碱性磷酸酶检测试剂盒
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒使用说明
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)货号：G5610有效期：6个月有效。
产品内容：产品规格试剂(A):ALP Assay buffer 2.5ml试剂(B):ALP显色液 2.5ml试剂(C):显色基液7.5ml试剂(D):Phenol标准(1mg/ml)1ml试剂(E):ddH2O1ml产品说明：碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8。
此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。
碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法，其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。
在碱性条件下酚与氨基安替比林结合，并经氧化生成红色醌式结构物，呈深浅不一的红色，产物红色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过酶标仪测定510nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料：96孔板、水浴锅或恒温箱、酶标仪操作步骤(仅供参考)：1、配制标准品工作液：取出Phenol标准(1mg/ml)恢复至室温后，取0.1ml溶解于1.9ml ddH2O，使浓度达到0.05mg/ml，即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。
按照下表稀释系列标准品溶液。
012345010******** Phenol(0.05mg/ml)(μl)ddH2O(μl)55453525155相当于金氏单位(U/L)010********2、准备样品：（1）细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-80℃冻存，用于碱性磷酸酯酶的检测。
骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒(凝集素亲和法)产品技术要求北京中生金域诊断
骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒（凝集素亲和法）适用范围：用于体外半定量检测人体全血或血清中骨源性碱性磷酸酶催化活性。
1.1 产品型号：JY–Color–BAP NB；JY–Color–BAP AB。
1.2 产品规格1.2.1 包装规格：20人份/盒、50人份/盒、100人份/盒。
1.2.2产品组成：产品主要组成成分见表1、表2。
表1 试剂盒配置表配 置 规 格 （装量）20人份/盒 50人份/盒 100人份/盒反应装置 1×20支 1×50支 5×20支显色液 JY–Color–BAP NB1ml ×1瓶3.5ml ×1瓶7ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB洗涤液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶 8ml ×1瓶 8ml ×2瓶 JY–Color–BAP AB终止液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶4ml ×1瓶 8ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB 7ml ×1瓶 7ml ×2瓶一次性定量取血管（含吸头）21支（含吸头1个）52支（含吸头1个）104支（含吸头1个）注：试剂盒中一次性定量取血管为外购有医疗器械证书的产品。
表2试剂配方和浓度配 置 组成 浓度显色液 氯化钠（NaCl） 700mmol/L氯化镁（MgCl2） 25mmol/L二甲基亚砜（DMSO）0.9%（体积比）洗涤液 氯化钠（NaCl） 13%氯化镁（MgCl2） 2.9% 聚乙二醇（PEG）13%氯化锌（ZnCl2） 7%氯化钙（CaCl2） 18%氯化锰（MnCl2） 32%迭氮钠（NaN3） 5%JY–Color–BAP NB终止液氯化钠（NaCl） 18%迭氮钠（NaN3） 25% JY–Color–BAP AB终止液 乙磺酸（MES） 9%氯化钠（NaCl） 13%迭氮钠（NaN3） 7%2.1 外观2.2.1 反应装置为白色塑料制品，结构应完整、表面光洁、无缺失、无折损、无脱落；2.2.2 测定用液体外观要求：a) 显色液为浅黄色液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物；b) 洗涤液为无色透明液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物；c) 终止液为无色透明液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序
碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶（ALP）存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。
测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力，做临床辅助诊断用。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶（ALP）的活力。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶（ALP）活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶（ALP）试剂盒采用的是AMP缓冲液法。
5.原理在AMP的缓冲环境下，磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下，可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。
在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升，其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。
−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：AMP缓冲液（PH10.50）、乙酸镁；R2：AMP缓冲液（PH8.85）、磷酸对硝基苯、乙酸镁。
AMP：2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性：试剂在2-8℃避光保存，有效期1年。
试剂工作液在2-8℃避光保存，可稳定4周，15-25℃可保存稳定4天。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求zhongshengbeikong
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。
1.1包装规格液体双剂型试剂1（R1）：80mL×3，试剂2（R2）：60mL×1；试剂1（R1）：80mL×2，试剂2（R2）：20mL×2；试剂1（R1）：60mL×3，试剂2（R2）：45mL×1；试剂1（R1）：40mL×3，试剂2（R2）：30mL×1；试剂1（R1）：40mL×3，试剂2（R2）：10mL×3。
1.2主要组成成分试剂1（R1）液体：AMP缓冲液350mmol/L（pH 10.5）2.5mmol/LMgCl2试剂2（R2）液体：对硝基苯磷酸盐 16mmol/L2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；2.1.2 试剂2（R2）应为淡黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长410nm（400nm～420nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤1.000；试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.005。
2.4准确度测定GBW(E)090593，相对偏差应不超过±10％。
2.5分析灵敏度对应于活性为120U/L的ALP所引起的吸光度变化率（△A/min）的绝对值应在0.010～0.050范围内。
2.6重复性重复测试同一样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7批间差测试同一样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围在[1，1200]U/L（37℃）范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在(20，1200] U/L（37℃）范围内，线性相对偏差应不超过±10％；在[1，20]U/L（37℃）范围内，线性绝对偏差应不超过±2U/L。
Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号：E-BC-K091-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪（500-530 nm）使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。
检测原理在pH=10的反应液中，碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解，生成游离酚和磷酸。
酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合，并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物，根据红色的深浅计算酶活的高低。
本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：酶标仪（500-530 nm，最佳检测波长520 nm）、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。
耗材：枪头（1000 µL，200 µL，10 μL）、EP管（10 mL，2 mL）。
试剂：双蒸水、PBS（0.01 M，pH 7.4）或生理盐水（0.9% NaCl）试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②工作液的配制：按试剂一：试剂二为1:1的体积比混匀，现用现配，未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。
③不同浓度标准品的稀释：样本准备①样本处理血清血浆等液体样本：直接测定。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求bjiuqiang
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液法）适用范围：用于体外定量测定人血清中的碱性磷酸酶的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度试剂空白：A405nm（主）/A600nm（副）下测定空白吸光度应≤0.5000。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.005。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验：在[3，1702] U/L区间内，相关系数r≥0.975，在[3，80]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±8U/L，在(80，1702]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时，其吸光度变化率在0.0240～0.0480之间。
2.6 线性区间测试血清样本，试剂线性在[3,1702]U/L区间内：a) 线性相关系数︱r︱应不小于0.990；b) [3,80]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±8U/L；(80,1702]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于5%。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为18个月。
取到效期后的样品检测外观、试剂空白、准确度、线性区间应符合2.1、2.3、2.4、2.6的要求。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液)产品技术要求dd
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液）
组成：
适用范围：用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。
2.1外观
试剂盒外观应整洁，液体无渗漏，文字符号标识清晰；试剂1：无色澄清液体；试剂2：淡黄绿色澄清液体。
2.2装量
每瓶不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度
用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A405nm处测定试剂空白吸光度A≤0.8，空白变化率△A/min≤0.005。
2.4分析灵敏度
试剂测定（120±12）U/L被测物，吸光度变化△A/min≥0.01。
2.5线性范围
2.5.1在[25，750]U/L内，相关系数R≥0.990。
2.5.2在 [25，100]U/L时绝对偏差不超过±10U/L，测定（100，750]U/L相对偏差不超过±10%。
2.6精密度
2.6.1 重复性
重复测试（120±12）U/L的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.6.2批间差
测定（120±12）U/L样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.7准确度
比对试验相关系数r2≥0.95， [25，100]U/L区间内，绝对偏差不超过±10U/L，（100，750]U/L区间内，相对偏差不超过±10%。
2.8 效期稳定性
试剂有效期为12个月，取到效期后一个月内进行检测，测定结果应符合2.3-2.6.1、2.7项要求。
碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书
碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP/ALP）活性测定试剂盒说明书分光光度法50管/24样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
测定原理：在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μ mol/mL酚标准液，4℃保存。
粗酶液提取：1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。
2. 细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定，或者适当稀释后测定。
测定步骤：1. 分光光度计预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸馏水，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A空白管。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求lepu
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性.1.1 规格试剂1:1×60mL，试剂2:1×12mL；试剂1:1×60mL，试剂2:1×15mL；试剂1:1×60mL，试剂2:1×20mL；试剂1:4×60mL，试剂2:4×15mL；试剂1:2×40mL，试剂2:2×10mL；试剂1:1×4L，试剂2:1×1L；试剂1:2×4L，试剂2:1×2L。
1.2 主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或微黄色溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在405nm处测定试剂空白吸光度，应≤0.5；2.3.2 试剂空白吸光度变化率用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.005。
2.4 分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0009。
2.5 准确度参照CLSI EP9-A2的方法，与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本，其相关系数r2≥0.95。
每个浓度点在[25，100]U/L区间内绝对偏差不超过±10U/L；（100,750]U/L区间内相对偏差不超过±10%。
2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的变异系数（CV）应不大于5％。
2.7 线性2.7.1在[25，750]U/L(37℃)区间内，线性相关系数r应不小于0.990；2.7.2 [25，100]U/L区间内绝对偏差不超过±10U/L；（100,750]U/L区间内相对偏差不超过±10%。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求wantaiderui
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液法）适用范围：用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。
1.1包装规格试剂1：58mL×8 、试剂2：58mL×2；试剂1：62mL×3 、试剂2：48mL×1；试剂1：48mL×4 、试剂2：24mL×2；试剂1：48mL×1 、试剂2：12mL×1；试剂1：64mL×3 、试剂2：16mL×3；试剂1：20mL×1、试剂2：5mL×1；1200测试/盒(试剂1：68mL×2、试剂2：17mL×2)；2400测试/盒(试剂1：68mL×:4、试剂2：17mL×4)；1050测试/盒(试剂1：20mL×6、试剂2：10mL×3)；1680测试/盒(试剂1：48mL×4、试剂2：12mL×4)；1260测试/盒(试剂1：48mL×3、试剂2：12mL×3)；800测试/盒（试剂1：24mL×2、试剂2：6mL×2）；1750测试/盒(试剂1：100mL×2、试剂2：25mL×2)；960测试/盒(试剂1：48mL×4、试剂2：48mL×1)；1650测试/盒(试剂1：62mL×3、试剂2：49mL×1)；800测试/盒(试剂1：64mL×1、试剂2：16mL×1)。
1.2组成成分试剂1：乙酸镁 1.0mmol/LAMP缓冲液 900mmol/L试剂2：对-硝基苯磷酸盐 17mmol/L2.1试剂装量应不低于瓶签标示装量。
2.2外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：黄色或淡黄色澄清液体。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度测定温度：37℃；测定波长：405nm；比色杯光径：1.0cm；其空白吸光度应＜1.0。
碱性磷酸酶测定试剂盒性能验证方案
碱性磷酸酶测定试剂盒性能验证评价方案某三甲医院一、评价目的和内容1.目的评价某公司的碱性磷酸酶测定试剂盒（以下简称ALP）的部分性能特点的验证。
2.评价内容★准确度★批内精密度★日间精密度★功能灵敏度★线性评价★参考范围验证★比对实验3.评价实验具体方法3.1 准确度根据试剂盒说明书，在仪器上编制参数。
测定科室内使用的质控高、低值，质控相对偏差应在10%内。
3.2 批内精密度选取1个样品，重复测定20次，计算20次的批内变异系数应在4.5%内。
3.3 日间精密度取科室内使用质控高、低两个浓度的质控品每天各测5次连续测4天记录数据，计算20次测定结果的CV应在6%内。
3.4 功能灵敏度3.4.1选取低浓度的样品，用生理盐水对样品分别进行不同倍数的稀释，使其最低浓度接近0浓度。
3.4.2 在仪器上分别对不同浓度的样品连续测定20次，计算其均数、标准差和变异系数，查看各样品的变异系数(CV%)，样品的变异系数≤10%时，最大稀释管平均浓度所对应的浓度及为功能灵敏度(检测低限)。
3.5线性评价3.5.1 用接近线性范围上限的高浓度样品和纯化水，按表示例混合成至少5个稀释梯度。
以此为样品，分别用对应试剂盒测定每个浓度样品，重复测定3次。
稀释比例1/16 1/8 1/4 1/2 1高浓度血清（μl）500(1/8) 500(1/4) 500(1/2) 500 1000纯化水（μl）500 500 500 500 03.5.2在说明书给定的范围内，对线性测定结果进行回归：线性相关系数（r）应≥0.990。
3.6 参考范围验证3.6.1 随机选取正常体检样品20例，分别测定ALP浓度。
3.6.2 分析20例测定结果是否在实验室采纳的正常参考范围区间内。
如果有不超过2个数据（测定结果的10%）落在采纳的参考范围界限以外，那么接受实验室采纳的参考范围。
3.7 比对实验3.7.1 本实验室做为参比实验室，三甲级医院做为对照实验室，两实验室同时测定20例在线性范围内的新鲜人血清样品中ALP的浓度。
AKP说明书
碱性磷酸酶 (U / gprot)
=
测定管吸光度 标准管吸光度
×
标准管含酚的量 (0.003mg)
÷
取样量中的蛋白克数
= 0.081 × 0.003 ÷ (1.29 ×10−3 × 0.03) = 32.37U / gprot 0.194
南京建成生物工程研究所 南京建成科技有限公司
地 址： 南京市中央路 258－27 号 电 话：（025）83360321
基质液(ml)
0. 5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
充分混匀,37℃水浴 15 分钟
显色剂(ml)
1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
立即混匀,在 520nm 处,1cm 光径,0 管调零,测各管 OD 值
以所测得的吸光度为纵坐标，以相应的标准浓度单位为横坐标，绘制标准曲线。
×
100ml 0.05ml
= 0.404 × 0.005 × 100 = 16.16金氏单位 /100ml
0.250
0.05
1
本试剂盒仅用于科研、实验室
南京建成
（二）、组织匀浆中 AKP 的测定：
1、 操作表：
测定管
标准管
空白管
1%组织匀浆(ml)
0.03
0.1mg/ml 酚标准液(ml)
三、操作：
Байду номын сангаас
(一)、血清（浆）中 AKP 的测定： 1、操作表：
测定管
标准管
空白管
血
清（ml）
0.05
0.1mg/ml 酚标准应用液（ml）
0.05
双 蒸 水（ml）
0.05
碱性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法)
产品组成：
规格
名称
3×10ml 3×20ml
Storage
S0100 (A): ALP 固定液
10ml
20ml
RT 避光
S0100 (B): ALP 孵育液 B1: AS-BI 染色液
5ml
10ml
-20℃ 避光
B2: FBB 染色液
5ml
10ml
4℃ 避光
临用前，按 B1:B2=1:1 比例混合，即为 ALP 孵育液，即配即用。
染色结果：
ALP 活性部位 细胞核
蓝色 红色(核固红)或绿色(甲基绿)
血液、骨髓涂片结果判断：
一般以积分报告结果，根据 100 个中性粒细胞阳性颗粒进行 0～4+计分。
细胞分值
染色特点
0
无颗粒
1
稍有颗粒
2
中等程度颗粒
3
多数颗粒
4
充满颗粒
临床意义： 1. 类白血病反应积分明显增高，未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。 2. 急性细菌性感染积分明显增高，病毒性感染积分多正常或减低。 3. 再生障碍性贫血积分常增高，PNH、MDS 积分常减低。
碱性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法) 也称中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色液，不是采 用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在 pH9.2～9.8 的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚， 后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、 冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于 胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求柏定
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。
1.1 包装规格见表1。
产品组成
2.1 外观
2.1.1 试剂1为无色透明液体，无混浊，无未溶解物。
2.1.2 试剂2为无色或微黄色透明液体，无混浊，无未溶解物。
2.1.3 标签内容清晰，字迹牢固不易脱落。
2.2 试剂装量
液体试剂的净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1 试剂空白吸光度
A≤0.600（光径1.0cm，405nm±20nm 波长）。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率
ΔA/分≤0.005。
2.4 分析灵敏度
测定120U/L样本，吸光度变化在0.024/分～0.072/分范围内。
2.5 线性区间
2.5.1 [5,1000]U/L（37℃）。
在规定的线性范围内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）不低于0.990。
2.5.2 [5,50]U/L范围内，线性绝对偏差不超过±5U/L；(50,1000]U/L范围内，线性相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV≤5%。
2.6.2 批间差
批间相对极差≤6%。
2.7 准确度
相对偏差在±10%范围内（测试国际参考物质（JC ERM 20327,Lot003））。
2.8 稳定性
原装试剂2℃～8℃保存，有效期12个月，有效期满后2个月内测定结果符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、和2.7要求。
alp试剂盒 说明书
碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。
哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。
常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。
干细胞，如iPS中，碱性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功诱导的标志。
另外，分化的结肠癌细胞中碱性磷酸酶的活性也会显著升高，被当作结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标。
此外，血清中碱性磷酸酯酶的升高，被称作高碱性磷酸酶血症(hyperalkalinephosphatasemia)，被认为和恶性胆管阻塞(malignant biliary obstruction)、原发性胆管硬化(primary biliary cirrhosis)、原发性硬化胆管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝胆疾病密切相关。
血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨头生成密切相关，因为碱性磷酸酶是成骨细胞的副产物。
血清中碱性磷酸酶活性过低也和一些疾病相关。
儿童和孕妇血清中的碱性磷酸酶活性较普通人高一些。
血清中碱性磷酸酶活性范围在20-140U/L。
碱性磷酸酶检测试剂盒
碱性磷酸酶检测试剂盒产品简介：碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。
哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。
常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。
干细胞，如iPS中，碱性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功诱导的标志。
另外，分化的结肠癌细胞中碱性磷酸酶的活性也会显著升高，被当作结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标。
此外，血清中碱性磷酸酯酶的升高，被称作高碱性磷酸酶血症(hyperalkalinephosphatasemia)，被认为和恶性胆管阻塞(malignant biliary obstruction)、原发性胆管硬化(primary biliary cirrhosis)、原发性硬化胆管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝胆疾病密切相关。
血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨头生成密切相关，因为碱性磷酸酶是成骨细胞的副产物。
血清中碱性磷酸酶活性过低也和一些疾病相关。
儿童和孕妇血清中的碱性磷酸酶活性较普通人高一些。
碱性磷酸酶测定试剂盒 (NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求北化康泰
碱性磷酸酶测定试剂盒 (NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围：本试剂盒用于定量检测人体血清样本中碱性磷酸酶的活性。
1.1. 包装规格试剂1：10ml×10（干粉复溶后的体积）；试剂2：100ml×1。
2.1 外观：试剂1为干燥粉末，试剂2为澄清溶液，外包装完整。
2.2 净含量：不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：A≤0.70（波长405nm，光径1cm）。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.005（波长405nm，光径1cm）。
2.4 分析灵敏度：浓度为120U/L时,吸光度变化率△A/min≥0.03。
2.5 线性区间2.5.1线性相关系数：[25，750]U/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。
2.5.2线性偏差：[25，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100,750] U/L 时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性：变异系数（CV）≤5%。
2.6.2批内瓶间差： CV≤5%。
2.6.3批间差：相对极差≤10%。
2.7 准确度：采用比对试验，相关系数r2≥0.95，[25，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100,750] U/L时，相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性2.8.1效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃贮存，有效期为24个月。
保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。
2.8.2复溶稳定性：工作液(将试剂1用10ml试剂2溶解)18℃～25℃可稳定2天，2℃～8℃可稳定3天。
测定结果满足2.5、2.7的要求。
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4. 参考下表使用 96 孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为 4、8、 16、24、32 和 40μL，样品通常可以直接加 50μL。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高，可以 减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
空白对照(Blank)
标准品(Standard)
样品(Sample)
检测缓冲液
3) 样品的稀释：如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或 PBS 等
进行稀释，也可以采用试剂盒中的检测缓冲液进行稀释。如果使用试剂盒中提供的检测缓冲
液进行稀释，需注意保留足够的检测缓冲液用于试剂盒的检测过程。
3. 将底物溶液在 37°C 下平衡，将酶标仪的检测波长设置为 405nm；
的水解。包括肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶和胎盘碱性磷酸酶。除胎盘碱性磷 酸酶外，其它的加热后易失活。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物，在碱性条件下，可在 碱性磷酸酶作用下生成 para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下，呈黄 色产物，可以在 405nm 检测吸光度。产物黄色越深，说明碱性磷酸酶检活性越高，反之则 酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。
清，用于碱性磷酸酶的检测。注意：裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存， 但需避免反复冻融。
2) 血浆、血清和尿液的准备：血浆和血清按照常规方法制备后可直接用于本试剂盒的测定，
但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。血浆制备时不
能用含 EDTA 和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻 存，但需避免反复冻融。
储存温度 检测缓冲液 4℃保存，其余-20℃保存，一年有效。其中显色底物和 p-nitrophenol 溶液需避光 保存。
包装清单 货号
HT012A HT012B HT012C HT012D
品名 检测缓冲液
显色底物 p-nitrophenol 溶液(10mM)
反应终止液 说明书
包装 50mL 2管 0.1mL 12mL 1份
西安赫特生物科技有限公司
XAHT-01-014-014-2015
碱性磷酸酶检测试剂盒
碱性磷酸酶检测试剂盒 该试剂盒可用于快速、便捷地检测细胞、组织的裂解液、血清、血浆、尿液等样品中内
源性的碱性磷酸酶活性。 碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可在碱性条件下催化磷酸酯键
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。 2. 如果希望进行酶活性的绝对定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育 30min 等较长的时间，以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高，则可以 预先适当稀释样品。 3. 样品溶液中须避免出现 EDTA、氟离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶的抑制剂。 4. 检测缓冲液和 p-nitrophenol 溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性， 请小心操作。
使用说明：
1. 试剂准备：将所有试剂取出，恢复至室温使用。 1) 显色底物溶液：取一管显色底物，溶解于 2.5mL 的检测缓冲液中，充分溶解和混匀，冰 上放置。新鲜配制的显色底物溶液需在 6h 内使用。
2) 标准品工作液：取 10μL p-nitrophenol 溶液(10mM)，用检测缓冲液稀释至 0.2mL，最终浓 度为 0.5mM。 2. 样品准备： 1) 细胞或组织裂解液的准备：采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞或组织，随后离心取上
50μL
（100-X）μL
（50-Y）μL
显色底物
50μL
－
50μL
样品
－
－
YμL
标准品工作液
－
XμL
－
1
4. 用枪头轻轻吹打混匀，也可借助摇床进行混匀。 5. 37℃孵育 5-10min。(说明：待测样品中碱性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至 30 分钟) 6. 每孔加入 100μL 反应终止液终止反应。此时，标准品或有碱性磷酸酶活性的孔会呈现不 同深浅的黄色。 7. 在 405nm 测定吸光度。 8. 碱性磷酸酶活性单位的定义： 在 pH9.8 的 diethanolamine(DEA)缓冲液中，37℃条件下，每分钟水解 para-nitrophenyl phosphate 显色底物产生 1μM p-nitrophenol 所需的碱性磷酸酶的量定义为一个酶活力单位， 也被称作一个 DEA 酶活力单位。 在 pH9.6 的甘氨酸缓冲液中，25℃条件下，每分钟水解 para-nitrophenyl phosphate 显色底物 产生 1 微摩尔 p-nitrophenol 所需的碱性磷酸酶的量定义为一个酶活力单位，也被称作一个 Glycine 酶活力单位。 一个 Glycine 酶活力单位约相当于 3 个 DEA 酶活力单位。本试剂盒测定的是 DEA 酶活力单 位。 9. 根据酶活性定义，计算出样品中的碱性磷酸酶活性。