正相色谱使用手册

硅胶柱使用注意事项

正相柱一般包括硅胶、CN基、Diol和氨基柱。

硅胶柱：

该色谱柱属于硅胶柱，由于分离原理跟反相相反，采用的常规流动相为非极性溶剂为流动相，如正己烷，石油醚等。

如同反相色谱不能接受有机溶剂一样，含水过多会将硅胶成分洗脱出来，所以在使用正相色谱时，需要注意，要将整个液相系统冲洗成不含水和盐的系统，同时液相的洗针溶剂，洗泵阀的溶剂也需要更换成异丙醇。管路，密封圈中尽量避免peek材质，选用不锈钢材质可减小腐蚀的几率。

使用注意事项：

1、先将系统接两通，冲含水量较高的溶剂（例如20%的甲醇），将系统中的盐充分冲洗出系统。

2、依次换纯甲醇→异丙醇→正己烷，1ml/min流速，每次换相冲洗时间不少于1小时，如果是四元低压泵或二元高压泵，则要注意要将两个泵都冲洗成正相系统，切不可简单的切换泵冲洗。

异丙醇有较好的过渡性能，可考虑多冲一会。

3、接色谱柱，先冲正己烷，流速逐级升高，勿直接高流速冲柱，然后换流动相即可。

4、色谱柱活化，如样品杂质较多，可用纯异丙醇冲洗。

100%异丙醇的极性和正相洗脱能力足够把正相柱上的所有残留物清洗掉。如果异丙醇的清洗还不足以恢复色谱性能，则说明色谱柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法无法解决这个问题。

5、色谱柱的保存，硅胶柱可直接用纯的正己烷保存，也可用异丙醇：正己烷（10:90）保存。

一般不考虑用纯的异丙醇保存，异丙醇黏度较大，不容易冲干净，而正相色谱中有较多的异丙醇时，会影响色谱的保留时间。