苏教版高中生物选修一 以尿素为唯一氮源的土壤微生物的分离、培养与数量测定 (共15张PPT)
高中生物选修1优质学案：2.3 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题3 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标1.能利用选择培养基分离细菌。
2.能运用稀释涂布平板法测定土壤中分解尿素细菌的数量。
|预知概念|一、研究思路1.筛选菌株(1)筛选的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基以尿素作为唯一氮源的培养基。
2.统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目①为了保证结果准确，一般设置至少三个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
3.设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计1.操作步骤：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
2.土壤取样一般要铲去表层土，因为绝大多数细菌分布于距地表约3～8__cm的土壤层。
3.样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同，请填写下表：4.微生物的生长受温度的影响，菌落的数目和特征是观察的主要内容。
三、操作提示1.无菌操作：取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。
称取土样要在火焰旁进行。
稀释样品要在火焰旁操作。
2.做好标记：要对平板和试管进行标记，尤其进行系列稀释时要按稀释度递增顺序将试管排列成行。
四、课题延伸分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，使培养基的碱性增强。
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
|过程评价|1.筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为固体培养基()2.利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数()3.统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计()4.利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数()5.利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量()6.培养分解尿素的细菌，培养基的pH值会增大()[答案] 1.√ 2.× 3.× 4.× 5.× 6.√|联想·质疑|★尿素为唯一氮源的培养基★脲酶的检测★土壤中分解尿素细菌的分离与计数如何进一步鉴定选择培养基上的菌落是分解尿素的细菌？提示：在培养基中添加酚红指示剂，培养基变红则可以初步鉴定为分解尿素的细菌。
高中生物选修一学案14：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。
重点与难点对土样的选取和选择培养基的配制、对分解尿素的细菌的计数学习过程一、筛选菌株1．尿素是一种重要的氮肥，农作物（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为，这是因为细菌能合成。
2．科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来原理是。
[思考1]本课题使用的培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是，提供氮源的是，琼脂的作用是。
[思考2]本课题使用的培养基对微生物（具有，不具有）选择作用。
如果具有，其选择机制是。
二、统计菌落数目1．在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是。
除此之外，也是测定微生物数量的常用方法。
2．采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于。
通过统计，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
[思考3]从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是。
[思考4]利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是。
3．统计的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。
因此，统计结果一般用来表示。
三、设置对照设置对照的主要目的是。
[思考5]请设计本实验的对照实验组：。
四、实验设计1．实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。
2．根据图示2－7填写以下实验流程：3．土壤微生物主要分布在距地表cm的近中性土壤中，约为细菌。
4．分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是，其目的是保证获得的平板。
细菌稀释度为，放线菌稀释度为，真菌稀释度为。
5．培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌一般在℃培养1～2d，放线菌一般在℃培养5～7d，霉菌一般在℃的温度下培养3～4d。
6．在菌落计数时，每隔h统计一次菌落数目。
选取时的记录作为结果，以防止因而导致遗漏菌落的数目。
高中生物选修实验分离以尿素为氮源的微生物
优选高中生物选修实验分离以 尿素为氮源的微生物
实验原理：
脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。人和 其它哺乳动物的尿中都含有尿素，尿素一 般不能直接被农作物吸收。有一些细菌含 有脲酶，它们可以通过降解尿素作为其生 长的氮源。选择以尿素作为唯一氮源即可 分离出此类微生物。
脲酶
(NH2)2C=O+H2O
2NH3+CO2
选择培养基
定义：是根据某一种或某一类微生物的特殊营养 要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。 利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的 微生物中分离出来(即提供有利于目的菌株生长的 条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其 他微生物生长。
实例应用： 1、培养基中加入抗生素可以筛选出抗生素抗性菌 2、培养基中缺乏碳源时，可筛选出自养型生物
你要包容那些意见跟你不同的人，这样子日子比较好过。你要是一直想改变他，那样子你会很痛苦。要学学怎样忍受他才是，你要学学怎样包容他 才是。 如果惧怕前面跌宕的山岩，生命就永远只能是死水一潭。 尽可能的开心地活每一天，就好比今天是你生命的最后一天。 勤奋是你生命的密码，能译出你一部壮丽的史诗。 善良的人永远是受苦的，那忧苦的重担似乎是与生俱来的，因此只有忍耐。 少一点预设的期待，那份对人的关怀会更自在。 ——苏霍姆林斯基 卓越的人一大优点是：在不利与艰难的遭遇里百折不饶。——贝多芬 同在一个环境中生活，强者与弱者的分界就在于谁能改变它。 有的时候一句古诗要比一个外语单词有用的多。 成功就是把复杂的问题简单化，然后狠狠去做。 人生就像骑单车，想保持平衡就得往前走。
培养基中的尿素在细菌的脲酶
制备培养基： 催化下分解产生NH3，呈碱性，
使细菌周围培养基的颜色发生 (1)全营养LB固体培养基： 变化：酸黄碱红
高中生物选修一土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计
⾼中⽣物选修⼀⼟壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计专题2微⽣物的培养与应⽤课题2 ⼟壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计本节课内容的总体⽬标⼆、教学重点与难点课题重点：对⼟样的选取和选择培养基的配制课题难点：对分解尿素的细菌的计数三、课时：1h四、本课题内容标准1、研究培养基对微⽣物的选择作⽤，“研究”属于知识性领域的⽬标动词，应⽤⽔平2、进⾏微⽣物的分离，“进⾏”属于技能性领域⽬标动词，独⽴操作⽔平3、测定某种微⽣物的数量，“测定”属于技能性领域⽬标动词，独⽴操作⽔平。
五、本课题研究思路六、教学思路:七、教学流程⼋、教学过程教学内容教师活动1.微⽣物最常⽤的两种接种⽅法是什么？学⽣活动设计意图为细菌计数原复习提问2?什么稀释涂布平板法？其⽬的是什么？学⽣回忆理、操作做好铺垫垫创设情景，引⼊学⽣⾃主学习新课，使学⽣明导⼊课题引导学⽣阅读“课题背景”知识，提出的问题。
确分解尿素的细回答问题菌的重要性，突出课题的必要性1、教师让学⽣阅读课本 P21，讲解：DNA 聚合酶作⽤，发现过程。
引导学⽣得到启⽰根据它对⽣存环境的要求，到相应的环境中去寻找（即⾃然界筛选）。
3、教师展⽰各种筛选菌株⽅法的多媒体图⽚:3、学⽣阅读课本P22侧边栏关于本课题使⽤的培养基成分相关内容，讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物质。
4、培养基选择分解尿素的微⽣物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微⽣物才能分解尿2.学⽣讨论为什么 1、筛选菌株 2、实验室中微⽣物的筛选原理实验室筛选：⼈为提供有利于⽬的菌株⽣长的条件（包括营养、温度、 H 等），同时抑制或阻⽌其他微⽣物⽣长。
Taq 细菌能从热泉 p 中筛选出来吗?黄⽯公园热泉底⽕⼭海 4.学⽣分析讨论，以尿素为唯⼀氮源的培养基能否筛选出分解尿素的细菌3、学⽣观看教师展⽰的多媒体图⽚。
⼤肠杆菌显⾊培养基菌株实验室筛选SARS 4、学⽣讨论培养基如何对微⽣物进⾏筛选。
高中生物选修1生物技术实践学案 实验2 分离以尿素为氮源的微生物
实验2 分离以尿素为氮源的微生物1．实验原理 脲或称尿素，是 降解产物，有一些细菌含脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。
在尿素固体培养基中加入 指示剂，如有含脲酶的细菌存在，这些细菌会向外分泌脲酶，使培养基中的尿素分解产生氨，导致培养基pH 升高，颜色变 。
可用______________固体培养基作为对照。
2．实验步骤3．实验结果4．讨论分析·题组训练1．下列培养基中，能分离出分解尿素的细菌的是（ ）A ．葡萄糖、NaCl 、K 2HPO 4、酚红、琼脂糖、水B ．蛋白胨、酵母提取液、NaCl 、K 2HPO 4、酚红、琼脂糖、水C ．葡萄糖、NaCl 、K 2HPO 4、酚红、琼脂糖、水、尿素D ．蛋白胨、酵母提取液、NaCl 、K 2HPO 4、水、尿素2．幽门螺杆菌（Hp ）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。
在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。
实验基本步骤如下：(NH 2)2C=O+H 2O 脲酶 2NH 3+CO 2请回答：（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现色环带。
（2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是灭菌。
A．高压蒸汽 B．紫外灯照射 C．70％酒精浸泡 D．过滤（3）步骤X表示。
在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液到培养基平面上。
菌液稀释的目的是为了获得菌落。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在中。
若不倒置培养，将导致。
（5）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的_________分解为NH3和14CO2。
现从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如下图所示：3．（1）欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，将土壤用进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布个平板，通常以每个培养皿中有个以内的单菌落的那一组稀释倍数为最合适。
（2）接种后的培养皿于37 ℃的恒温箱中培养。
高中生物选修一教学设计7：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、教材分析在微生物培养的基础上，本课题以土壤中分解尿素的细菌的分离为例，要求学生掌握菌种的分离与提纯，与专题1中发酵技术应用到的纯净菌种相呼应。
教材先从尿素在农业上的重要用途切入，介绍了土壤中能分解尿素的细菌，进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。
之后，通过实验设计来实现分解尿素的细菌的分离，体现出选择培养基的配置原则。
最后，从实验设计方案入手，逐渐过渡到实验流程，在整个实验流程中填入注意事项，构成一个完整的学习系统。
二、教学目标1.知识与技能（1）利用选择培养基分离细菌。
（2）运用相关技术解决生产生活中有关微生物技术的问题。
2.过程与方法分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性。
3.情感、态度与价值观形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯。
三、教学重难点1.重点对土样的选取和选择培养基的配置。
2.难点对分解尿素的细菌的计数。
四、教学准备多媒体课件。
五、课时安排2课时。
六、教学过程[课程导入]尿素是人工合成的第一个有机物，广泛存在于自然界中。
但是，尿素并不能直接被农作物吸收，只有经过土壤中脲酶的作用，水解形成无机物后，才能被作物吸收。
那么，土壤中哪些微生物能分解尿素呢？我们如何将其从土壤中分离出来并加以计数呢？这就是我们在本课时学习的重点内容。
[基础知识回顾]1.实验室筛选微生物的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长；2.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基；3.配制选择培养基的依据：根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养型微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养自生固氮微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
过渡：既然本节我们要学习从土壤中分离分解尿素的细菌，那么，了解尿素这种物质就是非常必要的。
实验03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、实验原理：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿酶。
（2）配置以尿素为唯一氮源的培养基，能够在这个培养基上生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
二、操作步骤：(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。
②取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。
(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。
(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。
细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。
②观察a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b．记录菌落的特征：包括菌落的形状、大小和颜色等。
2、灭菌培养基：高压蒸汽灭菌法3、培养皿灭菌：干热灭菌法三、操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在酒精灯火焰旁进行。
(2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。
例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题(1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。
(3)为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少三个平板作为重复组，目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。
(4)分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。
(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏，在菌落计数时，每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
生物选修1实验分离以尿素为氮源的微生物
人为 有利于目的菌株生长抑制 条件 或阻止其他微徽生物生长
微生物计数方法与原理
对照设置与重复设置
实验设计
实验方案
微生物计数方法与原理
稀释涂布平板法 显微镜直接计数
实验操作
结果与分析
教学小结
培 养 基 的 配 制 和 灭
制
采 集 土 样
备 土 壤 浸 出
液
菌
制备菌悬液
分离和纯化 菌种
稀释涂布 平板法 分离
四.实验操作具体步骤：
2.采集土样
土壤采样方法：用小铲子去除5 cm表土，取离地 面5-15cm处的土样1克，盛于预先灭菌的牛皮纸 袋中扎紧。
针对前面提出的问题， 你会想到去哪取样呢？
养猪场附近 有哺乳动物排泄物的地方
因为在这“我”才能活下去呀
四.实验操作具体步骤：
3.制备一定浓度的细菌悬液
在无菌条件下，将1g土样加到有99mL无菌水的三角瓶中，振荡 10min，即成10-2土壤稀释液。依此法制备10-3、10-4、10-5土壤稀 释液。取样时，尽量只取悬液。摇匀，放在试管架上。
请注意：①选择菌落数在30～300的平板计数。 ②每个稀释度取3个平板取其菌落的平均值。 ③统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
实验视频学习
思考视频中的各步骤与教材中的具体操作有什么不同， 对实验结果有何影响。
1.土样的选择不同
1.不同的土样所含有的微生物种类和数 量不同
2.菌液的稀释倍数不同
2.根据培养基的用途来定：分离菌落为 目的，则菌落数在20个以内为宜；计数 则以30-300个菌落数的稀释度为宜。
排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验的可信度
巩固练习
3.在做本课题实验时，甲同学筛选出的菌落与其他同学不同， 并且他在设计实验时并没有设置对照。思考下列问题： （1）你认为出现甲同学这种结果的原因可能是什么？ __一__是__由__于__土__样__不__同__，__二__是__由__于__培__养__基_。污染或操作失误。 （2）要帮助甲同学排除可能影响实验结果的因素，需要设置 _对__照__实__验_，实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与 甲同学一_样__的__土__样_ 进行实验，如果结果与甲同学一致，则证明 甲同学____无__误______，如果结果不同，则证明甲同学存在操作 __失__误_______或___培__养__基___的配制有问题。另一种方案是将甲同 学配制的培养基在不加__土__样_____的情况下进行培养，作为空白 对照，以证明培养基是否受到___污__染______。 （3）由此问题你得出的启示是什么？ _____做__实__验__时__一__定__要__设__置__对__照___________________。
高中生物选修一教学设计5：2.2 土壤中分解尿素的确细菌的分离和计数教案
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、教学目标1.知识目标a.了解有关选择培养基的基础知识。
b.掌握微生物数量测定实验的流程。
2.能力目标a.用涂布平板计数法进行微生物数量测定。
b.设计对照实验。
3.情感目标形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯。
二、课题重点对土样的选取和选择培养基的配制。
三、课题难点对分解尿素的细菌的计数。
四、教学流程教学流程教师活动学生活动设计意图环节一：课程导入从教材课题背景导入，展示课题目标。
背景材料：1.尿素的利用:尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。
只能被土壤中细菌分解为NH3才能被植物吸收利用。
2.细菌利用尿素的原因：土壤中的含脲酶的细菌能够分解尿素。
课题目标：1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌阅读、倾听。
情景导入本节目标。
环节二：讲授新课一、研究思路（一）筛选菌株1.实例以PCR技术为例，引导学生探究问题的解决方法。
PCR技术：一种在体外将少量DNA大量复制的技术。
此项技术阅读、思考、回答。
了解选择培养基相要求使用耐高温的DNA聚合酶。
提出的问题—如何寻找耐高温的DNA聚合酶？解决问题的思路—寻找耐高温环境。
原因：高温条件淘汰了绝大多数微生物。
获得启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
2.实验室微生物的筛选原理引导学生根据上面实例归纳实验室微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
3.选择培养基（1）让学生分析本课题使用的培养基成分，回答问题。
KH2PO4 1.4gNaHPO4 2.1gMgSO4 .7H2O 0.2g葡萄糖10.0g尿素 1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。
问题1：该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？碳源：葡萄糖、尿素；氮源：尿素。
高中生物选修一学案2：2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点要求1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。
双基过关一、理论基础1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。
3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。
二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
3．微生物的与观察将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液，转移至盛有的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、101、102…… 依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数生物选修一高考考点总结
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数生物选修一高考考点总结高中学生现代意识的培养，对于当前新课改下的高中生物教学来说，是一个非常有效的途径。
下面是小偏整理的土壤中分解尿素的细菌的分离和计数生物选修一高考考点总结，感谢您的每一次阅读。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数生物选修一高考考点总结(1)土壤取样：①土壤取样原因：土壤有“微生物的天然培养基”之称。
同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。
②要求：富含有机质(富含有机质的土壤层中微生物数量大、种类多)，酸碱度接近中性且潮湿(土壤中的微生物大约有70%~80%是细菌，此环境适宜细菌的生长)的土壤。
③取样部位：先铲去表层土3cm左右，再取距地表3~8cm的土壤层，将样品装入事先准备好的信封中。
(取样用的小铁铲和盛土样的信封都要经过灭菌)(2)制备培养基：以牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组，以尿素为唯一氮源的培养基作为实验组，用来判断选择培养基是否具有选择的作用。
(3)样品的稀释与涂布平板：①取样稀释：在火焰旁称取土壤10g，放入盛有90mL无菌水的三角瓶中，振荡使土样与水充分混合。
将细菌分散，制成101倍土样稀释液。
用1支1mL无菌吸管从中吸取1mL土壤悬液注入盛有9mL 无菌水的试管中，吹吸三次，充分混匀，制成102倍土壤稀释液。
依次类推，制成103、104、105、106、107倍土壤稀释液。
(稀释原因：样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目)②取样涂布：按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。
按照浓度从107~103的顺序涂布平板，不必更换移液管(涂布时稀释倍数的选择：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30~300之间，便于计数;如测定土壤中细菌的数量时，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板涂布培养;测定土壤中放线菌的数量时，一般选用103、104、105倍的稀释液进行平板涂布培养;测定土壤中真菌的数量时，一般选用102、103、104倍的稀释液进行平板涂布培养)。
高中生物选修一学案9：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[学习目标]1．明确用培养基对微生物进行选择的原理。
2．学会统计微生物数量的方法。
3．能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。
[学习过程]一、菌株的筛选及统计菌落数目的方法 1．筛选菌株的思路 (1)自然界中目的菌株的筛选①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR 技术过程中用到的耐高温的Taq DNA 聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
②方法：利用选择培养基分离。
a ．选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基。
b ．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
2．统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。
①原理⎩⎪⎨⎪⎧a.当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 一个活菌b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中 大约含有的活菌数②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M 。
C ：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M ：代表稀释倍数。
③注意事项a ．为了保证结果准确，一般设置三个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
b．统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c．设置对照：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
(2)其他方法：利用显微镜直接计数。
[合作探讨]探讨1：根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？提示：可将培养基的pH调至酸性，再接种培养。
高中生物选修1学案6：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、学习目标1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。
二、重点、难点：重点：对土样的选取和选择培养基的配制。
难点：对分解尿素的细菌的计数。
三、知识梳理（一）、温故而知新：（1）培养基的成分有哪些？按功能分，可以分成哪些类型的培养基？（2）要进行微生物的计数，应该选择哪种纯化方法？计算公式？（二）、预习案：一、理论基础1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。
3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。
二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的中。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基，将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
苏教版高中生物选修1 1.2《分离特定的微生物并测定其数量》学习要点
第二节分离特定的微生物并测定其数量【学习目标】1.掌握涂布平板法和混合平板法。
2.掌握利用选择培养基分离微生物的方法。
3.学习观察各种微生物形成的菌落.【重点提醒】1.用稀释平板法进行微生物的计数。
2.学会从土壤中分离仅以尿素为氮源的土壤微生物和能分解纤维素的微生物的方法。
【学习要点总结】一、微生物的分离1.原理：根据微生物对营养成分、氧气、pH等要求的不同，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入某些抑制剂使非目的微生物不能生长，从而达到选择分离微生物的目的。
2.选择培养分离：通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术。
要分离高温菌，可在高温条件下进行培养；要分离对某种抗生素具有抗性的菌种，可在加有抗生素（如链霉素或青霉素）的平板上进行培养；在培养基中加入质量分数为10%的酚，可以抑制细菌和霉菌的生长；运用把纤维素作为唯一碳源和能源的培养基，可以有效地分离能分解纤维素的细菌；运用无氮培养基，可选择能固氮的细菌；运用只含尿素而不含其他氮元素的培养基，可以选择能分解尿素以获取氮的微生物3.菌落：指单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度，形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
菌落特征：不同微生物在特定培养基生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落的大小、形状、边缘特征等，这些可以成为对微生物进行分类、鉴定的依据。
4.常用方法平板分离法⎧⎨⎩涂布平板法混合平板法二、仅以尿素为氮源的土壤微生物的分离、培养与数量测定准备实验器材→采集土壤，制备悬液→选择适于分离特定微生物的培养基→接种→培养与观察→计数菌落三、分解土壤中能分解纤维素的微生物1.研究目的从土壤微生物中筛选出能分解纤维素的微生物。
2.实验原理纤维素分解菌可以分泌纤维素酶，在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能很好地生长，其他微生物则不能生长。
高中生物选修1教学设计9：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学目标：1、通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用，理解筛选微生物的原理。
2、结合实验设计，分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决措施，学会微生物的计数方法，并对培养结果进行分析和评价。
教学过程：一、课题背景1、尿素的利用 P212、细菌能利用尿素的原因:土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶3、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌，小球菌，加单胞杆菌，克氏杆菌，棒状杆菌，梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。
4、课题目的：从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
二、研究思路：筛选菌株→统计菌落数→设置对照（一）筛选菌株1、实例一：PCR技术。
P21第一段原因：热泉温度70-80°C，淘汰了绝大多数微生物，只有Taq细菌被筛选出来。
启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求到相应的环境中去寻找。
2、实验室中微生物的筛选原理：P21下-p20上要分离一种微生物，必须根据微生物的特点，包括营养，生理，生长条件等。
方法：抑制大多数微生物的生长促进目的菌株的生长结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法，对它进行纯化培养分离。
3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：p22上（1）从物理性质看此培养基属于：固体培养基（2）在此培养基中：碳源——葡萄糖。
氮源——尿素4、培养基选择分解尿素的微生物原理培养基的氮源为尿素，只能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素为氮源。
缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖而受到抑制，所以用此培养基就能够选择分解尿素的微生物。
分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
5、选择培养基：P22上6、怎样证明此培养基具有选择性培养基类型是否接种目的结果实验组以尿素为唯一氮源的培养基是分解尿素的细菌只生长尿素细菌对照组牛肉膏蛋白胨培养基是判断该培养基有无选择性生长多种微生物（二）统计菌落数1、间接计数法：（1）原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上，所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先一个细胞。
2015-2016学年苏教版选修一 分离特定的微生物并测定其数量 教案
第二节分离特定的微生物并测定其数量●课标要求1．结合涂抹平板法或混合平板法分离细菌的知识掌握涂抹平板法或混合平板法操作技术。
2．结合选择培养分离的实验，掌握选择培养基的选择作用。
●课标解读1．掌握涂抹平板法或混合平板法。
2．掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。
3．观察各种微生物形成的菌落。
●教学地位本节内容涉及了涂抹平板法或混合平板法分离细菌、选择培养分离、观察各种微生物形成的菌落，仅以尿素为氮源的土壤微生物的分离、培养与数量测定、分离土壤中能分解纤维素的微生物等内容，属于微生物利用的一些基本操作，是高考中的常考内容。
●教法指导1．涂抹平板法和混合平板法可用多媒体课件展示，通过讨论掌握其操作要领。
2．菌株计数的两种计数方法可通过列表比较、分析出各自的特点。
●新课导入建议1．可通过分离微生物的具体事例，引出分离微生物的两种基本的分离方法。
2．可通过微生物的营养需求，引出选择培养基的作用。
●教学流程设计学生课前预习：阅读教材P17－24，填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2、3”。
⇒步骤1：情景导课：以【新课导入建议】引出本节课题。
⇒步骤2：根据创设的情景，引出基因工程的概念，并通过【课堂互动探究】探究1分析、理解涂抹平板法和混合平板法的异同。
通过例1巩固、提高。
⇒步骤3：结合目的微生物的生长条件过渡至选择培养基的作用的教学。
⇓步骤7：回扣基础知识，将检查、批阅【课前自主导学】时学生出错较多的部分进行强化，重点对【正误判断】部分进行辨析。
⇐步骤6：通过【课堂互动探究】探究3分析理解菌株计数的两种计数方法。
⇐步骤5：结合菌落的观察过渡至菌株计数的教学。
⇐步骤4：通过【课堂互动探究】探究2帮助学生认识选择培养基的作用，利用例2验收、巩固。
⇓步骤6：引导学生通过合作，整理本节重点、难点内容，利用【本课知识小结】进行总结，建立知识网络。
理解并记忆【结论语句】。
⇒步骤7：通过【当堂双基达标】进行当堂检测验收。
高中生物选修一教学设计4：2.2 土壤中分解尿素的确细菌的分离和计数教案
2.2 土壤中分解尿素的确细菌的分离和计数
教学目标：
知识目标：
掌握细菌的分离和计数的方法
能力目标：
1.科学探索能力，
2.理论联系实际能力
情感价值观：
科学性（素养）、耐性、协作精神的培养
教学重点与难点：
1．掌握选择培养基配制的方法；
2．利用稀释涂布平板计数的方法
教学方法：
1. 课内外结合的办法
2．启发与讲述相结合
教学手段：
编学案，课堂讲解，实验，
课时安排：
三课时
教学过程预设
一、基础知识
环节教师活动学生活动设计意图
讲授新课
选择培养基
讨论，理解，记忆注意与鉴定培养基的区别
统计菌落数目的方法1．稀释涂布平板法2．显微镜直接计数法计数方法的比较
实验原则1．对照了解实验通用原则
2．单一变量
3．等量
二、实验设计
环节教师活动学生活动设计意图
学案取样
↓
稀释
↓
涂平板
↓
培养
↓
计数
通过阅读教材，了解实验流
程，同时完成学案
分组讨论，获
取实验思路，
由组长上交方
案
三、结果分析
环节教师活动学生活动设计意图
实验评价提供交流平台，设计提出实验中
可能出现的错误操作。
结合旁栏
思考题，最后和学生共同解决。
分组讨论，实验得失理论联系实际
过程中注意纠
错
自我反思：
由于存在实验操作的不足，此实验有些组不能成功，另外由于牵涉到实验室和教室的共同使用对于某些班级来说不是很理想的教学方式。
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例1 不同的微生物对营养物质的需要各不相同。 下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营
养的描述，不正确的是( B )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
合作探究
以下是某同学纯化培养土壤中分解尿素的细菌 的实验过程。结合书本P24-25，你觉得实验过程中 怎样才能做到无菌操作？
(√)
(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，
若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌
(×)
(5)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后
的培养皿需放在光照培养箱中培养。
（×）
2. 科研人员利用实验室保藏的酵母及市场上出售的 面包酵母菌种，设计了相关实验，成功培育出能在20℃条件下冷冻保存56d，存活率达到90%以上的
将不接种的培养基作为空白对照，并每个稀释 度涂布3个平板作为重复组。
4. 如何根据平板上的菌落数推测出 每克样品中的菌落数？
见P22公式。
注意：1.涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中， 取出时要让多余的酒精滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器 在火焰上引燃。
2.操作中注意防火！不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧 杯中，以免引燃酒精。
D 耐冻性面包酵母菌菌种。下列有关叙述错误的是
()
A. 酵母菌能利用蛋白胨作为碳源与氮源
B. 在配制培养基时可选择添加适宜种类和浓
度的抗生素
C. 应将不同来源的菌株接种到培养液后置于
-20℃条件下冷冻保存56d
D. 应采用稀释涂布平板法和平板划线法分别
测定冷冻培养前后的活菌数
2 2 专题 课题 土壤中分解尿素的
细菌的分离与计数
实验分析
细菌的特点：能合成脲酶，分解尿素 细菌的来源： 潮湿肥沃 的土壤 细菌的筛选：用 选择 培养基
实验目的
1、从土壤中分离出能分解尿素的细菌 问题1：怎样筛选出这样的细菌？
2、统计每克土壤样品中究竟含有多少 这样的细菌
问题2：怎样纯化培养并计数？
选择培养基和鉴别培养基
选择培养基：允许特定种类的微生物 生长，同时抑制或阻止其他种类微生 物生长的培养基。
如：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以 筛选分解尿素的细菌。
如何确定选择培养基上生长的菌落能 分解尿素？ 鉴别培养基：添加某种指示剂或化学 药剂，鉴别不同种类的微生物。
筛选并鉴别菌株
(1)尿素分解菌的筛选：以尿素为唯一氮源 的选择培养基可以筛选分解尿素的细菌。 (2)尿素分解菌的鉴别：在以尿素为唯一氮 源的选择培养基中添加酚红指示剂，可以 鉴别分解尿素的细菌。（P26）
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
土壤 取样
选择 培养
稀释 计数
试剂 鉴别
特征 观察
课堂反馈
1．判断下列有关微生物培养叙述的正误 (1)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消
毒剂对细胞的伤害
(√ )
(2)在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑
pH、O2 及特殊营养物质的求
(√)
(3)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
注意：1.试管、移液管、涂布器使用前后都要进行灭菌。 2.操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。
合作探究
1. 稀释多少倍比较合适？
保证菌落数在30～300之间，适合计数。
2. 稀释后培养多长时间可以计数？
每隔24h统计一次菌落数，将菌落数目稳定时的 记录作为结果，防止遗漏。
3. 要不要设置对照组和重复组？
本课题使用的培养基配方
(1)培养基中氮源是___尿__素___，这种培养基在功能上属于 _选__择__培养基，目的是只允许能合成_脲__酶___的微生物生长，
其他微生物均不能生长。 (2)欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用
__稀__释__涂__布__平__板__法___或__平__板__划__线___法进行接种。
以上方法可以对该细菌进行计数吗？
取样时应注意的无菌操作：
1.取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都 需要灭菌。
2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土 样倒入锥形瓶，塞好棉塞。
3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰 旁操作。
计数方法：稀释涂布平板法或显微镜直接计数法
用稀释涂布平板法计数土壤中的菌落数