高效液相色谱法同时测定食品中安赛蜜、糖精、苯甲酸、山梨酸和咖啡因

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超高效液相色谱法检测饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量

收稿日期：０２— ３—１２１００
１材料与方法
１１仪器与试剂．
ＷａｒＡＱｎＹＵＬ（ｔｓＣＵ＇ＰＣ配有二极管阵列检测器、ｅ自动进
样器、谱工作站，ｃｕＰＣ＠ＢＨＣ。谱柱：色ＡＱＩＹＵＬｒＥ色
安全与质量检测教学。Ｅ—ｍｉｈｈ７＠１３ｅｍ。ａｌｃｍ９６．ｏ：ｃ
０４ｍ．５滤茶饮料、汽水试样取５—１０ｇ样品，用水
（上接第２１页）８
［３李景红，２］孟祥晨．高效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋
中图分类号：Ｓ７．Ｔ２２７文献标志码：Ａ文章编号：０２—１０（０２００８０１０３２２１）５— ２２— ２
近年来，由于消费者对食品的安全性日益关注，品中各食
种添加剂，特别是人工合成添加剂的使用情况越来越受到人们的重视。苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠等添加剂广泛应用于饮料、酱腌菜、蜜饯等食品中，些添加剂的长期过量食这用对人体有一定危害，我国《品添加剂使用卫生标准》在食
程春梅董刘敏，，师邱毅，宋慧波，曹小敏，张境
（．１浙江医药高等专科学校，浙江宁波３５０；．１１０２江苏省淮安市产品质量监督检验所，江苏淮安２３０）２０１
摘要：立了利用超高效液相色谱同时测定饮料中安赛蜜、建糖精钠、甲酸、苯山梨酸含量的方法。采用ＡＱＩＹＣＵＴＵＬ＠ＢＨＣ８谱柱（０ｍｘ２１ｍ１７ｍ）以００ｏＬ的乙酸铵一甲醇（５：）流动相，速ＰＣＥ１色１０ｍ．ｍ，．，．２ｍｌ／９５为流０３ｍ／ｉ，．Ｌｍｎ柱温２５℃ ，二极管阵列检测器在波长２０ｎｌ３ｌ进行检测。整个分离过程在２４ｍｎ内完成，Ｔ．ｉ安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸的回收率为９．％～１４２。该方法快速准确，４４０．％适用于果汁、含乳饮料、茶饮料、汽水等常规检测。关键词：超高效液相色谱法；饮料；安赛蜜；糖精钠；苯甲酸；山梨酸

高效液相色谱法同时测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜的方法研究

１）ｓｏｉｈｓ（．Ｌｍｎａｄｔｅｅｔｒａｅｗｓｔ３ｎＴｅｅｏｅｒｅｚｉａｉ，ｏｉａｉ，ｏ５ａｂｌｐａｅ１２ｍ／ｉ）ｎｅｄｔｃｖａ０ｍ．ｈｃｖｒｆｎｏｄｓｒｃｃｄｓｌｍｅｈｏｗａ２ｒｙｏｂｃｃｂ —
摘
１０３）０１１
要：采用色谱柱ＳｉａｚＰ— Ｄ，１０× ．，５ｈｍｄｕＶＯＳ５４６ｍ，对缓冲溶液ｐＨ，流动相各组份比例进行了研
究，实现了山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜四种常用添加剂８分钟内同时、快速、准确检测。色谱条件为：
维普资讯
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ＣｎＦｏＡｆｅ坌堑ｈｆｓ：＝篓ｉｄｌａｏ＝＝ｙ＝＝！
高效液相色谱法同时测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜的方法研究
曲娜，赵亚军，郭莹
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（ｈｅｏｄＳａｏｒｏｄＱａｔＳｐｒｉｏｎｓｅｔｎｏｉｏｉｇＰｏｉｃ，Ｓｅｙｎ１０３）ＴｅＳｃｎｔｔｎｆｏｕｌｙｕｅｖｉａｄＩｐｃｏｆａｎｎｒｖｎｅｈｎａｇ０ｉｏＦｉｓｎｎｉＬ１１
Ｋｅｒｓｙｗｏｄ：ＨＰＣ；ｂｎｏｃａｉＬｅｚｉｃｄ；ｓｒｉｃｄ；ｓｌｂｅｓｃｈｒｎｃｓｌｍｅｐｔｓｉｍｏｂｃａｉｏｕｌａｃａ；ａｅｕｆｉａｏａｓｕ
苯甲酸、山梨酸、糖精钠、乙酰磺胺酸钾

高效液相色谱法同时测定食品中11种添加剂

工程管理与技术现代商贸工业２０１８年第１３期１８２㊀㊀作者简介:周原(１９８６－),女,汉族,湖北荆州人,硕士,武汉食品化妆品检验所,工程师,研究方向:食品检测.由于激励函数没有初始状态,故其拉氏变换只有对应的第一项.将方程化为F (s )＝H １(S )＋H ２(s) E (S ),其中H １(S )对应零输入,H ２(s ) E (S )对应零状态.将H １(S )㊁H ２(s ) E (S )都用部分分式展开法化为ðk is －λi,则有对应的时域解为ðki e λitε(t ),最后同样将零状态解与零输入解相加即得总的系统方程解.复频域法十分适用于求解全响应,对于系统的微分方程,运用时域微分性质及和部分分式展开法,将方程两边进行拉氏变换,求解全响应十分简便.３㊀结论通过上述对连续时间系统的响应分析与求解,可以得出以下结论:当求解电路的电压响应或者电流响应,即先列出K C L 或者K V L 方程,再运用微分算子创建微分方程,用时域法求解全响应㊁零输入响应㊁零状态响应.频域法是运用傅里叶变换及其性质进行求解,但是只能求解零状态响应.复频域法特别适用于微分方程已知的情况下,对方程两边进行拉氏变换,即可以十分简便的得到全响应㊁零输入响应㊁零状态响应.当然这些方法是系统分析的重要方法,如果能够将M a t l a b 的数值运算功能与绘图功能有机结合起来,将会使系统分析更简便和精确.参考文献[１]吴湘淇．信号与系统(第３版)[M ]．北京:电子工业出版社,２００９．[２]郑君里,应启珩,杨为理．信号与系统(第二版)[M ]．北京:高等教育出版社,２０００:４２Ｇ５２．[３]陈从颜,翟军勇．信号与系统基础[M ]．北京:机械工业出版社,２００９:８５Ｇ８９．高效液相色谱法同时测定食品中１１种添加剂周㊀原㊀刘㊀坤㊀代㊀钰㊀何㊀艳㊀周晓婷(武汉食品化妆品检验所,湖北武汉４３００００)摘㊀要:建立了反相高效液相色谱法同时快速测定食品中安赛蜜㊁柠檬黄㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄㊁咖啡因㊁诱惑红和亮蓝的方法.以甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,通过D I ＧO N E X A c c l a i m１２０C １８(４．６ˑ２５０m m ,５μm )色谱柱分离,经二极管阵列检测器进行检测,外标法定量.１１种添加剂的检出限均在０．１~０．５m g/L 之间,加标回收率为９３．５~１０４．０％,线性相关系数均大于０．９９９,相对标准偏差(R S D )均小于０．９７４％.结果表明该方法前处理简单,毒性小,分离效果好,一次进样可以同时检测食品种１１种添加剂,能够满足同时快速检测食品中常见的添加剂的需要.关键词:高效液相色谱;添加剂;食品中图分类号:T B ㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀㊀㊀d o i :１０．１９３１１/j ．c n k i ．１６７２Ｇ３１９８．２０１８．１３．０８５㊀㊀现代食品产业中,食品添加剂发挥着巨大的作用.食品添加剂能够改善食品品质和延长保质期.食品添加剂已经成为食品中不可缺少的物质,各国都致力于开发新产品及新技术.食品添加剂在使用过程中除应保证其原有作用外,更应保证其安全性.但近年来,假酒中毒致死案件㊁糖精枣㊁瘦肉精㊁染色馒头㊁红心鸭蛋㊁三聚氰胺奶粉等重大食品安全事故频发,一些食品加工企业缺乏社会责任感,违规添加食品添加剂甚至使用有毒原料,给我国的食品行业带来了沉重的打击,因此需要严格监控食品添加剂的使用.高效液相色谱法(H i g h P e r f o r m a n c e L i qu i d C h r o ma t o g r a p h y ,H P L C )是２０世纪６０年代末,在经典液相和气相色谱基础上发展起来的新型分离分析技术.高效液相色谱法具有操作简便㊁检测灵敏度好㊁对样品适用范围广㊁可供选择的流动相种类多㊁分析速度快㊁能分析高沸点有机物和热稳定性差的化合物等特点.至今,高效液相色谱法已经在食品工业㊁制药工业㊁石油化工等领域获得广泛应用.在现行的国标中,对食品添加剂的检测,多是针对一种或少数几种添加剂,而一种食品中往往同时使用多种食品添加剂,如果按照现行的标准进行检测,必须对样品进行多次处理,分别检测不同的添加剂,费时费力.目前报到的文献中,大多数是针对饮料等简单基质的食品中添加剂进行研究,对糕点㊁蜜饯等复杂基质食品中添加剂的研究较少,且已报道的方法多直接用水提取,对食品中低含量的色素提取效果较差.本研究用碱性的有机溶剂提取食品中的添加剂,采用反相高效液相色谱法,同时测定食品中１１种常见的添加剂.实验证明,该方法具有现代商贸工业２０１８年第１３期１８３㊀提取效果好㊁前处理简单㊁快速㊁准确等优点.１㊀实验部分１．１㊀仪器与试剂U l t i M a t e ３０００高效液相色谱仪:配D A D－３０００光电二极管阵列检测器及C h r o m e l e o n TM 色谱作站,美国戴安公司;超声波清洗器,上海科导超声仪器有限公司;超纯水系统,美国M i l l i po r e 公司;电子分析天平,日本岛津公司.甲醇,M e r c k 公司,色谱纯;乙酸铵,北京中西泰安技术服务有限公司,优级纯;０．５m g/m L 安赛蜜㊁１．０m g /m L 苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁柠檬黄㊁日落黄㊁苋菜红㊁胭脂红㊁诱惑红㊁亮蓝㊁咖啡因标准储备液,国家标准物质中心.１．２㊀混合标准储备液的配制分别精密吸取标准储备液各５m L ,于１００m L 的容量瓶中,用M i l l i p o r e 水稀释至刻度,摇匀,即配成安赛蜜的浓度为２５．０m g /L ,其余１０种食品添加剂的浓度均为５０．０m g/L 的混合标准储备液.１．３㊀供试品溶液的制备将样品剪碎或放入捣碎机捣碎,精密称取５．０g 于５０m L 的具塞比色管中,加３５m L１％的氨水－乙醇溶液,超声提取３０m i n ,用水定容至５０m L ,摇匀,３０００r/m i n 离心１５m i n ,取上清液,调p H 值至中性,用微孔滤膜过滤后备用.１．４㊀色谱条件色谱柱:D I O N E X A c c l a i m１２０C １８(４．６ˑ２５０m m ,５μm );流动相为甲醇和２０m m o l /L 乙酸铵,梯度洗脱程序见表１,流速为１m L /m i n ,柱温为３０ħ,进样量为５μL ,采用保留时间和光谱图定性,峰面积外标法定量.表１㊀梯度洗脱程序表时间/m i n甲醇/％２０m m o l /L 乙酸铵/％０１４８６３１４８６１１４０６０１６６０４０２０１４８６２５１４８６２㊀结果与讨论２．１㊀流动相及p H 的选择本实验考察了乙腈－２０m m o l /L 乙酸铵和甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵两种流动相系统,经过不同的梯度洗脱程序,１１种添加剂均能实现基线的分离.但乙腈的毒性较大,故本实验采用甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵作为流动相.用冰乙酸将２０m m o l /L 乙酸铵缓冲溶液的p H 值分别调至３．０㊁４．０㊁５．０㊁６．０和７．０,然后考察不同p H 值的流动相分别对１１种食品添加剂分离的影响.实验结果表明,p H 值的改变对色素的分离影响较小,但对苯甲酸㊁山梨酸和糖精钠的分离有较大的影响.当pH 为３．０㊁４．０和５．０时,个别色谱峰严重拖尾,１１种添加剂不能被完全分开;当p H 为６．０和７．０时,峰形较好,所有添加剂均能实现基线的分离.由于２０m m o l /L 乙酸铵缓冲溶液的原始p H 值在６．０~７．０之间,故本实验不对流动相的p H 值进行调节.２．２㊀检测波长的选择尽管各组分均有紫外吸收,但最大吸收波长各不相同.二极管阵列检测器的特点是可以同时检测和处理多个波长的色谱图,本实验对比了２１０㊁２３０㊁２５４㊁４２０㊁５２０㊁６２８n m 六种检测波长下各组分的响应值.通过对比发现:除亮蓝外,在２３０n m 处各组分的灵敏度相对较高.因此,本实验在２３０n m 处对安赛蜜㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁柠檬黄㊁日落黄㊁胭脂红㊁苋菜红㊁诱惑红和咖啡因进行同时检测,色谱图见图１a ;在６２８n m处对亮蓝进行检测,色谱图见图１b .结果表明,各组分间无干扰,一次进样可以同时测定１１种食品添加剂.图１㊀１１种食品添加剂混合标准液的色谱图(１．安赛蜜,２．柠檬黄,３．苯甲酸,４．糖精钠,５．山梨酸,６．苋菜红,７．胭脂红,８．日落黄,９．咖啡因,１０．诱惑红,１１．亮蓝)２．３㊀线性关系和最小检出量的考察将１１种食品添加剂分别配制成一系列不同浓度的标准溶液,按照上述色谱条件进行测定,以浓度为横坐标,测得的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,以样品峰高为基线噪音峰高的３倍为准计算最小检出量.结果表明,１１种食品添加剂的相关系数R ２均大于０．９９９,线性范围为０．５~８００m g/L ,最低检出限在０．１~０．５m g/L 之间.２．４㊀实际样品的测定按照１．３所述处理方法处理样品,在优化的色谱条件下,对话梅及青豆中的食品添加剂进行测定,每个样品平行测定三次,得到的色谱图如图２㊁３所示.表２对比了同一个样品中,用水直接提取和用碱性有机溶工程管理与技术现代商贸工业２０１８年第１３期１８４㊀㊀剂提取的方法所测得的结果.结果表明,该方法对食品中低含量的色素的提取效果较好,一次进样可以同时检测食品中的１１种添加剂.图２㊀话梅色谱图(１．苯甲酸,２．糖精钠,３．山梨酸)图３㊀青豆色谱图(a ．亮蓝,b ．柠檬黄)表２㊀不同样品中添加剂的检测结果(g /k g)样品柠檬黄苯甲酸糖精钠山梨酸亮蓝１n d ０．１５５０．７５００．０８２n d２n d ０．１５３０．７４２０．０７９n d ３０．０２６n d n d n d ０．００６４０．０１２n dn dn dn d ㊀㊀注:１:话梅(用碱性有机溶剂提取),２:话梅(用水提取),３:青豆(用碱性有机溶剂提取),４:青豆(用水提取),n d 表示未检出.２．５㊀回收率实验采用碱性有机溶剂提取的方法对话梅在二个不同的添加水平进行加标回收率实验,其分析结果见表３.结果表明该方法的加标回收率为９３．５％~１０４．０％.表３㊀回收率的测定结果添加剂名称本底值/(g /k g)加标量/(g /k g )测定值/(g /k g )回收率/(％)安赛蜜００．０２０．２００．０１９７０．１９３９９８．５９７．０柠檬黄００．０２０．２００．０１９３０．１９３１９６．５９６．６苯甲酸０．１５５０．０２０．２００．１７３７０．３５４６９３．５９９．８糖精钠０．７５００．０２０．２００．７７０８０．９５０６１０４．０１００．３山梨酸０．０８２０．０２０．２００．１０２２０．２８１０１０１．０９９．５苋菜红００．０２０．２００．０１９００．１９０９９５．０９５．５胭脂红００．０２０．２００．０１８９０．１９０１９４．５９５．１日落黄００．０２０．２００．０１９３０．２０１２９６．５１００．６咖啡因００．０２０．２００．０１９９０．１９９７９９．５９９．９诱惑红００．０２０．２００．０１９００．２０１０９５．０１００．５亮蓝００．０２０．２００．０１８８０．１９００９４．０９５．０２．６㊀精密度实验本实验对加标０．２g /k g 的青豆样品平行测定６次,根据峰面积外标法对其定量,计算安赛蜜㊁柠檬黄㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄㊁咖啡因㊁诱惑红和亮蓝的R S D 分别为０．４６７％㊁０．６８５％㊁０．９７４％㊁０．５１９％㊁０．４３６％㊁０．８０８％㊁０．２０８％㊁０．４５１％㊁０．６６５％㊁０．８１４％和０．６２７％,结果表明该方法的重现性较好.３㊀结论该方法前处理简单,采用D A D 检测器可以在不同波长下查看不同的添加剂的出峰情况,避免了保留时间接近的峰之间的干扰,一次进样可以测定１１种常见的添加剂,并能检测出食品中含量较低的添加剂,具有快速㊁准确㊁提取效果好㊁毒性小㊁精密度和准确度较高等优点,可以用于多种常规食品中的快速检测.参考文献[１]王静,孙宝国．食品添加剂与食品安全[J ]．中国科学,２０１３,５８(２６):２６１９Ｇ２６２５．[２]A y a l a －Z a v a l a J F ,V e g a －Ve g aV ,R o s a s －Do m i n gu e zC ,e t a １．A g r o－i n d u s t r i a l p o t e n t i a l o f e x o t i cf r u i tb y p r o d u c t sa sa s o u r c e o f f o o da d d i t i v e s [J ]．F o o d R e sI n t e r n a t l ,２０１１,(４４):１８６６Ｇ１８７４．[３]L i uX ,Z h e n g XD ,F a n g W W ．S c r e e n i n g of f o o d a d d i t i v e s a n d p l a n t e x t r a c t s ag a i n s tCa n d i d aAl b i c a n s i nv i t r o f o r p r e v e n t i o n o f d e n t u r es t o m a t i t i s [J ]．P r o c e d i a E n v i r o n S c i ,２０１２,(１２):１３８１Ｇ１３６６．[４]于世林．高效液相色谱法及应用[M ]．北京:化学化工出版社,２０００,３Ｇ１０．[５]武中庸,赫欣睿,叶永丽等．高效液相色谱在食品添加剂检测中的应用[J ]．西北民族大学学报(自然科学版),２０１６,３７(１０２):６５Ｇ６９．[６]G B５００９．２８－２０１６食品安全国家标准食品中苯甲酸㊁山梨酸和糖精钠的测定[S ]．[７]G B５００９．１３９－２０１４食品安全国家标准饮料中咖啡因的测定[S ]．[８]王骏,胡梅,张卉等．超高效液相色谱快速测定饮料中的１６种食品添加剂[J ]．食品科学,２０１０,３１(２):１９５Ｇ１９８．[９]李芸瑛,黄丽华．高效液相色谱法同时快速测定饮料中的３种食品添加剂[J ]．肇庆学院学报,２００３,２４(２):３１Ｇ３５．。

超高效液相色谱法检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因、安赛蜜

超高效液相色谱法检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因、安赛蜜作者：李花觉来源：《现代食品》 2018年第21期摘要：目的：建立超高效液相色谱检测饮料中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因和安赛蜜。

方法：通过优化超高效液相色谱仪的工作条件，建立同时检测 5 种添加剂的方法。

结果：该条件下标准系列线性好，检出限流低，精密度好。

结论：该条件适用于用超高效液相色谱仪检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜和咖啡因。

关键词：超高效液相色谱；饮料；检测为了改善食品的色、香、味和品质, 食品中通常会加入一定量的防腐剂及甜味剂等食品添加剂[1]。

为保障人们的健康，国家对相关食品添加剂都进行限量并制定了相应的检测方法，但国家标准方法仅限于各种添加剂的分开测定，大大降低了工作效率，还造成了很多不必要的浪费。

本文根据实验室现有仪器条件及技术现状，结合国家标准检测方法，考察了流动相的体系、配比、流动相的流速、柱温、进样量等对测定的影响条件, 进一步优化色谱条件，建立了用超高效液相色谱法同时检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜和咖啡因的检测方法，该方法具有简单快捷、准确、重现性和选择性好等特点。

1 实验部分1.1 仪器和设备Waters ACQUITY H -Class 超高效液相色谱仪（配有紫外检测器、自动进样器、柱温箱、高压泵、Empower3 色谱工作站），MICROPURE 超纯水制备系统（美国塞默飞世尔公司），超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

色谱柱ACQUITY UPLC BEHC18（2.1 mm×50 mm，1.7μm)，0.45 μm 滤膜（天津津腾公司）。

1.2 标准系列溶液制备山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜和咖啡因 5 种物质均为国家标准物质检测中心出的成品，其原液浓度分别为1.0、1.0、1.0、1.0 和0.5 mg·mL-1，根据需要取一定量的原液混合，并用超纯水稀释成相应的质量浓度，其中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因浓度为1.00、5.00、10.00、15.00 μg·mL-1 和20.00 μg·mL-1，安赛蜜浓度为0.50、2.00、4.00、8.00 μg·mL-1 和10.00 μg·mL-1，经0.45 μm 滤膜过滤后待测。

高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠

将上述混合标准溶液进行测定，
根据待测物质峰面积和浓度关系绘图，
得到标准曲线回归方程。苯甲酸、山
梨酸和糖精钠在 0.2 ～ 200 mg/L 范围
内线性关系良好，苯甲酸在 0.25 mg/L
时，线性方式 y=31 991.7x，相关系数
r=0.999 7，检出限为 0.006 g/kg；山
1.2.1 配制混合标准溶液精密称取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准物质各 4.0 mL 于 20 mL 容量瓶中，
用水配制成 200 μg/mL 的标准混合储备液，再用水稀释成 100 μg/mL、50 μg/ mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL、2.5 μg/ mL、0.5 μg/mL、0.2 μg/mL 的系列标准工作液，由低浓度到高浓度依次进样。
梨酸在 0.20 mg/L 时，线性方式 y=60
861.2x，相关系数 r=0.999 8，检出限
为 0.005 g/kg；糖精钠在 0.50 mg/L
时，线性方式 y=21521.4x，相关系数
r=0.999 7，检出限为 0.012 5 g/kg。

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1.2.2 样品处理称取 2.0 g 果酱样品于 50 mL 比色管中，加 30 mL 水和 0.5 mol/L 的氢氧化钠溶液 1.0 mL，摇匀后置于超声清洗器中提取 15 ～ 20 min，直至被测组分完全溶解。然后再添加 0.42 mol/L 的硫酸锌溶液和 0.5 mol/L 的氢氧化铵溶液各 1.5 mL，加水定容到 50 mL 后摇匀，静置，然后用双层滤纸过滤上层清液，将最初过滤的 5 mL 液体丢弃，并采用 0.45 μm 的滤膜对滤液再次过滤，进样 5 μL 开展色谱分析。如果液体样品不包含蛋白质，则不需要蛋白质沉淀过程，直接取样后用水定容，超声提取后过滤进样即可；如果是固体样品，则需要将固体样品研磨粉碎，然后进行样品处理 [2]。 1.2.3 检测精确称取处理液和混合标准溶液各 20 μL 放置于高效液相色谱仪中进行分离，以标准溶液的固定峰值为依据，根据峰面积计算样液中的被测物质含量，计算公式为：，其中 X 表示样品中待测组分的含量，单位为 g/ kg；C 表示由标准曲线得出的样液中待测物质的量浓度，单位为 mg/mL， V 表示样品定容的体积，单位 mL；m 表示样品的质量，单位为 g。

高效液相色谱法同时测定饮料中的抗坏血酸、糖精、苯甲酸和山梨酸

ｂｅｂｇｂＨＬ．ＴｅｃｐｎｔｗｒｅｒａｓＰＣｈｅｍｏｅｓｅｖｅｙｓｏｎｅｓａａｄａｒａＯＳｌｎｕｉｅｒｔｏｐｅｎＺｂｘｃｕｂｓｇｏＤｏｍｙｎｍｔｎｌ５Ｋ２Ｏ（：）Ｈ６ａｅａｏ０％ＨＰ４０７（＝）ｈ／３０ｐｓｍｂｅａａｄｔｔｂＵ－５ＴｅｏｉｐｓｎｄｅｅｙＶ２４ｈｌｈｅｅｃｄ，ｃｆｃｎｓｖｒｔｎｔｆｒｍｏｅｔｏｆｉｔｏａｉｉｏｈｏｃｐｎｓｅｉｅｆａｏｆｕｏｅｎｆ７ｌａｗｒａｌｓａ２，Ｔｅｏｒｒｉｓｅｌｅｔｎｅｃｐｅｌｓｈ％ｈｒｏｅｅｏｔｆｒｍｏｅｔａｄｄｔｅｖｉｆｏｃｐｎｎｄｅｔｈｃｒｓｈｕｏｅｓｏｅｂｎｂｖｒｇｒｇｆｍ％ｔ１％ｌｋｅｅａｅｒ９ａｅａｓｄｎｏ０ｏ。００
（一）仪器及试剂日本岛津ＬＣ４－Ａ高效液相色谱仪，ＳＤ－Ａ型紫外检测器，ＣＲＡＰ２Ｓ－２Ｘ数
据处理系统。
抗坏血酸为生化试剂，糖精为食品纯，苯甲酸和山梨酸均为分析纯。（二）色谱条件色谱柱：２ｃ５ｍ×４６流动相：甲０５ＫＰ４ｂ－醇／．％Ｈ２Ｏ
ｃａｎ，ｅｏＡｉａｄｂＡｉｉＢｖｒｅｈｒｅＢｎｊｃｎＳｒｃｄｅｅｇｓｉｚｃｄｏｉｃｎａｂＨｇＰｒｒａｃＬｕＣｒａｇｐＹｎｙｈｆｍｎｉｉｈｍｔｒｈａｇｉｅｏｅｄｏｏａｙｑＣｎｓｎＺｕｎＺｕｎＸａｇｉｇｇｅｇ，ｈＹａａｎｈａｄｎｐ，Ｔｓｎｅｉｇ＆ＴｃｏｏＩｓｔｔｏＺｅａｇｔｅｎｌｇｎｉｅｈｉｎｈｙｔｕｆｊＰｏｉｃＨａｇｏｒｅｖ，ｎｚｕｈＡａｔａｉｍｔｄｐｏｏｄｄｔ－ｑｎｉｔｅｈｉｒｓｆｒｅｕｔｖｅｏｓｐｅｏｅｒｍｎｎｔｔｌｃｍｏｎｓｕａｅｓｉｉｇｅｔｏｐｕｄｓｌｎｏｌｎｉｈｉｅｉｔｕｙｍ

HPLC法同时检测食品中四种添加剂含量研究

HPLC法同时检测食品中四种添加剂含量研究作者：汤振华周红霞来源：《吉林农业·下半月》2014年第03期摘要：采用高效液相色谱法同时测定液体食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜。

样品经盐酸酸化，乙醚提取，甲醇和水溶解后过HLB固相萃取小柱净化，以TC-C18（4.6×250毫米，5微米）色谱柱分离。

结果显示苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜在1.0微克/毫升～100.0微克/毫克范围内呈线性关系，回收率在84.24%～96.34%之间，相对标准偏差在2.03%～4.78%之间，最低检限0.5毫克/千克，适用于同时检测液体食品中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜的含量。

关键词：苯甲酸；山梨酸；糖精钠；安赛蜜；高效液相色谱中图分类号： TS214 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2014）-06-30-21食品添加剂苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸是我国目前常用的食品有机防腐剂；糖精钠作为甜味剂也广泛应用于食品中，但过量使用会对人体产生毒副作用，甚至引发癌症。

因而对各类食品进行安全质量控制尤为重要[1-3]。

现有的国家标准方法中，很少有同时测定几种添加剂的方法。

但在日常工作中，为节约时间提高分析效率，就要求检测工作者研究出适合多种类型食品中多种添加剂同时测定的检测[4-6]。

不同类型食品中蛋白质和脂肪含量的高低直接影响着检测结果的可靠性，针对不同样品应用不同的前处理及检测方法，无疑增加了检测工作的难度及强度[7-8]。

本文研究了常见液体食品中如果汁、酱油、醋等其中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜这四种添加剂的液相色谱检测方法。

该法操作简单快速，测定结果满意，适合大批量样品的快速检测。

2 材料与方法2.1 仪器与试剂旋转蒸发仪 Heidolph G3；固相萃取装置美国Supelco；氮吹仪 Turbo Vap LV Caliper；高效液相色谱仪 AGILENT-1100。

乙醚（分析纯）；盐酸（分析纯）；氢氧化钠（分析纯）；甲醇（色谱纯美国TEDIA ）；醋酸铵（色谱纯美国TEDIA ）；冰乙酸（色谱纯美国TEDIA ）；HLB固相萃取小柱（30微米，Oasis公司）；MAX固相萃取小柱（30微米，Oasis公司）；C18固相萃取小柱（SP7756B，SUPELCO）2.2 样品的预处理精确称取5克样品至50毫升离心管中，加0.5毫升 6摩尔/升盐酸，加盖涡旋30秒使样品酸化，加20毫升乙醚，涡旋20秒提取，8000转/分离心3分，取乙醚层至圆底烧瓶中旋干，加1毫升甲醇混匀，再加9毫升水涡旋混匀，加200微升6摩尔/升盐酸混匀[2.8]，待过HLB 固相萃取小柱。

反相高效液相色谱法同时检测复合液体调味料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量

２．２流动相比例，流速的确定及谱图分离情况以流动相为甲醇：乙酸铵分别以４：９６：５：９５；６：９４；７：９３为例，以流速１．Ｏｍｌ／ｍｉｎ、１．Ｉｍｌ／ｍｉｎ和１．２ｍｌ／ｍｉｎ分别进行试验确认，当流速为１．ｉｍｌ／ｍｉｎ，流动相甲酸：乙酸铵为７：９３时，即满足谱峰分离效果良好，又符合
保留时间和二极管阵列定性，面积外标法定
量。１．３样品处理
在１５分钟内完成试验兼顾效率，完全满足试
验要求。浓度分别为４０ｍｇ／１的４种添加剂各谱峰图谱如下：４种添加剂标准物质组分分离图
１、实验部分
１．１仪器与试剂高效液相色谱（戴安Ｐ６８０Ａ，二级管阵列配紫外检测器）色谱柱（ＡｔｈｅｎａＣ１８一．１ＯＯＡ．４．６ｍｍＸ超声仪（昆山市超声仪器有限公司）离ｔｌ，机（金坛市杰瑞尔电器有限公司）电子天平（舾ＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯ。ＡＸ２０５０Ｒ）ＰＨ计（雷磁ＰＨＳ－３Ｅ）甲醇（色谱纯ＣＮＷ）乙酸铵溶液（分析纯广东汕头市西陇化
如下添加剂名称线性方程
苯甲酸山梨酸 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ赛蜜糖精钠Ｙ＝１．２１２Ｘ＋５．４３１Ｙ＝２．８３３Ｘ — — １８．３４２
Ｙ＝１．４７２Ｘ一
４５４３１

高效液相色谱法测定固体食品中的安赛蜜

高效液相色谱法测定固体食品中的安赛蜜刁玉华，张加稳，陈娴（昆明市食品药品检验所，昆明 650032）摘要：建立一种高效液相色谱法测定固体食品中安赛蜜的方法。

以水为提取溶剂超声波提取安赛蜜，然后在提取液中加入沉淀剂除杂，采用C18反相色谱柱，紫外检测器，以0.02mol/L乙酸铵溶液∶甲醇=90∶10（v/v）为流动相，检测波长225nm，流速1.0mL/min，柱温30℃，进样量10μL进行检测，外标法定量。

安赛蜜出峰时间为4.348min，样品的检出限为0.57mg/kg，定量限1.89mg/kg，线性范围为0.5～50.0μg/mL，相关系数0.9998，安赛蜜的加标回收率在91.3%～99.3%之间，重复性实验的相对标准偏差在2% 以下（n=6）。

建立的前处理方法具有简单、快速、准确、实用性强的特点，可用于固体食品中安赛蜜的检测。

关键词：安赛蜜；高效液相色谱；固体食品中图分类号：TS207.3/TS202.1 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）03-0090-05 doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.03.015Determination of acesulfame K in solid food byhigh performance liquid chromatographyDIAO Yu-hua，ZHANG Jia-wen，CHEN Xian（Kunming Institute for Food and Drag Control，Kunming 650032）Abstract：A high performance liquid chromatography for determination of acesulfame K in solid food was developed. Acesulfame K was extracted using water，assisted by ultrasound，and purified by precipitation. Zinc acetate and potassium ferrocyanide was used for preparation. Acesulfame K was separated on a C18 column using 0.02mol/L ammonium acetate methanol（90∶10，v/v）as mobile phase at a ﬂow rate of 1.0mL/min and detected by ultraviolet detector at 225 nm. The column temperature was 30℃ and injection volume was 10μL. The quantitative detection was carried out by external standard. The retention time of acesulfame K was 4.348 min. The limit of detection was 0.57mg/ kg and limit of quantification was 1.89mg/kg. The linear range was between 0.5 and 50.0μg/mL with correlation coefﬁcient of 0.9998. The mean spike recoveries for acesulfame K in a blank sample was between 91.3%and 99.3%，with a relative standard deviation below 2%（n=6） . The method was simple，rapid，accurate and practical. It can be used for determination of acesulfame K in solid food.Key words： acesulfame K；high performance liquid chromatography（HPLC）；solid food安赛蜜，学名乙酰磺胺酸钾（Acesulfame-K）是一种健康新型高强度甜味剂。

高效液相色谱法同时测定甜油中苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠与脱氢乙酸

ｄｏｉ：１０．１６７３６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｎ４１－１４３４／ｔｓ．２０１８．２０．０３３

Analysis and Testing 分析检测
高效液相色谱法同时测定甜油中苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠与脱氢乙酸
Determination of Benzoic acid, Sorbic acid, Saccharin sodium, Acesulfame K, Dehydroacetic Acid in Sweet Oil by HPLC
关键词：甜油；防腐剂；甜味剂；高效液相色谱法
Abstract：The analysis is performed on a C18 column using methanol and 0.02 mol·L-1sodium acetate solution and 0.04% acetic acid (25∶75) as the elution. The flow rate is 1.0 mL·min-1, the column temperature is 30 ℃ . The detector is DAD, the detection wavelength are at 214 nm, 230 nm and 293 nm. The results show that a good linear relationship is obtained. The RSD is below 3.8% (n=6), the average recovery is 93.7% ～ 101.9%. The method is simple, rapid, repeatable and which could beapplied for the analysis of additives in sweet oil.

高效液相色谱法同时检测碳酸饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量

高效液相色谱法同时检测碳酸饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量摘要: 采用高效液相色谱法同时检测饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠。

样品经除乙醇（如果含有乙醇），氨水调pH至中性，定容，过水相微孔滤膜，以 C18 （6 × 250mm）色谱柱分离，用配紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测。

结果显示安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠浓度在 1.0mg/ L ～ 100. 0mg/ L 范围内呈线性关系，回收率在87% ～ 98% 之间，相对标准偏差在 1%以下，最低检测限0.5mg/kg，适用于同时检测碳酸饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量。

关键词:碳酸饮料；安赛蜜；苯甲酸; 山梨酸; 糖精钠; 高效液相色谱仪防腐剂能抑制微生物生长繁殖，在食品中应用普遍，我国到目前为止已批准了32种使用的食物防腐剂，其中最常用的有苯甲酸钠、山梨酸钾等经常用于食品防腐，苯甲酸钠价格低廉，主要用于碳酸饮料和果汁饮料。

糖精钠及安赛蜜作为甜味剂应用于食品中调整食品口味，它们属于高倍甜味剂。

这些产品的甜度都比蔗糖高，现在糖精钠的使用得越来越少，而安赛蜜普遍添加到饮料中。

但过量使用会对人体产生毒副作用，甚至引发癌症。

因而对各类食品进行安全质量控制尤为重要。

现有的国家标准方法中，只有同时测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠的方法。

由于碳酸饮料中一般添加安赛蜜比较普遍，很少添加糖精钠，在日常工作中，为节约时间提高分析效率，就要求检测人员研究出适合食品中普遍存在的多种添加剂同时测定的检测方法。

1 材料与方法1. 1 仪器（1）赛默飞世尔高效液相色谱仪U3000带紫外检测器；（2）C18 ( 4.6× 250mm) 色谱柱；(3)万分之一电子天平；（4）无油真空抽滤装置 (5)水浴锅（6）刻度吸管10mL,移液管5mL,容量瓶50mL(7)0.22μm水相微孔滤膜1.2 试剂：（1）盐酸（优级纯）；（2）氨水 ( 优级纯) ; （3）甲醇 ( 色谱纯 ) ;（4）醋酸铵(20mmol/L)：称取1.54g优级纯醋酸铵，加入少量水溶解后，转入1000mL的容量瓶中，加水定容到刻度，经0.22μm水相微孔滤膜用真空抽滤装置抽滤后备用。

高效液相色谱法测定饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠

高效液相色谱法测定饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠许传旭;刘华【摘要】建立了饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的高效液相色谱测定方法.采用XB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)作为分析柱,以甲醇+O.02mol/L乙酸铵(pH6.O)(15:85)作为流动相,各组分得到很好的分离,检测波长为230 nm,进样量20μL,柱温30℃,采用外标法定量.考察了流动相中不同的甲醇配比和不同浓度的离子对试剂(乙酸铵)对分离和保留行为的影响.该方法精密度和准确度好,样品处理简单,适用于常规质量检测.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2008(000)004【总页数】3页(P67-69)【关键词】高效液相色谱法;饮料;安赛蜜;苯甲酸糖精钠;山梨酸【作者】许传旭;刘华【作者单位】北京北分瑞利分析仪器(集团)有限责任公司色谱仪器中心,北京,100095;北京北分瑞利分析仪器(集团)有限责任公司色谱仪器中心,北京,100095【正文语种】中文【中图分类】TS21 前言安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)、糖精钠、苯甲酸和山梨酸都属于食品添加剂。

安赛蜜和糖精钠是各类饮料中常用的甜味剂；苯甲酸和山梨酸作为防腐剂，应用也比较广泛。

对于甜味剂和防腐剂的使用限量，我国都有严格的规定。

为了迅速、准确地对上述添加剂进行检测，本文研究了用反相高效液相色谱法同时测定饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的方法，考察了在流动相中不同浓度离子对试剂及不同配比的甲醇对色谱保留行为的影响。

本法简单、快速，可满足日常检测的要求，对其他食品中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的检测，也具有一定的借鉴意义。

2 实验部分2.1 仪器与试剂SY-400K高效液相色谱仪(北京北分瑞利集团公司)， K-2501 型输液泵，K-5004 在线脱气机，K-1500 溶剂混合器，K-2501 型可变波长紫外检测器， Jetstream 色谱柱温箱 (德国 Knauer 公司)；BF-2002 色谱工作站(北京北分瑞利集团公司)；PHSJ-3F型pH计(上海精密科学仪器有限公司)；电子分析天平(0.0001g，上海精密科学仪器有限公司)。

高效液相色谱法同时测定食品中5种添加剂

高效液相色谱法同时测定食品中5种添加剂唐奕（邵阳市食品药品检验所，湖南邵阳 422000）摘要：采用高效液相色谱法同时测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸等5种添加剂。

样品经前处理，使用C18柱，以甲醇∶0.02 mol/L乙酸铵溶液（7∶93）为流动相，在波长230 nm，流速1 mL/min，柱温40 ℃的条件下测定。

经多次试验，该方法线性关系好，相关系数均在0.999 9以上，平均回收率为82.6%～104.4%，相对标准偏差为1.3%～4.6%。

该方法简单、快速、回收率高及精密度好，适用于食品中5种添加剂的同时检测。

关键词：高效液相色谱法；同时测定；食品添加剂Simultaneous Determination of Five Additives in Food by High Performance Liquid ChromatographyTANG Yi(Shaoyang Food and Drug Inspection Institute, Shaoyang 422000, China) Abstract: Five additives including acesulfame potassium, benzoic acid, sorbic acid, sodium saccharin and dehydroacetic acid in food were simultaneously determined by high performance liquid chromatography. The sample was pretreated, using a C18 column, methanol∶0.02 mol/L ammonium acetate solution (7∶93) as the mobile phase, and the wavelength was 230 nm, the ﬂow rate was 1 mL/min, and the column temperature was 40 ℃. After many experiments, the method has a good linear relationship, the correlation coefficient is above 0.999 9, the average recovery rate is 82.6%～104.4%, and the relative standard deviation is 1.3%～4.6%. The method is simple, fast, high in recovery rate and good in precision, and is suitable for the simultaneous detection of five kinds of additives in food.Keywords: high performance liquid chromatography; simultaneous determination; food additives食品企业在产品中添加甜味剂（安赛蜜、糖精钠）和防腐剂（苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸），以改善食品的口感、延长保质期[1]。

HPLC法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠及安赛蜜

HPLC法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠及安赛蜜袁磊;林芳;张丽;王一欣;王豆【期刊名称】《食品科学技术学报》【年(卷),期】2017(035)004【摘要】建立高效液相色谱法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠与安赛蜜的方法。

样品经水提取、亚铁氰化钾与乙酸锌沉淀蛋白、氨水调p H值后离心处理,经Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱分离,甲醇与0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.7 m L/min,采用二极管阵列检测器检测,波长230 nm,光谱扫描范围为200～400 nm,采用保留时间与光谱进行双重定性。

在14 min内苯甲酸、山梨酸、糖精钠与安赛蜜就能够达到较好的分离,在1～100μg/m L呈良好的线性关系,线性相关系数大于0.999 8,检出限0.5～1 mg/kg,不同类别产品加标回收率在88.5%～98.4%之间,精密度〈5%。

结果表明,该方法适用范围广、灵敏度高、准确性好,适用于各种食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠与安赛蜜的检测。

【总页数】8页(P72-79)【作者】袁磊;林芳;张丽;王一欣;王豆【作者单位】陕西省食品药品检验所,陕西西安710065【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.二极管阵列-高效液相色谱同时检测食品中的安赛蜜苯甲酸山梨酸糖精钠和脱氢乙酸2.高效液相色谱法同时检测液体食品中苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠含量的研究3.食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸同时检测方法4.HPLC法同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠及安赛蜜5.高效液相色谱同时检测食品中的安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

超高效液相色谱法检测饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量

超高效液相色谱法检测饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量程春梅;董刘敏;师邱毅;宋慧波;曹小敏;张境【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)005【摘要】建立了利用超高效液相色谱同时测定饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量的方法.采用ACQUITYUPLC(R)BEHC18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以0.02mol/L的乙酸铵一甲醇(95:5)为流动相,流速0.3mL/min,柱温25℃,二极管阵列检测器在波长230nm进行检测.整个分离过程在2.4min内完成,安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸的回收率为94.4％～104.2％.该方法快速准确,适用于果汁、含乳饮料、茶饮料、汽水等常规检测.【总页数】2页(P282-283)【作者】程春梅;董刘敏;师邱毅;宋慧波;曹小敏;张境【作者单位】浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;江苏省淮安市产品质量监督检验所,江苏淮安223001;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100;浙江医药高等专科学校,浙江宁波315100【正文语种】中文【中图分类】TS272.7【相关文献】1.高效液相色谱同时检测蛋白饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸的前处理方法研究 [J], 李玉强;晏晓清;张艳芳;程卫东;项飞兵2.超高效液相色谱法检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因、安赛蜜 [J], 李花觉3.超高效液相色谱法检测饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、咖啡因、安赛蜜 [J], 李花觉;4.超高效液相色谱法同时快速测定陈年道菜中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸 [J], 杨坤;刘桂琼;吴凯仪5.超高效液相色谱法快速测定饮料中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠 [J], 陈丹萍;杨富春;张宝元因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。