木犀草素对活化T细胞NF-κB P65及IκBa的调节作用

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木犀草素对缺血再灌注损伤作用机制的研究进展

木犀草素对缺血再灌注损伤作用机制的研究进展

木犀草素对缺血再灌注损伤作用机制的研究进展木犀草素最初是从中药药材木犀草中得到的,是一种天然黄酮类化合物,存在于多种水果蔬菜中。

近几年研究发现,木犀草素具有抗肿瘤、抗凋亡、抗炎、抗病毒等药理作用。

本文主要就木犀草素对缺血再灌注损伤作用机制的最新研究进展进行综述。

黄酮类化合物是一类羟基衍生物,多为黄色。

由于黄酮类化合物具有大π键和超离域度,因此其氧原子配位程度较强并容易形成配位络合物。

木犀草素是一种天然黄酮类化合物,常以糖苷类形式大量存在于水果植物中。

可在胡萝卜、白毛夏枯草、茶等植物中找到[1]。

木犀草素具有多种药理活性,近几年研究发现木犀草素具有抗炎、抗凋亡、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用[2-7]。

缺血引起的组织损伤是很多疾病致死的主要原因,相关疾病主要有心肌梗死、脑梗死等。

人们普遍认缺血组织恢复血供后会减弱梗阻所带来的损伤,但研究发现,在缺血性疾病的治疗过程中,很多严重的组织损伤却是由恢复血供引起的。

而在组织或器官缺血后,重新恢复血供后缺血组织或器官没有恢复其原有功能,反而使得损伤加重,导致组织或器官发生更为严重的损伤甚至恶化,这种现象称为缺血再灌注损伤[8]。

缺血再灌注损伤与许多机制相关,目前认为主要与氧化应激、凋亡、炎症反应、钙超载等相关。

1 抗炎炎症是活体组织对损伤因子发生的防御反应,炎症反应是炎症对机体局部组织损伤所呈现的反应,同时也是缺血再灌注损伤的主要诱因之一。

木犀草素的抗炎作用表现在其能减少促炎细胞因子和炎症介质的产生[9-11],其中主要包括TNF-α、IL-6、IL-1β。

TNF-α由巨噬细胞分泌,可以促进炎症因子的释放。

IL-6是一种多效细胞因子,与感染、损伤、创伤和其他压力有关。

IL-1β可以促进B 和T细胞活化,调节TNF-α生成,诱导其他炎症因子产生[12]。

核转录因子(NF-κB )是一种转录调节因子,可以促进TNF-α、白介素等多种细胞因子表达并与AP-1联合作用调节炎症反应。

木犀草素生物活性研究进展

木犀草素生物活性研究进展

参考文献: Eli张芳芳,沈汉明,朱心强.木犀草索抗肿瘤作用的研究进展[J].浙
江大学学报(医学版),2006,35(5):573~578.
[2]蔡良真.木犀草素对人白血病HI,60细胞内蛋[J激酶c的抑制作
用口].右江医学,2005,33(2):106~108.
[3]肖大凯,晕燕梅,莫丽儿,等.木犀草素对卵巢癌细胞株转移能力 的影响[J].中国病理牛理杂志,2006,22(6):1199~1202.
Hz 02损伤模型,观察不同浓度木犀草素(1×10一、3×10一、
1×10_5mol/L)对乳酸脱氢酶(LDH)活力、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响。与正常组比较,模 型组细胞LDH活性及MDA含鼍升高,S()D活性下降 (P<O.01);与模型组比较,不问浓度的木犀草素可以降低细 胞I.DH活性及MDA含量,增加SOD活性,以上实验结果均 表明木犀草素对H。Q诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作 用。牟艳玲等[6]通过实验说明木犀草苷能明显提高Hz()2损 伤细胞存活率,提高细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低 丙二醛(MDA)和细胞内活性氧(R()s)牛成量,同时使细胞内 钙含量降低。说明木犀草苷对Hz()2氧化损伤心肌细胞具有 明最的保护作用,机制可能与其提高自由基清除酶活性、保护 心肌细胞膜的完整性、有效维持抗氧化防御机制与自由基之 间的平衡、减少胞内钙超载有关。闫庆峰等L7J观察术犀草素 对实验性高脂血症大鼠血脂代谢的影响及抗氧化作用。结果 木犀草素能明显降低高脂血症大鼠血清中胆同醇(TC)、甘油 _三fl自(TG)、低密度脂蛋白胆同醇(LDL-C)和血清脂质过氧化 物(MDA)的水平,升高高密度脂蛋白胆I占I醇(HDL-C),使动 脉硬化指数(A1)降低。说明其可能通过增加高脂血症大鼠外 周组织细胞中的胆固醇向肝脏转运过程,以减少胆固醇在外 周组织细胞中的聚集和对血管内皮细胞的广泛性损害,防止 动脉粥样硬化形成。实验通过灌胃发现木犀草素可显著抑制 高脂血症大鼠的MDA升高及提高血清超氧化物歧化酶 (SOD)和谷光甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性,表明木犀草素 可保护高脂血症时机体内抗氧化物酶类活性.使多种组织存 在的自由基代谢紊乱情况得以纠正,从而维持机体氧化及抗

木犀草素的抗胶质母细胞瘤作用及其机制研究

木犀草素的抗胶质母细胞瘤作用及其机制研究

木犀草素的抗胶质母细胞瘤作用及其机制研究胶质母细胞瘤是颅内肿瘤中最常见且恶性程度最高的恶性肿瘤,由于肿瘤高度增殖、侵袭以及对放化疗的耐受性,患者即使接受最积极的治疗手段,患者依然要面临手术疗效差、术后极易复发、生存期短的境地。

因此,亟需我们开发新的治疗药物,寻找有效的治疗方法。

木犀草素是一种天然黄酮类化合物,有文献报道其在体外、体内都有明确的抗肿瘤作用。

研究表明,肺癌中木犀草素是Nrf2的有效的和选择性抑制剂,能有效抑制肺癌裸鼠种植瘤的生长并提高化疗药物的敏感性。

胰岛素样生长因子(IGF-1)在多种恶性肿瘤组织中高表达,其介导的信号通路参与了肿瘤细胞凋亡调控。

PI3K/AKT/mTOR信号通路的过度活化在肿瘤的发生发展过程中具有十分重要的作用,与肿瘤细胞的恶性生物学行为侵袭/迁移、凋亡和耐药等有着密不可分的关系。

内质网应激反应是细胞应对外界刺激的一种保护性反应,但是研究表明长时间持续的内质网应激反应会诱导细胞发生凋亡。

因此,本研究以胶质母细胞瘤细胞系U251MG和U87MG为体外模型,裸鼠皮下种植瘤为体内模型,详细研究木犀草素的抗胶质母细胞瘤作用,其对胶质母细胞瘤侵袭/迁移、凋亡的影响,以及对胶质母细胞瘤替莫唑胺耐药细胞的作用,并研究IGF-1R/PI3K/AKT/mTOR通路以及药物所引发的肿瘤细胞的内质网应激反应在这些过程中的作用。

本课题共分为以下五个研究部分:第一部分木犀草素对胶质母细胞瘤细胞迁移的作用目的:研究木犀草素能否抑制胶质母细胞瘤细胞的迁移。

方法:体外培养胶质母细胞瘤细胞系U251MG和U87MG,接种于96孔,利用CCK-8进行细胞增殖实验,将不同浓度梯度0,5,10,20,40,80μmol/L的木犀草素处理细胞24h后用CCK-8检测增殖,确定药物的给药浓度和时间(0,5,10,20μmol/L,24h)。

之后再检测对U251MG和U87MG迁移的影响;利用western blot检测侵袭和迁移相关蛋白MMP-9,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2的变化;利用 westernblot 检测EMT 相关蛋白 Vimentin,β-catenin,N-cadherin 和 E-cadherin水平变化;利用罗丹明标记的鬼笔环肽染色细胞骨架蛋白,检测木犀草素对细胞形态和迁移表型的影响。

木犀草素含药血清对高糖诱导肾小球系膜细胞AMPKSIRT-1PGC-1α信号通路及凋亡的影响

木犀草素含药血清对高糖诱导肾小球系膜细胞AMPKSIRT-1PGC-1α信号通路及凋亡的影响

木犀草素含药血清对高糖诱导肾小球系膜细胞AMPK/SIRT-1/PGC-la信号通路及凋亡的影响王超超,姜益,赵润英(温州市中西医结合医院肾内科•浙江温州325000)摘要目的:探讨木犀草素(Luteolin)含药血清对高糖诱导下肾小球系膜细胞(GMCs)凋亡及单磷酸腺昔活■化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子l(SIRTl)/过氧化物酶增殖物激活受体y共激活■因子la(PGC-la)信号通路的影响。

方法:将健康SPF级SD雄性大鼠分为正常组、Luteolin低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)剂量组、罗格列酮阳性组(0.36mg/kg),每组10只,均灌胃给予相应剂量药物,1次/d,连续7d后,经腹主动脉取血制备含药血清。

取SV40MES13型小鼠GMCs将其分为正常组、高糖模型组、Luteolin含药血清低、中、高剂量组、阳性含药血清组,各组细胞按相应剂量药物处理并培养24h后,采用四甲基偶氮座蓝(MTT)法及流式细胞仪检测各组GMCs存活率及凋亡率;以蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组细胞通路蛋白AMPK/SIRT-1/PGC-la及凋亡相关蛋白脂肪酸合酶(Fas)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达。

结果:与正常组相比,模型组GMCs细胞密度、胞质微丝样结构、胞核颗粒沉积等HE染色病理形态、存活率、Bcl-2蛋白表达均升高(P<0.05),凋亡率、pAMPK/AMPK、SIRT-1、PGC-la,Fas蛋白表达均降低(P<0.05)。

与模型组相比,Luteolin含药血清低、中、高剂量组及阳性对照组细胞密度、胞质微丝样结构、胞核颗粒沉积等HE染色病理形态、存活率、Bcl-2蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、pAMPK/AMPK、SIRT-1、PGC-la,Fas蛋白表达均升高(P<0.05),且Luteolin各剂量组呈剂量依赖性。

nf-κb p65 分子量

nf-κb p65 分子量

nf-κb p65 分子量NF-κB(核因子κB)是影响巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞活性的一个蛋白质家族。

NF-κB家族的成员包括p65,p50,p52,RelB和c-Rel等,其中p65是最为广泛研究的分子。

NF-κB p65是一种转录因子,其分子量约为65kDa,由Rel家族蛋白和DNA结合而形成核因子。

它能够从细胞质转移到核内,调控多种基因的表达,如炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-6等)和凋亡相关基因(Bcl-2、Bcl-xL等)。

NF-κB p65的激活机制包括经典通路和非经典通路。

在经典通路中,其入口是IKK复合体(IKKα、IKKβ和IKKγ),而在非经典通路中,其入口是NIK和IKKα。

当受到某种外源性或内源性刺激,如生物毒素、氧化应激和细胞因子等,会引起IKK复合体通过磷酸化、泛素化和降解IkB蛋白,从而使p65能够释放并进入核内。

NF-κB p65具有多种生物学功能,如免疫调节、增殖调节、细胞生存、基因转录等。

在免疫调节方面,NF-κB p65能够诱导免疫细胞的分化、成熟和活化,并促进炎症反应、抗菌、抗病毒等免疫防御作用。

在增殖调节方面,NF-κB p65通过调控细胞凋亡和细胞周期,维持细胞增殖和组织再生的平衡。

在细胞生存方面,NF-κB p65能够保护细胞免受环境应激和恶性转化的影响,使其能够存活下去。

在基因转录方面,NF-κB p65能够调控多种溶血性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病等的基因表达,从而影响细胞功能与命运。

由于NF-κB p65在炎症、免疫和肿瘤等疾病中发挥着重要作用,研究其调控机制、功能调控及其抑制剂等已成为重要的研究领域。

同时,在药物开发和治疗方面,NF-κB p65也成为一个重要的靶点,有着广泛的临床应用前景。

木犀草素的功效与作用

木犀草素的功效与作用

木犀草素的功效与作用【简介】木犀草素(luteolin)是一种天然黄酮类化合物,存在于多种植物中。

具有多种药理活性,如消炎、抗过敏、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗高尿酸等,临床主要用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管疾病、治疗高尿酸血症、治疗“肌萎缩性脊髓侧索硬化症”,SARS,肝炎等。

【特征】木犀草素在自然界中分布广泛,因最初是从木犀草科(Resedaceae)木犀草属草本植物木犀草(ResedaodorataL.)的叶、茎、枝中分离出而得名,可从多种天然药材、蔬菜果实中分离得到。

目前发现主要存在于金银花、菊花、荆芥、白毛夏枯草、洋蓟、紫苏属、黄芩属、裸花紫珠[1]等天然药材中,以及芽甘蓝、洋白菜、菜花、甜菜、椰菜、胡萝卜、芹菜、甜椒、辣椒、落花生等蔬菜果实中,其它如橄榄油和红酒等植物产品以及野凤仙花、鼠曲草、百里香草、唇形科植物全叶青兰草、筋骨草等也含有木犀草素。

【作用与功效】木犀草素,多以糖苷的形式存在于多种植物中,这些植物以全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏含量较高。

具有镇咳和祛痰作用。

据最新研究,呼吸道症状咳嗽、咳痰、喘息,均与气道慢性炎症有关。

如支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、慢性咽炎、变应性鼻炎等引起咳嗽、咳痰、喘息,均被认为与局部的炎症浸润有关,炎症的存在,使得气道的免疫应答混乱,患者常出现气道反应性增高。

治疗的手段首先应该消除气道的慢性炎症浸润。

目前常用糖皮质激素,以消除气道炎症。

但糖皮质激素的副作用较多,不宜长期应用。

研究表明,木犀草素抑制巨噬细胞磷酸化,抑制转录因子NF-kB的活性,能够抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞产生细胞因子IL-6,TNF-a。

后两种细胞因子在炎症机制中扮演非常重要的角色,是反映炎症程度的敏感指标。

木犀草素还能提高IFN-γ,降低特异性Ig-E,减少嗜酸性粒细胞的浸润。

另外,木犀草素除了抗炎、抗过敏作用以外,还具有抑制PDE、抗SARS、HIV病毒特性,其原因为抑制SARS病毒前S蛋白的活性,从而阻止其进入宿主细胞。

木犀草素通过抑制PTEN PI3K-AKT信号通路以及对免疫功能的调节作用介

木犀草素通过抑制PTEN PI3K-AKT信号通路以及对免疫功能的调节作用介
Z H O U L i a n g , Q I A O Y i n — l i n g , WA N G L i , Z HU L e i ’ , Z H A N G J i a n . y o n g
D e p a r t m e n t o f R e s p i r a t o r y Me d i c i n e , A il f i a t e d H o s p i t a l f o Z u n y i Me d i c a l C o l l e g e ; 2 D e p a r t m e n t f o G y n e c o l o g y , G u i z h o u A e r o s p a c e H o s p i t a l , Z u n y i 5 6 3 0 0 0 , C h i n a
mo d e l r a t s . T h e r a t s we r e g i v e n d i s p o s a b l e i n f u s i o n o f c a r c i n o g e n i c i o d i z e d 0 i l v i a l e f t l o b e b r o n c h u s t o i n d u c e l u n g c a n e — e r mo d e 1 . T h e r a t s we r e t r e a t e d w i t h h i g h, me d i u m a n d l o w d o s e o f l u t e o l i n a n d c y c l o p h o s p h a mi d e r e s p e c t i v e l y f o r 1 6
A bs t r a c t: To i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t o f l ut e o l i n o n P TEN— PI 3 K— AKT s i g n a l p a t h wa y a n d i m mu ne f un c t i o n i n l un g c a nc e r

木犀草素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的修复作用及机制

木犀草素对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的修复作用及机制

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脑与神经疾病杂志 2019 年第 27 卷第 9 期
细胞内 ROS 水平。将制备的单细胞悬液 0.01M PBS 洗 涤 2 次 后 重 悬 于 10μM DCFH-DA 中,37 ℃ 避 光 孵育 60min。每样本经流式细胞仪检测 10000 个细胞, 实验重复 2 次。 6. 脊髓组织 ΔΨm 测定
【关键词】 脊髓缺血再灌注损伤;木犀草素;线粒体;细胞色素 c 中图分类号:R446.1 文献标识码:A 文章编号:1006-351X(2019)09-0552-05
Protection of luteolin on spinal cord ischemia-reperfusion injury in rats Fu Jian, Xu wei, Wei Haofei, Dong Mingjie,Wang Chuan,Chen Congtao,Wang Xiaohuan. Department of Emergency Surgery, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, China Corresponding author: Fu Jian, Email: fjbaoding@
【Key words】 Spinal cord ischemia-reperfusion injury; Luteolin; Mitochondria; Cytochrome c
脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemiareperfusion injury,SCII)常继发于脊柱矫形术或胸腹 主动脉瘤手术创伤后,临床中可呈现不同的表现, 轻则相应肢体的感觉障碍、二便失禁,重则导致瘫 痪,甚至危及生命。已知线粒体为机体组织中最重 要的细胞器之一 , 当组织缺血后极易影响细胞内正常 的生物反应 , 加上血流再灌注的进一步损伤,无疑会 干扰线粒体功能,引起一系列变化, 如活性氧(reactive oxygen species,ROS)增加 , 细胞膜通透性增高 , 同时

木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用

木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用

㊃基础研究㊃木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用刘方圆,樊迪,杨政,唐其柱摘要:目的 探讨木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用㊂方法 选择C 57B L /6J 成年雄性小鼠54只,随机分为假手术组(6只)㊁模型组(16只)㊁联合低剂量组(木犀草素5m g /k g,16只)㊁联合高剂量组(木犀草素20m g /k g ,16只)㊂R T -P C R 检测心肌细胞T N F -α㊁白细胞介素1β(I L -1β)和白细胞介素6(I L -6)m R N A 表达,T U N E L 染色检测心肌细胞凋亡,免疫印迹检测信号通路c -J u n 氨基末端激酶(J N K )㊂结果 与假手术组比较,模型组生存率明显降低(P <0.05)㊂与模型组比较,联合高剂量组生存率明显升高(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组T N F -α㊁I L -1β㊁I L -6m R N A 和磷酸化P 65蛋白相对表达明显降低(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组T N F -α㊁I L -1β㊁I L -6m R N A 和磷酸化P 65蛋白相对表达明显降低(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组细胞凋亡明显下调(19.17ʃ3.06㊁14.67ʃ2.34v s 23.33ʃ4.80,P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组细胞凋亡明显下调(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组磷酸化P 38和磷酸化J N K 明显降低(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组磷酸化P 38和磷酸化J N K 明显降低(P <0.05)㊂结论 木犀草素通过丝裂原活化蛋白激酶/N F -κB 通路保护心肌细胞缺血损伤㊂关键词:木犀草素;心肌梗死;心肌缺血;细胞凋亡;炎症R o l e o f l u t e o l i n i n p r o t e c t i n g m i c e a g a i n s t c a r d i o m y o c c yt e i s c h e m i c i n j u r y a f t e r a c u t e m yo c a r d i a l i n f a r c t i o n L i u F a n g y u a n ,F a n D i ,Y a n g Z h e n g ,T a n g Qi z h u (D e p a r t m e n t o f C a r d i o l o g y ,W u h a n U n i v e r s i t y P e o p l e s H o s p i t a l ;W u h a n U n i v e r s i t y I n s t i t u t e o f Ca r d i o v a s c u l a r D i s e a s e s ;H ub e i K e y L a b o r a t o r y o f Ca r d i o v a s c u l a r D i s e a s e s ,W u h a n 430060,H ub e i P r o v i nc e ,C h i n a )A b s t r a c t :O b je c t i v e T o s t u y d t h e r o l e of l u t e o l i n i n p r o t e c t i ng m i c e a g a i n s t c a r d i o m y o c y t e i s ch e -mi c i nj u r y a f t e r AM I .M e t h o d s F i f t y -f o u r a d u l t m a l e C 57B L /6J m i c e w e r e r a n d o m l y di v i d e d i n t o s h a m o p e r a t i o n g r o u p (n =6),m o d e l g r o u p (n =16),l o w -d o s e g r o u p (l u t e o l i n 5m g /k g,n =16),h i g h -d o s e g r o u p (l u t e o l i n 20m g /k g ,n =16).E x p r e s s i o n s o f T N F -α,I L -1βa n d I L -6m R N A i n c a r -d i o m y o c y t e s w e r e d e t e c t e db y R T -P C R ,a p o p t o s i s o fc a rd i o m y o c y te w a s a s s a ye d w i t h T U N E L s t a i n i n g .A l t e r a t i o n of c -J u n w a s d e t e c t e d b y W e s t e r n b l o t .R e s u l t s T h e s u r v i v a l r a t e w a s s i gn i f i -c a n t l y l o w e r i n m o d e l g r o u p t h a n i n s h a m o p e r a t i o n g r o u p a n d w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r i n h i gh -d o s e g r o u p t h a n i n m o d e l g r o u p (P <0.05).T h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f T N F -α,I L -1βa n d I L -6m R N A a n d p h o s p h o r y l a t e d P 65p r o t e i n w e r e s i g n i f i c a n t l y l o w e r i n l o w -d o s e g r o u p a n d h i gh -d o s e g r o u p t h a n i n m o d e l g r o u p a n d i n h i g h -d o s e g r o u p t h a n i n l o w -d o s e g r o u p (P <0.05).T h e a p o p-t o s i s r a t e o f c a r d i o m y o c y t e s w a s s i g n i f i c a n t l y l o w e r i n l o w -d o s e g r o u p a n d h i g h -d o s e g r o u p th a n i n m o d e l g r o u p (19.17ʃ3.06,14.67ʃ2.34v s 23.33ʃ4.80,P <0.05).T h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f p h o s p h o r y l a t e d P 38a n d J N K w e r e s i g n i f i c a n t l y l o w e r i n l o w -d o s e g r o u p a n d h i g h -d o s e g r o u pt h a n i n m o d e l g r o u p a n d i n h i g h -d o s e g r o u p t h a n i n l o w -d o s e g r o u p (P <0.05).C o n c l u s i o n L u t e o l i n c a n p r o t e c t m i c e a g a i n s t c a r d i a m y o c y t e i s c h e m i c i n j u r y t h r o u g h t h e MA P K /N F -κB p a t h w a y.K e y wo r d s :L U T E O L I N ;m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n ;m y o c a r d i a l i s c h e m i a ;a p o p t o s i s ;i n f l a mm a t i o n D O I :10.3969/j.i s s n .1009-0126.2019.04.019基金项目:国家自然科学基金(81470516,81530012)作者单位:430060武汉大学人民医院心血管内科武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室通信作者:唐其柱,E m a i l :q z t a n g@w h u .e d u .c n ㊃114㊃中华老年心脑血管病杂志2019年4月第21卷第4期 C h i n J G e r i a t r H e a r t B r a i n V e s s e l D i s ,A pr 2019,V o l 21,N o .4心肌梗死是由冠状动脉血供和心肌需求严重失衡引起的急性心肌坏死㊂在急性心肌梗死中,冠状动脉血流减少,导致心肌缺血缺氧,心肌结构受损,心肌细胞收缩力降低,心脏泵功能降低[1]㊂许多因素如炎症㊁氧化应激和细胞凋亡都与心肌缺血性损伤有关㊂急性心肌梗死预后极差,随着年龄增长发生,心力衰竭引起的心肌梗死患者比例增加㊂因此针对炎症和凋亡等分子机制在急性心肌缺血发生后改善心肌功能㊁降低心血管事件发生率㊁限制梗死总范围是开发心血管保护剂的必要条件㊂木犀草素是一种广泛分布的类黄酮,具有心血管保护作用的天然多酚类化合物,存在于许多水果㊁蔬菜和中草药中㊂研究表明,木犀草素具有许多生物学和药理学活性,如抗炎和抗氧化,在膳食中添加木犀草素可以预防心血管疾病[2-4]㊂木犀草素可能是预防和治疗心血管疾病的潜在候选者㊂然而,木犀草素在小鼠急性心肌梗死中的保护作用机制尚未完全阐明㊂本研究采用经典冠状动脉左前降支结扎模型探讨木犀草素对小鼠急性心肌梗死的保护作用㊂1材料与方法1.1试剂和设备木犀草素(上海融禾公司,批号180523),纯度>98%㊂本实验一抗:甘油醛-3-磷酸脱氢酶(G A P D H)抗体㊁磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶抗体以及总P38丝裂原活化蛋白激酶抗体, c-J u n氨基末端激酶(J N K)抗体和磷酸化J N K抗体,B a x抗体,B c l-2抗体,B c l-x l抗体均购于C S T公司㊂免疫印迹荧光标记羊抗兔二抗I R d y e@800 C W I g G购买于L I-C O R公司;凝胶电泳系统(北京六一仪器厂);凝胶电泳转移系统(B I O-R A D);聚偏二氟乙烯膜(美国M i l l i p o r e);化学发光蛋白检测显影液(美国B o r a d);T R I z o l试剂盒(I n v i t r o g e n, 15596-026);反转录试剂盒(R o c h e,04896866001); L i g h t C y c l e r480S Y B R G r e e n荧光定量P C R仪(罗氏公司);T U N E L试剂盒(M i l l i p o r e公司,S7111);荧光显微镜(O L YM P U S D X51)㊂1.2动物和实验模型1.2.1实验动物分组选择C57B L/6J成年雄性小鼠54只,月龄8~10周,体质量23.5~27.5g,购于中国医学科学院实验动物研究所;无特定病原体级㊂所有操作遵循武汉大学人民医院动物护理和使用委员会批准㊂各组手术过程和实验数据分析均为单盲㊂实验动物购回后,适应环境1周,随机分为假手术组(6只)㊁模型组(冠状动脉结扎术,16只)㊁联合低剂量组(冠状动脉结扎术+木犀草素5m g/k g,16只)㊁联合高剂量组(冠状动脉结扎术+木犀草素20m g/k g,16只)㊂1.2.2 小鼠心肌梗死模型建立通过腹膜注射3%戊巴比妥钠麻醉小鼠㊂在加热垫上进行经口气管插管,使用啮齿动物呼吸机(S o m n o s u i t e模型; K e n t科技有限公司,U S A,C T,托灵顿)进行辅助呼吸㊂左侧第4肋间入胸,识别左前降支走行范围, 7-0滑线结扎左前降支,当左心室前壁部分颜色转为苍白,确认小鼠心肌梗死模型成功后一直维持血管结扎,假手术组左前降支无结扎,其他3组结扎位置基本相同㊂联合低剂量组和联合高剂量组于造模成功第2天开始以不同剂量进行腹腔注射给药,直至14d㊂1.3T U N E L染色检测细胞凋亡采用T U N E L 试剂盒进行染色,荧光显微镜下可观察到与蓝色细胞核重叠的绿色荧光,此为凋亡细胞㊂I m a g e-P r o P l u s6.0软件进行图像处理与分析㊂根据公式计算凋亡指数㊂1.4蛋白免疫印迹法各组心脏组织溶于裂解缓冲液中,采用B C A法测量蛋白浓度㊂组织裂解产物使用10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,转移到聚偏二氟乙烯膜上,5%脱脂牛奶封闭1h㊂孵育一抗4ħ过夜㊂37ħ孵育二抗40m i n,化学发光蛋白检测试剂盒进行显影㊂使用I m a g e J软件(美国)对蛋白表达水平进行定量,G A P D H作为内参蛋白,磷酸化蛋白以相应的总蛋白进行量化㊂1.5R T-P C R从心脏组织和培养的细胞中提取总m R N A,分光光度计检测R N A浓度和纯度,严格按照试剂盒说明书反转录c D N A㊂L i g h t C y c l e r 480S Y B R G r e e n I M a s t e r用于上机检测细胞促炎性因子T N F-α㊁白细胞介素1β(I L-1β)和白细胞介素6 (I L-6)m R N A表达水平,以G A P D H作为内参基因,将结果与G A P D H基因的表达进行比较,计算各组相较于假手术组的相对表达量㊂1.6统计学方法采用S P S S23.0统计软件,计量资料以 xʃs表示,符合正态分布,多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用L S D-t检验,生存率采用l o g-r a n k(M a n t e l-C o x)检验,P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1各组小鼠急性心肌梗死术后生存率比较54只实验小鼠在2周内有21只死亡,其中假手术组0只,模型组10只,联合低剂量组7只,联合高剂量组4只,死亡原因未查,最终存活小鼠共33只㊂模型㊃214㊃中华老年心脑血管病杂志2019年4月第21卷第4期 C h i n J G e r i a t r H e a r t B r a i n V e s s e l D i s,A p r2019,V o l21,N o.4组小鼠术后食欲减退,皮毛光泽度下降,活跃度明显降低㊂联合低剂量组和联合高剂量组小鼠用药后一般情况较模型组相对活跃㊂假手术组小鼠活动㊁饮食基本正常㊂各组小鼠无手术区域出现明显感染破溃㊂与假手术比较,模型组生存率明显降低,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与模型组比较,联合高剂量组生存率明显升高(P <0.05,图1)㊂ 注:=假手术组;=联合高剂量组;=联合低剂量组;=模型组;与假手术组比较,a P <0.05;与模型组比较,bP <0.05图1 各组小鼠急性心肌梗死术后生存率比较2.2 各组细胞促炎性因子和磷酸化P 65蛋白相对表达比较 与假手术比较,模型组㊁联合低剂量组和联合高剂量组T N F -α㊁I L -1β㊁I L -6m R N A 和磷酸化P 65蛋白相对表达明显增加,差异有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组T N F -α㊁I L -1β㊁I L -6m R N A 和磷酸化P 65蛋白相对表达明显降低(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组T N F -α㊁I L -1β㊁I L -6m R N A 和磷酸化P 65蛋白相对表达明显降低,差异有统计学意义(P <0.05,图2,表1)㊂1:假手术组;2:模型组;3:联合低剂量组;4:联合高剂量组图2 各组P 65蛋白表达印迹表1 各组细胞促炎性因子和磷酸化P 65蛋白相对表达比较( x ʃs ,n =6)组别T N F -αm R N AI L -1βm R N AI L -6m R N A磷酸化P 65蛋白假手术组1.00ʃ0.111.00ʃ0.061.00ʃ0.060.08ʃ0.01模型组4.26ʃ0.28a4.44ʃ0.74a13.95ʃ0.79a0.36ʃ0.04a联合低剂 量组3.49ʃ0.27b 3.39ʃ0.52b 9.61ʃ1.37b 0.23ʃ0.04b联合高剂 量组1.97ʃ0.72b c2.07ʃ0.35b c 5.40ʃ0.97b c 0.13ʃ0.03b c注:与假手术组比较,a P <0.05;与模型组比较,bP <0.05;与联合低剂量组比较,cP <0.052.3 各组急性心肌梗死诱导的心肌细胞凋亡比较与假手术组比较,模型组细胞凋亡明显上调,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组小鼠细胞凋亡明显下调,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组小鼠凋亡细胞明显下调,差异有统计学意义(P <0.05,图3~7)㊂ 图3 假手术组 图4 模型组 图5 联合低剂量组 图6 联合高剂量组 图3~6 各组急性心肌梗死诱导的心肌细胞凋亡T U N E L 染色 ˑ20注:与假手术组比较,a P <0.05;与模型组比较,bP <0.05;与联合低剂量组比较,cP <0.05图7 各组凋亡指数比较2.4 各组凋亡相关蛋白相对表达量的比较 与假手术组比较,模型组B a x 明显增加,B c l -2㊁B c l -x l ㊁B c l -2/B a x ㊁B c l -x l /B a x 明显降低,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组B a x 明显降低,B c l -2㊁B c l -x l ㊁B c l -2/B a x ㊁B c l -x l /B a x 明显升高,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组B a x明显降低,B c l -2㊁B c l -x l ㊁B c l -2/B a x ㊁B c l -x l /B a x 明显升高(0.08ʃ0.01v s 0.06ʃ0.01,P <0.05;0.17ʃ0.02v s 0.10ʃ0.01,P <0.05;0.54ʃ0.08v s 0.29ʃ0.04,P <0.05;1.11ʃ0.24v s 0.46ʃ0.07,P <0.05,表2,图8)㊂㊃314㊃中华老年心脑血管病杂志2019年4月第21卷第4期 C h i n J G e r i a t r H e a r t B r a i n V e s s e l D i s ,A pr 2019,V o l 21,N o .4表2 各组凋亡相关蛋白相对表达量比较( x ʃs ,n =6)组别B a xB c l -2B c l -x lB c l -2/B a xB c l -x l /B a x假手术组0.12ʃ0.020.11ʃ0.010.23ʃ0.020.95ʃ0.122.05ʃ0.32模型组0.31ʃ0.04a 0.05ʃ0.01a 0.06ʃ0.01a 0.15ʃ0.03a 0.21ʃ0.03a 联合低剂量组0.21ʃ0.02b 0.06ʃ0.01b 0.10ʃ0.01b 0.29ʃ0.04b 0.46ʃ0.07b 联合高剂量组0.16ʃ0.02b c0.08ʃ0.01b c0.17ʃ0.02b c0.54ʃ0.08b c1.11ʃ0.24b c注:与假手术组比较,aP <0.05;与模型组比较,bP <0.05;与联合低剂量组比较,cP <0.051:假手术组;2:模型组;3:联合低剂量组;4:联合高剂量组图8 各组B a x ㊁B c l -2㊁B c l -x l 表达蛋白印迹2.5 各组心肌P 38和J N K 蛋白相对表达比较 与假手术组比较,模型组磷酸化P 38和磷酸化J N K 明显增加,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组磷酸化P 38和磷酸化J N K 明显降低,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与联合低剂量组比较,联合高剂量组磷酸化P 38和磷酸化J N K 明显降低,差异有统计学意义(P <0.05,图9,表3)㊂1:假手术组;2:模型组;3:联合低剂量组;4:联合高剂量组图9 P 38和J N K 蛋白印迹表达条带表3 各组P 38和J N K 蛋白相对表达比较( x ʃs ,n =6)组别磷酸化P 38磷酸化J N K假手术组0.05ʃ0.000.15ʃ0.02模型组0.19ʃ0.01a 0.44ʃ0.07a 联合低剂量组0.15ʃ0.02b 0.35ʃ0.06b 联合高剂量组0.10ʃ0.00b c0.26ʃ0.03b c注:与假手术组比较,aP <0.05;与模型组比较,bP <0.05;与联合低剂量组比较,cP <0.053 讨 论急性心肌梗死后炎症和细胞凋亡等多种因素参与心肌缺血性损伤,明确缺血损伤时心肌细胞死亡和存活的调节机制,从而减少冠状动脉突然闭塞后心肌损失的数量是基础㊂本研究中小鼠实验性心肌梗死伴随N F -κB 和丝裂原活化蛋白激酶通路显著激活,大量凋亡细胞产生㊂心肌炎症在心功能和功能障碍的生理和病理机制中起着重要的作用,机体发生过度心肌炎症会对心肌造成严重损害,最终导致瘢痕形成,发生心肌梗死[5]㊂梗死心肌的炎性反应与炎性细胞聚集和几个炎症级联的协同激活有关㊂N F -κB 位于细胞质的大多数细胞作为一个不活跃的复杂与未加工的前体蛋白㊂这些前体蛋白降解使N F -κB 二聚体进入细胞核,激活特定靶基因表达,调节炎性转录因子,加重心脏损伤中的炎性反应,急性心肌梗死后心肌细胞局部产生的炎性介质如T N F -α,I L -1β或I L -6可能是缺血后心肌功能障碍,细胞凋亡和(或)肥大的重要原因㊂反过来,炎性细胞因子刺激各种信号通路,包括N F -κB ,进一步控制炎症,导致恶性循环[6]㊂研究表明,抑制N F -κB 可以提高生存,通过下调细胞因子表达以减少心肌细胞凋亡㊂本研究结果表明,木犀草素可抑制心肌梗死心肌细胞N F -κB 的过度磷酸化㊂同时降低T N F -α㊁I L -1β和I L -6,表明木犀草素可通过抑制N F -κB 活化来减轻缺血诱导的心肌炎性反应㊂细胞凋亡是由凋亡信号介导的一系列调控基因调控,B c l -2家族主要调节细胞凋亡的线粒体途径㊂根据B H 结构域的不同,B c l -2家族对于细胞凋亡表现出双重作用㊂促凋亡蛋白包括B a x ㊁B a k ㊁B c l -x s㊁B a d ㊁B i k ㊁B i m ㊁B i d ㊁H r k 和B o k ,而抗凋亡蛋白包括B c l -2㊁B c l -x l ㊁m c l 1㊁A 1/B f l -1㊂B c l -2和B c l -x l 具有B H 4抗凋亡蛋白结构域,发挥抑制细胞凋亡功能㊂B a x 等结构因含有B H 1㊁B H 2和B H 3三个结构域,因此发挥促细胞凋亡功能[7]㊂B c l -2和B a x 是相对应的重要凋亡调节基因对㊂它们彼此聚集形成异二聚体,每个异二聚体可以与相同蛋白质聚集形成同源二聚体㊂生理条件下,B c l -2/B a x (异二聚体)和B a x /B a x(同源二聚体)在细胞内处于动态平衡状态㊂B c l -2/B a x 降低,B a x /B a x 增加,这一动态平衡打乱,从而启动细胞凋亡㊂研究证实,B c l -2/B a x 在调节细胞凋亡的激活或抑制中起重要作用[8-9]㊂细胞凋亡的调控高度依赖抗凋亡蛋白与促凋亡蛋白比㊃414㊃中华老年心脑血管病杂志2019年4月第21卷第4期 C h i n J G e r i a t r H e a r t B r a i n V e s s e l D i s ,A pr 2019,V o l 21,N o .4值,它决定了细胞对死亡信号的反应,B c l-2/B a x和B c l-x l/B a x降低可促进细胞凋亡㊂本研究中,与假手术组比较,模型组B a x明显增加,B c l-2㊁B c l-x l㊁B c l-2/B a x㊁B c l-x l/B a x明显降低㊂说明小鼠心肌梗死后大量心肌细胞凋亡㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组B a x明显降低,B c l-2㊁B c l-x l㊁B c l-2/B a x㊁B c l-x l/B a x明显升高,差异有统计学意义㊂木犀草素处理后这种变化发生逆转㊂提示木犀草素可通过上调b c l-2/B a x和B c l-x l/B a x来减少缺血诱导的心肌细胞凋亡㊂分裂原活化蛋白激酶信号转导途径含有细胞外信号调节激酶,J N K和P38分裂原活化蛋白激酶亚基,并且与一系列心脏病理学相关,如炎症㊁细胞凋亡㊁心脏肥大和心力衰竭㊂丝裂原活化蛋白激酶促进细胞色素c的释放,并最终导致细胞凋亡[10]㊂P38分裂原活化蛋白激酶和应激活化蛋白激酶/ J N K为该通路的重要组成部分㊂既往研究结果表明,P38分裂原活化蛋白激酶和J N K持续激活,促进细胞凋亡[11-12]㊂本研究结果显示,与假手术组比较,模型组心肌磷酸化P38和磷酸化J N K/明显增加,差异有统计学意义㊂与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组磷酸化P38和磷酸化J N K明显降低,差异有统计学意义㊂木犀草素治疗后可以抑制P38和J N K活化㊂提示木犀草素通过下调磷酸化P38和J N K,从而减少急性心肌梗死诱导的心肌细胞凋亡㊂本研究尚存一定局限性:第一,木犀草素对于减少心肌凋亡除分裂原活化蛋白激酶信号通路外是否还涉及其他信号通路尚需探讨;第二,本实验显示, 20m g/k g木犀草素对缺血心肌有显著保护作用,其在实验和临床运用的精确剂量还需大量的研究探究;第三,急性心肌梗死后心肌纤维化程度与血管新生等机制在心肌梗死预后也发挥了重要作用,木犀草素是否还可以通过其他分子来发挥心肌梗死后的心肌保护作用尚不清楚㊂总之,小鼠实验性心肌梗死后运用木犀草素处理可显著提高小鼠生存率,减轻小鼠心肌细胞炎性反应,并减少细胞凋亡㊂本研究结果有助于提高对木犀草素药理活性的认识,木犀草素是一种有前途的心血管保护剂㊂参考文献[1] F r a n g o g i a n n i s N G.T h e i n f l a mm a t o r y r e s p o n s e i n m y o c a r d i a li n j u r y,r e p a i r,a n d r e m o d e l l i n g[J].N a t R e v C a r d i o l,2014,11(5):255-265. D O I:10.1038/n r c a r d i o.2014.28. [2] Y a m a g a t a K,T a g a m i M,Y a m o r i Y.D i e t a r y p o l y p h e n o l s r e g-u l a t e e n d o t h e l i a l f u n c t i o n a n d p r e v e n t c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e[J].N u t r i t i o n,2015,31(1):28-37. D O I:10.1016/j.n u t.2014.04.011.[3] A b u-E l s a a d N,E l-K a r e f A.T h e f a l c o n o i d l u t e o l i n m i t i g a t e st h e m y o c a r d i a l i n f l a mm a t o r y r e s p o n s e i n d u c e d b y h i g h-c a r b o-h y d r a t e/h i g h-f a t d i e t i n W i s t a r r a t s[J].I n f l a mm a t i o n,2018,41(1):221-231. D O I:10.1007/s10753-017-0680-8. [4] B a j p a i V K,A l a m M B,J u MK,e t a l.A n t i o x i d a n t m e c h a n i s mo f p o l y p h e n o l-r i c h n y m p h a e a n o u c h a l i l e a f e x t r a c t p r o t e c t i n gD N A d a m a g e a n d a t t e n u a t i n g o x i d a t i v e s t r e s s-i n d u c e d c e l ld e a t h v i a N r f2-m e d i a t e d h e m e-o x y g e n a s e-1i n d u c t i o n c o u p l e dw i t h E R K/p38s i g n a l i n g p a t h w a y[J].B i o m e d P h a r m a c o t h e r, 2018,103:1397-1407. D O I:10.1016/j.b i o p h a.2018.04.186.[5]S a x e n a A,R u s s o I,F r a n g o g i a n n i s N G.I n f l a mm a t i o n a s at h e r a p e u t i c t a r g e t i n m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n:l e a r n i n g f r o m p a s tf a i l u r e s t o m e e t f u t u r e c h a l l e ng e s[J].T r a n s l R e s,2016,167(1):152-166. D O I:10.1016/j.t r s l.2015.07.002.[6] Y u L,M u Y,S a N,e t a l.T u m o r n e c r o s i s f a c t o r a l p h a i n d u c e se p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n a n d p r o m o t e s m e t a s t a s i sv i a N F-k a p p a B s i g n a l i n g p a t h w a y-m e d i a t e d TW I S T e x p r e s-s i o n i n h y p o p h a r y n g e a l c a n c e r[J].O n c o l R e p,2014,31(1): 321-327. D O I:10.3892/o r.2013.2841.[7]S t a m a t i L,A v g e r i s M,K o s m i d i s H,e t a l.O v e r e x p r e s s i o n o fB C L2a n d B A X f o l l o w i n g B F M i n d u c t i o n t h e r a p y p r e d i c t s c h-A L L p a t i e n t s p o o r r e s p o n s e t o t r e a t m e n t a n d s h o r t-t e r m r e-l a p s e[J].J C a n c e r R e s C l i n O n c o l,2015,141(11):2023-2036.D O I:10.1007/s00432-015-1982-6.[8]J a f a r i n e j a d-F a r s a n g i S,F a r a z m a n d A,M a h m o u d i M,e t a l.M i c r o R N A-29a i n d u c e s a p o p t o s i s v i a i n c r e a s i n g t h e B a x:B c l-2r a t i o i n d e r m a l f i b r o b l a s t s o f p a t i e n t s w i t h s y s t e m i c s c l e r o s i s[J].A u t o i mm u n i t y,2015,48(6):369-378. D O I:10.3109/08916934.2015.1030616.[9] F i l i p p o n e S M,S a m i d u r a i A,R o h S K,e t a l.R e p e r f u s i o n t h e r a-p y w i t h r a p a m y c i n a t t e n u a t e s m y o c a r d i a l i n f a r c t i o n t h r o u g ha c t i v a t i o n o f A K T a n d E R K[J].O x i d M e d C e l l L o n g e v,2017,2017:4619720. D O I:10.1155/2017/4619720. [10] Y u a n L,W a n g J,X i a o H,e t a l.MA P K s i g n a l i n g p a t h w a y sr e g u l a t e m i t o c h o n d r i a l-m e d i a t e d a p o p t o s i s i n d u c e d b y i s o o r i-e n t i n i n h u m a n h e p a t o b l a s t o m a c a n c e r c e l l s[J].F o o d C h e mT o x i c o l,2013,53:62-68.D O I:10.1016/j.f c t.2012.11.048.[11] B o u r k e L T,M c D o n n e l l T,M c C o r m i c k J,e t a l.A n t i p h o s p h o-l i p i d a n t i b o d i e s e n h a n c e r a t n e o n a t a l c a r d i o m y o c y t e a p o p t o s i si n a n i n v i t r o h y p o x i a/r e o x y g e n a t i o n i n j u r y m o d e l v i a p38MA P K[J].C e l l D e a t h D i s,2017,8(1):e2549. D O I:10.1038/c d d i s.2016.235.[12] T e m p l i n A T,S a m a r a s e k e r a T,M e i e r D T,e t a l.A p o p t o s i s r e-p r e s s o r w i t h c a s p a s e r e c r u i t m e n t d o m a i n a m e l i o r a t e s a m y-l o i d-i n d u c e d b e t a-c e l l a p o p t o s i s a n d J N K p a t h w a y a c t i v a t i o n[J].D i a b e t e s,2017,66(10):2636-2645.D O I:10.2337/d b16-1352.(收稿日期:2018-11-12)(本文编辑:马卫东)㊃514㊃中华老年心脑血管病杂志2019年4月第21卷第4期 C h i n J G e r i a t r H e a r t B r a i n V e s s e l D i s,A p r2019,V o l21,N o.4。

木犀草素的应用[发明专利]

木犀草素的应用[发明专利]

专利名称:木犀草素的应用
专利类型:发明专利
发明人:周渭,胡蒙蒙,刘起发,藏小豪,李尤,胡锦荣申请号:CN201910907040.7
申请日:20190924
公开号:CN110507645A
公开日:
20191129
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及医药技术领域,尤其涉及木犀草素的应用。

本发明公开了木犀草素在制备抑制小胶质细胞激活药物中的应用。

由实验结果可知,木犀草素可以抑制LPS诱导的小胶质细胞的激活,显著抑制小胶质细胞内NO信号分子的产生,小胶质细胞和TLR4信号通路下游炎症因子IL‑1β、IL‑6和TNF‑α的表达。

因此,木犀草素可以显著抑制神经炎症活性,可用于制备预防或治疗神经退行性疾病药物,具有临床应用价值和开发前景。

申请人:广东工业大学
地址:510060 广东省广州市越秀区东风东路729号大院
国籍:CN
代理机构:北京集佳知识产权代理有限公司
代理人:许庆胜
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J774A.1细胞焦亡模型建立及木犀草素对其干预作用研究

J774A.1细胞焦亡模型建立及木犀草素对其干预作用研究

中文摘要细胞焦亡作为近年来探明的一种细胞炎性程序性死亡在诸多疾病中扮演着重要的角色。

近十年来,研究学者对细胞焦亡的发生机理做了大量的探索,发现并证实了其关键机制,但目前对于干预焦亡的药物研究鲜有报道。

本文旨在通过建立稳定的J774A.1巨噬细胞的焦亡模型,从传统中药的活性单体药物中筛选出能够抑制焦亡的药物,并重点探究其作用机制。

首先采用不同剂量LPS + ATP/尼日尼亚菌素刺激J774A.1细胞,利用碘化丙啶(PI)染色、CCK-8法、ELISA、western blot等检测手段,以焦亡的表型特征和关键靶点蛋白变化作为评判依据,建立稳定的J774A.1细胞焦亡的联合刺激方式,并进一步利用JSH-23阻断NF-кB通路,探究LPS在其诱导焦亡中的作用。

其次分别采用了黄芪甲苷、丹皮酚、厚朴酚、α-香附酮和木犀草素初步探究其对细胞焦亡的胞膜损伤和IL-1β/18细胞因子影响,发现木犀草素具有良好的潜在的抗细胞焦亡的药理作用。

最后,进一步探究木犀草素抑制LPS + ATP诱导的J774A.1细胞焦亡的作用效应及其分子机制。

试验结果如下:1.LPS + ATP刺激J774A.1细胞后,细胞活力极显著降低(p < 0.001),在形态学上表现出细胞膜严重损伤、细胞形态表现出扁平塌陷,细胞因子IL-1β/18释放显著升高(p < 0.001),蛋白检测NLRP3、caspase-1 p10、GSDMD p30表达显著上调(p < 0.001)。

其中100ng/mL LPS 预刺激4h加上5 mM ATP刺激30 min为J774A.1最优刺激方式。

JSH-23阻断NF-кB后,上述结果较LPS + ATP组均得到显著改善(p < 0.01)。

2.黄芪甲苷、丹皮酚、厚朴酚、α-香附酮和木犀草素预处理12h后,均极显著抑制LPS+ATP诱导的J774A.1的IL-1β(p < 0.001)。

木犀草素预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠炎症反应及细胞凋亡的影响

木犀草素预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠炎症反应及细胞凋亡的影响

木犀草素预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠炎症反应及细胞凋亡的影响樊维娜;孙经武【期刊名称】《陕西中医》【年(卷),期】2015(000)011【摘要】目的::研究木犀草素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤中细胞凋亡和炎症反应的影响。

方法:以30只健康雄性 Wistar 大鼠为研究对象,随机分为假手术组(A 组),缺血再灌注组(B组),木犀草素组(C组),每组10只,术前4d分别经尾静脉注射给予相应处理。

阻断冠脉左前降支,构建心肌缺血模型,缺血30min 后再灌注2h。

用 ELISA 法检测大鼠血清 TNF-α, IL-6的含量,采用TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数。

结果:与 A 组相比,B组心肌细胞凋亡指数、血清TNF-α及IL-6含量明显上升(P<0.01);与B组比较,C组的心肌细胞凋亡指数,血清IL-6和TNF-α的含量则显著降低)(P<0.05或0.01)。

结论:木犀草素预处理可以抑制心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡,其机制可能与减少促炎细胞因子 TNF-α及IL-6的产生,进而减轻炎症反应有关。

【总页数】3页(P1558-1560)【作者】樊维娜;孙经武【作者单位】陕西省咸阳市中心医院心血管介入科咸阳 712000;陕西省咸阳市中心医院心血管介入科咸阳 712000; 山东省滨州医学院烟台附属医院心内科烟台264100【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.藏红花酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎症反应和细胞凋亡的影响及其机制 [J], 孙经武;王艳艳;房灿2.杜鹃花总黄酮药理性预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中炎症反应的影响 [J], 张建华;武征;陈志武3.不同剂量右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤以及炎症反应的影响 [J], 吴志林;褚淑娟;姚尚龙;伍静4.吡格列酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎症反应及细胞凋亡的影响 [J], 李凤云;杨凤兰;张秀萍;刘志明5.电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠线粒体介导的细胞凋亡的影响 [J], 张小蕾;向丽莉;薛艺璇;林依梦;杨琪琪;刘珍珍;黄伟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

木犀草素的功效与作用

木犀草素的功效与作用

木犀草素的功效与作用【简介】木犀草素(luteolin)是一种天然黄酮类化合物,存在于多种植物中。

具有多种药理活性,如消炎、抗过敏、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗高尿酸等,临床主要用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管疾病、治疗高尿酸血症、治疗“肌萎缩性脊髓侧索硬化症”,SARS,肝炎等。

【特征】木犀草素在自然界中分布广泛,因最初是从木犀草科(Resedaceae)木犀草属草本植物木犀草(ResedaodorataL.)的叶、茎、枝中分离出而得名,可从多种天然药材、蔬菜果实中分离得到。

目前发现主要存在于金银花、菊花、荆芥、白毛夏枯草、洋蓟、紫苏属、黄芩属、裸花紫珠[1]等天然药材中,以及芽甘蓝、洋白菜、菜花、甜菜、椰菜、胡萝卜、芹菜、甜椒、辣椒、落花生等蔬菜果实中,其它如橄榄油和红酒等植物产品以及野凤仙花、鼠曲草、百里香草、唇形科植物全叶青兰草、筋骨草等也含有木犀草素。

【作用与功效】木犀草素,多以糖苷的形式存在于多种植物中,这些植物以全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏含量较高。

具有镇咳和祛痰作用。

据最新研究,呼吸道症状咳嗽、咳痰、喘息,均与气道慢性炎症有关。

如支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、慢性咽炎、变应性鼻炎等引起咳嗽、咳痰、喘息,均被认为与局部的炎症浸润有关,炎症的存在,使得气道的免疫应答混乱,患者常出现气道反应性增高。

治疗的手段首先应该消除气道的慢性炎症浸润。

目前常用糖皮质激素,以消除气道炎症。

但糖皮质激素的副作用较多,不宜长期应用。

研究表明,木犀草素抑制巨噬细胞磷酸化,抑制转录因子NF-kB的活性,能够抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞产生细胞因子IL-6,TNF-a。

后两种细胞因子在炎症机制中扮演非常重要的角色,是反映炎症程度的敏感指标。

木犀草素还能提高IFN-γ,降低特异性Ig-E,减少嗜酸性粒细胞的浸润。

另外,木犀草素除了抗炎、抗过敏作用以外,还具有抑制PDE、抗SARS、HIV病毒特性,其原因为抑制SARS病毒前S蛋白的活性,从而阻止其进入宿主细胞。

木犀草素对脑胶质瘤大鼠生长、血管生成及血管NF-κB表达水平的影响

木犀草素对脑胶质瘤大鼠生长、血管生成及血管NF-κB表达水平的影响

木犀草素对脑胶质瘤大鼠生长、血管生成及血管NF-κB表达水平的影响陈侠;赖满香;冯娟;来慧丽;黄金凤【期刊名称】《中国心血管病研究》【年(卷),期】2017(015)002【摘要】目的初步探析木犀草素联合替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生长、血管生成及血管NF-κB表达水平的影响,为胶质瘤的防治提供新思路.方法 120只雌性Wistar 大鼠进行实验.30只做体外实验确定最佳处理条件.另外90只分为3组并进行造模,分别用木犀草素、替莫唑胺、木犀草素联合替莫唑胺进行处理,比较各组细胞周期(G2/M所占比例)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及血管NF-κB表达.结果联合处理组的G2/M所占比例、VEGF、NF-κB分别为(3.6±1.6)%、(16.2±2.5)%、(347.7±70.2)mm2,分别低于木犀草素处理组和替莫唑胺处理组,差异有统计学意义(P<0.05).同时木犀草素处理组的G2/M所占比例、VEGF、NF-κB也低于替莫唑胺处理组,差异有统计学意义(P<0.05).结论木犀草素可多靶点、多环节、多途径抑制肿瘤,且可透过血脑屏障,对细胞周期、VEGF和NF-κB表达均有明显抑制作用,与替莫唑胺联合应用治疗脑胶质瘤可取得较佳效果,值得进一步展开深入研究.%Objective To preliminarily explore the effects of luteolin combined with Temozolomide on growth,angiogenesis and expression level of vascular NF-κB in rats with brain gliomas and provide new ideas for the prevention and treatment of gliomas.Methods 120 female Wistar rats were used for experiment.The optimal treatment conditions were determined by 30 rats in vitro experiment.Another 90 rats were divided into three groupsand were used for modeling.The three groups were treated with luteolin,Temozolomide and luteolin combined withTemozolomide,respectively.The cell cycle (proportion of G2/M),expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and expression of vascular NF-κB were compared.Results In the combined treatment group,the proportion of G2/M,VEGF and NF-κB[(3.6±1.6)%,(16.2±2.5)%,(347.7±70.2)mm2] were lower than those in luteolin treatment group and Temozolomide treatment group respectively (P<0.05).Besides,the proportion of G2/M,VEGF and NF-κB in luteolin treatment group were lower than those in Temozolomide treatment group (P<0.05).Conclusion Luteolin can inhibit tumor through multi-target,multi-link and multiple ways.Besides,it can also significantly inhibit cellcycle,expression of VEGF and NF-κB through blood brain barrier.Its combination with Temozolomide in the treatment of glioma can achieve a better effect,which is worthy of further study.【总页数】5页(P186-189,后插2)【作者】陈侠;赖满香;冯娟;来慧丽;黄金凤【作者单位】510520广东省广州市,广东食品药品职业学院护理学院;510520广东省广州市,广东食品药品职业学院护理学院;510520广东省广州市,广东食品药品职业学院护理学院;510520广东省广州市,广东食品药品职业学院护理学院;510520广东省广州市,广东食品药品职业学院护理学院【正文语种】中文【中图分类】Q95-33;R739.41【相关文献】1.脑胶质瘤中丝氨酸蛋白酶抑制剂、血管内皮生长因子表达及对血管生成的影响[J], 韩笑;吴琼石;杨薇2.人脐血干细胞移植对心肌梗死大鼠血管新生和血管内皮生长因子、促血管生成素-1表达的影响 [J], 赵林;王雷;贾三庆;张宇晨;李贵华;李虹伟;顾复生3.人脑胶质瘤组织中血管内皮生长因子表达及血管生成拟态的观察 [J], 常会民;郭志旺;胡辉华;姚雪峰;邱炜;彭卫华;苏军;林鹏;王军胜4.三链形成寡核苷酸对大鼠脑胶质瘤生长和血管生成影响的研究 [J], 李维方;周定标;余新光;金由辛5.丁基苯酞对脑出血大鼠血管内皮生长因子、血管生成素-2蛋白表达及血管新生的影响 [J], 涂鄂文; 刘秋庭; 谭莉; 曾艳香; 陈琼因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

木犀草素的体外抗炎机制研究

木犀草素的体外抗炎机制研究

木犀草素的体外抗炎机制研究张毅;王旭光【期刊名称】《广州中医药大学学报》【年(卷),期】2007(24)3【摘要】[目的]观察木犀草素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞(小鼠单核/巨噬细胞系)核因子κB(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达及NF-κBDNA结合活性的影响,探讨其体外抗炎机制.[方法]以RAW264.7细胞为研究对象,选用对数生长期的细胞,分别设空白对照组,脂多糖(LPS)处理组(模型组),5、15、45 μmol/L木犀草素处理组(中药低、中、高剂量组);加入药物30 min后再加入终浓度为1 μg/mL的LPS继续培养12 h,分别采用酶免疫测定法(EIA)检测木犀草素对RAW264.7细胞前列腺素E2(PGE2)生成的影响;电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定RAW264.7细胞中COX-2mRNA的水平;Western blot法测定RAW264.7细胞中NF-κB和COX-2蛋白的表达.[结果]木犀草素能显著性抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成,降低NF-κB的DNA结合活性;下调LPS诱导的RAW264.7细胞COX-2mRNA、NF-κB和COX-2蛋白的表达.[结论]木犀草素的抗炎作用可能与其能抑制核内NF-κB的表达和DNA结合活性从而下调COX-2的表达有关.【总页数】4页(P231-234)【作者】张毅;王旭光【作者单位】广东医学院附属医院中心实验室,广东湛江,524001;广东医学院附属医院中心实验室,广东湛江,524001【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.木犀草素体内抗炎作用机制研究 [J], 张毅;王旭光;杨展;何惠娟2.β-七叶皂苷钠对体外退变椎间盘细胞抗炎作用及机制研究 [J], 段雄;安菊霞;赵岩;杨学军3.木犀草素和槲皮素体外抗炎作用研究 [J], 周霄楠;韩超;宋鹏琰;赵兴华;钟秀会4.DPA体外抗炎活性及机制研究 [J], 郑振霄;朱凯;戴志远5.桑枝总黄酮体外抗炎活性及机制研究 [J], 章丹丹;凌霜;张洪平;史海霞;薛永亮;杨晓露;许锦文;卞卡因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

木犀草素对自发性高血压大鼠心肌组织的保护作用及NF-κB表达的影响

木犀草素对自发性高血压大鼠心肌组织的保护作用及NF-κB表达的影响

木犀草素对自发性高血压大鼠心肌组织的保护作用及NF-κB表达的影响吕立华;吕林华;张玉碧【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)7【摘要】目的通过对自发性高血压大鼠(SHR)血压、心肌组织内血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)浓度的检测,观察木犀草素对SHR心肌组织的保护作用及NF-κB表达的影响。

方法木犀草素低、中、高剂量组(Luteolin)(10,20,40 mg.kg-1.d-1)、卡托普利组(Captopril)(10 mg.kg-1.d-1)、模型阴性对照组(SHR),每组均8只,WKY大鼠8只做为正常对照组(WKY)。

灌胃8周后处死,检测其血压、心肌组织内ET-1及NO的浓度。

采用Western blot法检测各组大鼠NF-κB p65蛋白表达情况。

结果木犀草素组低、中、高各剂量组和SHR组血压均高于WKY组,(P<0.05),各剂量组血压和Captopril组均低于SHR 组,(P<0.05);给药后木犀草素各组心肌组织AngⅡ浓度、ET-1浓度较SHR组有显著下降(P<0.05);心肌组织NO浓度较SHR组有显著升高,其差异有统计学意义(P<0.05);木犀草素各剂量组大鼠肺组织NF-κB p65蛋白表达明显低于模型对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论木犀草素能降低SHR大鼠血压,降低SHR大鼠心肌组织AngⅡ浓度和ET-1浓度;升高SHR大鼠心肌组织NO浓度,下调NF-κB p65蛋白的表达,从而产生保护心肌组织的作用。

【总页数】3页(P1645-1647)【关键词】木犀草素;血管紧张素Ⅱ;核因子;内皮素1;一氧化氮【作者】吕立华;吕林华;张玉碧【作者单位】邵阳医学高等专科学校;中山大学附一院;湖南省邵阳市中心医院【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.星状神经节阻滞对自发性高血压大鼠脑组织 NF-κBp65与凋亡调节因子 bcl-2/bax 表达变化的影响 [J], 陈永权;付群;金孝岠2.阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌组织 p21蛋白表达和心肌肥厚的影响 [J], 赵丽华;张少利;郭长磊3.当归挥发油对自发性高血压大鼠心肌组织中微小 RNA差异表达谱的影响 [J], 伊琳;陈蓓蓓;孙少伯;杨陇;纪禄风;石向慧4.非诺贝特对自发性高血压大鼠心肌重构及NF-κB表达的影响 [J], 李传保;卜培莉;张运;公茂磊;侯晓阳;郝明秀;赵学强;孟晓5.安宫牛黄丸对自发性高血压脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB及NO表达的影响[J], 刘婷;刘远新;沙地克因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

木犀草素对氧化应激和炎症的调控机制

木犀草素对氧化应激和炎症的调控机制

木犀草素对氧化应激和炎症的调控机制
韩宁馨;孙雅丽;盛帅;张雯
【期刊名称】《动物营养学报》
【年(卷),期】2022(34)5
【摘要】木犀草素是一种天然黄酮类化合物,广泛分布于蔬菜、水果、花卉、香料和药用植物中,具有抗炎和抗氧化等多种生物活性。

近年来研究发现,木犀草素对改善反刍动物肠胃运动、提高机体抗氧化能力具有积极作用,作为饲料添加剂具有潜在研发价值和应用前景。

本文介绍了木犀草素的药物代谢、抗炎抗氧化机制及其在动物生产方面的应用,为木犀草素的后续研究和开发利用提供参考。

【总页数】6页(P2856-2861)
【作者】韩宁馨;孙雅丽;盛帅;张雯
【作者单位】东北林业大学野生动物与自然保护地学院
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
【相关文献】
1.丹皮酚对氧化应激和炎症信号通路的调控机制
2.热应激诱导畜禽氧化应激、热休克反应与免疫和炎症反应的机制及营养调控措施
3.硒对奶牛乳腺氧化应激及炎症反应的调控作用及其机制
4.人参皂苷Rg1对子痫前期大鼠氧化应激和炎症的调控作用及机制研究
5.类风湿关节炎湿热痹阻证患者LINC00638的表达及其调控炎症和氧化应激的机制
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木犀草素防治COPD的效果及抗炎机制

木犀草素防治COPD的效果及抗炎机制

木犀草素防治COPD的效果及抗炎机制李远航【期刊名称】《现代医药卫生》【年(卷),期】2016(32)8【摘要】目的探讨青兰浸膏片(主要成分为木犀草素)防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用效果及其可能抗炎机制.方法选取该院2011年10月至2012年3月收治的COPD急性加重期患者40例,随机分为观察组和对照组,各20例.两组患者均给予常规COPD急性加重期治疗方案,观察组在此基础上口服青兰浸膏片2周,对比分析两组患者治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-12、呼吸困难指数英国医学研究理事会(MRC)分级及相关肺功能指标.结果治疗后,两组患者血清TNF-α、IL-6、IL-12均较治疗前有显著改善,且观察组改善程度显著优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);观察组患者MRC分级较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);观察组患者呼吸困难程度[60.0%(12/20)]显著低于对照组[95.0%(19/20)],差异有统计学意义(P<0.01);观察组患者的第1秒用力呼气量与预计值的百分比、第1秒用力呼气容积/用力肺活量、最大通气量水平均较治疗前显著改善,且观察组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).结论木犀草素治疗COPD急性加重期患者具有较好抑制炎症因子TNF-α、IL-6、IL-12的作用,同时对减轻患者呼吸困难、提高肺功能作用明显,木犀草素的抗炎作用可能与控制脂多糖、抑制Toll样受体有关.【总页数】3页(P1216-1218)【作者】李远航【作者单位】深圳市蛇口人民医院急诊科,广东 518067【正文语种】中文【相关文献】1.木犀草素对稳定期COPD患者血清炎症细胞因子及肺功能的影响评价 [J], 朱荣辉2.木犀草素的体外抗炎机制研究 [J], 张毅;王旭光3.木犀草素对COPD患者血清TNF-α及肺功能的影响 [J], 唐文辉;朱荣辉;李远航;刘灼帆;宛太4.木犀草素抗炎机制的研究进展 [J], 于倩;巫冠中5.木犀草素抗炎机制的研究进展 [J], 于倩;巫冠中;因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

2022-2023年中药学类之中药学(士)题库与答案

2022-2023年中药学类之中药学(士)题库与答案

2022-2023年中药学类之中药学(士)题库与答案单选题(共100题)1、木犀草素的结构是A.5,7,3′,4′-四羟基黄酮B.5,7,4′-三羟基黄酮C.3,5,7,3′,4′-五羟基黄酮D.3,5,7,3′,4′,5′-六羟基黄酮E.3,5,7,4′-四羟基黄酮【答案】 A2、黄连解毒汤中黄芩的作用是A.清中焦火邪B.清三焦火邪C.清中上焦火邪D.清上焦火邪E.清下焦火邪【答案】 D3、阿洛索-OT属于A.阴离子型表面活性剂B.阳离子型表面活性剂C.非离子型表面活性剂D.天然两性离子型表面活性剂E.合成两性离子型表面活性剂【答案】 A4、散剂一般用A.最粗粉B.粗粉C.细粉D.最细粉E.极细粉【答案】 C5、入药部位为花蕾的是A.丁香B.洋金花C.紫花地丁D.菊花E.红花【答案】 A6、以正虚为主,机体不耐攻伐的虚实夹杂证,治则是A.扶正B.祛邪C.扶正兼祛邪D.先扶正后祛邪E.先祛邪后扶正【答案】 D7、枸橼酸盐或酒石酸盐在混悬液型药剂中可用作A.助悬剂B.矫味剂C.絮凝剂D.增溶剂E.润湿剂【答案】 C8、善清上焦血分热毒的大黄类饮片是A.醋大黄B.酒大黄C.熟大黄D.大黄炭E.清宁片【答案】 B9、处方中写药物的正名即付醋制品的是A.牛蒡子B.枇杷叶C.延胡索D.厚朴E.甘草【答案】 C10、急诊处方用量不超过A.1天B.3天C.4天D.2天E.7天【答案】 B11、中医学治疗疾病的基本原则是A.辨证论治B.因证立法C.据法选方D.同病异治E.异病同治【答案】 A12、温脾汤的功用是A.温脾暖胃,化湿和中B.温里散寒,通便止痛C.泻结通便,散寒救逆D.温补脾阳,攻下冷积E.温阳散寒,泻结逐瘀【答案】 D13、重大中医药科研成果的推广、转让、对外交流,中外合作研究中医药技术,应当获得批准的部门是A.国家中医药管理的部门B.国家知识产权局C.国家食品药品监督管理总局D.省级以上人民政府负责中医药管理的部门E.区级以上人民政府负责中医药管理的部门【答案】 D14、骨碎补净制方法是A.刷去毛B.烫去毛C.挖去毛D.燎去毛E.洗去毛【答案】 B15、利用重力作用达到固-液分离的是A.层析分离法B.旋转分离法C.滤过分离法D.沉降分离法E.离心分离法【答案】 D16、60岁以上老人的用药剂量相当于成人剂量的A.1.5倍B.3/4C.3/5D.1/2E.1/4【答案】 B17、四妙丸包A.百草霜衣B.滑石衣C.雄黄衣D.黄柏衣E.朱砂衣【答案】 D18、不采用盐炙法炮制的药材是A.补骨脂B.延胡索C.黄芪D.杜仲E.黄柏【答案】 C19、属于S-苷的是A.毛茛苷B.天麻苷C.靛苷D.芥子苷E.芦荟苷【答案】 D20、药品广告批准文号的有效期是A.1年B.2年C.3年D.4年E.5年【答案】 A21、“一源三歧”指的是A.任、带、冲三脉B.任、带、督三脉C.任、督、冲三脉D.阴跷、阳跷、阴维三脉E.阳跷、阴维、阳维三脉【答案】 C22、下列属于母子关系的是A.水和火B.土和金C.金和木D.木和土E.金和火【答案】 B23、麦门冬汤的功效是A.滋养肺肾,止咳化痰B.清养肺胃,降逆和中C.养阴清肺,解毒利咽D.增液润燥E.轻宣凉燥,理肺化痰【答案】 B24、不易使药材发生霉变的成分是A.蛋白质C.树脂D.糖类E.黏液质【答案】 C25、常用于阴虚发热、骨蒸劳热的炮制品是A.生黄柏B.酒黄柏C.盐黄柏D.黄柏炭E.醋黄柏【答案】 C26、水溶性或亲水性基质的栓剂常用润滑剂是A.甘油B.95%乙醇C.肥皂:甘油(1:1)D.液状石蜡E.聚乙二醇【答案】 D27、秦皮药材的原植物属于A.木兰科C.木犀科D.芸香科E.萝蘑科【答案】 C28、血在脉中循行而不溢出脉外主要依靠气的是A.推动作用B.固摄作用C.防御作用D.温煦作用E.气化作用【答案】 B29、颗粒剂的特点不包括A.产品质量较稳定B.剂量较小,携带、贮藏、运输较方便C.对于吸湿性物料,包装不严易吸湿结块D.不宜包衣E.可制成缓释制剂【答案】 D30、属于外科药的是A.补中益气丸B.乌鸡白凤丸C.大山楂丸D.七厘散E.明目地黄丸【答案】 D31、川芎茶调散的主治证是A.痰厥头痛B.血虚头痛C.外风头痛D.气虚头痛E.肝风头痛【答案】 C32、普通药品处方印刷用纸的颜色为A.白色B.淡绿色C.淡蓝色D.淡黄色E.淡红色【答案】 A33、槐花炒黄多用的火候是A.中火C.武火D.先武火后文火E.先文火后武火【答案】 B34、阴盛格阳病机的形成是由于A.阳偏衰B.阴偏衰C.阳偏盛D.阴偏盛E.阴阳偏盛【答案】 D35、百合固金汤的功效是A.滋养肺肾,止咳化痰B.清养肺胃,降逆和中C.养阴清肺,解毒利咽D.增液润燥E.轻宣凉燥,理肺化痰【答案】 A36、风邪的特性是A.收引C.重浊D.黏滞E.干涩【答案】 B37、儿科处方的保存期限是A.6个月B.l年C.2年D.3年E.4年【答案】 B38、用物理或化学方法防止和抑制微生物生长繁殖的操作A.化学灭菌B.物理灭菌法C.消毒D.防腐E.除菌【答案】 D39、当归可用于治疗A.高脂血症C.痛经D.肾衰竭E.失眠【答案】 C40、以下不需要印有规定标志的药品的是A.麻醉药品B.外用药品C.精神药品D.处方药E.非处方药【答案】 D41、土炒山药长于A.健脾燥湿B.补脾止泻C.补肾生精D.补脾健胃E.补中益气【答案】 B42、属于埋藏养护技术的是A.石灰埋藏法B.石灰干燥法C.摊晾法D.密封吸湿法E.冷藏法【答案】 A43、需要采用水飞法炮制的药材是A.石膏B.赭石C.朱砂D.磁石E.赤石脂【答案】 C44、生姜与黄芩配伍,效果是A.相使B.相畏C.相反D.相恶E.相须【答案】 D45、举之有余,按之不足的是A.浮脉B.沉脉C.细脉D.结脉E.代脉【答案】 A46、治疗赤白相兼之湿热痢疾的方剂是A.驻车丸B.痛泻要方C.大柴胡汤D.芍药汤E.白头翁汤【答案】 D47、肉桂药材主产地是A.安徽、山东B.广东、广西C.河南、山西D.东北E.四川、湖南【答案】 B48、符合规定的,发给A.《药物临床试验批件》B.《药品生产许可证》C.新药证书D.《审批意见通知件》E.药品批准文号新药临床试验申请时,国家食品药品经监督管理局依据技术审评意见作出审批决定。

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过硫酸铵 牛血清白蛋白 二甲基砜 胎牛血清 自身免疫性疾病 异硫氰酸荧光素 离子霉素 白细胞介素.2p 核因子kappaB抑制蛋白 核因子kappaB抑制蛋白0【 核因子kappaB抑制蛋白激酶 细胞间黏附分子 主要组织相容性复合物 Ⅱ类主要组织相容性复合物 核因子.rd3 NF.1cB诱导激酶 蛋白激酶C 佛波酯 类风湿关节炎 T细胞抗原受体 肿瘤坏死因子.0【 T辅助细胞1 T辅助细胞2
lymphocyte,and effect
cell
sources
on
NF-Id3 signal pathway in vitro.To stimulated T
in mouse spleen lymphocytes with phorbol
ester(PMA)plus
ionomycin(ionomycin,Ion)with different final
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(1)Luteolin
could inhibit the lymphocyte activation and proliferation,it
indicate that lueolin have anti-inflammatory effect.
minutes,the nuclear translocation of P65 is the most,luteolin(1 01.tM,
20pM,309M)blocked
nuclear translocation of P65 in T cell in

does
dependent manner;After stimulated by PMA plus Ion for 1 2 hours,the
种核蛋白因子,能够诱导多种炎症相关基因的表达,NF.r.B在炎症和自身免疫性
疾病的病理机制中发挥重要的免疫学作用【2】。NF.心通路的活化在人体内的作用
非常广泛,与类风湿性关节炎、哮喘、艾滋病、动脉粥样硬化、神经退行性疾病、 肿瘤等病理关系都有密切关系,在诱导免疫相关炎症上具有十分重要的作用。 NF.r.B通路活化可调节n盯.0【、IL.1 B、IL一6等炎症细胞因子基因的转录【3J。现已 明确NF.1①能够促进近100种基因的转录,这些基因主要参与了宿主的免疫反应,
on
treatment of rheumatoid arthritis.
order to explore the role of luteolin
on
Methods:In
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
on
immune regulation,
we studied the effect of luteolin
proliferation and activation of T
tumor necrosis factor-a
Thelped T helper2
原创性声明
本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢 的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不 包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我 共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。
I邙
IKpa
IKK ICAlVI
inhibitory proteins of NF-Kp
11出kinase
intercellular adhesion molecule
MHC MHCII
majorhistocompatibility complex
Human major histocompatibility complex II
on
cell proliferation;tO detect the T cells of the expression of
Ion plus
PMA stimulated
and P65
phosphorylation of
blot.
11(d3a
into the impact of nuclear by
作者签名:
学位论文版权使用授权书
本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校 有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文, 允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内 容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科
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CO-culture with T cells,T lymphocytes
groups:T cells
are
concentrations of luteolin
divided into the experimental
Group,T cells+
Group(contr01),T cells+PMA-I-Ion
SO
pathway,
to
achieve
the
effect
of
anti-inflammatory.
KEY
WORDS
luteolin,T cell,proliferation,NF-n]3,p65,IKt3
IV
硕士学位论文
缩略词表
缩略词表
缩写
英文全称
ammonium persulfate
bovine serum albumin

BSA
DMSO
FBS AID FITC Ion
dimethyl sulphoxide
fetal bovine serum
Autoimmtme disease
Fluorescein isothiocynate
ionomycin
IL一2p
Intedeukin一2p
inhibitory proteins of NF-Kp

lymphocyte
proliferation induced by PMA plus Ion in
dose
III
硕士学位论文
英文摘要
dependent manneI∽<0.0 1).
(2)Western
blotting assay shows after stimulated by
PMA
plus Ion for 30
luteolin—group,T
PMA+Ion+1 0 rtM
cells+PMA+Ion+20 pM
Group,
luteolin-group,T lymphoid
Fine+PMA+Ion+30州luteolin
MTT
total of five groups,determined by effect of luteolin the
英文摘要
ABSTRACT
obj ective:This
study
examined
on
the
active
ingredient
luteolin
of
Bizhongxiao decoction
T lymphocyte proliferation in vitro,as well
as
NF—KB signal pathway to explore the anti-inflammatory mechanism of luteolin
Western
Results:(1)MTT
assay shows after 48 hours stimulated by
PMA
plus
Ion,the proliferation of T cells increased
inhibit the
obviously,luteolin(5—30pM)can
Nuclear Factor-rd3 NF—rd3一inducing kinase
NF.心
NIK PKC
protein kinase C
Phorbol・-1 2-myristate 1 3—・acetate
PMA
RA TCR TNF.仅 TM Th2
Rheumatoid arthritis
T cell antigen receptor
expression of phosphorylation of IrBa is the
most,luteolin(1 OgM,
PMA
209M,309M)depressed the
plus Ion in Conlusion:

phosphorylation of IKBa stimulated by
并通过网络向社会公众提供信息服务。
作者签名:
导师签名
醐叶q月孕日
硕士学位论文
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类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种常见自身免疫性疾病,主要病
变发生在滑膜,累及关节软骨、韧带、肌腱及全身组织,引起关节肿痛,继而软 骨破坏关节间隙变窄,晚期关节畸形、功能活动障碍,大量淋巴细胞、巨噬细胞、 浆细胞浸润为特征。我国RA的患病率约为0.32%.0.36%,40.50岁为发病高峰, 总患病人数逾40万。由于病因和发病机制尚未清楚,而且缺乏特异有效的治疗方 法,致使绝大多数RA患者病情迁延反复,最终导致关节畸形和功能丧失,加以 目前的抗风湿药物多具较大的毒副作用,给病人带来极大的痛苦,给社会带来沉 重的负担,是造成我国人群丧失劳动力的主要病因之一。 RA的病理和病因包括了自身抗原的异常呈递和自身反应性T细胞的激活,一 般认为RA的慢性炎症是由抗原诱导T细胞活化,促使T细胞向滑膜浸润引起炎症
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