蓖麻主穗开花期的主基因+多基因混合遗传分析

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蓖麻主要农艺性状配合力测试与遗传力分析

第２卷第１５期
２１年１００月
内蒙古民族大学学报（自然科学版）
ＪｕｎｌｏｎｅｎｏｉｉｅｓｔｏｔｎｌｉｓｏｒａｆＩｎｒＭｏｇｌＵｎｖｒｉｆｒＮａｉａｉｅａｙｏｔ
Ｖ０．５Ｎｏ１１２．
ＣｏｂｉｎｇＡｂｉｉｙＴｅｔＡｎｄｍｎｉｌｓｔＡｎａｙｉｆＨｅｉａｌｔｌｓｓｏｒｔｂｉｙｉ
ｏｊｒＡｇｏｏｃＣｈｒｃｅｓｎＣａｔｒｆＭａｏｒｎｍｉａａｔｒｓｏｉ
ＷＡＮＧＤｏｇｍｅ，ＨＵＧｕ－ｉ一Ｍｏｅｅｕｎ－ｉ一Ｚｏｌ，ｄｌｔ
（．ｇｃｌｒｌｏｅｅＩｎｒｎｏｉＵｉｒｉｒａｉａｉｅ，ｏｇａ２０２Ｃｉａ１ｒｕｔａＣｌｇ，ｎｅｇｌｎｖｓｙｔｎｌｉＴｎｌｏ０８４，ｈｎ；ＡｉｕｌＭｏａｅｔｆＮｏｔｓｏｉ
２ＴｎｌｏＡｃｄｍｙｏＡｇｉａｕｅＴｃｏｏｙＴｎｌｏ０８１，ｈｎ．ｏｇｉａａｅｆｒｈｒｅｈｌｇ，ｏｇｉ２０５Ｃｉａ；ｃａ
３ＩｎｒｎｏｉｄｓｒｌｎｉｅｒｎｓａｃｎｅｆｎｖｒｉｅｒＣｓｏ，ｏｇａｏ０８４Ｃｉａ．ｅｇｌＩｕｔｉｇｎｅｉｇＲｅｅｒｈＣｅｔｒｏｉｅｓｉｓａｔｒｎｌｉ２０２，ｈｎ）ｎＭｏａｎａＥｕｔｆｏＴ
ｐａｔｅｇｔｎｔｍｉｍｅｅ，ｆｅｃａａｔｒｃｍｂｎｔｎｒｉｈｙｓｇｉｃｎｉ）ｅｃｓｗｔｅｄｙｅｄ，ｔｅｌｎｉｈｄｓｅｄａｔｒｉｈｒｃｅｓｏｉａｉｓｈａｖｏｗｅｅｈｇｌｉｎｆａｔｆｒｎｅ பைடு நூலகம்ｈｓｅｉｌｉｄ１ｈ

蓖麻组织培养及遗传转化概况

蓖麻组织培养及遗传转化概况
王文跃，。陈永胜Ｌ李国瑞，，黄凤兰，栾世慧尚雨丝王超智勇，志敏，，，张邵
（．１内蒙古民族大学，内蒙古通辽０８０；内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术中心，２００２内蒙古通辽ｏ８ｏ）２ｏｏ
ＷＡＮＧｅ —Ｙｕｅ。ＣＨＥＮｎｇｈｅｇ１Ｗｎ，。Ｙｏ－ｓｎ，ＬＩＧｕｏｎｉ．ＨＵＡＮＧｎｇｌｎ２－ｒ＇，２Ｆｅ－ａ，
ＬＵＡＮＳｉｈｉＳｈ — ｕ＇ＨＡＮＧ — ｉＷＡＮＧＣａ￣ＨＡＮＧＺｉｙｎｔＨＡＯＺｉｍｉ，Ｙｕｓ．ｈｏ，Ｚｈ — ｏｇ，Ｓｈ— ｎ
ＡｂｔａｔＴｅｃｓｏｉｉｗｉｅｙｕｅｖＭｉｎａｒｓａｅｔｘｉｓｐｓｉｉｅ，ｈｒｃｕｉａｓａｄｍａｙａｏｔｓｒｃ：ｈａｔｒｌｓｄｌｓｄｉａｉｏ，ｅｏｐｃ，ｅｔｅ，ｅｔｄｓｐａｍａｅｔｌ，ｎｎｒｍａｉｏｎｌｃｃｃｓｂｔｎｅｎｒｗｍａｅａｓＴｓｕｕｔｒｅｈｉｕｓｔｉｔｉｅａｖｎａｅｆｐａｔｆｈｒｉａｏｄｔｉ，ｕｓａｃｓｉａｔｒｌ．ｉｓｅｃｌｅｔｃｎｑｅｏｍａｎａｎｔｄａｔｇｓｏｌｎｓｏｅｏｉｎｌｇｏａｔｉｕｈｔｇｒｓ
ｔｎｓｌｃｉｎａｄｔｅｕｅｏｏｏｅｅｏｖｅｔｓｅｃｌｒｒｃｓ，ｔ．ｄｓｒｂｄｔｅｐｏｒｓｆｈａｔｒｉｉ，ｅｅｔｎｓｆｒｎｓｔｒｓｌｅｔｓｕｕｔｅｐｏｅｓｅｃ，ｅｃｅｈｒｇｅｓｏｅｃｓｏｌｏｏｈｈｍｏｈｉｕｉｔｏ

蓖麻主要数量性状相关性的通径分析

维普资讯
种子
Ｓｅ２０ｅｄ０２年
第２期
‘ 岜第１１）期２
蓖麻主要数量性状相关性的通径分析
王芳王云（蒙古民族大学农学院通辽内朱国立０８４）（２０２内蒙古通辽市农科所ｊ田迅刘海臣（蒙古民族大学农学院）内
一
１０＋ｏ３ｘ＋ｏ９ｘ＋０１。Ｘ、。ｘ．的三元回归决定系数Ｒ｝６．９．１．ｏ５ｘ、．、
．．７９这表明，桩穗长ｘ、级分枝粒重ｘ与单＝ｏ９３，门ｓ一。
株粒数是构成蓖麻产量的３主要性状３性状中若固定其中的２，ｘ，每增加１单位一个个个则ｘ、个Ｙ就要分别增加０９３、０９、．０个单位。１０１表１蓖麻１数量性状相美系数５个
用的同时，由于各主要性状间相关性的存在，得ｉ主要性状还可通过另一十主要性状对单株粒重Ｙ产生间接效应。其中一级分使个枝粒重通过单株粒数：门桩穗长、株粒数通过一级分枝粒重对单株粒重Ｙ产生间接效应都较大。单
ｌ材料与方法
试验以２５个蓖麻杂交种为材料，采用随机完全区组设计，次重复，行医ｔ长９８行株距０７ ×０７１９￣２０３双行．ｍ，ｍ．ｍ，９８００年于通辽市农科所进行。随机取５株有代表性植株进行田间调查和室内考种调查考种性状有：高（－、茎穗位（、株ｘ）主ｘｊ一级分枝果穗ｚ

蓖麻遗传资源产量与品质性状主成分聚类分析及其评价

２１年５月０１
蓖麻遗传资源产量与品质性状主成分聚类分析及其评价
方平平郑，鹭。陶爱芬祁建民’ 林荔辉吴建梅，，，，
（．１福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室，福建福州３００；．５０２２福建省中医药研究院，福建福州３００）５０３
ｉｇｐａｔｈｉｈ，ｅｒｌｎｔｄｎｌｎｅｇｔａｅｇｈ，ｏｌｙｅｄ，ｔｅｎｍｂｒｏｆｃｖａｅｌｎ，ｃｐｕｅｎｍｂｒｐｒｐａｔａｄｓｅｉｌｅｌｎ．ｉｉｌｈｕｅｅｅｔｅｅｒｐｒｐａｔａｓｕｅｅｌｅｄｙｅｄｐｒｐａｔｆｉｌｎｎ
Ｔａｔｉｅｔｃｔｎａｄｃｓｅｎｌｓｆａｔｒ（ｉｉｕｏｒｉｎｉａｉｎｌｔｒａａｙｉｏｓｏＲｃｓｃｍｍｕｉＬ．ｅｍｐａｍｓｄｆｏｕｓｃｎｎｓ）ｇｒｌｓ
ＦＮｉｇｐｎＺＥＧＬＡｉｅＱｉｎｒｉＬＮＬ．ｕＷＵＪａ．ｅＡＧＰｎ．ｉ，ＨＮｕ，ＴＯＡ．ｎ，Ｉａ．ｎ，Ｉｉｉ，ｉｍｉｇｆＪａｈｎ
ｃｔｇｒｓｗｉ＝２４．Ｔｅｅｖｒｔｓｃｕｄｂｓｄｆｒｃｓｏｒｅｉｇｗｉｉｅｅｔｐｒｏｅ．ａｅｏｉｈｌＤｅｅ．９ｈｓａｉｉｏｅｕｅａｔｒｂｄｎｔｄｆｒｎｕｐｓｓｅｅｌｏｅｈＫｅｒｓ：ｃｔｒｅｍｐａｍ；ｐｉｃｐｏｏｎｎｓａａｙｉ；ｃｕｔｒａａｙｉｙｗｏｄＳａｏ；ｇｒｌｓｒｎｉａｃｍｐｅｔｎ８８ｌｓｅｎｓｓｌｌｌ

蓖麻SnRK2基因家族的鉴定和特征分析

ＡＯＴａｏ，ＨＵＺｕｎ—ｈｏｎｇ。ＨＥＳｈａｎ，ＨＵＸｕｅ —ｌｉ，ＬＩＵＸｕ — ｙｕｎ，ＬＩＵＡｉ— ｚｈｏｎｇ
，
（１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＰｌａｎｔＲｅｓｏｕｒｃｅａｎｄＳｕｓｔａｉｎａｂｌｅＵｓｅ，
ＸｉｓｈｕａｎｇｂａｎｎａＴｒｏｐｉｃａｌＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｆｏＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍｅｎｇｌａ６６６３０３，Ｃｈｉｎａ；２．ＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＣｒｏｐＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＹｕｎｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０５，Ｃｈｉｎａ；
摘要：ＳｎＲＫ２是一类植物特有的Ｓｅｒ／Ｔｈｒ类蛋白激酶。为研究其在蓖麻抗逆过程中的作用，基于蓖麻的基因
组序列信息，利用生物信息学方法鉴定了６个蓖麻ＳｎＲＫ２蛋白激酶成员。分析发现这些蛋白具有亲水性属性，基
因结构分析表明，植物ＳｎＲＫ２基因在进化过程中具有很高的保守性；系统与进化分析发现植物ＳｎＲＫ２蛋白在单、双子叶植物中分化显著，可能是独立演化的结果。高通量ＲＮＡ— ｓｅｑ测序结果显示，大部分ＳｎＲＫ２基因在检测的

蓖麻PIP5K1_基因克隆、生物信息学及功能分析

DOI：10.19462/ki.zgzy.20231103004蓖麻PIP5K1基因克隆、生物信息学及功能分析李明静1　袁朴芳1　罗　蕊1　尹明达1　王志妍1　户雪妹1　顾晓慧1　黄风兰1，2（1内蒙古民族大学生命科学与食品学院，通辽 028000；2内蒙古自治区蓖麻育种国家民委重点实验室/ 内蒙古自治区蓖麻育种与综合利用重点实验室/蓖麻产业技术创新内蒙古自治区工程研究中心/内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心，通辽 028000）摘要：蓖麻PIP5K1基因在植物生长发育和抗逆过程中起重要作用。

为探究蓖麻PIP5K1基因在蓖麻物种中的生物学功能和不同时期雌性植株中的表达情况，以aLmAB2品系的蓖麻花序为试验材料，克隆PIP5K1基因，对该基因编码的蛋白质进行生物信息学分析，并对PIP5K1基因在不同时期雌性系植株的表达模式进行分析。

结果表明：从蓖麻花序轴顶端将总RNA 提取出来，并将其反转录成cDNA，克隆后得到一个全长为2325bp的PIP5K1基因片段，经测序后比对这一基因序列和NCBI 参考基因序列相同。

对该基因所编码蛋白展开生物信息学分析，确定PIP5K1基因所编码蛋白质的氨基酸等电点为8.85，氨基酸数目为774，分子量大小为87967.37Da，是一种亲水性稳定蛋白；无跨膜螺旋区，属于非跨膜蛋白；蛋白质二级结构由α螺旋、β转角、伸展链及无规卷曲构成；三级结构与二级结构预测结果一致；与同属于大戟科的木薯亲缘关系较近，与其他科亲缘关系较远。

qRT-PCR分析表明，PIP5K1在标雌系、单雌系、两性系花序中均有不同程度的上调和下调，推测PIP5K1基因参与蓖麻花序发育的调控。

本研究为探究PIP5K1基因促进蓖麻植株的生长发育机制奠定了理论基础。

关键词：蓖麻；PIP5K1；基因克隆；生物信息学分析；功能分析Cloning，Bioinformatics Analysis and Functional Analysis of Castor PIP5K1 Gene LI Mingjing1，YUAN Pufang1，LUO Rui1，YIN Mingda1，WANG Zhiyan1，HU Xuemei1，GU Xiaohui1，HUANG Fenglan1，2（1College of Life Sciences and Food Engineering，Inner Mongolia Minzu University，Tongliao 028000，Inner Mongolia；2Inner Mongolia Key Laboratory of Castor Breeding of the State Ethnic Affairs Commission/ Inner Mongolia Key Laboratory of Castor Breeding and Comprehensive Utilization/ InnerMongolia Engineering Research Center of Industrial Technology Innovation of Castor/ Inner Mongolia Industrial Engineering Research Center of Universities for Castor，Tongliao 028000，Inner Mongolia）蓖麻（Ricinus Communis L.）是大戟科蓖麻属双子叶一年生或多年生草本植物，是一种用途广泛、经济效益高的非食用性作物，为世界十大油料作物之一，具有极高的附加价值[1]。

用“主基因+多基因”遗传模型分析水稻茎蘖成穗率

第３４卷第３期
２０１３年７月
华南农业大学学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｖｏｌ＿３４．Ｎｏ．３
Ｊｕ１．２０１３
用“ 主基因＋多基因＂遗传模型分析水稻茎蘖成穗率
黄永相，郭涛，李伟，蒋世河，陈志强，郭建夫
（１广东海洋大学农学院，广东湛江５２４０８８；２华南农业大学，国家植物航天育种工程技术研究中心，广东广州５１０６４２）
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＰｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＰｒｏｄｕｃｔｉｖｅＴｉｌｌｅｒｉｎＲｉｃｅｂｙｔｈｅ
ＧｎｅｔｉｃＭｏｄｅｌ “ ＭａｊｏｒＧｅｎｅＰｌｕｓＰｏｌｙｇｅｎｅ ”
ｍａｔｅｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｍｏｄｅｌａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｔｉｌｌｅｒ（ＰＰＴ）ｕｓｉｎｇｔｈｅｍｏｄｅｏｆｍａｊｏｒｇｅｎｅａｎｄｐｏｌｙｇｅｎｅｍｉｘｅｄｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅｏｆｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＰＰＴｉｎｒｉｃｅｗａｓｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｂｙｔｈｅｍｉｘｅｄｇｅｎｅｔｉｃｍｏｄｅｌｏｆｏｎｅ — ｍａｊｏｒ — ｇｅｎｅｐｌｕｓｐｏｌｙｇｅｎｅｓ（ｍｏｄｅｌＤ－４）．Ｔｈｅｈｅｒｉｔａｂｉｌ —

主基因+多基因混合遗传模型分析步骤-2012

有些同学来问如何运用主基因+多基因混合遗传模型来做遗传分析，虽然这种分析在今天看来更多的被QTL所替代，但是还是有同学分析会用到，所以我把个人使用的心得小结出来，与大家交流分享。

主基因+多基因混合遗传模型可以确定控制性状的基因数目，估计遗传效应值及遗传率。

这个软件可以对单个分离世代进行分析，也可以对多个世代进行联合分析。

分析可以分为一步法和两步法。

这个软件都是DOS命令，每个不同分析群体都有各自的分析程序，使用时要依据自己的群体类型选择适合的小程序。

现在，仅以F2单独世代的一步法分析为例说明：一数据准备首先，建立一个TXT文件。

比如a.txt其次，将F2群体每个单株的数据输入txt文件中，可以不必有编号，仅用数据即可。

如下为F2群体的穗粒数数据文本文件格式。

二运行程序选择应用程序F2_1双击程序图标，打开，然后按照提示，依次输入期望值（0.0001），群体大小（你自己的群体单株数），文件名及所在路径（F2_1.txt）。

（一定注意输入正确路径及文件的名称及后缀）回车即开始运行。

运行后的数据自动存在该应用程序的同一文件夹下。

下图为程序对话：程序正在运行中。

下图为运行的结果文件三结果分析结果文件中各项内容的说明文件中共有模型A_0，A_1,A_2,A_3,A_4,B_1...到B_6。

现以一个模型（B_1）为例，说明各项的含义。

这是B_1的输出内容：model B_1 The esp value = 0.000100mean[1]=94.032539 mean[2]=73.406349 mean[3]=55.520161 mean[4]=54.413528 mean[5]=54.062317 mean[6]=53.886269 mean[7]=53.780346mean[8]=53.707722 mean[9]=53.656750sigma=129.892151mix[1]=0.059402 mix[2]=0.127216 mix[3]=0.062568 mix[4]=0.125135 mix[5]=0.250271 mix[6]=0.125136 mix[7]=0.062568 mix[8]=0.125136 mix[9]=0.062568Max-likelihood-value=-1829.820068 AIC=3679.640137U1= 0.012(0.9130) U2= 0.009(0.9248) U3= 0.002(0.9633)W = 0.1063 D = 0.0437(n=443,CD(0.05)=0.0648)The esp value指迭代收敛值：就是之前输入的0.0001mean[1]等，指各分布成分的平均数（专业说法为分离群体所剖分成的成分分布的平均数）以后估算遗传参数时用得上。

蓖麻叶片内源激素变化对主花序开花结实的影响

ｈｔｔｐ：／／ｑｋｓ．ｃｓｕｆｔ．ｅｄｕ．ｃａ
蓖麻叶片内源激素变化对主花序开花结实的影响
李培旺ｈ，陈景震ｈ，张良波ｈ，蒋丽娟
（１．湖南省林业科学院ａ．生物能源研究所；ｂ．油料能源植物高效转化国家地方联合工程实验室，湖南长沙４１０００４；２．中南林业科技大学，湖南长沙４１０００４）摘要：为了探明蓖麻叶片中的内源激素对其主花序开花结实的影响情况，以蓖麻良种湘蓖１号为试验材料，测
果穗长呈正相关，ＡＢＡ／ＩＡＡ与雌花序长呈显著正相关，而ＡＢＡ／（ＩＡＡ＋ＧＡ＋ＺＲ）与千粒质量和含油率之间均呈显著负相关。这一分析结果说明，内源激素ＡＢＡ和ＩＡＡ的含量及ＡＢＡ／ＩＡＡ的平衡状态对主花序花性分化均起重要作用，ＧＡ和ＡＢＡ的含量及ＡＢＡ／（ＩＡＡ＋ＧＡ＋ＺＲ）的平衡状态主要影响主花序的结实，文中建议，
ＨｕｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００４，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
定了蓖麻主花序不同发育时期叶片中内源激素ＩＡＡ、ＡＢＡ、ＧＡ、ＺＲ的含量，分析了主花序不同发育时期叶片中内源激素的变化规律及其对主花序开花结实的影响情况。结果表明：ＩＡＡ含量与雌花序长、雌花序比之间均

蓖麻高密度遗传图谱构建亲本SNP多态性分析

蓖麻高密度遗传图谱构建亲本SNP多态性分析杨俊芳曹越王宙王亚张宏斌赵宜婷王宏伟摘要：为了筛选最正确构建蓖麻高密度遗传图谱的亲本组合，以农艺性状差异较大的蓖麻两性系L1为父本，镶嵌型雌性系HCH3和HCH1分别为母本，基于全基因组重测序〔WG〕技术和生物信息学分析方法对2组亲本进行NP标记多态性分析。

结果说明，2组亲本间多态性标记均比拟丰富，其中以HCH1为母本的组合2的亲本多态性更佳，NP多态性标记总数为581158个，可用aa某bb型NP标记为181791个。

最正确亲本组合确实定为构建蓖麻的高密度遗传图谱、多种农艺性状定位和基因挖掘奠定了良好的根底。

在蓖麻上关于遗传图谱构建的研究起步较晚，研究者也较少。

国内学者毕川等最早开始蓖麻图谱构建工作[9]，2022年构建了第1张相对完整的遗传图谱[10]，共331个标记〔317个R、7个RAP标记、3个RAP标记、3个形态学标记、1个IR标记〕分布在10个连锁群上，覆盖1164.73cM基因组，平均标记间隔为3.63cM。

2022年又新构建了1张R标记遗传图谱并对蓖麻雌性复杂性状进行了定位[11]。

2022年Tomar等通过遗传群体筛选出141个〔RAPD、IR、R〕标记，构建了遗传连锁图谱，找到了关于蓖麻抗枯萎病的2个QTL[12]。

2022年Tomar等筛选出336个〔RAPD、IR、R〕标记，构建了遗传连锁图谱，并定位到了与蓖麻木炭腐病相关的新型QTL[13]。

2022年Yu等基于GB测序技术对200个重组自交系〔RIL〕群体进行测序分析，构建了10个连锁群〔LG〕的高分辨率遗传图谱包含8896个高质量的NP，覆盖1852.33cM基因组，筛选到了16个控制种子大小和质量的QTL[14]。

近年来，随着第2代测序技术迅速开展和测序本钱的降低，高通量测序技术为植物基因型鉴定和遗传作图带来了方法上跨越式的突破[15]。

以NP标记为代表的新一代分子标记大批量地用于植物高密度遗传图谱的构建[16-19]。

蓖麻高产宜机收杂交组合评价

收稿日期：2023-09-05基金项目：国家自然科学基金（31271759）作者简介：左金鹰（1998-），女，在读硕士生，研究方向为蓖麻分子育种，E-mail：*****************通信作者：殷学贵（1964—），男，博士，教授，研究方向为蓖麻种质资源、分子遗传育种和基因组学，E-mail：*****************蓖麻高产宜机收杂交组合评价左金鹰，陆建农，殷学贵，黄冠荣，张柳琴，林海虹，张星语，刘陆洲（广东海洋大学滨海农业学院，广东湛江 524088）摘要：【目的】对蓖麻杂交组合进行联合评价，为筛选高产、宜机收蓖麻品种提供理论参考。

【方法】联用灰色关联度分析、主成分分析和聚类分析对30个蓖麻杂交组合的产量性状、宜机收性状和光合性能3个方面进行综合评价。

【结果】在灰色关联度分析中，根据育种目标构建了理想品种；通过各组合与理想品种之间的加权关联度评选出N 19（0.768）、N 7（0.751）、N 11（0.727）、N 10（0.717）、N 6（0.713）和N 13（0.712）6个组合。

其中，前4个组合的加权关联度优于淄蓖5号（0.714），后2个组合的加权关联度与淄蓖5号接近；主成分分析结果将10个性状归纳为株型因子、产量决定因子和光合与分枝夹角因子3个主成分，累计贡献率达67.07%。

30个组合中，21个组合的综合得分均大于淄蓖5号（-0.699），且仅N 18（2.370）、N 4（1.848）、N 19（1.742）和N 11（1.019）4个组合的得分大于1，并以N 19最为突出，其得分远高于其他材料；聚类分析结果显示，在欧氏距离值为22处可将30个组合划分为4个类群，第Ⅳ类群成员（包括N 19、N 11和N 30）的整体表现与理想品种最为相似，但分枝夹角（59.10°）较大，仍需进一步改良。

【结论】综合3种评价结果，避免了多余材料入选和优良材料丢失，最终筛选出N 19和N 11 2个产量高、株型好和光合速率高的蓖麻杂交组合，它们的综合表现均优于淄蓖5号，为品种改良方向提供参考。

211021624_蓖麻ＲｃＭｓｃ２_基因功能分析

㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ｆｅｂ.２０２３ꎬ４３(２):３３６－３４６ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２２０７０２０耿柳婷ꎬ李艳肖ꎬ张春兰ꎬ等ꎬ２０２３.蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析[Ｊ].广西植物ꎬ４３(２):３３６－３４６.ＧＥＮＧＬＴꎬＬＩＹＸꎬＺＨＡＮＧＣＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２３.ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｉｎｃａｓｔｏｒ(Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ)[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ４３(２):３３６－３４６.蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析耿柳婷１ꎬ李艳肖１ꎬ张春兰２ꎬ于忠勇３ꎬ王桂玲４ꎬ向殿军１ꎬ刘㊀鹏１∗(１.内蒙古民族大学农学院ꎬ内蒙古通辽０２８０００ꎻ２.内蒙古民族大学生命科学与食品学院ꎬ内蒙古通辽０２８０００ꎻ３.内蒙古宏博种业科技有限公司ꎬ内蒙古通辽０２８０００ꎻ４.扎兰屯市绿色产业发展中心ꎬ内蒙古扎兰屯１６２６５０)摘㊀要:Ｇ２/有丝分裂特异性细胞周期蛋白２(Ｇ２/ｍｉｔｏｔｉｃ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃｃｙｃｌｉｎ￣２ꎬＭｓｃ２)作为高等植物应对逆境胁迫的关键调控蛋白ꎬ参与多个抗逆境胁迫的应答ꎮ为探究ＲｃＭｓｃ２基因的功能ꎬ该研究从蓖麻叶片组织中成功克隆了ＲｃＭｓｃ２ꎬ并利用生物信息学分析ＲｃＭｓｃ２蛋白的结构和潜在功能ꎬ同时借助ｑＲＴ￣ＰＣＲ方法分析ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达特性和非生物胁迫表达特性ꎮ结果表明:(１)ＲｃＭｓｃ２基因位于蓖麻第５号染色体长臂ꎬ该基因的ＣＤＳ(ｃｏｄｉｎｇｓｅｑｕｅｎｃｅ)区是１２９９ｂｐꎬ编码４３２个氨基酸ꎮ(２)ＲｃＭｓｃ２蛋白拥有细胞周期(ｃｙｃｌｉｎ)家族特征结构域ꎬ是一个不稳定酸性亲水蛋白ꎬ无跨膜域和信号肽ꎬ相对分子量为４９.３８ｋＤꎮ(３)ＲｃＭｓｃ２蛋白质的二级㊁三级结构以α￣螺旋和无规则卷曲为主ꎮ(４)ＲｃＭｓｃ２蛋白与麻风树和巴西橡胶树的ＣＹＣＢ２蛋白的序列同源性最高ꎬ且同被聚为ＧｒｏｕｐⅡꎮ(５)３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ融合蛋白定位于细胞核ꎮ(６)ＲｃＭｓｃ２基因在蓖麻的所有组织中均有表达且主要在根和茎中发挥作用ꎻ非生物胁迫分析表明ＲｃＭｓｃ２基因可以被脱落酸(ａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄꎬＡＢＡ)㊁盐㊁干旱和低温处理诱导表达ꎬ并且ＲｃＭｓｃ２基因对低温胁迫的响应最敏感ꎮ综上表明ꎬ该研究较全面地分析了ＲｃＭｓｃ２基因的结构特征㊁系统进化和表达模式ꎬ为揭示ＲｃＭｓｃ２基因在蓖麻的生长发育和应答冷胁迫过程中的功能提供了理论参考ꎮ关键词:蓖麻ꎬＲｃＭｓｃ２ꎬ基因克隆ꎬ表达特性ꎬ冷胁迫中图分类号:Ｑ９４３㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀文章编号:１０００￣３１４２(２０２３)０２￣０３３６￣１１ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｉｎｃａｓｔｏｒ(Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ)ＧＥＮＧＬｉｕｔｉｎｇ１ꎬＬＩＹａｎｘｉａｏ１ꎬＺＨＡＮＧＣｈｕｎｌａｎ２ꎬＹＵＺｈｏｎｇｙｏｎｇ３ꎬＷＡＮＧＧｕｉｌｉｎｇ４ꎬＸＩＡＮＧＤｉａｎｊｕｎ１ꎬＬＩＵＰｅｎｇ１∗(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＭｉｎｚｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＴｏｎｇｌｉａｏ０２８０００ꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＦｏｏｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＭｉｎｚｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＴｏｎｇｌｉａｏ０２８０００ꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＨｏｎｇｂｏＳｅｅｄＩｎｄｕｓｔｒｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＬｉｍｉｔｅｄＣｏｍｐａｎｙꎬＴｏｎｇｌｉａｏ０２８０００ꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＺｈａｌａｎｔｕｎＧｒｅｅｎＩｎｄｕｓｔｒｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｅｎｔｅｒꎬＺｈａｌａｎｔｕｎ１６２６５０ꎬＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｇ２/ｍｉｔｏｔｉｃ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃｃｙｃｌｉｎ￣２(Ｍｓｃ２)ꎬａｓａｋｅｙｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｓｔｒｅｓｓｉｎｈｉｇｈｅｒｐｌａｎｔｓꎬｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｓｔｒｅｓｓｅｓ.ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｗｈｉｃｈｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｃａｓｔｏｒｌｅａｆｔｉｓｓｕｅꎬｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓꎬａｎｄｔｈｅ收稿日期:２０２２－０８－２４基金项目:国家自然科学基金(３１８６０３８９ꎬ３２０６０４９２)ꎻ内蒙古自治区自然科学基金(２０２２ＭＳ０３０５７ꎬ２０２０ＬＨ０３００６)ꎮ第一作者:耿柳婷(１９９７－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为作物遗传改良与种质创新ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)２２１４８８３３０４＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ∗通信作者:刘鹏ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向为作物遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｍｉｎｄａｌｉｕｐｅｎｇ＠１２６.ｃｏｍꎮｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｉｎｔｉｓｓｕｅａｎｄａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｑＲＴ￣ＰＣＲ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ:(１)ＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｗａｓｌｏｃａｔｅｄｉｎｔｈｅｌｏｎｇａｒｍｏｆＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅ５ｉｎｃａｓｔｏｒꎬａｎｄｉｔｓＣＤＳｒｅｇｉｏｎｗａｓ１２９９ｂｐꎬｅｎｃｏｄｉｎｇ４３２ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ.(２)ＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎｈａｓｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｄｏｍａｉｎｏｆｃｙｃｌｉｎｆａｍｉｌｙꎬｗｈｉｃｈｗａｓａｎｕｎｓｔａｂｌｅａｃｉｄｉｃｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃｐｒｏｔｅｉｎｗｉｔｈｏｕｔｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎａｎｄｓｉｇｎａｌｐｅｐｔｉｄｅꎬａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｉｖｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｗａｓ４９.３８ｋＤ.(３)ＴｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙａｎｄｔｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｍａｉｎｌｙα￣ｈｅｌｉｘａｎｄｒａｎｄｏｍｃｏｉｌ.(４)ＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎｈａｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｓｅｑｕｅｎｃｅｈｏｍｏｌｏｇｙｗｉｔｈＣＹＣＢ２ｐｒｏｔｅｉｎｏｆＪａｔｒｏｐｈａｃｕｒｃａｓａｎｄＨｅｖｅａｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓꎬａｎｄｗａｓｃｌｕｓｔｅｒｅｄｉｎｔｏＧｒｏｕｐⅡ.(５)３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｌｏｃａｌｉｚｅｄｔｏｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓ.(６)ＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎａｌｌｔｉｓｓｕｅｓｏｆｃａｓｔｏｒꎬａｎｄｍａｉｎｌｙｐｌａｙｅｄａｒｏｌｅｉｎｒｏｏｔｓａｎｄｓｔｅｍｓꎻａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｃｏｕｌｄｂｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄ(ＡＢＡ)ꎬｓａｌｔꎬｄｒｏｕｇｈｔａｎｄｌｏｗｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔꎬａｎｄｔｈｅｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｔｏｌｏｗｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓｔｒｅｓｓｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｓｅｎｓｉｔｉｖｅ.ＩｎｓｕｍｍａｒｙꎬｔｈｉｓｓｔｕｄｙｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｌｙａｎａｌｙｚｅｄｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅꎬａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｒｅｖｅａｌｉｎｇｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｉｎｃａｓｔｏｒｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｃｏｌｄｓｔｒｅｓｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｃａｓｔｏｒꎬＲｃＭｓｃ２ꎬｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇꎬｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬｃｏｌｄｓｔｒｅｓｓ㊀㊀蓖麻(Ｒｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ)是一种产于非洲的大戟科多年生草本植物ꎬ可以在热带和温带地区种植(Ｍａｇｈｕｌｙｅｔａｌ.ꎬ２０１５)ꎮ因蓖麻油中含有丰富的蓖麻油酸ꎬ现已被列为第二代生物质绿色能源的重要原料(Ｔｒａｂｅｌｓｉｅｔａｌ.ꎬ２０１８)ꎮ蓖麻拥有极强的抗旱和耐盐碱能力ꎬ可以在较贫瘠的土地上生长ꎬ但在苗期易受细菌感染和冷胁迫的危害ꎬ最终导致植株成活率降低和籽粒品质下降(Ｓｅｖｅｒｉｎｏｅｔａｌ.ꎬ２０１２ꎻＷａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２２)ꎮ内蒙古通辽位于中纬度地区ꎬ在作物的生长期这里平均最低气温最高为１６.１ħꎬ最低仅有１２.７ħꎬ这种低温环境严重影响着蓖麻种子的萌发㊁生长和生物量的积累(Ｔａｏｅｔａｌ.ꎬ２０２０)ꎮ因此ꎬ如何改善低温环境对蓖麻生长发育的影响并选育出多抗非生物逆境胁迫的新品种ꎬ对未来的蓖麻种植产业及满足工业对蓖麻油的需求具有重要意义ꎮ细胞分裂是生物生长发育中最基本的过程(ｖａｎＬｅｅｎｅｅｔａｌ.ꎬ２０１０)ꎮ真核细胞的细胞周期进程主要是由细胞周期蛋白依赖性激酶(ＣＤＫ)的蛋白激酶家族控制(Ｓｕｒｙａｄｉｎａｔａｅｔａｌ.ꎬ２０１０)ꎮ根据生物体的类别不同ꎬ细胞周期蛋白也根据它们在细胞周期中发挥作用的阶段分为细胞周期蛋白Ｍ和细胞周期蛋白Ｇ１(Ｃａｎａｕｄｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮＧ１周期蛋白包括Ｃ㊁Ｄ㊁Ｅ和Ｇ共４种类型以调节Ｇ１￣Ｓ转换ꎬＭ周期蛋白包括Ａ和Ｂ共２种类型ꎬ可以在Ｓ￣Ｍ转变㊁Ｇ２￣Ｍ过渡阶段和Ｍ阶段内起作用(Ｋõｉｖｏｍäｇｉｅｔａｌ.ꎬ２０１１)ꎮＧ２/有丝分裂特异性细胞周期蛋白￣２(Ｇ２/ｍｉｔｏｔｉｃ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃｃｙｃｌｉｎ￣２ꎬＭｓｃ２)属于Ｂ型细胞周期蛋白ꎬ可通过在Ｇ２期到Ｍ期的转变㊁Ｇ２期内和Ｍ期内的短暂时间内表达以响应环境变化(Ｈéｇａｒａｔｅｔａｌ.ꎬ２０２０)ꎮ最近研究发现ꎬＣＹＣＢ２基因可能参与植物的盐胁迫㊁重金属胁迫㊁脱落酸(ａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄꎬＡＢＡ)和冷胁迫下的表达(Ｈｕｅｔａｌ.ꎬ２０１０ꎻＸｕｅｔａｌ.ꎬ２０１０ꎻＨｕａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０１３ꎻＦａｎｅｔａｌ.ꎬ２０２２)ꎬ烟草(Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ)ＮｔＣｙｃＢ２基因随着ＮａＣｌ处理时间的延长表达量减少ꎬ而敲除ＮｔＣｙｃＢ２基因可以提高植株在ＮａＣｌ胁迫下的抵抗力(Ｙａｎｅｔａｌ.ꎬ２０２１)ꎻ高粱(Ｓｏｒｇｈｕｍｂｉｃｏｌｏｒ)的转录组研究发现ＣＹＣＢ２基因在１００μｍｏｌＬ￣１和１５０μｍｏｌＬ￣１镉(Ｃｄ)金属离子胁迫下表达量均为上升趋势ꎬ说明高粱的ＣＹＣＢ２基因可能参与抗重金属胁迫调控机制(Ｒｏｙｅｔａｌ.ꎬ２０１６)ꎻ拟南芥ａｔｌ１７突变株与野生型植株相比ꎬ在ＡＢＡ不同浓度梯度处理下ꎬＣＹＣＢ２ꎻ１在ａｔｌ１７的表达量显著高于ＷＴꎬ表明可能通过ＡＢＡ调控机制抑制主根的生长而抵御逆境(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２０１０)ꎻ甘蓝(Ｂｒａｓｓｉｃａｏｌｅｒａｃｅａ)的冷胁迫试验表明ꎬＣＹＣＢ２基因在２ｄ和７ｄ的表达模式差异显著ꎬＣＹＣＢ２ꎻ１㊁ＣＹＣＢ２ꎻ２㊁ＣＹＣＢ２ꎻ３和ＣＹＣＢ２ꎻ４的Ｌｏｇ２值均高于对照ꎬ但处理７ｄ的ＣＹＣＢ２表达量显著低于２ｄ的ꎬ表明ＣＹＣＢ２基因可以在冷胁迫的短期内提高植株的细胞分化能力来减轻冷胁迫带来的伤害('Ｃｏｓｉｃ'ｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮ但是ꎬＣＹＣＢ２基因在蓖麻中的潜在功能及调控机制研究较少ꎬ而蓖麻作为重要的生物原料ꎬ研究其抗逆机制就显得尤为重要ꎮ蓖麻转录组数据中表达上调的ＤＥＧｓ有８４８个ꎬ而ＲｃＭｓｃ２(ＸＰ＿００２５２１７０４.１)在低温(相较于适温２５ħ)下的表达显著上调ꎬ并且作为拟南芥ＣＹＣＢ２ꎻ３的同源基因ꎬ很可能在蓖麻的冷适应过程中发挥作用(白雪等ꎬ２０１９)ꎮ因此ꎬ我们克隆了ＲｃＭｓｃ２基因ꎬ用烟草叶片细胞明确ＲｃＭｓｃ２基因的亚细胞位置ꎬ并通过ｑＲＴ￣ＰＣＲ技术分析其在不同７３３２期耿柳婷等:蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析胁迫下的表达模式ꎮ本研究旨在探讨以下问题: (１)ＲｃＭｓｃ２蛋白理化性质㊁结构及物种间的进化关系ꎻ(２)蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达模式及非生物胁迫下的表达模式ꎻ(３)蓖麻ＲｃＭｓｃ２在冷胁迫过程中的潜在功能ꎮ本研究可为蓖麻的抗低温育种提供潜在的基因资源ꎬ同时也可为解析蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因在应对冷胁迫方面的调控机制奠定基础ꎮ１㊀材料与方法１.１试验材料通篦５号由通辽市农牧科学研究所提供ꎮ植物总ＲＮＡ提取试剂盒(ＭｏｎｚｏｌＴＭＲｅａｇｅｎｔ)㊁反转录试剂盒(ＭｏｎＳｃｒｉｐｔＴＭＲＴＩＩＩＡｌｌ￣ｉｎ￣ＯｎｅＭｉｘｗｉｔｈｄｓＤＮａｓ)购自莫纳生物公司ꎮＴ￣载体(ｐＭＤＴＭ１８￣Ｔｖｅｃｔｏｒ)㊁限制性内切酶(ＢｓａＩ)和ＤＮＡ连接试剂盒(ＤＮＡＬｉｇａｔｉｏｎＫｉｔ)购自宝日医生物公司ꎮ高保真ＰＣＲ酶(ＫＯＤＭａｓｔｅｒＭｉｘ)㊁ＰＣＲ产物回收和纯化试剂盒购自天根生化科技有限公司ꎮＭａｘｉｍａＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ和２ＸＳＧＦａｓｔｑＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ购自赛默飞世尔科技(上海)公司ꎮ大肠杆菌感受态(ＤＨ５α)㊁保真酶(２ˑＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ)㊁引物合成和测序由生工生物工程(上海)股份有限公司完成ꎮ１.２材料处理将健康的蓖麻种子消毒后置入适量的无菌水中ꎬ于３０ħ催芽３ｄꎮ出芽后将其平均分成４份ꎬ并整齐地摆放在水培盘中ꎬ待２片子叶展开后开始浇灌１/４Ｈｏａｇｌａｎｄ溶液ꎬ每日补充２００ｍＬꎮ当幼苗长至４叶龄时ꎬ剪取幼苗的组织(根㊁茎㊁子叶和真叶)以检测ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达量ꎻ然后分别对其进行４ħ㊁１５０ｍｍｏｌＬ￣１ＮａＣｌ㊁１０％ＰＥＧ６０００和１００μｍｏｌＬ￣１ＡＢＡ胁迫ꎬ经时间梯度(０㊁２㊁４㊁８㊁１２㊁２４㊁３０㊁４８ｈ)处理后采集幼苗的真叶并迅速存于液氮中ꎬ冷冻２４ｈ后转移至－７０ħ冰箱备用ꎮ１.３ＲｃＭｓｃ２基因的克隆１.３.１总ＲＮＡ提取和第一链ｃＤＮＡ的合成㊀参照ＭｏｎｚｏｌＴＭＲｅａｇｅｎｔ试剂盒的说明书操作步骤ꎬ提取４ħ处理１２ｈ的蓖麻组织的总ＲＮＡꎬ并检测纯度ꎮ以提取的ＲＮＡ作为模板ꎬ参照ＭｏｎＳｃｒｉｐｔＴＭＲＴＩＩＩＡｌｌ￣ｉｎ￣ＯｎｅＭｉｘｗｉｔｈｄｓＤＮａｓ试剂盒说明书反转录合成第一链ｃＤＮＡꎬ作为克隆ＲｃＭｓｃ２基因的模板ꎮ１.３.２ＲｃＭｓｃ２基因的克隆及测序㊀根据ＮＣＢＩ数据库公布的ＲｃＭｓｃ２基因(ＸＰ＿００２５２１７０４.１)的ＣＤＳ区设计引物ＲｃＭｓｃ２￣Ｆ｜ＲｃＭｓｃ２￣Ｒ(表１)ꎮ以蓖麻ｃＤＮＡ为模板ꎬ使用高保真酶(ＫＯＤＭａｓｔｅｒＭｉｘ)扩增ＲｃＭｓｃ２基因的ＣＤＳ序列ꎬＰＣＲ扩增反应程序:９４ħ预变性４ｍｉｎꎻ９４ħ变性３０ｓꎬ５８ħ退火４５ｓꎬ７２ħ延伸９０ｓꎬ３５个循环ꎻ最后延伸１０ｍｉｎꎮ经电泳检测后将符合大小的片段回收ꎬ在３ᶄ端加Ａ碱基后利用ＤＮＡ纯化试剂盒纯化产物后连接至Ｔ载体ꎬ将ｐＭＤＴＭ１８￣Ｔ￣ＲｃＭｓｃ２热击转化ＤＨ５αꎬ在Ｋａｎ＋培养基上筛选出阳性克隆送至生工生物工程(上海)股份有限公司测序ꎮ表１㊀本研究所用引物Ｔａｂｌｅ１㊀Ｐｒｉｍｅｒｓｕｓｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ引物名称Ｐｒｉｍｅｒｎａｍｅ引物序列(５ᶄ￣３ᶄ)Ｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅ(５ᶄ￣３ᶄ)用途ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＲｃＭｓｃ２￣ＦＴＴＧＡＣＴＧＧＣＴＴＡＴＴＧＡＧＧＴＧ基因克隆ＧｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇＲｃＭｓｃ２￣ＲＣＡＡＣＣＡＡＣＣＣＣＡＣＣＡＡＣＴＧＡＲｃＭｓｃ２￣ＦｘＣＧＡＧＣＡＣＴＡＡＴＧＧＧＴＴＴＧＧＡ实时荧光定量分析ｑＲＴ￣ＰＣＲＲｃＭｓｃ２￣ＲｘＣＣＡＴＣＡＡＴＡＴＣＣＡＣＡＡＴＡＧＧＣＴＣＡｃｔｉｎ￣ＦＴＴＣＣＣＡＧＧＣＡＴＴＧＣＴＧＡＴＡＧＡｃｔｉｎ￣ＲＡＣＡＴＣＴＧＣＴＧＧＡＡＧＧＴＧＣＴＧＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ￣ＦｘＣＡＧＴＧＧＴＣＴＣＡＣＡＡＣＡＴＧＡＡＴＧＴＡＴＣＴＧＡＴＧＡＧＡＡ亚细胞定位ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ￣ＲｘＣＡＧＴＧＧＴＣＴＣＡＴＡＣＡＴＧＡＣＴＧＡＧＴＣＴＣＴＡＡＴＡＧＡＡ㊀注:下划线是ＢｓａＩ酶切位点ꎬ左侧是保护碱基ꎬ右侧是荧光表达载体的末端同源序列ꎮ㊀Ｎｏｔｅ:ＢｏｔｔｏｍｌｉｎｅｉｓｔｈｅＢｓａＩｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅꎬｔｈｅｌｅｆｔｉｓｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｂａｓｅꎬａｎｄｔｈｅｒｉｇｈｔｉｓｔｈｅｅｎｄｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒ.１.４ＲｃＭｓｃ２蛋白质的生物信息学分析借助ＥｘＰＡＳｙ(ｈｔｔｐｓ://ｗｅｂ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/ｔｒａｎｓｌａｔｅ/)工具将ＲｃＭｓｃ２基因的编码序列翻译成蛋白序列ꎮ在ＮＣＢＩ(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ)下载蓖麻的全基因组㊁蛋白组和注释文件ꎬ将ＲｃＭｓｃ２蛋白作为靶序列进行本地ＢＬＡＳＴｐꎬ以明确ＲｃＭｓｃ２８３３广㊀西㊀植㊀物４３卷基因的具体位置ꎮ使用蛋白分析网站ＥｘＰＡＳｙ￣ＰＲＯＳＩＴＥ(ｈｔｔｐｓ://ｐｒｏｓｉｔｅ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ)分析ＲｃＭｓｃ２蛋白质的理化性质和亲水/疏水性ꎮ借助ＮＣＢＩ￣ＣＤ￣ＳＥＡＲＣＨ(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ/ｂｗｒｐｓｂ/ｂｗｒｐｓｂ.ｃｇｉ)㊁ＰＳＯＲＴ(ｈｔｔｐ://ｐｓｏｒｔ.ｈｇｃ.ｊｐ/)和ＭｏｔｉｆＳｃａｎ(ｈｔｔｐｓ://ｍｙｈｉｔｓ.ｓｉｂ.ｓｗｉｓｓ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｍｏｔｉｆ＿ｓｃａｎ/)工具分别预测蛋白的结构域㊁亚细胞位置和生物活性位点ꎮ使用在线工具ＳｉｇｎａｌＰ５.０(ｈｔｔｐｓ://ｓｅｒｖｉｃｅｓ.ｈｅａｌｔｈｔｅｃｈ.ｄｔｕ.ｄｋ/ｓｅｒｖｉｃｅ.ｐｈｐ?ＳｉｇｎａｌＰ￣５.０)㊁ＤｅｅｐＴＭＨＭＭ(ｈｔｔｐｓ://ｄｔｕ.ｂｉｏｌｉｂ.ｃｏｍ/ＤｅｅｐＴＭＨＭＭ)和ＭｏｔｉｆＳｃａｎ(ｈｔｔｐｓ://ｍｙｈｉｔｓ.ｓｉｂ.ｓｗｉｓｓ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｍｏｔｉｆ＿ｓｃａｎ)分别预测该蛋白的信号肽㊁跨膜域和生物活性位点ꎮ利用ＵｎｉｐｒｏｔＫＢ数据库(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｕｎｉｐｒｏｔ.ｏｒｇ/ｈｅｌｐ/ｕｎｉｐｒｏｔｋｂ)在线ＢＬＡＳＴｐ程序下载ＲｃＭｓｃ２蛋白质的同源序列ꎬ使用ＣｌｕｓｔａｌＷ和ＭＥＧＡ１１.０软件对下载的序列进行比对及可视化分析ꎬ将多序列比对结果提交至ＥＮＤｓｃｒｉｐｔ/ＥＳＰｒｉｐｔ(ｈｔｔｐｓ://ｅｓｐｒｉｐｔ.ｉｂｃｐ.ｆｒ/ＥＳＰｒｉｐｔ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ＥＳＰｒｉｐｔ.ｃｇｉ)网站进行美化并将进化树提交至ｉＴＯＬ(ｈｔｔｐｓ://ｉｔｏｌ.ｅｍｂｌ.ｄｅ)网站进行美化ꎮ蛋白质的二级结构在ＳＯＰＭＡ(ｈｔｔｐｓ://ｎｐｓａ￣ｐｒａｂｉ.ｉｂｃｐ.ｆｒ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｓｅｃｐｒｅｄ＿ｓｏｐｍａ.ｐｌ)进行可视化预测ꎮ将ＲｃＭｓｃ２蛋白质提交至ＳＷＩＳＳ￣ＭＯＤＬＥ(ｈｔｔｐｓ://ｓｗｉｓｓｍｏｄｅｌ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/)预测其三级结构并借助ＳＡＶＥＳｖ６.０(ｈｔｔｐｓ://ｓａｖｅｓ.ｍｂｉ.ｕｃｌａ.ｅｄｕ/)工具对预测模型打分ꎬ检测合格后对其蛋白质的三级结构进行分析ꎮ１.５ＲｃＭｓｃ２基因的表达分析根据ＲｃＭｓｃ２基因的ＣＤＳ序列设计ｑＲＴ￣ＰＣＲ引物ＲｃＭｓｃ２￣Ｆｘ｜ＲｃＭｓｃ２￣Ｒｘ(表１)ꎬ以ＲｃＡｃｔｉｎ(ＮＣ＿０６３２６２.１)基因作为内参基因ꎬ分析ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达模式及胁迫处理下的表达模式ꎮ以Ｔｒｉｚｏｌ法提取蓖麻组织的总ＲＮＡꎬ并反转录成单链ｃＤＮＡ作为ＰＣＲ扩增的模板ꎬ严格按照２ＸＳＧＦａｓｔｑＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ的说明书操作步骤ꎬ在ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０Ⅱ型ＰＣＲ仪上完成对基因的扩增ꎮ反应程序:预变性９５ħ３ｍｉｎꎬ变性９５ħ５ｓꎬ退火和延伸６０ħ３０ｓꎬ４５个循环ꎮ用２－(ΔΔＣｔ)法计算ＲｃＭｓｃ２基因的相对表达量ꎮ１.６ＲｃＭｓｃ２蛋白质亚细胞定位使用限制性酶ＢｓａＩ对ｐＣＡＭＢＩＡ２３００￣ＣａＭＶ３５Ｓ￣ＧＦＰ进行酶切后回收目的片段ꎮ将ｐＭＤＴＭ１８￣Ｔ￣ＲｃＭｓｃ２作为重组ＤＮＡ的模板ꎬ扩增引物为ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ￣Ｆｘ｜ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ￣Ｒｘꎮ使用ＫＯＤＭａｓｔｅｒＭｉｘ先将模板序列连接在ｐＫＹ￣３５Ｓ￣ＧＦＰ载体上ꎬ再将产物转化至ＤＨ５α感受态细胞ꎬ最后筛选出阳性克隆并送至生工生物工程(上海)股份有限公司测序ꎮ确认测序结果正确后将ｐＫＹ￣３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ载体转至农杆菌中ꎬ最终在烟草叶片的表皮细胞中瞬时表达以确定ＲｃＭｓｃ２基因的亚细胞位置ꎮ２㊀结果与分析２.１ＲｃＭｓｃ２基因的克隆根据前期转录组数据信息ꎬ提取蓖麻叶片总ＲＮＡꎬ质量符合反转录操作要求(图１:Ａ)ꎮ并以ｃＤＮＡ为模板进行目的基因的扩增ꎬ得到大约１３００ｂｐ的条带(图１:Ｂ)ꎬ并经过Ｔ￣Ａ克隆㊁转化㊁阳性菌落的克隆和测序ꎬ得到１２９９ｂｐ的ＯＲＦꎬ推导其编码为４３２个ａａ(图２)ꎬ并命名为ＲｃＭｓｃ２ꎬ本地ＢＬＡＳＴｐ检索发现其定位在第５号染色体长臂ꎮＡ.蓖麻总ＲＮＡ的提取ꎻＢ.ＲｃＭｓｃ２基因ＣＤＳ区扩增ꎮ１.ＰＣＲ产物ꎻ２.ＤＬ２０００ＤＮＡＭａｒｋｅｒꎮＡ.ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌＲＮＡｆｒｏｍＲｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓꎻＢ.ＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣＤＳｒｅｇｉｏｎｆｒｏｍＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅ.１.ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎꎻ２.ＤＬ２０００ＤＮＡＭａｒｋｅｒ.图１㊀总ＲＮＡ的提取和ＲｃＭｓｃ２基因的扩增Ｆｉｇ.１㊀ＴｏｔａｌＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ２.２ＲｃＭｓｃ２蛋白的生物信息学分析２.２.１ＲｃＭｓｃ２蛋白的基本理化性质分析㊀Ｐｒｏｔｐａｒａｍ工具预测结果显示ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白的分子式为Ｃ２１８６Ｈ３４２６Ｎ５８４Ｏ６６２Ｓ２８ꎬ共计６８８６个原子ꎬ相对分子质量为４９.３８ｋＤꎬ理论等电点为５.２６ꎬ说明ＲｃＭｓｃ２蛋白呈酸性ꎻ该蛋白由２０种氨基酸组成ꎬ其中谷氨酸(Ｇｌｕ)数量最庞大ꎬ占总数的９％ꎬ而色氨酸(Ｔｒｐ)数量最少ꎬ仅占总数的０.７％ꎬ带负电荷的氨基酸(Ａｓｐ＋Ｇｌｕ)有６０个ꎬ带正电荷的氨基酸(Ａｒｇ＋Ｌｙｓ)有４６个(图２)ꎻ不稳定系数为４５.２４(>４０阈值)ꎬ表明该蛋白是不稳定蛋白ꎻ总平均疏水性为－０.３５３(<０)ꎬ预测该蛋白是亲水蛋白ꎻ蛋白的脂肪指数为８１.６９ꎮ另外ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白拥有一９３３２期耿柳婷等:蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析个Ｃｙｃｌｉｎ＿Ｃ(ｐｆａｍＩＤ:ＰＦ０２９８４)结构域和一个Ｃｙｃｌｉｎ＿Ｎ(ｐｆａｍＩＤ:ＰＦ００１３４)ꎬ是Ｂ型细胞周期蛋白(ｃｙｃｌｉｎ)家族的一员(图３)ꎮ２.２.２ＲｃＭｓｃ２蛋白的多序列对比及同源性分析㊀采用线上ＢＬＡＳＴ比对发现ꎬ麻风树(ＪａｔｒｏｐｈａｃｕｒｃａｓꎬＸＰ＿０１２０６５３７５.１)㊁巴西橡胶树(ＨｅｖｅａｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓꎬＸＰ＿０２１６４５０３４.１)㊁柳树(ＳａｌｉｘｓｕｃｈｏｗｅｎｓｉｓꎬＸＰ＿０２４４５６９０７.１)㊁可可树(ＴｈｅｏｂｒｏｍａｃａｃａｏꎬＥＯＸ９０６８２.１)㊁榴莲(ＤｕｒｉｏｚｉｂｅｔｈｉｎｕｓꎬＸＰ＿０２２７４０３２７.１)㊁棉花(ＧｏｓｓｙｐｉｕｍｍｕｓｔｅｌｉｎｕｍꎬＴＹＩ８８７２８.１)㊁大豆(ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘꎬＮＰ＿００１３５２０３５.１)和豇豆(ＶｉｇｎａａｎｇｕｌａｒｉｓꎬＸＰ＿０１４５２１１７７.１)与该蛋白的序列一致性依次是８７.４％㊁８５.５％㊁８１.１％㊁７９.７％㊁７９.７％㊁７７.５％㊁７２.７％和７２.７％ꎬ表明细胞周期蛋白在物种间高度保守ꎬ特别是Ｎ端蛋白的一致性较高ꎬ说明不同物种间的蛋白功能可能相似(图４)ꎮ另外ꎬ位于结构域内部的第２８３位氨基酸是细胞周期蛋白底物特异性位点ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白是Ｅ(谷氨酸)ꎬ而其他植物是Ｋ(赖氨酸)ꎬ这可能导致蓖麻ＲｃＭｓｃ２蛋白与其他植物的ＣＹＣＢ２蛋白拥有不同的底物特异性ꎮＭＥＧＡ１１.０中邻接法构建的进化树结果显示(图５)ꎬ８种植物的细胞周期蛋白共被聚为３类ꎮ同处于ＧｒｏｕｐⅠ大豆和豇豆的蛋白在进化中钝化ꎬ步长值为１００％ꎻＧｒｏｕｐⅡ中蓖麻与麻风树和巴西橡胶树的步长值为９９.９％ꎬ与多序列比对结果相同ꎻＧｒｏｕｐⅢ中棉花与榴莲和可可树的步长值为１００％ꎮＧｒｏｕｐⅠ㊁ＧｒｏｕｐⅡ和ＧｒｏｕｐⅢ分别对应豆科㊁大戟科和锦葵科植物ꎬ足以说明此进化树构建结果准确ꎬ表明ＣＹＣＢ２蛋白在物种间的进化高度保守ꎮ因此ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白与麻风树和巴西橡胶树的序列一致性最高ꎬ亲缘关系最近ꎮ２.２.３ＲｃＭｓｃ２蛋白的信号肽、跨膜域及生物活性位点预测㊀ＳｉｇｎａｌＰ５.０预测ＲｃＭｓｃ２蛋白中存在信号肽的可能性是０.００１２ꎬ推测该蛋白中无信号肽结构ꎮＤｅｅｐＴＭＨＭＭ预测结果显示ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白的４３２个氨基酸残基上均无从外到内的跨膜域ꎬ因此推测ＲｃＭｓｃ２蛋白不具备跨膜能力ꎮＭｏｔｉｆＳｃａｎ预测显示在ＲｃＭｓｃ２蛋白内部有６个潜在的Ｎ￣糖基化位点(分别位于第２~第５位㊁第１８９~第１９２位㊁第３０３~第３０６位㊁第３７０~第３７３位㊁第３７８~第３８１位和第４１１~第４１４位氨基酸)ꎬ４个潜在的酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(分别位于第６３~第６６位㊁第１４２~第１４５位㊁第３３７~第３４０位和第４１９~第４２２位氨基酸)ꎬ３个潜在的肉豆蔻基Ｎ￣肉豆蔻酰化位点(分别位于第２０~第２５位㊁第４８~第５３位和第６１~第６６位氨基酸)和７个潜在的蛋白激酶Ｃ磷酸化位点(分别位于第８２~第８４位㊁第１００~第１０２位㊁第２８０~第２８２位㊁第３２２~第３２４位㊁第４００~第４０２位㊁第４１２~第４１４位和第４１８~第４２０位氨基酸)ꎬ共２０个生物活性位点ꎮ这些位点的预测为解释ＲｃＭｓｃ２蛋白在逆境中功能提供理论基础ꎮ２.２.４ＲｃＭｓｃ２蛋白的高级结构预测㊀分析ＲｃＭｓｃ２蛋白质的二级㊁三级结构ꎬ可为蛋白功能研究提供基础支撑ꎮＲｃＭｓｃ２蛋白质的二级结构预测结果(图６)显示ꎬ它是由５２.５５％的α￣螺旋㊁４０.５１％的无规则卷曲㊁５.７９％的延伸链和１.１６％的β￣转角共同构成ꎮ从ＲｃＭｓｃ２蛋白质的三级结构预测图(图７:Ａ)中可以看出ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白主要由α￣螺旋构成ꎮＳＡＶＥＳｖ６.０模型检测工具结果(图７:Ｂ)显示ꎬ编码ＲｃＭｓｃ２蛋白的４３２个氨基酸残基中有９１.１％位于ｃｏｒｅ区域(红色区域>９０％ꎬＡ㊁Ｂ㊁Ｌ区)ꎬ８.９％位于次允许区域(ａ㊁ｂ㊁ｌ㊁ｐ区)ꎬ表明ＳＷＩＳＳ￣ＭＯＤＥＬ预测的此蛋白质三级结构模型具有可靠性ꎮ２.３ＲｃＭｓｃ２蛋白的亚细胞定位分析ＰＳＯＲＴ预测ＲｃＭｓｃ２蛋白的亚细胞定位在细胞核的可能性最大ꎮ因此ꎬ为了验证ＲｃＭｓｃ２蛋白亚细胞的具体位置ꎬ成功构建了由农杆菌(ＧＶ３１０３)介导的ｐＣＡＭＢＩＡ２３００￣ＣａＭＶ３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ表达载体ꎬ并在烟草表皮细胞中瞬时表达ꎮ结果(图８)显示ꎬ３５Ｓ￣ＧＦＰ的绿色荧光蛋白在细胞核㊁细胞质和细胞膜中均有分布(图８:Ａ－Ｄ)ꎬ而３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ中荧光蛋白则主要分布在细胞核和细胞膜(图８:Ｅ)ꎬ将结果合并后ꎬ叠加场中的３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ主要在烟草叶片的细胞核和细胞膜处有绿色荧光ꎬ但ＲｃＭｓｃ２定位在细胞核的可能性较大ꎬ与ＰＳＯＲＴ预测结果一致ꎬ可为后续证明ＲｃＭｓｃ２蛋白的抗逆功能提供依据ꎮ２.４ＲｃＭｓｃ２基因的表达特征分析２.４.１ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达模式分析㊀采用ｑＲＴ￣ＰＣＲ技术分析ＲｃＭｓｃ２基因在蓖麻不同组织中的表达水平(图９)ꎮ结果发现ꎬＲｃＭｓｃ２基因在种子和幼苗期均有表达ꎬ呈显著差异(Ｐ<０.０５)ꎮ其中ꎬＲｃＭｓｃ２基因在根中的表达量显著高于其他组织ꎬ表达量分别是子叶㊁茎㊁真叶的２.１３㊁１４.１１㊁１４.９４倍ꎮ这表明ＲｃＭｓｃ２基因拥有明显的组织表达特异性ꎬ并且有可能在根和茎中表达以抵御不利环境ꎮ２.４.２ＲｃＭｓｃ２基因的非生物胁迫表达模式分析㊀采用ｑＲＴ￣ＰＣＲ方法ꎬ研究蓖麻幼苗叶片的ＲｃＭｓｃ２０４３广㊀西㊀植㊀物４３卷图２㊀ＲｃＭｓｃ２基因ｃＤＮＡ序列及编码的氨基酸序列Ｆｉｇ.２㊀ｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｅｎｃｏｄｅｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅ图３㊀ＲｃＭｓｃ２蛋白的结构域预测结果Ｆｉｇ.３㊀ＤｏｍａｉｎｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎ１４３２期耿柳婷等:蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析红色背景表示相似性１００％ꎬ蓝色框表示相似性>９０％ꎻ标记处位于第２８３位ａａꎻ横线上侧表示ｃｙｃｌｉｎ结构域(１５６~３０１ａａ)ꎮＲｅｄｂａｃｋｇｒｏｕｎｄｉｎｄｉｃａｔｅｓ１００％ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙꎬｂｌｕｅｆｒａｍｅｉｎｄｉｃａｔｅｓｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ>９０％ꎻｍａｒｋｅｒｗａｓｌｏｃａｔｅｄａｔ２８３ａａꎻｔｈｅｕｐｐｅｒｓｉｄｅｏｆｔｈｅｈｏｒｉｚｏｎｔａｌｌｉｎｅｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｃｙｃｌｉｎｄｏｍａｉｎ(１５６－３０１ａａ).图４㊀ＲｃＭｓｃ２氨基酸序列及其他植物同源序列间多重比较Ｆｉｇ.４㊀ＭｕｌｔｉｐｌｅｈｏｍｏｌｏｇｙｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓｏｆＲｃＭｓｃ２ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｗｉｔｈｏｔｈｅｒｐｌａｎｔｓ基因在低温(４ħ)㊁高盐(１５０ｍｍｏｌＬ￣１ＮａＣｌ)㊁脱落酸(１００μｍｏｌＬ￣１ＡＢＡ)和干旱(１０％ＰＥＧ６０００)胁迫下的表达特征ꎮ结果显示ꎬＲｃＭｓｃ２基因在不同胁迫下随着时间梯度而差异表达(图１０)ꎬ呈现出不同的表达模式ꎮＲｃＭｓｃ２基因积极应答盐胁迫和干旱胁迫ꎬ分别在２ｈ和４ｈ开始表达ꎬ且均在４ｈ出现峰值ꎬ表达量分别是对照组(０ｈ)的３.０９倍和４.８２倍(图１０:ＢꎬＤ)ꎻＲｃＭｓｃ２基因在低温和ＡＢＡ处理下呈延迟表达模式ꎬ均在１２ｈ出现最大值ꎬ而ＡＢＡ胁迫１２ｈ后ＲｃＭｓｃ２的表达量骤２４３广㊀西㊀植㊀物４３卷蓝色.ＧｒｏｕｐⅠꎻ粉色.ＧｒｏｕｐⅡꎻ紫色.ＧｒｏｕｐⅢꎮＢｌｕｅ.ＧｒｏｕｐＩꎻＰｉｎｋ.ＧｒｏｕｐⅡꎻＰｕｒｐｌｅ.ＧｒｏｕｐⅢ.图５㊀不同植物的ＣＹＣＢ２蛋白的聚类分析Ｆｉｇ.５㊀ＣｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣＹＣＢ２ｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｓ降ꎬ表明ＲｃＭｓｃ２基因在低温条件下的表达可能经ＡＢＡ激活而持续表达至４８ｈꎬ说明ＲｃＭｓｃ２可能是一个冷诱导基因ꎬ并且延迟１２ｈ后才被激活表达ꎮ３㊀讨论与结论细胞周期蛋白与ＣＤＫｓ复合以控制ＣＤＫｓ的活性㊁底物和亚细胞位置ꎬ在植物细胞周期的细胞分裂过程中发挥着极其重要的作用(Ｌｏｙｅｒ＆Ｔｒｅｍｂｌｅｙ.ꎬ２０２０)ꎬ而ＣＹＣＢ２蛋白主要在Ｇ２期发挥作用(Ａｙｄｉｎｏｇｌｕꎬ２０２０)ꎮＣＹＣＢ２基因隶属于多基因家族ꎬ在大豆(Ｆｏｎｓｅｃａ￣Ｇａｒｃíａｅｔａｌ.ꎬ２０２１)㊁苜蓿(Ｍｅｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２０)和拟南芥(Ｓｔｅｒｋｅｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)的基因组中分别有１３㊁１２和１１个ＣＹＣＢ２基因ꎬ并且都含有相同的结构域ꎬ即Ｃｙｃｌｉｎ＿Ｃ和Ｃｙｃｌｉｎ＿Ｎꎬ且已有相关功能方面的研究ꎬ而关于蓖麻的Ｍｓｃ２蛋白功能研究较少ꎮ因此ꎬ本研究根据蓖麻低温转录组数据克隆出ＲｃＭｓｃ２基因ꎬ发现其推导出４３２个氨基酸ꎬ虽然蛋白长度短于拟南芥紫色.无规则卷曲ꎻ绿色.β￣转角ꎻ蓝色.α￣螺旋ꎻ红色.延伸链ꎮＰｕｒｐｌｅ.ＲａｎｄｏｍｃｏｉｌꎻＧｒｅｅｎ.β￣ｔｕｒｎꎻＢｌｕｅ.α￣ｈｅｌｉｘꎻＲｅｄ.Ｅｘｔｅｎｄｅｄｃｈａｉｎ.图６㊀ＲｃＭｓｃ２蛋白质的二级结构预测Ｆｉｇ.６㊀ＳｅｃｏｎｄａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎＡ.ＲｃＭｓｃ２蛋白质的三级结构预测ꎻＢ.ＲｃＭｓｃ２蛋白质的三级结构的检测ꎮＡ.ＴｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎꎻＢ.ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｎｔｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎ.图７㊀ＲｃＭｓｃ２蛋白质的三级结构预测和检测Ｆｉｇ.７㊀ＰｒｅｄｉｃｔｉｏｎａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｅｒｔｉａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎ３４３２期耿柳婷等:蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析ＡꎬＥ.绿色荧光场ꎻＢꎬＦ.叶绿体荧光通道ꎻＣꎬＧ.明场ꎻＤꎬＨ.叠加场ꎮ３５Ｓ￣ＧＦＰ为空载体ꎬ３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰ为包含ＲｃＭｓｃ２的融合蛋白载体ꎮＡꎬＥ.ＧｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｆｉｅｌｄꎻＢꎬＦ.ＣｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｃｈａｎｎｅｌꎻＣꎬＧ.ＢｒｉｇｈｔｆｉｅｌｄꎻＤꎬＨ.Ｍｅｒｇｅｄｆｉｅｌｄ.３５Ｓ￣ＧＦＰｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｅｍｐｔｙｖｅｃｔｏｒｓꎬａｎｄ３５Ｓ￣ＲｃＭｓｃ２￣ＧＦＰｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈｅｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｖｅｃｔｏｒｓｗｉｔｈＲｃＭｓｃ２.图８㊀ＲｃＭｓｃ２蛋白在本氏烟草叶片中的亚细胞定位Ｆｉｇ.８㊀ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＲｃＭｓｃ２ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｌｅａｆｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆＮｉｃｏｔｉａｎａｂｅｎｔｈａｍｉａｎａ柱子上方的不同小写字母表示差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ下同ꎮＤｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｏｎｔｈｅｂａｒｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ(Ｐ<０.０５).Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ.图９㊀ＲｃＭｓｃ２基因的组织表达分析Ｆｉｇ.９㊀ＴｉｓｓｕｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅＣＹＣＢ２ꎻ３(ｖａｎＬｅｅｎｅｅｔａｌ.ꎬ２０１０)ꎬ但明显长于苜蓿的ＭｅｄｔｒＣｙｃＢ１ꎻ２㊁ＭｅｄｔｒＣｙｃＢ２ꎻ１和ＭｅｄｔｒＣｙｃＢ２ꎻ２蛋白(Ｍｅｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２０)ꎮＲｃＭｓｃ２蛋白的理化性质与大豆(Ｆｏｎｓｅｃａ￣Ｇａｒｃíａｅｔａｌ.ꎬ２０２１)㊁苜蓿(Ｍｅｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２０)㊁番茄(Ａｎｗａｒｅｔａｌ.ꎬ２０１９)和高粱(Ｒｏｙｅｔａｌ.ꎬ２０１６)等的细胞周期蛋白存在一定差异ꎬ这可能是导致不同物种的细胞周期蛋白参与不同逆境的直接原因ꎮＲｃＭｓｃ２蛋白的序列特征分析表明ꎬ该蛋白主要由α￣螺旋组成且是一个亲水蛋白ꎬ无信号肽结构ꎬ这与前人研究结果一致(Ｌａｒａ￣Ｎúñｅｚｅｔａｌ.ꎬ２０１５ꎻＳｕｉｅｔａｌ.ꎬ２０１６)ꎮ研究发现ꎬ高等植物的蛋白肉豆蔻酰化修饰可以帮助其应对多种不利环境(Ｉｓｈｉｔａｎｉｅｔａｌ.ꎬ２０００ꎻＰｏｄｅｌｌ＆Ｇｒｉｂｓｋｏｖꎬ２００４)ꎮ然而ꎬ受环境诱导表达的蛋白并非单独起作用ꎬ而是多个蛋白共同协作ꎬ从而提高植株在逆境中的活力(豆玉娟等ꎬ２０１４)ꎮＲｃＭｓｃ２蛋白存在３个Ｎ￣肉豆蔻酰化作用位点ꎬ极有可能在低温下诱导与低温相关的蛋白来共同合作来抵御低温环境ꎬ进而提高蓖麻植株在低温环境下的存活能力ꎮ研究显示ꎬＣＹＣＢ２蛋白在细胞核(Ｓａｂｅｌｌｉｅｔａｌ.ꎬ２０１４)㊁纺锤体(Ｂｕｌａｎｋｏｖａｅｔａｌ.ꎬ２０１３)㊁内质网㊁细胞质和细胞膜(Ｂｏｒｕｃｅｔａｌ.ꎬ２０１０ａ)中均有分布ꎬ而ＣＹＣＢ２型蛋白则主要定位在细胞核(Ｌａｒａ￣Ｎúñｅｚｅｔａｌ.ꎬ２０２１ꎻＣｈｕｎｅｔａｌ.ꎬ２０２１)ꎬ并会根据环境的不同来调整位置以适应逆境(Ｂｏｒｕｃｅｔａｌ.ꎬ２０１０ｂ)ꎬＲｃＭｓｃ２蛋白的亚细胞定位结果表明ꎬ该蛋白明显定位在细胞核ꎬ并且作为一个核蛋白ꎬ极可能在冷胁迫过程中发挥着重要作用ꎮ４４３广㊀西㊀植㊀物４３卷图１０㊀ＲｃＭｓｃ２基因在不同胁迫下的表达模式Ｆｉｇ.１０㊀ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆＲｃＭｓｃ２ｇｅｎｅｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔｒｅｓｓｅｓ㊀㊀研究显示ꎬ植物的ＣＹＣＢ２基因家族成员在应对多逆境胁迫时可以激发各种防御机制来提高植株的存活率(Ｈｕａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２０ꎻＺｈａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０２１)ꎮ同时ꎬ该家族成员还拥有明显的胁迫表达时空特异性ꎬ高粱的ＣＹＣＢ２基因的表达与Ｃｄ浓度呈显著正相关ꎬ即在１００μｍｏｌＬ￣１Ｃｄ处理下的表达量显著低于１５０μｍｏｌＬ￣１(Ｒｏｙｅｔａｌ.ꎬ２０１６)ꎻ甘蓝的４个ＣＹＣＢ２基因(ＣＹＣＢ２ꎻ１~ＣＹＣＢ２ꎻ４)在冷处理２~７ｄ基因表达量相似ꎬ均在第２天表达出现峰值('Ｃｏｓｉｃ'ｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮＲｃＭｓｃ２基因在ＡＢＡ㊁ＰＥＧ㊁４ħ和ＮａＣｌ胁迫下的叶片中均有表达ꎬ而该基因在高盐和干旱胁迫下的表达模式相仿ꎬ均在处理的前４ｈ就已经表达并出现峰值ꎬＲｃＭｓｃ２基因在脱落酸和低温处理下呈延迟表达模式ꎬ其中该基因在低温环境下持续表达至４８ｈꎬ表明该基因是一个冷调控基因ꎬ并且极有可能被ＡＢＡ激活ꎬ说明该基因响应多环境压力的诱导ꎬ但其对低温的响应时间更持久ꎮ另外ꎬ细胞周期蛋白家族基因成员还有明显的组织表达特异性ꎬ拟南芥(Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ)突变株(ｇｉｇ１和ｕｖｉ４)内的ＣＹＣＢ２ꎻ２和ＣＹＣＢ１ꎻ１在子叶和下胚轴中拥有明显的组织表达特异性ꎬ并且可能在地塞米松(ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ)的诱导下在下胚轴中起作用(Ｉｗａｔａｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎮ本研究表明ꎬ蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因在种子期与幼苗期均有表达ꎬ并且拥有明显的组织表达特异性ꎬ该基因极大可能在低温环境下在蓖麻的茎和叶中发挥作用ꎬ但在不同组织中调控机制还需深入探索ꎮ因此ꎬ本研究为蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因在应答冷胁迫方面的分子机制提供了参考ꎮ参考文献:ＡＮＷＡＲＲꎬＦＡＴＩＭＡＳꎬＭＡＴＴＯＯＡＫꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.Ｆｒｕｉｔａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｉｎｐｏｌｙａｍｉｎｅ￣ｒｉｃｈｔｏｍａｔｏｇｅｒｍｐｌａｓｍｉｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｖｉａａｍｅｄｌｅｙｏｆｃｅｌｌｃｙｃｌｅꎬｃｅｌｌｅｘｐａｎｓｉｏｎꎬａｎｄｆｒｕｉｔｓｈａｐｅｇｅｎｅｓ[Ｊ].Ｐｌａｎｔｓꎬ８(１０):３８７.ＡＹＤＩＮＯＧＬＵＦꎬ２０２０.ＥｌｕｃｉｄａｔｉｎｇｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｓｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡｓｉｎｍａｉｚｅ(ＺｅａｍａｙｓＬ.)ｌｅａｆｇｒｏｗｔｈｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｃｈｉｌｌｉｎｇｓｔｒｅｓｓ[Ｊ].Ｐｌａｎｔａꎬ２５１(２):１－１５.ＢＡＩＸꎬＣＡＯＳꎬＸＩＡＮＧＤＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃａｓｔｏｒｓｅｅｄｓａｔｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓｔａｇｅｕｎｄｅｒｌｏｗｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ[Ｊ].ＭｏｌＰｌａｎｔＢｒｅｅｄꎬ１７(１２):３８３４－３８４４.[白雪ꎬ曹帅ꎬ向殿军ꎬ等ꎬ２０１９.低温条件下蓖麻种子萌发期转录组分析[Ｊ].分子植物育种ꎬ１７(１２):３８３４－３８４４.]ＢＯＲＵＣＪꎬＭＹＬＬＥＥꎬＤＵＤＡＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１０ａ.ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｃｏｒｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｖｅａｌｓｎｏｖｅｌｃｅｌｌｄｉｖｉｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘｅｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１５２(２):５５３－５６５.ＢＯＲＵＣＪꎬＶＡＮＤＥＮＤＡＥＬＥＨꎬＨＯＬＬＵＮＤＥＲＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１０ｂ.ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｍｏｄｕｌｅｓｉｎｔｈｅＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｃｏｒｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｂｉｎａｒｙｐｒｏｔｅｉｎ￣ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｎｅｔｗｏｒｋ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌꎬ２２(４):１２６４－１２８０.ＢＵＬＡＮＫＯＶＡＰꎬＡＫＩＭＣＨＥＶＡＳꎬＦＥＬＬＮＥＲＮꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｍｅｉｏｔｉｃｃｙｃｌｉｎｓｒｅｖｅａｌｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｉｖｅｒｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａｍｏｎｇｐｌａｎｔｃｙｃｌｉｎｇｅｎｅｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＧｅｎｅｔꎬ９(５):ｅ１００３５０８.ＣＡＮＡＵＤＧꎬＢＲＯＯＫＳＣＲꎬＫＩＳＨＩＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.ＣｙｃｌｉｎＧ１５４３２期耿柳婷等:蓖麻ＲｃＭｓｃ２基因功能分析ａｎｄＴＡＳＣＣｒｅｇｕｌａｔｅｋｉｄｎｅｙｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌＧ２￣Ｍａｒｒｅｓｔａｎｄｆｉｂｒｏｔｉｃｍａｌａｄａｐｔｉｖｅｒｅｐａｉｒ[Ｊ].ＳｃｉＴｒａｎｓｌＭｅｄꎬ１１(４７６):ｅａａｖ４７５４.ＣＨＵＮＪＩꎬＫＩＭＳＭꎬＫＩＭＨꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２１.ＳｌＨａｉｒ２ｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅｉｎｉｔｉａｔｉｏｎａｎｄｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｏｆｔｙｐｅＩｔｒｉｃｈｏｍｅｓｏｎｔｏｍａｔｏｌｅａｖｅｓａｎｄｓｔｅｍｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ６２(９):１４４６－１４５９.Ｃ'ＯＳＩＣ'ＴꎬＲＡＳＰＯＲＭꎬＳＡＶＩＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ￣ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｏｖｅｒｔｈｅｔｉｍｅｃｏｕｒｓｅｏｆｏｎｅ￣ｓｔｅｐｄｅｎｏｖｏｓｈｏｏｔｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓｆｒｏｍｉｎｔａｃｔｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆｋｏｈｌｒａｂｉ[Ｊ].ＪＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ２３２:２５７－２６９.ＤＯＵＹＪꎬＣＡＯＦꎬＭＡＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１４.ＣｌｏｎｉｎｇｏｆｂＨＬＨ７８ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙｉｎｆｒｕｉｔｓｏｆｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｓｔｒａｗｂｅｒｒｙａｎｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒ[Ｊ].ＭｏｌＰｌａｎｔＢｒｅｅｄꎬ１２(３):４５６－４６５.[豆玉娟ꎬ曹飞ꎬ马跃ꎬ等ꎬ２０１４.栽培草莓果实中特异表达的ｂＨＬＨ７８基因的克隆及过量表达载体构建[Ｊ].分子植物育种ꎬ１２(３):４５６－４６５]ＦＡＮＷꎬＸＩＡＺＱꎬＬＩＵＣＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２２.ＩｏｎｏｍｉｃｓꎬｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃｓａｎｄｕｎｔａｒｇｅｔｅｄｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓａｎａｌｙｓｅｓｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｎｓｉｇｈｔｓｉｎｔｏｔｈｅＣｄｒｅｓｐｏｎｓｅａｎｄａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｍｕｌｂｅｒｒｙ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎＥｘｐＢｏｔꎬ１９６:１０４８２１.ＦＯＮＳＥＣＡ￣ＧＡＲＣÍＡＣꎬＮＡＶＡＮꎬＬＡＲＡＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２１.ＡｎＮＡＤＰＨｏｘｉｄａｓｅｒｅｇｕｌａｔｅｓｃａｒｂｏｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｄｕｒｉｎｇｒｏｏｔｎｏｄｕｌｅｓｙｍｂｉｏｓｉｓｉｎｃｏｍｍｏｎｂｅａｎ(Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓ)[Ｊ].ＢＭＣＰｌａｎｔＢｉｏｌꎬ２１(１):１－１６.ＨÉＧＡＲＡＴＮꎬＣＲＮＣＥＣＡꎬＳＵＡＲＥＺＰＥＲＥＤＯＲＯＤＲＩＧＵＥＺＭＦꎬｅｔａｌ.２０２０.ＣｙｃｌｉｎＡｔｒｉｇｇｅｒｓＭｉｔｏｓｉｓｅｉｔｈｅｒｖｉａｔｈｅＧｒｅａｔｗａｌｌｋｉｎａｓｅｐａｔｈｗａｙｏｒＣｙｃｌｉｎＢ[Ｊ].ＥＭＢＯＪꎬ３９(１１):ｅ１０４４１９.ＨＵＸꎬＣＨＥＮＧＸꎬＪＩＡＮＧＨꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１０.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｙｃｌｉｎｓｉｎｍａｉｚｅ(Ｚｅａｍａｙｓ)[Ｊ].ＧｅｎｅｔＭｏｌＲｅｓꎬ９(３):１４９０－１５０３.ＨＵＡＮＧＣＺꎬＸＵＬꎬＳＵＮＪＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.Ａｌｌｅｌｏｃｈｅｍｉｃａｌｐ￣ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄｉｎｈｉｂｉｔｓｒｏｏｔｇｒｏｗｔｈｖｉａｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＲＯＳａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｃｕｃｕｍｂｅｒ(ＣｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖｕｓＬ.)[Ｊ].ＪＩｎｔｅｇＡｇｒｉｃꎬ１９(２):５１８－５２７.ＨＵＡＮＧＹꎬＳＲＡＭＫＯＳＫＩＲＭꎬＪＡＣＯＢＢＥＲＧＥＲＪＷꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.ＴｈｅｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆＧ２ａｎｄＭｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｓｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙＢｃｙｃｌｉｎｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯＮＥꎬ８(１２):ｅ８０８６１.ＩＳＨＩＴＡＮＩＭꎬＬＩＵＪＰꎬＨＡＬＦＴＥＲＵꎬｅｔａｌ.ꎬ２０００.ＳＯＳ３ｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｐｌａｎｔｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｒｅｑｕｉｒｅｓＮ￣ｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｉｏｎａｎｄｃａｌｃｉｕｍｂｉｎｄｉｎｇ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌꎬ１２(９):１６６７－１６７８.ＩＷＡＴＡＥꎬＩＫＥＤＡＳꎬＡＢＥＮꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.ＲｏｌｅｓｏｆＧＩＧ１ａｎｄＵＶＩ４ｉｎｇｅｎｏｍｅｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ[Ｊ].ＰｌａｎｔＳｉｇｎａｌＢｅｈａｖꎬ７(９):１０７９－１０８１.ＫÕＩＶＯＭÄＧＩＭꎬＶＡＬＫＥꎬＶＥＮＴＡＲꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１１.ＤｙｎａｍｉｃｓｏｆＣｄｋ１ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｄｕｒｉｎｇｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅ[Ｊ].ＭｏｌＣｅｌｌꎬ４２(５):６１０－６２３.ＬＡＲＡ￣ＮÚÑＥＺＡꎬＲＯＭＥＲＯ￣ＳÁＮＣＨＥＺＤＩꎬＡＸＯＳＣＯ￣ＭＡＲÍＮＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２１.ＴｗｏｃｙｃｌｉｎＢｓａｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｍｏｄｕｌａｔｅｄｂｙｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｓｕｃｒｏｓｅｄｕｒｉｎｇｍａｉｚｅｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ[Ｊ].Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅꎬ１８２:１０８－１１９.ＬＡＲＡ￣ＮÚÑＥＺＡꎬＶＥＮＴＵＲＡ￣ＧＡＬＬＥＧＯＳＪＬꎬＡＮＡＹＡＡＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.ＰｈｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＳｉｃｙｏｓｄｅｐｐｅｉｄｕｒｉｎｇｔｏｍａｔｏｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｒｏｌｅｏｆＡＢＡａｎｄｃｅｌｌｗａｌｌｅｎｚｙｍｅｓ[Ｊ].ＢｏｔＳｃｉꎬ９３(４):７７１－７８１.ＬＯＹＥＲＰꎬＴＲＥＭＢＬＥＹＪＨꎬ２０２０.ＲｏｌｅｓｏｆＣＤＫ/Ｃｙｃｌｉｎｃｏｍｐｌｅｘｅｓｉｎｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｎｄｐｒｅ￣ｍＲＮＡｓｐｌｉｃｉｎｇ:ＣｙｃｌｉｎｓＬａｎｄＣＤＫ１１ａｔｔｈｅｃｒｏｓｓ￣ｒｏａｄｓｏｆｃｅｌｌｃｙｃｌｅａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ[Ｊ].ＳｅｍｉｎａｒｓＣｅｌｌＤｅｖＢｉｏｌꎬ１０７:３６－４５.ＭＡＧＨＵＬＹＦꎬＶＯＬＬＭＡＮＮＪꎬＬＡＩＭＥＲＭꎬ２０１５.Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ(ＪａｔｒｏｐｈａｃｕｒｃａｓꎬＭａｎｉｈｏｔｅｓｃｕｌｅｎｔａꎬＲｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓ)[Ｊ].ＡｐｐｌＰｌａｎｔＧｅｎｏｍＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ:８７－１１４.ＭＥＮＧＪꎬＰＥＮＧＭＤꎬＹＡＮＧＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｃｙｃｌｉｎｇｅｎｅｆａｍｉｌｙａｎｄｔｈｅｉｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｉｎＭｅｄｉｃａｇｏｔｒｕｎｃａｔｕｌａ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉꎬ２１(２４):９４３０.ＰＯＤＥＬＬＳꎬＧＲＩＢＳＫＯＶＭꎬ２００４.ＰｒｅｄｉｃｔｉｎｇＮ￣ｔｅｒｍｉｎａｌｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｉｏｎｓｉｔｅｓｉｎｐｌａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].ＢＭＣＧｅｎｏｍꎬ５(１):３７.ＲＯＹＳＫꎬＣＨＯＳＷꎬＫＷＯＮＳＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１６.Ｍｏｒｐｈｏ￣ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐｒｏｔｅｏｍｅｌｅｖｅｌｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｃａｄｍｉｕｍｓｔｒｅｓｓｉｎｓｏｒｇｈｕｍ[Ｊ].ＰＬｏＳＯＮＥꎬ１１(２):ｅ０１５０４３１.ＳＡＢＥＬＬＩＰＡꎬＤＡＮＴＥＲＡꎬＮＧＵＹＥＮＨＮꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１４.ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎꎬｒｅｇｕｌａｔｉｏｎａｎｄａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａＢ２￣ｔｙｐｅｃｙｃｌｉｎｉｎｍｉｔｏｔｉｃａｎｄｅｎｄｏｒｅｄｕｐｌｉｃａｔｉｎｇｍａｉｚｅｅｎｄｏｓｐｅｒｍ[Ｊ].ＦｒｏｎｔＰｌａｎｔＳｃｉꎬ５:５６１.ＳＥＶＥＲＩＮＯＬＳꎬＡＵＬＤＤＬꎬＢＡＬＤＡＮＺＩＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.Ａｒｅｖｉｅｗｏｎｔｈｅｃｈａｌｌｅｎｇｅｓｆｏｒｉｎｃｒｅａｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｃａｓｔｏｒ[Ｊ].ＡｇｒｏｎＪꎬ１０４(４):８５３－８８０.ＳＴＥＲＫＥＮＲꎬＫＩＥＫＥＮＳＲꎬＢＯＲＵＣＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.ＣｏｍｂｉｎｅｄｌｉｎｋａｇｅａｎｄａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｍａｐｐｉｎｇｒｅｖｅａｌｓＣＹＣＤ５ꎻ１ａｓａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｔｒａｉｔｇｅｎｅｆｏｒｅｎｄｏｒｅｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉꎬ１０９(１２):４６７８－４６８３.ＳＵＩＺＰꎬＷＡＮＧＴＹꎬＬＩＨＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１６.Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｅｐｔｉｄｅ￣ｅｎｃｏｄｉｎｇＯｓＣＥＰ６.１ｒｅｓｕｌｔｓｉｎｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｎｇｒｏｗｔｈｉｎｒｉｃｅ(Ｏ.ｓａｔｉｖａ)[Ｊ].ＦｒｏｎｔＰｌａｎｔＳｃｉꎬ７:２２８.ＳＵＲＹＡＤＩＮＡＴＡＲꎬＳＡＤＯＷＳＫＩＭꎬＳＡＲＣＥＶＩＣＢꎬ２０１０.Ｃｏｎｔｒｏｌｏｆｃｅｌｌｃｙｃｌｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｂｙｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆｃｙｃｌｉｎ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ(ＣＤＫ)ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ[Ｊ].ＢｉｏｓｃｉＲｅｐꎬ３０(４):２４３－２５５.ＴＡＯＺＸꎬＨＵＡＮＧＷＪꎬＷＡＮＧＨＪꎬ２０２０.Ｓｏｉｌｍｏｉｓｔｕｒｅｏｕｔｗｅｉｇｈｓｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇｔｈｅｇｒｅｅｎ￣ｕｐｄａｔｅｉｎｔｅｍｐｅｒａｔｅｇｒａｓｓｌａｎｄｓ[Ｊ].ＴｈｅｏｒＡｐｐｌＣｌｉｍａｔｏｌꎬ１４０(３):１０９３－１１０５.ＴＲＡＢＥＬＳＩＡＢＨꎬＺＡＡＦＯＵＲＩＫꎬＢＡＧＨＤＡＤＩＷꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.Ｓｅｃｏｎｄｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｂｉｏｆｕｅｌｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｗａｓｔｅｃｏｏｋｉｎｇｏｉｌｖｉａｐｙｒｏｌｙｓｉｓｐｒｏｃｅｓｓ[Ｊ].ＲｅｎｅｗＥｎｅｒｇｙꎬ１２６:８８８－８９６.ＶＡＮＬＥＥＮＥＪꎬＨＯＬＬＵＮＤＥＲＪꎬＥＥＣＫＨＯＵＴＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１０.ＴａｒｇｅｔｅｄｉｎｔｅｒａｃｔｏｍｉｃｓｒｅｖｅａｌｓａｃｏｍｐｌｅｘｃｏｒｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｍａｃｈｉｎｅｒｙｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ[Ｊ].ＭｏｌＳｙｓｔＢｉｏｌꎬ６(１):３９７.ＷＡＮＧＸＹꎬＷＵＹꎬＳＵＮＭＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２２.Ｄｙｎａｍｉｃｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｐｒｏｆｉｌｉｎｇｒｅｖｅａｌｅｄｋｅｙｇｅｎｅｓａｎｄｐａｔｈｗａｙｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｃｏｌｄｓｔｒｅｓｓｉｎｃａｓｔｏｒ(ＲｉｃｉｎｕｓｃｏｍｍｕｎｉｓＬ.) [Ｊ].ＩｎｄＣｒｏｐｓＰｒｏｄｕｃｔｓꎬ１７８:１１４６１０.ＸＵＪꎬＧＡＯＧＬꎬＤＵＪＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１０.ＣｅｌｌｃｙｃｌｅｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｏＡＢＡ[Ｊ].ＰａｋＪＢｏｔꎬ４２(４):２７０３－２７１０.ＹＡＮＸＸꎬＧＵＡＮＹＹꎬＬＩＵＸＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２１.ＮｔＣｙｃＢ２ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｏｕｔｅｎｈａｎｃｅｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｈｉｇｈｓａｌｉｎｉｔｙｓｔｒｅｓｓｉｎＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ[Ｊ].ＩｎｄＣｒｏｐｓＰｒｏｄｕｃｔｓꎬ１７１:１１３８８６.ＺＨＡＮＧＨＹꎬＬＵＸＹꎬＷＡＮＧＺＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２１.ＥｘｃｒｅｔｉｏｎｆｒｏｍｌｏｎｇｇｌａｎｄｕｌａｒｔｒｉｃｈｏｍｅｓｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏａｌｌｅｖｉａｔｉｏｎｏｆｃａｄｍｉｕｍｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎＰｏｌｌꎬ２８５:１１７１８４.(责任编辑㊀李㊀莉㊀王登惠)６４３广㊀西㊀植㊀物４３卷。

蓖麻CeSA转录因子基因家族的鉴定与表达分析

激光生物学报ACTA　LASER　BIOLOGY　SINICAVol. 32 No. 2Apr . 2023第32卷第2期2023年4月收稿日期：2022-12-30；修回日期：2023-01-31。

基金项目：山西农业大学生物育种工程项目（YZGC 050）；吕梁市重点研发项目（2021NYGG-2-89）；山西农业大学特优农业高质量发展科技支撑工程项目（TYGC-32）；山西省青年科学研究项目（20210302124364）。

作者简介：王宙，硕士研究生。

* 通信作者：曹越，副研究员，主要从事蓖麻栽培育种及技术推广工作。

E-mail: caoyue 1001@ 。

蓖麻CeSA 转录因子基因家族的鉴定与表达分析王　宙，王宏伟，王　亚，杨俊芳，赵宜婷，张宏斌，曹　越*（山西农业大学经济作物研究所，太原 030031）摘　要：纤维素合成酶（CeSA ）是能在植物细胞质膜上合成纤维素的蛋白质，具有与叶片形态发育相关的顺式作用元件。

在高等植物的生长发育过程中，细胞的伸长受到激素和环境的影响，使得植物生长高度具有差异性。

其中细胞壁对细胞伸长起限制作用，而纤维素是细胞壁重要的组成成分，对植物的细胞形态有重要的影响。

CeSA 是植物生长发育的重要调控因子。

本研究通过对蓖麻（Ricinus co mmunis ）参考基因组CeSA 基因的识别和生物遗传信息学的研究，结合蓖麻基因组数据库，对CeSA 家族成员的基因结构、染色体定位、理化性质、二级结构、三级结构、信号肽与亚细胞定位、蛋白跨膜结构域、共线性分析、保守基序、启动子顺势作用元件及系统进化进行了鉴定和表达分析。

从蓖麻参考基因组中共鉴定出8个CeSA 转录因子，命名为RcCeSA 1～RcCeSA 8，分布在8条染色体上；8个RcCeSAs 蛋白都是亲水性蛋白，不含信号肽，蛋白亚细胞定位以在叶绿体和高尔基体上为主；在二级结构中有70%的α-螺旋和无规则卷曲；RcCeSAs 基因保守性分析表明，除Motif 1和Motif 2外，其他Motif 均为RcCeSA 家族中较为保守的基序；基因启动子顺式作用元件分析发现，RcCeSA 1、RcCeSA 4、RcCeSA 7转录因子的启动子区域中存在叶片形态发育以及参与防御和应激反应的相关的元件，可能会在逆境条件下快速表达，发挥其潜在功能。

蓖麻不同分枝对开花、结果性状和种子质量的影响

蓖麻不同分枝对开花、结果性状和种子质量的影响
蒋小军;文向多;朱雪志
【期刊名称】《农业科技通讯》
【年(卷),期】2009(000)006
【摘要】采用田间小区试验研究了永州地区蓖麻不同分枝的开花、结果性状对种子质量的影响.结果表明,蓖麻在永州地区1年有2个适宜的果实生长期5月-6月(主穗、1级分枝)和9月-11月(3～4级分枝),以9月-11月生长的果实种子质量最好:果穗的出籽率高达76.4%,种子百籽重达39.3g,含油量高达52.5%,粗蛋白含量达26.4%,蓖麻酸含量高达90.2%;5月-6月生长的果实种子质量次之;7月-8月不适宜蓖麻的生长.所以在生产上要充分利用各种栽培技术措施,避开7月-8月挂果,充分让5月-6月和9月-11月期间多挂果,以达到蓖麻生产的高产量,高质量.【总页数】3页(P73-75)
【作者】蒋小军;文向多;朱雪志
【作者单位】永州职业技术学院蓖麻研究所,湖南永州,425000;永州职业技术学院蓖麻研究所,湖南永州,425000;永州职业技术学院蓖麻研究所,湖南永州,425000【正文语种】中文
【中图分类】S5
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1.不同施氮量对蓖麻产量和生物及营养性状的影响 [J], 王晴晴;田长彦;赵振勇;张科;王梓宇
2.蓖麻不同收获期对种子质量的影响 [J], 李靖霞;李彤
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4.蓖麻基肥不同施用量对其主茎叶片和植株性状的影响 [J], 金方伦;罗朝斌;罗会贤;黎明;吴康云
5.不同浓度6-BA对不同蝴蝶兰品种开花时间和开花性状的影响 [J], 苏荣军;李仲科;阙名锦
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基于QTL定位的蓖麻株高性状遗传解析

矮化育种实现了水稻和小麦产量的突破性增长[1-2]。目前, 小麦中已有25个主效Rht (reduced height)基因被命
本研究由国家自然科学基金项目(31271759), 广东省教育厅项目[粤财教(2009)109 号]和广东海洋大学大学生创新实验项目(cxsy200915) 资助。 * 通讯作者(Corresponding author): 殷学贵, E-mail: yinxuegui@ 第一作者联系方式: E-mail: 969505210@ ** 同等贡献(Contributed equally to the work) Received(收稿日期): 2013-09-18; Accepted(接受日期): 2014-01-12; Published online(网络出版日期): 2014-02-14.
Genetic Analysis of Traits Related to Plant Height in Ricinus communis L. Based on QTL Mapping
LIU Chen**, LU Jian-Nong**, YIN Xue-Gui*, BI Chuan, WEN Dan-You, ZHENG Jun, LIU Shuai, SHI Zhuo-Xing, and CHENG Yue-Xiang
蓖麻具无限生长习性, 其株高(plant height, PH)与生
育期紧密相关, 是后期表达的复杂数量性状。一年生情况下, 一般在二级分枝穗停止伸长时测量。主穗位高 (bearing height of primary raceme, PRH)、主茎节数(node number of main stem, MSNN)、主茎节长(length of main stem internode, MSIL)是株高的重要组成部分, 受环境影响相对较小, 为早期表达的性状, 在主穗停止伸长时即可测量。本文利用2个高×矮组合的F2群体对蓖麻的株高、主穗位高、主茎节数、主茎节长和主茎茎粗(简称茎粗, 下同)(main stem diameter, MSD)进行相关、回归分析和QTL 定位, 以期为揭示蓖麻株高遗传和矮化育种提供参考。

蓖麻种质遗传多样性的SRAP分析

蓖麻种质遗传多样性的SRAP分析谭美莲;严明芳;汪磊;王力军;严兴初【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(027)005【摘要】蓖麻(Ricinus communis L.)是一种重要的工业油源作物,具有多种经济价值.为了解蓖麻的遗传多样性,本研究对50份蓖麻种质的遗传多样性进行SRAP分析.结果表明50份种质之间多态性低,其多态条带比率、平均基因多样性和每对引物的多态性带,分别为29.97％、0.0904和5.41,遗传相似系数介于0.6469至0.9739之间,香农指数为0.1379;华北种质群比其它种质群的遗传变异相对丰富,而华南种质群的各种质则紧密地聚在一起.采用不加权算术平均组对法(UPGMA)将50份种质分为三大类群,与二维主成分分析(PCA)的结果相一致,一些来自相同地区的种质紧密聚在一起,表现出一定的地域性;7个种质群分别聚为两大类群.【总页数】8页(P533-540)【作者】谭美莲;严明芳;汪磊;王力军;严兴初【作者单位】中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉430062【正文语种】中文【中图分类】S565.6【相关文献】1.洋葱种质资源遗传多样性的SRAP和ISSR分析 [J], 刘湘萍;杜敏霞;赵彦;王葆生;刘燕;廉勇;狄洁增;徐卫忠2.贵州核桃农家品种种质资源遗传多样性的SRAP分析 [J], 杨小红;侯娜3.基于SRAP分子标记的特早熟荔枝种质资源遗传多样性分析 [J], 胡福初;吴小波;陈哲;吴凤芝;周文静;冯学杰;范鸿雁;周瑞云;王祥和4.基于SRAP的辣木种质资源遗传多样性和亲缘关系分析 [J], 林宗铿;张天翔;杨俊杰5.基于表型性状和SRAP标记的观赏用辣椒种质资源遗传多样性分析 [J], 赫卫;张慧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

蓖麻主要农艺性状配合力分析

蓖麻主要农艺性状配合力分析唐艳梅;刘曙光【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(000)005【摘要】本文以11个亲本蓖麻品种按NCⅡ交配设计获得28个杂交组合，考查亲本F1代主要性状的表现，进行性状的配合力分析，结果表明：产量性状的一般配合力以转1号、转2号、1987的单株产量为较高，而其参于的特殊配合力效应也较高。

通过配合力分析，转1号/1987和转2号/2129为优良组合，可继续进行产量鉴定。

一般配合力方差相对比率大的性状有：单株产量、一级分枝果穗数、主茎穗长和一级分枝数，这些性状遗传上加性效应占主导地位，其他性状的杂种优势以非加性效应占主导地位。

通过对农艺性状遗传力的估算，狭义遗传力高的性状有一级分枝果穗数、主茎蒴果数、主茎穗长可在低世代进行选择，狭义遗传力低的性状则在较高的世代选择。

%11 parent castor varieties were used in experiment 28 F1 hybrids from NCⅡdiallel cross were syudies for combining ability.The results indicated:We analysed their generally combining ability、special combining ability、total combiningability;selected elite varieties:transfers 1、transfer 2 and 1987;2 elite crossing combinations:Transfers 1/1987 and transfers 2/2129. They may continue to study. Generally the combining ability variance relative ratio big character has Single output, first-level branching cob number, main stalk Guangzhou length and first-level branching number.Explained that these characters inherit the additive effect to occupy the dominantposition, other character's heterosis occupies the dominant position by the nonadditivity effectThrough to agronomic characters hereditary capacity estimate,The narrow hereditary capacity high character has the first-level branching cob number, the main stalk cap-sule number, main stalk Guangzhou to be long.May carry on the choice in the lowgeneration.Narrow hereditary capacity low character in high generation choice.【总页数】6页(P540-545)【作者】唐艳梅;刘曙光【作者单位】内蒙古赤峰市林西县农业局，内蒙古林西 025250;通辽市奈曼旗农产品质量安全检验检测站，内蒙古大沁他拉 028300【正文语种】中文【中图分类】S565.6【相关文献】1.蓖麻主要数量性状的配合力分析 [J], 王芳;朱国立;王云;田迅;庞晓斌2.蓖麻主要农艺性状的配合力分析 [J], 朱国立;顾名勋3.5个新选水稻三系不育系主要农艺性状配合力分析 [J], 潘清洁; 赵福胜; 罗洪发; 张治海; 杨旭东; 查仁明4.5个新选水稻三系不育系主要农艺性状配合力分析 [J], 潘清洁; 赵福胜; 罗洪发; 张治海; 杨旭东; 查仁明5.贵州水稻三系不育系品资5A的主要农艺性状配合力分析和食味评价 [J], 陈能刚;鄢小青;陈锋;陈启刚;雷云龙;谢应平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。