尿生成的调节

实验22 尿生成的调节（综合型）

【目的要求】

观察刺激迷走神经和静脉注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量及尿的某种成分的影响，以及分析这些因素的作用机制。

【基本原理】

【动物与器材】

家兔；微机生物信号处理系统，兔手术台，哺乳动物手术器械，注射器(20ml，10ml，1ml 各一副)，膀胱插管，试管，试管夹，培养皿，酒精灯，丝线，棉绳，纱布。20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，20%葡萄糖，1:10000去甲肾上腺素，垂体后叶素，速尿，0.6%酚红，10%NaOH，斑氏试剂。

【方法与步骤】

1.静脉麻醉从兔耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯(1g/kg体重)。

2.仰卧固定待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。

3.PcLab参数设置

记录方式：连续记录；存盘方式：连续存盘；输入：DC；放大倍数：100～200

采样速率：1ms

刺激波宽：0.1～5ms可调；刺激强度：0.5～5V手动可调；刺激方式：主周期连续；脉冲数：30可调；波间隔：33.3ms可调。

4.颈部手术

（1）剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5～6厘米，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经，在神经下穿线备用。静脉注射肝素，剂量为1000u/kg体重。

（2）行颈动脉插管，记录血压

5.腹部手术

从耻骨联合向上沿中线作长约4厘米的切口，沿腹白线打开腹腔，将膀胱轻拉到腹壁外，先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用线结扎膀胱颈部以阻断它同尿道的通路。用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分)，选择血管较少处，切一纵行小口(图11-24-1)，插入插管后膀胱即随着尿液的流出而缩小。如膀胱壁较松驰而膀胱容积仍较大时，可用粗线将膀胱扎掉一部分，使膀胱内的贮尿量减至最少。

使插管尿液流出口处低于膀胱水平，用培养皿盛接由插管流出的尿液,手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。

观察项目

1.连续记录动脉血压

2.记录正常尿流量(滴/分)。

3.静脉快速注射37～38℃的生理盐水20ml，观察尿量有何变化？

4.用中等强度和频率的电刺激间断刺激右侧颈迷走神经的末梢端，观察尿量有何变化？

5.取尿液2滴作一次尿糖定性试验。静脉注射20%葡萄糖5毫升，观察尿量有何变化？当尿量显著变化时，取流出的尿液2滴作一次尿糖定性试验，观察有无尿糖？

6.静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.5毫升，观察尿量有何变化？

7.静注注射速尿5mg/kg体重，观察尿量有何变化？

8.静脉注射0.6%酚红0.5毫升，用盛有10%NaOH溶液的培养皿收集尿液，计算从注射酚红起到尿中刚出现酚红所需的时间(酚红在碱性液中呈红色，可在培养皿下垫一白纸以及时察觉)。

9.静脉注射垂体后叶素２单位，观察尿量有何变化？

注意点

1.实验前最好给兔多喂些青菜，或用橡皮导管向其胃中灌入40～50毫升清水，以增加其基础尿量。

2.本实验需作多次静脉注射，应特别注意保护耳缘静脉，静脉穿刺从近耳尖处开始，逐次移向耳根。

3.作膀胱插管时，操作需轻，以免膀胱受刺激而缩得很小，增加插管难度。

4.各项实验顺序的安排是：在尿流量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验。

5.尿糖定性试验方法：在试管内盛１毫升斑氏试剂，加入尿液２滴，在酒精灯上加热至煮沸。冷却后观察试液和沉淀物的颜色，如由蓝绿色转变为黄色或砖红色，表示尿糖试验阳性。结果列表记录各项实验中尿量和血压变化，数据统计处理，分析尿量和血压变化的机制。思考题

1.本实验中哪些因素通过肾小球滤过率而影响尿量的？它们各自的作用机制如何？

2.兔静脉注射20％葡萄糖5毫升为什么会引起利尿？试以理论计算与实验结果证明动物出现糖尿。

3.试解释垂体后叶素对尿量的影响。

4.静脉注入的酚红经什么方式进入尿液？