三点测交

果蝇的三点测交
091140025 胡桉
一、实验目的
1.验证连锁互换定律，掌握并进行连锁分析，学习绘制遗传学图的原理和方法。

2.了解伴性遗传与非伴性遗传的区别，了解伴性基因在正、反交中的差异。

二、实验原理
1.三点测交是把三个基因包括在同一次交配中，即用三杂合体abc/+++或ab+/++c
跟三隐性个体abc/abc测交。

进行这种试验，一次就等于三次“两点试验”，而且带有另外两个优点。

2.一次三点测验得到的三个重组值是在同一基因型背景、同一环境条件下得到的，
而三次“两点试验”就不一定这样。

重组值既受基因型背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以，只有从三点试验所得到的三个重组值才是严格地可以互相比较的。

3.通过三点测交试验，可以得到三次两点试验所不能得到的资料，即双交换的资料。

4.果蝇的白眼、小翅、卷刚毛为X-连锁基因，全部隐性于各自的野生型基因（红眼、
长翅、直刚毛），把白眼、小翅、卷刚毛雌蝇（wmsn/wmsn）与野生型雄蝇交配（＋＋＋/Y），F1雌蝇全部为野生型，雄蝇则全部表现为三隐性突变型，让F1互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌蝇中两个染色体之间发生了互换的结果，根据基因在染色体线性排列的遗传理论，对F2进行分析即可知不同基因间的连锁距离。

5.因为这三个基因位于性染色体上，所以这个试验也可用来作为伴性遗传试验。

6.当基因位于X或Y染色体上时，一般不含相对的等位基因，产生伴性遗传，在正
交和反交试验中产生不同的结果。

三、实验材料、器材、药品
材料：野生型黑腹果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性果蝇。

器材：.解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶(4瓶/人)、
药品：.乙醚、75%乙醇
五、实验步骤
1.选三隐性雌性处女蝇（wmsn/wmsn ）和野生型雄蝇（＋＋＋/Y ）5～6对置于新鲜培养瓶中作正交，同时选野生型雌性处女蝇（＋＋＋/＋＋＋）和三隐性雄蝇（wmsn/Y）同置于新鲜培养瓶中，作为反交，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，组别及姓名。

各自带回宿舍，妥善保管，室温下培养。

注意谨防瓶塞掉出、瓶子摔破，避开阳光直射，保暖。

2.自始自终进行果蝇生活周期的察看。

写出观察日记：记录看到的果蝇行为，各发育阶段的主要现象及经历的时间等。

3.一周后，在实验室倒去亲本果蝇，一定要倒干净，一只也不能留。

（此时瓶壁上应有黑色蛹)
4. 二周后，F1蝇长出，实验室内观察F1雌蝇和F1雄蝇的各个性状，并观察正反交不同组合的结果如何。

5. 取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，正交放三瓶，反交一瓶。

6. 三周后，倒去F1，必须倒干净，一只也不能留。

7. 四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次（要求统计数量1000只以上），统计过的果蝇处死。

应该统计的F2果蝇是正交中的F2，但如果其数目不多，可借用反交中F2的雄蝇加以统计。

六.实验结果:
1.
实验结果与已知遗传图谱对比 基因的顺序为w-sn-m 。

w-m 的图距为35cM 。

w-sn 的图距为15.2cM 。

sn-m 的图距为19.2cM
对比可知w-sn 的距离测量值偏小，可能与选择的果蝇有关
七.实验讨论:
1，本实验成败的重要因素（操作与培养部分）:
1.处女蝇
如果投放的不是处女蝇则很有可能已经受精，在F1代中，引入纯合子。

将会影响下一代分离比，从而影响到试验结果。

2.产卵后亲本需在一周后清理干净。

一是会影响子代的计数，二是可能会和下一代交配，从而影响实验结果。

3.环境要适宜。

温度过高容易造成果蝇的不育以及变异，影响到实验结果。

而温度过低，则使得果蝇生长缓慢，影响实验进程。

培养基不长霉菌。

2，实验可能存在统计错误，在计数的时候长翅断翅有时难以分清。

3，培养果蝇最好在培养箱内进行，因为我为方便带回宿舍导致培养周期累计比同期果蝇慢了2周左右。

大概原因是天气太冷生长速度地下。

后来温度升高导致其中一瓶发生突变，部分果蝇左翅翘起。