病理切片技术培训2011年8月22日
病理科见习报告
艰辛知人生，实践长才干——附属医院实训总结临床专业 6班学号：时光飞逝，为期两周的见习期就此结束了。
有诸多不舍，诸多感慨！实习是一件很具意义的事情，在实习中能够学到书本上没有的知识，增加社会实践能力，我们必须在实践中来检验自己所学的知识，尽管有时候会认为，书本上的知识根本用不上，但是，具备了知识也就等于具备了学习的能力。
我见习的单位是坐落绿城南宁的广西医科大学第一附属医院，这是一家在广西壮族自治区数一数二的大医院，宏伟的门诊大楼，划分的清晰的住院楼，优美的绿化环境，医生来自五湖四海的优秀院校，但是这样一个地方让身为医学生的我受益匪浅！这次暑期社会实践，我没有选择直接与病人解除，而是选择进入病理科见习。
因为我认为，病理是诊断的金标准，能让我了解病情本质、发展、过程、转归。
我这次的实践内容一共分为三大部分1.熟悉医院环境，了解工作流程。
我第一天和同一批的同学熟悉了整个病理科的环境，以便于以后几天实践活动的顺利进行。
同时我认真听取了医院里老医生的介绍，熟悉了病理科各部门的职责和分部间的工作联系，了解其之间的相关配合及工作流程。
在熟悉病理科基本情况的基础上，我便按计划开始了我的工作。
在熟悉病理科的过程中，我发现虽然每个部门的工作性质都有一些差别，但是只有各部门各司其职并且合理配合才能使整个病理科正常运转。
病理科分为若干个室，分别为取材室，细胞制片室，包埋室，切片室，免疫组化室，采图室，档案室和医生诊断办公室。
2.见习期间，每天八点半准时到达医院，帮助医生和工作人员完成一系列取材、细胞制片、包埋、切片、免疫组化、采图、归档和诊断工作。
虽然说我能做的不多，但是在医生和老师的热心帮助下，我了解了一块组织从取材到制成切片的一系列过程，并且亲眼看到不少之前只在书本上见过的病变组织，诸如畸胎瘤、中央型肺癌、子宫颈锥切、肝癌等。
并且，我了解到，为了更好地为患者和临床服务，提高病理诊断水平，避免不必要及纠纷和医疗差错的产生，要经常与有关临床医师进行临床病理会诊与沟通，了解临床医师的诊断思考和病人情况，并向临床医师通报病理诊断的疑难情况、初步拟诊、延期发报告的原因及术中冰冻会诊注意事项等。
病理科常规切片(HE切片)质量PDCA管理循环案例示范
病理科常规切片（HE切片）质量PDCA管理循环案例示范病理切片质量的好坏关系到病理诊断质量和水平的高低，正确的病理诊断往往取决于准确的显微镜下观察，因此病理切片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性，甚至会带来错误的结果。
一张好的病理切片与标本的固定、取材、脱水、包埋、切片、染色等环节有密切的关系。
过去，我科一直严抓病理切片质量，每月都随机抽查30例常规切片进行质量评价，总体来说切片质量较高，基本达到诊断的要求。
但是每月的切片质量检查或多或少总发现存在一些缺陷，如切片刀痕、裂隙、气泡、胶液外溢等。
目的：通过检查常规切片质量，发现存在影响切片质量的问题，查找原因，提高切片质量。
数据收集：参照《临床技术操作规范病理学分册》中的常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准（见表1），对今年1-7月常规病理切片进行质量分级评定（每月随机抽查30例常规切片，见表2），总的优级率87.1%，优良率97.6%，总体达标。
表1 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准优质标准满分（分）质量缺陷减分组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数10 组织稍不完整：减1～3分；不完整：减4～10分；未达到规定面数：减5分切片薄(3～5μm)，厚薄均10 切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～匀10分；厚薄不均匀：减3～5分切片无刀痕、裂隙、颤痕10 有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断：减2分；有刀痕、裂隙、颤痕，影响诊断：减5分切片平坦，无皱褶、折叠10 有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2分；有皱褶折或折叠，影响诊断：各减5分切片无污染10 有污染：减10分无气泡（切片与载玻片间/盖片与切片、载玻片间），盖片周围无胶液外溢10 有气泡：减3分；胶液外溢：减3分透明度好10 透明度差：减1～3分；组织结构模糊：减5～7分细胞核与细胞浆染色对比清晰10 细胞核着色灰淡或过蓝：减5分红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5分切片无松散，裱贴位置适当10 切片松散：减5分；切片裱贴位置不当：减5分切片整洁，标签端正粘牢，编号清晰10 切片不整洁：减3分；标签粘贴不牢：减3分；编号不清晰：减4分合计100注：切片质量分级标准：?①甲级片：≥90分（优）；②乙级片：75～89分（良）；③丙级片：60～74分（基本合格）；④丁级片：≤59分（不合格）表2 2012年1-7月常规切片质量抽查情况注：每月随机抽查30例常规切片。
病理科常规切片(HE切片)质量PDCA管理循环案例示范
病理科常规切片（HE切片）质量PDCA管理循环案例示范病理切片质量的好坏关系到病理诊断质量和水平的高低，正确的病理诊断往往取决于准确的显微镜下观察，因此病理切片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性，甚至会带来错误的结果。
一张好的病理切片与标本的固定、取材、脱水、包埋、切片、染色等环节有密切的关系。
过去，我科一直严抓病理切片质量，每月都随机抽查30例常规切片进行质量评价，总体来说切片质量较高，基本达到诊断的要求。
但是每月的切片质量检查或多或少总发现存在一些缺陷，如切片刀痕、裂隙、气泡、胶液外溢等。
目的：通过检查常规切片质量，发现存在影响切片质量的问题，查找原因，提高切片质量。
数据收集：参照《临床技术操作规范病理学分册》中的常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准（见表1），对今年1-7月常规病理切片进行质量分级评定（每月随机抽查30例常规切片，见表2），总的优级率87.1%，优良率97.6%，总体达标。
表1 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准优质标准满分（分）质量缺陷减分组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数10 组织稍不完整：减1～3分；不完整：减4～10分；未达到规定面数：减5分切片薄(3～5μm)，厚薄均匀10 切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～10分；厚薄不均匀：减3～5分切片无刀痕、裂隙、颤痕10 有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断：减2分；有刀痕、裂隙、颤痕，影响诊断：减5分切片平坦，无皱褶、折叠10 有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2分；有皱褶折或折叠，影响诊断：各减5分切片无污染10 有污染：减10分无气泡（切片与载玻片间/盖片与切片、载玻片间），盖片周围无胶液外溢10 有气泡：减3分；胶液外溢：减3分透明度好10 透明度差：减1～3分；组织结构模糊：减5～7分细胞核与细胞浆染色对比清晰10 细胞核着色灰淡或过蓝：减5分红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5分切片无松散，裱贴位置适当10 切片松散：减5分；切片裱贴位置不当：减5分切片整洁，标签端正粘牢，编号清晰10 切片不整洁：减3分；标签粘贴不牢：减3分；编号不清晰：减4分合计100注：切片质量分级标准：①甲级片：≥90分（优）；②乙级片：75～89分（良）；③丙级片：60～74分（基本合格）；④丁级片：≤59分（不合格）表2 2012年1-7月常规切片质量抽查情况注：每月随机抽查30例常规切片。
病理生理学切片实训报告
一、实训目的通过本次实训，使学生掌握病理生理学切片的制作过程，熟悉病理生理学切片的观察方法，提高学生对病理生理学知识的理解和应用能力。
二、实训时间2021年X月X日三、实训地点病理生理学实验室四、实训内容1. 病理生理学切片的制作2. 病理生理学切片的观察3. 病理生理学切片的绘图与分析五、实训过程1. 病理生理学切片的制作（1）切片材料的准备：选取合适的病理生理学组织，如肝、肾、心脏等，将其置于固定液中固定24小时。
（2）切片的制作：将固定好的组织进行石蜡包埋，切片厚度约为5微米，进行脱蜡、水化、染色等步骤。
（3）切片的封片：将染色后的切片封片，置于显微镜下观察。
2. 病理生理学切片的观察（1）显微镜观察：使用光学显微镜观察切片，注意观察组织的形态、结构及病变情况。
（2）高倍镜观察：使用高倍显微镜观察切片，进一步观察病变的细节。
3. 病理生理学切片的绘图与分析（1）绘图：根据观察结果，使用绘图工具绘制切片的形态图。
（2）分析：结合病理生理学知识，对切片的病变进行分析，探讨病变的原因、发展过程及治疗措施。
六、实训结果与分析1. 切片制作结果本次实训中，切片制作过程顺利进行，切片质量良好，无明显气泡、杂质等。
2. 切片观察结果（1）肝切片：观察发现，肝细胞排列紊乱，部分肝细胞出现脂肪变性、坏死等病变。
（2）肾切片：观察发现，肾小球纤维化，肾小管萎缩，肾间质水肿等病变。
（3）心脏切片：观察发现，心肌细胞排列紊乱，部分心肌细胞出现纤维化、坏死等病变。
3. 切片分析结果（1）肝病变：肝细胞脂肪变性、坏死可能与长期饮酒、高脂饮食等因素有关，需调整生活习惯，控制血脂水平。
（2）肾病变：肾小球纤维化、肾小管萎缩可能与高血压、糖尿病等疾病有关，需积极治疗原发疾病，控制血压、血糖。
（3）心脏病变：心肌细胞纤维化、坏死可能与冠心病、高血压等疾病有关，需调整生活习惯，控制血压、血脂，必要时进行手术治疗。
七、实训总结通过本次实训，我对病理生理学切片的制作、观察及分析有了更深入的了解。
病理技术员培训计划
病理技术员培训计划一、前言病理技术员是医院中非常重要的职业，他们负责收集、处理和分析各种疾病标本，为医生提供病理诊断的依据。
为了提高病理技术员的专业素质和工作能力，本培训计划旨在为病理技术员提供系统的培训和学习机会，以提升其在临床工作中的技能和能力。
二、培训内容1. 理论知识学习病理技术员需要掌握丰富的医学知识，包括病理学、解剖学、生物化学等相关知识。
在培训过程中，将对病理技术员进行系统的理论知识学习，包括病理标本的采集、处理、储存和分析等方面的知识。
培训内容将涵盖各类疾病的基本病理变化，各种检验方法及技术，常见病理诊断的标本处理。
2. 实际操作技能培训病理技术员需要具有一定的操作技能，包括标本的取材、固定、包埋、切片等工作，以及病理标本的显微镜检查和病理诊断报告的编写等技能。
在培训中，将提供实际操作的训练机会，包括标本的处理和显微镜检查等，以提高病理技术员的实际操作技能。
3. 专业知识更新医学科学是一个日新月异的学科领域，病理技术员需要不断更新自己的专业知识，以跟上学科的发展和变化。
在培训中，将为病理技术员提供专业知识的更新学习机会，包括参加各类学术交流会议、病理学论坛等，以及阅读最新的医学文献、期刊和书籍等。
4. 专业素质培养病理技术员需要具有一定的专业素质，包括对工作的认真负责、严谨细致的工作态度、团队合作精神等。
在培训中，将针对病理技术员的专业素质进行培养和提高，包括临床工作中的职业道德规范、沟通技巧、协作能力等方面的培训。
三、培训流程1. 培训前的准备在培训开始前，将对所有参加培训的病理技术员进行基本的背景调查和初步的能力评估，以确定其学习能力和课程安排。
同时，将要求参训学员认真学习预备知识，为将来的学习做好充分准备。
2. 理论知识学习培训开始后，将先对学员进行系统的理论知识学习，包括病理学的基本概念、病理标本的采集和处理、各种疾病的病理变化等方面的知识培训。
学员将参与课堂教学、讲座、研讨会等形式的学习活动，以获取丰富的理论知识。
临床病理学技术培训PPT组织切片与疾病诊断
对使用的化学品要有充分的了解，包括其性质、毒性、安全防护措施等。使用化学品时要 佩戴好个人防护用品，并在通风良好的环境下进行操作。对于易燃、易爆、有毒有害的化 学品要特别小心，严格按照规定进行存储和使用。
废弃物处理
实验过程中产生的废弃物要分类收集和处理。对于有害废弃物，如废液、废固等，要按照 国家和地方的相关规定进行处置，不能随意排放或丢弃。对于可回收的废弃物，如玻璃器 皿、金属器械等，要进行清洗和分类回收。
培训效果评估方法介绍
问卷调查法
通过设计问卷，收集学员对培训 内容、方式、效果等方面的评价
和建议。
考试测评法
设置与培训内容相关的考试题目 ，检验学员对知识的掌握程度和
应用能力。
实际操作评估法
观察学员在实际操作中的表现， 评估其技能水平和操作能力。
学员反馈收集及整理分析
设立反馈渠道
通过线上或线下方式，设立专门的反馈渠道，方 便学员随时提出意见和建议。
组织切片制备流程
取材
根据病变部位和性质，选择合适的 取材方法和器械，取得具有代表性 的组织块。
固定
将组织块放入固定液中，使组织细 胞内的蛋白质变性凝固，保持细胞 形态和结构。
脱水
用不同浓度的酒精逐渐脱去组织块 中的水分，以便于后续的包埋和切 片。
包埋
将脱水后的组织块放入石蜡或树脂等 包埋剂中，制成一定形状和大小的蜡 块或树脂块。
脱水
用梯度酒精逐渐脱去组织 块中的水分，以便于后续 的透明和浸蜡。
操作规范及标准流程介绍
透明
用透明剂替换出组织块中 的酒精，使组织块变得透 明。
浸蜡
将透明的组织块放入熔化 的石蜡中，使石蜡逐渐渗 入组织块内部。
包埋
病理诊断培训
感染病例分析
感染类型
感染病例可分为细菌、病毒、真菌等类型，每种类型具有不同的 临床表现和诊断方法。
病原体检测
通过微生物培养、核酸检测等方法检测病原体，为感染病例提供 确诊依据。
组织病理学诊断
观察感染病灶的组织形态学改变，结合免疫组化等技术辅助诊断 。
遗传病例分析
1 2
遗传方式
遗传病例可分为单基因遗传病和多基因遗传病， 每种遗传方式具有不同的遗传规律和临床表现。
理论考试是评估病理诊断培训效果的重要手段之一，通过考试可以检验学员对 病理诊断基础知识的掌握程度。
详细描述
理论考试通常涉及病理学基础、病理诊断技术、病理组织学等方面的知识，通 过选择题、简答题、论述题等形式进行考核，以测试学员对病理诊断理论知识 的理解和应用能力。
实践操作考核
总结词
实践操作考核是评估病理诊断培训效果的关键环节，通过实 际操作可以检验学员对病理诊断技术的掌握程度和操作技能 。
04
病理诊断案例分析
肿瘤病例分析
肿瘤分类
01
根据组织形态和生物学行为，将肿瘤分为良性、交界性和恶性
，每种类型具有不同的治疗方案和预后。
肿瘤标志物
02
通过检测肿瘤标志物，如癌胚抗原、甲胎蛋白等，有助于肿瘤
的早期发现和诊断。
病理切片诊断
03
通过病理切片观察肿瘤细胞形态、排列和浸润情况，结合免疫
组化等技术辅助诊断。
据。
02
病理诊断基础知识
人体组织结构
人体组织类型
人体组织分为四大类，包括上皮组织 、结缔组织、肌肉组织和神经组织。 每种组织类型都有其特定的结构和功 能。
组织结构特点
组织功能
每种组织在人体中都有其特定的功能 ，了解这些功能有助于理解病变发生 的原因和机制。
病理科见习报告
艰辛知人生，实践长才干——附属医院实训总结临床专业 6班学号：时光飞逝，为期两周的见习期就此结束了。
有诸多不舍，诸多感慨！实习是一件很具意义的事情，在实习中能够学到书本上没有的知识，增加社会实践能力，我们必须在实践中来检验自己所学的知识，尽管有时候会认为，书本上的知识根本用不上，但是，具备了知识也就等于具备了学习的能力。
我见习的单位是坐落绿城南宁的广西医科大学第一附属医院，这是一家在广西壮族自治区数一数二的大医院，宏伟的门诊大楼，划分的清晰的住院楼，优美的绿化环境，医生来自五湖四海的优秀院校，但是这样一个地方让身为医学生的我受益匪浅！这次暑期社会实践，我没有选择直接与病人解除，而是选择进入病理科见习。
因为我认为，病理是诊断的金标准，能让我了解病情本质、发展、过程、转归。
我这次的实践内容一共分为三大部分1.熟悉医院环境，了解工作流程。
我第一天和同一批的同学熟悉了整个病理科的环境，以便于以后几天实践活动的顺利进行。
同时我认真听取了医院里老医生的介绍，熟悉了病理科各部门的职责和分部间的工作联系，了解其之间的相关配合及工作流程。
在熟悉病理科基本情况的基础上，我便按计划开始了我的工作。
在熟悉病理科的过程中，我发现虽然每个部门的工作性质都有一些差别，但是只有各部门各司其职并且合理配合才能使整个病理科正常运转。
病理科分为若干个室，分别为取材室，细胞制片室，包埋室，切片室，免疫组化室，采图室，档案室和医生诊断办公室。
2.见习期间，每天八点半准时到达医院，帮助医生和工作人员完成一系列取材、细胞制片、包埋、切片、免疫组化、采图、归档和诊断工作。
虽然说我能做的不多，但是在医生和老师的热心帮助下，我了解了一块组织从取材到制成切片的一系列过程，并且亲眼看到不少之前只在书本上见过的病变组织，诸如畸胎瘤、中央型肺癌、子宫颈锥切、肝癌等。
并且，我了解到，为了更好地为患者和临床服务，提高病理诊断水平，避免不必要及纠纷和医疗差错的产生，要经常与有关临床医师进行临床病理会诊与沟通，了解临床医师的诊断思考和病人情况，并向临床医师通报病理诊断的疑难情况、初步拟诊、延期发报告的原因及术中冰冻会诊注意事项等。
解剖学切片与剖析培训课件
包埋
将脱水后的材料放入包埋剂中，形成硬块，以便于 切片。
切片
将包埋后的材料进行切割，形成薄片。
染色
对切片进行染色，以便更好地观察其结构和形态。
切片在解剖学中的重要性
观察组织结构和形态
通过制作切片并观察其结构和形态， 可以深入了解生物或组织的生理和病 理状态。
辅助疾病诊断
科学研究
在解剖学和其他生物学领域的研究中 ，切片是一种重要的实验手段，可以 帮助科学家深入了解生物的结构和功 能。
切片还可以用于虚拟仿真教学，通过数字化技术和虚拟现实 技术，模拟真实的切片操作和观察过程，提高医学教育的质 量和效率。
药物研发与实验
在药物研发和实验中，切片技术可用于研究药物的疗效和 作用机制。通过对实验动物的组织切片观察，可以了解药 物对组织结构的影响，为新药研发提供依据。
切片技术还可用于药物毒理学研究，通过对实验动物的组 织切片观察，了解药物对器官和组织的毒性作用，为药物 安全性评价提供重要信息。
理和查找。
切片护理注意事项
01
02
03
04
定期检查
定期检查切片的状况，如发现 损坏或变质应及时处理。
清洁维护
定期对切片进行清洁和维护， 保持切片表面的整洁和清晰度
。
避免污染
在护理过程中要保持清洁卫生 ，以防细菌、霉菌等污染影响
切片质量。
防止破损
在操作和观察切片时要小心谨 慎，以防损坏或破裂。
切片损坏与修复
切片技术是病理学诊断的重要手段之 一，通过对病变组织进行病理切片， 观察其微观结构，确定病变的性质、 类型和程度，为临床治疗提供依据。
病理切片技术具有较高的准确性和可 靠性，对于肿瘤、炎症、感染等疾病 的诊断具有重要意义。
手术室病理学培训大纲
手术室病理学培训大纲1. 培训目标- 了解手术室病理学的基本概念和原理- 熟悉手术室病理学操作流程和技术要点- 掌握手术室病理学样本处理与取材技巧- 研究手术室病理学常见疾病的鉴别与诊断方法2. 培训内容2.1 手术室病理学基础知识- 手术室病理学的定义和发展历程- 手术室病理学在临床工作中的作用和意义- 手术室病理学与其他病理学领域的关系2.2 手术室病理学操作流程和技术要点- 手术室病理学的标本采集和处理流程- 手术室病理学的快速冰冻切片技术- 手术室病理学的术中病理会诊技术2.3 手术室病理学样本处理与取材技巧- 不同组织类型的样本取材方法和注意事项- 样本保存与运送的基本原则和方法- 样本切片和染色技术的操作步骤和要点2.4 手术室病理学常见疾病的鉴别与诊断方法- 常见恶性肿瘤的术中病理学鉴别和诊断方法- 常见炎症性病变的术中病理学鉴别和诊断方法- 其他常见疾病的术中病理学鉴别和诊断方法3. 培训方式- 理论研究：通过讲座、研讨会等形式进行手术室病理学基础知识的研究和讨论- 实践操作：组织参与手术室病理学样本处理、取材和切片染色等操作，以提高实际操作能力- 病例分析：结合实际病例进行病变的鉴别与诊断讨论，增进实际应用能力4. 培训考核- 培训结束后进行闭卷考试，考核培训期间所学内容和实操能力- 考核合格者颁发手术室病理学培训结业证书5. 培训时长- 培训总时长约为40个学时，包括理论研究、实践操作和病例分析等环节6. 培训人员要求- 医学背景，具有基本病理学知识和实践经验者优先- 具备手术室工作经验者优先考虑以上为手术室病理学培训大纲的主要内容和安排，详情请参考培训教材和实际培训安排。
半夏切片培训计划
半夏切片培训计划一、培训目的半夏切片是中医药临床诊断与治疗的重要手段之一，其准确与否直接影响到临床的诊断与治疗效果，因此对临床医生进行半夏切片的培训具有重要意义。
本次培训旨在提高临床医生对半夏切片的操作技能和解剖知识，使其能够准确、快速地进行半夏切片，为临床诊断和治疗提供有力支持。
二、培训对象本次培训对象为临床医生、卫生技师等相关人员，参加培训必须具备中医药临床相关专业的背景知识和基本手术技能。
三、培训内容1. 半夏切片的概念和作用2. 半夏切片手术准备3. 半夏切片手术操作技巧4. 半夏切片手术后处理四、师资力量我院医务部将邀请有丰富临床经验、熟悉半夏切片技术的知名中医专家进行培训授课，确保培训质量和效果。
五、培训时间和地点培训时间：拟定为两天一夜培训地点：我院培训中心六、培训方式1. 理论教学2. 实操训练3. 现场观摩4. 互动交流七、培训材料1. 专业教材2. 切片手术器械3. 实训模型4. 电子课件5. 其他辅助教学材料八、培训效果评估1. 组织考试，考核学员掌握的培训内容和技能水平2. 学员出具学习成果报告3. 举办培训结业典礼，颁发结业证书九、组织保障1. 健全的组织机构和领导小组2. 确保培训场地、器材的到位3. 做好学员的接待和后勤保障工作十、培训宣传1. 制定培训宣传策略2. 制作培训宣传资料3. 协调媒体宣传，提高培训知名度和影响力十一、安全保障1. 严格做好培训场地和器材的安全检查2. 培训期间，确保学员和工作人员的人身安全以上为我院半夏切片培训计划，如有不足，欢迎各位领导和专家提出建议和意见。
愿我们的培训取得圆满成功，谢谢！。
病理科免疫组化技术员培训
病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范一、病理科免疫组织化学技术员培训规范：凡新入我科的病理技术员均需进行免疫组化理论知识的学习、培训，经考核合格、具备病理技术员技士资质后方能从事免疫组织化学染色。
二、病理科免疫组织化学染色操作规范1.免疫组织化学染色前的准备事项(一)组织切片的制备常规切片脱蜡至水（组织固定需用10%中性甲醛）(二)抗体的选择、稀释和保存（1）选择抗体应先了解其反应谱和适用条件〔包括适用切片(石蜡切片抑或冷冻切片)、稀释度和温育时间等〕。
（2）对于未曾使用过的新抗体，应按照有关说明书的提示，以几个不同的稀释度对适宜检材(已知阳性切片/涂片)进行预试验;根据染色阳性表达的程度和检材背景着色程度，确定用于染色的最适稀释度（3）抗体的原液应于分装后置于一20℃冷室中保存，切勿反复冻存(以免效价降低)。
（4）抗体的工作液可置于4℃冰箱中保存。
（5）抗体的稀释。
(1)一般用0.01M PBS(生理盐水磷酸盐缓冲液)，pH值7.2。
(2)或用0.05M TBS(生理盐水三经基氨基甲烷缓冲液)，pH值7.6。
(3)必要时可按需要加适量小牛血清清蛋白。
(三)被检测组织内抗原的修复（1）经4%中性甲醛之类含醛基固定剂固定的组织，其切片中的抗原决定簇因醛的交联作用而被封闭，从而影响抗原一抗体反应。
进行免疫组织化学染色前，对于组织切片进行抗原修复处理，会使组织中的固有抗原尽量多地暴露出来，提升了大部分检测抗体的阳性率和反应强度。
有的抗体不需要进行抗原修复。
应按抗体试剂说明书的提示决定是否进行被检测组织内的抗原修复。
（2）抗原修复缓冲液。
(l)一般为0.01M柠檬酸缓冲液(2.1g柠檬酸溶于100ml蒸馏水中，用2M NaOH调节pH值至6.0)。
(2)有些抗体需要特殊修复缓冲液，如高PH值的EDTA(50mM Tris.，10mM EDTA，pH9.0)，或商品化的该高，10mM EDTA，pH9.0)，或商品化的该高pH修复液等。
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二 、 石 蜡 切 片 制 作 步 骤
取
固 脱
材
定 水
透
包 切 染 封
明
埋 片 色 片
㈠ 取材
※材料的好坏直接影响到切片的质量。
注意事项
①当怀疑病畜死于传染病、侵袭病或中毒病的 时候，应由县(市、区)动物疫病预防控制中心 进行诊断，做不出结果时，迅速采取病理材料 送交省、地、市动物疫病预防控制中心检验室、 农业大学动物病理诊断实验室或其他检验机构 进行检查。 ②病理组织学检验材料需及时采取,及时固定, 以免自溶出现死后变化,影响诊断。
活的细胞或组织多为无色透明，各种组 织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差， 在一般光镜下不易清楚区别出， 组织离开机体后很快就会死亡和产生组 织腐败，失去原有正常结构，因此，组 织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等 步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认 其形态结构。
光学显微镜的制片技术方法可分为两大类：
非切片法 切片法
非切片法：是用物理或化学的方法，使细胞彼 此分离，如有分离法、涂布法、压碎法等。非 切片法的操作比较简单，能保侍细胞的完整， 但是细胞之间的正常位置往往被更动，无法反 映细胞之间的正常联系。它可以与切片法配合 使用，各取其长处。
切片法：是利用锐利的刃具将组织切成极薄的 片层，材料须经过一系列特殊的处理，如固定、 脱水、包埋、切片、染色等，过程十分繁复。 在制作过程中，还要经过一系列的物理和化学 的处理，这些处理方法可根据各种不同材料的 性质要求进行合理选择。切片法虽然工序繁琐， 技术复杂，但是，它最能保持细胞间的正常的 相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原 貌，所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。
洗、浸泡。
⑷所取组织应包括病变部位和邻近的健康的部位, 这样有利于对照鉴别。 另外,所取组织应包括器官的基本或重要结 构。如肾脏应包括皮质、髓质、包膜和肾盂、 肾乳头;胃肠道应包括粘膜至浆膜各层结构。
⑸固定液要充分，一般为组织块体积的10倍。 固定所用的容器应宽大,以使组织块在固定过程 中不被挤压变形并得到充分固定。瓶口不能过小,以 免固定的组织变硬取不出来。同时注意组织块与容器 不要贴壁。 ⑹对于柔软或薄的组织,为了防止固定后的扭 曲.变形， 可在切取时将其平摊在吸水纸上，再固定。肺组织常 漂浮，不宜固定，最好用注射器抽吸肺内气体，以利 固定液侵入。
⑧病理报告：病理诊断报告在收到病理标 本后五个工作日发出，须加做特殊染色和/ 或免疫组化染色者除外。
㈡ 固定
固定是将需保留或制作成标本的脏器 或病变组织浸入固定液内，使组织的 形态结构尽可能保持在生前的状态， 组织细胞的物质成分变为不溶性，而 得到保存，且能适于某些研究程序。
1、固定的意义与作用
在一般情况下,凡是需要制作成大体标 本和显微镜切片标本的各种病理组织, 都要先行固定。固定是切片制作的关 键。固定不良在以后任何阶段皆不能 补救。 因此,可以说没有良好的固定基础,就不 可能制作出质量可靠的组织学切片,反 映不出被研究的组织细胞的生化特点, 以致影响诊断结果。
⑴杀死细胞, 改变组织细胞膜的通透性, 使染料 或作用物能进入细胞内。 ⑵抑制自溶和腐败。 ⑶固定使细胞内蛋白质、脂肪、糖等各种成 分沉 淀凝固,从而保持其原有的结构和性质。 ⑷固定也可使细胞从正常溶胶状态→凝胶状 态，从而增加组织的硬度，有利于制片。
③用作病理组织学检验的组织病料应选取病变 最典型、最明显的部位，并应包括病灶和其邻 近的正常组织两部分。这样便于对照观察,更 主要的是看病灶周围的炎症反应变化。 ④采取的病理组织材料,要包括各器官的主要 结构, 如肾应包括皮质、髓质、肾乳头及被膜。
⑤选取病料时,切勿挤压（可使组织变形）、 刮抹（使组织缺损）、冲洗(水洗易使红细胞 和其他细胞成分吸水而胀大, 甚至破裂)。 ⑥选取的组织不宜太大,长宽厚一般为 1.5×1.5×0.5(厘米)。尸检取标本时可先切取 稍大的组织块,待固定一段时间(数小时至过夜) 后,再修整成适当大小,并换固定液继续固定。 常用的固定液是10%福尔马林,固定液量为组 织体积的5~10倍。容器可以用大小适宜的广 口瓶。细小组织（小于5mm、纤维镜活检标 本）及脆而易碎的小组织，请先附贴于滤纸上 再放入固定液中，以免遗漏。
3、固定的方法：
最常用的是浸泡固定， 特殊情况下采用灌注固定 和蒸气固定。
4、固定液的选择与应用
用于固定组织标本的试剂很多。由各种固 定剂配制的固定液已多达上百种。 不同固定液有不同的作用。因而,在应用固 定液时应根据组织标本的性质、观察或研究的 不同目的恰当地选择所需的固定液。
在选择与应用固定液时应注意下述问题： ⑴固定液的性质与作用 各种固定剂，其化学性质及固 定作用不同。有的为氧化剂,有的为还原剂；有的能够 凝固或沉淀蛋白,固定脂肪或糖元；有的则能溶解或 破坏脂肪及糖元；有的能引起组织收缩，有的则引起 组织膨胀；对组织的渗透压力及硬化程度的大小等也 不相同；有的不仅能够保存组织标本的形态结构及某 些物质成分,而且还有媒染作用，有的则无明显的媒染 作用,甚至妨碍某些染料的着色。 所以，在固定时，必须注意固定液的化学性质与 固定作用，选择最有利于保存或保护所要研究的化学 物质的固定剂。如要显示多糖类及核酸DNA或RNA 物质，须用Carnoy氏液。
光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒 手切片，但是由于组织块往往十分柔软，切削 很困难，而且无法得到十分菲薄的切片，因此 必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支 持作用，并将整个组织块包住，然后再用精密 的切片机制作切片，才能获得良好的效果。这 种方法称为包埋法，包埋的物质称为包埋剂。 常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等， 水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同， 分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等， 它们各有长处，可以根据需要选用，但是使用 得最多的还是石蜡切片技术。
二、目前实验室常用的检测技术
血清学检测技术 分子生物学检测技术 病原学检测技术 病理学检测技术
三、病理学及检测技术
1、病理学在医学及兽医学中的地位
病理学是基础医学与临床医学之间的桥梁
动物学. 解剖学 组织胚胎学.生理学 生物化学微生物学
病理学
预防兽医学(寄.传) 临床兽医学(内.外.产) 公共卫生学
屠宰猪肝脏HEV免疫组化染色，被膜下散在 肝细胞核和少量细胞浆呈阳性反应细胞（免 疫组化染色，40×）；
The expression of HEVAg in nuclear of some liver cell of slaughtered swine (Immunohistochemical staining. 40×)；
电镜细胞化学是在光镜组织化学基础上发展起来 的一门生物技术.(作为一门学科)它是在超微
水平上观察细胞内化学物质,并在此基础上 进一步阐明其生理和病理状态下的生化代 谢改变。
在光学显微镜下所见的结构,称为显微结构.。
现一般光学显微镜最大分辨率约为0.2μm,最 大放大倍数为1400～1500倍。细胞内的结构 如线粒体、中心体、核仁、高尔基体、染色体 等都大于0.2μm。因此能在光学显微镜下观 察到。
在电子显微镜下所显示的结构一般称为超微结 构(US)。目前常用于超微结构研究的工具有电
子显微镜、X光衍射仪等。电子显微镜分辨率 一般可达0.12nm。最高的分辨率已经接近 了对单个原子(一个埃A左右)的分辨.(放大倍 数高达80—100万倍).
狂犬病毒
第二部分
石蜡切片制作技术
一、目的意义
（三）病原型别多、变异快
口蹄疫：7个型
多个亚型
流 感：A B C 3个型。亚型：HA有16种亚 型，H1～16 ，NA有9种亚型，N1～9 。 蓝耳病： 1996年美洲型 2006年变异株 2009年欧洲型
（四）2010年列入国家监测计划的动物疫病
高致病性禽流感、新城疫、口蹄疫、高致病性 猪蓝耳病、猪瘟、布鲁氏病、牛结核病、血吸 虫病、狂犬病 外来动物疫病：牛海绵状脑病（疯牛病）、牛 传染性胸膜肺炎、牛瘟、小反刍兽疫、痒病、 非洲猪瘟、蓝舌病。 注：结核病、狂犬病、牛海绵状脑病均可通过病 理学的方法确诊，而且目前牛海绵状脑病只能 通过病理学的方法确诊
屠宰猪肝脏中散在HEV免疫组化强阳性反应 细胞（免疫组化染色，40×）； The expression of HEVAg in liver cell of slaughtered swine. （Immunohistochemical staining.40×）
（3）原位杂交
荧光原位杂交
（4）超微病理学（电镜细胞化学）
病理知识和病理诊断是临床疫病诊断治疗的依据。
在临床医疗中，病理诊断是诊断疾病的最可靠 的方法，有“金标准”之称（确诊）。 病理医生在国外被称为“医生中的医生”。 一个医院的水平取决于诊断水平，而诊断水平 取决于病理诊断水平（动物医学病理要向人医 病理学习）。
2、病理检测技术
（1）常规病理学检测技术 利用疫病引起的动物组织发生特征性的 病变和病理变化对动物疫病进行诊断。 狂犬病、结核、牛海绵状脑病、肿瘤（马 立克、白血病、禽网状内皮增生症以及其他 的常见肿瘤。）发现新疫病。
⑦记录与存放。取材完毕后应在固定容器表面贴 好标签，表明标本名称和编号，有的瓶口可用蜡 严密封闭。同时，应对被检组织进行核对，整理 好的尸检记录及有关材料,并在送捡单中说明送检 的目的和要求。标本来源：系指手术切除的部位 或器官。如“结肠癌”、“子宫肌瘤”等等。应 填写“结肠”、“子宫”，不要填写“术中”； 送检标本容器上应贴有病畜的种类和标本部位， 同一患畜同时取有数种组织，或同一组织由不同 部位取出，应分盛容器，分别注明，并在病理送 检单上注明送检标本的份数及部位；标本瓶口宜 大，便于标本的取出。病理检查申请单是医疗举 证的重要文书，是病理诊断中心永久保存的医 学 资料，请务必保持清洁、完整无损，请勿涂改。 严禁用病理检查申请包裹标本容器送检。