细菌鉴定及检测方法

细菌鉴定及检测方法

一、启动条件

1、目的样出现坏包，若批次相同，取表现性状相同的任意一包进行细菌初步鉴

定。若批次不同则分别进行细菌初步鉴定。

2、随机样出现坏包，必须进行细菌初步鉴定。

二、胀包

1、记录批次。

2、及时用72%的酒精对样品的外表进行消毒，尽量不损坏封合待以后检查。在

超净台内以无菌操作剪开包装，再避开横竖封处剪开一个圆形或三角形。3、对样品进行微生物划线培养。

3.1采用普通营养琼脂培养基做细菌的划线培养36±1℃、48小时。

3.2分别吸取10毫升样品到两个无菌的小试管中，，分别在80和100℃的水

浴中加热10分钟，冷却用营养琼脂分别做芽孢（36±1℃、72小时）

和耐热芽孢（55±1℃、72小时）的划线培养。

3.3采用普通营养琼脂培养基或快速检测培养基做嗜冷菌/低温菌的划线培

养（4—6℃ 10天或21±0.5℃ 25小时）。

3.4 必须用高盐察氏或虎红琼脂培养基做霉菌和酵母菌的划线培养

（25—28℃ 5--7天）

4、对样品做感官检测。

5、用PH计检测样品的PH值。

6、将样品倒掉，进行包装密封性检查，并进行记录。

7、记录菌落特征。

8、选区不同形态的单一菌落进行坚定。

8.1 革兰氏阴性菌和阳性菌的鉴定：

8.1.1涂片、革兰氏染色、镜检。或结晶紫染色、镜检、氢氧化钾拉

丝试验。

8.1.2革兰氏染色、结晶紫染色方法见《微生物检测》

8.1.3氢氧化钾拉丝试验

在微生物载物片上滴一滴3%氢氧化钾，用接种针从培养皿上的

菌落中挑取微生物，放在氢氧化钾溶液中用力搅拌。7—10秒后，抬

起针头，观察针头和玻片之间是否有丝状物，如果15—20 秒后二者

之间无丝状物，停止搅拌。

判定：无丝状物阳性；有丝状物阴性。

8.2 过氧化氢酶试验（或过氧化氢酶试纸）（产气试验）：

试剂：10%过氧化氢溶液

步骤：在微生物载物片上滴一滴10%过氧化氢，用接种针从培养皿上的菌落中挑取微生物，放在过氧化氢溶液中看是否有气体产生。

判定：产气阳性；不产气阴性。

8.3氧化酶试验

试剂：含1%四甲基双噻二胺和99%的乙醇溶液。

步骤：用上述试剂将一张滤纸浸透（或直接采用氧化酶试纸条），然后进行细菌培养物的涂片试验。

判定：30秒内使显色物质变为深蓝色阳性，不变色阴性。

三、酸包

1、发现酸包后，及时将料液快速转入无菌瓶中。

2、记录批次

3、其它项目检测同胀包。