表观遗传:组蛋白甲基化、磷酸化解决方案
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表观遗传:组蛋白甲基化、磷酸化解决方案
组蛋白修饰(histone modification)是指组蛋白在相关酶作用下发生甲基化、乙酰化、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、ADP核糖基化等修饰的过程。
今天我们来重点说说组蛋白甲基化、组蛋白磷酸化。
一、组蛋白甲基化
组蛋白甲基化是由组蛋白甲基化转移酶(histonemethyl transferase,HMT)完成的。
甲基化可发生在组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上,而且赖氨酸残基能够发生单、双、三甲基化,而精氨酸残基能够单、双甲基化,这些不同程度的甲基化极大地增加了组蛋白修饰和调节基因表达的复杂性。
甲基化的作用位点在赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)的侧链N原子上。
组蛋白H3的第4、9、27和36位,H4的第20位Lys,H3的第2、l7、26位及H4的第3位Arg都是甲基化的常见位点。
研究表明·,组蛋白精氨酸甲基化是一种相对动态的标记,精氨酸甲基化与基因激活相关,而H3和H4精氨酸的甲基化丢失与基因沉默相关。
相反,赖氨酸甲基化似乎是基因表达调控中一种较为稳定的标记。
例如,H3第4位的赖氨酸残基甲基化与基因激活相关,而第9位和第27位赖氨酸甲基化与基因沉默相关。
此外,H4—K20的甲基化与基因沉默相关,H3—K36和H3—K79的甲基化与基因激活有关。
但应当注意的是,甲基化个数与基因沉默和激活的程度相关。
【1】组蛋白甲基化定量
组蛋白甲基化位点主要发生在H3和H4上面赖氨酸(K)和精氨酸(R)上,且能够发生单、双、三甲基化等。
要按照数学的排列组合,那也是蛮多类型了,举例EpiQuik 组蛋白H3修饰多重检测试剂盒(比色法)(96 次),P-3100-96,EpiQuik组蛋白H3修饰定量试剂盒(比色法)是一组完全的、优化的试剂组合,可以同时定量H3上面21个修饰方式,是一个简单的Elisa检测方法。
【2】组蛋白甲基转移酶(HMTs)分析测定
组蛋白甲基化修饰的时候,需要甲基转移酶来进行催化。
举例:PRMT甲基转移酶(II型特异性)活性/抑制分析试剂盒(比色法)(48次分析),P-3088-48
PRMT甲基转移酶(II型特异性)活性/抑制分析试剂盒(比色法)是包含最佳试剂完整实验组件,它是为简单,快速荧光法测定II型特异性PRMT甲基转移酶(PRMT5和PRMT7)的活性/抑制而设计的.可用于检测包括哺乳动物、植物、真菌和细菌等不同种属来源的培养细胞或新鲜/冻存组织中的核提取物、纯化的酶等样本.
二、组蛋白磷酸化
组蛋白磷酸化是指在组蛋白的四个尾巴上添加一个磷酸基,涉及DNA的损伤。
有一些相关的检测试剂盒和抗体研究。
举例原位组蛋白H3磷酸化(Ser10)检测试剂盒(96次分析),P-7001-96,适用于培养的贴壁细胞原位特异性测量组蛋白H3。
EpiQuik原位组蛋白H3磷酸化(Ser10)检测试剂盒可以原位检测磷酸化的组蛋白H3(Ser10),操作方便,即时可用.本试剂盒提供了一整套必要的试剂和方法来检测贴壁培养细胞中的磷酸化的组蛋白H3(Ser10).
EpiQuik原位组蛋白H3磷酸化(Ser10)检测试剂盒是一种组蛋白H3磷酸化(丝氨酸10)全细胞检测技术.检测实验中,粘附细胞培养在常规的96孔板上,经过您的实验处理后,将细胞固定并使其渗透性增加.组蛋白H3第10位的丝氨酸被磷酸化是灵敏的DNA损伤标志.磷酸化的组蛋白H3(Ser10)可以通过HRP连接的次级抗体显色反应系统检测,它的量与OD成正比.特点如下:
1、操作十分快捷,3小时内可完成;
2、独创的比色度检测方法,不接触放射性物质,无需进行电泳和色谱分析;
3、原位检测组蛋白H3第10位丝氨酸的磷酸化,无需溶解细胞;
4、96孔板模式使研究人员能根据自己需要选择手工或是高通量分析;
5、操作简便、结果可靠、统一的分析条件。