光合菌的检验方法
西南大学崇德湖中光合细菌的分离及初步鉴定
西南大学崇德湖中紫色非硫光合细菌的分离及初步鉴定摘要:西南大学校园崇德湖水体污染较严重,而紫色非硫光合细菌可以净化水体,因此对该湖水样进行鉴定,鉴定其紫色非硫光合细菌数量的多少。
利用特异性培养基对西南大学校园崇德湖水样进行富集、分离和纯化, 得到了1株紫色非硫细菌( PNSB) , 依据细菌形态特征及群落形态特征及特性观察实验, 初步鉴定这些光合细菌属于红篓菌属细菌。
关键词:紫色非硫光合细菌;分离;鉴定;崇德湖正文:一般湖中生物在死亡后尸体堆积于湖中。
这些物质腐败后产生的氨氮、硫化氢等有害物质直接污染水体及池底, 这些有害物质除直接危害养殖对象外, 同时也是病原微生物的营养源, 使病菌大量繁殖. 紫色非硫细菌( PNSB) 是光合细菌( PSB) 中最重要的一大类, 是无氧光合细菌中种属最多、分布最广、形态生理生化特征最为多样、系统发育最为复杂的一群。
紫色非硫细菌代谢类型多样, 具光合、固碳、降解大分子有机物、固氮、脱氮、硝化、反硝化、硫化物氧化等多种功能, 且细胞富含蛋白质、氨基酸等多种生理活性物质, 因而成为具有净化养殖水体、增加动物营养、促进生长和增强防病抗病能力等功能的重要微生物资源。
本课题采集校园湖中水样, 对分离出的紫色非硫细菌进行了生物学特性的研究及初步鉴定。
一、材料和方法:(一)样品:西南大学崇德湖水样(二)培养基:1、富集培养基成分:KH2PO4 0.5g;CH3COONa 3g;MgSO4·7H2O 0.2g;CaCl2·6H2O 0.05g;酵母膏0.05g;CH3CH2COONa 0.3g;K2HPO4 0.3g;(NH4)2SO4 0.3g;NaCl0.1g;pH 7.2;蒸馏水100mL。
2、分离培养基成分:酵母膏3g;蛋白胨3g;琼脂5g;CaCl2·6H2O 0.3g;NaCl0.3gMgSO4·7H2O 0.5g;pH 6.8;蒸馏水100mL。
高产辅酶Q10光合细菌的筛选及鉴定-2019年文档资料
高产辅酶Q10光合细菌的筛选及鉴定光合细菌(Photosynthetic bacteria,PSB)是一大类能利用光能作为能源进行不放氧光合作用的原核生物的总称,是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物,除蓝细菌外,都能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用有机物作氢供体兼作碳源,进行不放氧的光合作用以合成自身物质[1]。
光合细菌广泛分布在海洋、湖泊、江河、水田和活性污泥等各个角落,能充分利用光能和各种有机物为其营养源进行自身的营养繁殖[2]。
光合细菌营养丰富,细胞干物质中蛋白质含量超过60%,含有多种维生素,尤其是B族维生素含量极为丰富,VB12、叶酸、泛酸、生物素的含量远高于酵母[3],在人类生活的多方面都具有极其重要的作用。
光合细菌中辅酶Q10(CoQ10)的产量较高,尤其是红螺菌科细菌。
Yoshida等[4]报道了用Rhodobacter sphaeroides KY - 4113生产CoQ10。
目前日本已实现利用光合细菌工业化发酵生产CoQ10,而国内应用光合细菌发酵生产的技术还未成熟,主要还是用来净化水体、作为生物肥料以及动物饲料添加剂[5~7]。
CoQ10又称泛醌,是一种脂溶性醌类化合物,主要存在于动植物和微生物体内,在细胞内与线粒体内膜结合,作为生物体内细胞呼吸链上的电子递氢体和能量代谢的激活剂,是人体重要的生化辅酶之一。
CoQ10在心血管疾病的治疗中起重要作用,并可提高人体免疫力和治疗人体免疫系统疾病,是一种临床价值很高的生化药物,近年来已广泛应用于各类心脏病、糖尿病、癌症、急慢性肝炎、帕金森症等疾病的治疗[8,9]。
因此,筛选高产CoQ10的光合细菌具有积极的现实意义。
我们利用富集培养基从池塘污泥中富集和分离出5株光合细菌,对这5株光合细菌产生的CoQ10进行了定性定量分析,并对CoQ10产量最高的菌株进行了表型特征、生理生化特性及16S rDNA的系统发育分析,为以后提高CoQ10产量提供菌株材料。
光合细菌的分离及初步鉴定
光合细菌的分离及初步鉴定【摘要】利用从西南大学北校区崇德湖的边泥,富集分离得到两种光合细菌,该菌株厌氧培养后呈现出红色和绿色,革兰氏染色呈阴性,通过形态学观察及文献资料查询鉴定,初步鉴定为该菌株属于红假单胞菌属和蓝细菌。
【关键词】光合细菌富集分离鉴定目的初步了解无氧操作,学会无菌操作和革兰氏染色,掌握微生物实验的基本技能,学习分离厌氧光合细菌及初步鉴定的方法。
原理光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用,利用光能进行光合作用,利用光能同化二氧化碳,与绿色植物不同的是,它们的光合作用是不产氧的。
光合细菌在自身的同化代谢过程中,又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。
从厌氧且能得到光照的环境采样,选用特定的富集和分离培养基,在厌氧并有光照的条件下进行培养,可分离到不同的光合细菌。
材料与用具1、材料崇德湖池塘边透光处采取淤泥2、培养基及试剂光合细菌液体富集培养基(以下配方为500ml所用):CH3COONa 1.5 g;CH3CH2COONa 0.15 g;NaCl 0.5 g;(NH4)2SO4 0.15 g;MnSO4 12.5 mg;K2HPO4 0.15g;KH2PO4 0.25 g;CaCl2 0.025 g;MgSO4•7H2O 0.1 g;FeSO4•7H2O 0.0025 g;酵母膏0.05 g;蛋白胨0.005 g;蒸馏水500 ml;pH 7.0光合细菌分离培养基(以下配方为500ml用):CH3COONa 1.5g;CH3CH2COONa 0.15g;NaC1 0.25 g;NH4CI 0.5 g;MgSO4•7H2O 0.1g;K2HPO4 0.15g;KH2PO4 0.25 g;CaC12 0.025g;MnC12•4H2O 0.0015 g;FeSO4-7H2O 0.0025 g;酵母膏0.05g;蛋白胨0.005 g;谷氨酸0.0001 g;蒸馏水500 ml;琼脂10 g;pH 7.2—7.4无菌水、无菌液体石蜡3、仪器及用具光照培养箱、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、酒精灯、三角瓶、培养皿、试管、接种环、接种针、玻璃珠等。
临床细菌常规检验方法
临床细菌常规检验方法1.样本收集:通常采用微生物标本采集套装,如采血培养瓶、骨髓培养瓶、尿培养瓶、分泌物培养瓶等。
不同类型的标本要按照不同的采集方法进行采集,以确保样本的纯度和无污染。
2.样本处理:在获得样本后,要进行适当的处理,如血液样本要进行离心分离,分离出红细胞和血浆/血清。
尿液样本要进行离心去除悬浊物等。
3.细菌培养:将已处理的样本分别接种到含有适当培养基的培养皿中,并在适当温度和湿度下培养一段时间。
通常常规培养采用的培养基包括血浆琼脂、麦康凯琼脂等。
培养时间通常为24-48小时,特殊细菌可能需要更长的培养时间。
4.细菌鉴定:对培养出的菌落进行初步的形态学鉴定,如观察菌落形状、大小、颜色等。
然后进行革兰染色,观察细菌的形态特征,如是否革兰阳性或革兰阴性。
根据初步鉴定的结果,可以选择进一步的生化试验或分子生物学检测,如氧化/发酵试验、羟基酸钠试验、目标序列扩增等。
最终确定细菌的种类和特征。
5.药敏试验:对已鉴定出的细菌进行药敏试验,以确定细菌对各类抗生素的敏感性。
药敏试验通常采用纸片扩散法或肉汤稀释法,通过观察菌落的生长抑制区域大小来判断细菌对抗生素的敏感程度。
6.结果分析和报告:根据细菌培养和鉴定的结果以及药敏试验的结果,进行结果分析和判断。
最后将结果整理成报告,提供给临床医生参考,帮助临床医生做出正确的诊断和治疗决策。
总的来说,临床细菌常规检验方法包括了样本收集、样本处理、细菌培养、细菌鉴定、药敏试验等步骤。
这些步骤的顺序和方法都有一定的规范和标准,以确保检验结果的准确性和可靠性。
临床细菌常规检验在临床诊断和治疗中起着重要的作用,可以帮助医生选择合适的抗生素治疗方案,提高治疗效果。
光合细菌分离筛选与培养
光合细菌分离筛选与培养着色菌属或称红硫菌属的分离与纯化培养,着色细菌与绿菌属一样也是光合细菌,但它们除了含有叶绿素外,还含有胡罗卜素,而且后者占优势。
其细胞除球形外.有柱状,偶有弯曲有荚膜及极生鞭毛,能运动,细胞团块呈深浅不一的红色或紫红色。
在有硫化氢条件下生长时,能氧化硫化氢与硫,累积硫于细胞内,而绿色硫细菌却沉硫于细胞外。
分布在有腐烂藻类植物的海泥和淡水泥中。
1 分离培养基成分及其配制,由于此种完全培养基的有些成分不能在高压灭菌.或在高温下不相容必须先制备好基础培养基,然后把其他成分的无菌溶液加到冷基础培养基中。
(1)基础培养基:NH4Cl 0.1 克 KH2PO40.1 克 MgCl20.05克 NaCl海生种30 克淡水种10克琼脂 20克水 925毫升,溶解以上无机盐于水中,加入琼脂,加热至121℃ 15分钟,使琼脂溶解,分装于试管或螺旋口瓶里.121 ℃蒸汽下灭菌15分钟。
不加琼脂可作为液体培养基。
(2)无菌碳酸氛钠溶液:将NaHCO3 5克加水至100 毫升,在121℃蒸汽下灭菌15 分钟。
(3)无菌硫化钠溶液:此液既作为HS-的来源,又起脱氧剂作用,若是预先配制,必须把它保存在没有氧的密闭容器里,否则应在临用前配制。
取Na2S·9H2O 5克加水至100 毫升,在121 ℃蒸汽下灭菌15分钟.(4)完全培养基:基础培养基(融化冷至45 ℃) 10毫升 NaHCO3溶液 0.4毫升 Na2S9H2O 0.2毫升,依次无菌地如到基础培养基中,混匀后可用。
2.分离与纯化培养(1)分离培养:在广口玻璃瓶底放一层0.5-1厘米厚的混有腐烂海藻的海泥,用海水覆盖,暴露于光下。
直至培养器最靠近光源的壁上长出红色菌为止。
这些红色生长物通常含有着色菌.它的生长决定于泥中硫酸盐的还原,和随后释放的H2S。
(2)纯化培养①深层试管法:a 、选取具有着色菌特征的红色生长物(已用显微镜检查过细胞形态),放于一定量的完全培养液中,混匀。
光合细菌(2)2+9h
5、光谱指标 光吸收植A660> 光吸收植A660>1.5 A490> A490>2.5 A805> A805>1.7 A860> A860>1.9 6、卫生指标 沙门氏菌 黄曲霉素B1 黄曲霉素B1 (mg/Kg) 总砷(AS) 总砷(AS)( mg/Kg ) 铅 (mg/Kg)
无 <0.02 <0.5 <2.0
六、光合细菌在水Байду номын сангаас养殖中的应用
光合细菌由于菌体内含有丰富的蛋白质、氨 基酸、维生素B 基酸、维生素B族等,因此营养价值极高,可作为 主要的蛋白质饲料来源,为鱼、虾等所利用。同 时,由于光合细菌个体极小,是浮游生物的适饵, 而浮游生物又是稚鱼、虾类等的主要食物,因此 其在天然食物链中具有最佳的平衡作用。光合细 菌在自然水体中是生物的食物链和物质循环的中 心,对调节物质循环,能量流动,维持生态平衡, 净化水质起着极为重要的作用。
4、理化指标测定 (1)酸度测定 以不低于0.01PH值精度的酸度计,直接于20ml样 以不低于0.01PH值精度的酸度计,直接于20ml样 品中测量。 (2)电导率测定 以DOS-IIA型(或同等精度其它型号)电导仪直 DOS-IIA型(或同等精度其它型号)电导仪直 接于20ml样品中测量。 接于20ml样品中测量。 5、光谱指标测定 取0.5ml样品置3ml容积,1cm光径比色杯中,加 0.5ml样品置3ml容积,1cm光径比色杯中,加 入2ml蒸馏水,以蒸馏水为对照,在可见分光光度 2ml蒸馏水,以蒸馏水为对照,在可见分光光度 计中读取660nm、490nm、805nm、860nm波长 计中读取660nm、490nm、805nm、860nm波长 处光吸收值,再乘5 处光吸收值,再乘5得到以上几个波长处的光吸收 值。 6、卫生指标检验 (略)。
细菌鉴定及检测方法
细菌鉴定及检测方法细菌是一类微生物,其病原性和耐药性等特性对人类健康和环境安全有着重要影响。
因此,准确的细菌鉴定和检测方法对于疾病诊断、食品安全、环境监测以及抗生素治疗等领域至关重要。
本文将详细介绍常用的细菌鉴定和检测方法。
一、细菌鉴定方法1.形态学鉴定:通过观察细菌的形态特征,如细胞形状、大小、颜色等,可以初步判断其属于哪一类菌。
这种方法主要适用于形态特征非常典型的细菌。
2.染色法鉴定:常用的细菌染色方法有革兰氏染色、抗酸染色等。
革兰氏染色可以根据细菌的细胞壁特性将其分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。
抗酸染色适用于检测酸忍受性细菌,如结核分枝杆菌等。
3.生理生化特性鉴定:这是一种常用的鉴定细菌的方法,通过观察细菌对特定物质的代谢反应,例如对糖、气体等的发酵、氧要求等,可以初步确定细菌的鉴定组。
4.分子生物学鉴定:分子生物学方法可以通过提取细菌基因组DNA或RNA,利用PCR扩增、序列分析、16SrRNA测序等技术,从而精确确定细菌的鉴定种属。
分子生物学方法具有高度的特异性和敏感性,广泛应用于细菌鉴定中。
二、细菌检测方法1.培养法:这是一种常用的细菌检测方法,通过在富含营养物的培养基上培养细菌,并根据菌落形态、色素、气体产生等进行初步鉴定。
培养法可以用于检测食品、水源、空气中的细菌等。
然而,一些特殊的细菌可能无法在常规培养条件下生长,所以培养法在一些情况下可能会有限制。
2.免疫学方法:包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术。
这些方法利用细菌表面特异的抗原与特定抗体的结合反应来检测细菌,并通过检测结果的颜色或荧光信号来判断细菌是否存在。
免疫学方法具有高度的特异性和灵敏性,适用于检测特定细菌的存在或细菌相关的抗体等。
3.分子生物学方法:分子生物学方法在细菌检测中也起着重要作用。
PCR和实时荧光PCR是常用的检测细菌DNA的方法,可以通过特定引物和探针分别扩增和检测目标细菌的DNA。
此外,基于DNA测序技术的全基因组测序也可用于快速鉴定和检测细菌。
沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准
商务版 | 政务版 | ENGLISH 首页 > 政策法规 > 通知农牧函[1998]30号沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准作者:摘自:日期:1998-08-04中华人民共和国农业部通知农牧函[1998]30号各省市、自治区、直辖市畜牧(农牧)厅(局)、饲料工业办公室:根据农业部有关饲料添加剂审批的规定,经审核,批准北京市奇威生物工程研究所研制的沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂为水产养殖用新饲料添加剂。
试产期二年,试产期实行产品保护。
试产期内该产品的生产监督按我部发布的质量暂行标准执行。
一九九八年八月四日附件沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准1.主题内容与适用范围本标准规定了沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品的质量指标、试验方法、检验规则、标志包装、运输、储存的要求。
本标准适用于沼泽红假单胞菌类(光合细菌)水剂的生产。
2.引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
在标准出版时,所示版本均为有效,所有标准都会被修订,使用标准的各方应探讨、使用下列标准最新版本的可能性。
GB 13079-91饲料卫生标准GB 13091-91饲料中沙门氏菌的检验方法GB 8381-87 饲料中黄曲霉素B1的测定方法GB 13079-91饲料中总砷的测定方法GB 13080-91 饲料中铅的测定方法GB 10648-93饲料标签3.技术要求3.1微生物指标3.1.1菌落形态本品稀释后在琼脂培养皿上培养,菌落形态为草帽形或园形,表面光滑,少隆起,边缘整齐,棕红色。
3.1.2菌体形态显微镜下观察,本产品菌体形态为短杆状或卵园形,宽0.5-0.9微米,长1.2-2.0微米,无芽孢,无荚膜,单极鞭毛,可运动。
3.1.3革兰氏染色阴性3.2感观指标本品为红色悬浮液体,带培养基发酵味,长时间静置红色悬浮菌体会逐渐下沉,振荡后可恢复悬浮液状,无臭味。
3.3光合细菌含量总菌数不低于30亿个/ml活菌数不低于20亿个/ml3.4理化指标酸度PH6.5-7.0电导率6-8ms/cm3.5光谱指标光吸收植A660>1.5A490>2.5A805>1.7A860>1.93.6卫生指标沙门氏菌无黄曲霉素B1 Mg/Kg <0.02总砷(AS) Mg/Kg <0.5铅 Mg/Kg <2.04.试验方法4.1试剂和溶液除特别注明外,试验中所用试剂为分析纯试剂,水为蒸馏水或相应程度的水,溶液为水溶液。
菌的检测方法
菌的检测方法菌是一类微生物,广泛存在于自然界的各种生物体中,对人类健康和环境具有重要影响。
为确保食品安全、环境卫生和医疗卫生的需要,菌的检测成为必要的工作。
本文将介绍几种常用的菌的检测方法。
二、传统培养法传统培养法是一种常见的菌的检测方法。
其主要步骤包括样品采集、接种培养基、培养、菌落计数等。
首先,从待测样品中采集菌落并转移到培养基上。
然后,将培养基置于适宜的温度和湿度条件下,培养一定时间后观察菌落的形成和生长情况。
最后,通过菌落计数来确定待测样品中菌落的数量并进行分析。
三、分子生物学方法近年来,随着分子生物学技术的发展,分子生物学方法也被广泛应用于菌的检测中。
其中,聚合酶链反应(PCR)是一种常用的分子生物学方法。
该方法通过特定引物选择性地扩增待测样品中的目标基因序列,然后使用凝胶电泳等技术进行目标基因的检测和分析。
相比传统培养法,分子生物学方法具有更高的灵敏度和特异性,能够检测到更低浓度的菌,并且不受菌种生长条件的限制。
四、免疫学方法免疫学方法是另一种常用的菌的检测方法。
该方法基于菌体表面的抗原与特异性抗体的结合,通过免疫反应来检测菌的存在。
常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫荧光技术。
这些方法具有快速、准确的特点,可以进行大规模样品的高通量检测。
五、快速检测方法为了满足现代社会对快速、便捷、准确的菌检测需求,一些快速检测方法也被提出和发展。
比如,基于光学传感技术的生物传感器,利用菌体与传感器之间的相互作用来快速检测菌的存在。
同时,一些生物芯片技术也应用于菌的检测中,通过微小芯片上的微阵列来同时检测多个菌种。
综上所述,菌的检测是确保食品安全、环境卫生和医疗卫生的关键环节。
传统培养法、分子生物学方法、免疫学方法以及快速检测方法都是常用的菌的检测方法。
在选择适合的方法时,需要考虑样品的特点、检测的目的以及实验条件等因素。
在未来,随着技术的不断进步和创新,菌的检测方法将更加多样化和高效化,为人类保障健康提供更强有力的支持。
一株光合细菌分离与初步鉴定
一株光合细菌分离与初步鉴定
一、材料与器材
1. 全水:用于分离和洗涤细菌。
2. 乳酸:用于识别光合细菌。
3. 盘状冰膜:用于分离光合细菌。
4. 尿素:用于识别光合细菌。
5. 液体无氧培养基:用于支持细菌生长。
6. 杆状细菌培养物:用于支持细菌生长。
7. 高选择性培养基:用于培养光合细菌。
8. 实验室细胞膜:用于分离细菌。
二、流程
a. 收集样品:采集的样品应及时运输至实验室,以避免培养条件的变化,为分离细菌提供最佳环境。
b. 启动培养基:将采集样品放入液体培养基,稀释后供细菌培养。
c. 浇发:在实验台上放置一块冰箱冰膜,将未拆分的培养液浇注在上面,采用盘状法,可以将培养的细菌分离、纯化。
d. 识别:在分离的细菌培养物中添加乳酸和尿素,看是否有光合细菌的特征出现,从而判断细菌的表型。
e. 鉴定:使用高选择性培养基培养分离出的细菌,检查该株细菌的形成、形态和生活习性,鉴别出细菌种类。
三、结果
根据上述流程,成功分离出一株光合细菌,经鉴定属于假丝酵母菌。
其具体特征包括:在高选择性培养基上,以星状小颗粒菌群生成,菌落褐色;细胞多呈球形,偶尔有枝节;光合酶微量出现,具有酸性氨基甲酸酯酶、呋喃胺酶(URA)和α-
糖原酶(GLU)活性,而不含β-惰性酶。
综上,成功分离出一株光合细菌,经过初步鉴定,此株光合细菌属于假丝酵母菌。
真菌鉴定方法
真菌鉴定的方法主要有直接涂片、墨汁涂片、涂片或组织切片染色和培养检查12。
1.直接涂片:为最简单而重要的诊断方法。
取标本置玻片
上,加一滴10%KOH溶液,盖上盖玻片,在酒精灯火
焰上稍加热溶解角质后,轻轻加压盖玻片使标本透明即
可镜检。
可用于检查有无菌丝或孢子,但不能确定菌种。
2.墨汁涂片:用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。
取一
小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻片后直接
镜检。
3.涂片或组织切片染色:染色可更好地显示真菌形态和结
构。
革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等。
4.培养检查:可提高真菌检出率,并能确定菌种。
标本接
种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上,置室温或37℃培养
1-3周,必要时可行玻片小培养协助鉴定。
细菌的一般检验方法
细菌的一般检验方法细菌是一类微生物,其存在对人类和动植物的生长发育、食品的加工贮藏和环境的卫生安全等方面都具有重要的影响。
因此,对细菌的检验成为了保障公共卫生安全和食品安全的重要手段。
细菌的一般检验方法包括了样品采集、预处理、培养、鉴定和计数等步骤。
首先,样品采集是细菌检验的第一步。
样品的采集应当严格按照规范进行,以避免外界污染的介入,影响检验结果的准确性。
不同类型的样品需要采用不同的采集方法,比如空气中的微生物可以通过空气采样器进行采集,而食品和水样则需要进行样品的取样和保存。
其次,样品的预处理是为了提高细菌的检出率。
预处理的方法包括了样品的稀释、过滤、离心、酶处理等。
这些方法可以去除样品中的干扰物质,使得细菌更容易被检测出来。
然后,培养是细菌检验的关键步骤。
将样品接种在含有营养物质的培养基上,利用恒温箱进行培养,有利于细菌的生长和繁殖。
不同的培养条件可以选择不同的培养基,比如选择富含营养物质的富养分琼脂培养基用于一般微生物的培养,选择含有特定抑菌剂的培养基用于选择性培养。
接下来是鉴定,即对培养后的细菌进行鉴定和分类。
鉴定的方法包括了生化试验、形态学观察、生理生化特性检测、分子生物学方法等。
通过这些方法,可以对细菌的种属进行初步鉴定,从而为后续的处理和控制提供依据。
最后是计数,通过计数可以了解样品中细菌的数量。
常用的计数方法包括了平板计数法、膜过滤法、MPN法等。
这些方法可以对样品中的细菌数量进行定量分析,为后续的风险评估和控制提供依据。
总的来说,细菌的一般检验方法包括了样品采集、预处理、培养、鉴定和计数等步骤。
这些方法的准确性和可靠性对于保障公共卫生安全和食品安全具有重要的意义,因此在实际操作中需要严格按照规范进行操作,以确保检验结果的准确性和可靠性。
鉴别优质的光合细菌,避免劣质光合细菌使用无效的情况
鉴别优质的光合细菌,避免劣质光合细菌使用无效的情况光合细菌是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称,是一类没有形成芽孢能力的革兰氏阴性菌,是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。
光合细菌分为两个大类,蓝细菌和紫色细菌;蓝细菌是产氧型光合细菌,碳源只有二氧化碳。
它具有两个光系统,PSI及PSII,光合作用的原始供氢体是水,光合作用的结果是产生氧气。
紫色细菌是一群含有菌绿素和类胡萝卜素、能进行光合作用、光合内膜多样、以硫化物或硫酸盐作为电子供体、沉积硫的光能自养型细菌。
因含有不同类型的类胡萝卜素,细胞培养液呈紫色、红色、橙褐色、黄褐色,故称为紫色细菌。
红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属;水产养殖上能够有效应用的主要为红假单胞菌,又可以分为沼泽红,荚膜红,球形红等几种不同的菌属;目前大部分光合细菌制剂均以沼泽红、沼泽红荚膜红、球形红等三类细菌为水产养殖应用为主体;其中以沼泽红荚膜红为水产养殖的应用主体(大量实践证明其效果要优于单一的沼泽红或者球形红),单位毫升菌体的含量决定了我们使用菌制剂后,作用于水体时间的快慢;我们来叙述下如何区分光合细菌质量的优异及其菌体含量的高低,这两者则决定了光合细菌泼洒水体后作用时间的快慢及是否会产生相应的效果;一线的水产养殖人员往往在使用光合细菌后,说光合细菌无效或者看不到明显的作用,这里面包含了两个因素:一是光合细菌质量的高低;二是是否在正确时机使用了光合细菌,而前者则跟我们使用的是否为优质的光合细菌有直接的关系。
下面我们就来就如何鉴别优质的光合细菌进行剖析:1、菌体的酸碱度指标:成熟的光合细菌菌液其ph在8.0——9.0之间,但是大部分产品菌液的ph菌液甚至无法达到8.0,光合细菌在增殖过程中,其代谢物呈碱性,会提高菌液的ph值;所以,自行繁育的光合细菌或者购买的成品光合细菌以ph在8.5以上为佳;2、菌液形态颜色及包装:我们在接种初期菌液颜色根据接种的大小,其透明度会相对成熟菌液是比较高的,在不断增殖直至菌液成熟后,菌液会变得失去透明度,吸光值会处在1.8以上则为优秀,菌体含量会达到80亿左右;反之,菌液繁殖后透明度较高,则菌体含量就低;颜色接种初期会呈现鲜艳的靓红色,而成熟的菌液,其颜色会呈现深紫色,大红色,深红色、血红色等悦目颜色;优质的光合细菌其包装瓶一般为透明无色的,劣质的则采用白色塑料桶或者不透明包装;3、粘度形态:单位毫升的菌体含量增高,其代谢物会呈现黏连状态,摇动起来会有一种粘稠的感觉,也就是具有一定的粘稠形态,导出光合细菌液时,停止时由于菌液的黏连性也会有少许的菌液导出;而单位菌液含量稀少的光合细菌,则不会呈现这一特性;市场有部分产品冒充高密度的光合细菌,在成品菌液内添加增稠剂,欺骗水产养殖人员;4、活力鉴别:我们将成熟的光合菌液导入食用醋适量,将其ph 调至7.5左右,放置太阳下面6小时左右进行增殖,ph上升的越快越高,越表明菌体活力是比较旺盛的,反之,则表明菌体没有活力,即使泼洒到水体后,其发挥效用的能力也是比较弱或者无效的;5、菌液气味:菌液成熟后,会散发出尿骚味及大粪味;这个是成熟光合细菌菌液具有的特殊味道;6、显微镜镜检:结合酸碱度指标,气味,颜色变化,将显微镜调至1000倍,可以有效观察菌体的密度;菌体密度越大,证明菌液质量就越高,反之则为劣质光合细菌;。
检验微生物菌的方法有哪些
检验微生物菌的方法有哪些
检验微生物菌的方法主要有以下几种:
1. 培养法:将微生物菌落培养在不同的培养基上,通过观察菌落形态、颜色、大小等特征来鉴定微生物种类。
2. 直接染色法:利用染色剂将微生物标记出来,比如革兰氏染色法、抗酸染色法等。
3. 生化鉴定法:根据微生物代谢产生的酶和酸碱度等特性,通过对微生物代谢产物的分析来鉴定微生物种类。
4. 分子生物学鉴定法:利用PCR等分子生物学技术来检测微生物的DNA或RNA序列,通过序列比对来鉴定微生物种类。
5. 免疫学鉴定法:利用免疫学技术来检测微生物产生的抗原或抗体,通过检测抗原或抗体的特异性来鉴定微生物种类。
以上是常见的微生物菌检验方法,根据不同的检验目的和样本类型,可以选择不同的方法进行微生物菌的检验和鉴定。
光合细菌测试实验报告
一、实验目的1. 了解光合细菌的基本特性;2. 掌握光合细菌的培养方法;3. 学习观察光合细菌的形态和生长状况;4. 分析影响光合细菌生长的因素。
二、实验材料1. 光合细菌菌种:小球藻、绿藻等;2. 培养基:光合细菌培养基;3. 实验器材:培养皿、移液器、显微镜、培养箱、恒温箱、无菌水等。
三、实验步骤1. 光合细菌培养基的制备:按照实验要求,将光合细菌培养基按照一定比例溶解于无菌水中,然后加入适量的葡萄糖,搅拌均匀,过滤除菌,备用。
2. 光照条件的设置:将培养皿分为对照组和实验组,对照组在正常光照条件下培养,实验组在遮光条件下培养。
3. 光合细菌的接种:用无菌移液器吸取适量的光合细菌菌种,均匀接种于培养皿中,每个培养皿接种3个平行样。
4. 培养与观察:将培养皿置于培养箱中,恒温培养,观察光合细菌的生长状况。
每隔一段时间,用显微镜观察光合细菌的形态和数量。
5. 数据记录与分析:记录不同光照条件下光合细菌的生长状况,包括菌体形态、数量、生长速度等,分析影响光合细菌生长的因素。
四、实验结果1. 对照组:在正常光照条件下,光合细菌生长良好,菌体呈绿色,数量较多,生长速度较快。
2. 实验组:在遮光条件下,光合细菌生长缓慢,菌体呈淡绿色,数量较少,生长速度较慢。
五、讨论与分析1. 光照对光合细菌生长的影响:实验结果表明,光照对光合细菌的生长有显著影响。
在正常光照条件下,光合细菌生长良好,而在遮光条件下,光合细菌生长缓慢。
这是因为光合细菌需要光照进行光合作用,产生能量和有机物质,从而维持其生长。
2. 光照强度对光合细菌生长的影响:进一步实验可以探究不同光照强度对光合细菌生长的影响,以确定最适宜的光照强度。
3. 光照与温度的协同作用:光合细菌的生长不仅受光照的影响,还受温度的影响。
实验可以探究光照与温度的协同作用,以优化培养条件。
六、结论本实验研究了光照对光合细菌生长的影响,结果表明光照对光合细菌的生长有显著影响。
复合菌的测定方法是
复合菌的测定方法是复合菌是一类由藻类和真菌组成的复合生物。
测定复合菌主要有以下几种方法:1. 显微观察法利用光学显微镜或电子显微镜,可以直接观察复合菌样品的菌体结构,来鉴定它们的组成。
复合菌的特征是菌体由藻类细胞和真菌组成,两者关系密不可分。
显微观察可以看到菌体中的藻类细胞布局、形态、颜色等,从而初步判断复合菌的种类。
但仅凭形态学观察可能会产生误判,需配合其他方法。
2. 营养方法根据不同复合菌对营养源的利用能力,可以进行鉴定。
首先需要分离纯化复合菌,然后在不同培养基上培养,测试其生长情况。
不同复合菌对光照、无机碳源、有机碳源的依赖性各不相同,通过比较其生长速度、对营养利用的特异性,可以区分复合菌的种属。
3. 生理生化试验测定复合菌样品的一些生理生化特征,如颜色素成分、酶活性、抗生素敏感性等,也能作为鉴定依据。
这需要提取复合菌组分进行相关反应,根据结果判断菌种。
有些指标如光合作用活性直接反映藻类成分,而有些则反映真菌成分。
结合指标可以更准确地识别复合菌。
4. 分子生物学方法提取复合菌组分的DNA、RNA后,可以通过聚合酶链式反应(PCR)、DNA指纹图谱分析、序列分析等技术鉴定菌种。
如针对藻类、真菌保守基因设计引物进行PCR扩增,根据产物长度判定属种;也可以进行基因序列分析与数据库比对,判定分类地位。
这些方法灵敏度和精确度很高,是确认复合菌分类学位置的金标准。
5. 细胞分离技术从复合菌体中分离纯化藻类和真菌,进行单独培养,可以帮助判断两者的关系。
如果它们能在分离状态下正常生长,则为肉眼结合;如果不能生长,则为细胞内结合。
不同类型的藻真菌结合也是分类复合菌的重要依据。
分离技术需要化学或机械方法破坏菌体连接。
6. 生态学研究观察复合菌样品的自然生境、生长环境,以及它们与其他生物的关系,也有利于正确分类。
不同复合菌对生存环境的适应性有差异,这反映它们的系统发育关系。
生态学研究需要野外观察与样品采集。
7. 统计分析采用各种统计学方法,如主成分分析、聚类分析等,可以对复合菌样品的观测特征进行多元分析,判断样品之间的相似性,从而判定分类群。
如何鉴别光合细菌的质量
鉴别光合细菌质量:1、稀释后置阳光底下1-2小时再比色,色深者为佳;2、闻气味:光合细菌OD》8时(国家标准》1.7),有特殊酵香味,而不是恶臭;3、看瓶壁:瓶壁粘附菌膜的,已经大量衰亡;4、看黏度:越浓稠的(小瓶装)极有可能是增稠剂;5、看活力:光合细菌培养出来以后都是9.0左右的pH值,如果是透明瓶子装的,打开盖子,加食醋适量,调pH至7.5-8.0,摇匀放太阳底下,如果4-6小时后pH重新回到8.5以上,说明菌体活力好;6、看包装:几乎所有20Kg或以上的白色塑料桶装的,便宜质劣,5Kg透明瓶的比较合适水产养殖。
随着水产养殖业的不断发展,水域环境加剧恶化,导致水产养殖动物疾病频发。
由于过度使用消毒剂及抗生素等药物,不仅使病原菌耐药性增强,而且干扰了养殖环境中有益菌群的生长、繁殖,引起微生态失调;药物在动物体内残留富集又将对人体构成危害,引发食品安全问题。
为此,绿色环保的微生物制剂不断被开发应用于养殖业,并取得显著效果。
现将近年应用于水产养殖的有益菌类介绍如下。
1光合细菌简称PSB,是国内最早用于水产养殖的细菌制剂。
光合细菌是一些能利用光能进行不产氧的光合作用的细菌,革兰氏阴性,无毒,大多数为厌氧菌,细胞内有细菌叶绿素,可在日光下,在无氧条件下以H2S、硫代硫酸根作供氢体,进行不产氧的光合作用,植物的光合作用则不同,将两种反应过程比较如下:植物:光CO2 + H2O叶绿素(CH2O) + O2细菌:光CO2 + 2H2S细菌叶绿素(CH2O) + H2O + 2S光2CO2 + S2O32- +3H2O细菌叶绿素2(CH2O)+SO42- + H2SO4光合细菌通常不能利用大型有机物,它能吸收利用水中残留有机物经异养细菌分解后产生的有机物(低级脂肪酸、氨基酸、糖类)、H2S、NH4+等合成菌体,参与水体净化。
作用原理如下图所示:光合细菌体内富含蛋白质,大量B族维生素、B12、叶酸、生物素等,是鱼虾及饵料生物的优质饵料,添加于饲料中使动物体色鲜艳,提高孵化率及存活率。
学会这5招,轻松辨认光合细菌的品质。
学会这5招,轻松辨认光合细菌的品质。
1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。
相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。
(图片来源于网络)
而优秀的光合细菌产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。
(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外)这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。
少数地方,由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别。
2、没有粘壁现象。
很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一样,洗不掉,抹不去。
这主要是在培养过程中形成的,也有在保存过程中形成的。
优秀的光合细菌产品,应该是没有一丝一毫的粘壁现象。
所以外观上看起来质量也更好。
3、颜色的深度比较深。
根据国家质量标准,可以用721分光光
度计,测量A660nm处的吸光值,如果大于1.5,则说明,浓度一般都在30亿/毫升以上,好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上。
4、颜色鲜艳无杂色。
优秀的菌种和产品,不仅颜色深,而且,比较鲜艳,没有杂色,比如是大红色,血红色,或是深紫色,看起来是很悦目的,没有不良的杂色,或是暗暗的颜色。
(图片来源于网络)
5、保存期限长。
可以保存夏天3月以上,冬天6月以上。
在期限内外观基本无变化。
保持80%以上的活力。
检测一种菌的方法是
检测一种菌的方法是检测一种菌的方法是生物学和实验室技术的综合应用。
以下是一种常用的菌类检测方法的详细步骤:1. 选取样本:首先,根据需要检测的菌类类型和目标样本的来源选择合适的样本。
可以是从自然环境中采集到的土壤、水样、空气样等,也可以是食品、药品等生物材料。
2. 样本处理:将采集到的样本进行处理,以获得菌类的可培养分离物。
处理过程可能包括样本的过滤、稀释等步骤。
3. 分离和纯化:将处理后的样本进行分离和纯化,以获取单一的菌落。
这个过程通常会使用琼脂平板培养基和菌落计数方法进行。
4. 鉴定和分类:通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对分离得到的菌落进行鉴定和分类。
常见的鉴定方法包括显微镜观察、生化试验、抗生素敏感性试验、蛋白质或DNA序列分析等。
5. 菌量测定:通过菌落计数或其他定量方法,测定分离得到的菌落的数量,以评估样本中菌落的密度。
6. 生长条件优化:对已分离和鉴定的菌株进行进一步培养,并优化其生长条件。
这通常涉及到温度、pH值、营养成分等因素的控制。
7. 毒力检测:对于某些如病原菌等具有毒力的菌株,可以进行毒力检测。
常见的方法包括动物模型实验,细胞培养实验等。
8. 抗菌药物敏感性测试:对于已经分离和鉴定的菌株,可以通过抗菌药物敏感性测试来确定其对常用抗菌药物的敏感性。
这是选择治疗方法的重要依据。
9. 快速检测方法:除了传统的培养和鉴定方法,近年来还出现了很多快速检测方法,如PCR技术、基因芯片技术等。
这些方法通常能够在较短的时间内获得可靠的检测结果。
总体来说,菌类检测方法是一个复杂而多步骤的过程,需要结合生物学和实验室技术的知识和技能,以确保准确性和可重复性。
不同的菌类和应用场景可能需要特定的检测方法和步骤,但上述的步骤可以作为一般的菌类检测流程的参考。
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光合菌活菌数的检验方法
①取样:先清洗一个容量为30~50毫升的取样瓶或烧杯。
由于光合细菌在培养液中的分布是不均匀的,尤其是具有强烈运动能力的种类更明显,所以在取样前必须充气或搅拌,待分布均匀后,立即用移液管(移液管应预先进行消毒处理,以免造成污染)取样,取样的量为10~15毫升。
如果取样的密度太大,计数困难,必须加水稀释到适宜浓度后方可计数。
②样品放于计数板:放置前必须将血球计数板和盖玻片清洗干净、擦干,不能有油污染和杂质。
将血球计数板平放在桌子上,盖好盖玻片;然后把样品瓶轻轻摇动几下,使光合细菌分布均匀,并立即用干净的微吸管取样品,迅速把微细吸管放到盖玻片的边缘处,轻压微细吸管的橡皮帽,使样品流入计数板内。
注意控制样品流入量,不能过多,过多则流入到沟内;也不能过少,过少则计数时不准确(计数后的数量一般偏少),应充满画线方格及其周边部分。
还应注意盖玻片下不能有气泡存在,否则会造成计数不准确。
不符合操作要求时,应立即重新开始。
样品吸入血球计数板后,稍停1分钟,待细菌沉降在玻片表面上再在显微镜下进行计数。
③计数:光合细菌的计数,必须使用油镜才能观察清楚。
可以计数中央大格的4个角的中格,每个中格有25个小格,逐一计数,4个中格相加共计数100个小格。
计数时应从计数框一角开始,在计数框边缘的标本应按"计上不计下、计左不计右"的原则,计数出细菌的总量后,按下式计算出每毫升菌液中的细菌数量:细菌数量=100个小格的细菌数×4×10000×稀释倍数。
注意每个样品最少重复计数两次,然后取其平均值,计算细菌的数量,两次计数结果和平均数之差应不大于其平均数偏差的10%才有效。
因为盖玻片下每个大方格上的空间为0.1立方毫米,故1个大方格内的细菌数量若为n,则细菌密度为每立毫米10n个,将此换算为每毫升的细菌数量,则需乘以10000,因此1个大方格内细菌平均数是多少,则细菌的密度就是每毫升多少万个。
如果计数前经过稀释,则需乘以稀释倍数。
例如:吸取待测的光合细菌菌液1毫升,加水19毫升稀释,计数100个小格内的细菌数量为500个,则每毫升菌液的光合细菌数量为:
细菌数量=500×4×10000×(19+1)=4×108=4亿(个)。