乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
乙醛脱氢酶
核苷酸 02
ALDH-2 mRNA complete CDS LOCUS
AY621070 2018 bp mRNA linear PRI 14-APR-2005
ALDH-2 mRNA transcript variant 1
NM_000690 2076 bp mRNA linear PRI 15-MAR-2015 Homo sapiens aldehyde dehydrogenase 2 family (mitochondrial) (ALDH2), transcript variant 1, mRNA.
DEFINITION Homo sapiens mitochondrial
aldehyde dehydrogenase 2 (ALDH2) mRNA, complete cds; nuclear gene for mitochondrial product.
核苷酸 02
ALDH-2 mRNA complete cds blast ALDH-2 mRNA transcript variant 1
核苷酸 02
ALDH-2 mRNA complete cds blast ALDH-2 mRNA transcript variant 2
03
氨基酸
NCBI直接查询ALDH2蛋白质结果
蛋白质的理化性质分析
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
04
空间结构
Human Mitochondrial Aldehyde Dehydrogenase Asian Variant, Aldh2*2,
乙醛脱氢酶生物信息分析
目录
简介
01
核苷酸
02
03 04
空间结构 氨基酸
乙醛脱氢酶1在结直肠癌中的表达及临床意义
乙醛脱氢酶1在结直肠癌中的表达及临床意义许森林;段江洁;张宇;余时沧;卞修武【摘要】目的检测乙醛脱氢酶1(ALDH1)在结直肠癌中的表达,探讨其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法收集西南医院2006-2010年送检的结直肠癌组织及正常结直肠组织标本各75例,取结直肠癌与正常结直肠组织标本各70份,采用免疫组织化学法检测其ALDH1的表达,采用Real time RT-PCR、Western blotting检测其余各5例结直肠癌及正常结直肠组织中ALDH1的表达情况.结果免疫组织化学染色表明,ALDH1主要表达于结直肠癌肿瘤细胞和正常结直肠黏膜上皮细胞的胞质内,且在正常结直肠组织的阳性表达率(83%)显著高于结直肠癌组织(37%,P=0.000).ALDH1 mRNA在正常结直肠组织的表达水平是结直肠癌组织的1.4~17倍.Westem blotting检测结果显示,ALDH1在正常结直肠组织中的表达是结直肠癌组织的1.02~3.99倍.统计分析显示,ALDH1的表达与结直肠癌患者的年龄、性别以及肿瘤部位、浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期等无相关性(P>0.05).结论 ALDH1在正常结直肠组织中的表达显著高于结直肠癌组织,其表达与结直肠癌患者的临床病理特征之间无显著相关性.%Objective To observe the expression of aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1) in colorectal carcinoma and explore its clinicopathological significance. Methods Samples were collected from 75 patients admitted to Southwest Hospital from Jan. 2006 to Sep.2010. Each sample consisted of both colorectal carcinoma and normal colorectal tissue of the same individual. Immunohistochemistry SP was used to detect the expression of ALDH1 in 70 samples, and real time RT-PCR and Western- blotting were used to detect the expression of ALDH1 in the remaining 5 samples. Results Usingimmunohistochemistry SP, the ALDH1 was found to be expressed in cytoplasm of colorectal carcinomas and normal colorectal mucosal epithelium. The expression of ALDH1 was detected in a significantly greater proportion of normal colorectal tissue (83%) than that of colorectal carcinoma (37%) . ALDH1 mRNA levels in normal colorectal tissue was 1.4 to 17-fold higher than that in colorectal carcinoma tissue. Similarly, the expression level of ALDH1 protein in normal colorectal tissue was 1.02 to 3.99-fold higher compared with that in colorectal carcinoma tissue. However, by statistical analysis, the expression levels of ALDH1 in colorectal carcinoma was not correlated with the clinical pathological characteristics, such as age, gender, location,infiltration, pathological stage, metastasis, and Dukes'stages ( P>0.05). Conclusions The expression of ALDH1 is stronger in normal colorectal tissue than in colorectal carcinoma. However, the expression of ALDH1 in colorectal carcinoma is not correlated with the characteristics of clinical pathology.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2011(036)006【总页数】3页(P622-624)【关键词】乙醛脱氢酶1;结直肠肿瘤;基因表达【作者】许森林;段江洁;张宇;余时沧;卞修武【作者单位】400038,重庆,第三军医大学西南医院病理学研究所;400038,重庆,第三军医大学西南医院病理学研究所;400038,重庆,第三军医大学西南医院病理学研究所;400038,重庆,第三军医大学西南医院病理学研究所;400038,重庆,第三军医大学西南医院病理学研究所【正文语种】中文【中图分类】R735.34结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤,其发病率居全部恶性肿瘤的第4位。
乙醛脱氢酶的作用原理-概述说明以及解释
乙醛脱氢酶的作用原理-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述乙醛脱氢酶是一种重要的酶类,它在生物体内起着至关重要的作用。
酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,乙醛脱氢酶就是其中一种。
乙醛脱氢酶主要参与乙醛代谢途径中的一个关键步骤,具体来说就是催化乙醛转化为乙酸的反应。
乙醛脱氢酶在多个生物过程中都发挥着重要的作用,比如在能量代谢、脂肪酸合成以及酒精代谢等方面。
乙醛脱氢酶的作用机制主要是通过催化乙醛与辅因子NAD+之间的氧化还原反应来完成的。
乙醛在乙醛脱氢酶的作用下经过氧化反应转化为乙酸,同时NAD+还原为NADH。
这个反应对于维持细胞内氧化还原平衡以及能量代谢都至关重要。
乙醛脱氢酶的结构与功能也是值得关注的一个方面。
乙醛脱氢酶通常由多个亚基组成,每个亚基都承担着特定的功能。
例如,酶的催化中心位于活性中心上,它能够提供适宜的环境来帮助反应的进行。
除此之外,在乙醛脱氢酶的结构中还存在着多个辅助因子,它们能够促进酶的催化效率以及稳定性。
总之,乙醛脱氢酶在细胞内起着至关重要的作用。
它通过催化乙醛与NAD+之间的氧化还原反应来完成乙醛代谢的关键步骤,对细胞内的能量代谢、脂肪酸合成以及酒精代谢等过程有着重要的影响。
对于深入理解乙醛脱氢酶的作用原理,有助于揭示许多生物学过程的机制,并为相关领域的研究提供指导和启示。
1.2 文章结构文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的组织和内容进行简要介绍,让读者了解文章的整体安排和主要观点。
以下是关于文章结构的内容:文章结构:本篇文章主要分为引言、正文和结论三个部分。
1. 引言部分将从概述、文章结构和目的三个方面对乙醛脱氢酶的作用原理进行介绍。
概述部分将对乙醛脱氢酶进行简要概括,引起读者的兴趣和好奇心。
文章结构部分将清晰地列出文章的目录和组织结构,以便读者能够对文章的安排有一个整体的了解。
目的部分则说明该篇文章旨在研究和阐述乙醛脱氢酶的作用原理。
2. 正文部分将分为两个小节。
第一小节将介绍乙醛脱氢酶的定义和背景,包括其起源、研究历史、命名原因等内容,为读者提供必要的背景知识。
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法《乙醛脱氢酶测定方法》乙醛脱氢酶是一种重要的酶类,在生物化学研究和临床分析中具有广泛的应用价值。
乙醛脱氢酶的活性测定方法对于研究其功能和机制具有重要意义。
本文将介绍一种常用的乙醛脱氢酶测定方法。
该方法是基于酶促反应的原理,通过观察乙醛脱氢酶催化乙醛氧化生成的产物的酶活性来确定其活性。
操作步骤如下:步骤1:制备试样。
将待测的乙醛脱氢酶样品与适量的缓冲液混合,使最终稀释至一定浓度。
为了保证反应的准确性和可靠性,可以设置空白对照组。
步骤2:加入底物。
将乙醛底物加入试管中,底物的浓度应该控制在一定范围内,以保证反应的线性变化。
同时,添加辅助试剂,以提高酶催化反应的效率。
步骤3:反应进行。
将试管置于适宜的温度下,通常为37℃,并在一定的时间内进行反应。
反应时间的选择应根据具体实验要求进行调整。
步骤4:反应停止。
根据实验需求,在反应一定时间后,使用适当的方法停止反应。
常用的方法有加入酸性或碱性溶液,或通过变温停止反应。
步骤5:测定产物。
通过添加适当的试剂,使产生的酶催化产物发生颜色变化或发光,然后使用分光光度计或荧光测定仪等分析仪器进行测定。
通过比较样品和对照组的吸光度或荧光值,可以得到活性测定结果。
需要注意的是,乙醛脱氢酶活性的测定方法还可以依据具体实验要求进行修饰和改进。
例如,可以根据需求调整底物的浓度范围,或者加入辅助试剂来提高酶催化反应的效率。
综上所述,《乙醛脱氢酶测定方法》是一种常用的乙醛脱氢酶活性测定方法。
通过观察酶催化反应产生的颜色变化或发光,可以得到准确可靠的活性测定结果。
这种方法的优点是操作简便,结果可靠,适用于大量样品的测定。
同时,在研究乙醛脱氢酶功能和机制、临床诊断和药物筛选等领域有着广泛的应用前景。
乙醛脱氢酶 原理
乙醛脱氢酶原理乙醛脱氢酶:身体中的“解酒神器”与生活中的奇妙邂逅嗨,各位!今天咱们来聊聊一个生活中不起眼却无比重要的小家伙——乙醛脱氢酶(ALDH)。
这家伙,可是我们体内的一位神秘“解酒大侠”,在你我畅饮欢歌、把酒言欢之后,它便悄无声息地登场,以一身绝技化解酒精带来的种种困扰。
想象一下,当你杯觥交错,美酒下肚时,酒精就开始在你的血液里兴风作浪。
而这时,我们的乙醛脱氢酶,这位身怀绝技的“体内英雄”,就开始它的神奇表演。
首先,酒精在乙醇脱氢酶的作用下转化为毒性更强的乙醛,就像一场剧变在体内酝酿。
此时,乙醛脱氢酶宛如一位救世主,将乙醛迅速转化成无害的乙酸,进而代谢为二氧化碳和水排出体外。
这整个过程,就如同一场惊心动魄却又悄然无声的生命舞蹈,让人不禁惊叹:“哇塞,这乙醛脱氢酶真是个低调又给力的‘清道夫’啊!”不过,每个人的乙醛脱氢酶活性不尽相同,这就引出了为什么有些人喝酒易脸红、头疼,而有些人则“千杯不醉”的奥秘所在。
那些乙醛脱氢酶活性较低的朋友,乙醛在体内积累,就会出现面红耳赤、心跳加速等反应,也就是坊间常说的“上脸”。
反之,活性高的朋友,则能更高效地处理乙醛,自然也就显得酒量好些。
所以说,“酒逢知己千杯少,酶高才子半壶多”,乙醛脱氢酶的活性高低,无疑在很大程度上影响了我们在酒桌上的表现。
再者,乙醛脱氢酶的作用远不止于此。
在医学研究领域,它更是被科学家们视为一颗璀璨明珠。
从抗癌治疗到生物工程,乙醛脱氢酶都展现出了其独特的价值和广阔的应用前景。
例如,在癌症研究中,乙醛脱氢酶能够帮助识别并清除化疗药物产生的有害副产物,从而降低副作用,提高治疗效果。
这样的发现令人拍案叫绝,也让人们对乙醛脱氢酶刮目相看:“嘿,没想到你这个小分子还有这般大作为呢!”总的来说,乙醛脱氢酶虽然身处微观世界,但其作用却关乎着我们生活的方方面面,无论是日常生活中的饮酒文化,还是医学领域的前沿探索,都离不开这位“体内英雄”的默默付出。
让我们对乙醛脱氢酶报以敬意,感谢它在维护身体健康、促进科研进步等方面做出的卓越贡献。
苏州科铭试剂盒总清单-5.3
咨询 800 420 2300 1200 1000 520 1100 580 1550 800 1200 620
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒
抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒
抗坏血酸过氧化物酶(APX)测试盒
抗坏血酸过氧化物酶(APX)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
微量法
紫外分光光度法
微量法
100管/48样 50管/24样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样
100管/96样
50管/48样
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
醇脱氢酶(ADH)测试盒
醇脱氢酶(ADH)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒 乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒
烟酸含量测试盒
微量法 可见分光光度法 高效液相色谱法
微量法 可见分光光度法
脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)测试盒
脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)测试盒
人乙醛脱氢酶(ALDH)说明书
人乙醛脱氢酶(ALDH)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中乙醛脱氢酶(ALDH)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙醛脱氢酶(ALDH)水平。
用纯化的人乙醛脱氢酶(ALDH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入乙醛脱氢酶(ALDH),再与HRP标记的乙醛脱氢酶(ALDH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的乙醛脱氢酶(ALDH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人乙醛脱氢酶(ALDH)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:90ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)
乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)简介:乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)的系统名为乙醇:辅酶I氧化还原酶(alcohol:NAD+oxidoreductase),大量存在于人和动物肝脏、植物及微生物细胞之中,是一种含锌金属酶,具有广泛的底物特异性。
乙醇脱氢酶够以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶,催化伯醇和醛之间的可逆反应:CH3CH2OH+NAD+→CH3CHO+NADH+ H+。
在人和哺乳动物体内,乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶(ALDH)构成了乙醇脱氢酶系,参乙醇脱氢酶与体内乙醇代谢,是人和动物体内重要的代谢酶。
作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶,它在很多生理过程中起着重要作用。
丙酮酸脱羧酶(PDC)、乙醇脱氢酶(ADH)是乙醇发酵途径的关键酶,无氧呼吸途径代谢产物的过程积累对细胞产生毒性,影响线粒体结构和三羧酸循环的相关酶活性。
Leagene乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)检测原理是在弱碱条件下,以乙醛为底物,乙醛在ADH催化下被NADH还原为乙醇,ADH每催化1分子乙醛消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出乙醇脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中乙醇脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、比色杯5、分光光度计编号名称TE047350TStorage试剂(A):ADH Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml-20℃试剂(C):ADH Assay buffer100ml RT试剂(D):NADH1支-20℃使用说明书1份操作步骤(仅供参考):1、配制ADH Lysis buffer工作液:取出ADH Lysis buffer和PMSF,恢复至室温,ADHLysis buffer:PMSF按一定的的比例混合,混匀,即配即用,不易久置,否则蛋白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
紫外分光光度法测定单宁含量检测试剂盒说明书
单宁含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号:BC1390规格:50T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体75mL×2瓶2-8℃保存试剂一粉剂×1瓶常温保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、标准品:10mg 单宁酸。
临用前加入1.175mL 提取液溶解为5000nmol/mL 的标准液,2-8℃保存两周。
产品说明:单宁又称植物多酚,是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。
单宁可作为潜在的生物标记物;与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。
其收敛性是多种生理活性的基础,如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性,也是影响产品口感的因素之一。
根据光谱特性,单宁在275nm 下有较强的紫外吸收,通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。
技术指标:最低检出限:0.385nmol/mL 线性范围:0.39-18nmol/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)将样本烘干至恒重,粉碎,过30-50目筛之后,称取约0.1g ,加入2mL 提取液(封口膜封口防止液体溅出),于70℃水浴,准确提取30min ,期间可摇晃数次。
12000rpm,25℃,离心10min ,取上清,用提取液定容至2mL ,待测。
二、测定步骤1.紫外分光光度计预热30min ,波长调至275nm ,提取液调零。
Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************2.标准液的稀释:将标准液用提取液稀释为25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL标准溶液。
人乙醛脱氢酶2 (ALDH2)多态性分析
对已知基因 DNA 片段再进行PCR特异扩增;
特异的引物配对可以扩增出某一特异基因型的片 段,根据扩增出来的DNA条带大小的差异,可以 分析基因型(纯合型、杂合型)
ALDH2引物
AL1 5’-TAG GAC ACT CAC AGT TTT CACAT C-3’ (78bp) AL2 5’-CTC TCA CAG TTT TCA CTT T-3’ (73bp) AL3 5’-AAG ATG TCG GGG AGT GG-3’
• 凝胶结构均匀,孔径较大, 可用来分离酶的复合物、核 酸、病毒等大分子物质。
• 透明度较好,可直接或干燥 成薄膜后进行染色。
• 不吸收紫外光,可直接利用 紫外光吸收法作定量测定
• 有热可逆性
缺点
• 机械强度差,易破碎,浓度 不能太低。
• 易被细菌污染,不易保存, 临用前配制。
• 琼脂糖支持层上的区带易于 扩散,电泳后必须立即固定 染色。
➢ 引物浓度0.1-0.5 mol/L,浓度过高易导致模 板与引物错配,反应特异性下降
➢ Taq DNA聚合酶0.5-2.5 U/50 l,酶量增加使 反应特异性下降;酶量过少影响反应产量
➢ 四种dNTP浓度应相等 ➢ Mg2+ 是DNA聚合酶的激活剂,0.5 ~2.5mmol/L
基于PCR的扩增产物长度多态性 (PCR-APLP)
综合实验二
人乙醛脱氢酶2 (ALDH2)多态性分析
---PCR-APLP以及PCR 产物电泳鉴定及结果分析
综合实验
(一) 基因组抽提
(二) PCR-APLP
(三)
PCR产物电泳鉴 定及结果分析
乙醛脱氢酶检测
乙醛脱氢酶检测
乙醛脱氢酶(Acetaldehyde dehydrogenase),是醛脱氢酶的一种,负责催化乙醛氧化为乙酸的反应,肝中的乙醇脱氢酶负责将乙醇(酒的成分)氧化为乙醛,生成的乙醛作为底物进一步在乙醛脱氢酶催化下转变为无害的乙酸(即醋的成分)。
已知人类的乙醛脱氢酶由三个基因所编码:ALDH1A1、ALDH2及最近发现的ALDH1B1(亦称ALDH5)。
迪信泰检测平台采用生化的方法检测辅酶类物质,使用相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测乙醛脱氢酶。
此外,我们还提供其他辅酶类的检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定乙醛脱氢酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关参数(中英文)
3. 图片
4. 原始数据
5. 乙醛脱氢酶活性信息。
ALDH2基因分型测试说明书
ALDH2 Morgan™ SSP分型检测试剂盒由美国TBG有限公司(TBG, Inc)生产。
ALDH2基因位于人类第12号染色体,由于ALDH2 基因存在G1510A 多态性,导致氨基酸序列第487位上的谷氨酸被赖氨酸所替换( Glu487 Lys),其中具有催化活性的野生型称为G等位基因(ALDH2*1) ,催化能力失活的变异型称为A 等位基因(ALDH2*2) 。
在亚洲的黄种人群中, ALDH2*2是频率最高且最重要的突变型.本产品每块板48个ALDH2分型测试,此试剂盒具有可靠、简便、快速、重复性高等显着特点。
实验背景ALDH2与酒精性疾病乙醛脱氢酶( aldehyde dehydrogenase, ALDH)和乙醇脱氢酶( alcohol dehydrogenase, ADH) 在人体内共同组成了人乙醇脱氢酶系, 负责催化人体的乙醇分解代谢。
ALDH2在肝和胃中具有很高的表达量, 是乙醇代谢途径中最重要的酶之一。
研究发现, 突变型基因ALDH2*2的存在能导致ALDH2活力的严重缺失, 并与过度饮酒导致的酒精依赖、酒精性中毒、酒精性肝病、消化道癌症等疾病之间存在深刻的联系。
过度的饮酒行为, 不仅使ALDH2*2 携带者对酒精产生依赖, 还可能引起肝癌等的酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)。
ALD是长期、大量饮酒所引起的肝脏病变, 已成为现代社会的主要健康隐忧之一。
研究显示,携带ALDH2 变异基因型者大量饮酒将显著增加患肝癌的危险性,同时研究发现, ALDH2*2突变与饮酒人群患消化道癌的风险之间具有明显的联系。
此外,ALDH2*2显性突变与胃癌的易感性也存在一定的联系。
由此可见, ALDH2*2突变是增加区域性癌化几率的重要因素之一。
ALDH2与硝酸甘油治疗硝酸甘油是治疗心绞痛的经典药物,研究发现硝酸甘油的舒血管作用是通过释放一氧化氮(NO)所介导。
乙醛脱氢酶——精选推荐
乙醛脱氢酶乙醛脱氢酶(缩写ALDH)(EC 1.2.1.10)(CAS [9028-91-5]),醛脱氢酶的一种,负责催化乙醛氧化为乙酸的反应,肝中的乙醇脱氢酶负责将乙醇(酒的成分)氧化为乙醛,生成的乙醛作为底物进一步在乙醛脱氢酶催化下转变为无害的乙酸(即醋的成分)。
简介乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase,缩写ALDH)(EC1.2.1.10)(CAS [9028-91-5]),醛脱氢酶的一种,负责催化乙醛氧化为乙酸的反应。
CH3CHO + NAD +CoA→乙酰CoA+NADH+ H已知人类的乙醛脱氢酶由三个基因所编码:ALDH1A1、ALDH2及最近发现的ALDH1B1(亦称ALDH5)。
结构半胱氨酸-302为亲核剂,是酶活性中心所在。
胞质溶胶与线粒体两种同工酶中的Cys残基均可与标记的碘乙酰胺起反应,烷化后的酶活性受到影响。
并且附近序列Gln-Gly-Gln-Cys 在人类与马的乙醛脱氢酶中都是保守的,说明Cys-302对催化活性有重要作用。
对肝乙醛脱氢酶的定点突变显示谷氨酸-268也是催化活性所需残基。
有突变的酶的活性无法通过另加入一般碱类而恢复,表明此残基可能用于反应初活化半胱氨酸-302,而非仅参与脱酰或氢负转移步骤。
细菌中的酰化乙醛脱氢酶,与依赖金属的4-羟基-2-酮戊酸醛缩酶形成双功能的二聚体。
此复合体负责细菌中有毒芳香化合物的代谢。
两单元的结合在活性中心间产生一个疏水的通道,中间体在一边完成反应便被运送至另一端,提高了催化效率并避免了副反应的发生。
性质一种含锌酶类。
其分子由两个亚基组成,其中一个位于酶的活性中心,另一个起稳定四级结构的作用。
在辅酶I存在的条件下,它催化包括乙醇在内的某些一级或二级醇、醛和酮的脱氢反应,催化正丁醛、肉桂醛、苯甲醛脱氢反应速度比乙醛大。
脱下的氢由NAD接受,使之成为还原型辅酶I。
血清中乙醇脱氢酶活力是急性肝炎实质细胞损伤有诊断价值的指标。
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法
需要注意的是,具体的实验步骤和条件可能因实验目的、样品类型和实验室设备而有所不 同。在进行乙醛脱氢酶测定前,应参考相关的步骤: 1. 准备一组试管,每个试管中加入以下试剂(体积可根据需要调整): - 0.1 M 磷酸盐缓冲液 1 mL - 0.1 M 乙醛溶液 0.1 mL - 待测样品 0.1 mL(如果有) 2. 在每个试管中加入适量的乙醛脱氢酶溶液,使最终体积为2 mL。 3. 在每个试管中加入适量的NAD+溶液,使最终体积为3 mL。 4. 将试管放入37°C的恒温水浴中,孵育一定时间(通常为10-30分钟)。
乙醛脱氢酶测定方法
5. 孵育结束后,使用分光光度计测量每个试管中的吸光度。乙醛脱氢酶催化乙醛氧化生 成乙酸,同时还伴随着NAD+还原为NADH。通过测量NADH的吸光度变化,可以间接测定 乙醛脱氢酶的活性。
6. 使用一个空白试管作为对照,其中不加入乙醛溶液,其他步骤相同。
3. 数据分析: - 计算每个试管的吸光度差值(样品试管减去空白试管)。 - 根据已知的标准曲线或对照样品,将吸光度差值转换为乙醛脱氢酶的活性。
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)是一种酶,主要参与乙醛的代谢过程 。以下是一种常用的乙醛脱氢酶测定方法:
1. 材料准备: - 0.1 M 磷酸盐缓冲液(pH 7.4) - 0.1 M 乙醛溶液 - 0.1 M NAD+(辅酶)溶液 - 待测样品
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶2基因检测
可能引发的身体毛病
检测品外观
基因分型
• 乙醛脱氢酶2基因有三种基因分型: Glu504Glu、Glu504Lys、Lys504Lys。这 三种基因分型在人群中分布的概率不同, 所编码的乙醛脱氢酶、硝酸酯酶活性率也 不同。通过基因型的筛查,可以指导临床 用药和针对性调整生活方式。
典型病案
• 1.病例介绍 受检者,男性,53岁,管理人 员,因工作关系每日饮酒500ml左右,约30 年。既往体健。近3年体检发现肝脏多种酶 不同程度异常。 2014年5月行乙醛脱氢酶2 基因检测。结果:基因类型Glu 504 Lys。
• 此外,ALDH2*2显性突变与胃癌的易感性也存在 一定的联系。由此可见, ALDH2*2突变是增加区
• 二、参与心肌缺血后醛类代谢 有心血管疾 病的患者,由于各种原因导致心脏上冠状 动脉阻断,会引起相应的心肌损伤,损伤 过程中产生的毒性醛可直接导致心肌细胞 死亡。心肌细胞线粒内存在的(ALDH2)可以 清除这些毒性醛类有害物质,促进细胞存 活。
ALDH2*2的分布
适应症及注意事项
• [适应证] • 所有健康体检人群。[禁忌证] • 无绝对禁忌证。 • [检查前注意事项] • 检查前一晚22:00后禁食水。[检查中配合] • 1.检查当日晨静脉抽血(血常规,量约
1.7ml)2.环境准备,检查室温度保持在22 ~ 26°C。 • [检查后注意事项] • 三个手指平压针眼5min。
问题
• 1、乙醛脱氢酶2基因最重要的作用是 __________。
• 参与醛类和硝酸甘油的代谢 • 2、乙醛脱氢酶2基因血检测有什么作用? • 通过基因型的筛查,可以指导临床用药和
针对性调整生活方式。 • 3、乙醛脱氢酶2基因血检测前有哪些注意
谷氨酸脱氢酶(GDH)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4442
4谷氨酸脱氢酶(GDH )活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4442规格:50T/48S紫外分光光度法产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体60mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存溶液的配制:工作液的配制:临用前将试剂一加入试剂二中混合溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min 。
产品说明:GDH (EC 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和谷氨酸合成酶(GOGAT )共同参与谷氨酸的合成,在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
GDH 催化NH +、α-酮戊二酸和NADH ,生成谷氨酸和NAD +,引起340nm 吸光度下降。
通过测定340nm 吸光度的下降速率,计算GDH 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次);8000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2、称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤1.紫外分光光度计预热30min 以上,调节波长至340nm ,蒸馏水调零。
2.样本测定:取1mL 工作液和0.05mL 样本于光径为1cm 的1mL 石英比色皿中,混匀,加样本的同时开始计时,在340nm 波长下记录20秒时的初始吸光度A1和5分20秒时的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2。
酒精代谢实验报告
一、实验目的1. 了解人体酒精代谢的基本过程。
2. 掌握酒精代谢过程中相关酶的作用。
3. 探讨不同因素对酒精代谢的影响。
二、实验原理人体内酒精代谢主要通过肝脏进行,主要由两种酶催化:酒精脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)。
酒精在ADH的催化下,首先被氧化成乙醛,然后乙醛在ALDH 的催化下进一步被氧化成乙酸,最终乙酸被转化为二氧化碳和水,从而完成酒精的代谢。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 酒精(体积分数为50%)- 乙醛(体积分数为10%)- 酒精脱氢酶(ADH)- 乙醛脱氢酶(ALDH)- pH试纸- 氧化酶- 水浴锅- 移液器- 试管- 离心机2. 实验仪器:- pH计- 光度计- 热水浴- 冰箱四、实验步骤1. 将50%的酒精溶液稀释至一定浓度,作为实验用酒精。
2. 将乙醛溶液稀释至一定浓度,作为实验用乙醛。
3. 分别设置两组实验,一组为对照组,另一组为实验组。
4. 对照组:向试管中加入一定量的稀释酒精溶液,用pH试纸检测其pH值。
5. 实验组:向试管中加入一定量的稀释酒精溶液,再加入适量的ADH和ALDH,用pH试纸检测其pH值。
6. 观察并记录两组实验的pH值变化。
7. 将实验组试管中的溶液离心,取上清液,用氧化酶检测其中的乙醛含量。
8. 将实验组试管中的溶液再次离心,取上清液,用光度计检测其中的酒精含量。
9. 比较对照组和实验组的pH值变化、乙醛含量和酒精含量。
五、实验结果与分析1. 对照组实验结果显示,酒精溶液的pH值随着时间逐渐降低,说明酒精在人体内代谢过程中,会产生酸性物质。
2. 实验组实验结果显示,酒精溶液的pH值在加入ADH和ALDH后,降低速度明显减慢,说明ADH和ALDH对酒精代谢过程有催化作用。
3. 氧化酶检测结果显示,实验组上清液中的乙醛含量明显低于对照组,说明ADH 和ALDH在酒精代谢过程中,将乙醛转化为乙酸,减少了乙醛的积累。
4. 光度计检测结果显示,实验组上清液中的酒精含量明显低于对照组,说明ADH 和ALDH在酒精代谢过程中,将酒精转化为乙醛,减少了酒精的积累。
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乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0750
规格:50T/48S
产品内容:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂80mg×1瓶,-20℃避光保存。
临用前加入6mL蒸馏水溶解,-20℃分装保存;或者按比例现用现配。
试剂三:液体1mL×1支,4℃避光保存。
试剂四:液体2mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:液体3mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:
乙醛脱氢酶(EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种,广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。
在辅酶I 的存在下,它催化乙醇在内的某些一级或二级醇、醛或酮的脱氢反应。
在人类和许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注;同时,乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH,利用NADH在340nm处吸光值的变化即可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
试验中所需的仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后,10000g,4℃,离心20min。
细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。
液体:直接检测。
二、测定步骤:
1、紫外分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、将试剂一37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)预热15min。
3、操作表:
试剂名称空白管测定管
样本(µL)200
蒸馏水(µL)500300
试剂一(µL)300300
试剂二(µL)100100
试剂三(µL)2020
试剂四(µL)3030
试剂五(µL)5050在1mL石英比色皿中分别加入上述试剂,充分混匀后于340nm处测定30s时的吸光值A1,迅速置于37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)水浴1min,拿出迅速擦干测定90s时的吸光值A2,计算△A测定管=A2测定-A1测定,△A空白管=A2空白-A1空白,△A=△A测定管-△A空白管。
空白管只需做一次。
三、ALDH酶活计算
(1)按蛋白浓度计算
酶活定义:每毫克蛋白每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活(U/mg prot)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷(V样×Crp)÷T=804×△A÷Cpr
(2)按样本质量计算
酶活定义:每克样品每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活(U/g鲜重)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T
=804×△A÷W
(3)按照细胞数量计算
酶活定义:每104个细胞每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活(U/104cell)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量(万个))÷T
=804×△A÷细胞数量(万个)
(4)按液体体积计算
酶活定义:每mL样本每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活(nmol/min/mL)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷V样÷T=804×△A
ε:NADH微摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;
V反总:反应体系总体积,0.001L;V样:反应体系中样本体积,0.2mL;
Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL,需自行测定;W:样本质量,g,
T:反应时间:1min
注意事项:
1、空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,其OD值不超过0.3,变化不超过0.01。
2、△A大于1时,建议将样品稀释后再进行测定。
当△A小于0.01时,可以延长反应时间(5min或10min)
来测定。
3、试剂五沸点低,在使用时保持低温以保证正确的吸取量。