革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌检验共146页
革兰阴性需氧和兼性厌氧性杆菌鉴定—其它苛养菌(微生物检验课件)
❖ 流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时， 由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落 周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球 菌菌落越远的越小。
卫星现象
❖ 根据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强
❖ 所致疾病 原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童 继发感染：鼻窦炎等，多见于成人 敏感药物：氨苄西林、阿莫西林首选
肺炎型 非肺炎型（类似感冒） ❖ 免疫性：感染者血清中出现特异性IgG、 IgM抗体 大环内酯类、喹诺酮类有效。对青霉素、头孢类无效
微生物学检查
标本 （痰、支气管分泌物、血液、）
涂片染色镜检 （Gimenen染色）
形态染色 菌落特征 氧化酶、触酶 荧光抗体染色等
分离培养 （BEYE琼脂）
鉴定试验
结果报告
血清学试验
❖ 检测指标：检测患者血清中特异性抗体 ❖ 方法：ELISA ❖ 意义：
检测特异性IgM：诊断军团菌病 检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查
四、布鲁菌属
❖羊布氏杆菌（主要） ❖牛布氏杆菌 ❖猪布氏杆菌 ❖犬布氏杆菌（少见）
❖ 引起布鲁菌病（波状热） ❖ 可引起人畜共患病 ❖ 我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，以羊布鲁菌最常见 ❖ 属细胞内寄生菌
4、抗原与分型，A抗原和M抗原，不同菌含量不同可供鉴别
菌种 羊布鲁菌 牛布鲁菌 猪布鲁菌
A抗原： M抗原 1：20 20：1 2：1
5、抵抗力强
6. 致病物质：荚膜、侵袭性酶和内毒素
▪ 内毒素——致病作用（发热、白细胞↑、肝脾肿大等） ❖由于反复菌血症，使病人热型呈波浪状 ❖发热时，血培养阳性率高（70%） ❖易转为慢性，引起全身迁延性病变，较难根治。
嗜肺军团菌革兰染色
革兰氏阴性微需氧和厌氧菌的检验
革兰氏阴性微需氧和厌氧菌的检验•本类共包括8个属和1个科：1、弯曲菌属，2、水螺菌属，3、螺菌属，4、固氮螺菌属，5、海洋螺菌属，6、蛭弧菌属，7、吸血弧菌属，8、螺杆菌属，以及拟杆菌科。
•在医学检疫上有意义的是弯曲杆菌和螺杆菌属。
一、弯曲菌属Campylobacter一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。
1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃疡有关。
兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲菌、幽门弯曲菌。
其中以空肠弯菌最多见，胎儿亚种次之。
致病性（一）形态与染色1、0.2-0.4×1.5-3.0μm； G-, 呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色；2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌；3、从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。
（二）培养特性•微需氧，最适生长环境: 氧气5％、二氧化碳10％、氮气85％；通常42℃初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37℃生长良好。
•营养要求高，普通培养基不生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群。
•含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA）和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA）、碳基选择性培养基（CSM）和半固体动力培养基等常用于分离该属的细菌。
•在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。
（四）抵抗力•抵抗力较弱，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56℃、5min可被杀死。
但耐寒，在4℃冰箱或水中可存活4周。
革兰氏阴性杆菌需氧和兼
５０
２
１５
２
０
９６
４０
９７
９９
１００
０
０
密二糖
Ｄ－阿 拉伯糖 黄色色 素
７５
５ ０
４０
５ ０
０
１００ ０
０
８ ９８
１００
０ ５０
０
０ ０
3502株大肠埃希菌对各种抗菌药物的耐药率％
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
80.5 68.9 56.4 44.0 42.5 46.7 40.6 42.5 29.0 13.9 16.0 10.3 12.2 50.5
双纸片协同试验
CAZ TIM CTX
抑制剂增强的纸片扩散法
头孢噻肟 头孢他啶
头孢噻肟 ＋ 克拉维酸
头孢他啶 ＋ 克拉维酸
纸片 确证试验
CTX/Cal CTX
> 5mm
ESBL酶（+）
（3）
指示耐药： 青霉素类 头孢菌素类（三代头孢） 氨曲南
ESBL酶（+）（4）
治疗：
四代头孢菌素（疗效不稳定） ß菌
包括大肠埃希氏菌、蟑螂埃希氏菌、弗格森
埃希氏菌、赫曼埃希氏菌和伤口埃希氏菌５ 个菌种。大肠埃希氏菌是埃希属的代表种．
大肠埃希氏菌
１形态与染色
革兰氏阴性杆菌，粗短大小 1.1＊2.6μm，多数有周鞭毛。 ２菌落形态 在血平板菌落呈圆直径２－３ mm稍凸起、边缘整齐、灰白色不透明，少数 菌株产生β溶血环、少数呈粘稠状菌；在伊 红亚甲平板呈紫黑色，并有金属光泽；麦康 凯形成不透明红色菌落，有的麦康凯上粘稠 红色菌落的特征，有的麦康凯上不发酵乳糖 无色不透明，比一般细小菌落.