银耳多糖的制备及一般鉴定
一种非乙醇沉淀的高分子量银耳多糖及其制备方法
一种非乙醇沉淀的高分子量银耳多糖及其制备方法高分子量银耳多糖是一种非乙醇沉淀的多糖，具有多种生物活性和药理作用。
本文将介绍一种制备高分子量银耳多糖的方法。
首先，制备高分子量银耳多糖的原料是银耳菌丝体。
银耳是一种珍稀的食用真菌，其菌丝体富含多糖。
可以通过培养银耳菌丝体来获取菌丝体。
接下来，将获取的银耳菌丝体进行水提取。
将银耳菌丝体研磨成细粉，然后加入适量的水，进行浸泡和搅拌，提取其中的多糖。
水提取可以通过温泉提取法等方式进行。
提取得到的多糖溶液需要进行精制。
首先，可以通过过滤的方式去除杂质和残渣。
然后，可以采用离心分离的方法去除不溶性物质。
离心可以使多糖溶液中的悬浮颗粒沉淀到底部，得到纯净的溶液。
得到的多糖溶液可以进行浓缩。
可以通过真空浓缩法或喷雾干燥法对多糖溶液进行浓缩，得到高浓度的多糖。
浓缩过程中需要注意控制温度和压力，以保证多糖的活性和稳定性。
浓缩得到的多糖溶液可以通过反渗透膜法进行分离纯化。
反渗透膜法可以将溶液中的溶质与溶剂分离开来，得到纯净的多糖溶液。
反渗透膜法需要选择适当的膜材和操作条件，以保证分离效果。
分离纯化得到的多糖溶液可以进行进一步的活性检测和鉴定。
可以使用不同的分析方法，如高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法、核磁共振法等，对多糖进行结构分析和质量评估。
最后，可以将高分子量银耳多糖制备成不同形式的制剂。
可以制备成粉剂、胶囊、片剂、注射剂等，以满足不同的应用需求。
制剂的制备需要考虑多糖的稳定性和活性，选择适当的辅料和工艺条件。
综上所述，制备高分子量银耳多糖的方法包括银耳菌丝体的水提取、溶液的精制、浓缩和纯化、多糖的活性检测和鉴定，以及制剂的制备等步骤。
这种非乙醇沉淀的多糖具有广泛的应用前景，可以用于食品、保健品和药品等领域。
银耳多糖提取工艺的研究
银耳多糖提取工艺的研究银耳多糖提取工艺研究摘要：银耳多糖是一种有着良好保健和滋补功效的天然多糖，它由多种多糖成分组成，如葡萄糖、半乳糖、聚糖等，是人体健康的重要来源。
银耳多糖提取工艺是提取和分离银耳中含有银耳多糖的主要过程，经由不同的提取方法可以从银耳中得到高纯粹的银耳多糖粉末。
本文从四个方面详细介绍了银耳多糖提取工艺的理论基础、主要提取方法、技术参数以及优点和缺点，以便为后续银耳多糖提取工艺改进提供参考。
关键词：银耳多糖；提取工艺；提取方法Abstract: Trametes versicolor polysaccharides are natural polysaccharides with good health care and tonic effects, which are composed of various polysaccharides, such as glucose, galactose, polysaccharides, etc., and are an important source of human health. The extraction process of Trametes versicolor polysaccharides is the main process to extract and separate Trametes versicolor polysaccharides from Trametes versicolor. The highly pure Trametes versicolor polysaccharides powder can be obtained from Trametes versicolor by different extraction methods. This paper introduces the theoretical basis, main extraction methods, technical parameters, advantages and disadvantages of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in detail, in order to provide reference for the improvement of Trametes versicolor polysaccharides extraction process in the future.Keywords: Trametes versicolor polysaccharides; extraction process; extraction methods1、引言银耳多糖是一种良好的滋补和保健品，它是由多种多糖成分构成，其中葡萄糖、半乳糖、聚糖等是主要成分，具有强烈的收敛和胃黏膜防护作用，是常用的护肝、促进新陈代谢等健康保健产品的主要原料，是现在社会受到关注的重要天然产物之一。
实验一银耳多糖的制备及分析
实验一银耳多糖的制备及分析实验目的：1. 学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2. 掌握多糖类物质的提取及一般鉴定方法。
实验原理：银耳（Tremella fuciformis）是我国一种传统的珍贵的真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
多糖（polysaccharides）的纯化方法很多，但必须根据目的物质的性质及条件选择合适的纯化方法。
而且往往用一种方法不易得到理想的结果，因此必要时应考虑合用几种方法。
1、乙醇沉淀法：乙醇沉淀法是制备黏多糖的最常用手段。
乙醇的加入，改变了溶液的极性，导致糖溶解度下降。
供乙醇沉淀的多糖溶液，其含多糖的浓度以1%----2%为佳。
加完酒精，搅拌数小时，以保证多糖完全沉淀。
沉淀物可用无水乙醇、丙酮、乙醚脱水，真空干燥即可得疏松粉末状产品。
2、分级沉淀法：不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分子大小不同的黏多糖。
3、季铵盐络合法：黏多糖与一些阳离子表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化吡啶（CPC）等能形成季铵盐络合物。
这些络合物在低离子强度的水溶液中不溶解，在离子强度大时，这种络合物可以解离，溶解，释放。
本实验采用银耳子实体，经沸水抽提、氯仿—正丁醇法除蛋白质和乙醇沉淀分离可制得银耳多糖粗品，再用CTAB（溴化十六烷基三甲铵）络合法进一步精制可得银耳多糖精品。
然后进行定性和定量测定及杂质含量测定。
实验器材：1、器材（1）布氏漏斗 1 只（2）500ml抽滤瓶 1 只（3）250ml分液漏斗 1 只（4）100ml量筒 2 只（5）10ml量筒 1 只(6) 离心机 1 只（7）烧杯 2 只（8）水浴锅 1 只2、试剂（1）银耳实体：10g（2）2%CTAB:取2gCTAB溶于100ml蒸馏水中，摇匀备用（3）2mol/L 氢氧化钠溶液，6.2mol/L氯化钠溶液（4）氯仿—正丁醇溶液（4：1）（5）95%乙醇（6）甲苯胺（7）乙醚（8）无水乙醇（9）浓硫酸（10）a—萘酚（11）斐林试剂：A液：将34.5g硫酸铜（Cuso4.5H2O）溶于500ml水中B液：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500ml水中，临用时，将A B两液等量混匀。
银耳多糖的制备与分析[整理]
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银耳多糖的制备与分析一、实验目的1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理银耳是真菌的一种，是我国传统的珍贵药材之一，具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分，银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能，抗炎症和抗放射等作用。
1、制备（提取）原理：银耳多糖易溶于水，但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析（鉴定）原理：Molish反应多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下，脱水形成糠醛及其衍生物，其与α-萘酚反应，作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合，这样，糖与浓酸作用后，再与α-萘酚反应，就能生成紫色的化合物。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。
三、实验试剂和器材1、银耳子实体2、乙醇3、乙醚4、丙酮5、Ssvag试剂：氯仿：正丁醇=6、Molish试剂：取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配置，棕色瓶保存。
7、斐林试剂：甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液临用时临时配置，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。
仪器和器材烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平四、实验步骤（一）制备步骤1、取银耳子实体10g加水300mL，直火提取1h，提取过程中不断用玻棒搅拌。
银耳多糖提取实验报告
一、实验目的1. 学习银耳多糖的提取方法；2. 掌握银耳多糖的纯化技术；3. 分析银耳多糖的溶液性质。
二、实验原理银耳多糖是一种具有多种生物活性的大分子物质，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化衰老、降血糖血脂、抗凝血血栓、抗溃疡、促进蛋白质合成、抗病毒、促进神经细胞生长及改善记忆力等多方面的活性。
银耳多糖的提取主要是利用银耳中的多糖类物质，通过物理或化学方法将其从银耳中分离出来。
三、实验材料与仪器1. 材料：椴木银耳、2%的氢氧化钠、1%活性碳、5%的苯酚溶液、标准葡萄糖溶液、硫酸、乙醇、丙酮、乙醚、DEAE-C52、Sevage试剂、0.5mol·L-1盐酸、2mol·L-1 NaCl溶液。
2. 仪器：双重蒸馏水蒸馏器、超级恒温水浴、旋转蒸发仪RE52型、紫外可见分光光度计752N、低速大容量多管离心机LXJ-B型、透析袋、铝锅、搅拌器、天平、精密电子天平、电炉等。
四、实验方法1. 银耳多糖的提取（1）将椴木银耳洗净，浸泡于水中，使其充分吸水膨胀；（2）将膨胀后的银耳煮沸30分钟，以破坏细胞结构，释放出银耳多糖；（3）将煮沸后的银耳过滤，收集滤液；（4）向滤液中加入2%的氢氧化钠，调节pH值至7.0；（5）加入1%活性碳，搅拌30分钟，以去除杂质；（6）过滤，收集滤液；（7）向滤液中加入5%的苯酚溶液，以沉淀银耳多糖；（8）将沉淀物离心，收集沉淀物；（9）将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤，去除杂质；（10）将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干，得到银耳多糖。
2. 银耳多糖的纯化（1）将银耳多糖溶解于水中，配成一定浓度的溶液；（2）将溶液通过DEAE-C52层析柱，以去除杂质；（3）收集层析柱流出液，加入Sevage试剂，以去除杂质；（4）将流出液离心，收集沉淀物；（5）将沉淀物用乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂洗涤，去除杂质；（6）将洗涤后的沉淀物在60℃下烘干，得到纯化的银耳多糖。
银耳多糖制备实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握银耳多糖的提取和分离纯化方法。
2. 了解银耳多糖的理化性质和生物活性。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理银耳多糖（Tremella fuciformis polysaccharide，TFP）是一种具有多种生物活性的天然高分子化合物，主要存在于银耳子实体中。
银耳多糖具有提高免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等生理活性，在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
本实验采用水提醇沉法提取银耳多糖，该方法操作简便、成本低、提取效率较高。
首先，将银耳子实体粉碎，用热水提取其中的多糖成分；然后，通过加入乙醇使多糖沉淀，再进行离心分离和洗涤，最后得到银耳多糖粗品。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 银耳子实体：市售优质银耳- 试剂：95%乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、氯化钠、苯酚、硫酸、活性炭等- 仪器：粉碎机、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、离心机、分析天平、紫外可见分光光度计等2. 实验步骤（1）银耳子实体粉碎：将银耳子实体洗净、干燥、粉碎，过60目筛，备用。
（2）提取：取粉碎后的银耳子实体10g，加入100mL蒸馏水，于80℃恒温水浴锅中提取2小时。
（3）醇沉：将提取液冷却至室温，加入95%乙醇，使溶液中乙醇浓度达到70%，静置过夜。
（4）离心分离：将醇沉后的溶液以3000r/min离心15分钟，取沉淀。
（5）洗涤：用95%乙醇和蒸馏水分别洗涤沉淀3次，每次30分钟。
（6）干燥：将洗涤后的沉淀置于50℃真空干燥箱中干燥，得到银耳多糖粗品。
（7）银耳多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法测定银耳多糖含量。
四、实验结果与分析1. 银耳多糖提取率根据苯酚-硫酸法测定，银耳多糖提取率为4.5%。
2. 银耳多糖的理化性质（1）外观：银耳多糖粗品为白色粉末，无异味。
（2）溶解性：银耳多糖在水中溶解度较好，在乙醇、丙酮等有机溶剂中不溶。
（3）分子量：通过凝胶渗透色谱（GPC）测定，银耳多糖分子量约为10万。
一种银耳多糖及其制备方法和应用
一种银耳多糖及其制备方法和应用一种银耳多糖及其制备方法和应用简介银耳多糖是一种天然的多糖类化合物，具有多种生物活性与保健功效。
本文将针对一种银耳多糖的制备方法和应用进行详细介绍。
制备方法1.采集新鲜银耳并进行清洗。
2.银耳进行研磨处理，使其成为粉末状。
3.将银耳粉末与适量的水进行混合，形成稀浆状。
4.对稀浆进行高温酶解处理，使银耳中的多糖得以释放与提取。
5.经过离心和过滤等步骤，得到银耳多糖的提取液。
6.对提取液进行浓缩、干燥等处理，最终得到粉末状的银耳多糖。
应用医药领域•免疫调节：银耳多糖具有增强机体免疫功能的作用，可以调节免疫系统的功能，提高机体抵抗疾病的能力。
•抗肿瘤：研究发现，银耳多糖可以抑制肿瘤细胞的生长与扩散，具有一定的抗肿瘤活性。
•降血脂：银耳多糖可降低血液中的胆固醇含量，起到降血脂的作用，对于预防心血管疾病具有一定的益处。
食品工业•增稠剂：银耳多糖具有较好的增稠性能，可以作为食品工业中的天然增稠剂，用于制备各种果酱、果冻、糕点等食品，提高食品的质感和口感。
•保湿剂：银耳多糖具有良好的保湿性能，可以作为食品中的保湿剂，增加食品的保鲜期，延长食品的货架寿命。
化妆品•保湿修复：银耳多糖对于皮肤有一定的保湿与修复作用，可以作为化妆品中的保湿修复成分，有效改善干燥、粗糙的皮肤状况。
•抗氧化：研究表明，银耳多糖具有抗氧化性能，可以抑制自由基的产生，减缓皮肤的衰老过程。
养生保健•护肝：银耳多糖对肝脏具有保护作用，可以帮助修复受损的肝细胞，促进肝功能的恢复与代谢废物的排出。
•降糖：研究发现，银耳多糖可以降低血液中的糖分含量，调节血糖水平，对于糖尿病的预防与辅助治疗具有一定的效果。
总结银耳多糖是一种具有广泛应用价值的天然多糖，它在医药、食品、化妆品以及养生保健等领域都发挥着重要作用。
通过简单的制备方法，人们可以充分利用银耳多糖的生物活性与保健功效，为人们的健康和品质生活做出贡献。
医药领域•抗炎作用：银耳多糖具有一定的抗炎作用，可以减轻炎症反应，缓解炎症引起的疼痛和不适。
实验一银耳多糖的制备
汇报人：XX
目录
银耳多糖的简介
01
实验步骤与操作
04
银耳多糖的制备方法
02
实验结果与数据分析
05
实验材料与设备
结论与展望
03
06
银耳多糖的简介
银耳多糖的来源
银耳：一种真菌，广泛用于食品和 药品
制备方法：热水浸提、醇沉淀等
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来源：从银耳子实体中提取
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应用领域：食品、保健品、药品等
实验材料与设备
实验材料
银耳
水
葡萄糖
硫酸
氢氧化钠
实验设备
银耳多糖制备设备：用于提取银耳多糖的专用设备 离心机：用于分离银耳多糖和杂质 烘箱：用于干燥银耳和提取物 搅拌器：用于混合银耳和其他材料
实验步骤与操作
实验准备
实验材料：银耳、 水、葡萄糖等
实验设备：粉碎 机、搅拌器、蒸 发皿等
实验试剂：硫酸、 氢氧化钠等
实验结果与数据 分析
实验结果记录
银耳多糖的得 率：XX%
分子量分布： 主要分布在XX
范围
纯度：通过色 谱分析，纯度
达到XX%
结构表征：通 过红外光谱和 核磁共振氢谱 证实了银耳多 糖的结构特征
数据分析与处理
实验数据收集： 确保数据的准确 性和完整性
数据预处理：清洗、 整理、转换数据， 使其符合分析要求
讨论：对实验结果进行深入讨论，探讨银耳多糖的潜在应用价值和未来研究方向，提出改进和优化实验方法的建议。
结论与展望
结论总结
银耳多糖具有显著的抗氧化 和抗炎作用，对健康有益。
银耳多糖的制备方法得到优 化，提高了提取率和纯度。
银耳多糖咀嚼片的制备工艺的实验方案
银耳多糖咀嚼片的制备工艺的实验方案1、银耳粗多糖的提取1.1 提取的工艺流程1.2 操作要点1.2.1 原料粉碎将市售的银耳干品置于70℃电热鼓风干燥箱中干燥4h，之后机械粉碎机完全粉碎1.2.2 热水浸提将粉碎好的银耳干品以料液比1:60置于3000ml的锥形瓶中，90℃水浴，并不断搅拌浸提8h1.2.3 离心及浓缩将浸提好并已冷却的料液4000r/min，20min离心，收集上清液并浓缩至300ml左右1.2.4 乙醇沉淀向浓缩后的多糖溶液中加入其3倍体积95%乙醇并不断搅拌，隔夜后4000r/min，20min离心得沉淀，复溶，连续3次以上1.2.5 真空冷冻干燥2 银耳多糖咀嚼片的制备2.1 工艺流程2.2 操作要点2.2.1 原辅料准备银耳粗多糖粉碎，过100目筛，备用；辅料按照比例粉碎，过100目筛，备用2.2.2 混合将粉碎、过筛的原辅料按照比例混合均匀2.2.3 制软材待原辅料混合均匀后，缓慢加入润湿剂调和，待物料呈“手握成团，轻压即散”的状态，即制成软材。
2.2.4 造粒与干燥将制好的软材过18目筛造粒，后将湿粒置于不锈钢盘中，铺放均匀，于电热鼓风干燥箱中干燥，每20min翻动一次，干燥2-3h，其水分含量控制在2%2.2.5 整粒与压片干燥好的颗粒过20目筛整粒，之后加入其重量1%的硬脂酸镁作为润滑剂，混合均匀后压片，压制成0.3±0.05g/粒的片剂3 组成配方3.1银耳多糖与奶粉的配比本试验设定了银耳多糖与奶粉质量配比为9:1、8:2、7:3、6:4的4种配比比例，通过风味、色泽等感官评价进行筛选3.2 辅料的选择设定4因素3水平进行正交实验因素水平玉米淀粉A微晶纤维素B木糖醇C柠檬酸D 110% 5% 10%0.5%215%10% 15% 1.0%320%15% 20% 1.5%3.3 润湿剂的选择分别以40%、50%、60%、70%四个不同浓度的乙醇3.4 润滑剂的选择选取1%的硬脂酸镁3.5 干燥温度的选择选取50℃、60℃、70℃三个不同温度对湿粒进行干燥，通过颗粒的感官品质筛选出最佳的干燥温度。
银耳提取银耳多糖工艺流程-12
银耳提取银耳多糖工艺流程一、综述1、银耳银耳又名白木耳，是一种高等真菌，性味甘、平、具有滋阴润肺、养胃生津之功效，自古以来被人们看作是延年益寿的佳品，是世界公认的最珍贵的食用菌和重要药材。
银耳子实体中除银耳多糖物质外，还含有一定量的果胶质、蛋白质、粗纤维等成分，这些物质的存在，将不利于多糖物质的提取分离和纯化。
2、多糖多糖又名多聚糖，通常由多个单糖分子通过缩合、失水从而由甘糖键结合而成的一类分子结构复杂的高分子化合物。
根据其脱水缩合的成分不同，可分为均一性多糖、不均一性多糖。
多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗溃疡、降血糖、调节身体免疫力等多种作用。
3、银耳多糖简介银耳多糖( Tremella polysaccharides，TP) 是银耳的重要活性成分( 约占银耳干重的60%-70% ) ，是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖。
大量研究表明，从银耳中提取分离得到的银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变、抗肿瘤等作用，能增强机体耐缺氧能力，清除自由基。
1.1银耳多糖的组成银耳多糖的主链是由α-(1-3)-糖苷键组成的甘露聚糖，主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是α -(1-3)-甘露聚糖这一共同结构部分。
银耳多糖种类包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白质类物质[3]。
1.1.1酸性杂多糖约占银耳总多糖的70%~75%，为木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸为主的多聚体，中有少量岩藻糖。
1.1.2中性杂多糖约占银耳总多糖的20% 左右，为木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的多聚体。
1.1.3胞壁多糖根据文献报道，一种是从胞壁外层产生的酸性多糖，由D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成；另一种为碱性多糖，由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成。
药物分析论文银耳多糖纯化的检测分析
银耳多糖纯化的检测分析摘要：银耳中含有丰富的银耳多糖（约占银耳干重的60％～70％)。
本实验的主要内容是银耳多糖纯化的检测分析，首先对银耳采用水煮法按料水比1：40(m／v)在100℃水中浸提8h提取银耳多糖。
得到的提取液用硅藻土助虑，然后用1%、0.5%、1.5%的活性炭吸附脱色，最后用透析袋透析48h，透析液经离心、洗涤、真空干燥得到银耳多糖粗品。
经测得银耳多糖粗品的含糖量为31.3%。
关键词:银耳多糖；纯化；活性炭；透析1 前言银耳为真菌类，别名白木耳、雪耳、银耳子等【1】。
银耳所含化学成份比较复杂．主要可分为3大类，即多糖类、脂类和蛋白类(酶、蛋白质、氨基酸)，此外有无机盐、维生素B 族等。
灰分中含S、P、Fe、Mg、Ca、K、Na等成分。
银耳多糖是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖，银耳多糖是银耳的主要有效成分(约占银耳干质量的60％～70％)，据国内外学者研究报道，银耳多糖作为银耳的主要活性成份可分为酸性杂多糖、中性杂多糖(多糖LPS)、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖5大类。
Ukai等(1972)从银耳子实体中分离出3种酸性杂多糖A、B、C。
这3种多糖主要是由木糖、葡萄糖醛酸和甘露糖组成．还有少量葡萄糖及微量岩藻糖，其分子中有典型的乙酰基结构。
Tsubaki等(1977)从银耳的培养液中分离到一种具有高分子量和高分支的酸性杂多糖，主要由D一甘露糖、D一木糖、岩藻糖、D一葡糖醛酸和D一乙酰基构成。
Sone等(1978)从银耳细胞壁中分离到2种胞壁多糖，胞壁外层产生的酸性多糖是由D一葡萄糖醛酸、D一甘露糖和D一木糖组成的．胞壁中的碱不溶多糖由D一葡萄糖、D一葡萄糖醛酸、D一甘露糖和D一木糖组成。
Kakuta等(1979)从银耳细胞深层发酵孢子体中分离到主链结构与子实体多糖相似的酸性杂多糖，仅在支链上稍有些区别：其主链结构都是由糖苷键连接的甘露聚糖，在主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、葡萄糖醛酸和木糖等组成的侧链，表明深层培养的银耳孢外多糖和子实体提取的银耳多糖在组分上无明显的区别。
银耳子实体多糖的分离纯化、结构鉴定、溶液构象和流变学特性研究
银耳子实体多糖的分离纯化、结构鉴定、溶液构象和流变学特性研究银耳(Tremella fuciformis Berk)又称雪耳,是一种珍贵的食药用菌。
银耳多糖是银耳子实体中主要的活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖血脂、抗氧化和延缓衰老等重要的生物活性功能。
本论文采用水提醇沉法获得银耳子实体粗多糖,通过层析柱进一步纯化得到均一多糖组分,并对均一多糖组分初级结构、溶液构象和基本流变行为进行了探讨和研究。
银耳子实体多糖水提液依次用30、60、80 vol.%的乙醇浓度进行分级沉淀,得到了TFP30、TFP60、TFP80三个粗多糖组分,由于TFP60组分含糖量较高,因此选取TFP60组分进行后续分离纯化。
TFP60经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱和Sephacryl S500凝胶柱分离纯化后得到TFP60-2a均一组分。
紫外全扫描表明TFP60-2a不含游离的核酸和蛋白质类物质,对TFP60-2a进行高效液相色谱法测定其相对分子量为6.180×10~5 Da。
TFP60-2a通过红外光谱、气相色谱等手段进行初级结构的解析,结果表明TFP60-2a是一种酸性多糖,主要由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比为0.34:1.07:1.00:1.47:0.46。
利用差示扫描量热仪、刚果红实验、多检测器凝胶渗透色谱、原子力显微镜和扫描电子显微镜等多种方法对多糖TFP60-2a的高级结构进行了初探。
DSC结果表明在30-200℃范围内,TFP60-2a的热稳定较好;刚果红实验结果表明TFP60-2a与刚果红不能形成络合物,未出现三股螺旋构象;通过SEC-MALLS-RI-Vis确定TFP60-2a的重均分子量(M_w)、数均分子量(M_n)、Z均分子量(M_z)分别为1.071×10~6、8.110×10~5、1.324×10~6 Da,多分散系数PDI为1.321,其v值为0.531,推断TFP60-2a在溶液中以随机线团状存在。
实验一银耳多糖的制备
废液倒入专门的废液桶，固体废物和带残渣的废物不得倒入水槽或到处乱扔。
仪器损坏时，应如实向老师报告。
实验室内一切物品，未经本室负责老师批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。
每次实验课由班长负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的安全、卫生和一切服务性的工作。
实验一 银耳多糖的制备
指导老师：杨莉
糖类、脂类、蛋白质、核酸、酶、激素和维生素, etc.
糖的定义：是多羟醛或多羟酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。
常见的生物大分子：
一、简介
是生物体主要的能量来源。
01
可转变为生命所必需的其它物质，如脂类、蛋白质等。
02
可作为生物体的结构物质，如纤维素。
03
可作为细胞识别的信息分子。
1
2
3
实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好，将实验台面抹拭干净，才能离开实验室。
4
生物化学实验室规则
使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告老师，不得擅自动手检修。
04
其它功能。
05
糖类的主要生物学作用
糖的分类
单糖、双糖、多糖
葡萄糖
分子量一般很大，在几万以上。在水中不能形成真溶液，有的根本不溶于水，如纤维素。
物理性质：有旋光性，但无变旋现象。无甜味。
化学性质：无还原性，不能成脎。
多糖的共同特性
02
实训 银耳多糖制备及鉴定
实训银耳多糖制备及鉴定［任务描述］银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌。
银耳多糖主要成分为酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖及酸性低聚糖五类，不含核酸、蛋白质类物质。
银耳多糖具有明显提高机体免疫功能、抑制肿瘤转移、抗炎症、抗放射、抗血栓、降血糖等作用，是一种滋补强壮、扶正固本的保健食品和药物。
本次实训利用酶浸提法，银耳子实体经水浸泡捣碎，酶浸提，乙醇沉析分离可制得银耳多糖粗品，再用CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）络合法进一步精制得银耳多糖纯品并进行多糖的鉴定。
[任务实施］一、准备工作1.建立工作小组，制定工作计划，确定具体任务，任务分工到个人，并记录到工作表。
2.收集银耳多糖制备及鉴定工作中必须信息，掌握相关知识及操作要点，与指导教师共同确定出一种最佳的工作方案。
3.完成任务单中实际操作前的各项准备工作。
（1）材料准备银耳子实体干品20g（2）试剂2mol/L的氢氧化钠溶液、2mol/L氯化钠溶液、2mol/L盐酸溶液、无水乙醇、95%乙醇、浓氨水、乙醚、浓硫酸、α-萘酚、0.5%甲苯胺乙醇溶液、5%三氯乙酸-正丁醇溶液、复合酶制剂（含果胶酶、纤维素酶和中性蛋白酶食品级复合酶）、活性炭、硅藻土、2%十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、蒽酮、正丁醇、吡啶、冰醋酸、苯胺、邻苯二甲酸、葡萄糖标准品。
（3）仪器布氏漏斗、抽滤瓶、分液漏斗、量筒、DEAE-C薄板、离心机、水浴锅、透析袋、滤纸、薄层展开缸、组织捣碎机、分光光度计、不锈钢锅。
二、操作过程（一）操作流程见图1。
（二）操作过程1.银耳预处理选无杂质银耳子实体干品20g放入不锈钢锅中，加水1600mL，于20℃～25℃浸泡30min，置高速组织捣碎机中充分捣碎，制成银耳浆液。
2.酶浸提将银耳浆液用2mol/L盐酸溶液调pH至6.3，加入1%复合酶制剂，50℃下酶促反应40min，迅速升温至80℃灭酶，并保温浸提约1.5h，浸提液于80℃水浴浓缩至糖浆状。
银耳多糖的制备实验报告
银耳多糖的制备实验报告一、实验目的。
银耳多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等。
本实验旨在通过合适的方法从银耳中提取、分离和纯化银耳多糖，掌握多糖提取的基本原理和实验操作技能。
二、实验原理。
1. 提取原理。
- 银耳多糖为大分子化合物，在热水中溶解度增大。
利用热水浸提的方法，可以使银耳中的多糖溶解到水中。
同时，通过调节pH值，可以在一定程度上影响多糖的溶解性和稳定性，有利于多糖的提取。
2. 分离纯化原理。
- 采用乙醇沉淀法分离多糖。
多糖在高浓度乙醇中溶解度降低而析出。
还可以利用透析的方法去除小分子杂质，因为透析袋具有一定的截留分子量，小分子物质可以透过透析袋，而多糖分子由于分子量较大被截留在透析袋内。
三、实验材料与仪器。
1. 材料。
- 银耳（干品）、乙醇（分析纯）、氢氧化钠、盐酸等试剂。
2. 仪器。
- 电子天平、恒温水浴锅、离心机、透析袋、旋转蒸发仪、真空干燥箱等。
四、实验步骤。
1. 银耳预处理。
- 取适量干银耳，用清水冲洗干净，去除表面杂质。
然后将银耳剪成小块，置于烧杯中。
- 加入适量蒸馏水浸泡2 - 3小时，使银耳充分吸水膨胀。
这一步的目的是为了便于后续的提取操作，因为吸水膨胀后的银耳细胞结构更容易被破坏，多糖更容易溶出。
2. 热水浸提。
- 将浸泡后的银耳及浸泡液转移至圆底烧瓶中，按照一定料液比（如1:30，g/mL）加入蒸馏水。
- 用氢氧化钠调节pH值至8 - 9，在90 - 100°C的恒温水浴锅中加热提取2 - 3小时。
在此过程中，要不断搅拌，以促进多糖的溶出。
较高的温度和碱性环境有利于破坏银耳的细胞壁结构，使多糖更好地溶解到水中。
3. 离心分离。
- 提取结束后，将提取液冷却至室温，然后转移至离心管中。
- 在离心机中以4000 - 5000r/min的转速离心10 - 15分钟，分离出上清液。
离心的目的是去除残渣等不溶性杂质，得到含有多糖的上清液。
4. 乙醇沉淀。
- 量取上清液的体积，缓慢加入无水乙醇，使乙醇的终浓度达到70% - 80%（v/v）。
银耳多糖的制备及一般鉴定
银耳多糖的制备及一般鉴定【实验目的】1．学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2．学习多糖类物质的一般鉴定方法。
3. 掌握真菌多糖类粗提取的具体步骤及相应原理。
【实验原理】银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖，因其细胞或组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，第一步就是去除表面脂质, 常用醇或醚回流脱脂。
第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取多糖，这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质。
杂质主要是无机盐，低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。
第三步则要除去这些杂质，对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去；对于大分子杂质可用酶消化(如蛋白酶．木质素酶) ，乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。
多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤，常用方法有S e v a g e法、三氯乙酸法、酶解法、三氟三氯乙烷法等。
（1）S e v a g e法是除蛋白的经典方法，主要是利用蛋白质在氯仿中变性的特点，用氯仿:正丁醇=5:1或4:1的二元溶剂体系按1:5加入到多糖提取液中，混合物经剧烈振摇后离心，蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶物而分离，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。
（2）三氯乙酸法利用三氯乙酸，在低温下搅拌加入到多糖提取液中，直到溶液不再继续混浊为止离心弃沉淀，即可达到脱蛋白的目的。
存在于溶液中的三氯乙酸经中和后，通过透析或超滤等方法除去。
（3）酶解法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。
（4）三氟三氯乙烷法将三氯乙烷按1:1的比例加到多糖提取液中，在低温下搅拌约10min，离心得上层水层，水层继续用上述方法处理几次即得，此法效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。
实验二银耳多糖含量的测定
五、实验操作
• 1、标准曲线的制作 • (1) 加样：
葡萄糖溶液(ml) 0.00 蒸馏水(ml)
蒽酮(ml)
0.10 0.90
3.00
0.20 0.80
3.00
0.40 0.60
3.00
0.60 0.40
3.00
0.80 0.20
3.00
1.00
3.00
• (2) 将加好的样品混匀，沸水浴10 min，室温冷却，于620 nm处比色。
•
• • • • •
3、测定方法：取试管6 支，其中3 支各精密加入对照品溶液1ml ，另3 支各精密加入供 试品溶液1ml ，置37±0.5 ℃水浴中，保温5 分钟，精密加入预热至37±0.5 ℃的牛血红 蛋白试液5ml ，摇匀，并准确计时，在37±0.5 ℃水浴中反应10分钟。立即精密加入5% 三氯醋酸溶液5ml ，摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液备用。另取试管2 支，各精密 加入血红蛋白试液5ml ，置37±0.5 ℃水浴中保温10分钟，再精密加入 5％三氯醋酸溶 液5ml ，其中1 支加供试品溶液1ml ，另1 支加对照样品盐酸溶液1ml ，摇匀，过滤， 弃初滤液，取续滤液，分别作为供试品和对照品的空白对照，按照分光光度法在275nm 的波长处测定吸收度，算出平均值ＡS 和Ａ，按下式计算。 Ａ×Ｗｓ×ｎ 每g含蛋白酶活力单位数＝ ─────────── Ａs×Ｗ×10×181.19 式中：ＡS 为对照品的平均吸收度；Ａ为供试品的平均吸收度；Ｗs ＝1 ml 对照品溶液 中含酪氨酸的量，μg ；W＝供试品取样量，g ；n＝供试品的稀释倍数。 在上述条件下，每分钟能催化水解血红蛋白生成1 μmol 酪氨酸的酶量，为一个蛋白酶 活力单位。
三、仪器、试剂与药品
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银耳多糖的制备及一般鉴定
【实验目的】
1．学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2．学习多糖类物质的一般鉴定方法。
3. 掌握真菌多糖类粗提取的具体步骤及相应原理。
【实验原理】
银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖，因其细胞或组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，第一步就是去除表面脂质, 常用醇或醚回流脱脂。
第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取多糖，这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质。
杂质主要是无机盐，低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。
第三步则要除去这些杂质，对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去；对于大分子杂质可用酶消化(如蛋白酶．木质素酶) ，乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。
多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤，常用方法有S e v a g e法、三氯乙酸法、酶解法、三氟三氯乙烷法等。
（1）S e v a g e法是除蛋白的经典方法，主要是利用蛋白质在氯仿中变性的特点，用氯仿:正丁醇=5:1或4:1的二元溶剂体系按1:5加入到多糖提取液中，混合物经剧烈振摇后离心，蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶物而分离，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。
（2）三氯乙酸法利用三氯乙酸，在低温下搅拌加入到多糖提取液中，直到溶液不再继续混浊为止离心弃沉淀，即可达到脱蛋白的目的。
存在于溶液中的三氯乙酸经中和后，通过透析或超滤等方法除去。
（3）酶解法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。
（4）三氟三氯乙烷法将三氯乙烷按1:1的比例加到多糖提取液中，在低温下搅拌约10min，离心得上层水层，水层继续用上述方法处理几次即得，此法效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。
本实验采用固体法培养获得的银耳子实体，经沸水抽提、三氯甲烷一正丁醇法除蛋白质和乙醇沉淀分离可制得银耳多糖粗品。
然后进行定性和定量测定及杂质含量测定。
【实验方法】
1．提取
1.1 银耳5g，剪碎，放入1000ml烧杯中。
加500 ml蒸馏水，加一匙NaHCO3 (可加速溶化)，沸水提取1.5h，同时搅拌。
提取过程中可以少量加水。
1.2 三层纱布过滤，得提取液（约200ml）。
将提取液移至分液漏斗中。
1.3 向提取液中加1/4体积的氯仿：正丁醇溶液（V:V=4:1）。
振摇15min，离心（5 min）。
离心后，溶液分为三层，吸取最上层清液，得到去蛋白的多糖液。
1.4 向去蛋白的多糖液加3倍体积的95%乙醇，玻棒搅拌既得多糖沉淀。
1.5 用乙醇和丙酮分别洗涤沉淀，干燥，得粗提取物。
2．含量测定（未做）
完成以上操作后，将各试管放入沸水中煮10min，然后冷至室温。
在490nm下，测定吸光度，绘制标准曲线，根据标准曲线计算样品多糖的浓度。
另外以Folin酚法测定银耳多糖样品中蛋白质含量，以紫外分光光度法测定样品中核酸的含量。
【讨论】
实验中，我们首先用沸水提取银耳多糖，并在水中加入一匙碳酸氢钠。
加入少量碱是因为对于银耳多糖这种含有糖醛酸的中性多糖，它们在碱液中有更高的提取率，但要控制碱的浓度，碱性较强时多糖可能会水解。
在沸水煮银耳提取多糖的1.5小时内，要不停搅拌提取液，以防底部银耳碎片粘于烧杯底部变糊，同时可适量补充水分。
得到银耳多糖的胶体溶液后，用三层纱布过滤可去除大分子溶质从而纯化多糖提取液（黄色透明液体，约200ml）。
用S e v a g e法除蛋白，将氯仿：正丁醇溶液与提取液充分混匀，以使提取液中的蛋白质成分与氯仿：正丁醇溶液充分接触而生成凝胶物，不断振摇分液漏斗后，液体变为白色的乳状液，而不分层。
离心混合液后，可能是因为离心时间不够充分（离心5min），溶液较为清晰的分成了3层，但在多糖层和蛋白层之间，还有变形的、未完全沉淀的蛋白质杂质。
取离心后的上层清液加入95%乙醇后，搅拌即可得乳白色多糖沉淀。
用乙醇和丙酮洗涤多糖沉淀可除去一些大分子杂质，但在洗涤时，由于对多糖沉淀搅拌较重，沉淀团块被打碎，有部分多糖损失。
倒去洗涤液，我们得到了乳白色的多糖团块。
最后，感谢老师为我们提供了这次学习、实践的机会，感谢您们利用周末时间帮助我们完成实验。