病毒和亚病毒

●敏感性指示菌——遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体 会裂解性生活周期的非溶源性菌株，这些菌株可以从自然 界或菌种库中获得。
痒病——绵羊、山羊（Scrapie） 牛海绵状脑病——疯牛病（BSE） 猫海绵状脑病——家猫（FSE） 动物的朊病 传染性貂脑病——水貂（TME） 毒病 慢性消瘦病——黑尾鹿,骆驼（CWD） 野生动物海绵状脑病——羚羊、猎豹等 克雅氏病——CJD 新型克雅氏病——vCJD 人类的朊病 库鲁病——Kuru 毒病 格斯斯氏综合征——GSS 致死性家族性失眠症——FFI
原来的状态，进行大量的复制，变成烈性噬菌体，自发裂解几率105～10-6
。
可诱导裂解：用化学、物理方法诱导 具有“免疫性”：溶源菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源的噬
菌体不敏感，对同源噬菌体具免疫性，对非同源噬菌体没有免疫性。
可复愈：自然遗失前噬菌体，但不发生自发裂解和诱导裂解

溶源转变：由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己产生一
a
DNA病毒和RNA病毒中的一部分;b 利福平可抑制痘病毒复制
四、噬菌体的应用与防治
• 噬菌体的危害
主要是引起发酵中的噬菌体污染。 例：丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染；抗生素发酵
中的噬菌体污染；食品工业上的噬菌体污染。
• 防治
控制活菌排放，选育抗性生产菌株，生产中轮换使 用菌种，药物防治例如用金霉素、四环素等。
一、 病毒的一般特性
1、病毒的概念：
病毒：是一类由核酸和蛋白等物质组成的超显 微的非细胞生物,每一种病毒只含有一种核酸; 它们只能在活细胞内专营性寄生. 病毒粒子：完整的、具有感染性的病毒颗粒。
二、病毒的基本特点
1.个体极小（以nm计），能通过滤菌器，形态多样， 有球状、杆状、复合型。 2.无细胞结构，主要由蛋白质、核酸构成，一个病毒 体内仅含一种核酸，核酸以单链或双链形式存在。 3.生活方式为专性活细胞内寄生，病毒酶系不全，离
核衣壳
HIV病毒
艾滋病病毒模式图
艾滋病病毒的生活周期
显示在T细胞表面有许多 艾滋病病毒存在
SARS病毒
5.病毒的对称性
三类典型形态的病毒： •廿面体对称的结构(球状) •螺旋对称的结构(杆状)
•复合对称的结构(蝌蚪状)
大肠杆菌的T4噬菌体是由椭圆 形的二十面体头部和螺旋对称的尾
部组合而成，是病毒中复合对称的 代表。
噬菌斑
（3）病斑和空斑
•空斑和病斑：用于动物病毒粒子 的计数也可以采用噬菌斑法类似 的技术，但是这种斑点只能称为 空斑或病斑。
（4）枯斑
•枯斑：植物病毒在植物叶片上形 成的群体称为枯斑。
二、 4类病毒及其繁殖方式 1.噬菌体
病毒种类很多，根据病毒寄生的对 象来分，有植物病毒、动物病毒和微生 物病毒。 噬菌体：是病毒中的一种，一般把侵染 细菌、放线菌的病毒叫噬菌体。
②侵入：核酸注入细胞的过程。噬菌体尾部所含酶类物质 可使细胞壁产生一些小孔，然后尾鞘收缩，尾髓刺入细胞 壁，并将核酸注入细胞内，蛋白质外壳留在细胞外。
吸附
固着
尾鞘收缩
尾髓穿入
DNA注入
③ 增殖：包括核酸的复制和蛋白质合成。噬菌体核 酸进入宿主细胞后，会控制宿主细胞的合成系统， 然后以噬菌体核酸中的指令合成噬菌体所需的核 酸和蛋白质。
表7-1 单细胞微生物与病毒性质的比较
性质 直径大于 300nm 在无生命培养基生长 专性活细胞内寄生 双分裂 含有 DNA 和 RNA 核酸感染性 核糖体 产能代谢 细胞膜 对抗生素的敏感 对干扰素的敏感 细菌 + + + + + + + + 立克次氏体 + + + + + + + + 支原体 ± + ± + + + + + + 衣原体 ± + + + + + + 病毒 + +a -b +

一般认为，“大三阳”表示病毒复制活跃，常同时伴有乙肝病毒 DNA(脱氧核糖核酸)阳性，说明具有较强的传染性，同时演变成慢性 乙型肝炎的可能性也比较大。小三阳表示病毒已基本停止复制，传染 性比“大三阳”小，若乙肝病毒DNA阴性，则基本不再具有传染性。 有人说，“小三阳”要比“大三阳”好，且没有传染性。这是一个错 误的观念。“小三阳”照样有传染性，只不过血液循环内的病毒含量 相对较低一些而已。乙肝病毒感染者的情况好不好，与是否为“小三 阳”或“大三阳”无关，而与感染者是否有肝功能受损有关。有些“ 大三阳”的人，希望变成“小三阳”，甚至使用一些药物，其实大可 不必。因为“大三阳”并不是肝功能受损的标志，只是有可能比“小 三阳”在血液中的病毒含量高一些，病毒复制相对活跃一些而已，乙 肝病毒感染者肝功能是否出现损害及损害的程度与病毒复制程度并无 直接关系。
蝌蚪形噬菌体的构造
大肠杆菌T4噬菌体构造
Ｔ４噬菌体
6.群体形态
•包涵体
•噬菌斑
•病斑和空斑 •枯斑
（1）包涵体（inclusion body）
概念：病毒大量聚集，出现的在光学显微镜下可见的大 小、形态、数量不等的小体，称为包涵体。
（2）噬菌斑: 概念：将少量噬菌体与大量敏感 菌混合培养在营养琼脂中， 在平板表面布满宿主细胞的 菌苔上,可以用肉眼看到一个 个透明的不长菌的小圆斑， 称为噬菌斑。(每个噬菌斑一 般是由一个噬菌体粒子形成 的。) 应用: 噬菌斑可用于检出、分 离、纯化噬菌体和进行噬菌 体的计数。
可分以下阶段：
One-step growth curve Growth curve in host bacteria
100
Plaque number
一步生长曲线
10 Latent phase 1 Eclipse phase 40 Time(min) Rise phase Plateau phase
潜伏期
如E.coli的 、P1、P2，Salmonella typhimurium的P22等。
原噬菌体（或前噬菌体）： 即整合在宿主 核DNA上的噬菌体的核酸。 溶源性细菌：指在核染色体上整合有原噬 菌体的细菌。可进行正常生长繁殖,而不被 裂解。
溶源性细菌的特点：
可稳定遗传：子代细菌都含有原噬菌体，均具有溶源性。 可自发裂解：温和噬菌体的核酸也可从宿主DNA上脱落下来，恢复
些新的生理特征。
★烈性噬菌体与温和噬菌体的生活史比较：
吸 附
侵 入
裂解性循环
多次循环 同 整 步 合 复 制 溶源性循环 自 发 或 诱 导
增 殖
成 熟
裂 解
⑥★溶源性菌株的检验：
方法：在合适的培养基中培养待测菌样→→在对 数期进行紫外线照射，诱导原噬菌体复制→→进 一步培养→→滤液与指示菌混合、倒平板（或将 滤液加到敏感性指示菌的液体培养物中）→→观 察是否有噬菌斑出现（或使菌液变清）.
开活体后无生命特征。
4.病毒以复制的方式增殖,包括核酸复制、核酸蛋白 质装配，是在分子水平上进行的。 5.对抗生素不敏感，对干扰素敏感。

三、病毒的形态构造及化学组成
1. 病毒大小 测定病毒大小的单位是纳米 nm（10－9)，多数病毒的直径在 100nm上下； 病毒:细菌:真菌＝1:10:100
2. 形态

对于这个问题，我们可以这样理解：乙肝病毒就 像一个擅自居住在肝细胞这所房子里的房客，使 用房间的东西和食物，繁殖后代，却不会去破坏 房屋。所以在主人没有能力驱赶他时（抵抗力弱 时），一般处于和平相处的状态。病毒勤奋一点 ，就多繁殖一些后代，有时它们懒惰一些，复制 得就少些，就像人的活动和休息一样。当人体的 免疫系统对乙肝病毒发生抵抗或杀灭时，这种平 衡被打破。房客和主人在房子里开始相互驱逐打 架，就很容易造成房屋（肝细胞）的破坏，变成 乙型肝炎。
裂解期 稳定期
10
20
30
Fig. One-step growth curve of T2
裂解量(Burst phase) :每一受感染细胞所释 放的新的噬菌体的平均数。
裂解量 = 稳定期噬菌斑数
潜伏期噬菌斑数
4、温和噬菌体与溶源性细菌
温和噬菌体：噬菌体感染细胞后，将其核 酸整合（附着）到宿主的核DNA上，并且可 以随宿主DNA的复制而进行同步复制，在一 般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。
混匀，5min,使之吸附
离心或用抗phage血清处理, 去除过量phage 高倍稀释吸附phage的菌悬液(避免多次吸附) 37℃培养,定时取样
裂解液加入敏感菌液中
适当稀释混合液
涂布于琼脂培养基上
24-48h
计数噬菌斑
一步生长曲线
以培养时间为横坐标, 以噬菌斑数为纵坐标, 绘制成的曲线为一步 生长曲线。

乙肝病毒 （Hepatitis B virus） (HBV) HBV是环状dsDNA，核心为20面体结构。 抗原（Ag） 抗体（Ab） HBs ＋ 感染，带毒者 ＋ 恢复期病人，对再感染有保护作用 HBc 肝内复制，血清传染 ＋ 恢复期，或以往感染 HBe ＋ 大量复制，血液中有virus，＋ 保护作用
④装配：
⑤释放： 方式： 裂解：多以裂解细胞的方 式释放。 通常情况下，一个噬菌体通 过上述五个过程能合成 100——300个噬菌体。烈性 噬菌体的这种生长繁殖方式 也称为一步生长。
2.一步生长曲线
1. 实验设计依据：1个菌体被1个噬菌体感染,避免二 次吸附。 2. 实验过程: 敏感菌10ml Phage 1ml
第三章 病毒（Viruses） 和亚病毒(virusoid)
病毒(virus) ：至少含核酸和蛋白质二种组分 非细胞生物 亚病毒
朊病毒(prion) ：只含蛋白质 类病毒(viroid) ：只含具侵染性的RNA组分