革兰氏阴性需氧杆菌.pptx
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课件：革兰氏阴性需氧杆菌(2011)
第
十 一
2、培养特性
章 专性需氧，初次分离培养需要5-10%
革 兰
CO2，
氏 阴
最适pH6.6-7.4，
性 需
营养要求高，在普通培养基上不生长，
氧 在血琼上不溶血。
杆
菌
第一节 布氏杆菌属（Brucella）
第
十 一
二、致病性
章 主要致病物质为内毒素，侵袭力强，
革 兰
可通过完整的皮肤粘膜进入宿主体内，
需
氧
杆
菌
第三节 波氏菌属（Bordetella）
第
十 一
（三）生化反应
章
O/F试验为非氧化非发酵型，过氧化
革
兰 氢酶、氧化酶阳性，谷氨酸脱羧酶阳性，
氏
阴 使牛乳培养基强度产碱。不产生靛基质
性
需 氧
和H2S，能分解尿素。
杆
菌
第三节 波氏菌属（Bordetella）
第
十 （四）微生物学检查
一
章 1. 分离和鉴定
需 氧
病畜的措施。
杆
菌
第一节 布氏杆菌属（Brucella）
第
十 四、免疫防制
一
章 羊型5号(M5)弱毒活菌苗
革 兰
M5·90株，具有良好的安全性和更强
氏 阴
的免疫原性。
性 需
猪型2号(S2)弱毒活菌苗
氧
杆
菌
第二节 假单胞菌属（Pseudomonas）
第
十 一
铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）
章 （Pseudomonas aeruginosa）
第
十
一 章
致病机理：
革 布氏杆菌被吞噬
胞内寄生菌 侵入血
第11章 000革兰氏阴性需氧杆菌
(五）免疫防治
无疫苗：采用全面检疫，检出阳性补杀或隔离。
伪鼻疽伯氏菌（过去叫伪鼻疽杆菌）
引起人和动物的类鼻疽，表现为急性败 血症，但也可以是皮肤，肝脏、脾脏淋
巴结等处形成慢性的结节或脓肿病灶，
与鼻疽相似。
铜绿假单胞菌（绿脓杆菌） 1．G－极生单鞭毛，运动，有2种菌落，一种为大而 光滑边缘平坦，中央凸起的油煎蛋样，另一种为 小而粗糙，隆起菌落，临床病料为大菌落，环境 分病离株为小菌落。多数菌产生水溶性绿脓素 （蓝色）和荧光素（带绿色荧光）。β溶血
一、形态及染色特性
球形、球杆形或短杆形， 新分离者趋向球形。多单
在，不形成芽胞和荚膜 ，
无鞭毛不运动。革兰氏染 色阴性 ，但着色不佳。柯 兹罗夫染色法染成红色， 其他菌呈绿色或蓝色。
二、培养特性
本菌专性需氧，在初代分离培养时尚需5%-10%
CO2，泛酸钙和
内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。在培养基中加入少量血液、
•挑取可疑菌落，做涂片、染色和镜检， 确定为疑似菌后进行纯培养， •以布氏杆菌抗血清做玻板凝集试验， •以上两相试验结果并结合菌落特征， 可做出布氏杆菌的诊断
3、动物试验
病料乳悬液
腹腔或鼠蹊部皮下注射 每只1~2m1，
豚鼠
（1）每隔7~l0d （2）皮肤 采血检查血清抗 过敏试验进 体，如凝集价达 行诊断。 到1：50以上， 即认为感染了布 鲁氏菌。 （3）动物发病 死亡后，剖检取 肝、脾、淋巴结 及少许骨髓，进 行细菌检查和分 离。
R抗原：非S型菌的共同抗原，不与S型菌发生凝集。 变异：S→R
丧失A、M抗原，暴露R抗原
（二）属外抗原
可与巴氏杆菌、变形杆菌、大肠杆菌等属细菌发生交叉凝集反应。
革兰氏阴性需氧杆菌
四、微生物学诊断
鼻疽的诊断和检疫主要采用变态反应检查和血清学检查，而细菌学检 查只有在特殊病例才被应用。
1. 变态反应检查：患病动物较长时间（8-10年或终生）保持变态反应检查 阳性反应。检出急性、慢性、潜伏性等。
点眼反应最常用。 方法：鼻疽菌素3-4滴滴入被检动物一侧眼结膜囊内，分别于点眼后，3、 6、9、及24h观察反应。如眼结膜红肿并排除脓性分泌物，
布鲁氏菌染色照片
二、培养及生化特性
* 细菌专性需氧，初代分离（5-10％ CO2） * 初分离生长缓慢（7-14天），传代（2-3天） * 血清、血液、肝汤、葡萄糖—促进生长 * 菌落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型
肝汤肉汤：轻度混浊、粘稠沉淀物
血液肝汤琼脂：形成灰白色菌落，不溶血
血清肝汤琼脂：无色透明、湿润、闪光的小菌落
即为 阳性反应。
2. 细菌学检查： 被检材料：未破溃脓肿采取的穿刺物、鼻汁、皮肤溃疡分泌物、病变组
织 和 器官等。
分离培养：病料接种于1%血液甘油琼脂上分离培养；甘油肉汤增菌培养。 获纯培养物进一步鉴定。应注意该菌与类鼻疽杆
菌相区别。 3. 血清动学物检试查验：：接种于雄性豚鼠腹腔后，可引起典型的睾丸炎和睾丸周围炎，
第十章 革兰氏阴性需养杆菌
内容提要 * 第一节 布氏杆菌属
第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属
第一节 布氏杆菌属(Brucella)
布氏杆菌（布鲁氏菌）—布氏杆菌病（人兽共患病）
一、形态及染色特性
* 呈球杆形或短杆形，单在，革兰氏阴性菌 * 柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色—红色 * 染料（沙黄、孔雀绿）—迟染的特性
鼻疽的诊断和检疫主要采用变态反应检查和血清学检查，而细菌学检 查只有在特殊病例才被应用。
1. 变态反应检查：患病动物较长时间（8-10年或终生）保持变态反应检查 阳性反应。检出急性、慢性、潜伏性等。
点眼反应最常用。 方法：鼻疽菌素3-4滴滴入被检动物一侧眼结膜囊内，分别于点眼后，3、 6、9、及24h观察反应。如眼结膜红肿并排除脓性分泌物，
布鲁氏菌染色照片
二、培养及生化特性
* 细菌专性需氧，初代分离（5-10％ CO2） * 初分离生长缓慢（7-14天），传代（2-3天） * 血清、血液、肝汤、葡萄糖—促进生长 * 菌落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型
肝汤肉汤：轻度混浊、粘稠沉淀物
血液肝汤琼脂：形成灰白色菌落，不溶血
血清肝汤琼脂：无色透明、湿润、闪光的小菌落
即为 阳性反应。
2. 细菌学检查： 被检材料：未破溃脓肿采取的穿刺物、鼻汁、皮肤溃疡分泌物、病变组
织 和 器官等。
分离培养：病料接种于1%血液甘油琼脂上分离培养；甘油肉汤增菌培养。 获纯培养物进一步鉴定。应注意该菌与类鼻疽杆
菌相区别。 3. 血清动学物检试查验：：接种于雄性豚鼠腹腔后，可引起典型的睾丸炎和睾丸周围炎，
第十章 革兰氏阴性需养杆菌
内容提要 * 第一节 布氏杆菌属
第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属
第一节 布氏杆菌属(Brucella)
布氏杆菌（布鲁氏菌）—布氏杆菌病（人兽共患病）
一、形态及染色特性
* 呈球杆形或短杆形，单在，革兰氏阴性菌 * 柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色—红色 * 染料（沙黄、孔雀绿）—迟染的特性
革兰阴性球菌课件ppt
X线检查
CT检查
通过X线胸片检查，观察肺部炎症、胸腔积 液等病变情况。
对于某些深部感染，如肺炎、心脏疾病等 ，需要进行CT检查以更准确地诊断。
实验室检测
01
02
03
04
细菌培养
将采集的标本接种于培养 基上，在一定温度下培养 一定时间，观察细菌的生 长情况，并进行鉴定。
药敏试验
通过测定细菌对不同抗生 素的敏感程度，为临床治 疗提供依据。
危险。
传播途径
通过空气飞沫、人与人 之间的接触传播。
治疗
使用合适的抗生素是关 键，需根据感染的具体 病菌类型和严重程度选
择。
铜绿假单胞菌
概述
铜绿假单胞菌是一种常见的水 源和土壤中的细菌。
致病性
可引起皮肤感染、角膜炎、心 内膜炎等疾病。播。
治疗
对多种抗生素具有抗药性，治 疗需根据感染的具体病菌类型 和严重程度选择合适的药物。
流感嗜血杆菌
概述
流感嗜血杆菌是一种常见的呼吸道病菌。
传播途径
通过空气飞沫传播，特别是在拥挤、封闭的 环境中。
致病性
常与流感病毒共同作用，引起严重的呼吸道 感染，如肺炎。
治疗
使用抗生素治疗，但需注意与流感病毒的鉴 别诊断。
变形杆菌
概述
变形杆菌是一种常见的肠道细菌，也 是条件致病菌。
致病性
在特定条件下，如免疫系统较弱或肠 道环境失衡时，可引起尿路感染、败 血症等疾病。
传播
抗药性基因可以在细菌之间传播，甚至在不同种属细菌间传 播，导致多重耐药菌株的出现。医院、社区和环境中的细菌 可通过直接接触或污染物的间接接触进行传播。
抗药性的机制与类型
机制
革兰阴性球菌对抗菌药物的抗药性机制主要包括药物作用靶点的改变、药物外 排泵的过度表达、酶降解药物的活性增强等。这些机制可以单独或共同作用， 使细菌对药物产生抗药性。
致病菌的检验革兰氏阴性微需氧和厌氧菌ppt课件
目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯 曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者 在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲 菌和大肠弯曲菌等。 1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和 胃溃疡、十二指肠溃疡有关。
兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲杆菌、胎儿弯 曲杆菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲杆菌、幽门弯曲菌 。其中以空肠弯杆菌最多见，胎儿亚种次之。
本属细菌最早根据形态染色、培养条件等归于弯曲菌属 ，1989年Goodwin根据其超微结构、酶活性、脂肪酸序 列、生长特性等的不同，建议将其从弯曲菌属中划分出 来而成立一个新的属Hilicobacter（螺杆菌属）。
本属中现已鉴定的有19个种，研究得最多、最常见的是
幽门螺杆菌(H. pylori，Hp)。
（3）母畜感染：上呼吸道症状、肺炎、发热及菌血症；死胎 或流产；新生畜败血症及脑脊髓膜炎。
.
7
七 微生物学检查
1. 标本采集
采集粪便及剩余食物 ，立即送检，或将 标本接种于卡-布运 送培养基中送检；
对于高烧和脑膜炎者 ，于用药前抽取静 脉血或脑脊液，注 入布氏肉汤送检。
.
8
2. 细菌检验
（1）显微镜检查
普通培养基不生长，需补充血、血清、淀粉、活性炭等 。常用心脑浸出液琼脂、布氏琼脂、哥伦比亚琼脂等。
选择性培养基：改良的Skirrow琼脂培养基加入万古霉 素、两性霉素和头孢磺啶。
血平板：经3-5d形成小的半透明灰色菌落，有微弱的溶
血环，革兰氏染色浅。
.
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三 生化反应
生化反应不活泼，氧化酶和触酶阳性，不分解任何糖类 ，脲酶强阳性，可与本属其他细菌区别，也是检测HP 的快速诊断方法之一。
革兰氏阴性需氧杆菌
流产布氏杆菌（Br.abortus）
1、2、3、4、5、6、7型
马尔他布氏杆菌（Br.melitensis） 1、2、3型
猪布氏杆菌（Br.suis）
1、2、3、4、5型
绵羊布氏杆菌（Br.ovis）
1个
沙林鼠布氏杆菌（Br.neotomae）
1个
犬布氏杆菌（Br.canis）
1个
田鼠布氏杆菌（Br.microti）
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（一）形态及染色
G－中等大小杆菌，无芽孢、无荚膜、不 运动。单独散在。美蓝染色可见异染颗 粒，是本菌的形态特征。
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（二）生长要求及培养特性
生长要求
专性需氧，普通培养基中生长缓慢，加入 适量甘油、血红蛋白、血液、血清或葡 萄糖可促进生长，适温37℃，最适pH为 6.4～6.8。
• 需氧，适温37℃，最适pH6.6～7.4。
• 流产布氏杆菌和绵羊布氏杆菌初代 分离时尚需5％～10％CO2环境。
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培养特性
初次分离时生长缓慢，需5～10d甚至20～ 30d才能长出菌落，但实验室传代保存的菌 株，培养48～72h即可生长良好。
肝汤肉汤
呈轻微浑浊生长，无菌膜。但培养日久， 可形成菌环。
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一、主要生物学特性
• 菌体常为球杆状，大小为0.8μm×0.5μm。 • 革兰染色阴性，两级着色。 • 兼性厌氧，无运动力。 • 不溶血。 • 对营养要求苛刻，培养困难，生长缓慢。 • 用马血巧克力琼脂置CO2中培养，48h可见直
径小于1mm的细小、灰白色菌落，继续培养， 菌落直径可增至2-3mm。 • 麦康凯培养基不生长。
？
牛布氏杆菌（Br.ovis）
执业兽医资格考试微生物学革兰氏阴性需氧杆菌ppt课件
➢ 支气管败血波氏菌主要引起动物的疾病，在兽医 中比较重要；
➢ 百日咳波氏菌、副百日咳波氏菌主要对人致病，
引起人的百日咳。
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本节主要讲述： 支气管败血波氏菌。
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一、形态特征
• 支气管败血波氏菌为G－细小球杆菌，具有 周身鞭毛能运动，无芽胞，表面有微荚膜 存在，单在或成双，很少成链。
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二、培养特性
• 另外：伪鼻疽杆菌和绿脓杆菌的一些特性
请看书自学。
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第二节 布氏杆菌杆菌属 （Brucella）
• 布氏杆菌能引起人畜共患的慢性传染病， 主要侵害生殖器官和关节，主要特征是： 生殖器官、胎膜以及多种器官组织发炎、 坏死和肉芽肿的形成，引起流产、不孕、 睾丸及关节炎症等症状。
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本属细菌主要分为6个生物种 20个生物型，6个种即：
此特点有一定的诊断价值。
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二、培养特性
• 本菌为需氧菌，最适生长温度为37℃，最适生 长pH6.4~6.8；在普通培养基上能生长，但生长 缓慢；在含有3~5%的甘油或血液、血清、葡 萄糖的培养基中生长更好。
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（1）在甘油琼脂培养基上37℃24小时的菌落呈细小、光滑、 圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落；
2、血清学试验：目前主要是补体结合反 应，具有很高的特异性。
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3、变态反应：常用的方法有点眼反应、眼睑试 验、皮下试验、皮肤试验和喷雾试验，我国 的兽医规程主要采用点眼法。
– 点眼法操作简单，检出率高，该法是将鼻疽菌素 滴入待检马的一侧眼结膜囊内，约3~4滴，分别 于点眼后3、6、9、24小时观察；如眼结膜红肿 并排出脓性分泌物，即可判为阳性。
3. 由布氏杆菌引起的疾病称为“布氏杆菌病”，母畜通 常表现为不孕、流产，公畜主要发生附睾炎。
革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定ppt课件
（二）临床意义
2.所致疾病： 肠道外感染（内源性感染） ▪ 1.化脓性感染——定位转移 腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、 败血症、新生儿脑膜炎等 ▪ 2.泌尿道感染——病原菌来自病人肠道（上行性） 占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、 肾盂肾炎等）
引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征
旅行
类志贺毒素
腹泻、出血 性肠炎
腹泻（无 WBC），腹 痛、血便、发 热、HUS
儿童、老人
未熟牛肉 牛奶
未明
急、慢性腹 水泻、呕吐 泻
所有年龄
耐药性越来越严重：产超广谱β-内酰胺酶 （ESBL)比例增高，对青霉素类和1～4代头孢 菌素及单环菌素耐药，仅对头霉素类、碳青霉 烯类、含酶抑制剂类抗生素敏感。
死亡
毒 血 症
中 毒 性 菌
痢
高热、休克中毒 性脑病、DIC
（二）致病性与免疫性
所致疾病——细菌性痢疾 传染源：病人、带菌者 传播途径：经口 致病机制 临床类型 急性菌痢 中毒性菌痢 慢性菌痢 带菌者
免疫力:不牢固，易再感染
在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分，床边 接种或立即送检，不能及时接种者可用卡-布运送培养基送 检，昏迷不能排便病人可用肛拭取样。
抗原结构: 菌体（O）抗原 鞭毛（H）抗原 表面（K、Vi）抗原
易出现各种变异：耐药性（重要）
第一节 肠杆菌科
葡萄糖发酵（+） 硝酸盐还原（+） 氧化酶（-） 触酶（+）痢疾志贺菌除外 结合血清学鉴定到属、种（型）
硝酸盐还原试验 阳性：红色 阴性：淡黄色
氧化酶试验
阳性：紫红色 阴性：无色
抵抗力 比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感
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二、培养特性
本菌专性需氧，在初代分离培养时尚需5%-10% CO2 ，泛酸钙和 内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。在培养基中加入少量血液、 血清或肝浸液可促进生长，不溶血。生长缓慢，常需5-10d甚至 20-30d。
液体培养基上呈轻微浑浊生长，时间长可形成很厚的菌膜；在固体 培养基上有S、M、R型菌落，大小不一。
复习思考题
1 布氏杆菌有哪些种，其致病性如何？ 2 布氏杆菌病的微生物学诊断方法。
三、抗原性及变异性
（一）属内抗原 ：A、M、R抗原
❖光滑型布氏杆菌有A和M二种菌体抗原成分 (外露的多糖侧链），是 细菌的凝集抗原，各菌种含量不同。不与非S型菌发生交叉凝集。
❖R抗原：非S型菌的共同抗原，不与S型菌发生凝集。 ❖变异：S→R 丧失A、M抗原，暴露R抗原
（二）属外抗原
可与巴氏杆菌、变形杆菌、大肠杆菌等属细菌发生交叉凝集反应。
第四章 革兰氏阴性需氧杆菌
布氏杆菌属（Brucella）
布氏杆菌又名布鲁氏菌 ,1887年Bruce从死 亡士兵脾脏中分到第一株布鲁菌，可引起 多种动物发病。主要寄居于肝、脾和淋巴 组织内的单核细胞中，是胞内寄生菌。
一、形态及染色特性
球形、球杆形或短杆形， 新分离者趋向球形。多单 在，不形成芽胞和荚膜 ， 无鞭毛不运动。革兰氏染 色阴性 ，但着色不佳。柯 兹罗夫染色法染成红色， 其他菌呈绿色。
❖细菌学检查：意义不大。 ❖血清学检查：用已知的布氏杆菌检查动物的血清抗体
凝集试验（虎红平板凝集试验） 感染初期检测。大动物血清凝集价达1：100时阳性， 1：25可疑；小动物1：50为阳性，1：25为可疑。
补体结合试验 慢性布氏杆菌病诊断。规定1：10被检血清阻止溶血 在50%以上即阳性。
❖变态反应检测 不宜作早期诊断。布氏杆菌水解素注射，观察红肿反 应。1-2cm为弱+；2-3cm为+；4-6cm为强+。
四、种及致病性
（一）分类 6个种
❖马耳他布氏杆菌Br. melitensis（羊型）1-3 ❖ 流产布氏杆菌Br. abortus （牛型）1-9 ❖ 猪布氏杆菌Br. suis 1-5 ❖ 绵羊布氏杆菌Br. ovis ❖ 沙林鼠布氏杆菌 Br. neotomae ❖ 犬布氏杆菌 Br. canis
（二）致病性
❖主要致病物质有内毒素、荚膜和透明质酸酶。侵袭力强， 可通过完整的皮肤、粘膜进入体内，并有很强的繁殖与 扩散能力。
❖动物体内常局限于腺体组织与生殖器官（与赤藓醇含量 较高有关），故病畜主要表现为睾丸炎、附睾炎、乳腺 炎、子宫炎等。孕期动物对布氏杆菌最敏感，感染后常 引起流产。
五、微生物学诊断