高效液相色谱法测定果酒中的糖、甘油和乙醇
高效液相色谱法测定葡萄酒的有机酸及乙酸
高效液相色谱法测定葡萄酒的有机酸及乙酸
葡萄酒可谓是文化旅游的典藏，推行数百年的历史沉淀出的极致余韵。
用高效液相色谱法检测出葡萄酒中有机酸及乙酸的表现，无疑对研究深厚的质感做出了一定的贡献。
高效液相色谱法是一种以不断调整液体相态中溶剂体系的特定比例为原理，在一段时间内依次分离混样中各色谱组分成分，并以浓度色谱图的形式显示的技术。
采用此高效液相色谱法在葡萄酒中检测有机酸及乙酸，利用多种滤膜对样品进行过滤，再将其加入带有多种电解质的溶剂体系中，利用色谱仪检测多种有机酸及乙酸等混样组分，并呈现出色谱浓度图，利用质谱处理软件可进行准确的定性及定量处理数据，从而检测出葡萄酒中有机酸及乙酸的基本性质及含量。
使用高效液相色谱法检测葡萄酒中有机酸及乙酸，可大大提升检测葡萄酒的精度。
此方法可检测出葡萄酒中多种有机酸及乙酸的准确性及稳定性，使检测的准确性得到保证。
此外，高效液体色谱法也具有检测快速、选择性强、定性定量准确可靠、重复性好等优势。
使用此法检测葡萄酒的有机酸及乙酸可以极大的提升葡萄酒的口感及质量，从而使消费者获得更高品质的葡萄酒。
从上述内容可以得出结论，使用高效液相色谱法检测葡萄酒中有机酸及乙酸，可以提高葡萄酒的品质，同时也可提高消费者对葡萄酒的爱好和了解。
而采用此检测方法，可以使检测精度达到最高水准，从而保证了葡萄酒的品质及质量。
利用高效液相色谱法测定啤酒中的甘油含量
甘油能赋 予啤酒甜味和浓醇 的 口感 ，是控制啤酒醇厚
性 和 甜 苦 平 衡 的 重 要指 标 。
甘油 的检 测方法分为理 化检测和色谱检测 。常规
理化检测 （ 如 高碘 酸 氧 化 法 、 密度 法 、 滴 定 法 等 ）存
在； 隹确性较低 、操作复杂 、试 剂用量大、不具有 分离
鉴别等缺 点 ；而色谱法 以分离为基础、精密度较 高，
２ ０ １ ５ 年纂７ 期 息一２ １ １ 期 技术研究 ＆Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈｌ ２ ７
２ ． ３样 品 预 处理
的方法 ；并对 国内市售 啤酒 中甘 油进行检测 ，以期对
啤酒质量控 制有一定指导意义。
啤酒 、麦汁 、发酵液 经中速滤纸过滤 、Ｏ ４ ５ ｕ ｍ
微 孔 滤膜 过 滤 后 ，直 接 进 样 。
ｌ － 实验仪器与试剂
１ ． ’主 要 仪 器
葡萄 酒 中甘油进 行高 效液相 色谱法 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ）检测 的 研究 ，但 啤酒 中甘 油的 ＨＰ Ｌ Ｃ检 测却 很少。 本 文采 用高效液 相色谱 法 （ ＨＰ Ｌ Ｃ） 对甘 油进 行
检 测 并 验 证 方 法 ，建 立 啤 酒 中甘 油 ＨＰ Ｌ Ｃ 法定 量 分 析
花超 高档 啤酒 脸谱系列。
（ ｖ ／ ｖ ）为 流 动 相 ， 在 柱 温 ：３ ０ ℃ ； ＲＩ Ｄ 温 度 ：３ ０ ｑ Ｃ； 流 速 ： １ Ｏ ｍｌ ／ ｍｉ ｎ条 件 下 测 定 啤 酒 中 的 甘 油 ． ．该 方 法 具
有 良好 的 线性 关 系，且精 密度 高，重 复性 好 ，平均 回收 率 为 １ ０ ７ ７ ％。 通过 对 市售啤 酒进 行测 定 ，甘 油含
葡萄酒、果酒-总糖和还原糖的测定-高效液相色谱法(Ⅰ法)
葡萄酒、果酒－总糖和还原糖的测定－高效液相色谱法(Ⅰ法) 1 范围
本方法适用于葡萄酒、果酒及其相关产品中总糖和还原糖含量的测定。
2 原理
利用样品中各种组分在液固两相分配系数的不同，令样品通过液相色谱柱，而将样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。
然后再利用示差折光检测器进行鉴定，用外标法定量。
3 试剂与溶液
3.1 超纯水（或经0.45μm水系微过滤膜脱气过滤的新鲜重蒸蒸馏水）；
3.1 糖标准溶液（含总糖6.000g/L）：分别称取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各0.100g （精确至0.0019），移入50mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度。
该溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖分别为2.000 g/L。
4 仪器设备
4.1 高效液相色谱仪（配有记录系统或数据处理装置）；
4.2 示差折光检测器；
4.3 色谱柱：300 mm×6.5mm（内径），Sugar－PAK1 柱；
4.4 微过滤膜：0.45μm，水系；
4.5 脱气装置（或超声波装置）。
5 试样的制备
将样品用超纯水（或经0.45μm水系微过滤膜脱气过滤的新鲜重蒸蒸馏水）稀释至含糖量为5g/L左右，并用0.45μm水系微过滤膜过滤。
6 分析步骤
6.1 色谱条件
a.柱温：90℃；
b.流动相：超纯水；
c.流速：0.5mL/min；
d.进样量：50μL。
6.2 测量
在同样的色谱条件下，将糖标准溶液和处理好的试样分别注入色谱仪。
开启记录系统后，扳动进样阀。
固相萃取-高效液相色谱测定果酒中的有机酸
酒 、樱桃酒、蓝莓酒、枇杷酒、荔枝酒、葡萄酒和桑葚酒中有机酸的测定，得到的结果准确可靠，可以用于果酒品质的控制和
工效液相色谱;有机酸;果酒
中图分类号：TS261.7
文献标识码： A
文章编号：2095 - 2562(2016)06 - 0015 - 05
由 于 果 酒 的 保 健 作 用 ，近 年 来 越 来 越 受 到 人 们 的 青 睐 。而 影 响 果 酒 口 感 的 一 个 重 要 因 素 就 是 其 有 机
pH (包 括 果 实 产 地 、品 种 ，果 汁 ,加 糖 量 、发 酵 温 度 等 ），也 即 有 机 酸 的 形 成 跟 酿 造 工 艺 密 切 相 关 [3_6]。换句
话 说 ，控 制 有 机酸的形成对有 效 调 节 果 酒 的 酿 造 工 艺 和 进 行 品 质 控 制 有 着 极 其 重 要 的 作 用 [7]。 因 此 ，有必 要 建 立 快 速 、便 捷 的 果 酒 中 有 机 酸 的 测 定 方 法 。
高 效 液 相 色 谱 法 测 定 果 酒 中 的 有 机 酸 ，对 色 谱 条 件 进 行 优 化 ，该 法 步 骤 简 单 、重 现 性 好 、回 收 率 高 ，适用于 各类果酒中有机酸的检测。
1 实验部分
1 . 1 试剂与仪器
乙 酸 、草 酸 、酒 石 酸 、丙 酮 酸 、苹 果 酸 、2 - 酮 戊 二 酸 、乳 酸 、柠 檬 酸 、反 丁 烯 二 酸 、丁 二 酸 （上 海 国 药 ）；甲
第 26卷 第 6 期
2016 年 12 月
广东石油化工学院学报
Journal of Guangdong University of Petrochemical Technology
V〇1.26 No.6
高效液相色谱法分析(果糖、葡萄糖、蔗糖)原始记录
高效页
样品编号
试样质量
(g)
组分名称
定容体积
（mL）
峰面积
（A）
浓度
(mg/mL）
结果
（g/100g）
平均值
（g/100g）
相对偏差
（%）
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
高效液相色谱法分析（果糖、葡萄糖、蔗糖）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
果糖、葡萄糖、蔗糖
检测开始时间
年月日
检测依据
GB 5009.8-2016第一法
检测结束时间
年月日
检测方法
高效液相色谱法
温度及相对湿度
℃％
仪器名称及型号
Wters2695高效液相色谱仪
仪器编号
××/××-036
FA2004电子天平
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
葡萄糖
蔗糖
备注
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
××/××-074
样品处理情况
按照GB 5009.8-2016第一法对样品进行处理。
标准物质名称及浓度
标准溶液：20mg/mL
仪器
检测条件
检测器：RX检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：25.0℃
流速：1.0mL/min
进样量：μL
温度：40℃
流动相：乙腈+水=70+30
标准曲线
序号
1
运用高效液相色谱测定葡萄酒中的添加剂
运用高效液相色谱测定葡萄酒中的添加剂作者：来源：《食品界》2017年第04期在科学技术快速发展的背景下，许多新的检测技术和检测方法被广泛应用在食品安全检测中，有利于从技术层面保障食品的健康。
当前有不同类型的检测方法可以分别测定葡萄酒中的甜味剂、色素、防腐剂等，但是这些方法需要花费较长的检测时间，检测程序相对繁杂，不能同时快速测定葡萄酒中不同类型的添加剂。
高效液相色谱作为一种全新的检测方法，将其应用于葡萄酒的测定中，可以很好地检测出酒中的添加剂，达到良好的测定效果。
高效液相色谱法概述对于高效液相色谱法而言，其也称之为近代柱色谱、高分离度液相色谱、高速液相色谱、高压液相色谱等，可分为亲和色谱、离子色谱、吸附色谱、体积排阻色谱、分配色谱等类型，指的是在分析化学和生化中经常采用的柱层析仪。
作为色谱法中的重要内容，高效液相色谱是以液体为流动相，借助高压输液系统，在装有固定相的色谱柱中泵入不同比例的缓冲液、混合溶剂或不同极性的单一溶剂，当柱内的成分进行分离后加以检测，有效分析试样。
该方法可以及时准确解决不同学科领域中的数据问题，如法检、商检、工业、化学、农业、医学等，逐渐成为重要的分离分析技术。
材料与方法仪器设备和材料、试剂。
本实验中采用的仪器设备主要是沃特世高效液相色谱仪ACQUITY UPLC H-Class Bio、二极管阵列检测器、自动进样器。
而实验中使用的10份葡萄酒样品规格为750mL，试剂为0.5mg/mL的赤藓红、胭脂红、柠檬黄、苋菜红、日落黄与1.00mg/mL的诱惑红，纯度为99.5%的对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸甲酯、苯甲酸，纯度为99.9%的糖精钠、对羟基苯甲酸乙酯，纯度为91%的靛蓝与纯度为99%的山梨酸和安赛蜜，纯度为92%的新红。
仪器条件和样品处理。
（1）仪器条件。
首先是色谱条件。
本实验选用的色谱柱为ACQUITY UPLC 1.7μm，柱温为30℃，流速是1.0mL/min，而进样量为10μL，流动相为20mmol/L 乙酸铵-甲醇，检测波长涉及630nm的亮蓝、425nm的柠檬黄、515nm的诱惑红、日落黄、胭脂红、苋菜红等，下表1表示的是洗脱梯度。
2、反相高效液相色谱法测定果酒中的有机酸修改
反相高效液相色谱法测定果酒中的有机酸一、实验目的：学习和掌握反相高效色谱法测定果酒中有机酸含量的方法。
练习并掌握反相高效色谱仪的使用。
二、实验原理：实验采用反相高效色谱法测定果酒中有机酸含量，将五种有机酸标准溶液稀释至系列浓度后，在以Agilent ZorbaxSB-C18作为色谱分离柱、磷酸二氢钾为流动相的色谱条件下进行分析，以峰高外表定量，得到有机酸标准曲线。
然后再同样色谱条件下将果酒样品液进样，根据标准曲线来判断果酒中有机酸种类及含量。
三、实验仪器：反相高效色谱仪、50uL微量进样器、真空泵、恒温水浴锅、混合纤维树脂微孔滤膜、电子天平、离心机、四、实验试剂：草酸、酒石酸、乳酸、醋酸、柠檬酸（优质纯）、磷酸二氢钾、磷酸（分析纯）、甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、纯净水五、实验步骤：1、流动相的配制：称取磷酸二氢钾10.880g置于1000ml容量瓶中，用纯净水定容，其浓度为0.08mol/L 。
并用磷酸调PH为2.90.再经0.45um混合纤维树脂微孔滤膜真空抽滤后，并在超声波下脱气20min待用。
2、有机酸标准样的配制：分别准确称取5种有机酸：草酸0.4004g、酒石酸0.4003g、乳酸0.4003各（4.14905ml）、醋酸0.4004g（1.0694ml）、柠檬酸0.4003g、置于50ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，配成有机酸混合标准样品液。
3、酒样的预处理：取四个10ml一次性塑料离心管，分别加入1ml、1ml、1.5ml、1.5ml酒样，放入高速离心机在10000r/min的条下高速离心15min，等离心结束后取出酒样用移液器精确吸取样品5ml到25ml容量瓶中，用流动相定容至刻度。
酒样在通过0.45um混合纤维树脂微孔滤膜真空抽滤后，可直接进样。
4、有机酸标准曲线的绘制：将5种有机酸用0.45um混合纤维树脂微孔滤膜真空抽滤后在流动相为0.08mol/L磷酸二氢钾溶液（PH2.90）；流速为0.8ml/min ；进样量为20uL；检测波长为215nm；柱温为30度的色谱条件下进样，以峰高外标法定量绘制标准曲线。
高效液相色谱法测定水果中常见的4种糖和糖醇
高效液相色谱法测定水果中常见的4种糖和糖醇黄 蕊，吴光斌，陈发河【摘 要】[摘要]利用高效液相色谱法，一次进样，同时测定水果中的果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖等可溶性糖的含量．结果表明，整个分析过程在27 min内完成，各组分能够达到很好的分离，在0.2～20 mg/mL的糖质量浓度范围内呈现良好的线性关系，相关系数在0.9999以上，4种糖的加标回收率为97.07%～100.11%，相对标准偏差小于5%．该方法具有较高的灵敏度与精密度，样品前处理方法简便，可用于快速、准确地测定水果中果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖等可溶性糖的含量．【期刊名称】集美大学学报（自然科学版）【年(卷),期】2014(019)003【总页数】6【关键词】[关键词]高效液相色谱;果糖;山梨醇;葡萄糖;蔗糖0 引言果实内可溶性糖的种类与含量是影响果实品质的重要因素．这些可溶性糖不仅是影响果实甜度的物质，同时也是酸、类胡萝卜素、维生素C等营养成分及芳香物质等合成的基础原料[1]．果实中的常见的可溶性糖主要包括蔗糖、果糖、葡萄糖和山梨醇等[2－4]，其中山梨醇属于糖醇类，是山梨糖的还原产物．它本身是一种小分子渗透物质，在改变细胞渗透压[5]、提高植物抗寒力[6]、清除活性氧[7]等方面起着重要的作用．因此，准确测定山梨醇含量对于农产品采后贮藏保鲜机理的研究十分重要．通常糖的测定方法有比色法 蒽酮－硫酸法 硫酸－咔唑法 气相色谱法 等．一般的化学方法只能测定总糖的含量，不能测定糖的组成．气相色谱法虽然可以测定糖的组成，但必须对糖进行衍生化才可以检测，检测步骤繁琐，且不可避免地会产生误差[11]．而高效液相色谱法却可以弥补这一缺点，从而在糖类化合物的测定中得到了广泛的应用[2－3]．然而目前，关于果品中蔗糖、果糖、葡萄糖和山梨醇这4种糖的分离及含量的测定方法鲜有报道，而实际中将这4种糖和糖醇完全分离并实现同时一次检测也较为困难．本文建立了利用高效液相色谱法分离并同时测定水果中葡萄糖、果糖、蔗糖及山梨醇含量的技术方法．1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器莲雾 (黑珍珠)，购自厦门台湾水果集散中心;枇杷 (早钟6号)，福建省莆田县;柚子 (琯溪蜜柚)，福建省平和县．果糖、葡萄糖、山梨醇和蔗糖标准品，美国Sigma公司;乙腈，色谱纯，美国天地公司;无水乙醇，分析纯，中国国药集团;实验用水 (18.2 MΩ·cm)由本实验室用Millipore Milli Q RG超纯水系统制备．1525型高效液相色谱仪，美国Waters公司．1.2 方法1.2.1 样品处理称取一定量的果肉，置于研钵中，向其中加入20 mL体积分数为50%乙腈水溶液，研磨匀浆，定容至25 mL，常温离心 (4000 r/min，30 min)，取上清液，进样前通过0.22 μm微孔滤膜过滤．1.2.2 HPLC测定条件XBridge Amide Column(3.5 μm，4.6 mm ×250 mm，Waters);流动相为 V(乙腈)∶V(水)=85∶15，并含体积分数0.1%氨水;流速1.5 mL/min;柱温45℃;进样量20 μL;Waters 1525泵;Waters 2414折光指数检测器．以保留时间定性，峰面积定量．1.2.3 标准曲线的制备准确称取0.5 g(精确至0.0001 g)经干燥恒重的果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖，转移至25 mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得质量浓度为20 mg/mL的混标母液，逐级稀释至0.2、0.4、1、5、10、20 mg/mL的标准溶液．进样前通过0.22 μm微孔滤膜过滤．2 结果2.1 色谱条件的优化2.1.1 流动相的选择首先采用Waters XBridge Amide Column以不同体积比的流动相 (V(乙腈)∶V(水)=75∶25、80∶20、85∶15、90∶10)来测定混标液和样品提取液中果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖的分离情况．结果表明，增加水相比例可以缩短分析时间，但会降低分离度，造成果糖、山梨醇和葡萄糖色谱峰的重叠;随着乙腈比例的增加，4种糖的分离度提高，但相应的分析时间会延长．当流动相中V(乙腈)∶V(水)=85∶15时，4种糖的分离效果较好．但是，流动相仅为乙腈水溶液时，果糖峰形不佳，葡萄糖存在旋光异构体，因此，分别尝试在流动相中添加质量分数0.2%乙酸铵和体积分数0.1%氨水以改善峰形．结果表明，在流动相添加质量分数0.2%乙酸铵时，测定结果会在果糖色谱峰附近出现溶剂倒峰，无法准确定量;而添加体积分数0.1%氨水时，4种糖的色谱峰峰形得到改善，分离度均大于1.5．因此，在兼顾分离度、峰形及分析时间的基础上，本试验采用的流动相为V(乙腈)∶V(水)=85∶15，并含有体积分数0.1%氨水．2.1.2 流速的选择比较流速在1.0、1.2、1.3、1.4、1.5 mL/min条件下4种糖的分离情况，发现在流速为1.5mL/min时，4种糖的出峰时间较快，分离度均达1.5以上，峰形较好．2.1.3 色谱柱温度的选择在30、35、40、45、50℃条件下进行混标液和样品提取液中可溶性糖的分析，发现随着温度的升高，4种糖的保留时间有所缩短，但分离度降低．兼顾分离度和保留时间，本实验采用色谱柱柱温为45℃．2.2 方法的线性范围和检出限按1.2.2中的分析条件进行测定，以不同糖浓度混标峰面积y为纵坐标，标样质量浓度x为横坐标绘制标准曲线，以信噪比S/N=3计算果糖、山梨醇、葡萄糖、蔗糖的检出限，以信噪比S/N=10计算它们的定量限，标准曲线、回归方程、相关系数及检出限、定量限见表1．试验结果表明，果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖在0.2～20 mg/mL范围内，浓度与峰面积有良好的线性关系，相关系数达到了0.9999．2.3 色谱图在1.3.2色谱条件下，得到果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖标样的色谱图，相邻峰均能达到完全分离 (见图1)．2.4 加标回收率与精密度取适量的样品，按线性检测范围加入一定量的标准品，然后进行加标回收实验[13]，平行测定6次，结果如表2所示．结果表明，果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖的回收率在97.07% ～100.11%，说明该方法具有较高的准确度．平行测定6次，测定峰面积，通过计算相对标准偏差 (RSD)考察此方法的精密度，经测定，果糖、山梨醇、葡萄糖、蔗糖峰面积的RSD分别为1.34%、1.26%、1.07%、0.79%，结果表明该方法的精密度良好．2.5 样品分析按照1.2.2色谱条件分别对莲雾果实、枇杷果实及柚子果实样品进行分析，测得采后莲雾果实中的可溶性糖主要为果糖、葡萄糖和蔗糖，采后枇杷果实中的可溶性糖主要为果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖，采后柚子果实中的可溶性糖主要为果糖、葡萄糖和蔗糖，样品色谱图见图2—图4，样品中可溶性糖含量结果见表3．3 讨论葡萄糖、果糖、蔗糖、山梨醇在大部分果实所含的糖类组分中均占有较高的比例，它们直接影响到果实的感官品质．目前同时测定葡萄糖、果糖、蔗糖的方法报道较多，但利用HPLC－示差检测器同时分离测定水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的研究报道很少，本实验利用高效液相色谱－示差检测器和酰胺柱成功地分离了水果中这4种糖和糖醇．与Kelebek Hasim等[14]、刘胜辉等[15]、孟伊娜等[16]的研究对比，这一方法简化了样品前处理步骤，实现了4种糖和糖醇的同时分离测定．该方法的建立，不仅提高了检测效率，也节省了分析时间．本方法可广泛应用于各类水果、蔬菜等所含的葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的同时分离测定．4 结论本研究建立了用高效液相色谱法分离并测定果品中葡萄糖、果糖、蔗糖及山梨醇含量的方法体系，结果表明，该方法中4种糖的分离度均达到1.5以上，保留时间重现性较好，加标回收率准确性高，并且由于本研究中样品前处理方法简便、快速，因此可作为分析检测水果中可溶性糖组分和含量的一种简捷、准确的方法．[参考文献][1]王晨，房经贵，王涛，等．果树果实中的糖代谢[J]．浙江农业学报，2009，21(5):529-534．[2]张丽丽，刘威生，刘有春，等．高效液相色谱法测定5个杏品种的糖和酸 [J]．果树学报，2010，27(1):119-123．[3]胡志群，王惠聪，胡桂兵．高效液相色谱法测定荔枝果肉中的糖、酸和维生素C[J]．果树学报，2005，22(5):582-585．[4]吴国良，蔡华成，张宏平，等．扁桃果实发育期果肉组织糖含量及相关酶活性的变化 [J]．果树学报，2012，29(4):605-610．[5]BELLALOUI N，BROWN P H，DANDEKAR A M．Manipulation of in vivo sorbitol productionalters boron uptake and transport in tobacco[J]．PlantPhysiology，1999，119(2):735-742．[6]WANG S Y，STEFFENS G L，FAUST M．Effect of paclobutrazol on accumulation of carbohydrates on applewood [J]．Hort Sci，1986，21(6):1419-1421．[7]SMIRNOFF N，CUMBES Q J．Hydroxyl radical scavenging activity of compatible solutes[J]．Phytochemistry，1989，28(4):1057-1060．[8]孙伟伟，曹维强，王静．DNS法测定玉米秸秆中总糖 [J]．食品研究与开发，2006，27(6):120-123．[9]张惟杰．复合多糖生化研究技术[M]．上海:上海科学技术出版社，1987．[10]林颖，黄琳娟，田庚元．一种改良的糖醛酸含量测定方法 [J]．中草药，1999，30(11):817-819．[11]王静，王晴．色谱法在糖类化合物分析中的应用 [J]．分析化学，2001，29(2):222-227．[12]陈静，吴光斌，陈发河．HPLC测定采后莲雾果实中可溶性糖含量及其在贮藏期的变化 [J]．食品与机械，2012，28(6):103-105．[13]逯平杰，代容春，叶冰莹，等．高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、葡萄糖和蔗糖的含量 [J]．食品科学，2011，32(2):198-200．[14]KELEBEK H，SELLI S，CANBAS A，et al．HPLC determination of organicacids，sugars，phenolic compositions and antioxidant capacity of orange juice and orange wine made from a Turkish cv．Kozan[J]．Microchemical Journal，2009，91:187-192．[15]刘胜辉，魏长宾，孙光明，等．高效液相色谱法测定台农6号菠萝果实中的糖分 [J]．食品科学，2009，30(2):162-164．[16]孟伊娜，张瑞廷，史强，等．高效液相色谱法测定甜高粱茎秆中3种糖含量 [J]．中国农学通报，2010，26(8):90-95．[基金项目]国家自然科学基金资助项目 (31171777);福建省自然科学基金资助项目 (2010J01211)。
高效液相色谱法测定酒类中总糖含量
科技文苑Jun 2018 CHINA FOOD SAFETY61糖主要包括单糖（葡萄糖、果糖等）、双糖（蔗糖、乳糖等）和多糖（淀粉、纤维素等），不同类型的酒含有不同的糖，葡萄酒、果酒主要含果糖、葡萄糖；黄酒主要含葡萄糖；而大部分的配制酒添加了白砂糖，即主要含蔗糖，所以酒的总糖主要为果糖、葡萄糖、蔗糖三者的加和。
糖在酒中发挥着重要作用，如改善口感，但糖会带来一定的健康问题，如肥胖、糖尿病、高血压等。
总糖是食品的重要成分之一，总糖含量也是食品行业中评价产品质量、营养、风味的指标之一[1]，因此为了保证和控制酒的质量，建立简单、可靠且快速的糖类物质成分分析及含量测定方法具有重要意义。
目前，国内对酒的总糖检测方法主要是滴定法——直接滴定法[2]适用于果酒、葡萄酒、露酒；亚铁氰化钾滴定法[3]适用于干、半干黄酒；廉爱农法[3]适用于甜、半甜黄酒。
以上方法都有一个共通点，就是对样品中总糖含量、实验过程中的加热温度、滴定操作、滴定速度以及实验人员技术等要求严格[4]。
滴定法操作步骤多、费时长，影响因素也多，特别是含糖量较多的色酒、配料杂的酒，此类产品终点难判定，容易导致测量结果产生误差，而通过加入活性炭对有颜色的酒吸附脱色再测定，可以使样品变为无色，从而使滴定终点容易判定。
但有结果表明，不论在何种条件下，随着活性炭添加量的增加,吸附色素效果增强的同时吸附的糖也随之增加，吸附时间越长，活性炭吸附的糖越多，致使测得结果偏低[5]。
此外，不同类型的酒采用不同的滴定法，也会导致每天处理的样品量少，效率低。
高效液相色谱法具有普及率高、操作简便、快速、分离效果好等优点，是目前检测糖类物质的主要手段。
本文将通过优化液相色谱分离的条件检测酒类中的几种糖，结合酒类中糖的主要成分，建立高效液相色谱法测定酒类中总糖的方法。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂Waters e2695高效液相色谱仪，配备Waters 2414示差检测器；果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖标准品，来源于Dr.Ehrenstorfer GmbH；超纯水（18.2MΩ），实验室自制；乙腈（色谱纯）；酒样购自本地超市。
利用高效液相色谱法测定食品中五种糖的含量
图1 分离效果图
样品前处理
将苹果样品洗净、擦干、切碎并混匀，称取5.00 g 于研钵中，加入6 mL的蒸馏水磨制均匀。
磨制均匀后全部移入离心管中，4000 r·min-1离心6 min。
分离出离心液之后，将离心液导入干净的试管中，再向盛有沉淀的离心管中加入12 mL蒸馏水并搅拌，然后再进，最后将所有的离心液放入150 mL容量瓶中，并加蒸馏水稀释至相应刻度。
稀释液再用微孔滤膜过准备HPLC分析用。
色谱分析
对过滤后的稀释液进行HPLC分析。
结果与分析
色谱的保留时间
1.3的色谱条件下，分别对5种糖溶液、苹果样品和酸奶样品进行测定，发现果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及乳糖的保留时间分别是7.1、8.0
13.6 min及15.7 min，分离效果良好，样品图中也未见干扰部分。
2.2 标准曲线和最低检出限
精密配制5种糖组分的混合标准溶液，按照上述操作条件分离检测，用质量浓度（X，单位为
作为横坐标，色谱峰峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，最后得5种糖组分标准曲线的回归方程
系数及最低检测限见表1。
2.3 精密度实验
配制5种糖组分的混合标准液4份，并依次进样计算变异系数，结果见表2，RSD在4.5%～
均小于10%。
实验表明，5种糖组分的回收率均大于90 RSD均小于10%，说明本测定方法有较好的准确性和重复性。
现代食品XIANDAISHIPIN
食之不完的美筵。
——爱默生。
葡萄酒糖类的测定—高效液相色谱法（氨基柱）
葡萄酒糖类的测定—高效液相色谱法（氨基柱）FSPJLPG005 葡萄酒（果酒）糖类的测定高效液相色谱法（氨基柱）F_SP _JL _PG _005葡萄酒（果酒）—糖类的测定—高效液相色谱法（氨基柱）1. 范围本方法采用氨基柱的高效液相色谱法测定葡萄酒、果酒中的糖类，包括果糖、葡萄糖、蔗糖的含量，以及由此计算的总糖、还原糖的含量。
本方法适用于各种类型的葡萄酒、果酒中糖类的测定，以g/L 报告其结果，测定值保留一位小数。
2. 原理根据各种糖类在流动相和液相色谱柱的固定液之间具有不同的分配系数，将样品注入液相色谱柱，用乙腈和水作流动相，糖类分子按其分子量由小到大的顺序流出，经示差折光检测器检测，用外标法定量。
3. 试剂3.1乙腈：液相色谱纯3.2超纯水（或新鲜的重蒸馏水）3.3乙腈-水（80+20）：将乙腈和水按（80+20）的比例混合（或根据仪器情况调整该比例至分离效果最佳），用0.45μm 微孔滤膜（可用于有机溶剂的）过滤后用脱气装置充分脱气。
3.4糖混合标准溶液（10g/L ）分别准确称取干燥的果糖、葡萄糖、蔗糖各1g （精确至0.0001g ），用少量水溶解后，完全转移至100mL 容量瓶中，用超纯水定容至刻度，混匀。
该溶液含果糖、葡萄糖、蔗糖分别为10g/L 。
将糖混合标准溶液用0.45μm 微孔滤膜过滤，备用。
4. 仪器4.1高效液相色谱仪：配有示差折光检测器及积分仪或工作站4.2色谱柱：μ Bondapak Carbohydrate 柱（300mm ×4mm ）（Waters 公司），或相当。
4.3样品及溶剂的过滤装置及可用于有机溶剂的微孔滤膜（0.45μm ）。
4.4脱气装置（或超声波装置）4.5微量注射器：25μL5. 操作步骤5.1试样的制备将样品超纯水稀释至总糖量在4～50g/L 左右，并用0.45μm 微孔滤膜过滤。
5.2色谱条件采用乙腈-水(80+20)作为流动相,流速为2ml/min,在室温下运行至基线平稳后再进样,进样量为20μL 。
高效液相色谱法测定国公酒中3种成分的含量
34中国处方药 第18卷 第6期·实验研究·表7：一级动力学模型的计算数学模型溶出介质自制片剂参比制剂缬沙坦氨氯地平缬沙坦氨氯地平一级动力学模型水Y＝-0.859 8X＋4.370 2r ＝0.989 9Y＝-0.947 4X＋4.358 4r ＝0.976 2Y＝-0.910 2X＋4.383 4r ＝0.996 8Y＝-1.071 3X＋4.444 4r ＝0.995 4pH1.2Y＝-0.306 7X＋4.530 5r ＝0.989 2Y＝-0.183 1X＋3.396 9r ＝0.982 7Y＝-0.305 9X＋4.551 0r ＝0.993 7Y＝-0.033 3X＋3.220 5r ＝0.938 3pH4.0Y＝-1.086 0X＋4.337 1r ＝0.995 3Y＝-0.927 9X＋4.266 4r ＝0.986 6Y＝-1.183 8X＋4.398 9r ＝0.991 1Y＝-0.922 1X＋4.270 5r ＝0.960 2pH6.8Y＝-7.107 3X＋3.776 5r ＝0.969 6Y＝-10.365X＋4.833 5r ＝0.964 7Y＝-7.841 0X＋3.776 5r ＝0.987 9Y＝-11.501 5X＋5.141 4r ＝0.999 5光照和反复挤压，为成品的质量带来风险。
因此，在体外溶曲拟合的前提下，本研究采用了粉末直接压片工艺。
该技术降低了工艺过程中的风险，同时流程简单、生产效率高、产业化容易，具有良好的产能弹性，可降低产品的综合生产成本。
在处方筛选阶段，选用pH4.0缓冲溶液作为有区分力的溶出条件，并成功筛选出适用于粉末直接压片工艺、并且体外溶出行为与参比在4种介质中均相似的处方。
证明自制产品的内在质量与参比制剂具有一定的相似性，为体内生物等效性试验的成功提供了依据。
参考文献[1] Gerbin oPP， Shoheiber O. Adherence patterns among patients treated with fixed-dose combination versus separate antihypertensive agents[J]. AJHP， 2007， 64（12）: 1279-1283.[2] 戴彤， 张抒扬. 缬沙坦/氨氯地平单片复方制剂在高血压治疗中的应用[J]. 中华高血压杂志， 2011， 19（9）: 813-815.[3]王娓. 高血压治疗药物新趋势: 单片复方制剂的探讨[J]. 中国处方药， 2015， 13（4）: 30-31.[4]张崖冰， 胡善联， 宋哲意， 等. 氨氯地平-缬沙坦复合片的药物经济学研究[J]. 中国新药与临床杂志， 2010， 29（2）: 143-147.[5] 诺瓦提斯公司.瓦尔沙登的固体口服剂量形式：中国专利，97195891.2[P].2004-01-07[6] 李红成. 干法制粒技术在药物研究中的应用进展[J]. 中国药业，2013， 22（6）: 127-128.[7] 冯雄峰. 干法制粒及设备的特点与影响干轧效果因素的简述[J]. 机电信息， 2006， 4: 49.[8] 李金枝， 冯金瑞， 何恬， 等. 粉末直接压片技术及其辅料的应用与研究现状[J]. 中国新药杂志， 2015， 24（21）: 2467-2470.[9] 谢沐风. 具有区分力的溶出曲线 [J]. 中国医药工业杂志， 2014，45（7）: 687-689.[10] 国家药品监督管理局. 普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则[EB/OL]. /WS04/CL2093/229256.html. [2016-03-18].[11] 张启明， 谢沐风， 宁保明， 等. 采用多条溶出曲线评价口服固体制剂的内在质量[J]. 中国医药工业杂志， 2009，40（12）: 946-950.[12] 牛剑钊， 林兰， 张启明. 美国和日本溶出曲线相似性判定方法介绍[J]. 中国药物评价， 2013， 30（2）: 67-69.[13] 王丽葵， 陈中亚， 王威， 等. 国内外溶出度测定及评价方法的异同点[J]. 中国医药工业杂志， 2015， 46（5）: 519-524.国公酒是临床中医学中的一种常见中成药，主要由30多味中药材制成，如当归、羌活、牛膝、防风、独活、牡丹皮、广藿香、槟榔、麦冬、陈皮、佛手等，功能作用为祛风湿、舒经络等，用于风寒湿邪闭阻所致的痹病，症见关节疼痛、沉重、屈伸不利、手足麻木、腰腿疼痛[1]。
葡萄酒中果糖、葡萄糖含量的测定——高效液相色谱法
葡萄酒中果糖、葡萄糖含量的测定——高效液相色谱法摘要：通过配有示差折光检测器的高效液相色谱仪检测葡萄酒中果糖、葡萄糖的含量。
在色谱柱为氨基柱，流动相为乙腈+一级水=76+24，流速为0.8mL/min，检测池温度为40℃的检测条件下，果糖、葡萄糖均呈良好的线性关系，其检出限分别为0.10g/L、0.16g/L，定量限分别为0.37g/L、0.50g/L，回收率范围分别为90.81%~97.96%、90.40%~97.96%，精密度良好。
关键词：高效液相色谱；果糖；葡萄糖；葡萄酒；示差折光检测器葡萄酒中含糖量是葡萄酒酿造工艺中发酵后剩余的糖，是判断葡萄酒类型的重要指标，也是改进葡萄酒酿造工艺的重要因素[1]。
目前，检测葡萄酒的含糖量主要是用斐林试剂滴定法测定酒中的总糖和还原糖，还原性糖包括果糖和葡萄糖。
斐林试剂滴定法不能对果糖、葡萄糖分别定量，且斐林试剂需要现用现配，有一定的局限性。
本方法采用高效液相色谱法，具有简便、准确、可大批量检测的优点，适用于葡萄酒中果糖和葡萄糖的检测。
1. 材料和方法1.1仪器和设备LC-20A高效液相色谱仪配示差折光检测器（RID-10A），日本岛津；固相萃取装置，安谱；真空泵，恒奥；电子天平，梅特勒-托利多。
1.2试剂果糖标准品（纯度99.0%），葡萄糖标准品（纯度99.0%），一级水，色谱纯乙腈，C18固相萃取柱（6mL，500mg）。
1.3方法1.3.1标准曲线的配制1.3.1.1 果糖、葡萄糖混合标准溶液：分别准确称取0.500g果糖标准品（纯度99.0%），葡萄糖标准品（纯度99.0%）至同一个25mL容量瓶中，用一级水定容至刻度后摇匀，配制得到20.0mg/mL果糖、葡萄糖混合标准溶液。
1.3.1.2 果糖、葡萄糖混合标准工作曲线：将20.0mg/mL果糖、葡萄糖混合标准溶液用一级稀释，配成浓度分别为0.1、2.0、4.0、6.0、10.0mg/mL混合标准工作曲线，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液进样检测。
高效液相色谱法测定饮料中糖、甘油和乙醇
高效液相色谱法测定饮料中糖、甘油和乙醇
杨亚玲;胡秋芬;杨光宇;尹家元
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2003(039)006
【摘要】研究了高效液相色谱法测定饮料中糖、甘油和乙醇的方法.饮料样品用Waters SepPak-C18固相萃取小柱预分离,以Waters Sugar-Pak-1钙型阳离子交换柱为固定相,0.05g@L-1EDTA钙钠水溶液为流动相,示差折光仪为检测器,一次进样测定饮料样品中的糖、甘油和乙醇.检出限在微克级,RSD在0.68%～2.1%之间,
标准回收率在96%～107%之间.方法用于几种饮料样品的测定,结果满意.
【总页数】3页(P327-329)
【作者】杨亚玲;胡秋芬;杨光宇;尹家元
【作者单位】昆明理工大学,生化学院,昆明,650224;云南大学,化学系;云南大学,化
学系;云南大学,化学系
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
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泽文;李宝馨
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5.高效液相色谱法测定细菌发酵液中的糖、甘油和乙醇的研究 [J], 陈毅坚;周元清;张灼
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高效液相色谱法测定啤酒、发酵液和麦汁中的糖类和乙醇
高效液相色谱法测定啤酒、发酵液和麦汁中的糖类和乙醇闫国芳;林艳;于世民
【期刊名称】《啤酒科技》
【年(卷),期】2002(000)010
【摘要】@@ 1.引言rn目前国内大啤酒厂多采用啤酒分析仪测定乙醇,很少采用气相色谱法(GC)和液相色谱法(HPLC).采用GC和HPLC则直接测定乙醇含量,由于啤酒中乙醇含量远高于其它杂醇油,GC法测定杂醇油时,难以定量测定乙醇,除非采用填充柱,单独测定乙醇.本文方法采用Nucleosil C18柱,测定啤酒、发酵液和麦汁中的糖类时,同时测定乙醇.
【总页数】2页(P36,47)
【作者】闫国芳;林艳;于世民
【作者单位】青岛市产品质量监督检验局,266071;青岛啤酒集团公司科研中
心,266061;青岛啤酒集团公司科研中心,266061
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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直接稀释-液相色谱法快速测定葡萄酒中的甘油和糖
直接稀释-液相色谱法快速测定葡萄酒中的甘油和糖葛宝坤;杨爽;俞子萱;赵滨岩【摘要】采用30%的乙腈水（体积分数）为稀释液，建立了样品直接稀释、高效液相色谱（HPLC）分离、示差折光检测器（RID）快速测定葡萄酒中的甘油、果糖、葡萄糖、蔗糖的可靠方法。
该方法以保留时间（Rt）定性，外标法定量；在0.05 mg/mL~5 mg/mL的浓度范围内，标准曲线有良好的线性关系，相关系数大于0.9995；样品在0.25、2.5、25.0 g/L 3个加标水平内的回收率范围为96%~102%（n=10），相对标准偏差小于8.0%；方法的定性检出限（LOD）为0.04 g/L、定量检出限（LOQ）为0.10 g/L。
%Diluent for 30%acetonitrile water, there were set up some reliable methods,like dilute the sample directly, High performance liquid chromatography (HPLC), Refractive index detector (RID),which made a rapid determination ofglycerin,fructose,glucose,sucrose in wine. The method took the retention time (Rt) qualitative, external standard method of quantitative;within the limits of concentration 0.05 mg/mL-5 mg/mL, standard curve had a good linear relationship, and the correlation coefficient was more than 0.999 5;in the level of 0.25 g/L,2.5 g/L,25.0 g/L,the add mark recovery rate was from 96%to 102%,the relative standard deviation was less than 8.0%, limit of detection(LOD) was 0.04 g/L,limit of quantitation(LOQ) was 0.10 g/L.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】3页(P79-81)【关键词】直接稀释法;HPLC;RID;甘油;糖【作者】葛宝坤;杨爽;俞子萱;赵滨岩【作者单位】天津出入境检验检疫局，天津300461;天津出入境检验检疫局，天津300461;天津出入境检验检疫局，天津300461;天津出入境检验检疫局，天津300461【正文语种】中文近年来，随着人们生活水平的提高，葡萄酒已逐渐成为普通百姓餐桌上的重要饮品，但葡萄酒被检出标签不合格、重金属、添加剂超限量使用、生产劣质假冒葡萄酒的情况时有发生[1]，因此葡萄酒的真伪与质量的好坏是关系到人们身体健康的重要因素。
高效液相色谱法同时分析低浓度的葡萄糖_乙醇和甘油
等教育出版社, 1981. 1～11 4 师 治贤, 王俊德. 生物大分 子的液相 色谱分离 和制备 .
第 2 版. 北京: 科学出版社, 1996. 17
Simultaneous Analysis of Low Concentrations of Glucose, Ethanol and Glycerol by High Performance Liquid Chromatographic Method
保留时间 R et ent ion t ime
( min)
6. 04±0. 04
选择性* ′
1
相关系数 r
0. 999 1
线性范围 Linear range
(g / L)
< 15
乙醇 E th anol
13. 36±0. 08
2. 21
0. 999 7
< 20
甘油 G l ycer ol
8. 72±0. 05
Abstract: A met hod based on hig h perfo rma nce liquid chr om atog raphy ( HP LC) fo r t he analy sis of gluco se, ethanol and g ly cero l sim ultaneously is pr esented. T he ba seline separation w as achieved at r oo m tempera ture ( 25-30 ℃) o n a Beckman -Spher og el car bohydra te colum n ( 6. 5 mm i. d. ×30 cm) w ith H2SO 4-H2O ( 0. 5∶ 1 000, V / V ) as mo bile phase at a flow rate o f 1. 000 mL / min. A ll the substances w ere detected w ith the Beckman 186 Refr activ e Index Detecto r. U nder these conditio ns, distinct peaks o f g luco se , ethano l and gly cer ol w er e resolv ed w ithin 15 min. T he ret ent ion t ime in t he par ticular co ndit ion w as ( 6. 04±0. 04) min for g lucose, ( 13. 36± 0. 08) min fo r ethanol and( 8. 72± 0. 05) min fo r g ly cero l. T he detectio n limit fo r glucose, ethanol and g ly cero l w ere fo und t o be 10- 5g, 10- 4g and 10- 5g respectiv ely . A ser ies of ex per iments have been per for med to investigate the g lucose co nsumptio n and the ethanol, g ly cer ol pr oduct ion in the ra ndom gr ow th of Sacchar omy ces cer evisiae w ith the metho d abo ve . O nly 0. 5 mL sample w as needed each tim e. In 30 hour s aft er ino culatio n, the cell density incr eased fr om 106 m L- 1 to 107 mL - 1. I t wa s fo und that the gluco se co ncentr atio n decreased appro x imately linearly aft er 8 hour s, and ethanol and glycer ol was det ect ed after the delay per io d as ex pect ed. T he results sho w t ha t the method pro po sed is r apid and convenient w it h eno ug h accur acy. T he metho d ma y be used to investigat e the metabolic behavior of y east in the fer mentation pr ocess at the ear ly stag e o r detect the slight cha ng es o f concentr atio ns of some objective substances in par ticular cultur e ex per iments.
高效液相色谱法快速测定葡萄酒及果酒中的防腐剂和甜味剂
高效液相色谱法快速测定葡萄酒及果酒中的防腐剂和甜味剂刘渭萍;雷雅娟
【期刊名称】《辽宁化工》
【年(卷),期】2006(035)004
【摘要】建立了用高效液相色谱仪测定葡萄酒中的防腐剂和甜味剂的方法.采用Agilent ZOBAX SB-C18(4.6×150 mm×5 μm)色谱柱,以乙酸铵(0.02 mol/L)+甲醇(70+30)为流动相进行分离,方法的检出限为10 ng,线性范围为0～200 μg,相对标准偏差为0.8 %～2.9 %(n=3).
【总页数】3页(P238-239,248)
【作者】刘渭萍;雷雅娟
【作者单位】辽宁省产品质量监督检验院,辽宁,沈阳,110004;辽宁省产品质量监督检验院,辽宁,沈阳,110004
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7+2
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1.高效液相法同时测定葡萄酒中3种防腐剂和2种甜味剂 [J], 杭莉
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高效液相色谱法测定葡萄酒中含糖量
高效液相色谱法测定葡萄酒中含糖量
王吉顺;关家锐;王淑仁
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】1992(000)006
【摘要】葡萄酒中含糖量是葡萄酒质量检测的重要指标,在葡萄酒生产过程中,也要求严格控制糖的含量,因此快速、准确地测定葡萄酒中含糖量显得很重要。
有关葡萄酒中糖的测定方法很多,但多数方法操作繁琐,费工费时,且测定结果可靠性差。
而高效液相色谱法测定葡萄酒中含糖量则以速度快、结果可靠、样品不需前处理的特点被广泛采用。
【总页数】1页(P369)
【作者】王吉顺;关家锐;王淑仁
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】TS262.6
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２ ２ 流 动 相 的 选 择 根 据 色 谱 柱 说 明 书 和 文 献 ． ［ ］Ｗ ａｅｓＳ ｇｒ ａ ６ ， ｔｒ ｕ ａ ～Ｐ ｋ工钙 型 阳离 子 交 换 柱 一 般
以水 作 流 动 相 ， 中 加 入 少 量 Ｅ Ａ 钙 钠 可 减 少 水 ＤＴ
公 司 高 效 液 相 色 谱 仪 ， 括 ２ ０泵 ； Ｃ一３ 包 ５ Ｌ ０示 差 折
样分 析 ．
２ 结 果 与讨 论
２ １ 检 测 器 的选 择 由于 待 测 物 在 紫 外 光 区无 吸 ．
收， 且 待 测 物 在 样 品 中 的 含 量 较 高 ， 选 用 示 差 而 故
折光检测 器检测 ，
１ 实 验 部 分
１ １ 主 要 仪 器 和 试 剂 美 国 Ｐ ＲＫＩ —ＥＬ Ｒ ． Ｅ Ｎ ＭＥ
中 的糖 、 油 和 乙醇 的方 法 ， 果 满 意 ． 甘 结
Ｃ ｒｒ ｇ ｓ 护 柱 ； 动 相 为 ： ． ５ｇ Ｌ Ｅ ＴＡ钙 ａｔｉ ｅ 保 ｄ 流 ０ ０ ・ Ｄ 钠 水 溶 液 ， 速 为 ０ ５ｍＬ ｍｉ ； 温 ８ ℃ ； 样 量 流 ． ／ ｎ 柱 ５ 进
２ “ ０ Ｌ．
黄 海 涛 ，杨 力佳 中涛 ，丁 ，李 忠
（ ． 南 烟 草 科 学 研 究 院 烟 草 化 学 室 ， 南 昆 明 ６ ０ ０ ； ． １云 云 ５ １６ ２ 云南 大学 化学 系 ， 云南 昆 明
６ ０９ ） ５ ０ １
摘 要 ： 究 了 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 果 酒 中 的 糖 、 油 和 乙 醇 的 方 法 ， 酒 样 品 用 Ｓ ｐ—Ｐ ｋ—Ｃ ８ 固 相 微 萃 研 甘 果 ｅ ａ １ 取 小 柱 预 分 离 ， Ｗ ａｅｓＳ ｇ ｒ ａ 型 阳 离 子 交 换 柱 为 固 定 相 ， ． ５ Ｌ Ｅ Ａ 钙 钠 水 溶 液 为 流 动 相 ， 以 ｔｒ ｕ ａ —Ｐ ｋＩ钙 ０ ０ ＤＴ 示 差 折 光 仪 为 检 测 器 ， 次 进 样 测 定 果 洒 样 品 中 的 蔗 糖 、 萄 糖 、 糖 、 油 和 乙 醇 ． 低 检 测 限 在 微 克 级 ， 对 标 一 葡 果 甘 最 相 准偏 差在 ０ ９ ％ ～１５ ｏ之 间 ， 准 回 收率 在 ９ ％～１５ 之 间 ． 法 用于 果 酒样 品的测 定 ， 果满 意 ． ．２ ．２ｎ ， 标 ７ ０％ 方 结 关 键 词 ： 效 液 相 色 谱 法 ； 酒 ； ； 油 ； 醇 高 果 糖 甘 乙 中 图分类 号 ： ６２ ６ ０ ５ ． ３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：２ ８ ９ １２ ０ ） ５ ３ ５～０ ０ ５ —７ ７ （０ ２ ０ —０ ７ ３
光检 测 器 ， Ｃ—Ｏｖ ｎ一 １ １柱 温 箱 ； 连 化 物 所 Ｌ ｅ ０ 大
ＫＹＫＹ —Ｓ Ｓ—Ｉ 色谱 工 作 站 ． Ｐ Ｉ
柱 材 料 上 的 钙 离 子 流 失 ， 长 柱 的 寿 命 ； 动相 也 延 流
可加 入 少 于 ５ 的 甲 醇 、 腈 或 四 氢 呋 喃 等 亲 水 性 ％ 乙
水 为 石 英 亚 沸 蒸 馏 水 并 用 Ｍｉｉ ｌ —ｑ５ 美 国 ｌ ０（ Ｍｉｉ ｒ 公 司 ） 纯 水 仪 处 理 ；Ｅ Ａ 钙 钠 （ 效 ｌｐ ｅ ｌｏ 超 ＤＴ 高 液 相 色 谱 专 用 ， ｔｒ 公 司 提 供 ） 蔗 糖 、 萄 糖 、 Ｗａｅｓ ； 葡 果 糖 、 油 、 醇 标 准 （ ｌｋ 甘 乙 Ｆ ｕ ａ公 司 生 产 ， 量 分 数 质
糖 、 油 和 乙醇 是 果 酒 中 的 重 要 成 分 ． 确 测 甘 准 定 这 些 成 分 对 了解 果 酒 的 特 性 和 风 味 都 有 重 要 意
型 阳 离 子 交 换 柱 （ ． １１ ０ １１ ， ａｅｓＳ ｐ ６ ５ ｒ１ ×３ ０ｒ１ ） Ｗ ｔｒ ｅ １３ １３
～
Ｐ ｋ—ｃ ８ 相 微 萃 取 小 柱 ，Ｓ ｐ—Ｐ ｋ ｕ ｎ ａ １固 ｅ ａ ｍｉ
义 ． 般 情 况 下 人 们 采 用 容 量 法 或 比 重 法 测 定 甘 一 油、 乙醇 。 量 法 或 比 色 法 测 定 糖 ｌ－ ］ 但 当 这 些 容 １３． 成 分 共 存 时 会 因相 互 干 扰 而 使 测 定 变 得 困难 ， 以 所 用 液 相 色 谱 法 同时 测 定 这 些 成 分 具 有 重 要 意 义 ． 目 前 用 液 相 色 谱 法 同 时 测 定 这 些 成 分 已 见 报 道 ｌ－ ｊ但 是 用 ＷａｅｓＳ ｇ ｒ ４ ６， ｔｒ ｕ ａ —Ｐ ｋ工钙 型 阳离 子 ａ 交换 柱 为 固 定 相 高 效 液 相 色 谱 法 同 时 测 定 果 酒 样 品 中 的 糖 、 油 和 乙 醇 在 国 内 还 未 见 报 道 过 ， 们 甘 我 研 究 了用 固 相 萃 取 预 分 离 ， ｕ ａ —Ｐ ｋ工阳离 子 交 ， Ｓｇｒ ａ 换 柱 为 固 定 相 高 效 液 相 色谱 法 同 时 测 定 果 酒 样 品
标 样 色 谱 图见 图 １ 果 酒 样 品 色谱 图 见 图 ２ ， ．
１ ３ 样 品处 理 ．取 果 酒 样ຫໍສະໝຸດ 品 ５ｍＬ 通 过 预 活 化 好 ，
的 Ｓ ｐ—Ｐ ｋＣ ８ 相 萃 取 小 柱 ， 去 最 初 的 ２ｍ ｅ ａ 固 弃 Ｌ ＇
收集 后 面 的 ３ｎＬ用 ４ ５ １ ． ｍ 滤 膜 过 滤 ， ２ Ｌ进 取 ０
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云南大学学报
（ 然科 学版 ） 自 ，
ＣＮ ５３ — １ ０４５／ Ｎ Ｉ Ｎ ２５８— ７ ｓｓ ０ ９７１
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高效 液 相 色 谱 法 测 定 果酒 中 的糖 、 油 和 乙醇 甘