自身免疫性疾病及其免疫检测 ppt课件

2020/11/13
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检检测测方方法法及及应应用用
• 间接免疫荧光检测，是目前国内外临床常 规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。
• 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达 95%～100%，但其敏感性仅为30%～ 50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除 SLE的诊断。
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抗dsDNA抗体
自身免疫性疾病的主要实验检测
• 自身抗体 • 免疫球蛋白 • 补体 • 淋巴细胞 • 细胞因子
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自身抗体研究发展简史
• 1948年 Haragraves等发现 LE 细胞现象 • 1957年 Holborow等应用IIF检测ANA • 1961年 Beck等发现ANA不同荧光染色模型 • 60–70年代IIF、ID、CIE应用新的自身抗体 • 1979年 Towbin等应用免疫印迹技术检测自身抗体 • 80年代IB、RIP应用蛋白多肽水平认识自身抗原 • 1987年DNA基因重组技术开始应用自身抗体研究 • 近十年应用分子生物学技术
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抗肌动蛋白抗体
见于自身免疫性慢性活动型肝炎
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抗双链DNA抗体
• 抗dsDNA抗体与细胞核DNA（外围区） 脱氧核糖磷酸框架结合。
• 抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标 志抗体。其抗体滴度与疾病的活动程度 有相关性，抗体滴度的动态测定为监控 治疗提供了有效的实验室手段。
PBC
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检测自身抗体常用的方法
间接免疫荧光法（IIF） ELISA 免疫印迹法（Western-blot） 酶免疫斑点法
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二、抗核抗体的检测与应用
抗核抗体::以真核细胞（如HEp-2细胞、 肝细胞）的各种细胞核成分为靶抗原所 检测的自身抗体的总称。
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IIF检测ANA荧光染色模型
细胞核 细胞浆
细胞骨架
细胞周期
均质型 核糖体型 肌蛋白型
中心体型
斑点型 线粒体型 波形纤维蛋白型 纺缍体型
核仁型 高尔基体型 细胞角蛋白型 纺缍丝型
着丝点型 溶酶体型 原肌球蛋白型 中间体型
周边型
颗粒型 纽带蛋白型百度文库
PCNA型
核点型(dots)
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仅见于5%～10%的PSS，男性高于女性 仅见于硬皮病患者，阳性率为4%
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抗PM-Scl（PM-1）抗体
见于重叠综合征（多发性肌炎PM /皮肌炎 DM / 弥漫性PSS ）
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抗Scl-70型
PSS 弥漫型的标志抗体
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增殖细胞核抗原Ⅰ型
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抗核抗体谱
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抗核抗体谱的分类和命名
1. 以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗 Sm、 抗Sa 抗体等；
2. 以相关疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、 抗SS-B 抗体等；
3. 以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线 粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；
4. 以抗原的化学名称分类命名，如抗DNA、 抗RNP、抗组蛋白抗体,抗核小体抗体等。
（PCNA）
SLE特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关
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抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体 抗线粒体抗体（AMA）
SLE标志抗体
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原发性胆汁性肝硬化标志抗体
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抗Jo-1抗体
抗高尔基体抗体
多发性肌炎（PM）标志抗体
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偶见于SLE和SS
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常检测的自身抗体
• 抗核抗体（ANA） • 抗可提取性核抗原抗体（ENA） • 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） • 类风湿因子（RF） • 抗角蛋白抗体（AKA） • 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） • 抗心磷脂抗体（ACLA）
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常见自身免疫性疾病的标志抗体
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精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
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抗核抗体检测方法
间接免疫荧光法 （indirect immunofluorescence, IIF）
酶免疫斑点法 ELISA 免疫印迹法
（Western-blot）
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间接免疫荧光法示意图
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荧光标记抗体
病人血清（待检抗体）
HEp-2细胞 肝组织切片
标志抗体
相关疾病
dsDNA
SLE
Sm
SLE
SSB
SS
着丝点抗体
PSS（局限型）
Scl-70抗体
PSS（弥漫型）
AKA、抗CCP抗体
RA
Jo-1抗体
PM/DM（进行性系统性硬皮病）
高滴度RNP抗体
MCTD
肝肾微粒体抗体（LKM-1） Ⅱ型自身免疫性肝炎
平滑肌抗体（SMA）
Ⅰ型自身免疫性肝炎
AMA（M2）
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抗组蛋白抗体(histone) 抗核小体抗体(nucleosome)
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周边型
可见于胶原病、PBC、CAH等患者
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核点型（DOTS）
抗着丝点型
见于SLE、SS、PBC、风湿病
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PSS局限型标志抗体
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抗原纤维蛋白型 抗RNA多聚酶Ⅰ型抗 体
常见自身免疫性疾病的自身抗体 检测
自身抗体（autoantibody）
是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原 的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要 特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身 抗体(谱)
分类: 脏器特异性自身抗体
脏器非特异性自身抗体
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一、自身抗体的特性
自身免疫性疾病的重要标志 高滴度存在于自身免疫性疾病患者 与疾病的活动性相关 参与免疫病理性损伤
斑点型（nRNP/Sm） 斑点型（SSA/SSB）
高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的 特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特 异2性02。0/11/13
抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼 疮 （100%）。抗SSB抗体几乎仅见 于女性，可出现于SS和SLE。
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均质型
抗dsDNA抗体 抗ssDNA抗体