牙周膜胶原纤维组织切片的显微图像配准
组织学与胚胎学实验--组织切片典型图片
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考试重点：以下切片的名称、取材、主要结构等
照片名称：主细胞与壁细胞
照片名称：中动脉2副本
照片名称：有髓神经纤维2副本
照片名称：血细胞
照片名称：未角化复扁
照片名称：胃粘膜层
照片名称：心肌闰盘
照片名称：心肌闰盘细胞核纵切
照片名称：疏松结缔组织（胶原纤维、弹性纤
照片名称：生精小管
照片名称：肾上腺1
照片名称：神经元1
照片名称：脾脏
照片名称：子宫分泌期2
照片名称：蒲肯野纤维
照片名称：气管壁结构
照片名称：潘氏细胞
照片名称：门管区-2
照片名称：骨骼肌（骨骼肌纤维细胞核）纵切
照片名称：睾丸低倍
照片名称：单层柱状上皮（杯状细胞柱状细胞
照片名称：肺的呼吸部jpg
照片名称：复层扁平未角化jpg
照片名称：肝脏巨噬细胞
照片名称：垂体远侧部细胞副本
照片名称：次级卵泡2
照片名称：大动脉1
照片名称：单层立方
照片名称：平滑肌纵切。
牙周膜肌成纤维细胞的体外培养及其标志物的表达时效
牙周膜肌成纤维细胞的体外培养及其标志物的表达时效目的探讨人牙周膜肌成纤维细胞（MFB）体外培养及其标志物表达的时效性。
方法体外培养人牙周膜成纤维细胞（hPDLF），72 h内以5ug·L-1终质量浓度的转化生长因子（TGF）-B1诱导hPDLF向MFB转化，免疫细胞化学和免疫组织化学染色检测MFB标志物a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）表达情况。
分别进行12、24、48、72、96和120 h的MFB观察，采用流式细胞术观察MFB长时间培养的细胞活性，采用免疫细胞化学观察MFB长时间培养后的a-SMA表达情况。
结果经TGF-B1诱导后a-SMA呈阳性；诱导至120 h，a-SMA仍呈阳性，72 h内其表达稳定。
结论5 ug·L-1终质量浓度的TGF-B1成功诱导人牙周膜细胞向MFB转化。
MFB体外培养具有时效性，培养0-72 h，其状态稳定。
标签：人牙周膜成纤维细胞；肌成纤维细胞；a-平滑肌肌动蛋白本研究的前期体内试验证实，正畸牙牙周膜张力侧肌成纤维细胞（myofibroblast，MFB）可能参与了牙周膜改建和成骨细胞的成骨过程；但牙周膜内生物学环境复杂，在正畸生物力学的影响下，多种牙周膜细胞都可能出现类似于MFB标志物的表达情况；因此，要明确MFB在牙移动过程中可能发挥的作用，就需要进行体外试验，以明确MFB分泌细胞外基质及成骨的机制。
MFB 大多存在于组织处于外力环境时，而当外界张力因素去除掉后，MFB大多程序性死亡或退化消失。
研究MFB的功能，在成功诱导出MFB后还需明确MFB的活性，即MFB可以维持多久，这样才能确定MFB的体外观察时间。
本试验采用转化生长因子（transforming growth factor，TGF）-B1诱导人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblast，hPDLF）向MFB转化，从12 h起，分6个时间点对hPDLF进行最长120 h的观察。
口腔组织病理学之牙周膜
04
牙周膜疾病的预防与保健
保持口腔卫生
01
02
03
每天刷牙两次
使用软毛牙刷和含氟牙膏 ，每次刷牙时间不少于两 分钟，确保牙齿和牙龈的 清洁。
定期使用牙线
除了刷牙，还应该使用牙 线清洁牙缝，以去除牙菌 斑和食物残渣。
漱口
饭后及时用清水或淡盐水 漱口，以清除口腔内的食 物残渣和细菌。
控制牙菌斑
定期洁牙
与牙医保持良好的沟通，遵循医嘱， 积极配合治疗和保健计划。
关注口腔信号
关注口腔出现的任何异常症状，如牙 龈出血、牙齿松动等，及时就医。
05
牙周膜疾病的研究进展
新技术应用
基因组学技术
通过基因组学技术，研究牙周膜疾病的遗传 因素，周膜疾病的研究中，有助于发 现与疾病相关的生物标志物和治疗靶点。
02
牙周膜的病理变化
炎症
牙周膜炎症
牙周膜受到感染或刺激时，会发生炎 症反应，表现为牙周膜增厚、充血、 水肿和白细胞浸润。炎症可能由牙石 、菌斑、创伤或不良修复体等引起。
牙周脓肿
牙周膜内的化脓性炎症可形成牙周脓 肿，表现为牙周膜内局限性、波动性 脓肿，可伴随疼痛和牙齿松动。
牙周膜损伤
牙周膜纤维性变
胞等。
牙周膜的功能
固定牙齿
牙周膜中的胶原纤维将牙齿与牙槽骨 紧密连接在一起，起到固定牙齿的作 用。
营养牙齿
牙周膜中的血管和神经为牙齿提供营 养和神经支配，维持牙齿的正常生理 功能。
缓冲外力
牙周膜具有一定的弹性，可以缓冲外 力对牙齿的冲击，保护牙齿免受损伤 。
参与骨改建
牙周膜中的成骨细胞和破骨细胞参与 牙槽骨的改建过程，维持牙槽骨的正 常形态和功能。
病理学技术-特殊染色技术
结缔组织染色 肌肉组织染色 糖类染色 色素类染色 病理内源性沉着物染色 病原微生物染色 内分泌细胞染色
一、纤维素染色
纤维素 (fibrin) 又称为纤维蛋白， 它是存在于血液内的纤维蛋白原分子聚合 而形成的特殊蛋白质。 在病理状态下， 血管内和血管外以及其它组织中， 均可见到纤维素沉着物 。 常见于炎症渗出性改变， 弥漫性血管内凝血 、 高血压的小血管壁和一些胶原性疾病的疏松纤维，肾小球的毛细血管腔内和 基底膜等均有纤维素的存在。
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抗酸杆菌 (acid fast bacteria) 体内含有脂质、蛋白质和多糖类并由糖脂形成一 个蜡质的外壳，能与苯酚碱性复红结合成复合物，这种复合物能抵抗酸的脱色， 所以称为抗酸杆菌。
病毒是最小的非细胞型微生物，当病毒引起疾病的时候，其感染 的细胞内可以形成包涵体，而存在于细胞浆和细胞核内，但有时 胞浆和胞核内同时可见到包涵体，在一般的情况下， RNA病毒形 成胞浆内包涵体，DNA病毒形成核内包涵体。
一、弥散神经内分泌细胞染色(diffuse neuroendocrine system， DNES) 弥散神经内分泌系统的细胞具有细胞化学、 病理和超微结构的形态特点 。 从生物
化学方面而言，这些内分泌细胞都能合成和分泌胺，而且细胞是通过摄取胺前体 (氨基酸) 经脱羧后产生胺的。随着对细胞研究的深入，发现其不仅产生胺，而且还 产生肽。 DNES 的组成至今已有40多种细胞，分为中枢和周围两大部分。中枢部分包括下丘 脑一垂体轴的细胞和松果体细胞。周围部分包括胃、肠、胰、呼吸道和泌尿生殖道 的内分泌细胞，以及甲状腺滤泡旁组胞，甲状旁腺细胞，嗜铬细胞，颈动脉体细胞 等。 日前证明这些细胞的染色方法较多，但常用的是使用亲银和嗜银反应来鉴别细胞浆 中的银颗粒。
最新口腔助理医师-牙周膜组织结构及功能
口腔助理医师-牙周膜组织结构及功能口腔助理医师-牙周膜组织结构及功能口腔执业助理医师近几年来考试的难度是越来越大了，这里是医学教育网整理的相关内容，希望对考生能有所帮助！牙周膜组织结构牙周膜（periodontalmembrane）也称牙周韧带，是致密的结缔组织，位于牙根和牙槽骨之间，由细胞、基质和纤维构成。
（一）组织结构1.纤维牙周膜的纤维主要由胶原纤维和Oxytalan纤维组成，其中胶原纤维汇集成粗大的纤维束，并有一定的排列方向，称为主纤维。
主纤维一端埋入牙骨质，另一端埋入牙槽骨，埋在牙骨质和牙槽骨中的纤维称穿通纤维或沙比纤维。
由于主纤维所在部位和功能不同，其排列方向也不同。
自牙颈向根尖可分为下列几组：（1）牙槽嵴组：纤维起于牙槽嵴顶，呈放射状向牙冠方向走行，止于牙颈部的牙骨质。
此纤维存在于颊舌侧，在邻面无此纤维。
其功能是将牙齿向牙槽窝内牵引，抵抗侧方力，保持牙的直立。
（2）水平组：在牙槽嵴纤维的根方，呈水平方向分布，与牙弓的合平面大致平行。
一端埋入牙骨质，另一端埋入牙槽骨中，是维持牙直立的主要力量，并与牙槽嵴纤维共同对抗侧方力，防止牙齿侧方移动。
（3）斜行组：是牙周膜中数量最多、力量最强的一组纤维。
除牙颈部和根尖区外，纤维方向向根方倾斜约45°角，埋入牙槽骨的一端近牙颈部，将牙悬吊在牙槽窝内。
这种结构可将牙承受的咀嚼压力转变为牵引力，均匀地分散到牙槽骨上。
（4）根尖组：起于根尖区牙骨质，呈放射状至根尖周围的牙槽骨，具有固定牙根尖的作用。
（5）根间组：只存在于多根牙，起自根分叉处的牙根间骨隔顶，至根分叉区牙骨质，有防止牙根向冠方移动的作用。
2.细胞牙周膜中的主要细胞有以下几种：（1）成纤维细胞：是牙周膜中最多，在功能上也是最主要的细胞。
镜下观察细胞核大，胞质嗜碱性，细胞排列方向与纤维束的长轴平行。
功能是合成胶原纤维，此细胞也可以吞噬变性、老化的胶原纤维。
因此，该细胞与胶原纤维的合成及吸收有关。
基于多模态牙科图像的牙体硬组织自动配准
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｄｅｎｔａｌｈａｒｄｔｉｓｓｕｅｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎｉｓｖｅｒｙｃｈａｌｌｅｎｇｉｎｇｄｕｅｔｏｔｈｅｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙｏｆｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｔｈｅｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｏｆ ｉｍａｇｉｎｇｍｏｄａｌｉｔｙａｎｄｉｍａｇｅｑｕａｌｉｔｙ．Ｔｏｂｅｎｅｆｉｔｆｒｏｍｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｗｏｒｋｓ，ｔｈｉｓｐａｐｅｒｐｒｏｐｏｓｅｄａｎｏｖｅｌｄｅｎｔａｌ ｈａｒｄｔｉｓｓｕｅａｕｔｏｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｂａｓｅｄｏｎｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙｄｅｎｔａｌｉｍａｇｅｓ．ＩｔｅｍｐｌｏｙｅｄｔｈｅｍｏｄｉｆｉｅｄＩＣＰａｌｇｏｒｉｔｈｍ ａｎｄｗａｓ ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆｏｒｄｅｎｔａｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇａｎｄｔｈｅｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ．Ｔｈｅａｌｇｏｒｉｔｈｍｆｉｒｓｔｌｙｐｒｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄｔｈｅｄｅｎｔａｌ ｉｍａｇｅｓｔｏｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｉｍｐａｃｔｏｆｉｍｂａｌａｎｃｅｌｏｃａｌｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ．Ｓｅｃｏｎｄｌｙ，ｉｔｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄａｒｏｂｕｓｔｆｅａｔｕｒｅｐｏｉｎｔｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｔｒａ ｔｅｇｙ，ｉ．ｅ．ｃａｌｃｕｌａｔｅｄｔｈｅｂｏｕｎｄａｒｉｅｓｏｆｈａｒｄｔｉｓｓｕｅａｓｉｎｉｔｉａｌｆｅａｔｕｒｅｐｏｉｎｔｓｅｔｓ，ａｎｄｆｕｒｔｈｅｒｅｘｔｒａｃｔｅｄｔｈｅｌｅｓｉｏｎａｒｅａｓｂａｓｅｄｏｎ ｔｈｅｐｒｉｏｒｋｎｏｗｌｅｄｇｅｏｆｏｒａｌｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙｆｏｒｔｈｅｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔｏｆｆｅａｔｕｒｅｐｏｉｎｔｓ．Ｆｉｎａｌｌｙ，ｔｈｉｓｐａｐｅｒｅｘｅｃｕｔｅｄｔｈｅｍｏｄｉｆｉｅｄＩＣＰ ａｌｇｏｒｉｔｈｍｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｔｈｅＩＣＰｉｔｅｒａｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄａｎｄｒｏｂｕｓｔｌｏｓｓｆｕｎｃｔｉｏｎｔｏｒｅｇｉｓｔｅｒｄｅｎｔａｌｉｍａｇｅ．Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｐｏｓｅｄｍｅｔｈｏｄｉｓｎｏｔｏｎｌｙｒｏｂｕｓｔ，ｂｕｔａｌｓｏｃａｎｃｏｎｖｅｒｇｅｍｏｒｅｑｕｉｃｋｌｙａｎｄａｃｈｉｅｖｅｈｉｇｈｅｒａｃｃｕｒａｃｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｅｎｔａｌｉｍａｇｅ；ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙｍｅｄｉｃａｌｉｍａｇｅｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ；ｍｏｄｉｆｉｅｄＩＣＰａｌｇｏｒｉｔｈｍ；ｒｏｂｕｓｔｌｏｓｓｆｕｎｃｔｉｏｎ
区分胶原纤维和肌纤维的思路和方法
区分胶原纤维和肌纤维的思路和方法
思路和方法
1、观察：区分胶原纤维和肌纤维首先可以从外观和结构上观察，一般来说，胶原纤维是十分细长而均匀的丝状，而肌纤维则是相对较粗而不规则的结构；
2、光学显微镜：使用光学显微镜对样品进行观测，胶原纤维会呈螺旋状，细胞周围还会有脂质内胆；而肌纤维则呈现较大的纹路，此外肌纤维的螺旋结构会出现离散的情况；
3、荧光显微镜：使用荧光显微镜可以用荧光标记技术显示特定关键蛋白，如胶原蛋白可以用荧光标记技术显示其特殊的分布和区分；
4、免疫组化：使用免疫组化技术可以确定部分关键特异蛋白的数量和分布，如胶原蛋白会结合葡萄糖氨酸的数量和分布，肌纤维也可以通过该技术进行区分；
5、扫描电子显微镜：扫描电子显微镜能够通过观察胶原蛋白来区分胶原纤维和肌纤维，一般来说，胶原纤维的厚度较厚，非常均匀，而肌纤维表面上也有不规则的形状出现；
6、质谱仪：质谱仪分析胶原蛋白或肌纤维等特定关键蛋白的分子组成、分布及量，因此可以协助识别胶原纤维和肌纤维的区别；
7、 DNA电泳：使用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，可以确定胶原纤维和肌纤维的电
泳特性，从而特征性地分离出两者；
8、全基因组测序：采用DNA测序技术，可以确定不同细胞类型及不同基因在胶
原纤维和肌纤维中的分布情况，协助判断这两者的区别。
生理状态下人牙周膜成纤维细胞的原子力显微镜下的观察
Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｌｉｖｉｎｇｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ
ｌｉｇａｍｅｎｔｃｅｌｌｓｗｉｔｈａｔｏｍｉｃｆｏｒｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ
ＬＩＵＹｕ－ｑｉａｏ ，ＷＡＮＧＹａ－ｙｕ，ＳＨＩＬｉａｎｇ （ ＡｒｍｙＤｉａｇｎｏｓｉｓ＆ ＴｒｅａｔｍｅｎｔＣｅｎｔｅｒｆｏｒＯｒａｌＤｉｓｅａｓｅ，ｔｈｅ３０６ｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｏｆｔｈｅＰＬＡ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０１，Ｃｈｉｎａ）
牙体牙髓牙周病学杂志（ＣｈｉｎａＪＣｏｎｓｅｒｖＤｅｎｔ）２０１８，２８（９）
·子力显微镜下的观察
刘玉乔１，王亚宇１，史 亮２ （北京：１．中国人民解放军第 ３０６医院口腔科，１００１０１；２．国家康复辅具研究中心附属康复医院，１００１７６）
［摘 要］ 目的：利用原子力显微镜（ＡＦＭ）观察人牙周膜细胞（ｈＰＤＬＣｓ）的表面形貌及细胞骨架。 方法：用酶消化组织块法获得原代 ｈＰＤＬＣｓ并经免疫组化鉴定，用弹性常数为 ０．０３Ｎ／ｍ 标准原子力微悬臂进 行接触模式扫描，采集细胞原子力显微镜的纳米级高分辨细胞形貌图。结果：ｈＰＤＬＣｓ波形丝蛋白阳性，角蛋白 染色阴性。原子力显微镜图像显示，生理状态下 ｈＰＤＬＣｓ细胞膜下有应力纤维结构。结论：ｈＰＤＬＣｓ细胞膜下具 有应力纤维结构。
按照酶消化组织块法［６］原代培养 ｈＰＤＬＣｓ。取 １２～３６岁因正畸减数或阻生而新鲜拔除的健康牙 １４个，立即置于预冷的含青霉素、链霉素的 ＤＭＥＭ 培养液中。取牙根中 １／３部位的牙周膜组织，加入 含 ０．５ｇ／Ｌ胶原酶的 ＤＭＥＭ 培养液 ４ｍＬ，置于 ３７℃孵箱中孵育消化约 ２０～３０ｍｉｎ，其 间 每 隔 ５ｍｉｎ振荡 １次。再用无血清 ＤＭＥＭ 漂洗 １次后 去上清，收集组织块并置于直径 ３５ｍｍ的培养皿 中，加入含 ２００ｍＬ／Ｌ胎牛血清的 ＤＭＥＭ 培养液， 将无菌盖玻片缓慢覆盖于组织块上，使培养液充盈 于盖玻片与组织块之间。培养皿在 ＣＯ２ 培养箱内 孵育 ４ｈ后，加入培养液 １～２ｍＬ，再静置培养，每 隔 ３ｄ换液１次。当细胞铺满培养皿底约 ８０％时， 使用 ２５ｍＬ培养瓶进行首次传代。以后按细胞记数 １∶３传代，取第 ５代 ｈＰＤＬＣｓ用于后期实验。 １．３ ｈＰＤＬＣｓ的鉴定
牙周膜胶原纤维空间结构的重建研究
牙周组织是口腔内的重要组织结构［1］，一直都是口腔医学领域的研究热点，近来对牙周膜的研究逐渐增加，主要集中于对牙周膜内细胞功能、微循环系统、神经系统等方面的研究，对牙周膜空间结构的研究还鲜有报道。
本文通过数字技术方法对兔牙周膜胶原纤维进行重建研究，旨在为后续关于牙周膜方面的研究提供一个有效的数字模型。
1材料与方法1.1材料：成年雄性新西兰大白兔，实验试剂［乙二胺四乙酸，石蜡，Masson染色试剂，苏木精⁃伊红（HE）染色试剂，多聚甲醛等］，实验仪器（圆盘锯，p H试纸，载玻片，盖玻片，手术刀等），计算机软件（可视化分割与配准工具Insight Segmen-tation and Registration Toolkit，ITK，可视化工具包Visualiza-tion Toolkit，VTK，Visual Studio2008，矩阵实验室Matlab）。
1.2方法：通过耳缘静脉推注空气的方法处死新西兰大白兔，获取下颌前牙区部分颌骨，于固定液中固定标本。
从下颌前牙冠根分界处横断面修切兔下颌前牙牙根为3mm的骨段，置于乙二胺四乙酸中进行脱钙处理，脱钙完成后依次进行标本的脱水，透明，浸蜡，包埋后制成石蜡块，于切片机上以5μm厚度进行连续切片，将制好的切片烤干后进行HE 和Masson染色，最终获得兔下颌前牙区牙周膜的连续图片共55张。
经过计算机软件的预处理、配准和重建后，得到兔牙周膜胶原纤维组织的空间结构图像。
2结果组织切片处理结果比较理想，HE染色组织切片红蓝对比适中，密度较均匀；Masson染色组织切片可见胶原纤维（蓝色）、细胞核（蓝黑色），基本达到理想效果。
全部组织切片染色效果好，主要取决于标本处理是否彻底，同时切片中未见甲醛颗粒。
面绘制图像成像过程较快，但数据缺失相对体绘制要多，所成图像可以清晰地观察纤维的走向，但纤维的连续性差，纤维条索显示不很清晰。
体绘制成像过程较面绘制复杂，但数据缺失较少，效果较面绘制好。
医学切片图像的配准
这里首先介绍在医学诊断方面广为应用的 CT 的基本思想。 通过一个理想的 X 射线源发出的笔束 X 射线，在对面放置一个 检测器。分别测出 X 射线经过物体衰减前后的强度 I0 和 I，再把 X 射 线源与检测器构成的系统在观察平面内平移一定得步数 N。每平移一 次均做同样的测量，得到一组数据。之后再旋转一个小角度 ΔΦ，接 着再平移 N 步，得到新的角度下的另一组数据。像这样重复旋转 NΦ 次，其中 NΦΔΦ=180º，得到 NΦ 组数据后停止。然后利用这些得到的 数据利用数学方法重新建立物体的模型或者内部图像。 特别要提到的是 CT 值的这个概念。由于 CT 是根据各种组织对 X 射线的吸收系数μ来决定其采用的标准，因此 Hounsfield 将线性衰 减系统分成了 2000 个单位，在医学上成为 CT 值。在 CT 图像的研究 中，提供诊断信息的是组织之间对 X 射线衰减系数的差异来体现的。 因此 CT 值定义如下：
第三章 数值实验模拟………………………………………………………17
3.1 医学图像切片预处理……………………………………………………17 3.2 利用全局匹配的方法配准图像…………………………………………19 3.3 利用局部匹配的方法配准图像…………………………………………21 3.4 结果………………………………………………………………………22
由于制片和图像采集等原因，序列数字切片图像的每两层间都会存在错位现 象，即平移和旋转等变换。基于切片数据的建模分析，其第一步就要对上下相邻 层切片图像进行配准，即通过图像的几何变换来完成校准。本文将从图像边缘曲 线匹配的角度来处理医学切片数据（人体躯干部位）相邻层之间的配准校正问题。
牙周膜成纤维细胞多种培养法的研究
牙周膜成纤维细胞多种培养法的研究吴忧;张军梅【摘要】目的：提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率，提高组织块贴壁率，缩短培养时间，加快细胞增殖。
方法以高血清结合改良组织块培养法培养原代HPDLCs 与传统组织块法及改良组织块培养法作比较。
通过免疫组化方法鉴定细胞的来源，绘制细胞的生长曲线，对三种方式的培养成功率、组织块贴壁率及细胞增殖速度进行比较。
结果三种方法所培养的原代细胞生长均趋于正常，细胞呈长梭形或多角形，波形蛋白鉴定呈阳性，角蛋白鉴定呈阴性，符合正常 HPDLCs 的正常形态及生物学特点。
高血清结合改良组织块培养法的成功率为86．67％，明显高于其他两种方法（P ＜0．01）。
结论高血清结合改良组织块培养法明显提高了HPDLCs 原代培养的成功率，适合在临床上运用。
%Objective To improve the successful rate of primary culture of periodontal fibroblast cells and tissue block adherence rate,reduce culture time and increase cellproduction.Methods Culture primary HPDLCs by combi-ning high serum and improved tissue block,which was compared with traditional tissue block method and improved block method.Recognize the source of cell by immunity group,draw the growing curve of cell,and make compari-son of successful rate,adherence rate and production rate of threemethods.Results The primary cells cultured by three methods are all normal.The cells look like fusiform and multi-angle shape,vimentin positive,Keratin nega-tive,which conform of normal morphology of HPDLCs and biological characteristics.The successful rate of im-proved tissue block with high serum totals 86.7%,obviously higher than that ofother two groups (P <0.01).Con-clusion The method of high serum improved tissue block obviously is increased the successful rate of primary cultiva-tion,which shall be applied in clinical cases.【期刊名称】《贵州医药》【年(卷),期】2016(040)005【总页数】3页(P469-471)【关键词】原代培养;提高培养成功率;人牙周膜成纤维细胞【作者】吴忧;张军梅【作者单位】贵州医科大学，贵州贵阳 550004;贵州医科大学，贵州贵阳550004【正文语种】中文【中图分类】R781牙周膜成纤维细胞是牙周结缔组织中最为主要的一种间充质细胞，不仅具有更新与自我修复的能力[1]，同时还能够分泌牙周组织中的间充质以及在口腔正畸过程中促进成骨与破骨过程的各种酶、生长因子等。
人牙周膜成纤维细胞培养与鉴定
人牙周膜成纤维细胞培养与鉴定沈慧娟;李琳娟;康娜【摘要】目的:培养人牙周膜成纤维细胞,并对其来源进行鉴定,为后期实验提供细胞来源.方法:选择20颗有正畸需求需拔牙矫治的年轻患者所拔的第一或第二前磨牙,采用组织块法分离并培养牙周膜成纤维细胞,通过形态学及免疫细胞化学SP法(对细胞进行波丝蛋白、角蛋白染色)进行鉴定.绘制生长曲线,观察细胞生长并计算细胞群体倍增时间.结果:细胞培养成功,表现为漩涡形或放射形生长,形态为长梭形.波丝蛋白染色呈阳性,抗角蛋白阴性,表明细胞来源中胚层.结论:成功从人牙周膜组织中分离培养出入牙周膜成纤维细胞.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2015(032)006【总页数】4页(P872-875)【关键词】人牙周膜成纤维细胞;细胞培养;免疫化学【作者】沈慧娟;李琳娟;康娜【作者单位】广西医科大学附属口腔医院正畸科南宁 530021;广西医科大学附属口腔医院正畸科南宁 530021;广西医科大学附属口腔医院正畸科南宁 530021【正文语种】中文【中图分类】R-33牙周膜成纤维细胞是牙周膜组织中数量最多、功能上最重要的细胞。
它能不断合成与降解胶原，维持牙周膜中胶原的更新与重建，以及通过分泌多种细胞活性因子刺激成骨细胞和破骨细胞完成牙周组织的修复与再生[1]。
利用人牙周膜成纤维细胞建立体外细胞系已成为国内外学者研究正畸牙移动的重要手段。
本实验采用组织块法培养人牙周膜成纤维细胞并进行鉴定，为下一步的正畸研究提供细胞来源，奠定了实验基础。
1.1 实验对象：人牙周膜均取自于2015年6月广西医科大学附属口腔医院口腔外科门诊就诊的11～16岁青少年因正畸需要而拔除的20颗健康前磨牙，均经自愿者知情同意，经过伦理委员会同意。
所选牙齿均为健康的第一或第二前磨牙，无龋坏、根尖周炎、牙周炎等，且该前磨牙无正畸治疗史。
1.2 试验材料及主要仪器设备：维森特培养基(DMEM)培养液；维森特胎牛血清(澳洲血源)；维森特胰蛋白酶(0.25%+0.1%EDTA)；维森特磷酸盐缓冲液(PBS)；四甲基偶氨唑盐(MTT，诺维赞)；抗波丝蛋白抗体、抗角蛋白抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)、多聚甲醛、sp试剂盒、辣根素、DAB溶液(二氨基联苯胺)、苏木精；25 mL塑料培养瓶、6孔板，96孔板。
全牙酶消化法原代培养人牙周膜成纤维细胞及鉴定
全牙酶消化法原代培养人牙周膜成纤维细胞及鉴定姬晓炜;葛菲;钟良军【摘要】目的探讨一种快速简便、原代培养成功率高、可重复性高的人牙周膜成纤维细胞培养方法.方法将处理后的牙齿整个用酶进行消化,原代培养人牙周膜成纤维细胞,对培养出的细胞进行形态学观察,免疫组化方法鉴定其来源,通过生长曲线研究其生物学特性.结果 8～14 d内可获得实验用成纤维细胞,原代培养成功率为90%,细胞形态呈长梭形.波形丝蛋白染色呈阳性,角蛋白染色呈阴性,符合人牙周膜成纤维细胞的形态学特征和生物学特性.结论采用全牙酶消化法可以快速、成功地培养出人牙周膜成纤维细胞,且简单易行,可重复性高.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2011(034)006【总页数】4页(P609-612)【关键词】人牙周膜成纤维细胞;原代培养;免疫组化【作者】姬晓炜;葛菲;钟良军【作者单位】新疆医科大学第一附属医院口腔修复科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学第一附属医院口腔修复科,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学第一附属医院口腔修复科,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R34牙周膜是牙周组织中具有自我更新和修复能力的致密组织，牙周膜细胞是牙周膜内的主要细胞，具有多种功能，在牙周组织的修复及再生中起着重要作用。
早在20世纪八十年代，就有学者报道过体外牙周膜细胞培养的模型，总的说来有2种技术：组织块法和酶消化法[1-3]，这是最经典的牙周膜细胞体外培养的方法。
近年来又有学者对这2种技术进行了不同程度的改良与结合使用，旨在提高牙周膜细胞培养的成功率。
本研究通过改变传统的酶消化方式，探求一种快速、可靠、重复性高的牙周膜成纤维细胞体外培养方法，为牙周组织工程的研究奠定基础。
1 材料与方法1.1 主要试剂与仪器 DMEM培养基(Gibco，USA)，Ⅰ型胶原酶(Sigma，USA)，胎牛血清(FBS，Hyclone，USA)，青霉素、链霉素(华北制药厂)，鼠抗人角蛋白抗体(Dako，DEN)，鼠抗人波丝蛋白抗体(Dako，DEN)，CO2培养箱(Forma，USA)，超净工作台(苏州净化器厂)，倒置相差显微镜(Olympus，JAP)，流式细胞仪(Epics，USA)。
纤共焦扫描显微图像渐晕校正的研究
第２４卷第２期光电子技术Ｖ０１．２４Ｎｏ．２２００４年６月ＯＰＴＯＥＩ。
ＥＣＴＲＯＮＩＣＴＥＣＨＮＯＩ。
ＯＧＹＪｕｎ・２００４＝：＝：：＝＝：：：：＝：＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝引光纤共焦扫描显微图像渐晕校正的研究张晓波，迟泽英，陈文建（南京理工大学电子工程与光电技术学院．南京，２１００９４）摘要：光纤共焦扫描显微镜是一种使用单模光纤代替传统共焦扫描显微镜的针孔来形成点光源与点探测器的激光共焦扫描显微系统。
本文在详细地分析了光纤共焦扫描显微镜的双振镜扫描系统产生渐晕原因的基础上，给出了渐晕校正的详细算法，并设计了与扫描采集集成为一体的硬件校正系统。
关键词：光纤；共焦；显微镜；渐晕中图分类号：ＴＮ２５３文献标识码：Ａ文章编号：１００５—４８８Ｘ（２００４）０２—０１２１－０４ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＩｍａｇｅＶｉｇｎｅｔｔｉｎｇＲｅｖｉｓｉｎｇｆｏｒＯｐｔｉｃ—ｆｉｂｅｒＣｏｎｆｏｃａｌＳｃａｎｎｉｎｇＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅＺＨＡＮＧＸｉａｏ—ｂｏ，ＣＨＩＺｅ—ｙｉｎｇ，ＣＨＥＮＷｅｎ—ｊｉａｎ（Ｃｏｌｌｅｇｅｔ）ｆＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＯｐｔｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．，ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ，２１００９４，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｐｔｉｃ—ｆｉｂｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｉｓａｋｉｎｄｏｆｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏ—ｓｃｏｐｅｔｈａｔｕｓｅｓｏｐｔｉｃ—ｆｉｂｅｒｔｏｆｏｒｍｔｈｅｐｏｉｎｔｌｉｇｈｔｒｅｓｏｕｒｃｅａｎｄｐｏｉｎｔｄｅｔｅｃｔｏｒｉｎｓｔｅａｄｏｆｐｉｎｈｏｌｅｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｖｉｇｎｅｔｔｉｎｇｏｆｔｈｅｓｃａｎｎｉｎｇｓｙｓｔｅｍｏｆｔｈｅｏｐｔｉｃ—ｆｉｂｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｉｓａｎａｌｙｚｅｄｉｎｄｅｔａｉｌ．Ｒｅｖｉｓｉｎｇａｌｇｏｒｉｔｈｍｏｆｖｉ—ｇｎｅｔｔｉｎｇｉｓｄｅｓｃｒｉｂｅｄｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙｉｎｔｈｅｏｒｙ，ａｎｄｒｅｌａｔｉｖｅｈａｒｄｗａｒｅｉｓｇｉｖｅｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｏｐｔｉｃ—ｆｉｂｅｒ；ｃｏｎｆｏｃａｌ；ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ；ｖｉｇｎｅｔｔｉｎｇ光纤激光共焦扫描显微镜由于排除了离焦光线所造成的晕斑对图像的影响，能够获得高对比、高分辨的二维高倍率放大图像．加上它所具有的亚微米级纵向高分辨能力，可以实现物体轴向不同高度若干幅平面图像的三维重构［１‘２］，因而在材料、生物医学等领域具有广泛的应用前景。
一种改进的病理显微图像亚像素快速配准方法
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｉｍａｇｅ；ｓｕｂ－ｐｉｘｅｌｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ；ｐｈａｓｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ；ｔｅｍｐｌａｔｅｍａｔｃｈｉｎｇ
０ 引 言
图像配准是指求解两幅或者多幅具有相同场景或者内 容的图像之间几何变换关系，图像配准是图像处理、机器 视觉以及医 疗 成 像 中 最 重 要 的 步 骤 之 一 ， ［１］ 医 学 图 像 拼 接 融合、计算机 视 觉 领 域 的 目 标 定 位 以 及 卫 星 遥 感 图 像 等 ［２］ 应用均对图像配准的精度有较高的要求。
关键词：病理显微Βιβλιοθήκη 像；亚像素配准；相位相关；模板匹配
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Ｚｈａｎｇ Ｗｕｊｉｅ，ＴａｎｇＬｉｕｓｈｅｎｇ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｃｈａｎｉｃａｌ＆ ＡｕｔｏｍｏｔｉｖｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６４１，Ｃｈｉｎａ） 犃犫狊狋狉犪犮狋：Ａｉｍｉｎｇａｔｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｏｆｆａｓｔａｎｄｈｉｇｈ－ｐｒｅｃｉｓｉｏｎｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｉｍａｇｅｓ，ａｎ