M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用

M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用

【摘要】目的：观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和组胺H1受体拮抗扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。方法：运用RM6240生理信号采集处理系统以及张力换能器记录不同药物作用下的回肠平滑肌肌张力变化。结果：加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g，再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g

（p<0.001）；加入组胺后肌张力为2.12±0.80g，加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g（p<0.001），加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性，再加阿托品后仅只略微降低其张力。结论：乙酰胆碱为M胆碱受体激动药，组胺为H1受体激动药，氯化钡为肌肉兴奋剂，三者均可使肠道平滑肌收缩。阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受的作用。

体部分减弱BaCl

2

【关键词】：平滑肌；张力曲线；拮抗剂；激动剂；M胆碱受体；H1受体

1. 材料

1.1 实验动物：

豚鼠

1.2 药品与试剂

未标记的激动剂：A，B，C。

10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液；

10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液；

10g/L BaCl2溶液。

拮抗剂：1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液；10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液。

台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。

1.3 仪器：

离体装置：双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器、微距调节夹恒温水浴箱多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统

2.实验方法

2.1 准备：

清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度；

检查温度：37℃±0.5 ℃；

检查通氧: 单个小泡溢出;

打开电脑：选中桌面RM6240图标，选择“实验”---生理科学实验---肠肌2.2 实验步骤：

清醒豚鼠

轻击头部后股动脉放血

打开腹腔

取出回肠

制作回肠标本

一端固定在通气钩上

置含有37℃台氏液的浴槽中

通氧

另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接

连接RM6240生物信号采集处理系统

选择“实验”---生理科学实验---肠肌

归零

调节换能器张力（1g）

稳定20分钟

2.3 制作回肠标本：

找到回盲部，在离回盲部1cm处剪断回肠，取出回肠约15cm左右一段，置于盛有台氏液的培养皿中，将回肠剪成1-1.5cm的小段。

2.4 回肠标本张力调节

将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上，放入麦氏浴槽中，选中桌面RM6240图标选择“实验”--生理科学实验--肠肌，工具--快速归零（按右上快速归零Z）---调“ 0”

将RM6240系统处在记录状态；将回肠标本的上端连线打一活结，勾在张力换能器的悬臂梁钩上，旋转调节螺母，调张力至1g。（见左上显示平均1g左右）2.5 实验观察记录

待离体回肠稳定10min，记录一段正常收缩曲线。

加A药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，加入拮抗剂阿托品 0.3ml,曲线稳定后加A药，记录一段曲线后，用台氏液连续冲洗浴槽3次换液，稳定5min。

加B药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线稳定后，加入拮抗剂氯苯那敏0.3ml,观察5min，加B药，换液，稳定5min。

加C药0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线稳定后，加入拮抗剂阿托品0.3ml,观察3min，加C药，记录曲线

2.6 统计

参考《生理科学实验教程》 p30应用Excel进行数据统计分析，t-检验。以x ±s 表示

3.实验结果

3.1 A药对离体豚鼠回肠作用加入A药后平滑肌肌张力显著上升，至达到高峰后波动性下降并维持一定强度，张力大于初始张力，并呈现显著波动性。加入

阿托品后肌张力显著减小，肠肌张力波动消失成平稳直线。再加入A药对肌张力无影响，肌张力曲线保持平直。下图是一次实验中的记录曲线：

对数据进行分析后，得出加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g，再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g（p<0.001）；

3.2 B药对离体豚鼠回肠作用加入B药后肌张力显著上升，再急剧下降，而后缓慢上升在并维持一定肌强度。加入氯苯那敏后曲线下降，再加入B药不能改变曲线的平直状态。下图是一次实验中的记录曲线：

对数据进行分析后，可知加入B后肌张力为2.12±0.80g，加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g（p<0.001）。

3.3 C药对离体豚鼠回肠作用加入C药后肌张力显著上升，再急剧下降，而后稍有上升后呈波动性缓慢下降。加入阿托品后曲线轻度缓慢下降，张力下降至不再降低而呈波动性。再加入C药肌张力波动程度增大，频率也增高。下图是一次实验中的记录曲线：

总之，加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性，再加阿托品后仅只略微降低其张力。

4.讨论

4.1 A、B、C药的鉴别与结果分析据实验证据可得出以下结论：A药为乙酰胆碱，B药为组胺，C药则为氯化钡。从曲线上看A药具有兴奋肠道平滑肌作用，而这种肠道平滑肌兴奋作用能够被Ｍ型胆碱能受体拮抗剂阿托品阻断。因此推断A药为可作用于M型胆碱能受体激动剂乙酰胆碱。同样的，B药的肠道平滑肌兴奋作用也能够被H1受体拮抗剂扑尔敏阻断，因此B药为H1受体激动剂组胺。而C药能够兴奋平滑肌，但是不能完全被阿托品阻断，因此C为氯化钡，而且第二次加入C药效果没有第一次那么强，猜测是因为钡离子的毒性作用。

4.2 激动剂与拮抗剂的作用机制：乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M-受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。阿托品：为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体结合，从而阻断乙酰胆碱对M-受体的激动作用。

组胺:组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H1受体结合，通过激活G 蛋白-磷酸脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，平滑肌收缩。氯苯那敏（扑尔敏）：为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。

氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，另一方面BaCl2兴奋胆碱能N受体， N受体有神经型和肌肉型， N 受体激动时改变Na+、 K+、 Ca2+通道的电生理学特性，使肌肉收缩。