医学课件口蹄疫病毒
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抵抗力
• 病毒对乙醚、氯仿等有机溶剂有抵抗力, 不耐酸,在 pH6.5 、 4℃条件下每 14h 灭活 90% ,在 pH5.5 、 1min 灭活 90% ,在 pH5.0 、 ls 灭 活 90%,pH3.0 时 瞬 时 失 活 。 在 pH7.0 ~ 7.5 十分稳定。肉品酸化处埋可 杀灭病毒,但骨髓、脂肪、淋巴结等产 酸甚少,其中病毒可存活1年以上。
• 病毒对酚类、酒精等消毒剂抵抗力较强, 但对碱类消毒剂极敏感。1~2%氢氧化钠 或氢氧化钾、 30% 草木灰、 4% 碳酸钠、 1~2%甲醛可用于环境消毒。 • 病毒在低温下可长期保存,在冰冻情况 下,骨髓中病毒能存活70d,血中病毒能 存活 4-5 个月,肉中病毒能存活 30 ~ 40d 。
• 盐水具有保护病毒作用,感染组织长期保存于
微生物学诊断
(一)病料采集
• 可采集水泡皮或水泡液,最好用注射器 在水泡破溃前抽取水泡液,立即加入等 量细胞维持液中混匀,低温保存备用。 同时剪取水泡皮,置50%甘油磷酸盐缓冲 液中,低温保存备用。
(二)分离培养 1.动物接种 常用豚鼠、乳小白鼠、乳兔等, 3~5天小鼠20~30小时死亡。 2.细胞培养 (三)血清学试验 1、补体结合试验 本法可确定病毒血清型。
• FMDV 具有四种主要多肽,即 VP1 、 VP2 、 VP3、VP4。
• FMDV 在血清学上分为 7 个型,即 A 、 O 、 C 、 SAT , ( 南非 1 型 ) 、 SAT2( 南非 2 型 ) 、 SAT3( 南非 3 型 ) 和 AsiaⅠ(亚洲 1 型 ) ,每一型又有许多亚型。目前 7 个型至少可分为 65 个亚型,其中 A 型有 32 个, O 型 有 11 个, C 型有 5 个, SAT1 有 7 个, SAT2 有 3 个, SAT3 有 4 个, Asia I 有 3 个。各型间无交叉免疫原 性,在同型内的亚型间有部分交叉免疫原性。病 毒型和亚型的鉴定主要根据抗原差异,不同型之 间完全没有抗原关系,可用各型标准血清来鉴定 病毒型。
四、传播
• 本病通过直接或间接接触传播,病毒是主 要传染源。 • 本病除通过直接接触和被污染的物品机械 传播外,空气也是一种重要的传播媒介。 据多次大流行的气象分析表明,本病的传 播方向与本病发生时风雨的方向等紧密相 关。本病常可发生远距离的跳跃式传播。
• 本病暴发具有周期性特点,每隔一二年 或三五年流行一次。由于本病传播因素 较多,一Biblioteka Baidu发生,很难根除。死亡率虽 不高,但造成严重的经济损失,因此许 多国家均把本病列为重要检疫对象之一。
2、中和试验 本法主要用于检测病畜和康复 动物血清中抗体,也可用已知抗血清鉴定 病毒,可用乳鼠或细胞进行。
3 、琼扩试验
本法既可检测抗原又可检
测抗体,可确定血清型。 4 、对流免疫电泳 本法可检测抗原或抗
体,其敏感性比琼扩试验高 8 ~ 16 倍, 且所需时间短,还可用于鉴别口蹄疫和 猪水泡病。
5、反向间接血凝试验 用各型标准抗血 清的IgG敏红细胞与被检病料悬液的上清 液 ( 加热灭活 ) 作用,如被检抗原在 1:61:48 或更高出现 "++" 以上血凝,即判为 阳性。本法特异性强,且简易快速,可 用于鉴别口蹄疫和猪水泡病,还可进行 血凝抑制试验,以检测恢复期和康复动 物血清中的相应抗体。
第二节 口蹄疫病毒(FMDV)
• FMDV 属微RNA 病毒科口蹄疫病毒属成员,
有 7 个血清型和 65 个以上的亚型。是引起 多种动物发生口蹄疫的病原。
一、病毒特性
• 病毒颗粒呈球形,二十面体对称,无囊 膜,核酸类型为单股正链 RNA,核酸分子 量 2.4 ~ 2.8-l×106d ,长 2.62um ,呈细 丝状,有感染性,并能起而RNA作用。病 毒在胞浆内增殖。
• 在疾病流行时。有的毒株只选择性地感染牛 或猪。潜伏期短则2 ~ 5d,长则达2 ~ 3周;野 生动物中黄羊、鹿、腐、野猪、长颈鹿、野 牧瘤牛、野耗牛、驼羊、岩羚羊和象均可感 染,豚鼠。小鼠 ; 仓鼠、兔、猫、犬、鸡、 鸭、鹅、珠鸡、火鸡、刺猬、黄鼠狼等可人 工感染。实验动物中以豚鼠和乳小鼠最易感。 人也可感染。马对本病有较强抵抗力。
五、防
制
• 自然感染或实验感染康复动物能产生坚强 免疫力,能抵抗同型强毒攻击,但不能抵 抗异型强毒攻击。免疫或康复母牛的抗体, 可通过初乳传递给初生犊牛,便后者获得 被动免疫。由于口蹄疫病毒极易发生变异, 各血清型间又无交叉免疫;同一血清型各亚 型间交叉免疫性也较弱,因此给本病的防 制带来了很大困难。
• 本病毒不易适应鸡胚。静脉接种14日龄 鸡胚,于35℃培养,可在鸡胚继代,连 续传代后对原宿主致病力降低。有的毒 株能于鸡胚绒尿膜上生长,适应乳鼠的
毒株用各种途径接种鸡胚均易成功。
三、致病性与免疫
• 在自然条件下,本病毒主要感染偶蹄动物, 表现为口腔粘膜、蹄部、乳房反肤发生水泡 和溃疡。 家畜中以牛最易感(易感性从大到 小依次为黄牛、耗牛、铺牛、水牛 ) ,其次 是猪,骆驼、绵羊、山羊易感性最低。犊牛 比成年牛易感,病死率也高。
6 、交叉保护试验 以待检病料接种牛 或豚鼠等动物,待其发病痊愈后再用已 知各血清型病毒分别攻毒,根据保护情 况,鉴定毒型。也可用乳鼠进行交叉保 护试验,取乳鼠分别注射各型标准血清, 6-24h后待检病料攻毒,根据保护结果判 定毒型。 此外, IFA 、 ELISA 、核酸探针技术、 PCR技术等也已用于本病毒的检测。
此液中不会丧失毒力,尤其在低温,如水泡皮
保存于 50% 甘油中。- 50℃下可保毒 360-470d 。
• 紫外线能杀灭病毒,但仍保持其抗原性和吸附 细胞的能力。直接阳光照射和于燥能很快杀死 病毒,但在组织块和污染的饲料、垫草、被毛 及土壤中能保存感染性达数周至数月之久。
二、培养特性
• 本病毒能在牛舌上皮细胞、豚鼠胚以及 牛、猪、山羊、绵羊、免等动物的原代 肾细胞上生长,并出现CPE。猪和仓鼠传 代细胞系 PKl5 、 IBRS—2 、 BHK21 等均适 于本病毒培养,犊牛甲状腺细胞对本病 毒最敏感,常用于病毒分离。