血清Western Blot去除白蛋白(Albumin)
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血清Western Blot去除白蛋白(Albumin)
应用Western Blotting的方法检测血清中某种蛋白的含量是,最关键的问题是要将血清做怎样的电泳前处理.
一般的处理方式:
1.常规分离血清,即取血后常温放置,使其凝固,然后3000 rpm 15 min离心,取上清即可。
2.测血清蛋白浓度。
3.用Laemmli buffer(蛋白裂解液)稀释至所需浓度,我一般为5ug/ul.
4.加入适量loading buffer,100℃煮5分钟。注意:有时会出现水煮后,蛋白液变得
非常粘稠,这时可以在65℃煮10-20 minutes以替代沸水煮。
PS:对于目标蛋白在血清中含量很低,或者目标蛋白分子量与白蛋白或球蛋白分子量相近的情况下,必烦要去除血清中的白蛋白和/或球蛋白,以下是知名厂商
G-Biosciences提供的试剂盒,使用较为简便,同时价格也不贵哦。
美国G-Biosciences-AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒
血浆和脑脊髓液等样本中,包含大量的白蛋白,从而封闭掉在二维凝胶电泳中发现和鉴定其他低丰度蛋白的可能。AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒被设计用来在这种样本中大量去除白蛋白。
这种白蛋白去除方法是基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合。AlbuminOUT™被优化从样本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速离心柱方法,每个柱子含有0.2ml的染料结合树脂,从而可以结合大于2mg的人白蛋白。AlbuminOUT™可以从5-50微升人血浆中去除大于98%的白蛋白。
离心柱形式可以在10分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人,猪,羊,狗,兔,大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或许也可以从其他物种中去除白蛋白。适用于处理25或50个样本。
Figure 1: 2D analysis of whole human serum before (left) and after
(right) treatment with AlbminOUT™.
产品特点:
●从样本中不到10分钟的时间内去除白蛋白
●基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合
●每个柱子的结合力大于2mg的人白蛋白
●从5-50微升人血浆中去除大于98%的白蛋白
应用:
从生物学样本比如血浆和脑脊髓液中去除白蛋白
产品信息:
产品货号产品名称包装786-251 AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒25 Preps 786-251T AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒 4 Preps 786-252 AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒50 Preps