第6章 一般毒性(1)

<20
<20
高 毒 5∼
20∼
20∼
中等毒 5∼500 200∼2000
200∼2000
低 毒 >500
>2000
>2000
工业毒物急性毒性分级
毒性分级
剧毒 高毒 中等毒 低毒 微毒
小鼠一次经口 LD50(mg/kg) <10 11∼100 101∼1000 1001∼10000 >10000
小鼠吸入2h 兔经皮
二、急性毒性试验方法
（一）实验动物的选择 （二）染毒途径和方式 （三）剂量选择 （四）毒性反应的观察与检查
（一）实验动物的选择
1. 物种与品系选择
（1） 敏感动物 （2） 尽可能选择对化学物的反应和代谢特点与人 或靶动物相同或相近的动物。 （3） 多种动物，至少两种，啮齿与非啮齿。
实验动物的选择
4
4. 经注射染毒
常用实验动物给予受试物的体积(ml)
注射方式 小鼠 大鼠 豚鼠 兔
腹腔 肌肉 静脉 皮下
0.2∼1.0 0.1∼0.2 0.2∼0.5 0.1∼0.5
1∼3 2∼5 0.2∼0.5 0.2∼0.5
1∼2 1∼5 0.5∼1 0.5∼2
5∼10 0.5∼1 3∼10 1∼3
狗
5∼15 2∼5 5∼15 3∼10
禁食
经口染毒时，染毒前必须禁食，但饮水不限。大 动物一般在每日上午喂食前给与受试化学物。大鼠和 小鼠主要在夜间采食，应隔夜禁食，或停食6~8h。 染毒后2~4h复食。 禁食时间不宜过长，因动物饥饿也可影响试验结果。
实验动物的喂养环境
温度、湿度要适合动物试验要求，光照应12小时 日光，12小时黑暗。 环境、饮水、饲料清洁、保持室内卫生
LD50(ppm) LD50(mg/kg)
<50
<10
51∼500
11∼50
501∼5000 51∼500
5001∼50000 501∼5000
>50000
>5000
5. 最大耐受剂量(maximal lethal dose, MTD或LD0) 是指在一群个体中不引起死亡的最高剂量。接触 此剂量的个体可以出现严重的毒性作用，但不发 生死亡。
（二） LD50的测定
预 试: 求出LD0和 LD100 预试验采用少量动物摸索受试物的100％或
0%死亡的剂量，以增加正式试验结果的成功率。
（二） LD50的测定
正式试验： 剂 量 组：LD100之间安排5-7个剂量组，
10只/组 组 距：0.65 ~ 0.85倍。 计算方法：寇氏法和概率单位法最常用
（三）LD50应用中的注意问题
1. 试验条件的同一性 2. LD50指标的选择与缺点
为何常用LD50或作为表示或衡量 化合物急性毒性指标的理由
3. 经皮肤染毒
（2）皮肤刺激毒性 研究化合物的局部毒性常用涂布法、皮肤斑
贴法和兔耳法刺激试验。
皮肤反应评价标准
观察项目
评分
红斑与焦痂形成
无红斑
0
很轻微红斑
1
易于察觉红斑

2
中度至严重红斑
3
严重红斑至轻微焦痂形成
4
水肿形成
无水肿
0
很轻微水肿
1
轻度水肿(边缘隆起)
2
中度水肿(隆起约1cm)
3
重度水肿(隆起>1cm)
3. 实例分析
LD50测定的是药物的急性毒性，不代表药物的长 期毒性和特殊毒性。
依据对A、B两药的限定，从对小动物产生的 急性毒性角度来看，可以认为服用2mgA产生的毒 性与服用4mgB是一样的； 至于服用2mgA与4mgB是否与服用4mgA一样就不 能轻易下结论：
3. 实例分析
1. A、B之间是否存在药理学相互作用不知道； 两种药物的毒性不是简单的相加，可能会有协 同，拮抗等作用。比如提到的A药、B药，如 果前者是神经系统毒性，后者毒性作用是心血 管毒性，能说二者毒性是一致的吗？
中毒症状的观察是了解该化合物急性毒性的十分 重要的一环，是补充LD50这个参数不足的重要方 面。
三、常用指标
（一）LD50及其相关指标
1. 绝对致死量(absalute lethal dose, LD100) 是指引 起一群机体全部死亡的最小剂量。 2. 半数致死量(median lethal dose, LD50)：指引起 一群个体50%死亡所需的剂量，也称致死中量。 表示LD50的单位为mg/kg体重，如DDT的LD50为 300mg/kg体重(大鼠, 经口)。
急性毒性
2. 经呼吸道染毒
♣ 吸入接触 ♣ 将受试化合物注入动物气管肺内
吸入接触 ♣ 静式吸入 ♣ 动式吸入
3.经皮肤染毒
（1）经皮肤吸收毒性 定性试验：小鼠和大鼠的浸尾试验是常用的定性
试验方法。 定量试验：在试验动物一脱好毛的部位涂布受试
物，以求该化合物经皮吸收的剂量－反 应关系，求经皮LD50 。
（二）染毒途径和方式
1. 经口（胃肠道）染毒（oral exposure） 2. 经呼吸道染毒(inhalation exposure) 3. 经皮肤染毒（dermal exposure） 4. 其他染毒途径
1. 经口染毒
灌胃 喂饲 吞咽胶囊
灌胃时 应注意
空腹 给予2-4h后复食 灌胃的体积不超过体重的 2-3%
研究内容
急性毒性 过敏反应 呕吐 致热反应 吸入性粉尘 药物对皮肤局部作用 实质性脏器的毒作用 慢性毒性 水污染物的毒性
实验动物
大、小鼠 豚鼠(豚鼠>家兔>狗>小鼠>猫>青蛙) 狗、猫，不宜用草食动物 兔、 猫 不宜用大鼠小鼠和狗(无汗腺) 大鼠 兔、豚鼠 小鼠、兔 大鼠、狗 鱼、贝、水蚤和藻类
（2）个体选择
比值越小，即化学物的急性毒作用带越窄，该化 学物的危险性越大。
4种不同外源化学物的LD50及剂量-反应死亡关系曲线
3. 实例分析
例如A的LD50为2 mg，B的LD50 为4 mg，那么是不 是可以说服用2mg A和服用4mg B的毒性一样的？ 服用2mg A和4mg B，是不是和服用4mg A毒性是 一致的？ 假设A、B的结构相近，毒性反应基本一致。
1. 急性毒性的概念
急性毒性：指人或动物一次或于24 h之内 多次接触外源化学物后，在短期内所发生的毒 性效应，包括致死效应。
acute toxicity
一、急性毒性的概念及试验目的
2. 急性毒性试验的目的
（1） 测定外源化学物的半数致死剂量及相关参 数，初步估计该化学物的毒性大小。 （2） 探求外源化学物的剂量-反应关系，为进一步 试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供参考。 （3）了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征 及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险性。
① 年龄与体重 要求各组动物的平均体重及体重的离散度尽可能
一致。具体来说是： 实验动物的体重不应超过全体实验动物平均
体重的20%－控制离散度; 每组之间的平均体重相差不应超过10%－控
制均衡性。 ② 性别 ：一般均应采用两种性别动物进行试验。
（3）动物数量
大鼠和小鼠每组10只以上；较大的动物如狗、家兔 等每组不少于3～5只。
动物可选用大鼠、小鼠、狗、猴等。但试验 最常用的是大鼠或小鼠。选大鼠或小鼠20～40 只，分5～7组。狗6-8只，雌雄不拘，实验前需观 察两周，择健康成年动物进行试验剂量设计可按4 倍法如:4:16:64:256:1024:4096mg/kg，也可按10倍 法如1:10:100:1000:5000mg/kg。
3. 实例分析
2. A、B之间是否产生蛋白结合置换不清楚； 3. A、B之间是否产生代谢相互作用？ 4. A、B药物的作用机制是否一致或部分一致？
四、急性毒性试验评价
农药的急性毒性分级
大鼠经口 级别
大鼠经皮
大鼠吸入
LD50(mg/kg) LD50(mg/kg/4h) LD50(mg/m3)2h
剧 毒 <5
致突变试验 致畸试验 繁殖与发育毒性试验 致癌试验 其他试验
第六章 毒物的一般毒性作用及其评价
第一节 急性毒性试验 第二节 蓄积毒性试验 第三节 亚慢性和慢性毒性试验
第一节 急性毒性试验
一、急性毒性的概念及试验目的 二、急性毒性试验的方法 三、常用指标 四、急性毒性试验评价
一、急性毒性的概念及试验目的
中毒症状 死亡情况 大体解剖
器管或系统 观察项目 中毒后常见的表现
CNS和 神经肌肉系统
植物神经系统 呼吸系统 泌尿生殖系统 皮肤和被毛 眼睛
行为 运动状态
对刺激反应性
脑脊髓反射 肌肉张力 瞳孔大小 腺体分泌 鼻 呼吸表现 阴户 乳腺 阴茎 颜色张力 眼睑 眼球 角膜
体位异常 叫声异常 活动异常 呆卧少动 痉挛 抽搐 震颤 强直 麻痹 运动失调 易兴奋 感觉迟钝或过敏 反应 低下或过高 减弱或消失 松驰或紧张 散大或缩小 流涎 流泪 鼻孔溢液 鼻翼扇动 徐缓 过速 困难 衰竭 肿胀 分泌物增多 会阴部污秽 脱出 皮肤充血 紫绀 被毛蓬松 污秽 眼球突出，充血，角膜混 浊，血性分泌物
第六章 毒物的一般毒性作用及其评价
一般毒性： 指外源化学物在一定剂量、一定接触时间和
一定接触方式下，对实验动物机体产生总体毒效 应的能力，又称一般毒性作用或基础毒性。
general toxicity general toxicity effect basic toxicity
第六章 毒物的一般毒性作用及其评价
正式试验一般分为5～7个剂量组。组间剂量 呈等比级数，其比值为1.2~1.5。
i = lg LD100 − lg LD0 n −1
i = lg LD90 − lg LD10 n −1