明胶包被溶液
高尔基染色中文说明书
下面是FD 快速高尔基染色试剂盒（PK401）中文版的说明书，仅供参考：FD Rapid GolgiStain TM KitFD快速高尔基染色试剂盒神经元和胶质细胞形态学研究的完整Golgi-Cox染色体系使用手册中文版PK401/PK401A仅用于体外研究不能用于诊断或其它用途I. 介绍Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态最有效的方法之一。
使用Golgi 技术，在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。
然而Golgi染色法的不可靠性且费时已成为这种方法广泛应用的障碍。
FD Rapid GolgiStainTM Kit(FD快速高尔基染色法)是根据Ramón-Moliner，Glaser和Van der Loos所阐述的方法原理设计的。
该试剂盒不仅极大地改进并简化了Golgi-Cox技术，而且被证实在显示神经元和胶质细胞，尤其是树突棘的形态细节极为灵敏可靠。
启维益成的FD Rapid GolgiStainTM Kit已被广泛测试并用于数种动物脑及去世病人的脑。
II. 试剂盒组分室温保存PK401A PK401溶液A 125 ml 250 ml溶液B 125 ml 250 ml溶液C 125 ml x 2 250 ml x 2溶液D 125 ml 250 ml溶液E 125 ml 250 ml琉璃样品回收器 2 2天然毛画笔 2 2滴瓶 1 1塑料镊子 1 1使用手册 1 1III. 需要但未包括在试剂盒里的物品1. 双蒸水或Milli-Q水2. 塑料/玻璃管或瓶3. 组织学耗材：明胶包被的显微镜载玻片（Cat.#PO101）盖玻片染色罐乙醇二甲苯树胶封片剂Permount®光学显微镜IV. 安全操作注意事项1. FD Rapid GolgiStainTM Kit仅用于体外研究，不能用于诊断或其它应用。
2. 试剂盒所包含有试剂是有毒的，吸入或接触皮肤是有害的，如果吞咽可能是致命的。
明胶包被的载玻片制作流程
明胶包被的载玻片制作流程1. 引言嘿，大家好！今天咱们聊聊一个听起来很高大上的话题——明胶包被的载玻片。
别担心，这听上去复杂，其实就是把载玻片“打扮”一下，让它们更好用、更耐用。
明胶这种东西，大家都知道吧？它不仅能做美味的果冻，还能在科学实验中派上大用场！那么，接下来咱们就来看看具体怎么做吧，保证让你觉得这个过程既简单又有趣！2. 准备材料2.1 基础材料首先，咱得准备一些基础材料。
这包括载玻片（嘿，这个大家肯定见过），明胶粉，纯净水，还有一个小锅子，当然，最重要的还有耐心和好奇心哦！如果你没见过载玻片，那可真得看看了，薄薄一片，像是小小的玻璃窗，透亮透亮的。
2.2 明胶的准备接下来，就该准备明胶了。
你可以在超市里买到明胶粉，千万别忘了查看保质期哦！将明胶粉按照说明书上的比例，用纯净水泡发。
泡发后，咱们就把它放在小锅里加热，让它慢慢溶解。
哎呀，热的时候一定要小心哦，不要让它煮开，免得明胶变得“性情大变”，粘稠得跟什么似的。
3. 包被过程3.1 涂抹明胶等明胶完全溶解后，就可以开始大展身手了！先把载玻片清洗干净，确保没有灰尘和污垢，这样才能让明胶“服服帖帖”地粘上去。
然后，用小刷子或者吸管，把溶解好的明胶均匀地涂抹在载玻片上。
涂的时候，心里默念“平平稳稳，包裹妥妥”，这样心情也能变得轻松点。
涂抹的动作要轻柔哦，不然可能会把载玻片弄碎，那就太得不偿失了！3.2 干燥固化涂好明胶后，就要把载玻片放在阴凉处晾干。
这个过程可得耐心等候，大概需要几个小时。
晾的时候，可以时不时瞄一眼，看看明胶的变化，感觉自己像是在等一件艺术品慢慢成型，心里美滋滋的。
等明胶完全干透后，表面会变得光滑且透亮，真是太好看了！这时，心里想着：“嘿，我真是个小科学家！”4. 应用与总结4.1 实验乐趣一旦载玻片完成了明胶的包被，咱们就可以把它拿去做实验啦！这时候，明胶的作用就体现出来了，它能让细胞等样本更好地附着在载玻片上，观察起来简直是如鱼得水，轻松愉快！哎，科学实验的乐趣就藏在这些小细节里，每一步都值得品味。
免疫组化,免疫检测
免疫组化,免疫检测北京华越洋生物-----------------------------------------------DMDC玻片硅化剂(2%) 100ml 免疫组化40% 室温,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由二甲二氯硅烷(DMDC)组成。
玻片硅化试剂盒(APES法) 3×100ml 免疫组化40% 4℃,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由APES、洗涤液、DEPC水组成。
玻片硅化试剂盒(APES法) 3×500ml 免疫组化40% 4℃,6个月玻片的硅化,包括盖玻片和载玻片主要由APES、洗涤液、DEPC水组成。
PBS-Triton去污剂100ml 免疫组化40% 室温,12个月去污主要由PBS、Triton-100组成。
Sorensen磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH5.3-8.04)500ml 免疫组化40% 4℃,6个月组织化学常用缓冲液主要由磷酸二氢盐(钠/钾)和磷酸氢二盐(钠/钾)溶液组成,按不同比例混合后获得对用PH值。
pH值可选5.3，5.6，5.91，6.24，6.47，6.64，6.81，6.98，7.17，7.73，8.04。
Sorensen磷酸缓冲液(1×,pH6.2) 500ml 免疫组化40% 4℃,6个月少量细胞趋化实验主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化镁、氯化钙组成,终浓度17mM。
Sorensen磷酸缓冲液(10×,pH6.2) 500ml 免疫组化40% 4℃,6个月少量细胞趋化实验主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化镁、氯化钙组成,终浓度170mM。
TBS缓冲液(0.02mol/L,pH8.2) 500ml 免疫组化40% 室温,6个月免疫金银染色缓冲液主要由Tris、氯化钠组成。
TBS缓冲液(0.05mol/L,pH7.4) 500ml 免疫组化40% 室温,6个月免疫金银染色缓冲液主要由Tris、氯化钠、叠氮钠、BSA组成。
明胶 溶解
明胶溶解1. 什么是明胶？明胶是一种由动物骨骼、皮肤或结缔组织提取而来的蛋白质。
它主要由胶原蛋白组成，具有黏性和透明度高的特点。
明胶在食品工业、制药工业、摄影等领域有广泛的应用。
2. 明胶的溶解过程明胶通常以固体形式存在，需要在溶剂中进行溶解才能发挥其功能。
下面是一般情况下明胶的溶解过程：1.准备溶剂：常用的溶剂包括水、盐水和酸碱溶液等。
选择合适的溶剂取决于具体应用需求。
2.加热：将溶剂加热至适当温度，通常在40-60°C之间。
3.加入明胶：将固态明胶块或粉末逐渐添加到加热后的溶剂中。
搅拌均匀以确保明胶充分分散。
4.搅拌：使用搅拌器或搅拌棒搅拌溶液，以帮助明胶更好地溶解。
5.静置：将溶液静置一段时间，让明胶彻底溶解。
静置时间取决于明胶的类型和溶剂的温度。
6.过滤：如果有需要，可以使用滤纸或过滤器将溶液中的杂质去除。
3. 明胶溶解的影响因素明胶的溶解过程受到多种因素的影响，包括以下几个方面：3.1 温度温度是影响明胶溶解速度和效果的重要因素。
一般来说，较高的温度会加快明胶的溶解速度。
然而，过高的温度可能会导致明胶变性，从而降低其功能。
3.2 pH值pH值对明胶的溶解也有一定影响。
在酸性条件下，如pH值低于4，明胶容易发生水解反应而降解。
而碱性条件下，如pH值高于9，明胶也容易发生水解反应。
3.3 明胶浓度明胶浓度越高，在相同条件下其溶解速度越慢。
这是因为较高浓度的明胶更难以分散和溶解。
3.4 搅拌速度搅拌速度对明胶的溶解也有影响。
适当的搅拌可以促进明胶颗粒与溶剂的接触，从而加快溶解速度。
4. 明胶溶解的应用明胶在食品工业、制药工业、摄影等领域有广泛的应用，下面介绍一些常见的应用：4.1 食品工业明胶在食品工业中被广泛用作增稠剂、凝固剂和乳化剂等。
例如，在果冻、糖果和冻品中，明胶可以增加其黏性和口感。
4.2 制药工业在制药工业中，明胶常被用于制备软胶囊、片剂和注射液等。
它可以作为药物的包裹材料或稳定剂，延缓药物释放。
1体外诊断试剂研发包被标记检测等详细步骤注意点影响因素
1体外诊断试剂研发包被标记检测等详细步骤注意点影响因素一、抗体包被详细步骤：用包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/mL。
在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1mL，4℃过夜。
次日，平衡至室温弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次1分钟。
加入封阻液200uL，37℃温浴2-3h，用洗涤缓冲液洗3次，每次1分钟。
加入200uL含5%蔗糖的PBS缓冲液，37℃温浴1h，甩干后37℃烘干1h后自封袋封存（含干燥剂）。
包被缓冲液：10mM PBS;pH7.420mM Tris-HCL；pH7.2-8.050mM碳酸盐缓冲液；pH9.6洗涤缓冲液：10mM PBST(含有0.05%吐温)pH7.4封阻液：10mM PBS缓冲液ph7.4，含1%BSA二、过碘酸钠氧化法标记步骤：称0.5mg HRP，溶于0.25ml纯化水，入20uL新配的0.1M NaIO4，温避光反应20min（15-30min）。
1mM醋酸钠缓冲液透析，4度过夜，加入50ul0.16M乙二醇，混匀静置30min，加入5ul0.2M CBS。
立即加入0.5mg抗体，室温避光轻混2-4h，加入10ul新配的4mg/ml NaBH4，4度避光2h。
对PBS透析过夜调浓度，甘油对半稀释，-20冻存。
三、具体操作步骤1.配制稀释液（PBS，pH7.2～7.4，含2%BSA）；2.取1块预包被板，平衡至室温（大概时间20min）；3.取CA125抗原一支（冻干品，500U/支0.5mL纯水复溶）复溶混匀；4.加入稀释液，配制浓度为12U/mL，50U/mL的抗原液作为校准品；5.将-20℃酶标抗体（冻存浓度为500ug/mL）室温快速溶解（可以用手温或37℃水浴溶解），加入稀释液中，酶使用浓度为1ug/mL；6.酶反应底物配置，完成后用锡箔纸避光，使用之前必须平衡至室温（至少20min）7.所有试剂使用前平衡至室温（大概20min，液体较多则平衡至30min）8.每个孔加样100ul（垂直悬空加入，切勿碰到孔壁）盖上封板膜37℃孵育1h，和90min，注意边缘效应，边缘数值一般较高；9.沿弧线甩干液体，移液枪小心加入300uL PBST（0.05%吐温）洗涤液，不要流出孔外，放置到微量振荡器振荡1min，重复洗涤四次。
实验室常用实验方法-人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养
实验室常用实验方法-人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养___培养的步骤如下：1.将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存，注意储存时间不要超过规定时间。
2.使用钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。
3.使用手术钳夹紧脐带下端，加入15ml的胶原酶（1mg/ml）室温下消化15-20分钟，并不时上下摇动脐带。
4.消化完后，将下端手术钳松开，消化液流入一个50ml无菌离心管中，用无菌的PBS溶液冲洗脐带2-3次。
5.将收集液离心（2000转/分）3分钟，倒去上清，加入10mlM199培养基（加入10U/ml的bFGF），用弯管吹散细胞，将所有液体转入一个用明胶包被好的培养瓶中，37℃培养。
6.在每个培养瓶中加入3-4ml无菌的1%的明胶溶液，摇匀使得明胶溶液完全铺满瓶底，放入37℃孵育，最少2小时，用前将明胶溶液倒了即可，明胶包被有利于细胞贴壁。
7.培养24小时后，倒掉培养基，并用无菌的PBS溶液清洗2-3次，洗掉红细胞和死细胞，加入10ml新鲜的M199培养基。
8.每2天换一次培养基（每次换掉2/3的培养基）。
9.一般培养5-7天，细胞可长满至80-90%单层，这时可以传代。
10.倒掉培养基，用无菌的PBS溶液清洗2-3次，加入2-3ml消化液（0.25%胰酶+0.1%EDTA）消化细胞，在显微镜下观察，一旦细胞变圆，即加入2-3倍的有血清的DMEM培养基终止反应。
11.使用弯管将细胞吹打下来，并将所消化的细胞转移到一个50ml无菌离心管中，2000转/分，离心3分钟。
12.倒掉上清，加入10ml新鲜培基，一般一瓶细胞可传代3-4瓶。
以后照此传代培养。
13.一般传代2-3代（培养了20天左右）用于做各种实验效果最好。
包被细胞培养板的相关问题
包被细胞培养板的相关问题培养板的包被及相关问题：为了适应不同的实验需要，可对培养板用不同的物质进行包被后使用，这其中有促进细胞黏附的，也有用于一些特殊检测需要的。
不同的实验目的可能具体的方案亦不同，根据需要灵活掌握。
(一)多聚赖氨酸包被：问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
问：PLL的分子量有3-5万，7-15万，15-30万几种，应怎样选择？？谢谢：）答：我们养神经细胞，用的是分子量3万到7万的pll 。
免疫层析试纸包被技术简介
免疫层析试纸包被技术简介试纸生产过程中一般有三种溶液的包被处理，即质控溶液，检测溶液，和结合物溶液（胶体金）。
质控和检测溶液就是C/T线上包被的溶液。
在免疫层析试纸硝酸纤维素膜表面进行C/T线的包被，是试纸生产制作的关键环节之一。
免疫诊断试剂中使用的硝酸纤维素膜有两类，一种是免疫渗滤产品用的，按孔径选择一般采用0.45um-1.2um的膜，与分子生物学中用的印迹转移膜一样。
Whatman Schleicher &Schuell 的膜属于纯采用100%的纯硝酸纤维素，蛋白结合能力较高。
另一类即免疫层析用膜，一般按侧向流动速度来划分，常用的范围一般在120-180秒/4cm。
目前市场上的硝酸纤维素膜材以带塑料底衬为主，也有部分的膜不带底衬。
不带底衬的膜需注意膜面的正反面，其光滑度有适当差别。
鉴于流动封闭技术的普及，C/T线的包被目前流行先将膜粘贴在塑料底板上，然后直接将塑料底板放在仪器上进行划线操作，干燥后进行其他部分的贴板组装，这种划膜工艺可简称为划板。
但部分产品的工艺要求先直接在膜上划好C/T线，然后用特定配方的溶液将膜进行浸泡封闭处理，干燥后再贴膜及其他部分材料，这种划膜工艺可简称为划膜。
在结合物溶液（胶体金）的包被上，较多的用户倾向于用气动喷头进行定量操作。
在科研及研发项目中，往往喷一条线或几条线就够用了，因此在单维往复平台上一次喷一条线也可接受。
鉴于胶体金切条宽度一般在3--7mm，不方便一条条依次地在移动平台上固定和取放。
因此在批量生产过程中，一般建议采用成片的胶体金垫，用三维平台往复来回间隔喷线，一次即可喷出二三十条。
此后将喷好的金干燥再裁切成条，这样的操作会效率高，适合规模生产。
在某些免疫层析试纸产品生产工艺中，层析膜材或样品垫膜材需要用特定溶液进行整平面包被，要求效果均匀，如层析膜和样品垫的特定封闭处理。
而一般的浸泡或铺金工艺满足不了要求。
这时可用气动喷头叠加喷线成面。
通过对溶液量和气体压力的调节，往往可以取得好的效果。
明胶包被溶液
明胶包被溶液简介：明胶包被溶液和多聚赖氨酸溶液一样，都是粘附剂，常用于载玻片的包被，可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。
明胶包被溶液主要由优质明胶和明矾等组成，可以用于促进细胞的贴壁生长和核酸杂交。
制备好的载玻片可4℃保存半年。
组成:操作步骤(仅供参考)：1、 用于细胞培养① 根据实验需要明胶包被溶液稀释至适当浓度溶液后即可使用。
不同的细胞，明胶包被(Coating)的时间和浓度，甚至稀释液的选择有所不同，请自行参考相关文献进行适当的包被。
②明胶包被溶液用于细胞培养时，有些实验需要包被1～2h ，有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后，吸除明胶包被溶液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。
通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥2h 或更长时间。
干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
2、 用于核酸杂交① 方法一：取事先准备好的载玻片或盖玻片经冷却至室温，在明胶包被溶液中上下浸蘸几下，自然干燥，亦可室温保存1个月。
② 方法二：明胶包被溶液涂于玻片上，自然干燥后即可使用，可用于细胞涂片和切片。
③ 方法三：滴加明胶包被溶液至玻片上，用另一盖玻片以血涂片方法推片或用另一玻片紧贴于其上，相互摩擦以使两玻片相对的一面涂布上明胶包被溶液。
注意事项：1、 明胶包被溶液可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的明胶包被会产生一定的细胞毒性。
2、 浸蘸明胶包被溶液时，务必使玻片完全浸入液体中，否则易使包被不完全产生样本脱落现象。
编号 名称 IH0205 Storage 明胶包被溶液 50ml 4℃ 避光 使用说明书 1份3、干燥过程中注意避免尘埃污染。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
明胶包被液
明胶包被液简介：明胶包被溶液简称明胶包被液，是和多聚赖氨酸溶液一样，都是粘附剂，常用于载玻片的包被，可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。
明胶包被液主要由优质明胶和明矾等组成，可以用于促进细胞的贴壁生长、免疫组化、核酸杂交等领域。
制备好的载玻片可4℃保存半年。
该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:操作步骤(仅供参考)：1、 用于细胞培养①根据实验需要明胶包被液稀释至适当浓度溶液后即可使用。
不同的细胞，明胶包被(Coating)的时间和浓度，甚至稀释液的选择有所不同，请自行参考相关文献进行适当的包被。
明胶包被液在低温情况下容易形成胶冻状，应孵育溶解后使用。
②明胶包被液用于细胞培养时，包被至少5min ，有些实验需要包被1～2h ，有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后，吸除明胶包被液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。
通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥2h 或更长时间。
干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
2、 用于核酸杂交：明胶包被液在低温情况下容易形成胶冻状，应孵育溶解后使用。
①方法一：取事先准备好的载玻片或盖玻片经冷却至室温，在明胶包被液中上下浸蘸几下，自然干燥，4℃备用，亦可室温保存1个月。
②方法二：明胶包被液涂于玻片上，自然干燥后即可使用，可用于细胞涂片和切片。
③方法三：滴加明胶包被液至玻片上，用另一盖玻片以血涂片方法推片或用另一玻片紧贴于其上，相互摩擦以使两玻片相对的一面涂布上明胶包被液。
注意事项：1、 明胶包被液可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的明胶包被会产生一定的细胞毒性。
编号 名称 IH0092 Storage 明胶包被液 100ml 4℃ 使用说明书 1份2、浸蘸明胶包被液时，务必使玻片完全浸入液体中，否则易使包被不完全产生样本脱落现象。
3、干燥过程中注意避免尘埃污染。
溶液的配制
溶液的配制1.包被液－－pH9.6的碳酸盐缓冲液2.洗涤液－－磷酸盐缓冲液＋吐温3.封闭液－－明胶4.抗体稀释液、样品稀释液、酶标稀释液－－磷酸盐5.底物－－－A和B混合液，进口非混合液6.有机溶剂－－－乙腈等2. 酶联免疫检测仪3. 辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 工作稀释度1:1000。
4. 包被液:：0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液,4℃，保存,Na2CO3 0.15克, NaHCO3 0.293克,蒸馏水稀释至100 ml。
5. 稀释液：0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20, ４℃，保存. NaCl 8g, KH2PO4 0.2g,Na2HPO4.12H2O 2.9g, Tween—20，0.5ml. 蒸馏水加至1000ml。
6. 洗涤液：同稀释液7. 封闭液：0.5%鸡卵清蛋白，pH7.4 PBS。
8. 邻苯二胺溶液(底物)：临用前配制0.1M 柠檬酸(2.1g/100ml), 6.1ml 0.2M Na2HPO4.12H2O(7.163g/100ml) 6.4ml, 蒸馏水12.5ml, 邻苯二胺10mg, 溶解后, 临用前加30%H2O2 40 微升。
9. 终止液：2mol/LH2SO4。
四. 操作步骤1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃温育1小时后，4℃冰箱放置16～18小时。
2. 洗涤：倒尽板孔中液体，加满洗涤液，静放三分钟，反复三次，最后将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽。
3. 加封闭液200微升，37℃放置一小时。
4. 洗涤同2。
5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,，每孔200微升。
同时作稀释液对照。
37℃放置2小时。
6. 洗涤同2。
7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃1小时。
8. 洗涤同2。
9. 加底物：邻苯二胺溶液加200ml，室温暗处10--15分钟。
明胶包被的载玻片制作流程
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在进行明胶包被的载玻片制作之前，需要做好充分的准备工作。
包被细胞培养板的相关问题
培养板的包被及相关问题：为了适应不同的实验需要，可对培养板用不同的物质进行包被后使用，这其中有促进细胞黏附的，也有用于一些特殊检测需要的。
不同的实验目的可能具体的方案亦不同，根据需要灵活掌握。
(一)多聚赖氨酸包被：问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
问：PLL的分子量有3-5万，7-15万，15-30万几种，应怎样选择？？谢谢：）答：我们养神经细胞，用的是分子量3万到7万的pll 。
以PBS配成1mg/ml的母液，－20度保存。
包被细胞培养板的相关问题
培养板的包被及相关问题：为了适应不同的实验需要，可对培养板用不同的物质进行包被后使用，这其中有促进细胞黏附的，也有用于一些特殊检测需要的。
不同的实验目的可能具体的方案亦不同，根据需要灵活掌握。
(一)多聚赖氨酸包被：问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来si gma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250m l，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
明胶溶液的配制方法
明胶溶液的配制方法【原创实用版3篇】《明胶溶液的配制方法》篇1明胶溶液的配制方法如下：1. 准备所需材料：明胶粉、蒸馏水、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
2. 称取所需明胶粉：根据需要配制的明胶溶液的浓度和体积，计算出所需的明胶粉的质量。
称取明胶粉时，应将其放在干净的称量纸上，并避免与空气接触过久。
3. 将明胶粉加入烧杯中：将称取的明胶粉放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌至明胶粉完全溶解。
4. 加入足够的蒸馏水：加入足够的蒸馏水，使烧杯中的明胶溶液体积达到所需的体积。
5. 搅拌均匀：用玻璃棒搅拌均匀，确保明胶溶液浓度均匀。
6. 倒入容量瓶中：将明胶溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒，将洗涤液倒入容量瓶中。
7. 定容：加入足够的蒸馏水，使容量瓶中的明胶溶液体积达到刻度线。
8. 摇匀：摇匀容量瓶，使明胶溶液充分混合均匀。
9. 贴标签：在容量瓶上贴上标签，标明明胶溶液的浓度、体积和配制日期等信息。
需要注意的是，在配制明胶溶液时，应尽量避免明胶粉与空气接触过久，以免明胶粉吸潮变质。
《明胶溶液的配制方法》篇2明胶溶液的配制方法如下：1. 准备所需材料：明胶粉、热水、搅拌器、容器等。
2. 将明胶粉倒入容器中，加入适量的热水，搅拌均匀直至明胶粉完全溶解。
3. 继续加入适量的热水，搅拌均匀，直到溶液达到所需的浓度。
4. 将溶液倒入另一个容器中，加入适量的搅拌器，继续搅拌至溶液均匀。
5. 配制好的明胶溶液可以在常温下保存，但需要注意避免潮湿和阳光直射。
需要注意的是，在配制明胶溶液时，应该选择优质的明胶粉，并且配制过程需要严格控制水温和搅拌速度，以保证溶液的稳定性和质量。
《明胶溶液的配制方法》篇3明胶溶液的配制方法如下：1. 准备所需材料：明胶粉、蒸馏水、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
2. 称取所需质量的明胶粉，通常情况下，配制1000 毫升1% 的明胶溶液需要称取10 克明胶粉。
3. 将称取的明胶粉放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌至明胶粉完全溶解。
明胶包被培养皿原理
明胶包被培养皿原理明胶包被培养皿是一种常用的细菌培养方法，它的原理是在寒天胶包中添加适量的营养物质、微生物指示剂，通过将其置于热水中煮沸，使胶体凝固，形成一个透明的固体培养基。
该固化的培养基具有良好的透明度和可溶液性，并且可以提供养分来支持细菌生长。
此外，明胶包还具有延缓或阻止微生物生长的能力，因为它可以在凝胶中选择性地固定细菌物种。
1.准备培养基：根据所需的性状和所使用的细菌物种，选择合适的培养基配方。
通常，培养基包含寒天、营养物质（如蛋白胨、葡萄糖、植物提取物等）、微生物指示剂（如溶血素）等。
2.加热溶解：将培养基配方溶解在适量的水中，加热至溶解完全。
3.通滤：将溶解的培养基通滤，以去除杂质和微生物。
4.至装液体：将纯净的培养基倒入培养皿中，使其达到适当的高度。
5.加入微生物指示剂：向培养基中加入微生物指示剂，以检测细菌的生长情况。
微生物指示剂通常是一种易于识别的细菌株，对于一些特定的微生物，它会产生特定的反应，并在明胶包中形成特殊的表现。
6.加热固化：将装有培养基和微生物指示剂的培养皿装在一固定的加热器中，通过加热使其胶凝。
7.存储：待培养基冷却后，需在适当的温度下储存，以保持其效果和持久性。
明胶包被培养皿在实验室中有着广泛的应用。
首先，明胶包可以提供一个适合微生物生长的环境，以加快细菌培养和成长的速度。
其次，明胶包的透明度可以提供便于观察和检测微生物生长状态的优势。
此外，明胶包还能够选择性地固定一些微生物，使其在胶体中生长并展示出特定的形态、色素或反应。
在实验中，明胶包被培养皿主要用于以下方面的研究：1.微生物生长特性：通过观察明胶包上微生物的生长状态和形态特征，可以了解微生物的生长规律、菌落特征等。
2.抗菌试验：将抗菌物质添加到明胶包中，观察菌落生长受到抑制或杀灭的情况，以评估抗菌物质的效果。
3.微生物分离：通过将含有多种微生物的样品涂布在明胶包上，观察不同的细菌或真菌在明胶包上生长出不同的菌落特征，从而分离不同的微生物。
明胶法注意事项
明胶法注意事项明胶法是一种经典的化学实验方法，用于合成水凝胶、溶胀胶和固化剂等。
在进行明胶法实验时，需要注意以下几点：第一，实验环境要保持清洁。
明胶实验涉及到使用一些比较精细的实验仪器和试剂，如平板、透明膜、移液器等，要保持实验环境的清洁，以免杂质影响实验结果。
第二，操作要严谨细致。
明胶法实验有着一系列的步骤和操作要求，如融解明胶、加入溶液、混匀、倒入模具等，每个步骤都需要严格控制操作时间和操作顺序，以确保实验能够顺利进行并得到准确的结果。
第三，注意溶液的配制和浓度。
在明胶法实验中，溶液的配制和浓度对实验结果有着重要的影响。
要按照实验要求准确称取试剂，正确控制溶液的浓度，以免过高或过低的浓度对实验结果产生影响。
第四，注意温度的控制。
在明胶法实验中，温度的控制是非常重要的。
明胶的融解温度、溶液的配制温度和固化剂的加热温度都需要严格控制，以保证实验能够顺利进行。
第五，实验室安全要求。
在进行明胶法实验时，需要遵守实验室的安全要求，如佩戴实验手套、护目镜等个人防护用具，避免接触有毒有害物质，确保实验的安全性。
第六，精密仪器仔细校正。
在明胶法实验中，涉及到一些精密仪器的使用，如电子天平、PH计等，在进行实验之前要仔细校正这些仪器，以确保测量结果的准确性。
第七，注意实验过程中的实时观察。
明胶法实验的一些反应和变化是在实时观察中才能看到的，如明胶的凝固、溶液的上浮等。
在进行实验时，要时刻注意观察这些变化，及时记录实验现象，以便后续的研究和分析。
总之，明胶法实验是一种比较复杂的实验方法，需要严格按照实验要求进行操作，注意实验环境的清洁，控制溶液的配制和浓度，严格控制温度，遵守实验室安全要求，正确校正仪器，实时观察实验过程中的变化等。
只有这样，才能够得到准确可靠的实验结果。
明胶包被的显微镜载玻片—QWBIO
明胶包被的显微镜载玻片—QWBIO产品名称：明胶包被的显微镜载玻片（Gelatin-Coated Microscope Slides）产品货号：PO101产品包装：100片每盒产品简介：启维益成提供的该产品的载玻片采用最高质量的玻璃制造，预清洗后用3%明胶溶液包被而成。
每一张载玻片（大小：75x25 mm，厚度：1.0 mm）都有一个磨砂末端。
这些载玻片采用优质的载玻片盒子包装，并使用气密性塑料袋密封来确保在运输和存储过程中始终是干燥的状态。
产品用途：启维益成提供的明胶包被的显微镜载玻片能够避免组织切片在免疫组织化学染色实验的频繁清洗操作中脱离载玻片而遗失的情况发生。
该产品适用于冷冻切片、组织化学染色、免疫组织化学和原位杂交。
这些载玻片能够提供更好的组织粘连，不需要额外的胶粘和涂层技术，极大地节省实验时间和成本。
英语介绍：Gelatin microscope slides are coated with a 2% solution of gelatin and chromium potassium placing a permanent positive charge on the microscope slide ensuring a firm electrostatic attraction to the slide of frozen tissue sections, cells and cytology preparations binding them to the glass surface.The gelatin microscope slides prevent the loss of tissue sections from floating off the slide during frequent washing when carrying out immuno-histochemical staining. Gelatin microscope slides are ideal for cyrosections, histochemical stains, immunohistochemistry and in situ hybridization. These slides provide superior tissue adhesion and save laboratory time and money eliminating the need for extra adhesive or coating techniques.。
明胶——精选推荐
0.1%明胶溶液的配制称取0.5 g明胶，溶于500 ml PBS中，（在水浴箱中溶解40度左右就可以）0.22μm孔径的滤膜过滤。
无菌条件分装，50 ml/瓶，冰箱冻存。
120°高压20分钟即可，即使配制时没有溶解也可直接高压，高压过程中即溶解。
高压后1%的浓度分装做储存，0.1%使用，4°储存有些呈果冻状，平衡至室温时即呈液态了。
明胶知识问答：一、明胶铺被1、问；我曾经常识过高压与过滤两种方法。
其中高压之后的明胶，即使放4℃冰箱仍很澄清，这是不是明胶变性？你觉得高压可靠吗？明胶里是蛋白与氨基酸能耐住这么高的温度吗？另外，明胶在37℃水浴溶解澄清后，过滤仍不易通过（每50ml大约可滤到30ml），而且过滤后的明胶再放到4℃就又变为胶冻状，经37℃水浴澄清后铺瓶。
这样反复三次，发现我的明胶有些浑浊，不知什么原因，是不是这样的反复水浴对明胶十分的不利？答：不用过滤，高压就可以了，可靠，我都用了好几年了，而且，我这个方法教给很多很多很多人了。
2、"0.5-2%明胶PBS",到底是该怎样做,能详细些吗?6孔板每孔要用多少明胶呢?不同规格的培养瓶加明胶的量是怎样算的呢?是将底部铺满为准吗?问：我正在养，前一段时间养了牛的，结果第二次就长细胞了，但是第二次的在第二天就发现像是染菌了，因为没舍的倒掉，换液后又放了三天，结果看见有多角形细胞生长，而且有成片生长的，当时长势还不错，但是培养瓶内漂了大片物质，当时还以为是组织碎块，但是这些东西长势飞快，换液后第二天就有很多，类似树根状的。
为了防止在孵箱内感染别的细胞就倒掉了。
紧接着又做了两次牛的都没有细胞生长。
由于牛头难消毒，而且不方便一人操作。
我又尝试养大鼠的，取新生两周后的大鼠4只，结果匀浆后，再过100目和200目网时发现200目网上没东西，请问是因为大鼠太少？还是匀浆太细了？我开始是用的布式漏斗加尼龙网过滤，但尼龙网高压后易变形，我就借来别人的不锈钢网类似勺状（底是平的），网会有影响吗？请问你养时，取200目网上的东西后能见到微血管段吗？微血管段消化离心后有含血清的培养基悬浮铺瓶后能见到细胞吗？再是您的细胞传代时是不是也要用明胶铺被培养瓶？答：大鼠太小了吧，取70-100g的大鼠吧，新手的话，5只大鼠做一瓶吧。
内皮细胞增殖实验步骤
一、脐带内皮细胞的分离1. 脐带收集用无菌止血钳夹闭脐带两端，在止血钳外侧剪断脐带，放入盛有4 ℃Cord Buffer 的饭盒内。
脐带在4 ℃放置不应超过24 小时。
2. 脐带内皮细胞分离（1）带无菌手套，取出脐带，在止血钳内侧用碘酒和酒精棉球消毒后，用无菌剪刀将两端脐带剪除。
（2）在脐带一端找到静脉，插入脐带静脉插管，用2 根粗丝线扎牢，用Cord Buffer 抽吸有的30 ml注射器冲洗静脉腔，至将脐血洗净。
（3）赶出静脉腔内残余液体，将脐带另一端用止血钳夹闭，用10 ml注射器连接针头，注入37 ℃预热的0.1 ％胶原酶约6-8 ml，放入37 ℃Cord Buffer中保温6-10 min。
（4）吸出静脉腔内胶原酶所消化的细胞悬液，加入预加有20 ml Cord Buffer的离心管中，冲洗静脉腔，一并加入离心管中。
（5）离心，1500 rpm，10 min弃上清，用5～7 ml 20 ％FCS，RPMT 1640重悬细胞，转入培养瓶，放5 ％CO孵箱。
二、牛下丘脑内皮细胞生长因子粗提物的制备1. 取新鲜牛下丘脑，加1.5倍体积的冰生理盐水用组织匀浆机匀浆，每次0.5 min，共6次。
2. 在4 ℃条件下用震荡器机械震荡约1.5 h。
3. 离心，10000 g，40 min，收取上清液。
4. 按0.5 ％加硫酸链霉素，4 ℃过夜。
5. 离心，20000 g，40 min，收取上清液。
6. 用紫外分光光度测280 nm，260 nm OD值按公式计算蛋白含量。
7. 过滤，分装，-20 ℃保存备用。
三、内皮细胞的培养与鉴定1. 培养瓶包被明胶培养瓶（25 cm）中加入0.2 ％明胶3 ml，使其铺满瓶底，放4 ℃备用。
用前弃去明胶溶液。
2. 原代培养将从脐带静脉中收集到的内皮细胞移入包被明胶的培养瓶（25 cm），加5～7 ml 20 ％小牛血清199培养基，按终浓度分别为20 μg/ml和100 μg/ml加入内皮细胞生长因子粗提物和肝素。
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明胶包被溶液
简介：
明胶包被溶液和多聚赖氨酸溶液一样，都是粘附剂，常用于载玻片的包被，可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。
明胶包被溶液主要由优质明胶和明矾等组成，可以用于促进细胞的贴壁生长和核酸杂交。
制备好的载玻片可4℃保存半年。
组成:
操作步骤(仅供参考)：
1、 用于细胞培养
①_x0001_ 根据实验需要明胶包被溶液稀释至适当浓度溶液后即可使用。
不同的细胞，明胶包被(Coating)的时间和浓度，甚至稀释液的选择有所不同，请自行参考相关文献进行适当的包被。
②明胶包被溶液用于细胞培养时，包被至少5min ，有些实验需要包被1～2h ，有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后，吸除明胶包被溶液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。
通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥2h 或更长时间。
干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
2、 用于核酸杂交
①_x0001_
方法一：取事先准备好的载玻片或盖玻片经冷却至室温，在明胶包被溶液中上下浸蘸几下，自然干燥，4℃备用，亦可室温保存1个月。
②_x0001_
方法二：明胶包被溶液涂于玻片上，自然干燥后即可使用，可用于细胞涂片和切片。
③_x0001_
方法三：滴加明胶包被溶液至玻片上，用另一盖玻片以血涂片方法推片或用另一玻片紧贴于其上，相互摩擦以使两玻片相对的一面涂布上明胶包被溶液。
注意事项：
1、 明胶包被溶液可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的明胶包被会产生一定的细胞毒性。
编号 名称 IH0205 Storage 明胶包被溶液 50ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
2、浸蘸明胶包被溶液时，务必使玻片完全浸入液体中，否则易使包被不完全产生样本脱落
现象。
3、干燥过程中注意避免尘埃污染。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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编号名称
CC0130 胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
IH0091 多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)
PT0001 BCA蛋白定量试剂盒
PW0082 丽春红S染色液(1×Ponceau S)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。