微生物采样及检测ppt
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微生物标本的正确采集运送及注意事项PPT课件
管理流程不严密
缺乏完善的标本采集、运送和保存流程，以及有效的监督和质量控制 机制。
针对性解决方案提
01
加强人员培训
提高操作人员对微生物标本采集和运送规范的认识和技能水平。
02
完善设备设施
提供适当的采集工具、保存容器和运送设备，确保标本质量。
03
优化管理流程
建立完善的标本采集、运送和保存流程，加强监督和质量控制，确保标
标本标识不清
导致无法准确识别标本来源和 采集时间，影响后续检测和诊 断。
运送条件不符合要求
如温度控制不当、运送时间过 长等，可能导致标本中微生物
的死亡或增殖。
问题产生原因分析
人员操作不规范
缺乏专业培训或经验不足的操作人员可能导致标本采集和运送过程 中的问题。
设备设施不完善
缺乏适当的采集工具、保存容器和运送设备，可能导致标本质量下 降。
微生物标本的正确采 集运送及注意事项 PPT课件
REPORTING
目录
• 微生物标本采集概述 • 微生物标本采集方法 • 微生物标本运送与保存 • 微生物标本处理与检测 • 微生物标本采集运送中常见问题及解决方案 • 总结与展望
PART 01
微生物标本采集概述
REPORTING
采集目的与意义
01
采样方法
使用无菌铁锹或土壤钻进行土壤采 集，将土壤样品装入无菌袋中并标 记相关信息。
人体微生物采集
采样部位选择
根据研究目的选择合适的采样部位，如皮肤、口腔、肠道等。
采样方法
使用无菌棉签或拭子进行皮肤或口腔粘膜的擦拭；或使用无菌粪便收集器进行 肠道微生物的收集。注意避免使用消毒剂或抗生素等药物影响微生物的活性。
标本处理
缺乏完善的标本采集、运送和保存流程，以及有效的监督和质量控制 机制。
针对性解决方案提
01
加强人员培训
提高操作人员对微生物标本采集和运送规范的认识和技能水平。
02
完善设备设施
提供适当的采集工具、保存容器和运送设备，确保标本质量。
03
优化管理流程
建立完善的标本采集、运送和保存流程，加强监督和质量控制，确保标
标本标识不清
导致无法准确识别标本来源和 采集时间，影响后续检测和诊 断。
运送条件不符合要求
如温度控制不当、运送时间过 长等，可能导致标本中微生物
的死亡或增殖。
问题产生原因分析
人员操作不规范
缺乏专业培训或经验不足的操作人员可能导致标本采集和运送过程 中的问题。
设备设施不完善
缺乏适当的采集工具、保存容器和运送设备，可能导致标本质量下 降。
微生物标本的正确采 集运送及注意事项 PPT课件
REPORTING
目录
• 微生物标本采集概述 • 微生物标本采集方法 • 微生物标本运送与保存 • 微生物标本处理与检测 • 微生物标本采集运送中常见问题及解决方案 • 总结与展望
PART 01
微生物标本采集概述
REPORTING
采集目的与意义
01
采样方法
使用无菌铁锹或土壤钻进行土壤采 集，将土壤样品装入无菌袋中并标 记相关信息。
人体微生物采集
采样部位选择
根据研究目的选择合适的采样部位，如皮肤、口腔、肠道等。
采样方法
使用无菌棉签或拭子进行皮肤或口腔粘膜的擦拭；或使用无菌粪便收集器进行 肠道微生物的收集。注意避免使用消毒剂或抗生素等药物影响微生物的活性。
标本处理
各类食品微生物检样样品的采集与制备实例PPT课件
各类食品微生物检样样品的采集与 制备实例ppt课件
目录
• 绪论 • 食品微生物样品采集方法 • 食品微生物样品制备方法 • 各类食品微生物检测实例
01 绪论
食品微生物检测的意义
保障食品安全
通过检测食品中的微生物，可以 及时发现食品中可能存在的有害 微生物，避免因食用被污染的食
品而引发食品安全事件。
检测项目
菌落总数、大肠菌群、副溶血性弧菌等。
检测方法
采用国标规定的微生物培养法、免疫学方法等。
注意事项
采集样品时应避免水产品表面污染，确保无菌操作。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
果蔬类食品微生物检测实例
01
样品采集
采集新鲜、无腐烂的果蔬，如苹果、 香蕉等。
检测方法
采用国标规定的微生物培养法、免 疫学方法等。
03
02
检测项目
大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌等。
注意事项
采集样品时应避免果蔬表面污染， 确保无菌操作。
04
水产品微生物检测实例
样品采集
采集新鲜、无异味的鱼类、贝类等水产品。
检测项目
大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
注意事项
采集样品时应避免污染，确保无菌操作。
肉制品微生物检测实例
样品采集
检测项目
采集新鲜、无异味的肉制品，如猪肉、牛 肉等。
菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌等。
检测方法
注意事项
采用国标规定的微生物培养法、免疫学方 法等。
采集样品时应避免交叉污染，确保无菌操 作。
的质量和安全状况。
采样的过程应随机选择， 避免主观因素影响样品
的代表性。
采样人员应保持公正， 不偏袒任何一方，确保 样品的客观性和真实性。
目录
• 绪论 • 食品微生物样品采集方法 • 食品微生物样品制备方法 • 各类食品微生物检测实例
01 绪论
食品微生物检测的意义
保障食品安全
通过检测食品中的微生物，可以 及时发现食品中可能存在的有害 微生物，避免因食用被污染的食
品而引发食品安全事件。
检测项目
菌落总数、大肠菌群、副溶血性弧菌等。
检测方法
采用国标规定的微生物培养法、免疫学方法等。
注意事项
采集样品时应避免水产品表面污染，确保无菌操作。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
果蔬类食品微生物检测实例
01
样品采集
采集新鲜、无腐烂的果蔬，如苹果、 香蕉等。
检测方法
采用国标规定的微生物培养法、免 疫学方法等。
03
02
检测项目
大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌等。
注意事项
采集样品时应避免果蔬表面污染， 确保无菌操作。
04
水产品微生物检测实例
样品采集
采集新鲜、无异味的鱼类、贝类等水产品。
检测项目
大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
注意事项
采集样品时应避免污染，确保无菌操作。
肉制品微生物检测实例
样品采集
检测项目
采集新鲜、无异味的肉制品，如猪肉、牛 肉等。
菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌等。
检测方法
注意事项
采用国标规定的微生物培养法、免疫学方 法等。
采集样品时应避免交叉污染，确保无菌操 作。
的质量和安全状况。
采样的过程应随机选择， 避免主观因素影响样品
的代表性。
采样人员应保持公正， 不偏袒任何一方，确保 样品的客观性和真实性。
医院环境微生物采样方法及注意事项PPT课件
注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，采样后1 小时内检测。
五、医用物品的实验室监测
由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医 院感染的一个主要途径。 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在 危险因素。如果对污染的医疗物品操作不当， 对医务工作者也是一个危险因素。 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
六、灭菌质量监测（压力蒸汽 灭菌的监测）
（一）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录 灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。 （二）化学监测法：应进行包外、包内化学指示 物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时， 应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品 旁进行化学监测。 （三）生物监测法：生物指示剂有芽孢悬液、芽 孢菌片以及菌片与培养基混装（自含式）的指 示管。
医院环境微生物采样方法及注 意事项
院感科
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空 气、物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施： 一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施。 二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为； 1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
五、医用物品的实验室监测
由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医 院感染的一个主要途径。 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在 危险因素。如果对污染的医疗物品操作不当， 对医务工作者也是一个危险因素。 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
六、灭菌质量监测（压力蒸汽 灭菌的监测）
（一）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录 灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。 （二）化学监测法：应进行包外、包内化学指示 物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时， 应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品 旁进行化学监测。 （三）生物监测法：生物指示剂有芽孢悬液、芽 孢菌片以及菌片与培养基混装（自含式）的指 示管。
医院环境微生物采样方法及注 意事项
院感科
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空 气、物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施： 一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施。 二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为； 1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
微生物标本的采集方法(共52张PPT)
室内面积＞30㎡设4角及中央5点均距墙壁1米
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
临床微生物标本处理及操作流程PPT
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
血培养 Blood Culture
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
如何看待CSF的培养结果？
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。 成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他 肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌 可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
标本采集PPT课件
非越多越好，超过一定的采血量会稀释培养瓶内 的肉汤，影响检测结果。
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
临床微生物标本的采集与送检培训课件
临床微生物标本的采集与送检
41
采集方法
自然排便采集法 自然排便后，挑取其脓 血、粘液部分2-3g，液状粪便取絮状物23ml，盛于灭菌容器内或保存液中送检
直肠拭子方法 如不易获得粪便时，或排 泄困难的患者及婴儿，可用直肠拭子采取， 即以无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入 肛门内4-5cm（幼儿2-3cm）轻轻转动取出， 插入无菌试管内送检。
19
静脉血采集操作步骤及要点
携用物至床边，核对床号、姓名、解释 戴手套，选择静脉，常规系止血带、 消毒皮肤，嘱患者握拳 行静脉穿刺、取血、松止血带、 嘱患者松拳、按压针眼、迅速拔针 穿刺点按压2～3min
临床微生物标本的采集与送检
20
血液注入标本瓶内方法 血清标本：
取下针头，将血液顺试管 壁缓慢注入干燥试管（最常 用）内。
11
标本的运送原则
①所有的标本都必须立即送往实验室，最 好在2h内,保存时间不应超过24h.
②最佳的临床标本送检首先取决于所获取 标本的量.量少的标本应在采集后15-30min 内送检.
③对环境敏感的微生物如志贺菌、奈瑟氏 菌和流感嗜血杆菌（对低温敏感）应立即 处理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、 内耳道标本。
临床微生物标本的采集与送检
24
血标本的微生物学检查
1.采血时间及次数：一般应在抗生素治疗前， 发热初期或高峰时抽血。
a. 伤寒患者应在发热1-2周内抽血 b. 化脓性脑膜炎、鼠疫或野兔热患者应在发热
1-2d内抽血 c. 急性败血症应在24小时内抽血3次或更多次，
并可在不同部位，如左、右手臂或颈部
临床微生物标本的采集与送检
44
痰及上呼吸道标本
采集时间: 痰：一般以晨痰为好；支气管扩张症患者，
临床常见微生物标本的采集和运送 PPT
咽拭子
其他
无菌体液
血液
脑脊液 关节腔积液
胸腹水 其他
微 （D生i物rty实、验D室um常p被、称D为an3gDe实ro验us室）
血液培养标本的采集
采血次数：对于成年患者，应该同时分别不同部位采集 2-3套血标本（一套为一瓶需氧一瓶厌氧），在不同部位 分离到同样菌种才能确定是病原菌。儿童由厌氧菌引起的 血流感染非常罕见，一般无需常规做厌氧培养。
引器至适宜负压(成人：40.0—53.3kPa；小儿：<40.0kPa)。
⑤将一次性吸痰管外包装去除，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，
检查管道是否通畅。
⑥折叠一次性吸痰管末端，插人口腔或鼻腔或人工气道至适宜深
度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。
见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管
注：除婴儿和活动性腹泻患者外不推荐用拭子做常规病原 检查
微生物标本存在问题
感谢您的聆听！
临床常见微生物标本的采集和运送
微生物培养标本采集送检的基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 6.送检标本应注明来源和检验目的
临床微生物标本的种类
带菌体液 痰
尿液 粪便
与吸引器分离(使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15s，吸痰前 后需吸入高浓度氧气1—2min)。
⑦将痰液注入无菌容器(试管)内，如痰液黏稠可用一次性针筒向
吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲人无菌容器(试管)内。
而无色透明、有灰白片状物或黑色小点，有明显食物渣滓、 纸屑灰尘的为不合格标本。
其他
无菌体液
血液
脑脊液 关节腔积液
胸腹水 其他
微 （D生i物rty实、验D室um常p被、称D为an3gDe实ro验us室）
血液培养标本的采集
采血次数：对于成年患者，应该同时分别不同部位采集 2-3套血标本（一套为一瓶需氧一瓶厌氧），在不同部位 分离到同样菌种才能确定是病原菌。儿童由厌氧菌引起的 血流感染非常罕见，一般无需常规做厌氧培养。
引器至适宜负压(成人：40.0—53.3kPa；小儿：<40.0kPa)。
⑤将一次性吸痰管外包装去除，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，
检查管道是否通畅。
⑥折叠一次性吸痰管末端，插人口腔或鼻腔或人工气道至适宜深
度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。
见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管
注：除婴儿和活动性腹泻患者外不推荐用拭子做常规病原 检查
微生物标本存在问题
感谢您的聆听！
临床常见微生物标本的采集和运送
微生物培养标本采集送检的基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 6.送检标本应注明来源和检验目的
临床微生物标本的种类
带菌体液 痰
尿液 粪便
与吸引器分离(使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15s，吸痰前 后需吸入高浓度氧气1—2min)。
⑦将痰液注入无菌容器(试管)内，如痰液黏稠可用一次性针筒向
吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲人无菌容器(试管)内。
而无色透明、有灰白片状物或黑色小点，有明显食物渣滓、 纸屑灰尘的为不合格标本。
微生物标本检验的采集(共77张PPT)
【标本采集注意事项】
• ①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注 入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以 检测所有的菌血症和真菌血症。
• ②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。
• ③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒 战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
•
皮肤消毒程序
• 严格按以下三步法进行：
• ①75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
•
②用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2%碘酊作用30s或碘伏作用
60s，从穿刺点向外以1.5～3cm直径画圈进行消毒
• ③75％酒精脱碘。
•
对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺
支气管刷直接取得标本。 • 3.胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，
有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
• 4.管穿刺法：主要用于厌氧菌培养 • * 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到
刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
【标本采集注意事项】
【标本的送检地点】 • 检验科微生物室，非正常上班时间送检验
科急诊化验室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢 出，避免细菌污染。
上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目 • 上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真
菌涂片、结核菌涂片。 二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
• 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本 ，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应 用前采集。
微生物检验ppt课件
微生物检验ppt课件
目 录
• 微生物检验概述 • 微生物检验的基本原理与方法 • 微生物检验的样品采集与处理 • 微生物检验的常用技术与操作 • 微生物检验的质量控制与保证 • 微生物检验的挑战与发展趋势
01
微生物检验概述
微生物检验的定义与重要性
定义
微生物检验是对环境中的微生物进行定性、定量和鉴定的一种技术，通过特定 的方法和技术手段，对微生物的种类、数量、生理生化特性、遗传物质等进行 分析和研究。
。
04
微生物检验的常用技术与操作
显微镜技术
光学显微镜
01
利用可见光和光学透镜成像，可观察细菌、真菌等微生物的形
态和结构。
电子显微镜
02
利用电子束成像，能够观察更细微的结构，如病毒、细菌的超
微结构等。
相差显微镜
03
利用光的相位差原理，可观察无色透明的微生物，如支原体、
衣原体等。
培养基制备技术
01
补体结合试验
利用补体参与抗原抗体反 应，形成复合物并激活补 体系统，用于检测微生物 抗原或抗体。
微生物的分子生物学检测方法
PCR技术
应用聚合酶链式反应（PCR）技术扩 增微生物特异性基因片段，实现快速 、灵敏的微生物检测。
生物信息学分析
应用生物信息学方法对微生物基因组 数据进行挖掘和分析，揭示微生物种 类、进化关系等信息。
脱羧酶试验等。
酶活性检测
检测微生物产生的特定酶活性 ，如过氧化氢酶试验、氧化酶
试验等。
抗生素敏感性试验
检测微生物对抗生素的敏感性 ，以指导临床用药。
微生物的血清学试验
凝集试验
应用特异性抗体与微生物 抗原结合，形成可见的凝 集现象，用于鉴定微生物 种类。
目 录
• 微生物检验概述 • 微生物检验的基本原理与方法 • 微生物检验的样品采集与处理 • 微生物检验的常用技术与操作 • 微生物检验的质量控制与保证 • 微生物检验的挑战与发展趋势
01
微生物检验概述
微生物检验的定义与重要性
定义
微生物检验是对环境中的微生物进行定性、定量和鉴定的一种技术，通过特定 的方法和技术手段，对微生物的种类、数量、生理生化特性、遗传物质等进行 分析和研究。
。
04
微生物检验的常用技术与操作
显微镜技术
光学显微镜
01
利用可见光和光学透镜成像，可观察细菌、真菌等微生物的形
态和结构。
电子显微镜
02
利用电子束成像，能够观察更细微的结构，如病毒、细菌的超
微结构等。
相差显微镜
03
利用光的相位差原理，可观察无色透明的微生物，如支原体、
衣原体等。
培养基制备技术
01
补体结合试验
利用补体参与抗原抗体反 应，形成复合物并激活补 体系统，用于检测微生物 抗原或抗体。
微生物的分子生物学检测方法
PCR技术
应用聚合酶链式反应（PCR）技术扩 增微生物特异性基因片段，实现快速 、灵敏的微生物检测。
生物信息学分析
应用生物信息学方法对微生物基因组 数据进行挖掘和分析，揭示微生物种 类、进化关系等信息。
脱羧酶试验等。
酶活性检测
检测微生物产生的特定酶活性 ，如过氧化氢酶试验、氧化酶
试验等。
抗生素敏感性试验
检测微生物对抗生素的敏感性 ，以指导临床用药。
微生物的血清学试验
凝集试验
应用特异性抗体与微生物 抗原结合，形成可见的凝 集现象，用于鉴定微生物 种类。
微生物样本采集的标准化与规范化ppt课件
4）咽用压舌板压舌；用无菌拭子在后咽部、扁桃体 和其它感染部位采集标本；怀疑白喉可用无菌拭
子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。 肉汤拭子≤2小时，室温；拭子：≤1小时，室温， 1次/天。
咽拭子标本采集
3. 尿
外尿道多寄居有正常菌群，故采集尿液时 更应注意无菌操作，常用清洁中段尿作为 送检标本。中段尿用于细菌培养，最好用 晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般 为菌落计数≥105CFU/ml。针对于老年人多 重症及卧床患者排尿困难，可相应采用导 尿管采集标本。采集和容器为无菌尿瓶， 标本量≥1毫升，条件≤2小时，室温，1次/ 天。
3）肛拭子：小心将拭子插入肛门，大约在括约肌之 上2-3厘米；轻轻旋转拭子采集肛门隐窝的标本；
要在拭子上明显看到粪便，才能检测腹泻病原体 。拭子采集，≤2小时，室温，1次/天。除了长期
卧床、无便（如中毒性痢疾）患者及频繁腹泻患
者，不推荐做拭子常规培养。用于检测淋病奈瑟 菌、志贺菌、弯曲菌、B群链球菌的肛携带者以及 不能留取粪便标本的患者。可检测霍乱弧菌。
培养瓶消毒程序：
用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消 毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡 皮塞表面残余液体．然后注入血液。
血 培 养 标 本 采 集 流 程 需氧和厌氧血培养瓶
采集次数
急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次； 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次，每次
10. 褥疮
褥疮拭子培养的临床意义不大。应选择供 活检组织或注射器吸出物。以无菌盐水清 洗褥疮表面；如不做活检，用力以拭子抹 取褥疮基底部；将拭子置入肉汤培养基中 。≤2小时，室温，1次/天/来源。
参考文献
汪复 张婴元 吴菊芳等，实用抗感染治疗学 ，北京： 人民卫生出版社，2004，24 ~33.
子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。 肉汤拭子≤2小时，室温；拭子：≤1小时，室温， 1次/天。
咽拭子标本采集
3. 尿
外尿道多寄居有正常菌群，故采集尿液时 更应注意无菌操作，常用清洁中段尿作为 送检标本。中段尿用于细菌培养，最好用 晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般 为菌落计数≥105CFU/ml。针对于老年人多 重症及卧床患者排尿困难，可相应采用导 尿管采集标本。采集和容器为无菌尿瓶， 标本量≥1毫升，条件≤2小时，室温，1次/ 天。
3）肛拭子：小心将拭子插入肛门，大约在括约肌之 上2-3厘米；轻轻旋转拭子采集肛门隐窝的标本；
要在拭子上明显看到粪便，才能检测腹泻病原体 。拭子采集，≤2小时，室温，1次/天。除了长期
卧床、无便（如中毒性痢疾）患者及频繁腹泻患
者，不推荐做拭子常规培养。用于检测淋病奈瑟 菌、志贺菌、弯曲菌、B群链球菌的肛携带者以及 不能留取粪便标本的患者。可检测霍乱弧菌。
培养瓶消毒程序：
用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消 毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡 皮塞表面残余液体．然后注入血液。
血 培 养 标 本 采 集 流 程 需氧和厌氧血培养瓶
采集次数
急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次； 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次，每次
10. 褥疮
褥疮拭子培养的临床意义不大。应选择供 活检组织或注射器吸出物。以无菌盐水清 洗褥疮表面；如不做活检，用力以拭子抹 取褥疮基底部；将拭子置入肉汤培养基中 。≤2小时，室温，1次/天/来源。
参考文献
汪复 张婴元 吴菊芳等，实用抗感染治疗学 ，北京： 人民卫生出版社，2004，24 ~33.
微生物标本采集PPT
四、标本运输 ① 标本采集后需尽快送到实验室； ② 不要冷藏标本。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
四、标本采集—气道吸取标本
一、临床采样指征 有气管插管或气管切开等人工气道患者，无法自行咳
痰，可通过吸痰管从气道吸取标本。
二、标本采集 通过气管内插管将一次性无菌吸痰管推进呼吸道直至
遇到阻力后开始抽吸，留取标本在吸痰杯内。
四、标本采集—气道吸取标本
二、生物标本运送的基本原则
三、微生物实验室对标本的拒收标准
1. 标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时 间，或保存的温度不当。
2. 标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下 送检。
3. 容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容 器非无菌等。
4. 未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培 养送检尿标本；患者信息与标本不符，如女性患者送检 前列腺标本。
四、标本采集—血培养
二、标本采集： 1.菌血症： ① 采血时机：寒战开始时，发热高峰前30-60min内；使用抗菌药物治疗前
采集，如已用药，则在下一次用药之前采集最佳。 ② 采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀
疑有导管相关的血流感染，应避免从留置静脉或动脉导管取血，因为导 管常伴有定植菌存在。 ③ 采血工具：真空血培养瓶，如培养瓶的储存温度为2-8℃，应先复温 30min左右，平衡至室温再采血。同一部位双瓶采集时不建议更换针头。 ④ 采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部位采集 血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。 ⑤ 采血量：影响阳性率的重要因素，过少明显降低阳性率，5-10ml/瓶。 ⑥ 皮肤、血培养瓶消毒：穿刺前皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥。 ⑦ 避免采血管内空气注入厌氧血培养瓶。
《微生物标本采集》ppt课件
《微生物标本采集》ppt课件$number{01}目录•微生物标本采集概述•微生物标本采集前的准备•微生物标本采集方法与技巧•微生物标本的保存与运输•微生物标本的质量控制与安全管理•微生物标本采集的实践应用与案例分析01微生物标本采集概述微生物标本的定义与分类定义微生物标本是指从自然界或人体中分离、培养或收集的微生物及其代谢产物，用于科学研究、教学、临床诊断和生物制品生产等领域。
分类根据来源和性质不同，微生物标本可分为环境微生物、临床微生物、工业微生物和农业微生物等几大类。
微生物标本采集的目的与意义目的获取具有代表性的微生物样本，为后续的实验研究提供可靠的物质基础。
意义微生物标本采集是微生物学研究的基础工作，对于揭示微生物的多样性、分布规律以及与人类和环境的相互关系具有重要意义。
微生物标本采集的原则与要求原则：确保采集的标本具有代表性、典型性和可比性，同时遵循安全、无菌操作的原则。
要求根据研究目的选择合适的采样地点和时间；妥善保存和运输标本，确保其活性不受损失；详细记录采样信息，包括时间、地点、环境参数等。
使用无菌的采样器具，避免交叉污染；02微生物标本采集前的准备123了解患者的病情与病史评估患者体征观察患者的体温、脉搏、呼吸等生命体征，了解患者的病情严重程度。
询问患者病史包括既往病史、家族病史、过敏史等，以评估患者感染的风险和可能的病原体类型。
了解患者症状详细询问患者的症状，如发热、咳嗽、腹泻等，以初步判断感染部位和可能的病原体。
选择合适的标本采集部位根据感染部位选择根据患者的症状和体征，选择合适的标本采集部位，如呼吸道、消化道、泌尿道等。
考虑病原体特性不同的病原体在体内的分布和繁殖部位不同，需根据病原体的特性选择合适的采集部位。
避免污染在选择采集部位时，应尽量避免受到外源性污染，如皮肤表面的污垢、消毒液等。
根据采集标本的类型和后续检测需求，选择合适的容器，如无菌试管、培养皿等。
选择合适的容器准备试剂检查容器与试剂根据检测需求，准备相应的试剂，如培养基、抗凝剂、保存液等。
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一个批号内的产品有的被污染，有的不被 污染，数性量极多，有的较少，种类复杂或单一。
这种不均匀性源于污染源的复杂性。 以活的微生物作为检验对象也是其独特
分布的不特相均同性匀，，检性不测同结菌果种只的代生表长取率样和时死的亡状率态不。尽
活体特征
2 抽样对微生物限度检测的影响
1 微产可生品多物受可外少限来；度微种生类检物多验的样污。的染依特，条污件殊染而性可定有，可非无产，
Partic品ula本ri身ty所of固th有e M。i因cr此ob微ial生L物im限it T度e检sti验ng对象
（是中1不的）确不微定合生的格。品物污是限染一度是个意随检外机验事变对件量。。象污的染特批号性
检样： ▪ 每次最少应分取二瓶（盒）以上的样品共10g或
10ml。 ▪ 中药蜜丸至少应分取4丸以上共10g。
(2)食品取样
Food sampling
中样一般为250克；小样一般25克。
A、食品卫生学微生物检验的取样方案
国际食品卫生委员会（ICMSF）方案 美国食品药品管理局（FDA）方案 世界粮农组织（FAO）方案
B、食物中毒微生物检验的取样方案
当怀疑发生食物中毒时，应及时收集可疑中毒源食品或餐 具，同时收集病人的呕吐物、粪便或血液等。
C、人畜共患病病原微生物检验的取样方案
当怀疑某一动物产品可能带有人畜共患病病原体时，应结 合畜禽传染病学的基础知识，采取病原体最集中、最易检出的组 织或体液送实验室检验。
国际食品卫生规范委员会
三级抽样方案
有一个额外的参数，附加指标值M，用于区分
可接受的临界值和不可接受的值
在任何一个样品中，大于或等于M的值都是不
可接受的 根据被检测到的微生物的浓度，三级抽样方案
将食品分成三级 • 若计数小于m，则可接受
• 若计数大于m，小于M ，则处于可接受的临界
处
例如：大肠杆菌的抽样方案可以是：
取样数 • c是样品检测值超过指标值m的最大可接受
抽样单位数，如果超过该值，则拒绝接受 该批产品 • m是每克样品中相关细菌的合格菌数限量， 即指标值
• 例如：
n=5,c=0，m=0
意味着有5个样品被检验某一病原体，如果有 一个样品中含有该病原体，则该批产品不可接 受。
n=5,c=0，m=102
意味着有5个样品被检验某一病原体，未见到 有超过m值的样品，则该批产品可接受，即合 格。
(1)药品取样
Drug sampling
抽样： ▪ 供试品为随机抽样，一般抽样量为检验用量（2个
以上最小包装单位）的3倍量。 ▪ 对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污
染或对有争议复验的样品应抽取可疑污染或对有 争议复验的原样品。 ▪ 从药品、瓶外观看出发霉、生虫及变质的药品不 必再继续检验，直接判为不合格。
Preparation for Microorganism Examination
1. 准备好所需的各种仪器 2. 准备好所需的各种玻璃器皿 3. 准备好所需的各种试剂、药品、培养基 4. 无菌室灭菌 5. 检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用
二、样品的采集
Sampling
在产品的检验中，样品的采集和处理是任 何检验工作中最重要的组成部分。
第二章 微生物检验的基本程序
Microorganism examination procedures
样品保存 样品处理
采集样品
选择参考菌群 检验前准备
细
大
菌
肠
总
菌
数
群
致病菌
微
分
增
生
离
菌
培
物
养 分
检
离 培
验
养
一
纯化
般
生动血 染 其
程
化物清 色 他 试试学 镜 试
序
验验试 检 验
图
验
报告
一、检验前准备
Effect of Sampling on Microbial Limit Testing
由于以上特殊性，抽样对微生物限 度检测值将产生巨大的影响。当一批产 品无污染时，抽样将不影响检验结果， 当一批产品存在污染时，抽样的样本是 随机变量，抽样的影响如下：
抽样方法：不同的方法对批产品总体的代表性是不 同的，测定值也是有差异的。如可疑样本与随机样本。
International Commission on Microbiological Specification for Food, ICMSF
可疑微生物检测
病原体 指示菌
二级抽样方案
三级抽样方案
选择n值
选择n值和c值
美国食品药品管理局（FDA） 联合国粮农组织（FAO）
二级抽样方案
• 由n、c和m组成 • n是从一批被检查食品中抽取样品的数量 ，
抽样量：抽样量的多少对样本的代表性极为重要。
抽样次数：
3 样品的种类
Sample Type
样品可分为大样、中样和小样。 大样：一整批样品 中样：从样品各部分取得的混合样 小样（检样）:分析用的样品。
抽样量：指从全批产品（或全过程） 抽取的 单位包装。 检验量：是指检验用量，是抽样量各包装的 混合样品的一部分。 检验量与抽样量是两种不同的范畴的量，抽样 量大于检验量。
n=5,c=2，m=10， M=100
意味着有5个样品中有2个样品的大肠杆菌含量 在10-100之间是可接受的。但是如果有3个样品 中，大肠杆菌的含量在10-100之间则不可接受； 或者仅有一个样品的含量超过了100，那么该 批次食品不可接受。
涉及健康危害水平的抽样方案及其应用条件
微生物的危害类型 无直接健康危害
4 采样方法
Sampling Method
• 必须在无菌操作下进行 • 袋装、瓶装、罐装品，应采完整的未开封的样品 • 如果样品很大，用无菌采样器采集 • 固体样品：粉末状的边取边混，小块大包装品从不同
部位的小块取样，大块整体样品从不同部位取样，兼 顾表面和深度 • 半固体样品，用无菌勺从几个部位挖取 • 液体样品振摇混匀，用100mL无菌注射器抽取 • 冷冻品，保持冷冻状态 根据检验目的，确定取样方案
关系到结果的准确性和检验机关决策的正 确性。
采集的样品必须具有代表性，即所取的样 品能够代表产品的所有成分。
科学的取样方案和正确的样品制备方法是必不 可少的条件。
要了解产品加工的批号、原料的来源、加工方 法、保藏条件、运输、销售中的各环节，以及 销售人员的责任心和卫生知识水平等。
无论采取何种方案，都要实行随机抽样
这种不均匀性源于污染源的复杂性。 以活的微生物作为检验对象也是其独特
分布的不特相均同性匀，，检性不测同结菌果种只的代生表长取率样和时死的亡状率态不。尽
活体特征
2 抽样对微生物限度检测的影响
1 微产可生品多物受可外少限来；度微种生类检物多验的样污。的染依特，条污件殊染而性可定有，可非无产，
Partic品ula本ri身ty所of固th有e M。i因cr此ob微ial生L物im限it T度e检sti验ng对象
（是中1不的）确不微定合生的格。品物污是限染一度是个意随检外机验事变对件量。。象污的染特批号性
检样： ▪ 每次最少应分取二瓶（盒）以上的样品共10g或
10ml。 ▪ 中药蜜丸至少应分取4丸以上共10g。
(2)食品取样
Food sampling
中样一般为250克；小样一般25克。
A、食品卫生学微生物检验的取样方案
国际食品卫生委员会（ICMSF）方案 美国食品药品管理局（FDA）方案 世界粮农组织（FAO）方案
B、食物中毒微生物检验的取样方案
当怀疑发生食物中毒时，应及时收集可疑中毒源食品或餐 具，同时收集病人的呕吐物、粪便或血液等。
C、人畜共患病病原微生物检验的取样方案
当怀疑某一动物产品可能带有人畜共患病病原体时，应结 合畜禽传染病学的基础知识，采取病原体最集中、最易检出的组 织或体液送实验室检验。
国际食品卫生规范委员会
三级抽样方案
有一个额外的参数，附加指标值M，用于区分
可接受的临界值和不可接受的值
在任何一个样品中，大于或等于M的值都是不
可接受的 根据被检测到的微生物的浓度，三级抽样方案
将食品分成三级 • 若计数小于m，则可接受
• 若计数大于m，小于M ，则处于可接受的临界
处
例如：大肠杆菌的抽样方案可以是：
取样数 • c是样品检测值超过指标值m的最大可接受
抽样单位数，如果超过该值，则拒绝接受 该批产品 • m是每克样品中相关细菌的合格菌数限量， 即指标值
• 例如：
n=5,c=0，m=0
意味着有5个样品被检验某一病原体，如果有 一个样品中含有该病原体，则该批产品不可接 受。
n=5,c=0，m=102
意味着有5个样品被检验某一病原体，未见到 有超过m值的样品，则该批产品可接受，即合 格。
(1)药品取样
Drug sampling
抽样： ▪ 供试品为随机抽样，一般抽样量为检验用量（2个
以上最小包装单位）的3倍量。 ▪ 对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污
染或对有争议复验的样品应抽取可疑污染或对有 争议复验的原样品。 ▪ 从药品、瓶外观看出发霉、生虫及变质的药品不 必再继续检验，直接判为不合格。
Preparation for Microorganism Examination
1. 准备好所需的各种仪器 2. 准备好所需的各种玻璃器皿 3. 准备好所需的各种试剂、药品、培养基 4. 无菌室灭菌 5. 检验人员的工作衣、帽、鞋、口罩等灭菌后备用
二、样品的采集
Sampling
在产品的检验中，样品的采集和处理是任 何检验工作中最重要的组成部分。
第二章 微生物检验的基本程序
Microorganism examination procedures
样品保存 样品处理
采集样品
选择参考菌群 检验前准备
细
大
菌
肠
总
菌
数
群
致病菌
微
分
增
生
离
菌
培
物
养 分
检
离 培
验
养
一
纯化
般
生动血 染 其
程
化物清 色 他 试试学 镜 试
序
验验试 检 验
图
验
报告
一、检验前准备
Effect of Sampling on Microbial Limit Testing
由于以上特殊性，抽样对微生物限 度检测值将产生巨大的影响。当一批产 品无污染时，抽样将不影响检验结果， 当一批产品存在污染时，抽样的样本是 随机变量，抽样的影响如下：
抽样方法：不同的方法对批产品总体的代表性是不 同的，测定值也是有差异的。如可疑样本与随机样本。
International Commission on Microbiological Specification for Food, ICMSF
可疑微生物检测
病原体 指示菌
二级抽样方案
三级抽样方案
选择n值
选择n值和c值
美国食品药品管理局（FDA） 联合国粮农组织（FAO）
二级抽样方案
• 由n、c和m组成 • n是从一批被检查食品中抽取样品的数量 ，
抽样量：抽样量的多少对样本的代表性极为重要。
抽样次数：
3 样品的种类
Sample Type
样品可分为大样、中样和小样。 大样：一整批样品 中样：从样品各部分取得的混合样 小样（检样）:分析用的样品。
抽样量：指从全批产品（或全过程） 抽取的 单位包装。 检验量：是指检验用量，是抽样量各包装的 混合样品的一部分。 检验量与抽样量是两种不同的范畴的量，抽样 量大于检验量。
n=5,c=2，m=10， M=100
意味着有5个样品中有2个样品的大肠杆菌含量 在10-100之间是可接受的。但是如果有3个样品 中，大肠杆菌的含量在10-100之间则不可接受； 或者仅有一个样品的含量超过了100，那么该 批次食品不可接受。
涉及健康危害水平的抽样方案及其应用条件
微生物的危害类型 无直接健康危害
4 采样方法
Sampling Method
• 必须在无菌操作下进行 • 袋装、瓶装、罐装品，应采完整的未开封的样品 • 如果样品很大，用无菌采样器采集 • 固体样品：粉末状的边取边混，小块大包装品从不同
部位的小块取样，大块整体样品从不同部位取样，兼 顾表面和深度 • 半固体样品，用无菌勺从几个部位挖取 • 液体样品振摇混匀，用100mL无菌注射器抽取 • 冷冻品，保持冷冻状态 根据检验目的，确定取样方案
关系到结果的准确性和检验机关决策的正 确性。
采集的样品必须具有代表性，即所取的样 品能够代表产品的所有成分。
科学的取样方案和正确的样品制备方法是必不 可少的条件。
要了解产品加工的批号、原料的来源、加工方 法、保藏条件、运输、销售中的各环节，以及 销售人员的责任心和卫生知识水平等。
无论采取何种方案，都要实行随机抽样