可口可乐中阿斯巴甜因含量的测定
可口可乐中阿斯巴甜因含量的测定
分析化学课程设计题目: 可口可乐中阿斯巴甜含量的测定姓名：孙毅专业：应用化学班级： 1223002学号： 0228指导老师：周瑜芬 2015年5月目录摘要 (1)关键词 (1)一、引言 (2)测定阿斯巴甜的目的与意义 (2)阿斯巴甜的性质 (3)二、测定方法及原理 (3)阿斯巴甜的测定方法 (3)阿斯巴甜的测定原理 (3)三、具体测定步骤 (4)仪器与药品 (4)仪器 (4)药品 (4)方法与过程 (4)色谱分析条件 (4)对照品溶液的制备 (5)进样精度 (5)标准曲线的绘制 (5)样品溶液的配制 (5)加标回收率 (5)稳定性实验 (5)样品含量测定 (5)四、数据分析与处理 (6)图表的绘制 (6)阿斯巴甜对照品色谱图 (6)精密度实验图 (6)标准曲线的绘制 (6)加标回收率图 (6)稳定性实验图 (6)阿斯巴甜含量计算 (7)五、阿斯巴甜的安全性 (7)摄入量 (7)代谢 (7)癌症 (7)神经及精神症状 (8)头痛 (8)体重变化和饥饿 (8)阿斯巴甜安全性结论 (9)六、阿斯巴甜的应用 (9)七、总结 (9)参考文献 (10)可口可乐中阿斯巴甜含量的测定摘要：2009年可口可乐旗下新品－“零度”(ZERO) 无糖可乐致癌的说法在国内众多博客、网上论坛及民间广为流传。
传闻称“零度”中所含的阿斯巴甜有损神经系统，将引发头痛、记忆力衰退、癫痫、视力消失、昏迷乃至癌肿。
本文将介绍对备受争议的“阿斯巴甜”采用高效液相色谱法将可乐样品经水提取后,在ODS-C18色谱柱上以磷酸二氢钾水溶液和乙腈作为流动相进行色谱分离,用HPLC法在VWD208nm 处检测可口可乐中阿斯巴甜的含量[1]。
同时，对阿斯巴甜的安全性和在食品中的应用作了简单的介绍。
关键词：阿斯巴甜高效液相色谱法测定安全应用一、引言本节将介绍测定可乐中阿斯巴甜含量的目的和意义及阿斯巴甜的性质。
测定阿斯巴甜的目的与意义2009年可口可乐旗下新品－“零度”(ZERO) 无糖可乐致癌的说法在国内众多博客、网上论坛及民间广为流传。
可乐食品添加剂检测报告
可乐食品添加剂检测报告
检测机构：XXXX化验所
检测对象：可乐食品添加剂样品
检测日期：2021年X月X日
一、检测项目及方法
本次检测对可乐食品添加剂样品进行了以下检测项目：
1. 色素类添加剂：采用高效液相色谱法测定。
2. 酸味调节剂：采用滴定法测定。
3. 甜味剂：采用气相色谱法测定。
4. 防腐剂：采用气相色谱法测定。
5. 发泡剂：采用称重法测定。
二、检测结果
经过严格的检测和分析，本次检测结果如下：
1. 色素类添加剂：该样品中不存在任何色素类添加剂。
2. 酸味调节剂：该样品中存在柠檬酸，含量为1.23g/100ml。
3. 甜味剂：该样品中存在糖精钠和阿斯巴甜，含量分别为
0.02g/100ml和0.03g/100ml。
4. 防腐剂：该样品中不存在任何防腐剂。
5. 发泡剂：该样品中存在二氧化碳，含量为3.2g/100ml。
三、结论
本次检测结果显示，该样品中色素类添加剂和防腐剂均未检出。
各种添加剂的含量均符合国家标准和相关法规要求。
因此，可乐
食品添加剂样品检测合格。
四、附注
1. 本报告仅对检测样品负责。
2. 本报告结果仅针对样品，不能用于其他类似产品。
3. 如有疑问，请直接联系检测机构。
高效液相色谱法测定食品中阿斯巴甜、阿力甜两种甜味剂
高效液相色谱法测定食品中阿斯巴甜、阿力甜两种甜味剂摘要：目的：采用高效液相色谱法来对食品当中的阿斯巴甜和阿力甜两种甜味剂进行测定。
方法：在采用高效液相色谱法测定的过程中，采用色谱柱，流动相为甲醇和水，二极管所检测的位置是208nm处。
结果：最终检测的结果显示采用这种方法最低可以检测到的阿力甜与阿斯巴甜量分别是32.8ng与3.8ng，且曲线呈现出良好的线性，回收率在90%以上。
结论在食品当中对阿斯巴甜与阿力甜甜味剂进行检测时采用高效液相色谱法检测简单易行，快速灵敏度比较高。
关键词：高效液相色谱法；食品；甜味剂；阿斯巴甜；阿力甜甜味剂是我们在食品当中常见的添加剂。
近几年来阿力甜以及阿斯巴甜这两种甜味剂都得到了十分广泛的应用[1]。
人们在摄入阿斯巴甜后不会随着被人体的消化吸收等产生不良影响，具备较高的安全性。
阿力甜的甜度更高，有着很好的稳定性能。
当前常见的甜味剂当中很多都不是单一的，而是由很多不同的成分复合形成[2]。
复合方式可以减少单一甜味剂的副作用，使成本得到降低，促进口感的改善。
所以应当构建起简便、快速的测定方法。
一、资料和方法1.1 仪器和试剂本次研究所采用到的试剂是阿斯巴甜以及阿力甜，这些都是从安谱公司购买的。
而使用到的仪器则主要是高效液相色谱仪，真空脱气机等以及色谱工作站，二极管矩阵检测仪器等。
1.2色谱的相关条件所选择的色谱柱是ZORBAX-SB-C18 4.6×250mm 5-Micron的，同时选择水和甲醇（61+39）来作为流动相，其流速控制在每分钟1毫升。
色谱柱的温度为常规的室温，所检测的波长为208nm。
同时明确测定的波长范围等。
1.3 曲线绘制需要针对这两种物质分别绘制相应的曲线。
其中阿斯巴甜应当加入到容量为10ml的容量瓶当中，将蒸馏水加入溶解后，定容到预定的刻度。
放置在冰箱当中保存好，阿斯巴甜标准液还需要进行逐级的稀释，最终得到不同标准的样本。
阿力甜储备液所需要加入的剂量是0.053g，容量瓶为100ml，在加入蒸馏水溶解之后进行定容到相应的刻度。
阿斯巴甜的研究现状及前景展望
阿斯巴甜的研究现状及前景展望摘要：随着近年来人们对于可乐饮料对人体危害的认识的加深，尤其是其中糖的影响的关注，人们把研究的重点放在了寻找新型甜味剂上边。
阿斯巴甜营运而生，本文对于阿斯巴甜的基本性质、生产现状、及前景的展望等内容做以介绍。
关键字：阿斯巴甜、苯丙氨酸、甜味剂、合成2008年初，可口可乐在国内推出了一款黑色外包装的无糖可乐“零度”无糖可乐并不是没有甜味，而是使用了一种代替蔗糖的成——阿斯巴甜，有网友发帖说阿斯巴甜可能让饮用者产生偏头痛甚至有致癌的风险，随即对可乐的安全性引起了网上的热议[1]。
那么什么是阿斯巴甜呢?它有什么用途呢?传统的食品工业主要以糖类作甜味物质，但其热量高，易引起心血管病、肥胖症和龋齿等威胁人类健康的疾病。
随着人们生活水平的提高，人们对食品中的蔗糖含量很敏感，但又不太适应低糖或无糖食品，因此开发新型甜味剂就显得非常重要，阿斯巴甜正是其中的佼佼者。
1阿斯巴甜的特点:阿斯巴甜(Aspartame，APM)，俗称天冬甜素、甜味素，化学名称为a—L-天图门冬氨酰一L广苯丙氨酸甲酯，是由L-天门冬氨酸和L-苯丙氨酸甲酯构成的二肽类甜味剂，结构式如2。
阿斯巴甜外观为白色结晶粉末，在水中的最大溶解度为1％(25℃)，乙醇中为o．26 mg／lOO mL，在常温、弱酸性(pH=3～5)下十分稳定，但在长时间高温加热，pH又高的条件下，会分解成无毒无味的二酮哌嗪。
当前世界上采用的甜味剂主要有蔗糖、糖精、安赛蜜(AK糖)、甜蜜素、甜味菊甘、阿斯巴甜等，其中阿斯巴甜作为一种新型甜味剂具有许多优点，备受食品专家的推荐与厚爱。
其主要特点如下：1.1甜度高、昧美阿斯巴甜口味纯正清爽，甜味强烈，类似蔗糖，但甜度约为蔗糖的200倍，没有人造甜味剂常有的苦味、化学味或金属的后味。
另外阿斯巴甜与其他甜味剂共用时会产生明显的甜味增效作用，即甜度高于单独使用的甜度之和，并能屏蔽其他甜味剂如糖精等的苦涩味，而且对某些食品、饮料风味也有明显的增效作用，特别是对酸型水果风味。
阿斯巴甜 jecfa标准
阿斯巴甜jecfa标准
阿斯巴甜是一种人工合成的低热量甜味剂，其国际上的食品添加物标准通常由联合国粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）的联合专家委员会——联合国食品和农业组织/世界卫生组织食品添加物专家委员会（JECFA）负责评估和制定。
以下是关于阿斯巴甜的JECFA标准的一些基本信息：
1.ADIs（每日容许摄入量）：JECFA评估了阿斯巴甜的安全性，并确定了ADIs，即每日容许摄入量。
ADIs是以每公斤体重每天的毫克数来表示，用于衡量一个人每天可以摄入的阿斯巴甜的最大安全量。
2.最大残留限量：针对某些食品中阿斯巴甜残留的问题，JECFA通常也会制定最大残留限量，以确保食品中的阿斯巴甜含量在安全水平内。
3.规范和标准：JECFA会制定关于阿斯巴甜在食品中使用的规范和标准，以确保其安全使用。
这包括阿斯巴甜在特定食品中的使用量、工艺条件等。
4.毒理学和安全性评估：JECFA进行了详细的毒理学和安全性评估，考虑了阿斯巴甜对人体的潜在危险性，并确保其在合理使用条件下是安全的。
这些标准和评估可能会随着时间的推移而更新，因此建议查阅最新的JECFA文档或相关法规以获取最准确的信息。
实验7 液相色谱法测雪碧、可乐中的咖啡因含量
液相色谱分离测定雪碧、可乐中的咖啡因【摘要】色谱法是一种分离和分析方法，本实验采用的是液相色谱中的反相分配色谱，反相色谱的固定相极性小于流动相，样品根据在固定相和流动相中的分配系数不同而进行分离。
通过标准样品的保留时间进行定性，以峰面积对浓度绘制的工作曲线定量测定可乐和雪碧中的咖啡因。
【关键字】液相色谱反相色谱咖啡因外标法【Summary】Chromatography is a separation and analysis method.This experiment uses reversed-phase distribution chromatography in liquid chromatography.The reversed-phase chromatography has a smaller stationary phase than the mobile phase.Samples have different distribution coefficients in the stationary phase and the mobile phase. And separation.Quantitative determination of caffeine in Cola and Sprite was performed by quantifying the retention time of the standard sample and by plotting the peak area versus the concentration plotted.【Keywords】liquid chromatography reversed phase chromatography caffeine external standard method【实验目的】1、学习液相色谱仪的基本原理，尤其是反相色谱的基本规律，构成和使用方法2、了解高效液相色谱仪（以安捷伦1260为例）的结构及基本操作；3、掌握色谱的基本定性、标准曲线定量方法。
真相探寻：可乐含糖量之无糖可乐含糖量？
真相探寻：可乐含糖量之无糖可乐含糖量？饮食的健康和安全是越来越多当代人所关注的头等大事，病从口入这个概念自古以来就制约着追求美食美味的人们对口腹之欲的过度需求。
大家对于可乐含糖量比较看重，所以，当一款号称无糖健康饮料出现在市面上时，对需要控制糖份摄入量，又要追求享受的人们来说无疑于天大的喜讯。
这个喜讯同时也伴随着无数的质疑声：市面上的无糖可乐真的无糖吗？可乐含糖量真的是零吗？如何让消费者安全又安心的接受这款新产品，饮料生产企业的资深研究员自然可以很好的解答这个问题。
下面，让我们从三个方面来为无糖可乐做个鉴定：一、无糖可乐的无糖是个什么概念：无糖可乐顾名思义就是没有真正意义上白砂糖的成分，而将糖换作代糖，即阿斯巴甜，这种代糖经常使用在低糖饮料当中，一直广为流传。
研究己证明代糖能释放自由甲醇，也就是我们俗称的木糖醇，占代糖的1/3，很多低糖可乐、低糖汽水、无糖口香糖、冰淇淋中都含有阿斯巴甜这种代糖成分。
①无糖可乐真的无糖吗？答案是在无糖的同时且具有普通可乐的正宗口味，是可乐的又一畅销保证。
二、无糖可乐对消费者有什么益处：首先可得知，无糖可乐针对的人群无非三种——因摄糖过多导致肥胖的人士、必须严格控制摄糖量的如糖尿病患者、因摄糖过多导致牙损伤的人士。
目前，无谓无糖类食品，大多是以阿斯巴甜作为甜味剂的，这种代糖被一些糖尿病患者亲切的称为“蛋白糖”，属于在人体内不会参与代谢的一种甜味剂。
不参与代谢的意思即这种物质不会在人体内分解并吸收，而是保持原样在人身体里“走一遭”，然后通过尿液、粪便排出体外。
因此上来说，无糖可乐真的无糖吗？对此类消费者有着无比重大的意义。
②三、无糖可乐的安全保证有哪些？在我们国内刚刚兴起无糖、低糖食品的时候，国外的无糖食品己流通多年，在可乐无比畅销的国家，至今无糖可乐仍是大多数保健人士的首选，因此上市面上的销售经验己印证了无糖可乐的安全性，对此有需求的消费者可以安心的进行选择饮用。
在美味与健康可以兼得的当今社会，我们一定要依据理性的眼光来看待流言和真相。
饮料中糖含量的测定
饮料中糖含量的测定引言饮料是我们日常生活中常见的消费品，而糖是其中的主要成分之一。
了解饮料中的糖含量对于控制摄入的糖的数量以及健康管理非常重要。
本文将介绍一种常用的方法来测定饮料中的糖含量，以帮助人们更好地了解饮料的营养成分。
实验材料和方法实验材料•饮料样品•蒸馏水•盐酸溶液•酚酞指示剂溶液•硫酸溶液•甲基橙指示剂溶液•糖溶液（备用）实验步骤1.取一个饮料样品，并将其称重记录下来。
2.将样品倒入500毫升锥形瓶中。
3.将蒸馏水加入到锥形瓶中，使液位上升到容量线附近。
4.将锥形瓶中的液体转移到锥形瓶中，重复此步骤5次，以充分混合。
5.取锥形瓶中的一小部分液体（约10毫升）置于玻璃烧杯中。
6.加入酚酞指示剂溶液，并滴加盐酸溶液，直到溶液变红。
7.将锥形瓶中的液体归还到烧杯中，并用蒸馏水冲洗锥形瓶以确保所有液体都转移到烧杯中。
8.在烧杯中加入甲基橙指示剂溶液，直到溶液变橙色。
9.分别加入酚酞指示剂溶液和硫酸溶液，直到溶液变红或变黄。
10.取出另外一个锥形瓶，并将锥形瓶中的糖溶液称重记录下来。
11.将糖溶液倒入锥形瓶中。
12.重复步骤6至9，以测定糖溶液中的糖含量。
结果和讨论根据实验步骤得到的数据，我们可以计算出饮料样品中的糖含量。
通过与糖溶液的对照组进行比较，可以确定饮料样品中的糖含量是否超出了健康范围。
在这个实验中，我们使用酚酞指示剂溶液和硫酸溶液来进行滴定。
酚酞指示剂溶液可以在酸性条件下变红，而硫酸溶液可以在碱性条件下变黄。
这样，我们可以通过观察溶液的颜色变化来确定滴定终点。
需要注意的是，该方法只能确定总糖含量，并不能对不同种类的糖进行分析。
此外，根据不同的实验条件和指示剂的使用，可能会得到稍有不同的结果。
因此，在进行实验时，应该保持一致的操作步骤，以确保结果的准确性和可重复性。
结论本实验介绍了一种测定饮料中糖含量的方法。
通过该方法，我们可以确定饮料样品中的糖含量，并与糖溶液的对照组进行比较，以评估饮料的营养成分。
GB 5009.263-2016液相色谱法测定碳酸饮料中阿斯巴甜含量的不确定度评定
液相色谱法测定碳酸饮料中阿斯巴甜含量的不确定度评定1. 确定被测量和测量方法1.1原理：根据GB 5009.263-2016 《食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》，阿斯巴甜易溶于水而不溶于脂溶性溶剂的特点，碳酸饮料用水提取，在高效液相色谱C 18反向柱上进行分离，在波长200nm 处检测，以色谱峰的保留时间定性，外标法定量。
1.2实验过程：直接浸提法: 碳酸饮料称取约5g （精确至0.001g ）于50mL 烧杯中，50℃微温除去二氧化碳，将试样全部转入25mL 容量瓶中，用水定容，混匀，4000r/min 离心5min ，，上清液过0.45μm 膜，取20 μL 进高效液相色谱仪测定。
1.3仪器参考条件1.3.1 色谱柱:C18柱,4.6mm×250mm,5μm 或等效色谱柱。
1.3.2 流动相:甲醇-水（40+60）; 1.3.3 流速:0.8mL/min 。
1.3.4 检测器：二极管阵列检测器； 1.3.5 进样量:20μL 。
1.3.6 波长:200nm 。
1.3.7 色谱柱清洗参考条件：实验结束后，用10%甲醇清洗1h ，再用100%甲醇清洗1h 。
2. 建立数学模型样品中阿斯巴甜含量,按式(1)计算: 1000m c ⨯⨯=VX式中:X ———样品中阿斯巴甜含量,单位为克每千克(g/kg);c ———由标准曲线得出的样液中阿斯巴甜的浓度,单位为毫克每毫升(mg/L); V ———样液最后定容体积,单位为毫升(mL); m ———样品质量,单位为克(g); 计算结果保留三位有效数字。
3. 不确定度来源分析由数学模型得知测定碳酸饮料中阿斯巴甜含量不确定度的主要来源包括：（1）样品测量重复性；（2）样品质量；（3）标准溶液的配制；（4）样品定容体积；（5）标准曲线4. 不确定度评定4.1测量重复性引入的相对标准不确定度分量)(rel x u A4.1.1计算被测量的最佳估计值xkg g x n x ni i /101.011===∑=4.1.2计算实验标准差)x (s k00126g/kg .01)()x (s 412=--=∑=n x x i ik4.1.3计算A 类标准不确定度)(x u Ag/kg 000629.0)(s ()(===nx x s x u k A ） 4.1.4 计算A 类相对标准不确定度)x (s k 00623.0)()(rel ==xx u x u A A 4.2样品质量引入的相对标准不确定度分量)(u B m rel根据电子天平检定证书，其最大允许误差为±0.5e=±0.05g ，则α=0.05g 。
高效液相色谱法测定可口可乐中咖啡因的含量--
高效液相色谱法测定可口可乐中咖啡因的含量姓名：学号：前言高效液相色谱是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广、色谱柱可反复使用的特点。
咖啡因（Caffeine ）是日常饮料中主要成分，据查验，1g雀巢咖啡含35咖啡因，1g茶含20-35mg，而1000ml可乐饮料中含90-100mg[1]。
咖啡因亦称咖啡碱，是一种甲基黄嘌呤，属生物碱类物质，化学名称为l，3，7一三甲基一3，7一二氢一1H一嘌呤一2，6一二酮水合物，化学式C。
H。
N。
0：，相对分子质量为194．2，易溶于水、乙醚、氯仿、二氯甲烷，能溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯，难溶于乙醚和苯，熔点为235～237℃，白色结晶粉末，无臭，味苦，有风化性[2]。
咖啡因是从茶叶、咖啡果中提炼出来的一种生物碱，属黄嘌呤类，药理作用相似，咖啡因的中枢兴奋作用较强，临床主要用作中枢兴奋药。
适度地使用有祛除疲劳、兴奋神经的作用，临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。
但是，大剂量或长期使用也会对人体造成损害，特别是它也有成瘾性，一旦停用会出现精神萎顿、浑身困乏疲软等各种戒断症状，被列入受国家管制的精神药品范围。
化学名称1,3,7-三甲基黄嘌呤，可由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱。
它能兴奋大脑皮层，使人精神兴奋。
常用来测定咖啡因的方法有滴定法[3]，紫外分光光度法[4]，高效液相色谱法[5]，气相色谱法[6]，毛细管电泳法[7]等。
1试剂、仪器和药品仪器：KQ3200DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司；AL204电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；Waters-2695高效液相色谱仪（美国；试剂：甲醇为色谱纯、超纯水；样品：可口可乐饮料(市售)；对照品：咖啡因(原料药)；2色谱条件1.色谱柱：INERTSIL-ODS-SP-18( 4.6×150mm，5um)；2.流动相：甲醇：水=35:65（V/V）；3.流速：1ml/min；4.检测波长：270nm；5.柱温：25℃。
反相高效液相色谱法测定可乐中咖啡因的含量
图1咖啡因的结构式
图2色谱前处理柱
2结果与讨论
2.1色谱条件的选择优化
本方法的主要目的就是检测可乐中咖啡因的含量,我们采用美国
沃特斯公司的Diomonsil C18(2)5u色谱柱,实验表明该色谱柱对咖啡
因有很好的分离性能。
通过选择比较不同的波长条件,发现咖啡因甲醇溶液在286nm
波长下有很大的吸收且与其他物质的吸收峰很好的分开,所以选择
286nm为测定波长。
通过选择比较不同的淋洗液体系,发现甲醇/水体系能够很好的
分离咖啡因,不会出现峰拖尾,鬼峰以及其他峰不完全分离的情况,经
)作为流动
图3咖啡因色谱图
甲醇/水(4:1,流速1ml.min-1)
2.2方法的精密度、线性关系和检出限
配制浓度为10、20、50、100、150ug/mL的咖啡因甲醇标准溶液,每个浓度在286nm波长下测定6次峰面积响应值,RSD在0.18%~ 1.36%之间,分别测定不同浓度的咖啡因标准溶液的吸光度值,咖啡因浓度在10~150ug/L范围内与峰面积值呈良好线性关系,Y=1.7×104 X-9.99×103,相关系数为0.9998,方法检出限为为0.72ug/mL。
2.3实际样品测定
我们以不同品牌的可乐饮料为实验对象,测定其中含有的咖啡因,含量见表1。
表1实际样品测定结果及回收率中的咖啡因。
样品本法平均测定值/(%)RSD/%加标回收率。
可口可乐含阿斯巴甜吗
可口可乐含阿斯巴甜吗可口可乐含阿斯巴甜吗阿斯巴甜是一种食品添加剂，属于食品添加剂中的“甜味剂”分类，它的优点是甜度极高(约为蔗糖的数百倍)且不含有能量，不引起血糖波动，因此常被用于减肥产品和糖尿病专属食品的生产加工。
阿斯巴甜是被研究得最为彻底的食品成分之一，其安全性在200多项研究中得到了证实，已在100多个国家中获得许可使用，全世界超过6000种食物和饮料都使用这种成分。
阿斯巴甜被禁用了吗阿斯巴甜是最常见的人工甜味剂之一，主要用途是被添加在无糖可乐等饮料中。
随着人们对健康以及控制体重愈发重视，各类无糖饮料也越来越畅销。
知情人士称，IARC将于7月14日公布这项决定。
本月早些时候，IARC的外部专家召开了一次会议，最终确定了这项决定。
需要说明的是，IARC依据患癌几率的高低将致癌因素分为五类：1类：对人类有确认的致癌性2A类：对人类很可能有致癌性2B类：有可能对人类致癌3类：尚不能确定其是否对人体致癌4类：对人体基本无致癌作用根据媒体披露的信息，IARC将把阿斯巴甜列为“2B类”，即有可能对人类致癌。
联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会(JECFA)也在调查阿斯巴甜对人体健康的影响，该机构于6月底召开会议，并且也将于7月14日宣布其调查结果。
自1981年以来，JECFA一直表示，在可接受的每日摄入量范围内，食用阿斯巴甜是安全的。
过往该机构认为，一个体重60公斤的成年人每天喝12到36瓶无糖饮料(具体数字取决于无糖饮料中阿斯巴甜的含量)，才会有损害健康的风险。
这一观点得到了包括美国和欧洲在内的各国监管机构的广泛认同。
世卫回应阿斯巴甜致癌阿斯巴甜是一种人造(化学)甜味剂，自20世纪80年代以来广泛用于各种食品和饮料制品，包括减肥饮料、口香糖、明胶、冰淇淋、酸奶等乳制品、早餐麦片、牙膏和止咳药水和维生素咀嚼片等药物。
“癌症是全球主要死因之一。
每年，每6人中就有1人死于癌症。
正在不断扩大科学探索，评估癌症的可能诱发或促进因素，以期减少患病数和人类死亡，”世卫组织营养和食品安全司司长Francesco Branca博士说。
阿斯巴甜使用标准
阿斯巴甜使用标准阿斯巴甜（Aspartame）是一种低热量和高强度的人工甜味剂，广泛应用于食品和饮料工业。
它是由天冬氨酸甲酰化和苯丙氨酸去羧化反应形成的二肽，味道甜度是蔗糖的200倍。
阿斯巴甜广泛应用于无糖饮料、口香糖、酸奶、糖果、冰淇淋等许多食品产品中，为消费者提供低热量和减少糖摄入的选择。
阿斯巴甜的使用标准被国际食品标准组织和许多国家的食品安全机构制定。
以下是阿斯巴甜使用的相关参考内容：1. 安全性评估：- 国际食品标准组织（CODEX）制定了阿斯巴甜的每日摄入量（ADI）为每千克体重体重儿童ADIs为2.5 mg，成年人ADIs为5 mg。
这个数值是通过临床试验、动物研究以及对人类流行病学数据的分析来确定的。
- 欧洲食品安全局（EFSA）对阿斯巴甜进行了全面安全评估，并确认其在建议的ADI范围内使用是安全的。
- 美国食品药品监督管理局（FDA）也认可阿斯巴甜是安全的，可以用作一种食品添加剂。
2. 用途限制：- 阿斯巴甜主要用于甜味调味剂，但不适用于烹饪过程中的高温烹饪。
- 部分国家和地区对阿斯巴甜使用有一些限制，如巴西、墨西哥和印度尼西亚等国家在婴儿食品中禁止使用阿斯巴甜。
3. 标签表示：- 阿斯巴甜使用的产品在包装上必须明确标示“含有阿斯巴甜（aspartame）”，以便消费者做出知情决策，尤其是对于对阿斯巴甜过敏或敏感的人群。
4. 不适用人群：- 孕妇、哺乳期妇女以及对苯丙酮尿症患者需要避免使用阿斯巴甜。
苯丙酮尿症是一种先天性代谢病，患者体内缺乏代谢苯丙氨酸的酶。
以上是关于阿斯巴甜使用的一些参考内容，阿斯巴甜的安全性已经得到了包括国际食品标准组织在内的多个国家和地区的食品安全机构的确认。
然而，每个人都应了解自己的身体状况和耐受度，并在咨询医生或专业人士的建议后做出明智的饮食选择。
可乐咖啡因测定实验报告
一、实验目的1. 学习高效液相色谱法（HPLC）的基本操作和原理；2. 掌握咖啡因含量测定的标准曲线法；3. 了解可乐饮料中咖啡因含量的测定方法及其意义。
二、实验原理咖啡因是一种具有药理活性的物质，广泛存在于可乐饮料、咖啡和茶叶中。
适量摄入咖啡因具有提神、兴奋神经等作用，但过量或长期摄入咖啡因可能对人体健康产生不利影响。
本实验采用高效液相色谱法测定可乐饮料中咖啡因含量，以期为消费者提供参考。
高效液相色谱法（HPLC）是一种高效、灵敏的分析方法，具有分离度高、检测限低、分析速度快等优点。
本实验采用HPLC法测定可乐饮料中咖啡因含量，通过比较标准曲线与样品峰面积，计算出样品中咖啡因的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：市售可乐饮料、咖啡因标准品、甲醇、乙腈、磷酸二氢钠等；2. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、移液器、离心机等。
四、实验方法1. 标准曲线制备：准确称取一定量的咖啡因标准品，用甲醇溶解并配制成一系列浓度的标准溶液。
将标准溶液进样，以峰面积为纵坐标，浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样品前处理：准确吸取一定量的可乐饮料，加入适量甲醇，超声处理一定时间，待溶液澄清后，离心分离。
取上清液进样。
3. HPLC分析：根据实验要求，选择合适的色谱柱、流动相、流速、检测波长等条件，进行HPLC分析。
4. 数据处理：将样品峰面积与标准曲线进行比对，计算出样品中咖啡因的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：本实验制备的标准曲线线性范围为0.5～30 mg/L，相关系数为0.9999，说明该方法具有良好的线性关系。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算出可乐饮料中咖啡因的含量。
3. 结果分析：本实验测定的可乐饮料中咖啡因含量与市售可乐饮料标签标注的咖啡因含量基本一致，说明该方法能够准确测定可乐饮料中咖啡因含量。
六、实验结论1. 本实验采用高效液相色谱法测定可乐饮料中咖啡因含量，操作简单、快速、准确，具有良好的重复性和重现性；2. 该方法为消费者了解可乐饮料中咖啡因含量提供了一种有效的检测手段。
阿斯巴甜使用标准
阿斯巴甜使用标准阿斯巴甜是一种广泛应用于食品和饮料中的人工甜味剂。
它的甜度是蔗糖的200倍，热值极低，因此被广泛用于减少糖的摄入量和控制体重。
然而，由于其甜味和应用范围的普遍性，阿斯巴甜的使用是需要遵循一定的标准的。
一、阿斯巴甜的安全标准1. 国际食品添加剂法规：阿斯巴甜在国际上被许多国家和地区认可，并被纳入食品添加剂法规中，如欧盟食品添加剂法规（EU REGULATION No 1333/2008）、美国FDA（美国食品药品监督管理局）等。
2. 食品安全标准：各国制定并实施了食品安全标准，如中国的《食品安全国家标准食品添加剂阿斯巴甜》（GB 25548-2010）中规定了阿斯巴甜的使用标准、纯度要求和残留限量等。
二、阿斯巴甜的使用标准1. 最大使用浓度限制：阿斯巴甜的使用在食品和饮料中是有严格限制的。
如中国的食品安全国家标准规定，阿斯巴甜的最大使用浓度限制为0.6g/kg；欧盟食品添加剂法规中规定，阿斯巴甜的最大使用浓度限制为2000mg/kg。
2. 使用范围限制：阿斯巴甜的使用范围也是有限制的。
根据不同国家和地区的法规，阿斯巴甜可以用于多种食品和饮料中，如饮料、乳制品、酸奶、冰淇淋、糖果、口香糖、果酱等。
但同时也有一些食品是禁止使用阿斯巴甜的，如牛奶、婴儿食品等。
3. 标签声明：根据食品安全国家标准的规定，使用阿斯巴甜的食品需要在标签上声明“含有阿斯巴甜”的字样，并注明“不适用于婴幼儿和孕妇”。
三、阿斯巴甜的残留限量1. 特定食品中的残留限量：针对一些特定的食品和饮料，阿斯巴甜的残留限量有着具体的规定，以保证消费者的安全。
例如，中国的食品安全国家标准规定，含有阿斯巴甜的糖果的残留限量为600mg/kg，含有阿斯巴甜的饮料的残留限量为350mg/kg。
2. 总残留限量：在许多国家和地区的法规中，也规定了阿斯巴甜的总残留限量，保证人体摄入的总量不会超过安全范围。
例如，欧盟食品添加剂法规规定阿斯巴甜的总残留限量为无限制的。
饮料中甜味剂检测的研究进展
Jun. 2020 CHINA FOOD SAFETY 173食品科技甜味剂作为一类重要的食品添加剂，主要用于增加或改善食品甜味感、提升品质。
为了满足消费者需求，企业获得更大利益，近年来我国饮料行业愈来愈多得将含甜味剂的香精香料添加至饮料中，导致饮料中甜味剂超标。
《食品添加剂使用卫生标准》GB 2760-2014严格限制了饮料中添加糖精钠、纽甜等合成甜味剂的量，但市场上这类甜味剂屡见不鲜[1]。
为规范饮料生产行业、促进行业发展，建立了多种有效合理的饮料甜味剂检测手段，主要有LC-MS、HPLC、IC、GC 等。
1 饮料中常见的甜味剂1.1 安赛蜜安赛蜜为人工合成甜味剂，白色结晶状粉末，甜度约为蔗糖130倍，具强烈甜味、易溶于水、人体内不代谢且不吸收，具有热、酸稳定性等特点。
对人体尤其对老人、孕妇、小孩肝脏和神经系统有危害。
1.2 糖精钠糖精钠属于食品添加剂，具有甜味口感，对人体无实际营养价值。
过量食用会影响肠胃消化酶的正常分泌，降低小肠吸收能力，国家限制了糖精钠在食品加工中的使用量。
1.3 纽甜纽甜呈白色结晶粉末，也属于功能性甜味剂，且甜味纯正，甜度比蔗糖甜7 000～13 000倍。
在瞬时高温的条件下具有热稳定性，无能量提供。
1.4 三氯蔗糖三氯蔗糖俗称蔗糖素，是唯一以蔗糖为原料的功能性高倍甜味剂，甜度约为蔗糖的600倍，具零能量、高甜度以及酸、热和光稳定性等特点，被认为是目前最理想和安全的甜味剂。
1.5 甜菊糖苷甜菊糖苷为白色结晶粉末，易溶于水和甲醇、乙醇等有机试剂，具有耐热性、耐盐性和稳定性，甜度可达到蔗糖的200～300倍，是我国卫生部、轻工业部批准使用的最接近蔗糖口味的天然低热值甜味剂。
1.6 阿斯巴甜阿斯巴甜属于非碳水化合物类的功能性低聚糖，常温下为白色结晶粉末，熔点为248～250 ℃，其甜味高、热量低，甜味纯正，主要应用于饮料、糕点和配制酒等。
1.7 甜蜜素甜蜜素是食品生产中常用的无营养甜味剂，甜度可达到蔗糖30～40倍，易溶于水，难溶于乙醇，不溶于氯仿和乙醚，酸性条件下分解，碱性条件下较稳定。
食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定1 范围本标准规定了碳酸饮料、乳饮料、浓缩果汁、果冻、胶基糖果、蜜饯和固体饮料中阿斯巴甜、阿力甜的测定方法。
本标准适用于碳酸饮料、乳饮料、浓缩果汁、果冻、胶基糖果、蜜饯和固体饮料中阿斯巴甜、阿力甜的测定。
2 原理根据阿斯巴甜和阿力甜易溶于水、甲醇和乙醇等极性溶剂而不溶于脂溶性溶剂特点，果冻和蜜饯试样用甲醇水在超声波振荡下提取；浓缩果汁、碳酸饮料和固体饮料类试样用水提取；乳饮料类试样用乙醇沉淀蛋白后用乙醇水提取；胶基糖果用正己烷溶解胶基并用水提取。
各提取液在液相色谱C18反相柱上进行分离，在波长200 nm处检测，以色谱峰的保留时间定性，外标法定量。
3 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的实验室一级水。
3.1试剂3.1.1甲醇(CH3OH)：色谱纯。
3.1.2 乙醇(CH3CH2OH)：优级纯。
3.2标准品3.2.1 阿力甜标准品（C14H25N3O4S）：纯度≥99%。
3.2.2 阿斯巴甜标准品（C14H18N2O5）：纯度≥99%。
3.3 标准溶液配制3.3.1 阿斯巴甜和阿力甜的标准储备液（0.5mg/mL）:各称取0.0250g阿斯巴甜和阿力甜置于两个50mL 容量瓶中，加入水溶解并定容至刻度，置于冰箱保存，有效期为90天。
3.3.2阿斯巴甜和阿力甜混合标准工作液系列的制备:将阿斯巴甜和阿力甜标准储备液用水逐级稀释成混合标准系列，阿斯巴甜和阿力甜的浓度均分别为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL的标准使用溶液系列。
置于冰箱保存，有效期为30天。
4 仪器和设备4.1 液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器。
4.2 超声波震荡器。
4.3 天平：感量分别为1mg和0.1 mg。
4.4 离心机：转速≥4000 r/min。
5 分析步骤5.1 试样制备5.1.1 碳酸饮料、浓缩果汁和固体饮料称取约5g碳酸饮料试样（精确到0.001g）于50ml烧杯中，在50℃水浴上除去二氧化碳，然后将试样全部转入25mL容量瓶中，备用；称取约2g浓缩果汁试样（精确到0.001g）于25ml容量瓶中，备用；称取约1g固体饮料试样（精确到0.001g）于25ml容量瓶中，加20ml水后超声波震荡提取20min，备用。
阿斯巴甜检验操作规程
阿斯巴甜检验操作规程1 目的：建立阿斯巴甜检验操作规程。
2 适用范围：适用于阿斯巴甜的检验。
3 职责：检验人员对本规程的实施负责。
4 规程：4.1 编制依据：企业标准。
4.2 质量指标：见《阿斯巴甜质量标准》。
4.3 仪器与用具：电子天平、恒温干燥箱、分光光度计、旋光度测定仪。
4.4 试药与试液：甲酸、冰醋酸、结晶紫试液、高氯酸滴定液（0.1mol/L）、盐酸。
4.5 操作方法：4.5.1 感观要求：白色结晶粉末，无臭，有甜味，不吸湿。
4.5.2 天门冬酰苯丙氨酸甲酯含量（以干基计）：精确称量300mg样品移入150ml的烧杯，溶于1.5ml甲酸完全溶解后再加入60ml的冰醋酸，充分摇匀，滴入2-3滴结晶紫指示液，立即用0.1mol/L的高氯酸滴定液进行滴定，直到由深绿色转至淡绿略带微黄为终点进行空白试验。
每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L）与29.43mg的N-α-2-天冬门氨酰基-L-苯丙氨酸-1-甲酯相当。
注意：用高氯酸滴定液（0.1mol/L）预先标定至绿色。
如超过0.1ml的空白滴定可能是由于过量的水分所致，并可能引起可见滴定终点灵敏度的损失。
4.5.3 干燥失重：精密称取样品2.0g，置于已恒重的称量瓶中，置烘箱中在100±5℃条件下干燥4小时，减失重量≤4.5%。
4.5.4 灼烧残渣：精密称取本品1g，先小火灼烧，后800±10℃以灼烧至恒重，灼烧残渣≤0.2%。
4.5.5 PH值：配制0.8%样品溶液，按《PH值检查操作规程》恒温至20℃，应为4.5-6.0。
4.5.6 比旋度：精密称取2g样品，用15N甲酸溶解（取322ml含量为88%的甲酸用水稀释至500ml）定容至50ml，同时做空白，先将装有空白液的试管放入样品上室，将测量字数清零，然后将恒温至20℃的待测样品注入试管，同方向放入样品室，测量旋光度，按干基计，应为+14.5至+16.5°。
阿斯巴甜使用标准
阿斯巴甜使用标准
1. 阿斯巴甜介绍：
阿斯巴甜是一种广泛应用于食品和饮料中的人工甜味剂。
它的甜度是蔗糖的200倍，
而热量却非常低。
阿斯巴甜通常以粉末或片剂的形式出现，并且在生产和消费中得到了广
泛使用。
2. 适用范围：
阿斯巴甜可以广泛应用于各类食品和饮料的生产中，包括但不限于糖果、饼干、饮料、果汁、冰淇淋、乳制品等。
它能够提供持久而甜美的口感，而不会增加额外的热量。
3. 使用量控制：
在使用阿斯巴甜时，应根据具体产品的生产需求和市场接受度来确定使用量。
通常情
况下，根据阿斯巴甜的甜度，每克阿斯巴甜的使用量相当于蔗糖的一小部分。
但具体使用
量还需根据产品种类和配方来调整。
4. 安全性和质量监控：
阿斯巴甜在食品和饮料中的使用必须符合国家相关法律法规的要求。
厂商应确保所使
用的阿斯巴甜符合食品安全标准，并且在生产过程中进行严格的质量控制。
产品应在包装
上明确标注阿斯巴甜的存在，以警示消费者。
5. 存储和保质期控制：
阿斯巴甜应存放在干燥、阴凉和通风良好的地方，避免阳光直射。
包装上应标明保质期，并严格按照保质期要求进行使用，以确保阿斯巴甜的稳定性和品质。
请注意，以上所述为一般阿斯巴甜使用标准，并非针对具体产品的生产准则。
在具体
的生产过程中，还需要根据国家法律法规和产品性质进行准确的使用量和质量管理。
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分析化学课程设计题目: 可口可乐中阿斯巴甜含量的测定姓名：孙毅专业：应用化学班级：1223002学号：201220300228指导老师：周瑜芬2015年5月目录摘要 (1)关键词 (1)一、引言 (2)1.1测定阿斯巴甜的目的与意义 (2)1.2阿斯巴甜的性质 (2)二、测定方法及原理 (3)2.1阿斯巴甜的测定方法 (3)2.2阿斯巴甜的测定原理 (3)三、具体测定步骤 (3)3.1仪器与药品 (3)3.1.1仪器 (3)3.1.2药品 (3)3.2方法与过程 (4)3.2.1色谱分析条件 (4)3.2.2对照品溶液的制备 (4)3.2.3进样精度 (4)3.2.4标准曲线的绘制 (4)3.2.5样品溶液的配制 (4)3.2.6加标回收率 (4)3.2.7稳定性实验 (4)3.2.8样品含量测定 (5)四、数据分析与处理 (5)4.1图表的绘制 (5)4.1.1阿斯巴甜对照品色谱图 (5)4.1.2精密度实验图 (5)4.1.3标准曲线的绘制 (5)4.1.4加标回收率图 (5)4.1.5稳定性实验图 (5)4.2阿斯巴甜含量计算 (6)五、阿斯巴甜的安全性 (6)5.1摄入量 (6)5.2代谢 (6)5.3癌症 (6)5.4神经及精神症状 (7)5.5头痛 (7)5.6体重变化和饥饿 (7)5.7阿斯巴甜安全性结论 (7)六、阿斯巴甜的应用 (7)七、总结 (8)参考文献 (8)可口可乐中阿斯巴甜含量的测定摘要：2009年可口可乐旗下新品－“零度”(ZERO) 无糖可乐致癌的说法在国内众多博客、网上论坛及民间广为流传。
传闻称“零度”中所含的阿斯巴甜有损神经系统，将引发头痛、记忆力衰退、癫痫、视力消失、昏迷乃至癌肿。
本文将介绍对备受争议的“阿斯巴甜”采用高效液相色谱法将可乐样品经水提取后,在ODS-C18色谱柱上以磷酸二氢钾水溶液和乙腈作为流动相进行色谱分离,用HPLC法在VWD208nm 处检测可口可乐中阿斯巴甜的含量[1]。
同时，对阿斯巴甜的安全性和在食品中的应用作了简单的介绍。
关键词：阿斯巴甜高效液相色谱法测定安全应用一、引言本节将介绍测定可乐中阿斯巴甜含量的目的和意义及阿斯巴甜的性质。
1.1测定阿斯巴甜的目的与意义2009年可口可乐旗下新品－“零度”(ZERO) 无糖可乐致癌的说法在国内众多博客、网上论坛及民间广为流传。
传闻称“零度”中所含的阿斯巴甜有损神经系统，将引发头痛、记忆力衰退、癫痫、视力消失、昏迷乃至癌肿。
2015年4月24日，百事可乐宣布将在美国销售的无糖碳酸饮料中停止使用甜味剂阿斯巴甜，转而用另一甜味剂三氯蔗糖(Splenda)替代。
虽然此前不少专家都表示该人工甜味剂是安全的，但消费者对阿斯巴甜安全性的担忧还是使百事可乐改变配方。
全世界目前已有80多个国家批准阿斯巴甜的使用, 我国规定除罐头食品外可用于各类食品, 其用量按生产需要适量使用。
20 世纪 80 年代以来, 全球阿斯巴甜的年消费增长率超过20% , 远远超过其他人工合成甜味剂平均增长率 5%的速度。
但是目前国际上对阿斯巴甜的安全性存在很大的争议, 众多关于阿斯巴甜的食品安全问题引起了公众对阿斯巴甜这一甜味剂的质疑[2]。
2005 年 7 月, 意大利科学家公布的一份研究结果称, 动物实验证明, 阿斯巴甜可导致大鼠肿瘤。
无论如何, 阿斯巴甜作为一种食品添加剂, 为保护人体健康, 防止其对人体的潜在危害, 其添加量应该受到监控, 因此对各种食品、药品中阿斯巴甜的测定很有必要。
本次对可乐中阿斯巴甜含量的测定将确定可口可乐中阿斯巴甜的含量并讨论其对人体健康的影响。
1.2阿斯巴甜的性质阿斯巴甜由L-苯丙氨酸（或L-甲基苯丙氨酸酯）与L-天冬氨酸以化学或酶催化反应制得。
前者产生有甜味的α-阿斯巴甜和无甜味的β-阿斯巴甜，要将α-阿斯巴甜和β-阿斯巴甜分离，并经纯化，酶促过程只产生α-阿斯巴甜。
阿斯巴甜的分子式为C14H18N2O5，国外商品名称为Nutrasweet、EqualTablets，又称甜味素、蛋白糖、天冬甜母、天冬甜精、天苯糖等。
常温下，为白色结晶性的粉末。
阿斯巴甜为JamesM.Schlatter于1965年发现。
这名化学家在G.D.Searle&Company工作时合成制作抑制溃疡药物时发现的一种二肽甜味剂[3]。
其甜度约为蔗糖的200倍, 甜味酷似蔗糖, 外观呈白色针状结晶或结晶粉末, 具有安全、低热量、甜味纯净、防龋齿、代谢不需胰岛素参与等特点。
但使人感到到甜味所需的阿斯巴甜量非常少，以至于可忽略其所含的热量，因此也被广泛地作为蔗糖的代替品。
阿斯巴甜的味道和一般蔗糖的味道有所不同。
阿斯巴甜的甜味与糖相比较，可延缓及持续较长的时间。
目前阿斯巴甜作为低卡路里甜味料,用于制造5000多个品种, 包括饮料、酸奶、甜片、果冻、各类保健食品等[4]。
阿斯巴甜结构式二、测定方法及原理本节将具体介绍测定可口可乐中阿斯巴甜含量的方法及原理。
2.1阿斯巴甜的测定方法食品中阿斯巴甜的测定方法主要有滴定法、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法和高效毛细管电泳法等。
国内外应用较多的是高效液相色谱法。
但在应用中我们发现, 食品添加剂中阿斯巴甜的高效液相色谱法样品处理烦琐,且色谱峰形差, 分析周期长。
本研究采用纯水超声提取可乐样品, 提取液用水定容, 微孔滤膜过滤后直接进样测定, 改进了流动相体系, 简化了操作步骤, 加快了分析速度, 应用本法测定了可乐样品中的阿斯巴甜。
2.2阿斯巴甜的测定原理色谱法利用混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出，与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
国标GB/ T 2225—2008适用于碳酸饮料、乳饮料、浓缩果汁和固体饮料中阿斯巴甜的检测。
根据阿斯巴甜易溶于水和乙醇等溶剂的特点, 饮料中的阿斯巴甜用蒸馏水在超声波振荡下提取, 提取液用水定容;碳酸饮料类试样除二氧化碳后用水定容;乳饮料类试样中阿斯巴甜用乙醇沉淀蛋白, 上清液用乙醇+ 水(2 +1)定容, 提取液在液相色谱ODS-C18 反相柱上进行分离, 在波长208 nm处检测[5]。
三、具体测定步骤本节将具体介绍测定可口可乐中阿斯巴甜含量的步骤。
3.1仪器与药品3.1.1仪器：赛多利斯电子天平220S（北京赛多利斯仪器系统有限公司），超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司，型号 KQ-100B），高效液相色谱仪(日本日立)，包括HITACHI Pump L-2130 ，HITACHI Autosampler L-2200 ， Organizer ， HITACHI UV-VIS Detector L-2420。
3.1.2药品：阿斯巴甜对照品（常州市牛塘化工厂有限公司 20090512），乙腈为色谱纯（fish），磷酸二氢钾为分析纯。
3.2方法与过程3.2.1色谱分析条件色谱柱：THERMO ODS-2 C18（4.6×250 mm，5µm）；紫外检测的波长：208 nm（国标）；流速：根据测定实际确定；进样量：根据测定实际确定；流动相：0.01 mol∙L-1磷酸二氢钾:乙腈（比例根据测定实际确定）。
柱温：根据测定实际确定。
3.2.2对照品溶液的制备精密称取阿斯巴甜对照品0.0025 g，置于25 mL容量瓶中，先用部分纯净水溶解，超声10 分钟，定容，超声。
得100 µg/mL的对照品溶液。
3.2.3进样精度按照对照品溶液制备方法3.2.2，配制溶液，按照2.1 项下的方法测定。
3.2.4标准曲线的绘制分别精密移取对照品溶液0.50、1.00、1.50、2.00、 2.50 mL，分别置于5 mL 的棕色容量瓶中用纯净水稀释，超声定容。
按照 2.1 项下的方法测定，绘制标准曲线，由面积和浓度进行线性回归，得到回归方程。
3.2.5样品溶液的配制可乐样品1 mL，用纯净水稀释在5 mL 的容量瓶中，超声10 分钟，定容。
过滤，得样品溶液。
3.2.6加标回收率按照2.2 的方法，配制含有20 mg/L 的溶液1 L，分别精密称取7.00，10.00，13.00 mg 对照品，混匀后超声。
按照 2.1 项下的方法测定。
并根据回归方程计算平均回收率。
3.2.7稳定性实验取浓度为20 µg/mL 的对照品溶液，放置于室温阴暗处1、2、4、8、12、24 h，按照2.1 项下的方法测定，确定其稳定性。
3.2.8样品含量测定取可乐样品，按照 2.1 项下的方法测定。
按照回归的方程进行计算阿斯巴甜的含量。
四、数据分析与处理4.1图表的绘制4.1.1阿斯巴甜对照品色谱图根据测定实际绘制4.1.2精密度实验图根据测定实际绘制4.1.3标准曲线的绘制根据测定实际绘制4.1.4加标回收率图根据测定实际绘制4.1.5稳定性实验图根据测定实际绘制4.2阿斯巴甜含量计算将可乐测试所得的峰面积代入标准曲线回归方程计算浓度五、阿斯巴甜的安全性本节将从大众对阿斯巴甜可能对人体产生的几种不利影响对阿斯巴甜的安全性展开分析。
5.1摄入量欧盟食品科学委员会限定阿斯巴甜日容许摄入量为40毫克每千克体重[25]，美国疾病控制与预防中心则限定为50毫克每千克体重[26]。
1罐355毫升无糖可乐约含180毫克，对于一个体重75公斤的成年男性而言需要饮用大约21罐（7.3升）无糖可乐才能达到FDA规定的50毫克每千克体重的摄入上限。
5.2代谢阿斯巴甜在体内迅速代谢为天冬氨酸、苯丙氨酸和甲醇。
即使大量摄入阿斯巴甜（200毫克每千克体重），在血液内也不能检测到阿斯巴甜。
由阿斯巴甜提供的天冬氨酸仅占人体每日所摄入量的1-2%。
虽然天冬氨酸和一些氨基酸（如谷氨酸）联合作用可能对神经细胞造成损伤，但研究表明阿斯巴甜并无神经毒性，而通过阿斯巴甜摄入的天冬氨酸无法达到足够产生毒性的剂量。
甲醇在体内代谢为甲醛，进而氧化为甲酸，以甲酸形态在体内停留时间最长，因此被认为是甲醇毒性的作用机理。
但由阿斯巴甜提供的甲醇不会引起严重健康问题。
首先，阿斯巴甜提供的甲醇少于果汁和柑橘类水果，而啤酒等发酵类饮品中甲醇含量更高。
然后，阿斯巴甜产生的甲醛量远远小于人体正常饮食产生的甲醛量，哪怕以最大剂量摄入阿斯巴甜，在血液中甲醛和甲酸浓度并无明显升高。
5.3癌症审查发现阿斯巴甜和癌症之间没有关联。
这些审查是在众多的动物致癌性研究，人类流行病学研究以及在体外基因毒性研究。
这些研究都没有发现显著的证据表明，阿斯巴甜会导致动物的癌症，损坏的基因组，或在目前使用的剂量下导致人类癌症。