M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用

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药物对离体豚鼠回肠收缩的作用

药物对离体豚鼠回肠收缩的作用

实验报告
针对实验数据,进行结果描述 针对实验数据, 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如:[1]陆源,夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社, 2004,245-247
肠管
观察项目
记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 基础张力 加入10 换液。 加入 -2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录曲线,作用明显时换液。 ,观察并记录曲线,作用明显时换液 重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml, 剂量,待收缩到最高点时加入 重复以上 剂量 阿托品 , 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后, 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后,再加入相同量的 Ach,观察并记录收缩曲线,换液。 ,观察并记录收缩曲线,换液。 加入10 换液。 加入 -2 g/L组胺 0.3ml,作用明显时迅速换液。 组胺 ,作用明显时迅速换液 预先加入10 扑尔敏0.2 , 预先加入 -2 g/L扑尔敏 ml,5 min后(不换液)加入同量组 扑尔敏 后 不换液)加入同量组 换液。 胺,观察并记录收缩曲线 ,换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml,当作用达到最高点,加入1 g/L阿托 加入 溶液 ,当作用达到最高点,加入 阿托 品 0.2 ml,观察并记录收缩曲线。 ,观察并记录收缩曲线。
标本准备( ) 标本准备(2)
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 角处分别用缝针穿线 并打结。一端系于浴槽固定钩 分别用缝针穿线, 角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩 另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 张力换能器的悬臂梁上 上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器

离体豚鼠回肠mine

离体豚鼠回肠mine

离体豚⿏回肠mine药物对离体豚⿏回肠的作⽤摘要⽬的观察胆碱能神经递质⼄酰胆碱(acetylcholine,Ach)和局部炎症介质组胺(histamine,His)对肠道平滑肌M胆碱受体的激动作⽤,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作⽤。

⽅法在离体肠平滑肌灌流装置中,测量⼄酰胆碱、组胺、阿托品和扑尔敏对豚⿏回肠平滑肌张⼒的影响。

结果以阿托品,扑尔敏分别作⽤于回肠平滑肌,其受⼄酰胆碱、组胺的激动作⽤较回肠直接受Ach、His激动时作⽤弱,收缩幅度明显减⼩,BaCl2的强激动作⽤不能被阿托品阻断。

结论Ach、His 能兴奋肠道平滑肌,其激动作⽤能分别被拮抗剂阿托品和扑尔敏阻断;阿托品不能阻断BaCl2对肠道平滑肌的强烈激动作⽤。

关键词⼄酰胆碱阿托品组胺扑尔敏1. 材料和⽅法1.1 材料豚⿏1.2仪器离体装置:浴槽(20ml),恒温⽔浴箱。

张⼒换能器与多道⽣理信号采集处理系统的连接。

RM6240⽣物信号采集处理系统部分1.3 药品 10-2 g/L氯⼄酰胆碱、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L组胺磷酸盐, 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。

1.4 ⽅法1.4.1 实验装置准备和仪器参数设置麦⽒浴槽加固定量的台⽒液(10ml左右)→恒温37℃→95% O2+5%CO2⽓体→通⽓速度,⽓泡⼀个个逸出为宜→固定张⼒换能器→参数设置1.4.2 标本准备清醒豚⿏→击头部处死→打开腹腔→找到回盲部→在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右⼀段→置于盛有台⽒液的培养⽫中,将回肠剪成1-1.5cm 的⼏⼩段,冲洗⼲净→取⼀段肠管置于盛有台⽒液的培养⽫中,在其两端对⾓处分别⽤缝针穿线,并打结。

⼀端系于浴槽固定钩上,另⼀端系在张⼒换能器的悬臂梁上。

1.4.3 通氧→连接PCLab⽣物信号采集处理系统→⽂件---打开配置---药物对离体豚⿏平滑肌的作⽤→配置---零点设置→调节换能器张⼒(2-3 g)→稳定20-30分钟2. 观察项⽬2.1标本在浴槽内稳定10~30min后,记录⼀段正常收缩曲线,依次向麦⽒浴槽内加下列药物。

药物对豚鼠离体回肠的作用

药物对豚鼠离体回肠的作用
ASB240U生物信号系统 实验模块 药理学实验
药物对离体肠管的作用 参数:电流:DC 灵敏度:3.8克 滤波:50HZ 走纸速度:12.5s/div
(三)离体回肠标本的连结
离体回肠两端各系一线,一端挂于换能器尖端, 另一端绕过浴槽内铁丝钩自由悬垂,给予1g外力, 使波形上升1-2格,固定于铁架台上
【预习要求】
1.预习相关理论 2.实验方法与步骤 3.预测实验结果。
下次实验内容磺胺嘧啶钠在兔体内的药物动 力学。
(二) ASB240U生物信号处理系统的设定
(三) 离体回肠标本的连结
(四) 给药
(一) 仪器准备
(1)打开恒温水浴箱电源开关,预热 (注意:已设定37±0.5 ℃ ,勿动)
(2)清洗麦氏槽,加入约20ml台式液
(注意:打开空气泵再清洗)
(3)调节空气泵:呈细密小气泡
(二) ASB240U生物信号处理系统的设定
(固定)
(连换能器)
动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管
(四)给药
氯化钡0.2ml
乙酰胆碱0.2ml
.
组胺0.2ml 阿托品0.1ml
苯海拉明0.1ml 乙酰胆碱0.2ml 组胺0.2ml
苯海拉明0.1ml
阿托品0.1ml
给药注意事项
1.每次给药后立即打标记,观察,待曲线稳定后 (走2-3格)再加入另一种药物
组胺
待作用稳定后,加入苯海拉明0.1ml。
2.注意清洗针管,加药时勿将药液直接加到 肠管上或将药物沾染到浴槽壁 3.做完后点 结束实验,结果存到E:/我的实验
组胺
苯海拉明
【实验结果打印说明】
1.实验结果保存在E:/我的实验 2.打开数据文件 →右键显示所有数据 →通过⊕放大选中波段,调整图形至最佳 通过⊕放大坐标轴 →剪切图片 →右键输出图形到Word →打印结果

药物对离体肠肌的作用ppt课件

药物对离体肠肌的作用ppt课件

实验目的(Objectives):
1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法
2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M 胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它 们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻 断作用。
1. 材料与方法(materials and methods):
1.1 实验动物 1.2 药品与试剂 豚鼠 10-2g/L acetylcholine chloride溶液,
药物对离体肠 肌的作用
实验原理(Principle)
ACh 阿托品 回肠M受体
平滑肌Ca2+通道开放
Ca2+内流↑ 胞浆Ca2+ ↑ 平滑肌收缩↑
组胺
扑尔敏
H1受体
G蛋白
肌浆网释放Ca2+ 平滑肌收缩
Ca2+通道
外Ca2+内流
氯化钡 Ba2+经钙通道进入胞浆 胆碱能神经释 放ACh
触发肌浆网释放Ca2+ 肌浆[Ca2+] ↑ 平滑肌收缩↑
Ach 换液
Ach Atr Ach
换液 His 换液 Chl His
Bacl2
Atr
稳定20min
Ach: acetylcholine,乙酰胆碱 His: histamine 组胺
(每次换液后稳定10min)
Atr: atropine 阿托品 Chl:chlorpheniramine 氯苯那敏
图1 药物对离体豚鼠回肠作用
1g/L atropine sulfate 溶液,10-2 g/L histamine phosphate溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、 10g/L BaCl2 溶液、台氏液。
1.3 仪器和装置

实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)

实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
13.050.1173.580.344
2 2.810.1032.230.564
3 3.430.1253.070.111
4 3.260.1873.460.394
5 1.340.2712.160.776
62.150.1202.980.230
7 3.34-0.083.010.418
8 3.460.1542.590.103
3.讨论
3.1M受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作用
M胆碱受体激动药可分为两类,即胆碱酯类和天然形成的拟胆碱生物碱。乙酰胆碱属于胆碱酯类药物[2],小剂量时为M胆碱受体激动作用。Ach与M胆碱能受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流增加,肌浆Ca2+浓度增大,平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有N胆碱受体激动作用,使胃肠道平滑肌兴奋。Atropine为M胆碱受体阻断药,其与平滑肌细胞膜M-受体结合,本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断乙酰胆碱与M-受体结合,阻断乙酰胆碱与M-受体的激动作用[3]。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆碱受体 H1受体
胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。BaCl2为肌肉兴奋剂,能够使平滑肌强烈收缩[1]。
如上histamine同样具有使回肠平滑肌收缩的能力,作用前后其张力变化幅度为2.76±0.618,经扑尔敏作用后,再加入histamine平滑肌的收缩幅度变为0.37±0.213,用t检验得P<0.01,两者差异显著。说明扑尔敏具有对抗histamine的作用,主要是阻断了肠道上的H1受体。

药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。

观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。

方法以离体豚鼠回肠为材料,研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。

结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01);BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。

关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽(20ml)张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只,以木槌击打头部致昏死,立刻剖开腹腔,在离回盲部1cm处剪断,取长约10cm左右的回肠一段,置于氧饱和的台氏液中,沿肠壁去除肠系膜,将回肠剪成1-1.5cm左右的小段,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。

1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度,调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃,通气管接95% O2+5%CO2混合气体,调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。

将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中,另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。

连接RM6240生物信号采集处理系统,仪器参数:通道时间常数直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。

1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。

预习报告-实验15- 药物对离体豚鼠回肠的作用

预习报告-实验15- 药物对离体豚鼠回肠的作用

实验15 药物对离体豚鼠回肠的作用实验日期:3月8日时间:温度:组员:受试对象:豚鼠性别:离体器官:回肠【目的】了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。

【原理】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性.传导性和收缩性等。

但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。

给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。

Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。

Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。

Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。

【材料】豚鼠;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,生物信号采集处理系统;台氏溶液,10-2g/L acetylcholine chloride溶液,1g/L atropine sulfate溶液,10-2 g/L histamine phosphate 溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液。

【方法】1.实验装置准备和仪器参数设置(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。

药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用消化道平滑肌除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性以外,尚具有自动节律性收缩(其特点是收缩缓慢而不规则)、伸展性较大、具有紧张性收缩以及对化学刺激、温度改变和牵张刺激敏感等特性。

本实验采用离体小肠平滑肌灌流的方法,观察acetylcholine (乙酰胆碱),histamine (组胺)对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,以atropine (阿托品)、chlorpheniramine (氯苯那敏、扑尔敏)为工具药,初步分析以上二药的作用原理。

1 材料和方法1.1 材料豚鼠,改良式离体组织灌流装置、生物信号采集处理系统、张力传感器(量程为10克)、铁支架、微调固定器、温度计、1ml注射器、腰穿长针头、烧杯、台氏溶液、10-2 g/L乙酰胆碱、1 g/L硫酸阿托品、10-2 g/L组胺磷酸盐, 10-3 g/L扑尔敏溶液等。

1.2 方法1.2.1 改良式离体组织灌流装置的准备在改良式离体组织灌流装置(图9.3-1)中事先向中心管内加台氏液10ml。

开启恒温槽,使其温度保持于37℃。

灌流槽内通以5%CO2和95%O2,使逸出的气泡细小而均匀。

图9.3-1 改良式离体组织灌流装置1.2.2 制备标本将豚鼠执于手中倒悬,用木槌猛击后脑部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,以此处为起点取长20~30cm的肠管。

用台氏液冲洗肠段内容物,置于低温(4~6℃)的台氏液内。

实验时剪取一段长约2cm的肠段,用细丝线于其两端各扎一结,一端系于固定钩上,另一端与张力传感器相连。

适当调节传感器高度,使其与标本之间松紧度合适。

并且注意连线垂直,不得与浴槽的管壁接触,以避免磨擦。

1.2.3 连接实验装置将张力传感器的输入插头与生物信号采集处理系统的信号放大器输入通道相连,并设置好放大器、采样和刺激器参数。

1.2.4 实验观察(1)待离体回肠稳定20~30 min后,记录一段正常收缩曲线,依次向麦氏浴槽内加下列药物。

药物对豚鼠离体回肠的作用

药物对豚鼠离体回肠的作用

药物对豚鼠离体回肠的作用讨论:1,从受体学说角度,讨论分析实验结果。

(1)1)消化道平滑肌的一般特性有,兴奋性较骨骼肌低,不规则的节律性、紧张性、伸展性,对刺激的特异敏感性即对牵张、温度和化学刺激敏感而对切割、电刺激等不敏感。

当施加1g的力时牵张刺激使平滑肌反射性收缩。

2)豚鼠消化道平滑肌上有H1受体,是组织胺受体的一种。

组织胺是组织胺受体H1的激动剂,与细胞上的组织胺受体结合可以引起平滑肌收缩。

因此加入0.2ml磷酸组织胺后豚鼠消化道平滑肌强烈收缩,描计曲线上升。

拮抗剂能与受体结合,具有较强亲和力而无内在活性。

H1受体阻断药苯海拉明对组织胺具有竞争性拮抗作用,可以竞争性地拮抗组织胺对豚鼠消化道平滑肌的收缩作用,使消化道平滑肌松弛,曲线下降到正常状况。

(2)肠肌稳定后,再加入0.2ml的磷酸组织胺,则消化道平滑肌收缩作用小于“(1)”中加入组织胺的结果。

这可能是因为在“(1)”中细胞内的储备受体已经被苯海拉明占领,再次加入组织胺后组织胺结合的受体数量很少,故收缩作用远不如第一次强。

也可能是再次加入激动剂后消化道平滑肌的反应性降低所致。

(3)胆碱能受体广泛分布与中枢和周围神经系统,分为M受体和N受体。

豚鼠消化道平滑肌上存在M受体,M受体激活后可产生一系列自主神经反应,包括平滑肌收缩。

加入0.2ml乙酰胆碱,乙酰胆碱是一种完全拟胆碱药,作用于M受体产生M样作用,兴奋平滑肌,使回肠肌收缩,描笔曲线呈现上升。

给阿托品后,阿托品的作用机制为竞争性拮抗乙酰胆碱或胆碱受体激动药对M 胆碱受体的激动作用。

阿托品与M胆碱受体结合,因内在活性很小,一般不产生激动作用,却能阻断乙酰胆碱或胆碱受体激动药与受体结合,结果拮抗了它们的作用。

对内脏平滑肌有松弛作用,因此给阿托品后曲线下降到正常状况。

(4)肠肌稳定后,再加入0.2ml的乙酰胆碱,消化道平滑肌收缩作用小于“(3)”中加入乙酰胆碱的结果。

这可能是因为在“(3)”中细胞内储备的M受体已经被阿托品占领,再次加入乙酰胆碱可以结合的M受体数量减少,故收缩作用远不如第一次强。

药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用

注意事项
• 冲洗和分离肠管时动作应轻柔,尽量避免牵拉 肠管。肠管两端穿线时,切勿将肠管缝死,只 需穿过一层肠壁。 • 台氏液应保持在37±0.5 °C,换液时,台氏液 亦应38±0.5 °C 。 • 加药时不要把药液直接加到回肠上,以免影响 结果。 • 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果,应注意 调节。
观察项目
(1)稳定10-30 min后,记录一段正常收缩曲线。 然后用注射器依次向麦氏浴槽中滴加药液。每加 一组药时立即标记,并观察、记录收缩幅度。 (2)加入Ach 0.2 ml,观察2-3 min后换液(3次) (3)重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时,加 入atropine 0.2 ml。不换液,待平滑肌收缩曲线 稳定后,再加入Ach 0.2 ml,观察2-3 min后换设置
– 麦氏浴槽内稳度:37 °C – 通气:95%O2+5%CO2 (1-2个气泡/秒)
• 标本制备
– 击昏豚鼠,剖开腹腔,在离回盲部1 cm处剪 取回肠(长约10 cm),置于氧饱和的冷台 氏液中,除去肠系膜,将回肠剪成数小段 (长约1-1.5 cm),用注射器冲洗干净,换 以新鲜台氏液备用。勿牵拉肠段。 – 在肠管两端对角处用线打结。注意保持肠管 通畅。肠管一端系于浴槽固定钩上,然后放 入浴槽中。另一端系于张力换能器,调节张 力至2-3 g。
(4)加入histamine 0.3 ml,待作用明显后 迅速换液 (5)先加入chlorpheniramine 0.2 ml,观察 5 min后,再加入histamine 0.3 ml,观察2 -3 min后换液 (6)先加入BaCl2 1 ml,当肠段痉挛收缩 时,再加入atropine 0.2 ml,观察2-3 min后换液
• 先给乙酰胆碱,是因为乙酰胆碱是一种完全拟 胆碱药,作用于M受体产生M样作用,兴奋平 滑肌,使回肠肌收缩,描笔曲线呈现上升。 • 给阿托品后,由于阿托品能竞争性阻断M受体, 对抗乙酰胆碱的M样作用,对内脏平滑肌有松 弛作用,因此给阿托品后曲线下降到正常状况。 • 氯化钡不作用于受体,而是直接作用于肠管, 使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩,曲线呈 上升,此时再加阿托品,不能拮抗,曲线无变 化。

1.药物对豚鼠离体回肠的影响

1.药物对豚鼠离体回肠的影响

0.01%乙酰胆碱溶液, 0.01%阿托品溶液,
10% BaCl2 溶液, 台氏液。
3.实验仪器
恒温水浴箱、麦氏浴槽、 ASB240U生物信号处理系统
固定钩
出水口 进水口
四、实验方法
(一)仪器准备 (二)ASB240U生物信号系统的设定 (三)离体回肠标本的连结
(四)给药
(一)仪器准备
1.打开恒温水浴箱电源开关,预热。 (注意:已设定37±0.5℃ ,勿动) 2.清洗麦氏槽,加入约20ml台式液。 3.调节空气泵:呈细密小气泡,1~2个/s。
一、药物对豚鼠离体回肠的作用
二、实验原理
阿托品
Ach
回肠M受体
平滑肌收缩↑
组胺
H1受体
苯海拉明
平滑肌收缩↑
氯化钡 (Bacl2) Ba2+经钙通道进入胞浆 胆碱能神经释 放ACh
触发肌浆网释放Ca2+ 肌浆[Ca2+] ↑ 平滑肌收缩↑
三、材料与仪器
1.实验动物 豚鼠 2.药品与试剂
0.01%磷酸组胺溶液, 0.01%苯海拉明溶液,
(连换能器)
(固定)
动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管
(四)给药
氯化钡0.2ml 乙酰胆碱0.2ml
.
组胺0.2ml 阿托品0.1ml
苯海拉明0.1ml 乙酰胆碱0.2ml 组胺0.2ml
苯海拉明0.1ml
阿托品0.1ml
注意事项
1.每次给药后立即打标记,观察,待曲线稳定后 (走3-4格)再加入另一种药物。
组胺
待作用稳定后,加入苯海拉明0.1ml。
2.注意清洗针管,加药时勿将药液直接加到肠管上 或将药物沾染到浴槽壁。 3.做完后点 结束实验,结果存到E:/我的实验:以 时间命名的文件夹。

药物对肠管平滑肌的作用

药物对肠管平滑肌的作用

药物对肠管平滑肌的作用教案药学院药理教研室李生莹2006.11. 21药物对离体肠管平滑肌的作用一、实验目的1. 学习离体平滑肌器官的实验方法。

2. 观察乙酰胆碱、阿托品、组织胺、扑尔敏和氯化钡等药物对离体回肠平滑肌的作用,并分析其作用原理。

二、实验原理1. 乙酰胆碱:为胆碱能神经末稍释放的递质,对M、N受体均有激动作用,因此它的作用非常广泛,其中对胃肠道平滑肌的作用主要表现为激动M受体后,其收缩的幅度、张力增加,蠕动加快,曲线呈现上升。

2. 阿托品:为非选择性的M受体阻断药,它对M1、M2、M3受体均有阻断作用,从而对抗乙酰胆碱的作用,对胃肠平滑肌的作用则表现为松弛,降低蠕动的幅度和频率,曲线呈现下降。

3. 组织胺:广泛存在于体内的自体活性物质之一,组织中的组胺主要存在于肥大细胞及嗜碱性粒细胞中,当组织受到物理的或化学的刺激时可使肥大细胞脱颗粒,导致组胺的释放,释放的组胺可与靶细胞上的组胺受体结合产生生物效应。

组胺受体有H1、H2、H3三种亚型,今天我们所使用的豚鼠回肠平滑肌上分布的受体主要是H1受体,当组胺与H1受体结合后,产生激动作用,引起肠管平滑肌的收缩,曲线呈现上升。

4. 扑尔敏:为常用的H1受体阻断药,可竞争性阻断H1受体,对抗组胺引起的肠管平滑肌收缩作用,曲线呈现下降。

5. 氯化钡:Ba2+与Ca2+化学结构相似,可模拟Ca2+的作用引起肠管平滑肌的收缩,曲线呈现上升。

他不作用于受体,而是直接作用于肠管,此时再加阿托品或扑尔敏,不能拮抗,曲线无变化。

三、实验材料1. 动物:豚鼠2. 器材:恒温平滑肌槽1台、通气泵、铁支架、止水夹各1个,生物信号采集处理系统,张力换能器,1ml注射器4个,培养皿1个,50ml烧杯1个,普通剪刀、组织剪、眼科剪各1把,丝线若干。

3. 药品:台氏液、0.1%氯化乙酰胆碱溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、0.1%磷酸组织胺溶液、0.1%扑尔敏溶液、8.33%氯化钡溶液四、实验方法1. 标本制备:取豚鼠一只,置于手中倒悬,以木槌击头至死,立即打开腹腔,找到回盲部,在离其2—3cm的回肠处剪断,取出回肠,置于盛有台氏液的培养皿中,沿肠壁分离并剪去肠系膜,将肠管剪成数段,轻轻冲出肠内容物,最后将肠管剪成2~3 cm的小段备用。

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M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用
【摘要】目的:观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。

观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和组胺H1受体拮抗扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。

方法:运用RM6240生理信号采集处理系统以及张力换能器记录不同药物作用下的回肠平滑肌肌张力变化。

结果:加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g,再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g
(p<0.001);加入组胺后肌张力为2.12±0.80g,加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g(p<0.001),加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性,再加阿托品后仅只略微降低其张力。

结论:乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,组胺为H1受体激动药,氯化钡为肌肉兴奋剂,三者均可使肠道平滑肌收缩。

阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受的作用。

体部分减弱BaCl
2
【关键词】:平滑肌;张力曲线;拮抗剂;激动剂;M胆碱受体;H1受体
1. 材料
1.1 实验动物:
豚鼠
1.2 药品与试剂
未标记的激动剂:A,B,C。

10-2g/L氯化乙酰胆碱(acetylcholine chloride)溶液;
10-2g/L磷酸组织胺(histamine phosphate)溶液;
10g/L BaCl2溶液。

拮抗剂:1g/L硫酸阿托品(atropine sulfate)溶液;10-3g/L氯苯那敏(chlorpheniramine)溶液。

台氏液(Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。

1.3 仪器:
离体装置:双层玻璃浴槽(20ml)、张力换能器、微距调节夹恒温水浴箱多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统
2.实验方法
2.1 准备:
清洗浴槽:清洗后,将台氏液装至刻度;
检查温度:37℃±0.5 ℃;
检查通氧: 单个小泡溢出;
打开电脑:选中桌面RM6240图标,选择“实验”---生理科学实验---肠肌2.2 实验步骤:
清醒豚鼠
轻击头部后股动脉放血
打开腹腔
取出回肠
制作回肠标本
一端固定在通气钩上
置含有37℃台氏液的浴槽中
通氧
另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接
连接RM6240生物信号采集处理系统
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
归零
调节换能器张力(1g)
稳定20分钟
2.3 制作回肠标本:
找到回盲部,在离回盲部1cm处剪断回肠,取出回肠约15cm左右一段,置于盛有台氏液的培养皿中,将回肠剪成1-1.5cm的小段。

2.4 回肠标本张力调节
将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上,放入麦氏浴槽中,选中桌面RM6240图标选择“实验”--生理科学实验--肠肌,工具--快速归零(按右上快速归零Z)---调“ 0”
将RM6240系统处在记录状态;将回肠标本的上端连线打一活结,勾在张力换能器的悬臂梁钩上,旋转调节螺母,调张力至1g。

(见左上显示平均1g左右)2.5 实验观察记录
待离体回肠稳定10min,记录一段正常收缩曲线。

加A药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,加入拮抗剂阿托品 0.3ml,曲线稳定后加A药,记录一段曲线后,用台氏液连续冲洗浴槽3次换液,稳定5min。

加B药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,待曲线稳定后,加入拮抗剂氯苯那敏0.3ml,观察5min,加B药,换液,稳定5min。

加C药0.3ml,观察并记录其收缩曲线,待曲线稳定后,加入拮抗剂阿托品0.3ml,观察3min,加C药,记录曲线
2.6 统计
参考《生理科学实验教程》 p30应用Excel进行数据统计分析,t-检验。

以x ±s 表示
3.实验结果
3.1 A药对离体豚鼠回肠作用加入A药后平滑肌肌张力显著上升,至达到高峰后波动性下降并维持一定强度,张力大于初始张力,并呈现显著波动性。

加入
阿托品后肌张力显著减小,肠肌张力波动消失成平稳直线。

再加入A药对肌张力无影响,肌张力曲线保持平直。

下图是一次实验中的记录曲线:
对数据进行分析后,得出加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g,再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g(p<0.001);
3.2 B药对离体豚鼠回肠作用加入B药后肌张力显著上升,再急剧下降,而后缓慢上升在并维持一定肌强度。

加入氯苯那敏后曲线下降,再加入B药不能改变曲线的平直状态。

下图是一次实验中的记录曲线:
对数据进行分析后,可知加入B后肌张力为2.12±0.80g,加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g(p<0.001)。

3.3 C药对离体豚鼠回肠作用加入C药后肌张力显著上升,再急剧下降,而后稍有上升后呈波动性缓慢下降。

加入阿托品后曲线轻度缓慢下降,张力下降至不再降低而呈波动性。

再加入C药肌张力波动程度增大,频率也增高。

下图是一次实验中的记录曲线:
总之,加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性,再加阿托品后仅只略微降低其张力。

4.讨论
4.1 A、B、C药的鉴别与结果分析据实验证据可得出以下结论:A药为乙酰胆碱,B药为组胺,C药则为氯化钡。

从曲线上看A药具有兴奋肠道平滑肌作用,而这种肠道平滑肌兴奋作用能够被M型胆碱能受体拮抗剂阿托品阻断。

因此推断A药为可作用于M型胆碱能受体激动剂乙酰胆碱。

同样的,B药的肠道平滑肌兴奋作用也能够被H1受体拮抗剂扑尔敏阻断,因此B药为H1受体激动剂组胺。

而C药能够兴奋平滑肌,但是不能完全被阿托品阻断,因此C为氯化钡,而且第二次加入C药效果没有第一次那么强,猜测是因为钡离子的毒性作用。

4.2 激动剂与拮抗剂的作用机制:乙酰胆碱:小剂量时有M胆碱受体激动作用。

Ach与M-受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流↑,肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。

大剂量时也有.N胆碱受体激动作用,使胃肠道平滑肌兴奋。

阿托品:为M胆碱受体拮抗剂。

阿托品与平滑肌细胞膜M-受体结合,阻断乙酰胆碱与M-受体结合,从而阻断乙酰胆碱对M-受体的激动作用。

组胺:组胺是一种血管活性胺。

与平滑肌细胞膜H1受体结合,通过激活G 蛋白-磷酸脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,平滑肌收缩。

氯苯那敏(扑尔敏):为组胺H1受体拮抗剂。

扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。

氯化钡:肌肉兴奋剂。

Ba2+经钙通道进入胞浆,使肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高,另一方面BaCl2兴奋胆碱能N受体, N受体有神经型和肌肉型, N 受体激动时改变Na+、 K+、 Ca2+通道的电生理学特性,使肌肉收缩。

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