公开课动物细胞培养23页PPT
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《生物工艺学》动物细胞培养 ppt课件
• 虽然可以把目的基因插入原核细胞中表达，例如，人生长激素、胰 岛素和干扰素已经被基因工程化了，但是在细菌中转录及修饰方面 的缺陷(如糖基化)，使哺乳动物细胞表达系统成了一个更合适的工 具。
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动物细胞产品分为三类
①动物细胞可以自然合成或在外源基因指导下合成许多分泌产物。
干扰素和酶，单克隆抗体，基因工程细胞株合成的EPO/EPO（EPO是 促 红 细 胞 生 成 素 （ Erythropoietin ） 的 英 文 。 促 红 素 、 依 泊 汀 ） 、 tPA/ 溶栓药组织纤溶酶原激活剂）的贴壁依赖性生长
体外培养细胞：贴壁依赖型和悬浮型 A 贴壁依赖型
• 细胞需贴附在支持物上培养生长， 绝大多数细胞在培养时，皆呈贴 壁依赖型。出现类似“返祖”现 象： 1 成纤维细胞型 2 上皮细胞型 3 游走细胞型 4 多形性细胞型
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Fibroblasts
cells used in culture
Blood Cells
Epithelial Neuronal
Muscle
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B 悬浮型或非贴壁依赖型
• 有的细胞在培养时，不贴附于支持物，呈悬浮状态生长。 • 来源于血液、淋巴组织的细胞，许多肿瘤细胞(包括杂交瘤)和其它转化细胞是属于这一
类型的细胞，可采用类似微生物培养方法进行悬浮培养。 • 悬浮型细胞常呈圆形。
• 为了代替其中的不确定组份，还开发了复杂培养基，如NCTCl09、 NCTCl35、F10和F12等。
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10.1.2.4 肿瘤细胞
• 肿瘤细胞是来自于肿瘤组织的细胞或经肿瘤 细胞与其他细胞融合产生的细胞，如杂交瘤 细胞。基本上是非贴壁依赖性的。肿瘤细胞 有很好的增殖特性，生长速率高，对培养环 境的要求低。
动物细胞培养的过程(课堂PPT)
英国科学家成功地利用骨髓干细胞培育出了人体心
脏瓣膜组织，估计在3到5年内能培育出人造心脏瓣膜用于
人体移植。
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更为重要的是，新的细胞培养法有助于人类灵活应对大 规模暴发的流感。近年来，高致病性禽流感的爆发总让人担 心届时疫苗够不够用。用鸡蛋培养病毒的话，生产多少疫苗 必须提前做出精确计划，但一般来说流感暴发时，人们很难 在短时间内购置生产疫苗所需的数百万只鸡蛋。而新方法可 在很小的生产空间，很快地制造出大批纯净的疫苗。 15
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什么是动物细胞培养?
从动物机体中取出相关组织，将它们分散 成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让 这些细胞生长和增殖。
如何进行细胞培养?
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动物细胞培养的过程
放入二氧化碳 培养箱中培养
思考：
每一步操作的理 由或目的是什么？
在培养过程中， 出现了哪些我们以前 没有涉及过的现象或 处理方法？
你觉得在了解细 胞培养过程的知识中， 应该抓住哪些关键词？
世界上第一个细胞培养生产的流感疫苗上市2007060916动物细胞培养与植物组织培养的区别1培养的起点2培养的结果3培养基的成分1718美国时代杂志评出2007年十大科学发现时代杂志说2007年11月美日科学家宣布他们利用皮肤细胞仿制出具备胚胎干细胞功能的干细胞从而避开了胚胎干细胞研究面临的伦理问题
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物 对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞 为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。 请回答下列有关动物细胞培养的问题： （1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培 养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量 比乙细胞数量___多_______。 （2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清， 其原因是__血__清_可__以__补_充__合__成_培__养__基_中_ 缺乏的物质 。细胞培养应在含 5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_ 维持__培__养__液__p_H__。 （3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长将 ___停__止____。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细 胞比乙细胞可以传代的次数更__多_____。若用动物的 肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___胰__蛋__白__酶__消化处理。 （4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加14入 适量的___抗__生__素______。
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得1e－
Cl
Cl
元素原子得电子，表现什么性？你认为氯气在
化学反应中化合价会怎样变化？ 从氯的原子结构来推测，氯在自然界中会以
化合态存在还是以游离态存在？
氯元素在自然界中态以化合存在
人体血液中含有NaCl，用来保证体内正常的生理活动 和功能的发挥。氯元素在自然界中也以化合态形式存在， 主要以NaCl和MgCl2的形式存在于海水和陆地的盐矿中。
比较项目 原理 培养基性质
植物组织培养
细胞的全能性 固体培养基
动物细胞培养
细胞增殖 液体培养基
培养基特有成分 培养结果
蔗糖、植物 激素
植物体
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
葡萄糖、动 物血清
细胞群体
获得细胞 或细胞产物
请举出动物细胞培养应用的实例
知识与技能
1.了解氯气的物理性质和实验室制法。 2.掌握氯气的化学性质：与金属的反 应，与非金属的反应，与水的反应，与 碱的反应。 3.氯气在生产、生活中的应用。
思考与交流
• 有人用软管将氯气导入鼠洞来杀灭老 鼠，效果很好，这样做，利用氯气的 什么性质？
一、氯气的物理性质
1.黄绿色气体。 2.有刺激性气味 3.有毒（怎么闻？） 4.能溶于水（1:2）,形成氯水。 5.易液化。 氯气 -34.6℃ 液氯 -101℃ 固态氯
(思考:氯气与氯水是同一物质吗?) 6.密度大于空气。
谈谈你从中得到什么启示？
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4