层析柱装柱流程

层析柱装柱流程标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]

层析柱装柱流程

装柱材料

层析柱：BXK层析柱装柱仪器：?KTA 装柱器

装柱溶液

20%乙醇

匀浆的准备

精确计算所需介质的量（这对固定柱高的层析柱尤其重要）。1L填充柱所需的介质量大约是1.15L自然沉淀匀浆的量，于干净烧杯中，取 100%沉降胶（静止放置一天以上，倾去20%乙醇后的胶为100%沉降胶）与等体积20%乙醇混合备用。

安装层析柱

1.?检测层析柱的各个部件，确保干净、完整，拧上下端堵头，拧紧膨胀圈，然后

将层析柱垂直固定在铁架台上。

2.?将装柱器安装在层析柱上端。

3.?往层析柱中加入适量的20%乙醇，打开下端口，重力流，排除下筛网中滞留的气

泡，在液面低至1-2cm高度时关闭层析柱下端出口。

装柱

1.?用玻璃棒紧靠柱子内壁引流，将摇匀的介质加入到层析柱中，这可以减少气泡

的产生。迅速用20%乙醇填满柱子和装柱器，装上装柱器盖子，连接到?KTA 上。

2.?打开层析柱下端，开始以30cm/h流速装柱，直至柱床界面平稳。停止装柱。

3.?打开装柱器盖子，用虹吸法去除界面上端的液体，去掉装柱器，然后小心的用

20%乙醇封满柱子剩余部分。

4.?将上端转接头一端连上?KTA，打开机器，以装柱流速用装柱液排出转接头管路

中及筛板中残留的气泡，然后将转接头另一端装到层析柱上，使转接头下端刚好接触胶界面。(装柱流速约为70-100%的最大流速）

5.?拧紧膨胀圈，继续用装柱流速压柱，至少保持3个柱体积，以界面不变为主，

在界面处做上记号。

6.?关闭泵，并关闭柱子下端出口，使层析柱上端和泵断开（转接器上接口是打开

的），略拧松膨胀圈，缓慢向下转动调节杆，到记号处停止，然后再拧紧膨胀圈，关闭上接口。

7. 检测柱效