课件4-2微生物检验中的采样与样品制备
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样品采集和制备ppt课件
37
绿色食品产品抽样技术规范 （试行）
2.抽样程序 2.4样品一般应在申请人的产品成品库中抽取。抽取的产品 应已
经 出厂检验合格或交收检验合格。 2.5抽取的样品应立即装箱，贴上抽样单位封条。被抽样单位应
在2个工作日内将样品寄、送绿色食品定点监测机构。 2.6抽样人员根据现场检查和国内外贸易的需要，有权提出执行
4
2、采样目的
鉴定食品的营养价值和卫生质量，包括食品中营养成 分的种类、含量和营养价值
食品及其原料、添加剂、设备、容器、包装材料中是 否存在有毒有害物质及其种类、性质、来源、含量、 危害等。
食品采样是进行营养指导、开发营养保健食品和新资 源食品、强化食品的卫生监督管理、制定国家食品卫 生质量标准以及进行营养与食品卫生学研究的基本手 段和重要依据。
1
采样准备 采样
样品保存 样品制备
2
二、采样
样品与采样 采样的目的 采样原则 样品分类 采样过程
3
1、样品与采样
样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能
较好地代表其总体样品的方法。
食品采样是食品检测结果准确与否的关键，也是营养食 品卫生专业人员必须掌握的一项基本技能
19
（五）采样步骤和方法
（2）固体散装食品 对在粮堆、库房、船舱、车
厢里堆积的食品进行采样， 可采用分层采样法，即分上、 中、下三层或等距离多层， 在每层中心及四角分别采取 等量小样，混合为初级样品；
20
21
22
采样步骤和方法
（2）固体散装食品 对大面积平铺散装食品可先分区，每区面积不超过
36
绿色食品产品抽样技术规范 （试行）
绿色食品产品抽样技术规范 （试行）
2.抽样程序 2.4样品一般应在申请人的产品成品库中抽取。抽取的产品 应已
经 出厂检验合格或交收检验合格。 2.5抽取的样品应立即装箱，贴上抽样单位封条。被抽样单位应
在2个工作日内将样品寄、送绿色食品定点监测机构。 2.6抽样人员根据现场检查和国内外贸易的需要，有权提出执行
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2、采样目的
鉴定食品的营养价值和卫生质量，包括食品中营养成 分的种类、含量和营养价值
食品及其原料、添加剂、设备、容器、包装材料中是 否存在有毒有害物质及其种类、性质、来源、含量、 危害等。
食品采样是进行营养指导、开发营养保健食品和新资 源食品、强化食品的卫生监督管理、制定国家食品卫 生质量标准以及进行营养与食品卫生学研究的基本手 段和重要依据。
1
采样准备 采样
样品保存 样品制备
2
二、采样
样品与采样 采样的目的 采样原则 样品分类 采样过程
3
1、样品与采样
样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能
较好地代表其总体样品的方法。
食品采样是食品检测结果准确与否的关键，也是营养食 品卫生专业人员必须掌握的一项基本技能
19
（五）采样步骤和方法
（2）固体散装食品 对在粮堆、库房、船舱、车
厢里堆积的食品进行采样， 可采用分层采样法，即分上、 中、下三层或等距离多层， 在每层中心及四角分别采取 等量小样，混合为初级样品；
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21
22
采样步骤和方法
（2）固体散装食品 对大面积平铺散装食品可先分区，每区面积不超过
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绿色食品产品抽样技术规范 （试行）
样品的采集与制备—认识样品采集(分析制样技术课件)
什么是采样
01
样品的采取与制备流程
01 样品的采取与制备流程
制定采样方案
确定采样工具
采样 实 施 采 样
咨询
填单
交接
查验
制样 留样
分析制样技术
粉碎 筛分 混匀 缩分 分类
保存
处理
02
采样场景
02 采样场景
分析制样技术
环境样品
食品样品
化工商品
地球岩矿
03
采样定义
03 采样定义
分析制样技术
采样是从待测的原始物料中取得具有代表性的分析试样的过程。
分析制样技术
（4)样品采集针对性
样品采集要针对性的采集有问题的典型样品，而不能用均匀的样品代表。
疑似污染食品监测
尽可能的采集接近污染源的食品或污染部分。
应采集确实未被污染的同种食品样品以做空 白试验或对照试验。
采样的方法必须与分析目的保持一致
采样方案设计
01
采样与抽样
01 采样与抽样
分析制样技术
将24.4进为25，即应选取25桶。
03 抽样方案设计
(2)抽样单元位置的确定
分析制样技术
随机抽取 利用随机数骰子
利用随机数表
利用电子随机数抽样器
采样注意事项
采样注意事项
分析制样技术
(1)采样工具的准备
不同环境与物料所需 采样工具不相同。 具有特别要求，特别 采样部位，需要特殊 的专用采样工具。
（2)采样点位置 针对不同样品，有专门布点法
（例如：对角线法、网格法等）
（3)采样的质量 根据样品的状态与数量以及测试方
法来确定的。
02 采样方案设计
分析制样技术
01
样品的采取与制备流程
01 样品的采取与制备流程
制定采样方案
确定采样工具
采样 实 施 采 样
咨询
填单
交接
查验
制样 留样
分析制样技术
粉碎 筛分 混匀 缩分 分类
保存
处理
02
采样场景
02 采样场景
分析制样技术
环境样品
食品样品
化工商品
地球岩矿
03
采样定义
03 采样定义
分析制样技术
采样是从待测的原始物料中取得具有代表性的分析试样的过程。
分析制样技术
（4)样品采集针对性
样品采集要针对性的采集有问题的典型样品，而不能用均匀的样品代表。
疑似污染食品监测
尽可能的采集接近污染源的食品或污染部分。
应采集确实未被污染的同种食品样品以做空 白试验或对照试验。
采样的方法必须与分析目的保持一致
采样方案设计
01
采样与抽样
01 采样与抽样
分析制样技术
将24.4进为25，即应选取25桶。
03 抽样方案设计
(2)抽样单元位置的确定
分析制样技术
随机抽取 利用随机数骰子
利用随机数表
利用电子随机数抽样器
采样注意事项
采样注意事项
分析制样技术
(1)采样工具的准备
不同环境与物料所需 采样工具不相同。 具有特别要求，特别 采样部位，需要特殊 的专用采样工具。
（2)采样点位置 针对不同样品，有专门布点法
（例如：对角线法、网格法等）
（3)采样的质量 根据样品的状态与数量以及测试方
法来确定的。
02 采样方案设计
分析制样技术
微生物标本采集PPT
四、标本运输 ① 标本采集后需尽快送到实验室； ② 不要冷藏标本。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
最新讲义3：微生物基本操作规范(3)采样和取、制样PPT课件
✓应根据不同的样品特征和采样环境，对采样 物品和试剂进行事先准备和灭菌等工作。
✓实验室的工作人员进入车间采样时，必须更 换工作服，避免将实验室的菌体带入加工环 境，造成加工过程的污染。
2.采样方案
✓ 微生物检验的特点是一个以小份样品的检测结果
来说明一大批食品卫生质量，因此，用于分析的样品 的代表性至关重要，也即样品的数量、大小和性质对 结果判定产生重大影响。要保证样品的代表性首先要 有一套科学的采样方案，其次使用正确的采样技术， 并在样品的保存和运输过程中保持样品的原有状态。
例如：n=5，c=2，m=100 CFU/g，M=1 000 CFU/g。
含义是从一批产品中采集5个样品，若5 个样品的检验结果均小于或等于m值（≤100 CFU/g），则这种情况是允许的；
若≤2个样品的结果（X ）位于m值和M值 之间（100 CFU/g <X≤1 000 CFU/g），则 这种情况也是允许的；
2）采样原则
(1)根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、 微生物的危害程度等确定采样方案;
(2)应采用随机原则进行采样，确保所采集的样 品具有代表性;
(3)采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能 的外来污染；
(4)样品在保存和运输的过程中，应采取必要的 措施防止样品中原有微生物的数量变化，保 持样品的原有状态。
1)采样的术语 批量货物：数量确定的货物，品质必须均匀一致。 抽检货物：从批量货中的一个位置取出的少量货物。 混合货样：条件允许，从某一特定批量采样、混合，
即为混合货样，亦即大样。 样品单位：从监督总体中抽取用于检验的样品中的单
位产品。 样品量：样品中所包含的样品单位数。 合格判定数：在计数采样检查中，对接收批的样品允
《样品的制备》课件
溶解技术
溶解技术
将固体样品溶解于适当的 溶剂中，以获得溶液样品 。
溶解方法
包括酸溶、碱溶、盐溶、 溶剂溶解等。
注意事项
选择合适的溶剂和溶解条 件，避免样品损失和溶解 不完全。
分离技术
分离技术
将样品中的不同组分进行分离， 以获得纯度较高的组分。
分离方法
包括沉淀分离、萃取分离、色谱分 离等。
注意事项
选择合适的分离方法和条件，避免 样品损失和交叉污染。
PART 05
样品制备质量控制
质量标准与检测方法
质量标准
明确样品制备的质量标准，确保制备的样品符合相关规定和要求。
检测方法
选择合适的检测方法，用于评估样品制备的质量，包括物理、化学和微生物检测 等。
质量控制流程
流程设计
制定样品制备的质量控制流程，确保 每个环节都有明确的操作规范和质量 要求。
去除样品中的水分或其他溶剂，以便于保存和实验分析。
保存
选择适当的容器和环境条件，确保样品在保存过程中不发生变质或成分变化。
PART 04
样品制备技术
研磨技术
研磨技术
将大块样品破碎成小颗粒，以便后续 处理和分析。
注意事项
研磨过程中应控制温度，避免样品损 失和污染。
研磨方法
包括机械研磨、气流研磨、超声波研 磨等。
保存和运输
食品样品需要妥善保存和运输，以保 持样品的原始状态和营养成分。
环境样品制备案例
环境介质
采样点选择
在环境样品制备中，需要考虑环境介质的 种类、性质和特点，如空气、水、土壤等 。
根据环境介质的分布和均匀程度，选择合 适的采样点，以确保采样的代表性和准确 性。
样品处理
《微生物采抽样要求》课件
采样点的选择
01
02
03
代表性
选择的采样点应具有代表 性，能够反映整体情况。
均匀性
在整体范围内均匀分布采 样点，避免过于集中或分 散。
可行性
考虑采样的实际操作，确 保采样点易于到达和采样 的安全性。
采样方法的选择
随机抽样
随机选择一定数量的样本 进行检测，适用于总体数 量较大、分布均匀的情况 。
系统抽样
采样工具应在使用前进行消毒处理， 以避免交叉污染和潜在的微生物传播 。
防止交叉污染的措施
采样过程中应采取严格的隔离措 施，确保不同样品之间不会发生
交叉污染。
采样人员应遵循无菌操作原则， 避免将手或其他物品接触采样区
域。
采样结束后，应对采样工具和采 样区域进行清洁和消毒，以消除
潜在的微生物污染。
采样过程中对环境的保护
在采样过程中，应采取措施减少对环境的干扰和污染。
对于需要采集的环境样本，应选择具有代表性的区域进行采样，避免对 环境造成不必要的破坏。
采样结束后，应对采样区域进行恢复和清理，确保环境得到妥善的保护 。
采样人员的卫生要求
采样人员在进行采样前应进行严格的卫 生检查，确保没有携带任何潜在的污染
物。
采样人员应遵循良好的个人卫生习惯， 如勤洗手、穿戴清洁的工作服和手套等
。
采样人员在进行采样时，应避免与样品 直接接触，以减少潜在的污染风险。
04
微生物抽样的标准与规范
国家标准与行业标准
国家标准
由国家制定并颁布的，适用于全 国范围内的微生物抽样标准，具 有法律效应。
行业标准
由相关行业协会或组织制定，适 用于特定行业的微生物抽样标准 ，具有行业指导意义。
采样样品制备和预处理课件
毒物分析 毒物分析用于检测生物样品中的有害物质或毒素。在分析过程中，需要对样品进行适当的制备和预处理， 以提取出目标毒物，进行准确的测定，为中毒事件的诊断和治疗提供依据。
05
采样样品制备和预处理的注 意事项
安全注意事 项
遵守实验室安全规定 在进行采样样品制备和预处理时，应严格遵守实验室的安 全规定，确保实验人员的人身安全。
01
在采样过程中，应保证采样的代表性，避免采样误差对实验结
果的影响。
严格控制实验条件
02
在样品制备和预处理过程中，应严格控制实验条件，如温度、
湿度、压力等，以确保实验结果的准确性和可靠性。
进行重复实验
03
为减小实验误差，应对同一样品进行重复实验，并对结果取平
均值，以提高实验结果的准确性和可靠性。
实验数据处理与分析
分离方法
根据样品的性质和目标成分离等。
纯化技术
通过一系列的纯化技术，如重结晶、 层析、离子交换等，去除样品中的 杂质，提高目标成分的纯度。
操作技巧
在分离和纯化过程中，应注意操作 技巧，避免样品损失或交叉污染。
样品浓缩与干燥
浓缩方法
注意事项
根据样品的性质和目标成分，选择合 适的浓缩方法，如蒸发、冷冻干燥、 吸附等。
在浓缩和干燥过程中，应注意防止样 品损失、变质或成分变化。
干燥技术
通过适当的干燥技术，如自然干燥、 烘箱干燥、真空干燥等，去除样品中 的水分或其他溶剂。
03
样品预处理技术
样品消解
消解目的
将样品中的目标物质溶解或转化 为可分析的形态，以便后续的检
测和分析。
消解方法
采用酸、碱、氧化剂等试剂，通 过加热、搅拌、回流等方法使样
05
采样样品制备和预处理的注 意事项
安全注意事 项
遵守实验室安全规定 在进行采样样品制备和预处理时，应严格遵守实验室的安 全规定，确保实验人员的人身安全。
01
在采样过程中，应保证采样的代表性，避免采样误差对实验结
果的影响。
严格控制实验条件
02
在样品制备和预处理过程中，应严格控制实验条件，如温度、
湿度、压力等，以确保实验结果的准确性和可靠性。
进行重复实验
03
为减小实验误差，应对同一样品进行重复实验，并对结果取平
均值，以提高实验结果的准确性和可靠性。
实验数据处理与分析
分离方法
根据样品的性质和目标成分离等。
纯化技术
通过一系列的纯化技术，如重结晶、 层析、离子交换等，去除样品中的 杂质，提高目标成分的纯度。
操作技巧
在分离和纯化过程中，应注意操作 技巧，避免样品损失或交叉污染。
样品浓缩与干燥
浓缩方法
注意事项
根据样品的性质和目标成分，选择合 适的浓缩方法，如蒸发、冷冻干燥、 吸附等。
在浓缩和干燥过程中，应注意防止样 品损失、变质或成分变化。
干燥技术
通过适当的干燥技术，如自然干燥、 烘箱干燥、真空干燥等，去除样品中 的水分或其他溶剂。
03
样品预处理技术
样品消解
消解目的
将样品中的目标物质溶解或转化 为可分析的形态，以便后续的检
测和分析。
消解方法
采用酸、碱、氧化剂等试剂，通 过加热、搅拌、回流等方法使样
微生物学采样细菌ppt课件
若≤2个样品位于m和M之间（100 cfu/g<X≤1000cfu/g）
若3个及以上样品的检验结果位于m值和M值之间
若有任一样品的检验结果大于M值（>1000cfu/g）
√
√
X
X
5
例1：婴幼儿配方粉微生物标准
CODE OF HYGIENICPRACTICE FOR POWDERED
FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN
有毒植物食物中毒：摄入含有有毒成分的植物性食物
（如毒蘑菇、菜豆等）所引起的一类急性中毒性疾病。
13
GB14938系列标准（1－13）
食源性疾病判定标准及处理总则
食源性沙门氏菌病判定标准及处理原则
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素中毒判定标准及处理原则
对怀疑化学性食物中毒应采集血液和尿液；无
剩余可疑食品时应采集相关容器、用具、抹布
等涂抹样品。
19
微生物采样方法 --采样人数
尽可能采集较多的人数：对一起发
病规模较大的食物中毒事件一般至
少应采集10-20名具有典型临床症状
的病人的检验样品，同时应采集部
分具有相同进食史但未发病者的同
类样品作为对照。
运送培养基或保存液中送检。
* 注意为保证多个检验项目的开展，同一病人应至少采集2支
肛拭。
21
微生物采样方法 --粪便
3.粪便标本应尽量在病程早期和治疗前采
若3个及以上样品的检验结果位于m值和M值之间
若有任一样品的检验结果大于M值（>1000cfu/g）
√
√
X
X
5
例1：婴幼儿配方粉微生物标准
CODE OF HYGIENICPRACTICE FOR POWDERED
FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN
有毒植物食物中毒：摄入含有有毒成分的植物性食物
（如毒蘑菇、菜豆等）所引起的一类急性中毒性疾病。
13
GB14938系列标准（1－13）
食源性疾病判定标准及处理总则
食源性沙门氏菌病判定标准及处理原则
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素中毒判定标准及处理原则
对怀疑化学性食物中毒应采集血液和尿液；无
剩余可疑食品时应采集相关容器、用具、抹布
等涂抹样品。
19
微生物采样方法 --采样人数
尽可能采集较多的人数：对一起发
病规模较大的食物中毒事件一般至
少应采集10-20名具有典型临床症状
的病人的检验样品，同时应采集部
分具有相同进食史但未发病者的同
类样品作为对照。
运送培养基或保存液中送检。
* 注意为保证多个检验项目的开展，同一病人应至少采集2支
肛拭。
21
微生物采样方法 --粪便
3.粪便标本应尽量在病程早期和治疗前采
微生物标本采集及处理PPT课件
部位） 。
婴幼儿患者：采集2次血培养标本（不同部位） 除特殊情况外，在采取血培养后的2-5天内，无需重复
采取血培养。
可疑为持续性菌血症：如心内膜炎、导管相关血流感染，
间隔(1--24h)几次取血监测、捕捉、指导治疗。
14
采血量
2019/12/1
成年患者：推荐的采血量为每套不少于10ml，
7
2019/12/1
实验室必须严格依照既定的标准操作手册并接 受法律监督。
实验室应建立技术规范，这种规范并不是狭义 地单纯为实验人员设立权限，而是建立更好的 相互交流与尊重，以及良好的协作关系。
实验室需要的标本多样，体液、组织及提取物 是外伤等微生物学常需采集的标本；而拭子一 般用于鼻、咽部和病毒性呼吸道感染标本的采 集。
常规培养可检测多数引起心内膜炎感染的病菌，但巴尔通体属和考克斯 体属常规培养多为阴性，需要血清学或分子生物学辅助诊断。 在少数培 养为阴性的感染者中，对有价值的标本进行分子生物学检测（包括16SRNA和DNA测序）有助于诊断。
11
2019/12/1 12
采集时间
2019/12/1
根据研究表明细菌通常在寒战和发烧前1小时入血
9
2019/12/1
血培养 Blood Culture
10
2019/12/1
微生物实验室的一项重要功能是诊断血液系统感染 （blood stream infections, BSIs）。大多数引起BSIs的病原菌应常规血培
养48 h检出，少数病原菌培养时间超过5 d，这些病原菌培养常需要复杂 的营养环境，如嗜血菌属、心杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属和布鲁杆菌 等。
5
2019/12/1
临床微生物实验室要获得准确的结果，须要 临床科室进行合理的标本选择和正确的标本采 集及运输；检验科应用适宜的检测方法，并进 行恰当的结果解释，为临床医生提供感染原因、 微生物病原种类和药物敏感性（药敏）结果； 同时须临床医生、护士和微生物实验室实验员 之间的密切配合。
婴幼儿患者：采集2次血培养标本（不同部位） 除特殊情况外，在采取血培养后的2-5天内，无需重复
采取血培养。
可疑为持续性菌血症：如心内膜炎、导管相关血流感染，
间隔(1--24h)几次取血监测、捕捉、指导治疗。
14
采血量
2019/12/1
成年患者：推荐的采血量为每套不少于10ml，
7
2019/12/1
实验室必须严格依照既定的标准操作手册并接 受法律监督。
实验室应建立技术规范，这种规范并不是狭义 地单纯为实验人员设立权限，而是建立更好的 相互交流与尊重，以及良好的协作关系。
实验室需要的标本多样，体液、组织及提取物 是外伤等微生物学常需采集的标本；而拭子一 般用于鼻、咽部和病毒性呼吸道感染标本的采 集。
常规培养可检测多数引起心内膜炎感染的病菌，但巴尔通体属和考克斯 体属常规培养多为阴性，需要血清学或分子生物学辅助诊断。 在少数培 养为阴性的感染者中，对有价值的标本进行分子生物学检测（包括16SRNA和DNA测序）有助于诊断。
11
2019/12/1 12
采集时间
2019/12/1
根据研究表明细菌通常在寒战和发烧前1小时入血
9
2019/12/1
血培养 Blood Culture
10
2019/12/1
微生物实验室的一项重要功能是诊断血液系统感染 （blood stream infections, BSIs）。大多数引起BSIs的病原菌应常规血培
养48 h检出，少数病原菌培养时间超过5 d，这些病原菌培养常需要复杂 的营养环境，如嗜血菌属、心杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属和布鲁杆菌 等。
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2019/12/1
临床微生物实验室要获得准确的结果，须要 临床科室进行合理的标本选择和正确的标本采 集及运输；检验科应用适宜的检测方法，并进 行恰当的结果解释，为临床医生提供感染原因、 微生物病原种类和药物敏感性（药敏）结果； 同时须临床医生、护士和微生物实验室实验员 之间的密切配合。
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5．操作过程注意事项
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(4) 使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而 必须用洗耳球操作。不能向含有感染性物质的溶 液中吹人气体。
(5) 观察平板时不要开盖，如欲蘸取菌落检查时， 必须靠近火焰区操作，平皿盖也不能大开，而是 上下盖适当开缝。
(一) 无菌操作要求
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1. 接种时必须穿工作服、戴工作帽。 2．进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、 帽及拖鞋，它们应放在无菌室缓冲间，工作前经 紫外线消毒后使用。应在进无菌室前用肥皂洗手， 然后用75％酒精棉球将手擦干净。
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(5) 无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部 位(待检物例外)，然后打开紫外灯杀菌30min，时 间一到，关闭紫外灯待用。
(6) 进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的 工作服、工作帽及工作鞋。 (7)操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中 少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。
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5．操作过程注意事项
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(6) 进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹 持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染， 用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再 洗涤。
(7) 工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，最 后用消毒液(含有1％有效氯的溶液或3％过氧化氢 的溶液）也可擦拭工作台。
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5．在无菌室内如需要安装空调时，则应有过滤 装置。
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(四) 有毒有害菌污染物处理要求
(2) 室内检验用具及桌凳等位置保持固定，不随 便移动。 (3) 每2～3周用2％石炭酸水溶液擦拭工作台、门、 窗、桌、椅及地面，然后用甲醛加热或喷雾灭菌， 最后紫外灯杀菌0.5 h。
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无菌室的使用与管理
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(1) 无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放最必需 的检验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种 针、接种环、玻璃铅笔等。
无菌室的使用与管理
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(二) 无菌室使用要求
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3．无菌室使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如 采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯距离 在1.0 m处，照射时间、不少于30 min，使用紫外 灯，应注意不得直接在紫外线下操作'以免引起损 伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去 上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。 4．处理和接种食品标本时，进入无菌室操作， 不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传 递。
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(3) 操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工 作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。在所有可能产 生潜在感染性物质喷溅的操作过程中，操作人员 应将面部、口和眼遮住或采取其他防护措施。
(4) 进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行 检验操作。
1)无菌室、超净工作台应设在较洁净的环境内， 附近无污染源。
无菌室基本要求
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(2) 室内六面应光滑平整、无缝隙，不起灰、 不落尘，耐腐蚀、易清洗。墙与地面、墙壁之 间相接处应有一定弧度，不留死角。室内门窗 结构应密合，并尽量减少活动窗口面积。
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食品检验
食品检验
微生物实验室要求及样品制备
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微生物检查验中的采样与样品制备
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(一) 无菌操作要求
5 ．接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作， 接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开 试管塞都要通过火焰消毒。
6． 接种环和接种针在接种细菌前应经火焰烧灼 全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接 处。 7 ．吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮 头吸取，不得直接用口吸。
(一) 无菌操作要求
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3．进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经 消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置 后再使用，金属用具应高压灭菌或用95％酒精点 燃烧灼3次后使用。 4．从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外 露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖 不得触及试管或平皿边。
温控设备(培养箱、冰箱、冰冻机、烤箱)、 测量器具(温度计、计时器、天平、酸度计、菌落计数器 等 )、 定容设备(吸管、自动分液器、微量移液器等)、
除菌和灭菌设备(超净工作台或生物安全柜、高压灭菌锅)、 其他设备(显微镜、离心机、均质器等)。
无菌室基本要求
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无菌室基本要求
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(3) 无菌室外应设缓冲间，其结构同无菌室，做进 入无菌室之前的更衣戴帽等准备工作。
无菌室基本要求
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5．操作过程注意事项
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(1) 动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污 染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。 为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散，在 工作台面应当放置一块浸有消毒液的布或吸有消 毒液的纸，使用后将其按感染性废弃物处理。
提出微生物检验 中的采样与样品制 备项目任务设想， 分发学习任务
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第二节 微生物检查验中的采样与样品制备
范围
本标准规定了食品微生 物学检验基本原则和要求。 本标准适用于食品微生 物学检验。
(2) 火焰灭菌 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
器材及场所的灭菌消毒
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(3) 高温干燥灭菌 各种玻璃器皿、注射器、吸管 等，置于干燥箱中160℃灭菌，2 h。
(4) 一般消毒 无菌室内的凳、工作台、试管架、天 平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其 他方法进行消毒处理，采用2％石炭酸或来苏尔水 溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。 (5) 空气的消毒 开启紫外灯照射30~60min即可。
(一) 无菌操作要求
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食品微生物检验室工作人员，必须有严格的无菌 观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原 因一是防止试验操作中人为污染样品；二是保证 工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当 造成个人污染。
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4．准备工作操作要领
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(1) 先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯 30~60min。
(2) 检验用的有关器材，搬入无菌室前必须分别 灭菌消毒。
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4．准备工作操作要领
(2) 操作应在近火焰区进行。
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5．操作过程注意事项
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(3) 接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼 烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭 菌。为了避免被接种物洒落，微生物接种环的直 径应为2～3 mm并完全封闭，柄长度应小于6 cm 以减小抖动。使用封闭式微型电加热器消毒接种 环，能够避免在明火上加热所引起的感染性物质 爆溅。最好使用不需要再进行消毒的一次性接种 环。