超高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中6种兽药残留
超高效液相色谱-串联质谱在食品农药残留和兽药残留及添加剂检测分析中的应用
食品科技1 超高效液相色谱-串联质谱联用仪技术基本原理超高效液相色谱-串联质谱联用仪有两种离子源：一种是电喷雾电离，简称ESI，另外一种是大气压化学电离，简称APCI。
首先，待检测的样品通过液相色谱（LC）进行分离，然后再通过质谱完成样品溶液的气化和样品分子的电离[1]，主要原理是电场使离子带电，使化合物离子高速运动，进行碰撞。
碰撞后产生正负离子，选择其中的一个离子作为母离子，再在合适的条件下将母离子打碎，得到子离子。
根据产生并收集到的离子的特征对化合物进行定性和定量分析。
超高效液相色谱-串联质谱仪器可把离子信号转换成为电信号，传输给计算机电脑系统，并对数据进行处理，便可按照质谱峰的具体情况开展分析工作[2]。
2 农药残留我国对农药的使用种类和用量要求都非常严格，尤其是进入超市等市场的农产品，农药残留量过高，会对人们的健康生活和人身安全等造成危害。
在农药残留检测中，合适有效的检测方法对其检测数据的准确性起着至关重要的决定。
有很多的分析方法都可以检测农药残留含量，气相色谱仪就是比较常用的一种，但该检测方法也有一定的局限性，受热易分解的物质或者极性大的物质的气相色谱法检测结果不准确[3]。
超高效液相色谱-串联质谱法可对农药含量低的物质进行分析检测，使检测有效性得到 保证[4]。
罗碧容等以地表水环境质量标准严格控制的特定项目为依据，建立了用高效液相色谱-串联质谱法同时测定水中13种化学性质差异较大的有机污染物的分析方法[5]。
此方法的方法检出限较低，相对标准偏差值较小，所以超高效液相色谱-串联质谱技术对农药残留有很好的分析效果。
3 兽药残留兽药残留主要是动物体内存留的原型药物或者代谢产物，通常包括与兽药相关的杂质残留[6]。
动物性食品中的兽药残留是这些年来大家研究并关注的公共卫生问题。
随着我国加入WTO以来，兽药残留是否超标就成了一项进出口时，衡量食品安全质量的重要指标。
动物源性食品药物残留具有种类繁多、检测量较小等特点。
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留曾春芳;万译文;李小玲;刘丽【摘要】建立了一种同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱方法.样品经乙酸乙醇提取,用正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化,采用LC-MS/MS选择反应监测(SRM)正离子模式测定进行定性及定量分析.结果表明:硝基呋喃类代谢物检测结果的相对标准偏差为1.2％～10.3％ (n=6),加标回收率达到68.6％～106.2％.该方法重现性好、灵敏度高、分析时间短、确证能力强,适用于水产品中硝基呋喃类代谢物残留的确证检测.【期刊名称】《湖南师范大学自然科学学报》【年(卷),期】2013(036)005【总页数】6页(P45-50)【关键词】高效液相色谱-串联质谱法;硝基呋喃类代谢物;水产品【作者】曾春芳;万译文;李小玲;刘丽【作者单位】农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),中国长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),中国长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),中国长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),中国长沙410153【正文语种】中文【中图分类】TS254.7硝基呋喃类代谢物属于一种人工合成的广谱抗菌药物，它主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮等.硝基呋喃类由于具有杀菌性而被广泛应用于畜禽和水产等动物传染病预防与治疗［1-3］.该类药物半衰期短，在动物体内代谢速度快，与蛋白结合的代谢物产生稳定的残留，形成的代谢产物3-氨基-2-噁唑烷酮(AOZ)、3-氨基-5-吗咻代甲基-2-噁唑烷酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基乙内酰脲(AHD)均可使动物发生癌变和基因突变，人类长期使用可对其健康产生危害［4-6］.欧盟在1995年已全面禁止呋喃类抗菌药物作为生长剂和杀菌剂用在饲料中，我国也于2002年颁布了禁止使用硝基呋喃类药物的公告.由于硝基呋喃在动物体内代谢速度快，不容易在动物组织中被检测到，通过14C标记表明［7］，硝基呋喃代谢物在动物体内以蛋白结合物的形式存在，在体内能残留数周，这些结合残留物可通过在适当的酸性条件下释放出来，以达到检测硝基呋喃残留的目的［8］.由于液相色谱串联质谱方法灵敏度高，前处理方法简单快速，可同时用于产品的检测和确证，农业部颁布了相关的标准采用液质法应用于食品当中硝基呋喃类代谢物的残留检测［9-10］.该方法操作简单，成本较低，回收率满足要求，但是由于水产品成分比较复杂，基质中含有大量的脂肪、蛋白质等杂质，前处理过程中没有采取进一步的净化，流动相溶解后会有乳化现象产生，容易产生基质效应，而且会对仪器造成污染影响结果的准确性，导致假阳性的情况出现.本文建立了水产品中硝基呋喃类代谢物的液相色谱串联质谱检测方法，通过在前处理过程中采取固相萃取柱进行净化，减少样品带来的基质效应，提高了色谱分析的功效，简单快速，灵敏度高，而且节约成本，能够实现药物残留的快速检测，可以满足水产品质检以及相关基础研究的要求.1 实验部分1.1 仪器与试剂Thermo TSQ Quantum液相色谱-高分辨串联四级杆质谱联用仪(配用电喷雾离子ESI源);旋转蒸发仪(瑞士布奇公司);高速冷冻离心机(日本日立公司);超声波清洗器(昆山超声波仪器厂);精密电子天平(梅特勒—托利多称重设备系统有限公司);微型漩涡混合仪(上海沪西分析仪器厂).AHD、SEM、AMOZ、AOZ 标准品(德国 R-Biopharm 公司);AHD-13C3、SEM-15N13C、AMOZ-D5、AOZ-D4(德国Witega公司);二甲基苯甲醛(色谱纯，美国Fluka公司);二甲亚砜(色谱纯，美国Fluka公司);甲醇、乙腈(色谱纯，美国Tedia公司);正己烷(色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司);乙酸铵(色谱纯，美国Fluka 公司);甲酸(色谱纯，美国Fluka公司);浓盐酸(优级纯，国药集团化学试剂有限公司);磷酸氢二钾(分析纯，天津光复科技发展有限公司);固相萃取HLB柱(3 mL，60 mg，美国Waters公司).标准储备液的配置:分别称取硝基呋喃类标准品各10.0 mg，用甲醇溶解后转移至100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容配置成100 mg/L的标准储备液，在－18℃下避光保存.使用时将上述标准储备液混合，用甲醇稀释成 0.5、1.0、5.0、10.0、25.0、50.0 mg/L 不同浓度的标准工作液.内标储备液及使用液的配置:分别称取10.0 mg各内标标准品，用甲醇溶解并定容，配成100 mg/L的标准储备液，在－18℃下避光保存.准确吸取各内标储备液，用甲醇逐级稀释配成0.01 mg/L的混合内标使用液，在－18℃下避光保存.1.2 色谱质谱条件色谱柱:Thermo Scientific Hypersil GOLD C18(2.1 mm ×100 mm，5 μm);柱温:30℃，流动相 A 为甲醇;B为2 mmol/L的乙酸铵溶液(含0.1%的甲酸);进样体积:10 μL;流速:0.25 mL/min，流动相梯度见下表1.表1 流动相梯度洗脱程序Tab.1 Elution process of the separation时间/min 流速/(mL·min－1)流动相比例/%A B 0 0.25 10 90 3 0.25 30 70 7 0.25 40 60 7.10.25 10 90 10 0.25 10 90采用电喷雾离子源(ESI);喷雾电压:4.1 kV;离子传输毛细管温度:350℃;碰撞气氩气压力:0.1 Pa;鞘气流量:40 arb;辅助气流量:30 arb;扫描模式:多反应监测(SRM);硝基呋喃类代谢物的母离子、子离子和碰撞能量见表2.表2 8种药物的SRM采集参数和标准曲线Tab.2 SRM parameters and linear equations for 8 drugs*定量离子.目标物母离子/(m/z)子离子/(m/z)碰撞能量/eV 线性回归方程相关系数/R2+0.342 0.997 4 SEM 209 166* ，192 7，11Y=0.294 X －0.365 0.998 1 AOZ 236 134* ，104 23，13 Y=0.022 7 X －0.064 3 0.997 7 AMOZ 335 291* ，262 11，16 Y=0.145 X+0.032 6 0.999 1 AHD-13C3 252 134 10 / /SEM-15N13C 212 168 11 / /AMOZ-D5 340 296 12 / /AOZ-D4 AHD 249 134* ，104 22，15 Y=0.316 X 240 134 13 / /1.3 样品前处理称取2 g样品至于50 mL离心管中(精确至0.01 g)，加入200 μL 0.01 mg/L的混合内标溶液，再加入5 mL 0.2 mol/L盐酸溶液和0.2 mL 0.5 mol/L 2-硝基苯甲醛溶液，在漩涡混合仪上充分混合1 min.置于恒温水浴振荡器中(37℃)避光振荡16 h，取出离心管冷至室温，加入5 mL 1.0 mol/L磷酸氢二钾溶液，调节pH 至7.0～7.5，加入8 mL正己烷漩涡混匀后放入离心机离心10 min(6 000 r/min)，分层后取下层水相待过柱，固相萃取柱(HLB，3 mL，60 mg)依次用3 mL甲醇，6 mL水活化，取备用液过柱，采用在大气压力下自然过柱.过完样品后，加入3 mL水淋洗并抽干.用4 mL乙酸乙酯分2次洗脱，洗脱液于40℃氮气吹干后，加入1.0 mL流动相溶解残渣，再加入2.0 mL正己烷放入离心机离心5 min(5 000r/min)，取下层液体过0.22 μm滤膜，滤液供液相色谱-质联用仪测定.2 结果与讨论2.1 前处理条件的选择及优化考察了甲醇与2 mmol/L的乙酸铵溶液不同体积比例(5∶95、10∶90、15∶85、20∶80)的混合液作为流动相时对目标物分析的影响，综合考虑目标物的响应值和出峰的时间、峰形的尖锐性，本文选择2 mmol/L的乙酸铵溶液:甲醇(V∶V=80∶20)为本实验的最佳流动相.由于水产品成分比较复杂，基质中含有大量的脂肪、蛋白质、碳水化合物以及色素等杂质.本文比较了在调节pH后加入8 mL正己烷离心和加入流动相后再加入2 mL正己烷离心2种不同的净化方式，这2种方式去脂的效果均不错，溶液也较澄清，但是第二种净化方式，回收率较低，在60%以下，第一种净化方式的回收率满足试验要求.2.2 固相萃取实验固相萃取是一种色谱分离的前处理方法，主要依靠固相萃取柱来进行净化，不同的基质选择不同材料的固相萃取柱，填料的类型决定了吸附能力的大小以及回收率的高低，本文比较了4种不同的固相萃取柱(C18 500 mg/3 mL，HLB 60 mg/3 mL，MCX 150 mg/6 mL，Alumina-N 60 mg/3 mL)对硝基呋喃类代谢物的净化效果，其回收率的结果见图1，本实验选用HLB柱作为硝基呋喃类代谢物的固相萃取柱，回收率均满足要求.固相萃取过程中的洗脱液一般选择甲醇、乙腈或者乙酸乙酯，本实验采用乙酸乙酯作为洗脱液，得到良好的洗脱效果.洗脱方式主要考察了一次4 mL、4 mL分2次以及9 mL分3次的3种洗脱方式，从实验结果(表3)来看，当用4 mL乙酸乙酯溶液进行洗脱时，目标物洗脱不完全，还有部分目标物在组合SPE柱上没有被洗脱下来;当用分2次洗脱时(2×2.0 mL)，目标物被完全洗脱，回收率良好;当用洗脱液分3次洗脱时(3×3.0 mL)，回收率与2次洗脱淋洗时差不多，因此本实验选择操作简单、节约试剂的2×2.0 mL分2次洗脱的方式.图1 不同固相萃取柱的硝基呋喃类代谢物回收率Fig.1 Recoveries of metabolites of nitrofuran on different SPE columns.表3 洗脱方式对回收率的影响Tab.3 Influence of elute style on recoveryAHD SEM AOZ AMOZ一次洗脱次数72.5 ～80.8 73.6 ～84.2 76.4 ～88.2 85.9 ～90.5 57.4 ～68.3 59.3 ～66.4 66.1 ～73.2 67.4 ～75.6二次洗脱 70.8 ～79.5 72.3 ～83.2 72.6 ～84.4 83.2 ～87.7三次洗脱2.3 色谱条件的选择及优化流动相的pH值会影响目标物在色谱柱中的分离.本实验考虑采用挥发性电解质乙酸铵来做为流动相，同时加入0.1%甲酸控制流动相pH值，采用合适的梯度洗脱程序，不但很好地实现了各种目标物的分离，并且得到了比较理想的色谱峰，峰形尖锐且对称性好，增大了分子离子峰的峰强度.在8 min内，各种硝基呋喃类代谢物均得到了较好的分离.色谱图见图2.2.4 质谱条件的选择及优化根据硝基呋喃类代谢物的结构特征，采用ESI正离子电离模式，以流动注射泵连续进样对1.0 mg/L的标液进行Q1全扫描，扫描范围为200～400 m/z之间，得到每种组份的分子离子，分别向其分子离子施以碰撞能量形成子离子，接着进行子离子全扫描，找出丰度最强的碎片离子为定量离子，丰度次强的碎片离子为定性离子.同时优化锥孔电压、碰撞能量、鞘气与辅助气流量等质谱条件，使母离子和子离子组成的特征离子的丰度和比例达到最佳.得到1.2中最佳质谱条件.2.5 线性范围和灵敏度配置0.5、1.0、5.0、20.0、50.0 μg/L 的系列标准工作溶液，采用内标法定量，以待测物的质量浓度X(μg/L)为横坐标，待测物与内标物的峰面积比值Y为纵坐标制作标准曲线，得到硝基呋喃类代谢物的回归方程和相关系数(见表2).由表2可知，硝基呋喃类代谢物在0.5～50.0 μg/L在范围内其标准曲线的线性关系良好，相关性系数R2在0.997以上.在方法规定的取样质量条件下，在阴性样品中添加2种混合标准溶液(添加水平为0.25 μg/kg)经测定信噪比(S/N)均大于3，表明这4种物质的检测下限(LOD)为0.25 μg/kg，在阴性样品中添加2种混合标准溶液(添加水平为0.5 μg/kg)经测定信噪比(S/N)均大于10，表明其定量下限(LOQ)可为 0.5 μg/kg.2.6 回收率与精密度向草鱼、中华鳖和对虾阴性样品中分别添加5、20、100 ng/g 3个水平的添加实验，每个添加水平进行3次实验，每次平行测定6次，按1.2节所述条件进行加标回收率实验，所得结果为回收率为68.6% ～106.2%，相对标准偏差为1.2% ～10.3%，符合国内外有关标准和法规的要求，结果见表4.图2 鱼肉中硝基呋喃类代谢物(25.0μg/L)及其内标溶液的提取离子流色谱图Fig.2 Extraction ion chromatograms of metabolites of nitrofuran(25.0μg/L)in fish and their internal solution表4 4种药物在空白样品中的添加回收率和相对标准偏差(n=6)Tab.4 Recoveries and relative standard deviations of four drugs in blank samples目标物Drug 添加水平/(ng·g－1)平均回收率/%相对标准偏差草鱼对虾中华鳖RSD/%79.5 72.5 77.6 3.5 20 80.1 87.3.3 79.9 2.2 5 AMOZ 100 88.1 96.5 100.5 1.9 AOZ AHD SEM 78.9 77.5 82.1 6.9 20 82.4 90.5 99.4 3.6 100 98.3 106.2 99.3 1.2 5 68.6 70.3.1 71.4 10.3 20 77.3 72.6.6 79.7 7.6 100 80.3 78.6 82.1 5.8 5 76.3 70.6 79.2 3.8 20 80.6 81.2 85.5 3.6 5 100 87.7 86.3 92.1 2.9 3 小结通过对前处理条件、色谱条件以及质谱条件的优化，建立了水产品中硝基呋喃类代谢物残留的检测方法.结果表明，该方法在0.5 ～50.0 μg/L 范围内，硝基呋喃类代谢物检测下限(LOD)为0.25 μg/kg，其定量下限(LOQ)可为0.5 μg/kg;在3个不同的添加水平下，其回收率为68.6% ～106.2%，相对标准偏差为1.2% ～10.3%.本方法前处理步骤简单、回收率稳定、精密度好，满足我国以及欧盟等国家的限量要求，可以作为水产品中硝基呋喃类代谢物的检测方法，并可为该类药物在水产品中的消除规律及毒理评价提供灵敏、准确的分析手段，对水产品中硝基呋喃类代谢物的溯源和卫生监督提供了技术支撑.参考文献:［1］葛宝坤，王云风，常春艳，等.测定鸡肉、水产品中四种硝基呋喃类药物残留量的固相萃取-液相色谱法［J］.分析测试学报，2003，22(5):91-93.［2］GREGORY O N，TIMOTHY H B，GREGORY W D.Semicarbazide formation in flour and bread［J］.J Agric Food Chem，2008，56(6):2064-2067.［3］孙言春，张洁，牟振波，等.固相萃取液相色谱串联质谱测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留研究［J］.中国渔业质量与标准，2011，1(2):54-59.［4］VAN KOTEN-VERNELEN J E M.Report of the 40th meeting of the JECFA world health organization［R］.Geneva:JECFA，1993，85:85-90. ［5］CHANG C，PENG D P，WU J E，et al.Development of an indirect competitive ELISA for the detection of furazolidone marker residue in animal edible tissues［J］.J Agric Food Chem，2008，56(1):1525-1531. ［6］张会彩，李军，闫晓东，等.高效液相色谱法检测饲料中7种硝基呋喃类药物［J］.中国兽医杂志，2011，47(5):72-74.［7］VAN DE WATER C，HAAGSMA N.Analysis of chloramphenicol residues in swine tissues and milk:comparative study using different screening and quantitative methods［J］.J Chromatogr 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高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量万建春;王文君;占春瑞;郭平【摘要】采用高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃和硝基咪唑类药物残留量.样品用盐酸水解,在酸性环境下进行衍生化反应16 h,乙酸乙酯萃取.以Phenomenex Luna C18色谱柱为分离柱,以不同体积比的乙腈和乙酸(0.2+99.8)溶液混合液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子源多反应监测模式检测.采用同位素内标法定量.方法的检出限(3S/N)在0.15～0.30 μg·kg-1之间.以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率在83.3％～115％之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.3％～14％之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)008【总页数】6页(P1168-1173)【关键词】高效液相色谱-串联质谱法;水产品;硝基呋喃;硝基咪唑【作者】万建春;王文君;占春瑞;郭平【作者单位】江西农业大学食品科学与工程学院,南昌330045;江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心,南昌330002;江西农业大学食品科学与工程学院,南昌330045;江西农业大学食品科学与工程学院,南昌330045;江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心,南昌330002;江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心,南昌330002【正文语种】中文【中图分类】O657.63硝基呋喃类药物(NTF)是用于人类和动物的广谱性合成抗菌剂;硝基咪唑类药物(NMZs)有5-硝基咪唑环结构,是常用的抗菌素和抗原虫药,硝基呋喃和硝基咪唑类药物在水产养殖中被用于治疗寄生虫感染[1]。
硝基呋喃和硝基咪唑类药物在体内代谢较快[2],硝基咪唑主要代谢产物是由咪唑环C-2上的甲基被氧化成羟甲基,成为侧链羟甲基[3]。
研究表明硝基呋喃代谢物具有致畸、致突变和致癌作用[4-8],硝基咪唑类药物含有的硝基杂环具有细胞诱变性,有致癌性和潜在的致畸性[9-11],我国已将这两类药物列入《食用动物禁用的兽药及其它化合物清单》中。
超高效液相色谱－串联质谱法测定水产品中16种喹诺酮类药物残留
本实验建立了一种超高效液相色谱－串联质谱法， 能够同时测定水产品中16种喹诺酮类药物残留，快速、灵 敏、准确，适用于水产品中喹诺酮的检测，也能为水产品 的安全风险监测与监管工作提供技术支持。
作者简介：袁荷芳（1984－），女，汉族，江苏常 州人，硕士研究生，高级工程师，研究方向为食品理化 检验。
*通信作者：蒋晓勤（1988－），女，汉族，江苏常州 人，硕士研究生，主管药师，研究方向为食品检验。
3.前处理方法优化。喹诺酮类化合物的分子结构中含 有羧基和叔胺基，因此具有酸碱两性性质，易溶于酸性或 碱性溶液。本实验分别采用纯有机溶剂和添加一定比例乙 酸的有机溶剂提取，结果发现，乙腈能够使样品蛋白质变 性，利于目标物的提取；添加了乙酸的有机溶液可以显著 提高回收率，酸性增强，有利于目标化合物的提取，但有 机酸比例过高则不利于浓缩，综合考虑，本实验采用浓度 为1％的乙酸乙腈溶液进行提取。
H]＋准分子离子。配制含16种喹诺酮（100ng/mL）的标准 溶液，采用针泵进样方式将其注入离子源，在正离子检测 模式下进行优化，确定碎片离子有最大响应强度时的最佳 碰撞电压值。
2.色谱条件的优化。使用浓度为10ng/mL的混合标准 溶液，考察液相色谱流动相类型和酸度对灵敏度和分离度 的影响。喹诺酮类化合物为酸碱两性化合物，其解离状态 和在流动相中的溶解性随流动相的pH值而变化，在流动相 中加入一定比例的有机酸可以显著提高两性喹诺酮的分离 度和离子化效率。本实验分别采用浓度为0.1％、0.2％和 0.3％的甲酸水溶液作为流动相，比较酸性增强，峰型有所 改善，响应提高；当甲酸比例超过0.2％时，多数化合物响 应有所降低，综合考虑，选择浓度0.2％的甲酸溶液作为水 相流动相。
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品硝基呋喃类代谢物残留
酸乙酯提取 ， 用 正己烷脱脂 ， Ｈ Ｌ Ｂ固相萃取柱净化 ， 采用 Ｌ Ｃ ． Ｍ Ｓ ／ Ｍ Ｓ 选择反应监测 （ Ｓ Ｒ Ｍ） 正离子模式测定进 行定性
及定 量分析． 结果表 明 ： 硝基 呋喃类 代谢物检 测结 果的相对 标 准偏差为 １ ． ２ ％ 一１ ０ ． ３ ％ （ ＝６ ） ， 加 标 回收率 达到 ６ ８ ． ６ ％ 一１ ０ ６ ． ２ ％． 该 方法重 现性好 、 灵敏度 高 、 分 析时 间短、 确证 能力强 ， 适用 于水产 品中硝基呋 喃类 代谢物残 留
的确证检 测．
关键 词
高效液相色谱・ 串联质谱 法 ； 硝基 呋喃类代谢 物 ； 水产 品
Ｔ Ｓ ２ ５ ４ ． ７ 文献标识码 Ａ 文章编 号 １ ０ ０ ０ － ２ ５ ３ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ － ０ ０ ４ ５ － ０ ６
中图分类号
Ｓｉ ｍｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｎｉ ｔ ｒ ｏ ｆ ｕ ｒ ａ ｎ Ｒｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｃ ａ ｒ ｔ ｒ ｉ ｄ ｇ ｅ ｓ（ ＨＬ Ｂ） ．Ｔ ｈｅ ｍ ｓｓ ａ ｓ ｐ ｅ ｃ ｒ ｔ ｏ ｍ ｅ ｔ ｅ ｒ ｗ ａ ｓ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｉ ｏ ｎ ｍ ｏ ｄ ｅ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｒ ｅ －
Ｚ Ｅ Ｎ Ｇ Ｃ ｈ ｕ ｎ － ｆ ａ ｎ ｇ ，Ｗ Ａ Ｎ Ｙ ｉ — ｙ ３ ｅ Ｒ’ ， Ｌ Ｉ Ｘ ｉ ａ ｏ — ｌ ｉ ｎ ｇ ， Ｌ Ｉ Ｕ Ｌ ｉ
（ Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ ｙ Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓ Ｑ ｕ ｌ ａ ｉ ｔ ｙ Ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｖ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ， Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ，Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ ４ １ ０ １ ５ ３ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留摘要：在养殖过程中，滥用抗生素、大量使用合成等药物的现象越来越严重，兽药具有致癌、至畸、至突变等不良效用，危害人类健康。
近年来由于滥用兽药引起的食品安全问题频发已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。
一些化学合成药物在畜牧水产养殖业中使用较多，随便使用这些药物是很容易使水产品受到污染的。
在这种情况下，人们吃了这种受到污染的肉类食物，就会使得这些毒素在人体内积累，会使人体产生一定的抗药性。
随着兽药在我国实际生产中的广泛应用，人们对其危害有了更多的认识，这些肉类食品中所残留的兽药也是目前食品安全中所关注的重要内容。
因此，对畜牧水产养殖业的相关产品进行严格的检测，能够保证肉类食品的质量。
本文建立了高效液相色谱-串联质谱HPLC-MS/MS同时测定水产品中喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、磺胺增效剂、林可胺类、硝基咪唑类、类和多肽类8类共38种限用兽药残留的检测方法。
关键词：高效液相色谱；串联质谱；兽药残留本试验同时测定鳗鱼、鳙鱼和小龙虾中的类药物残留，在检测的过程中，检测的药物种类虽多，但前处理方法简单并不需要特殊的实验装置来辅助实验，检测周期短且成本低，从而为水产品的大量检测，提供了更加简便的方法。
一、实验部分1.1实验所用的仪器和试剂实验仪器：质谱仪、高效液相色谱仪、Waters C3色谱柱、IKAT25数显型高速分散机、低温高速离心机和氮吹浓缩仪。
实验试剂：甲醇、正已烷、甲酸、冰乙酸、无水硫酸钠，以上试剂均为分析纯，乙腈、甲酸为色谱纯。
1.2样品前处理样品的提取及净化：称5.00g样品置于50mL聚丙烯离心管中，加入约5g无水硫酸钠及15mL1%的乙酸乙腈溶液，用高速分散机进行提取，离心（5000r/min，5min），收集上清液。
沉淀再用20mL1%的乙酸乙腈溶液按照上述步骤重复提取一次，离心，合并上清液，用提取液将其定容到25mL，混合均匀，将其放到-80℃的冷冻机中冷冻1小时。
固相萃取- 超高效液相- 串联质谱法检测水产品中渔药残留
固相萃取- 超高效液相- 串联质谱法检测水产品中渔药残留作者：张海霞王迎迎来源：《黑龙江水产》 2017年第5期在水产品养殖过程中，由于使用者对氯霉素、磺胺类、喹诺酮类渔药及三苯甲烷类染料的毒性和危害认识不足，存在违规使用的现象。
渔药残留常见危害为药物通过较长时间的蓄积，对人体产生的慢性毒性作用。
人们长期食用这类含渔药残留的水产品后，药物在人体内蓄积，达到一定浓度后，就会对人体产生各种慢性毒性作用，损害肝脏、肾脏、消化系统、神经系统、造血系统、循环系统等。
农业部235号公告规定了其限量标准，农业部和黑龙江省农监局每年要对水产品中这四类渔药的残留进行四次例行监测，以保证水产品的质量安全。
目前，水产品中渔药残留的检测方法主要有酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱-串联质谱法、电化学分析、毛细管电泳等，使用的前处理方法主要有液液萃取法、固相萃取法等。
这些方法对渔药残留的检测多是按同族药物或单一药物来开发，这些方法的不足之处在于仅可以检测单一或几个目标化合物，检测效率低，成本高，造成检测仪器设备、检测人员的浪费。
本实验采用Prime HLB固相萃取柱净化，超高效液相色谱-串联质谱法一次性检测4类12种渔药残留，检测效率高，成本低，适用于越来越繁重的突发事件和应急监测工作。
1 材料与方法1.1 仪器、试剂与材料仪器：超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用仪Waters Acquity UPLC–TQD（美国Waters公司），配有电喷雾离子源；Milli-Q高纯水发生器（美国Millipore公司）；高速离心机（Sigma）；高速组织匀质仪、涡旋振荡器（IKA）；氮吹仪（美国Organomation）；pH计、电子天平（Mettler Toledo）；超声波清洗器（KUDOS）；料理机（博朗）；试剂：优级纯的乙腈、甲酸、氯化钠、盐酸羟胺、对甲苯磺酸、无水乙酸钠、冰乙酸（科密欧）；乙腈、甲醇色谱纯（美国Fisher公司）；甲酸色谱级（迪马）；Prime HLB固相萃取柱（Waters）;标准品均购自Dr. Ehrenstorfer。
超高效液相色谱_串联质谱快速测定水产品中孔雀石绿_结晶紫及其代谢物残留量
第6卷第4期2010年8月南 方 水 产Sou t h Ch i na F isheries Sc i enceV o l 6,N o 4Aug ,2010do:i 10 3969/j issn 1673-2227 2010 04 006收稿日期:2010 02 22;修回日期:2010 04 10作者简介:王丽敏(1981-),女,硕士,从事食品安全与兽药残留分析研究。
E m ai:l w angli m i n20073225@163 co m超高效液相色谱 串联质谱快速测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量王丽敏,杜雪莉,赵艳,刘耀敏(通威股份有限公司检测中心,四川成都610041)摘要:建立了超高效液相色谱 串联质谱(U PLC M S /M S)测定水产品中孔雀石绿(MG )、结晶紫(CV )及其代谢物隐色孔雀石绿(L M G )和隐色结晶紫(LCV )残留量的快速、准确检测方法。
该法在SN /T 1768 2006快速检测方法的基础上,采用空白样品添加不同质量浓度标准溶液的方式绘制校准曲线,并以氘代孔雀石绿(D 5 M G )和氘代隐色孔雀石绿(D 6 L M G )为内标进行检测,从而大大提高了定量的准确性。
结果表明,MG 、CV 、L M G 和LC V 4种待测物在0~10 0ng mL -1范围内线性关系良好(R >0 99),方法检出限均为0 1 g kg -1。
在加标量为0 5和1 0 g kg -1水平下4种待测物平均回收率在92 1%~111 0%之间,测定结果的相对标准偏差为2 2%~9 5%。
此外,该法在FA PA S 国际能力验证中得以证实,改进后的方法快速且准确,能满足水产品出口检测要求。
关键词:超高效液相色谱 串联质谱;孔雀石绿;结晶紫;代谢物;水产品中图分类号:S 948;R 155 5文献标志码:A文章编号:1673-2227-(2010)04-0032-05Rapi d residue deter m i nation ofm al achite green ,crystal violet and theirm etabolites i n aquatic products by UPLC M S /M SWANG Li m in ,DU Xuel,i Z HAO Y an ,LI U Y ao m i n(Inspection C enter of T ongw ei Co Ltd ,Chengdu 610041,China )Abstrac t :W e deve l oped a rapid and accurate m ethod by U PLC M S /M S to deter m i ne t he residue o fm a lach i te green (MG ),crysta lv iolet (CV )and the ir m etabo lites (L M G and LCV )i n aquatic produc ts B ased on the rapid m e t hod of S N /T 1768 2006,standard curv es w ere m ade by add i ng standard so l utions o f d ifferent concentra tions to the b l ank sa m ples ,and D 5 MG and D 6 L M G we re used as interna l standards ,wh i ch i m proved the accuracy o f de ter m i nati on T he resu lts show tha tMG,CV,LM G and LCV have a good li nea r co rre l a ti on w it h i n t he range o f 0~10 0ng mL -1(R >0 99),and the detec tion li m its o f the m ethod are all 0 1 g kg -1 T he aver age recoveries a t fortificati on of 0 5and 1 0 g kg -1rang e fro m 92 1%to 111 0%w ith re l a tive standa rd dev i a tions (R SD )vary ing fro m 2 2%to 9 5% Furthe r mo re ,the rapi d and accura te i m proved m ethod i s a lso proved by FAPA S P ro fi c iency T est to m ee t the ex port testi ng requ i re m ents o f aquatic produc ts K ey word s :U PLC M S /M S ;ma lach ite green ;cry sta l v i o l e t ;m e tabolite ;aquati c produc ts孔雀石绿(MG )和结晶紫(C V )是一类三苯甲烷类染料,最先应用在纺织工艺,因其具有消毒和杀菌作用而被广泛应用于水产品的养殖过程中。
同位素内标法-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中地西泮残留
分析检测同位素内标法-超高效液相色谱-串联质谱法 快速测定水产品中地西泮残留马承鸿1,2，陈晓嘉1,2，吴家玲1,2，何雯倩3，周芳梅1,2（1.广东省食品质量监督检验站，广东广州 510000；2.广东省食品工业研究所有限公司，广东广州 510000；3.江苏广海检验检测有限公司，江苏南通 226121）摘 要：目的：建立同位素内标法-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中地西泮残留量的方法。
方法：在样品中加入地西泮-D5，采用乙腈涡旋提取，QuEChERS法除脂净化后，取上清液过滤上机。
使用phenomenex Luna C18色谱柱分离，超高效液相色谱串联四极杆质谱模式，多反应离子监测方式检测，内标法定量。
结果：在0.1～10.0 μg·L-1线性关系良好，相关系数大于0.995，检出限为0.05 μg·kg-1，定量限为0.15 μg·kg-1，回收率（n=6）为95.8%～110.3%，相对偏差（n=6）为0.6%～8.5%。
结论：该方法具有简便快速、灵敏度高、结果准确的优点，适用于大批量水产品中地西泮残留量的准确快速测定。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；地西泮；内标法；QuEChERS；水产品Rapid Determination of Diazepam Residues in Aquatic Products by UPLC-MS/MS with Isotope Internal Standard Method MA Chenghong1,2, CHEN Xiaojia1,2, WU Jialing1,2, HE Wenqian3, ZHOU Fangmei1,2(1.Guangdong Food Quality Supervision and Inspection Station, Guangzhou 510000, China;2.Guangdong Food Industry Institute Co., Ltd., Guangzhou 510000, China;3.Jiangsu Guanghai Inspection and Testing Co., Ltd., Nantong 226121, China)Abstract: Objective: A rapid method for the determination of diazepam residues in aquatic products by internal standard isotope-ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry was established. Method: By adding diazepam-D5 to the samples, followed by vortex extraction with acetonitrile and QuEChERS-based defatting, the supernatant was obtained and filtered. The analytes were separated on a Phenomenex Luna C18 column, and detected by UPLC coupled with quadrupole mass spectrometry in multiple reaction ion monitoring mode, employing an internal standard method for quantification. Result: The linear relationship was good in the range of 0.1 ～10.0 μg·L-1, the correlation coefficient was greater than 0.995. The limit of detection was 0.05 μg·kg-1, limit of quantification was 0.15 μg·kg-1, the recovery rate (n=6) was 95.8%～110.3%, and the relative deviation (n=6) was 0.6%～8.5%. Conclusion: The method is simple, rapid, sensitive and accurate, which is suitable for the accurate and rapid determination of diazepam residues in large quantities of aquatic products.Keywords: ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; diazepam; isotope internal standard method; QuEChERS; aquatic products地西泮属于苯二氮卓类药物，为第二代催眠药。
高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中的磺胺类药物残留
工作研究畜牧业环境 2021.0432摘 要：高效液相色谱-串联质谱法是检测领域中一种非常重要的检测方法，本文针对水产品中的磺胺类药物残留建立了相关的LC-MS法，旨在帮助实验室提高检测效率和检测质量。
本实验建立的方法在1～20ng/mL范围内具有良好线性关系，且7种磺胺药物的相关系数均大于0.998；同时该方法检出限较低，为1ug/kg。
另外测定了5ug/kg添加水平时的回收率，结果显示各类药物的回收率在83%～95%之间。
可见该方法高效准确，可以满足实验需求。
关键词：高效液相色谱-串联质谱法；水产品；磺胺类药物；检测方法1 前言磺胺类药物自发现至今，已有80余年历史。
由于其具有广谱抗菌性、性质稳定、吸收快、使用方便等诸多优点，使其在医疗卫生、食品生产、动物养殖等领域应用广泛。
但在使用过程中也存在着一些缺陷，例如抑菌效果弱、易产生耐药性、用量大、疗程长和发生不良反应等，这些缺陷的存在会造成磺胺类药物的过量使用，由此导致水产、畜禽肉等农产品中药物残留超标，对人体健康产生威胁。
随着检验检测技术的发展，关于磺胺类药物的检测方法已从最初的一种变为现在的多种，主要包括LC-MS（高效液相-串联质谱法）、LC（高效液相色谱法）、快速检测法（ELISA酶联免疫吸附法）、安培检测法等。
其中LC-MS和LC最为常用，在定性定量方面占有很大优势。
本研究以水产品为检测对象，经过一系列条件的优化，建立了关于磺胺类药物的高效液相-串联质谱法的检测方法。
2 材料与方法2.1 实验材料与仪器甲酸（色谱纯，赛默飞世尔），甲醇、乙腈（色谱纯，默克），Captive EMR柱（5982-1003，安捷伦），7种磺胺类药物的混合标准品（100μg/ml，Dr.Ehrenstorfer GmbH）。
0.1%甲酸-水溶液：甲酸：水=1：1000。
超高效液相色谱（1290）-串联四极杆质谱联用仪（6495）（美国，安捷伦）；CF16RN高速冷冻离心机（日本，日立）；涡旋混合器（德国，IKA）；MS2204TS电子天平（瑞士，梅特勒）。
超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中的30种兽药残留
超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中的30种兽药残留作者：黄正华来源：《现代食品》 2018年第21期摘要：文章首先介绍了实验的设备与试剂、标准溶液的配制、预处理方法、标准工作曲线的配制、仪器条件及定量等内容，随后文章针对实验结果进行了讨论分析，包括优化质谱条件、改善色谱条件、创新预处理方法、考察基质效应、检测实际样品等，希望能给相关人士提供一些参考。
关键词：固相萃取；喹诺酮兽药；青霉素兽药我国在水生物养殖、禽类饲养以及畜牧业生产等过程中会使用各种兽药，其中包括喹诺酮和青霉素等，这些药物的滥用会对人体产生一定的影响，当人体内的药物积累到一定程度后，就会出现耐药性，甚至导致畸形、突变等严重后果[1]。
目前在兽药检测领域中普遍使用的一种方法是超高效液相色谱- 串联质谱法。
1 实验方法1.1 设备与试剂使用的设备包括超高效液相色谱仪Agilent1290，三重四极杆质谱仪6460，高速冷冻离心机、水浴式的氮吹仪、高纯净水仪、超声波振荡器等。
试剂包括甲酸、正己烷、乙腈、甲醇、氯化钠、三氯乙酸、C18 吸附剂。
实验过程中所使用的水均是通过高纯水净化而来。
此外，还包括19 种喹诺酮标准品，恩诺沙星、司帕沙星、双氟沙星、沙拉沙星、环丙沙星、诺氟沙星、萘啶酸、西诺沙星、洛美沙星、培氟沙星、吡哌酸、奥比沙星、依诺沙星、马波沙星、达氟沙星、氟甲喹、恶喹酸、司帕沙星、沙拉沙星等，还有11 种青霉素标准品，如苯氧乙基青霉素、双氯青霉素、邻氯青霉素、甲氧苯青霉素、苯咪青青霉素、苯氧甲基青霉素、苄青霉素、乙氧萘胺青霉素、双氯青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素、苯氧乙基青霉素等。
1.2 标准溶液的配制先将喹诺酮标准品使用10 毫升的甲酸进行溶解后用乙腈作为溶剂。
而青霉素类标准品则以50%乙腈水溶液作为溶剂，然后将30 种标准品配制成500 μg·mL-1 浓度的单标储备液，并避光冷藏保存。
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星李小玲;黄向荣;万译文;陈湘艺【摘要】建立了一种同时测定水产品中诺氟沙星、环丙沙星与恩诺沙星药物残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法.样品经乙腈提取,用正己烷脱脂,旋转蒸发浓缩,采用HPLC-MS/MS选择反应监测(SRM)正离子模式测定进行定性和定量分析.结果表明,诺氟沙星、环丙沙星与恩诺沙星药物检测结果的检出限(LOD)为1.0 μg/kg,定量限(LOQ)为2.0 μg/kg,检测结果的相对标准偏差为1.8％～10.9％(n=6),加标回收率达到68.5％～102.1％.该方法具有重现性好、灵敏度高、分析时间短和确证能力强等优点,适用于水产品中诺氟沙星、环丙沙星与恩诺沙星药物残留的确证检测.【期刊名称】《中国渔业质量与标准》【年(卷),期】2013(003)004【总页数】6页(P25-30)【关键词】高效液相色谱-串联质谱法;诺氟沙星;环丙沙星;恩诺沙星;水产品【作者】李小玲;黄向荣;万译文;陈湘艺【作者单位】农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),湖南长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),湖南长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),湖南长沙410153;农业部渔业产品质量监督检验测试中心(长沙),湖南长沙410153【正文语种】中文【中图分类】S94诺氟沙星、环丙沙星与恩诺沙星是20世纪80年代出现的第3代喹诺酮类药物［1－4］。
该类药物抗菌效果好、低毒、组织穿透力强，被广泛应用于治疗消化、呼吸、泌尿和生殖等系统的感染征，在畜禽和水产养殖业中被大量使用。
由于在饲养过程中该类药物的不合理应用，使得少量该类药物蓄积在动物源性食品中，给人体健康造成危害［5－6］。
目前欧盟和美国等已将该类药物列为动物源性食品中残留的重点监控药物，并规定在水产品中不得检出［7］。
液相色谱-串联质谱法检测动物产品中兽药残留的应用
液相色谱-串联质谱法检测动物产品中兽药残留的应用摘要：本文主要探讨液相色谱-串联质谱法在检测动物产品中兽药残留的应用及效果。
常用的样品前处理方法包括固相萃取（SPE）和液液萃取（LLE）。
固相萃取通过使用特定吸附剂去除干扰物质，从而提高目标化合物的浓缩度和纯度。
液液萃取则利用溶剂的分配系数差异，将目标化合物从基质中转移到有机相中进行富集。
在LC-MS/MS分析条件方面，选择合适的色谱柱对于分离目标兽药很重要。
常用的色谱柱类型包括C18和亲水性柱，具有良好的保留和分离性能。
流动相的组成和温度也需要优化，以实现目标化合物的最佳保留和分离效果。
关键词：液相色谱-串联质谱法；动物产品；兽药残留1动物产品中兽药残留的检测需求与挑战兽药是用于动物领域的诊断、治疗和预防疾病的药物。
在畜牧业中，兽药的使用可以提高动物的生产性能和健康状况。
然而，不当或滥用兽药可能导致兽药残留，在动物产品（如肉类、奶制品和蛋类）中残留下来。
兽药残留可能对人类健康产生潜在风险。
长期暴露于兽药残留物可能导致抗菌耐药性、过敏反应和慢性毒性等问题。
因此，监测和控制动物产品中的兽药残留是保障食品安全和公众健康的重要任务。
液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）由于其高灵敏度、高选择性和广泛的适用性，在兽药残留检测中得到广泛应用。
2样品前处理方法2.1固相萃取（SPE）的应用固相萃取（Solid-Phase Extraction，SPE）是一种常用的样品净化方法，在兽药残留的分析中得到广泛应用。
SPE利用固定在固相柱中的吸附剂对样品进行选择性吸附和洗脱，实现兽药残留的富集和净化。
在SPE过程中，常见的固相材料包括正相、反相和离子交换剂等。
根据目标分析物的特性和样品基质的性质，选择适当的固相材料可以实现针对性的富集和净化效果。
如果目标分析物是亲水性化合物，通常选择正相固相材料进行富集。
正相SPE柱上的吸附剂通常具有极性官能团，能够有效地吸附亲水性化合物。
高效液相色谱-串联质谱在兽药残留分析中的应用
T logy科技食品科技HPLC-MS/MS全称为种高效液相色谱-串联质谱技术，该技术可对多组分进行定性、定量综合分析，在应用中可以对高沸点、非挥发性等进行准确的分离鉴定。
在分离检测的过程中主要利用电喷雾电离和大气压化学电离技术将待测物中的成分分离出来，在送入质谱检测系统中进行检测，便可以较为精准地测量出母离子的特征碎片。
1 动物药物残留分析简介常用的兽药残留量检测方法有微生物法和色谱法。
前者为筛选方法，该方法的原理是抗原抗体反应，在对动物药物残留进行测定的过程中难以对同类型的药物进行区分。
对于禁用兽药（A类），如硝基呋喃等，残留限度（PED）在4%以下；而禁用兽药 （B类），如磺胺类，残留限度（PED）在3%以下。
质谱分析技术可以准确检测食品中的动物药物残留，进而为解决兽药残留问题提供有效的解决 途径。
2 液相色谱质谱联用技术在兽药残留检测中的应用β-内酰胺类在动物医疗中被广泛应用，这种抗生素可以抑制动物细菌性感染，同时还可以对动物体内的细菌细胞合成、抗革兰氏阳性菌等进行阻断隔离，其主要的代表化合物有青霉素、氨苄青霉素。
徐伟、耿士伟等利用电喷雾离子阱技术，对牛奶中7种β-内酰胺类抗生素进行了检测，用乙腈提取和沉淀蛋白质，经C18柱净化浓缩后供LC-MS/MS分析，再利用正离子模式监测，多级离子捕捉器可以提供更多的碎片离子结构信息，获得高灵敏度。
使用LC-MS/MS测量牛奶中的阿莫西林、邻氯青霉素、青霉素G等，并使用内标物d7-青霉素G，样品经高速离心脱脂后，样品过C18柱（pH值过柱时大于6），每一种药物选择3个离子来提高检测的灵敏度。
然后他们将这一方法运用到生奶检测中，以青霉素V为内标，测定了10种牛乳中β-内酰胺类抗生素的残留检测方法[1]。
郭盈岑教授在负离子扫描模式下监测牛肝、肾和肌肉中的6种青霉素含量，用LC-MS/MS测定，定量限为50 μg/kg。
通过LC-MS/MS法测定β-内酰胺、皮质激素、氯霉素等药物的实验研究发现，认为液质结合技术是解决兽药残留分析的有效手段[2]。
高效液相色谱_串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留_熊春兰
Simultaneous Determination of 8 Kinds of 38 Veterinary Drug Residues in Aquatic Products by High Performance Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry
类、磺胺增效剂、林可胺类、硝基咪唑类、喹
用 1% 乙酸乙腈溶液提取，经冷冻离心分离和正己烷净化后， HPLC － MS / MS 进行测定，基质曲线外标法定 量。在电喷雾正离子模式下，以多反应监测（ MRM） 方式采集数据进行定性与定量分析 。38 种兽药在水产品 中的基质溶液标准曲线线性系数（ r） 均大于 0. 99 ； 在 4 个不同浓度加标水平下，平均回收率为 43% ～ 123% ； 日内相对标准偏差（ RSD） 为 1. 0% ～ 26. 4% ，日间 RSD 为 1. 6% ～ 28. 9% ； 定量下限（ LOQ，S / N≥10 ） 为 5 ～ 20 μg / kg。方法简单、快速、可靠，可用于水产品中兽药多残留的快速筛查 。 关键词： 高效液相色谱 － 串联质谱法； 水产品； 限用兽药； 多残留； 快速筛查 中图分类号： O657. 63 ； TQ460. 72 文献标识码： A 文章编号： 1004 － 4957 （ 2013 ） 02 － 0193 － 07 doi： 10. 3969 / j. issn. 1004 － 4957. 2013. 02. 009
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分析测试学报
第 32 卷
伴随着兽药在畜牧业中的广泛应用和人们对其相关危害的深入认识 ， 动物性食品中兽药残留成为 食品安全领域的热点和焦点。在我国，滥用、 乱用限用药物、 非法使用禁用药物等现象屡禁不止， 已 成为导致我国动物源性食品中兽药残留超标的主要原因 ， 引发了畜禽产品消费安全和食品贸易争端等 ［1 ］ 严重后果 。喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、 磺胺增效剂、 林可胺类、 硝基咪唑类、 喹 啉类和多 肽类等化合物目前在畜牧水产养殖方面使用较多 ， 滥用这些药物易造成畜水产品的严重污染， 通过食 物链可在人体内蓄积，并具有导致过敏反应和使人体产生抗药性等副作用。 世界各国对此有严格的限
高效液相色谱在食品农兽药残留中的检测应用
13 Oct. 2021 CHINA FOOD SAFETY Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
颁布的《动物性食品中兽药最高残留限量》已经明文规定食
品动物中不得检出氯霉素。朱虹通过 HPLC 法对猪肉产品
进行抗生素检测，发现 HPLC 法可同时检测氯霉素、土霉素、
甲砜霉素、阿莫西林、四环素和氟苯尼考 6 种抗生素，且不
同抗生素的线性关系良好，最低检出限为 8 μg/kg，定量限
最高可达 30 μg/kg，多次检测的 RSD 值最高为 4.3%，表明
食ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ管理
高效液相色谱在食品农兽药残留中的检测应用
郑碧秋
（茂名市食品药品检验所，广东茂名 525000）
摘 要：随着健康饮食习惯的普及，越来越多的消费者重视植物性或动物性食品中农药、兽药残留问题，希望建立一 种快速、灵敏、精准的检查方法来保证食品安全。本文介绍了高效液相色谱法在食品中有机磷农药、氨基甲酸酯类农药和 烟碱类农药的检测应用，分析了高效液相色谱法在氯霉素、四环素类、磺胺类和喹诺酮类兽药的检测应用，以期为食品中 农药、兽药的高效高通量检测提供参考。
类农药的检出限为 0.1 ～ 1.0 μg/kg，定量限为 0.3 ～ 2.0 μg/kg，
6 种农药的 RSD 值为 1.3% ～ 14.3%，表明 HPLC 方法快速，
分析简单，可以适用于大批量蜂蜜农药残留的检测。
2 食品中兽药残留的检测 2.1 氯霉素
超高效液相色谱_串联质谱法测定水产品中三聚氰胺残留量
2009，18（3）超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中三聚氰胺残留量林荆，郑宇，张金虎，吴文凡，赵建晖（福清出入境检验检疫局，福建福清350300）摘要：本文建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-M S/M S)快速测定水产品中三聚氰胺残留的方法。
色谱条件：ACQUITY UPLC BEH HILIC 柱(2.1×100mm ，1.7m)，流动相：乙腈-0.5mmol/L 乙酸铵溶液（0.1%甲酸），流速：0.3mL/min 。
采用电喷雾质谱检测，以正离子模式5min 就完成了质谱分析。
实验结果表明，三聚氰胺在水产品中的检测限为0.05mg/kg ，在0.05~0.50mg/kg 添加水平时加标回收率为63%~90%之间，相对标准偏差（RSD,n=6）均小于7.2%。
关键词：三聚氰胺；水产品；超高效液相色谱-串联质谱；中图分类号：0657.63文献标识码：A 文章编号：1009-8143(2009)03-0023-04Determination of Melamine Residues in aquatic products by Ultra PerformanceLiquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryLin Jing,Zhen Yu,Zhang Jin-hu,Wu Wen-fan,Zhao Jian-hui (Fuqing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Fuqing,Fujian350300,China)Abstract:The residue of melamine in aquatic product was studied by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometer.The sample was extracted and separated on ACQUITY UPLC BEH HILIC column (2.1×100mm ，1.7m)with acetonitrile-0.5mmol/L ammonium acetate (0.1%formic acid)as the mobile phase at flow rate 0.3mL/min.The detection was performed by tandem mass spectrometry with electrospray ionization in positive mode (ES+)in five minutes.Experimental results showed that the limit of detection was 0.05mg/kg,the recoveries between 0.05~0.50mg/kg levels ranged from 63%to 90%.Relative standard deviations (n=6)were less than 7.2%。
液相色谱_串联质谱法同时测定水产_省略_类_氟喹诺酮类和四环素类渔药残留_郭萌萌(1)
收稿日期： 2013 － 01 － 02 ； 接收日期： 2013 － 01 － 30 资助项目： 国家自然科学基金项目（ 41106109 ） 和中央级基本科研业务费项目（ 20603022011004 ） 作者简介： 郭萌萌（ 1981 － ） ， 硕士， 助理研究员， 主要从事水产品安全与质量检测研究 。E － mail： guomm@ ysfri． ac． cn 通信作者： 谭志军， 副研究员， 主要从事水产品安全与质量控制研究 。E － mail： tanzj@ ysfri． ac． cn
1． 4
液相色谱 － 质谱分析条件
液相色谱条件： Atlantis dC18 色谱柱 （ 2． 1 mm × 150 mm， 3 μm） ； 柱温： 35 ℃ ； 流速： 0． 20 mL / min； 进 样量： 5 μL； 流动相： A 为 5 mmol / L 乙酸铵 （ 含 0． 05 % 甲酸） ， B 为乙腈； 梯度洗脱程序见表 1 。
* 郭萌萌， 谭志军 ， 孙晓杰， 吴海燕， 孙伟红， 邢丽红， 李兆新， 翟毓秀
（ 农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室， 中国水产科学研究院黄海水产研究所； 国家水产品质量监督检验中心： 山东 青岛 266071 ） 摘要： 建立了同时测定水产品中三苯甲烷类染料 、 氯霉素类、 磺胺类、 氟喹诺酮类和四环素类 5 类共 23 种渔用药物残 C18 吸附剂分散固相萃取净化， 正己烷进一步除脂， 滤膜过 留的液相色谱 － 串联质谱分析方法。样品经酸化乙腈提取， 以乙腈和 5 mmol / L 乙酸铵（ 含 0． 05 % 甲酸） 水溶液为流动相， 梯度洗脱分 滤后进行分析。采用 Atlantis dC18 色谱柱， 离后， 目标分析物在选择反应监测模式（ SRM） 、 正负离子切换扫描方式下进行定性和定量分析 。 所选定的 23 种化合 4 种三苯甲烷类染料和氯霉素的线性范围为 0． 5 ～ 20． 0 ng / mL， 物在 12 min 内实现良好分离。其中， 检出限均为 0． 3 4 种氟喹诺酮类化合物、 μg / kg； 8 种磺胺类化合物、 甲砜霉素和氟甲砜霉素的线性范围为 5． 0 ～ 100． 0 ng / mL， 检出限 均为 2． 0 μg / kg； 4 种四环素类化合物线性范围为 10． 0 ～ 200． 0 ng / mL， 检出限均为 5． 0 μg / kg。23 种化合物的平均添 加回收率为 50． 4 % ～ 118． 5 % ， 相对标准偏差（ RSD） 为 2． 86 % ～ 17． 2 % 之间。 该方法操作简便， 灵敏度较高， 可用 2013 ， 3 （ 1 ） ： 51 － 58］ 于水产品中 5 类渔用药物残留的快速筛查。［ 中国渔业质量与标准， 关键词： 渔用药物； 残留； 液相色谱 － 串联质谱； 水产品 中图分类号： 文献标志码： A 文章编号： 2095 － 1833 （ 2013 ） 01antum Access TM 液 相 色 谱 － 串 联 质 谱 仪 （ 美国 Thermo Fisher Scientific 公司） ； KQ － 300E 型超 声波提取仪（ 昆山市超声仪器有限公司 ） ； XW － 80A 型旋涡混合器 （ 上海医大仪器厂 ） ； Himac CR 22G Ⅱ 型高速离心机 （ 日本 Hitachi 公司 ） ； N － EVAPTM112 型氮气吹扫仪（ 美国 Organomation 公司） ； Milli － Q 型 超纯水仪 （ 美国 Millipore 公司 ） ； T18 basic 型均质机 （ 德国 IKA 公司） 。 孔雀石绿 （ malachite green， 纯 度 93． 5% ） 、 隐色 孔雀石绿 （ leucomalachite green， 纯度 98% ） 、 结晶紫 （ crystal violet， 纯度 98% ） 、 隐 色 结 晶 紫 （ leucocrystal violet， 纯 度 99% ） 、氯 霉 素 （ choramphenicol，纯 度 98. 5% ） 、 甲砜霉素 （ thiamphenicol， 纯度 98． 5% ） 、 氟 甲砜霉素（ florfenicol， 纯度 99． 5% ） 、 磺胺嘧啶 （ sulfadiazine， 纯度 99. 0% ） 、 磺胺甲基嘧啶 （ sulfamerazine， 纯度 99． 2% ） 、 磺胺二甲基嘧啶 （ sulfadimidine， 纯度 99． 0% ） 、磺 胺 甲 噁 唑 （ sulfamethoxazole，纯 度 99. 5% ） 、磺 胺 二 甲 异 噁 唑 （ sulfisoxazole，纯 度 98. 7% ） 、 磺胺噻唑 （ sulfathiazole， 纯度 99． 5% ） 、 磺胺 纯度 99． 0% ） 、 磺胺喹噁啉 （ sulfa多辛（ sulfadoxine， quinoxaline， 纯度 97． 5% ） 、 诺氟沙星 （ norfloxacin， 纯 99． 5% ） 、 （ ciprofloxacin ， 95． 0% ） 、 度 环丙沙星 纯度 恩诺 沙 星 （ enrofloxacin， 纯 度 98. 5% ） 、 氧氟沙星 （ ofloxacin， 纯度 99． 0% ） 、 土霉素 （ oxytetracycline， 纯 度 97． 5% ） 、 金霉素（ chlorotetracycline， 纯度 99. 0% ） 、 四环素 （ tetracycline， 纯度 98． 0% ） 、 多西环素 （ doxycycline， 纯度 98． 7% ） 标准品均购自德国 Dr． Ehrenstorfer 公司； 乙腈、 Merk 公司 ） ； 甲 正己烷 （ HPLC 级， Fluka 公 司 ） ； 超 纯 水 （ 18． 2 酸、 乙 酸 铵 （ HPLC 级， MΩ． cm） ； 酸化乙腈（ 含 1% 甲酸的乙腈溶液， V / V） 。
快速高效液相色谱_串联质谱法同时测定水产品中5类33种药物残留_罗辉泰
分析化学 （ FENXI HUAXUE） 研究报告 Chinese Journal of Analytical Chemistry
第2 期 273 ～ 279
DOI： 10． 3724 / SP． J． 1096． 2012． 10410
快 速 高 效 液 相 色 谱 -串 联 质 谱 法 同 时 测 定 水产品中 5 类 33 种药物残留
2 实验部分
2． 1 仪器与试剂 Agilent1200 SL Series RRLC /6410B Triple Quard MS 快速高效液相色谱 / 串联质谱联用仪（ 美国安捷
伦公司） ； AS 3120 超声波发生器（ Auto Science 公司） ； Anke TDL-40B 离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ；
2011-04-29 收稿； 2011-09-16 接受 本文系广东省科技计划项目重点专项（ No． 2009A020101004） 资助 * E-mail： wenhxl@ 126． com
274
分析化学
第 40 卷
DC12H 水浴式氮吹浓缩仪（ 上海安谱科学仪器有限公司） ； XW-80A 快速混匀器（ 海门市麒麟医用仪器厂） 。 四环素（ TC） 、土霉素（ OTC） 、金霉素（ CTC） 、强力霉素（ DOX） 购于中国药品生物制品检定所； 依诺
BDS Hypersil C8 柱色谱柱（ 100 mm×2． 1 mm，2． 4 μm） ； 柱温： 30 ℃ ； 流速： 0． 3 mL / min； 进样量： 5 μ L； 流动相： A 为 0． 4% （ V / V） 甲酸+10 mmol / L 乙酸铵溶液，B 为 0． 4% （ V / V） 甲酸-乙腈； 梯度洗脱程序： 0 ～ 10 min，10% ～ 80% B； 10 ～ 11 min，80% ～ 100% B； 11 ～ 13 min，100% B； 13 ～ 13． 1 min，100% ～ 10% B； 13． 1 ～ 16 min，10% B。
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8类38种兽药残留熊春兰;郭平;占春瑞;刘光斌;万建春【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2013(032)002【摘要】建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时测定水产品中喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、磺胺增效剂、林可胺类、硝基咪唑类、喹(噁)啉类和多肽类8类共38种限用兽药残留的检测方法.试样用1％乙酸乙腈溶液提取,经冷冻离心分离和正己烷净化后,HPLC-MS/MS进行测定,基质曲线外标法定量.在电喷雾正离子模式下,以多反应监测(MRM)方式采集数据进行定性与定量分析.38种兽药在水产品中的基质溶液标准曲线线性系数(r)均大于0.99;在4个不同浓度加标水平下,平均回收率为43％～123％；日内相对标准偏差(RSD)为1.0％～26.4％,日间RSD为1.6％～28.9％;定量下限(LOQ,S/N≥10)为5～20μg/kg.方法简单、快速、可靠,可用于水产品中兽药多残留的快速筛查.【总页数】7页(P193-198,204)【作者】熊春兰;郭平;占春瑞;刘光斌;万建春【作者单位】江西农业大学理学院应用化学研究所,江西南昌330045;江西出入境检验检疫局综合技术中心,江西南昌330038;江西出入境检验检疫局综合技术中心,江西南昌330038;江西出入境检验检疫局综合技术中心,江西南昌330038;江西农业大学理学院应用化学研究所,江西南昌330045;江西出入境检验检疫局综合技术中心,江西南昌330038【正文语种】中文【中图分类】O657.63;TQ460.72【相关文献】1.鲜冻水产品中违禁兽药残留高效液相色谱-串联质谱法比较与改进研究 [J], 唐小兰;魏仲珊;王亮亮;邱宇2.超高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中6种兽药残留 [J], 隋涛;付建;李晓玉;郭海霞;娄喜山3.固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中多种兽药的残留量 [J], 刘辉;谭素娴4.分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中19种喹诺酮类兽药残留[J], 曹军;陈勇;杨瑞章;黄月芳5.分散固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法检测水产品中多兽药残留 [J], 张桂云;杨伟强;林振宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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乙酸铵 /% 10 25 35 90 60 95 10
斜率
6 6 6 6 6 1
※分析检测
食品科学
2011, Vol. 32, No. 10 205
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1mm × 100mm，1.8μm)；流动相：甲醇 -5mmol/L 乙酸铵溶液 (0.1% 甲酸)，梯度洗脱程序见表 1； 流速：0.25mL/min； 柱温 3 5 ℃；进样量：3μL 。首先用一个等梯度洗脱程 序，观察每一种化合物出峰的出峰顺序，后确定一个 较为粗略的梯度洗脱程序，通过不断优化和实验最终确 定一个最佳的梯度洗脱程序。
式见图 1 。 韩国国立水产物品质检查院计划 2010 年增加针对水
产品的检测项目，新增抗生素类项目 12 项，其中包括 萘啶酸(nalidixic acid)、吡喹酮(praziquantel)、泰妙菌素 (tiamu lin)、二氟沙星(diflo x ac in)、甲氧苄胺嘧啶 (trimethoprim)、氟甲砜霉素(florfenicol)，在鱼类或甲壳 类中的限量分别为 0.03、0.02、0.1、0.3、0.05、0.1mg/kg。
detected by UPLC-MS/MS within 6 minutes. The linear regression coefficients corresponding to 6 spiked levels in the range of
5 to 200 μg/L were between 0.9977 and 0.9999. The detection limit for each of the six substances was 1.0 μg/kg, and their
2 结果与分析
2.1 质谱分析与方法定性 分别将 6 种 5mg/L 的单独标准溶液以蠕动泵进样的
方式注入到质谱中，萘啶酸、泰妙菌素、甲氧苄胺嘧 啶、二氟沙星、吡喹酮在 ESI+ 方式下进行一级质谱全 扫描分析，可以找到准确的[M+ H]+ 分子离子峰。氟甲 砜霉素在 ESI+ 方式下离子化强度远弱于 ESI-，因此氟甲 砜霉素选择在 ESI- 方式下进行 MRM 分析。用 daughterscan 方式对子离子及碰撞能量进行优化。 2.2 色谱条件的选择
CH2CH3
O
N
O
CO2H
O
萘啶酸 nalidixic
O
N N
O 吡喹酮
praziquantel
OH
OO
O
O
O
NO
OH
泰妙菌素 tiamul
N
N
N
F
二氟沙星 difloxacin
O O
O
O
F
S
N
NH2
O
O
N NH2
Cl
N
H
Cl
OH
甲氧苄胺嘧啶 trimethprim
氟甲砜霉素 florfenicol
aquatic products by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) after liquid-
liquid extraction approach was established. The samples were extracted using acetonitrile as the solvent, purified by hexane and
2.2.1 色谱柱的选择 本研究选用适用于 Acquity UPLC 的 3 种专用反相色
谱柱，在其他质谱与液相条件相同的情况下，比较各 色谱柱对 6 种物质的保留情况、灵敏度、峰形等。3 种 色谱柱规格为：Waters ACQUITY UPLC HSS T3 Column (2.1mm × 100mm，1.8μm) (简写：T3)；Waters ACQUITY SHIELD RP18 Column(2.1mm × 100mm，1.7μm)(简写：
1.4.1 色谱条件
时间 /min 初始 1.0 2.5 3.0 3.5 5.0 6.0
表 1 流动相梯度洗脱程序 Table 1 Gradient elution program
流速 /(mL/min) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
甲醇 /% 90 75 65 10 40 5 90
1.4.2 质谱条件 采用 ESI 离子源；扫描方式：由于氟甲砜霉素含有
电负性较强的氯基团，因此确定为负离子扫描，萘啶 酸、泰妙菌素、甲氧苄胺嘧啶、二氟沙星、吡喹酮 为正离子扫描；正离子模式下毛细管电压：3 . 0 k V ，负 离子模式下毛细管电压为 2.6kV；离子源温度：110℃； 脱溶剂温度：3 50 ℃。首先对每一种标准品的单标进行 蠕动进样，通过分别界定母离子和子离子的扫描范围进 行全扫描以确定母离子和子离子对的准确值，然后分别 通过改变不同的锥孔电压和碰撞能值使化合物的出峰灵 敏度达到最高以使锥孔电压和碰撞能值达到最优。
单标储备液制备：用天平准确称取 0.0100g 标准物 质，用乙腈配制成 1 00 mg /L 的标准储备液，4℃避光 保存。
混合标准工作液的制备：准确移取一定量的混合标 准储备液置于容量瓶中，用乙腈与水混合溶液(4:6，V/V) 定容至刻度线，逐级稀释成 2 、5 、10 、25、50 、10 0 μg / L 的标准工作混合液，于 4 ℃条件下保存。 1.2 仪器与设备
1 材料与方法
1.1 试剂 乙腈、甲醇(均为色谱纯) 德国默克公司；正己
烷、甲酸(均为色谱纯) 天津科密欧化学试剂有限公 司；水为超纯水，乙酸铵为优级纯。
6 种标准物质(纯度)：萘啶酸(9 9.5%)、泰妙菌素 (98.5%)、甲氧苄胺嘧啶(99.5%)、二氟沙星(98.4%)、氟 甲砜霉素(99.0%)、吡喹酮(99.0%) 德国 Dr.Ehrenstorfer 公司。
萘啶酸为第一代喹诺酮类抗菌药物，对大肠埃希 菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、志贺菌属、沙门菌 属、肠杆菌属及流感嗜血杆菌的部分菌株具抗菌活性。 泰妙菌素是一种双萜类动物专用抗生素，主要用于防治 家畜家禽呼吸系统疾病和动物促生长，是世界十大兽用 抗生素之一。甲氧苄胺嘧啶是一种抗菌药物，抗菌谱 与磺胺药相近，具有抑制二氢叶酸还原酶的作用。二 氟沙星是动物用抗菌药，属于氟喹诺酮类。氟甲砜霉 素是兽用抗菌药，用于敏感细菌所致的猪、鸡及鱼的 细菌性疾病。吡喹酮为一新型广谱抗寄生虫药。结构
※分析检测
食品科学
2011, Vol. 32, No. 10 203
超高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中 6 种兽药残留
隋 涛 1，付 建 2，李晓玉 1，郭海霞 2，娄喜山 2
(1.烟台出入境检验检疫局，山东 烟台 264000；2.烟台杰科检测服务有限公司，山东 烟台
265231)
摘 要：采用液液萃取的前处理方式，以超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测水产品中萘啶酸、泰妙菌 素、甲氧苄胺嘧啶、二氟沙星、氟甲砜霉素和吡喹酮的残留量。水产品经过匀质，乙腈提取并沉淀蛋白，正己 烷去除脂肪，UPLC-MS/MS 进行检测，在 6min 内完成分离。在 5～200μg/L 范围内，相关系数 R2 在 0.9977～ 0.9999 之间，具有良好的线性关系。6 种物质的检测限度均为 1.0μg/kg，回收率范围在 61.2%～90.5% 之间。本方 法操作简单、灵敏度高，可以满足水产品中农药残留的的定性定量检测。 关键词：萘啶酸；泰妙菌素；甲氧苄胺嘧啶；二氟沙星；氟甲砜霉素；吡喹酮；超高效液相色谱串联质谱； 多反应监测
称取 5.0 0g 匀质后的样品、5g 无水硫酸钠，置于 50mL 离心管中，加入 20mL 乙腈，振荡提取 10min， 4000r/min 离心 5min，上清液转移至 125mL 分液漏斗中， 残渣中加入 20mL 乙腈，再次提取 1 次，合并上清液至 分液漏斗中。向分液漏斗中 20mL 乙腈饱和的正己烷溶 液，混合均匀，静置分层，分取乙腈层至茄形瓶中。 40℃水浴条件下旋转蒸发至干，准确加入 1mL 乙腈 - 水 (4:6，V/V)混合溶液和 1mL 乙腈饱和正己烷，超声使其 完全溶解，将溶液转移至 2.0mL 小离心管中，12000r/min 高速离心 10min。吸取下层过 0.22μm 的滤膜。待检测。 1.4 超高效液相色谱 - 质谱联用分析
204 2011, Vol. 32, No. 10
食科学
※分析检测
所用仪器多为液相色谱，定量不够准确，灵敏度也不 够高。萘啶酸的检测尚无相关国家标准和行业标准，泰 妙菌素、甲氧苄胺嘧啶、二氟沙星、氟甲砜霉素、 吡喹酮 5 种药物虽然分别有相关的国家标准或行业标 准，但每个项目均为独立的前处理方法和仪器检测方 法，不能同时、快速分析检测。分析时间长，成本 高，效率非常低，难以有效地对其出口安全性进行监 控。因此，建立一种可以同时、快速检测上述药物 的标准方法对人们的身体健康和出口贸易都有十分重要 的意义。
图 1 6 种兽药的结构式 Fig.1 Structures of six veterinary drugs
本实验旨在建立快速萃取后进样同时测定水产品中 萘啶酸、泰妙菌素、甲氧苄胺嘧啶、二氟沙星、氟 甲砜霉素、吡喹酮的超高效液相色谱串联质谱法。该 法具有可多种兽药同时分析、操作简便、测定速度快 等优点，适应目前出口食品的快速通关检测工作的需 要，也可作为企业内控检测的标准方法，从而提高企 业出口产品安全性，降低企业检测成本。