高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质PPT课件
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高中生物___检测生物组织中的 糖类、脂肪和蛋白质
实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关 有机化合物产生特定的颜色反应。
水浴加热
①还原糖 + 斐林试剂
砖红色沉淀
②脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
④淀粉 + 碘→蓝色
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央
染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min
制片
洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴
制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片
镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
视野中 有橘黄 色颗粒
橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒
化学试剂+有机化合物→特定的颜 色
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐林试剂
甲液
乙液
双缩脲试剂
A液
B液
成分
鉴定 物质
0.1 g/mL 0.05 g/mL 0.1 g/mL 0.01 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 NaOH溶液 CuSO4溶液
可溶性还原糖
蛋白质或多肽
添加 甲乙两液等量混匀后立即 顺序 使用（现配现用）
浓度 相同点
乙液CuSO4浓度为0.05 g/mL B液CuSO4浓度为0.01g/mL
都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是 0.1g/mL
双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物与碱性硫酸 铜作用，生成蓝紫色的复合物
斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如 下三点不同： ①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL， CuSO4的浓度为0.05g/mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为 0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.01g/mL。
双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中 能和Cu2+作用生成紫色的络化物，这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白 质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2mL 组织 样液
双缩脲试 剂A 2mL
双缩脲试 剂B 3-4滴
（创造碱性条件） （提供Cu2+）
②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液； 双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2＋。
③使用方法不同。使用斐林试剂时，先把NaOH溶液和CuSO4 溶液混合，然后立即使用。使用双缩脲试剂时，先加入NaOH 溶液，然后再加入CuSO4溶液。
一、可溶性还原糖的检测：
（1）原理：还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 （2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为 白色或近于白色的植物组织。 （3）检测过程：
新配制的斐林试剂
浴加热2min
或本尼迪特试剂
观察现象 观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色
结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。
2 ml组织样液
1 ml新配制的斐林试剂
5065℃水浴加热 约2min
浅蓝色
棕色
观察颜色变化 砖红色
【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05 g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色 的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH） 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。
先加入A液1 mL，摇匀， 再加入B液4滴（不能过 量），摇匀
反应 条件
50～65 ℃水浴加热
不需加热，摇匀即可
反应 现象
样液变砖红色沉淀
样液变紫色
斐林试剂用的是甲液和乙液，须现配现用，混合均匀，水 浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液，先加A液，后滴B 液，不用水浴加热。
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴 加，或者久置后才用。
制备组织样液
砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃
洗净、去皮、切块
梨或苹果
研磨
取5g，放入研钵中
过滤
滤液
（用单层纱布）
显色反应
向试管中加入 2ml组织样液
向试管中加入2ml 振荡混匀 50～65℃水
三、蛋白质的检测： 双（双缩脲）子（紫色）弹（蛋白质）
（1）原理：蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色络合物
（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆
（3）检测过程：
3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀
2 ml组织样液
2 ml双缩脲试剂A液，摇匀
wk.baidu.com观察颜色变化
紫 色
双缩脲≠双缩脲试剂
将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。 反应式为:
脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液 橘黄色（或红色）
注意事项：
（1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸 泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切 下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。
（2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解 苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。
使用方法
甲液和乙液混合均匀后方可 使用，且现配现用
使用时先加A液再加B液
反应条件
不 同
反应原理 点
颜色
需50-65℃水浴加热
不需加热即可反应
还原糖中的醛基被Cu（OH） 具有两个以上肽键的化合物
2 悬浊液氧化,Cu（OH）2被 在碱性条件下与Cu2+反应生
还原为砖红色Cu2O沉淀
成紫色络合物
砖红色
紫色
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的 Cu2O沉淀。
-CHO+Cu(OH)2悬浊液
-COOH+Cu2O↓（砖红色）
二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程： 苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪） 切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
振荡混匀
呈现浅蓝色
50～65℃水浴 加热2min
变成砖红色（Cu2O）
还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和 麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量 浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡 蓝色的Cu（OH）2悬浊液。 Cu（OH）2与葡萄糖、 果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红 色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中 含可溶性还原糖。
实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关 有机化合物产生特定的颜色反应。
水浴加热
①还原糖 + 斐林试剂
砖红色沉淀
②脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
④淀粉 + 碘→蓝色
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央
染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min
制片
洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴
制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片
镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
视野中 有橘黄 色颗粒
橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒
化学试剂+有机化合物→特定的颜 色
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐林试剂
甲液
乙液
双缩脲试剂
A液
B液
成分
鉴定 物质
0.1 g/mL 0.05 g/mL 0.1 g/mL 0.01 g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液 NaOH溶液 CuSO4溶液
可溶性还原糖
蛋白质或多肽
添加 甲乙两液等量混匀后立即 顺序 使用（现配现用）
浓度 相同点
乙液CuSO4浓度为0.05 g/mL B液CuSO4浓度为0.01g/mL
都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是 0.1g/mL
双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物与碱性硫酸 铜作用，生成蓝紫色的复合物
斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如 下三点不同： ①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL， CuSO4的浓度为0.05g/mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为 0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.01g/mL。
双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中 能和Cu2+作用生成紫色的络化物，这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白 质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2mL 组织 样液
双缩脲试 剂A 2mL
双缩脲试 剂B 3-4滴
（创造碱性条件） （提供Cu2+）
②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液； 双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2＋。
③使用方法不同。使用斐林试剂时，先把NaOH溶液和CuSO4 溶液混合，然后立即使用。使用双缩脲试剂时，先加入NaOH 溶液，然后再加入CuSO4溶液。
一、可溶性还原糖的检测：
（1）原理：还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 （2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为 白色或近于白色的植物组织。 （3）检测过程：
新配制的斐林试剂
浴加热2min
或本尼迪特试剂
观察现象 观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色
结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。
2 ml组织样液
1 ml新配制的斐林试剂
5065℃水浴加热 约2min
浅蓝色
棕色
观察颜色变化 砖红色
【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05 g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色 的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH） 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。
先加入A液1 mL，摇匀， 再加入B液4滴（不能过 量），摇匀
反应 条件
50～65 ℃水浴加热
不需加热，摇匀即可
反应 现象
样液变砖红色沉淀
样液变紫色
斐林试剂用的是甲液和乙液，须现配现用，混合均匀，水 浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液，先加A液，后滴B 液，不用水浴加热。
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴 加，或者久置后才用。
制备组织样液
砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃
洗净、去皮、切块
梨或苹果
研磨
取5g，放入研钵中
过滤
滤液
（用单层纱布）
显色反应
向试管中加入 2ml组织样液
向试管中加入2ml 振荡混匀 50～65℃水
三、蛋白质的检测： 双（双缩脲）子（紫色）弹（蛋白质）
（1）原理：蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色络合物
（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆
（3）检测过程：
3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀
2 ml组织样液
2 ml双缩脲试剂A液，摇匀
wk.baidu.com观察颜色变化
紫 色
双缩脲≠双缩脲试剂
将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。 反应式为:
脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液 橘黄色（或红色）
注意事项：
（1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸 泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切 下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。
（2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解 苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。
使用方法
甲液和乙液混合均匀后方可 使用，且现配现用
使用时先加A液再加B液
反应条件
不 同
反应原理 点
颜色
需50-65℃水浴加热
不需加热即可反应
还原糖中的醛基被Cu（OH） 具有两个以上肽键的化合物
2 悬浊液氧化,Cu（OH）2被 在碱性条件下与Cu2+反应生
还原为砖红色Cu2O沉淀
成紫色络合物
砖红色
紫色
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的 Cu2O沉淀。
-CHO+Cu(OH)2悬浊液
-COOH+Cu2O↓（砖红色）
二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程： 苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪） 切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
振荡混匀
呈现浅蓝色
50～65℃水浴 加热2min
变成砖红色（Cu2O）
还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和 麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量 浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡 蓝色的Cu（OH）2悬浊液。 Cu（OH）2与葡萄糖、 果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红 色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中 含可溶性还原糖。