果蝇的三点测交实验

果蝇的三点测交实验

赵子杰 141140054

一．实验目的

1、验证连锁互换定律，掌握并进行连锁分析，学习绘制遗传学图的原理和

方法。

2、了解伴性遗传与非伴性遗传的区别，了解伴性基因在正、反交中的差异。二．实验原理

1、三点测交

三点测交把三个基因包括在同一次交配中，即用三杂合体abc/+++或ab+/++c跟三隐性个体abc/abc测交。进行这种试验，一次就等于三次“两点试验”，而且带有另外两个优点。

一次三点测验得到的三个重组值是在同一基因型背景、同一环境条件下得到的，而三次“两点试验”就不一定这样。重组值既受基因型背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以，只有从三点试验所得到的三个重组值才是严格地可以互相比较的。通过三点测交试验，可以得到三次两点试验所不能得到的资料，即双交换的资料。

果蝇的白眼、小翅、卷刚毛为X-连锁基因，全部隐性于各自的野生型基因（红眼、长翅、直刚毛），把白眼、小翅、卷刚毛雌蝇（wmsn/wmsn）与野生型雄蝇交配（＋＋＋/Y），F1雌蝇全部为野生型，雄蝇则全部表现为三隐性突变型，让F1互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌蝇中两个染色体之间发生了互换的结果，根据基因在染色体线性排列的遗传理论，对F2进行分析即可知不同基因间的连锁距离。因为这三个基因位于性染色体上，所以这个试验也可用来作为伴性遗传试验。

当基因位于X或Y染色体上时，一般不含相对的等位基因，产生伴性遗传，在正交和反交试验中产生不同的结果。

2、连锁率和互换率

生殖细胞形成过程中，位于同一染色体上的基因是连锁在一起，作为一个单位进行传递，称为连锁律。在生殖细胞形成时，一对同源染色体上的不同对等位基因之间可以发生交换，称为交换律或互换律。

连锁和互换是生物界的普遍现象，也是造成生物多样性的重要原因之一。一般而言，两对等位基因相距越远，发生交换的机会越大，即交换率越高；反之，相距越近，交换率越低。因此，交换率可用来反映同一染色体上两个基因之间的相对距离。以基因重组率为 1%时两个基因间的距离记作1厘摩（centimorgan ，cM ）。

基因座位很近，只发生一次交换，重组值＝交换率。 基因座位较远，可发生两次交换，重组值＜交换率。

基因图距就是通过重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重祖

率与交换率的值相等，可以直接根据重组率的大小作为有关基因间的相对距离，把基因顺序地排列在染色体上，绘制出基因图。如果基因间相距较远，两个基因往往发生两次以上的交换，这是如果简单的把重组率看作交换率，那么交换率就会被低估，图距就会偏小。这时需要利用试验数据进行校正，以便正确估计图距。基因在染色体上的相对位置的确定除进行两个基因间的测交外，更常用的是三点测交法。

3、并发率和干涉

如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换。那么预期的双交换频率应等于两个单交换频率的乘积。但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值。因为每发生一次单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一些，这叫做干涉。一般用并发率来表示干涉的大小。

理论双交换值

实际双交换值

并发率

=C

C I -1=干扰值

三.实验器材与材料

黑腹果蝇（Drosophila melanogaster ）品系：

野生型黑腹果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性果蝇、野生型果蝇（+++）：红眼，长翅，直刚毛。

器材：.解剖镜、毛笔、麻醉瓶、玻璃板、标签、吸水纸、培养瓶、酒精棉。 药品：.乙醚、75%乙醇。

四.实验步骤

1、选三隐性雌性处女蝇（wmsn/wmsn ）和野生型雄蝇（＋＋＋/Y ） 5～6对置于新鲜培养瓶中作正交，同时选野生型雌性处女蝇（＋＋＋/＋＋＋）和三隐性雄蝇（wmsn/Y ）同置于新鲜培养瓶中，作为反交，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，组别及姓名。

2、自始自终进行果蝇生活周期的察看。写出观察日记：记录看到的果蝇行为，各发育阶段的主要现象及经历的时间等。

3、一周后，在实验室倒去亲本果蝇，一定要倒干净，一只也不能留。（此时瓶壁

上应有黑色蛹)

4、二周后，F1蝇长出，实验室内观察F1雌蝇和F1雄蝇的各个性状，并观察正反交不同组合的结果如何。

5、取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，正交放两瓶，反交一瓶。

6、三周后，倒去F1，必须倒干净，一只也不能留。

7、四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次（要求统计数量1000只以上），统计过的果蝇处死。应该统计的F2果蝇是正交中F2，但如果其数目不多，可借用反交中F2的雄蝇加以统计。 8、记录实验数据。

五.个人实验结果与分析

1.遗传图谱分析

2.遗传表型数据及重组率计算

1.F1代：正交（野生型雄蝇x 三隐型雌蝇），雌蝇全部为红眼长翅直刚毛，雄蝇全部为白眼小翅卷刚毛； 反交（野生型雌蝇x 三隐型雄蝇），雌雄蝇均为红眼长翅直刚毛

2.F2代：其统计数据如下表：

F2果蝇表型类型 （及基因型） 数目 重组区域 w-sn w-m m-sn 白小卷（wmsn/wmsn,wmsn/y ） 229 557 - - - 红长直（+++/wmsn,+++/y ） 328 白小直（wm+/wmsn,wm+/y ）

13

31

+

-

+

+ + +

m sn 3 w

m sn 3 w

×

m sn 3

w

m sn 3 w

m sn 3 w

+ + +

×

（♂

♀

（♂

♀

m sn 3 w

+ + +

m sn 3 w

+ + +

m sn 3 w

+ + +

m sn 3 w m + + + sn 3 w

+ + +

m sn 3 w m sn 3 + + + w

+ + +

+ sn 3 +

m sn 3 w m + w + + +

P ：

F1：

（测交）