非发酵菌
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dl第二十一章 非发酵菌及检验
新鲜标本（胸腹水、脑脊液、脓汁等），分离培养 可疑菌落可涂片镜检。
分离培养
BAP、SS、MAC
鉴定
初步鉴定（菌落、菌体特征，色素、氧化酶、 KIA），最后鉴定（系统生化、血清学）
药敏试验
粪便
胸腹水 离心 脑脊液 沉淀 尿液 分泌物 血液 （增菌） 体液
分离培养 （SS、MAC）
可 疑 菌 落 初 步 鉴 定
不动杆菌属
不动杆菌属（Acinetobater）为一群不发酵
糖类、氧化酶 - 、无动力的革兰阴性杆菌。 生化反应：氧化酶 - ，MIU - - - ，硝酸盐 还原试验 - 。 耐药性：对全部氨基青霉素、一代二代头 孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药。
鲍曼不动杆菌在BAP上的生长现象
4 2 1
O-F
1
DNA
结果 总值
O
+ + — 6
+ — + 5
+ — — 4
鉴定值：1654
鉴定结果：铜绿假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）为条件致病菌，常引起抵抗力
低下患者的各种感染，在假单胞菌的感染 中检出率仅次于铜绿假单胞菌。 生化反应特殊：氧化酶 - ；赖氨酸脱羧酶 +； 氧化分解麦芽糖；水解七叶苷。 耐药性：含有-内酰氨酶，对亚胺培南天然 耐药，临床治疗首选磺胺类（TMP/SMZ）； 喹诺酮类：环丙沙星或替卡西林/克拉维酸。
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）是假单胞
菌属的代表菌种，为条件致病菌，是医院 感染的主要病原菌。可经多种感染途径、 污染导致多种感染，且对多种抗生素天然 耐药，因此有很重要的临床意义。
分离培养
BAP、SS、MAC
鉴定
初步鉴定（菌落、菌体特征，色素、氧化酶、 KIA），最后鉴定（系统生化、血清学）
药敏试验
粪便
胸腹水 离心 脑脊液 沉淀 尿液 分泌物 血液 （增菌） 体液
分离培养 （SS、MAC）
可 疑 菌 落 初 步 鉴 定
不动杆菌属
不动杆菌属（Acinetobater）为一群不发酵
糖类、氧化酶 - 、无动力的革兰阴性杆菌。 生化反应：氧化酶 - ，MIU - - - ，硝酸盐 还原试验 - 。 耐药性：对全部氨基青霉素、一代二代头 孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药。
鲍曼不动杆菌在BAP上的生长现象
4 2 1
O-F
1
DNA
结果 总值
O
+ + — 6
+ — + 5
+ — — 4
鉴定值：1654
鉴定结果：铜绿假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）为条件致病菌，常引起抵抗力
低下患者的各种感染，在假单胞菌的感染 中检出率仅次于铜绿假单胞菌。 生化反应特殊：氧化酶 - ；赖氨酸脱羧酶 +； 氧化分解麦芽糖；水解七叶苷。 耐药性：含有-内酰氨酶，对亚胺培南天然 耐药，临床治疗首选磺胺类（TMP/SMZ）； 喹诺酮类：环丙沙星或替卡西林/克拉维酸。
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）是假单胞
菌属的代表菌种，为条件致病菌，是医院 感染的主要病原菌。可经多种感染途径、 污染导致多种感染，且对多种抗生素天然 耐药，因此有很重要的临床意义。
[医药卫生]非发酵菌
![[医药卫生]非发酵菌](https://img.taocdn.com/s3/m/c95763c1941ea76e58fa04e2.png)
见于水和土壤中，都可作为咽部的正常菌群存 在，是人类少见的条件致病菌
荧光假单胞菌和污染的血制品关系密切，可见 于近期接受过血液制品而致菌血症的患者。
嗜麦芽窄食单胞菌
窄食单胞菌属,假单胞菌科，嗜麦芽窄食单胞菌 分布广泛，可引起条件感染是一种重要的医院 获得性病原体，本菌可分离于几乎所有部位， 最常见的是呼吸道.
100 100 96
100 94 0
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000
100 78 12
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100 9 0
75 18 0
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1
11
铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）
分布广泛，是非发酵菌中最具临床意义的细菌，也是 医院内感染最多见的细菌，主要引起条件感染。
感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人及静 脉药瘾者，感染多位于潮湿部位，如气管造口、留置 的导管、创面、外耳道、角膜和渗出性皮肤伤口处
葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）
初步分群鉴定试验
1、葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）
OF培养基:蛋白胨和养基:应只穿刺培养基顶部4mm，在培养4-6小时 后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果。更准确的 方法是湿片法和鞭毛染色。
本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存， 所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势，医院获 得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或ICU 的住院患者。
产碱杆菌属
氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌，不分解糖类,周鞭毛， 在含蛋白的肉汤中产氨。
有医学意义的产碱杆菌属主要有 木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种A.xylosoxidans subsp.
荧光假单胞菌和污染的血制品关系密切，可见 于近期接受过血液制品而致菌血症的患者。
嗜麦芽窄食单胞菌
窄食单胞菌属,假单胞菌科，嗜麦芽窄食单胞菌 分布广泛，可引起条件感染是一种重要的医院 获得性病原体，本菌可分离于几乎所有部位， 最常见的是呼吸道.
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铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）
分布广泛，是非发酵菌中最具临床意义的细菌，也是 医院内感染最多见的细菌，主要引起条件感染。
感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人及静 脉药瘾者，感染多位于潮湿部位，如气管造口、留置 的导管、创面、外耳道、角膜和渗出性皮肤伤口处
葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）
初步分群鉴定试验
1、葡萄糖氧化-发酵（O/F试验）
OF培养基:蛋白胨和养基:应只穿刺培养基顶部4mm，在培养4-6小时 后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果。更准确的 方法是湿片法和鞭毛染色。
本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存， 所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势，医院获 得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或ICU 的住院患者。
产碱杆菌属
氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌，不分解糖类,周鞭毛， 在含蛋白的肉汤中产氨。
有医学意义的产碱杆菌属主要有 木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种A.xylosoxidans subsp.
非发酵菌的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握非发酵菌的基本概念及分类；2. 熟悉非发酵菌的鉴定方法；3. 提高实验室操作技能，培养科学思维和严谨的工作态度。
二、实验原理非发酵菌是一类不发酵或不分解糖类的革兰氏阴性杆菌，主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。
非发酵菌的鉴定主要通过观察菌落特征、进行生化试验、动力与鞭毛观察等手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）非发酵菌菌种：假单胞菌、不动杆菌、产碱杆菌、莫拉菌、黄杆菌等；（2）培养基：普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、动力半固体培养基、氧化酶试验培养基等；（3）试剂：葡萄糖、乳糖、酵母提取物、酚红指示剂、氧化酶试剂等；（4）实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。
2. 实验仪器：（1）显微镜：用于观察菌落特征；（2）恒温培养箱：用于培养菌种；（3）酒精灯：用于无菌操作；（4）无菌操作台：用于无菌操作。
四、实验方法与步骤1. 菌落观察（1）将菌种接种于普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板，分别于30℃、37℃培养24小时；（2）观察菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘、表面、透明度等；（3）记录观察结果。
2. 动力与鞭毛观察（1）将菌种接种于动力半固体培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种在半固体培养基中的生长情况，如是否有鞭毛、菌落是否呈指状、螺旋状等；（3）记录观察结果。
3. 氧化酶试验（1）将菌种接种于氧化酶试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生氧化酶，即菌落周围是否出现绿色；（3）记录观察结果。
4. 氧化-发酵（O/F）试验（1）将菌种接种于氧化-发酵试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生酸，即菌落周围是否出现红色；（3）记录观察结果。
5. 麦康凯琼脂平板生长情况（1）将菌种接种于麦康凯琼脂平板，30℃培养24小时；（2）观察菌种在麦康凯琼脂平板上的生长情况，如是否生长、生长速度等；（3）记录观察结果。
非发酵菌 PPT课件
3生化反应：OX弱阳性或阴性，H2O2阳性， 能水解明胶，不发酵糖。 4抗原结构：有O抗原和H抗原，O抗原有特 异性。 5.抵抗力：抵抗力强，在水中可存活数月。 对化学消毒剂敏感。
致病性
可引起肺炎型（重症类型）、流感样型 （轻症类型）和肺外感染三种类型； 肺炎型死亡率高 感染后对该菌有一定的抵抗力。
葡萄糖产酸
+
+ + 端鞭毛 +
尿素
－ 无色杆菌属 + 土壤杆菌属
假单胞菌属
第 一节 假单胞菌属 (Pseudomonas)
一、 概述 1. 分类 2. 临床意义 3. 微生物特性 4.微生物检验 (1)检验程序 (2)鉴定 (3)药物敏感性试验(Antibacterial Susceptibility Test)
葡萄糖氧化
木糖氧化 乳糖氧化 精氨酸双水解酶
+
－ ＋ ＋
+
＋ ＋ ＋
+/－
+/－ － ＋
－
－ ＋ ＋
－
－ ＋ －/＋
－
－ ＋ －
鸟氨酸脱羧酶
苯丙氨酸脱氨酶 丙二酸盐利用
＋
＋ ＋
＋
＋ ＋
－
－ ＋
－
－ －
－
－ －/＋
－
－ －
枸椽酸盐利用
明胶液化 生长温度: 37℃ Nhomakorabea＋
－ ＋
＋
－ ＋
＋
＋ ＋
＋/－
－ ＋
＋
－ －
生长温度范围广，最适生长温度为35℃
产生各种水溶性色素：绿脓素、脓玉红素、荧光
素、脓褐素
对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药
非发酵菌
生物学特性
直或微弯杆菌，有荚膜，单端 直或微弯杆菌，有荚膜， 根鞭毛， 有1根鞭毛，运动活泼 根鞭毛 严格需氧 最适生长温度35℃ 需氧， 严格需氧，最适生长温度 ℃， 4℃不生长，42℃生长 ℃不生长， ℃ 严格需氧，氧化利用葡萄糖 利用葡萄糖、 严格需氧，氧化利用葡萄糖、 MAC生长 生长
血平板上形成大而扁平， 血平板上形成大而扁平， 湿润，边缘不齐， 湿润，边缘不齐，有金属 光泽，有生姜气味的灰绿 光泽， 生姜气味的灰绿 色菌落，并形成透明溶血 色菌落，并形成透明溶血 环。 有时可产生水滴样样菌落， 有时可产生水滴样样菌落， 无色素不溶血（ 无色素不溶血（囊性纤维 化病人） 化病人）
嗜麦芽窄食单胞菌
嗜麦芽窄食单胞菌为有动力杆菌，具有丛极鞭毛， 嗜麦芽窄食单胞菌为有动力杆菌，具有丛极鞭毛， 丛极鞭毛 血平板上菌落粗糙呈淡黄色或浅绿色，有氨气味。 血平板上菌落粗糙呈淡黄色或浅绿色，有氨气味。 赖氨酸脱羧酶试验阳性和DNA酶阳性、氧化酶 酶阳性、 根据 赖氨酸脱羧酶试验阳性和 酶阳性 阴性可很容易与其他假单胞菌区别 可很容易与其他假单胞菌区别， 阴性可很容易与其他假单胞菌区别，本菌葡萄糖氧 化缓慢，可快速氧化分解麦芽糖。 化缓慢，可快速氧化分解麦芽糖。
不动杆菌属
广泛分布于自然和医院环境中， 广泛分布于自然和医院环境中，能在潮湿和干燥的表面 生存，也可存在于健康人的皮肤. 生存，也可存在于健康人的皮肤. 无动力、氧化酶阴性、 无动力、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性 醋酸钙不动杆菌 鲍曼不动杆菌
鲍曼不动杆菌
在非发酵菌中本菌是在临床标本中的分离阳性率仅次于铜 绿假单胞菌而居第二位的条件致病 居第二位的条件致病菌 绿假单胞菌而居第二位的条件致病菌，通常不动杆菌对健 康人体不致病，但对体弱者可引起感染。 康人体不致病，但对体弱者可引起感染。 本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存， 本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存， 所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势， 所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势，医院获 得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或ICU 得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或ICU 的住院患者。 的住院患者。
非发酵菌群的分类鉴定
产碱杆菌属
莫拉氏菌属
无色杆菌属
土壤杆菌属
黄色素
.
+
13
—
黄杆菌属
莫拉氏菌属
假单胞菌属 产碱杆菌属
无色杆菌属 土壤杆菌属
鞭毛染色
端毛菌
周毛菌
假单胞菌属
产碱杆菌属，无色杆菌属，土壤杆菌属
O型
O/F —
无色杆菌属，土壤杆菌属
还原硝酸盐后产气
+
—
产碱杆菌属
土壤杆菌属
无色杆菌属
.
14
第四节、非发酵菌群的属内鉴别
支气管败血鲍特氏菌，金氏杆菌属，无色杆菌属，
莫拉氏菌属，艾肯氏菌属，土壤杆菌属。
触酶
+
—
假单胞菌属，产碱杆菌属，黄杆菌属，
金氏杆菌属，
支气管败血鲍特氏菌，无色杆菌属，
艾肯氏菌属
莫拉氏菌属，土壤杆菌属
O/F
动力
弱F
—
37℃
18—24 ℃
金氏杆菌属
艾肯氏菌属
—
+
—
+
+
—
支气管败血 假单胞菌属
黄杆菌属
鲍特氏菌
.
20
铜绿假单胞菌鉴别要点：
（1）、铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上能 产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色。
（2）、在血平板上经35—37℃，18—24h培 养可表现为：菌落灰绿色、半透明、大而扁 平、表面湿润、边缘不齐；有金属光泽；有 生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色 透明溶血环。
.
5
因此在临床上真正能分离出来且 有临床意义的非发酵菌群有：
假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、 鲍特氏菌属（百日咳鲍特氏菌除外）、金氏杆菌属、不 动杆菌属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土 壤杆菌属。
非发酵菌
30.6%
0.3
0.2
13.5%
0.1
0
铜绿假单胞菌组
n = 49
MRSA组 n = 148
铜绿假单胞菌感染者的死亡率达 MRSA感染者死亡率的2倍以上
Osmon S, et al. CHEST 2004;125:607–616.
45%
40%
35%
30%
22.10%
25%
20%
15%
10%
5%
0%
肺部感染 n = 33
44.2
41.2
40 34.4 36.8
31.3 31.7 32.1
30
27.6 28.9
22.5 22.8
20
10
0 阿 头 头 头 亚 环 美哌 氨 头 哌 庆 替
米 孢 孢 孢 胺 丙 罗拉 曲 孢 拉 大 卡
卡 哌 吡 他 培 沙 培西 南 哌 西 霉 西
星 酮/ 肟 啶 南 星 南 林/
酮 林 素 林/
. 侯天文等. 医学综述2002;8:547-548.
常见的非发酵菌有哪些？
非发酵菌
假单胞菌属
铜绿假单胞菌
不动杆菌属
鲍曼不动杆菌
窄食单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
产碱杆菌属
伯克霍尔德菌属
洋葱伯克霍尔德菌
黄杆菌属
. 汪复，张婴元. 实用抗感染治疗学 2004
为何需要高度重视非发酵菌？
分布广泛 分离率日益增高 耐药形势严峻
哌 培 培西 西 他 卡 吡 沙 噻新 西 霉 呋 西西 唑
酮/ 南 南 林 林 啶 星 肟 星 肟 诺 林 素 辛 丁 林 啉
舒
//
明
巴
舒三
0.3
0.2
13.5%
0.1
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铜绿假单胞菌组
n = 49
MRSA组 n = 148
铜绿假单胞菌感染者的死亡率达 MRSA感染者死亡率的2倍以上
Osmon S, et al. CHEST 2004;125:607–616.
45%
40%
35%
30%
22.10%
25%
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肺部感染 n = 33
44.2
41.2
40 34.4 36.8
31.3 31.7 32.1
30
27.6 28.9
22.5 22.8
20
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0 阿 头 头 头 亚 环 美哌 氨 头 哌 庆 替
米 孢 孢 孢 胺 丙 罗拉 曲 孢 拉 大 卡
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星 酮/ 肟 啶 南 星 南 林/
酮 林 素 林/
. 侯天文等. 医学综述2002;8:547-548.
常见的非发酵菌有哪些？
非发酵菌
假单胞菌属
铜绿假单胞菌
不动杆菌属
鲍曼不动杆菌
窄食单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
产碱杆菌属
伯克霍尔德菌属
洋葱伯克霍尔德菌
黄杆菌属
. 汪复，张婴元. 实用抗感染治疗学 2004
为何需要高度重视非发酵菌？
分布广泛 分离率日益增高 耐药形势严峻
哌 培 培西 西 他 卡 吡 沙 噻新 西 霉 呋 西西 唑
酮/ 南 南 林 林 啶 星 肟 星 肟 诺 林 素 辛 丁 林 啉
舒
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明
巴
舒三
非发酵菌PPT课件
在生物抗病毒、抗炎等活性的代谢产物， 用于新药研发。
疫苗生产
非发酵菌产生的某些代谢产物具有免疫原性，可以作为疫苗用于 预防疾病。
基因工程
非发酵菌可以作为基因工程的宿主细胞，用于外源基因的表达和 产物的生产。
05
非发酵菌的遗传改良与基 因工程
基因克隆与表达
生物能源
非发酵菌可以用于生产生物燃料，如乙醇、丁醇等，具有高效、 环保的优点。
生物材料
非发酵菌可以用于生产生物可降解塑料、生物纤维等，替代传统的 石化产品。
生物农药
非发酵菌可以用于生产生物农药，具有安全、环保、高效的优点。
非发酵菌在环境治理和生物医学中的新挑战
环境治理
非发酵菌在环境污染治理方面具有重要作用，可以用于降解有机污染物、重金属离子等。
营养需求
特殊营养需求
培养基配制
非发酵菌通常需要特殊的营养物质， 如维生素、氨基酸等，以满足其生长 和代谢需求。
为了满足非发酵菌的营养需求，需要 精心配制培养基，确保提供适当的营 养成分。
不同种类营养需求差异
不同种类的非发酵菌对营养的需求存 在差异，有些需要更多的有机氮源， 而有些则需要更多的无机盐。
生物医学
非发酵菌在生物医学领域具有广阔的应用前景，如用于治疗感染性疾病、癌症等，但同时也面临着安全性、有效 性等方面的挑战。
THANKS
感谢观看
代谢途径
糖酵解途径
非发酵菌主要通过糖酵解途径进行能量代谢，将葡萄糖转化为丙 酮酸并产生能量。
丙酮酸的去向
丙酮酸可以进一步转化为其他有机化合物，如脂肪酸、氨基酸等。
不同种类代谢途径差异
不同种类的非发酵菌具有不同的代谢途径，有些能够利用其他有机 化合物作为碳源。
非发酵菌
临床意义
• 常引起的是菌血症、脑膜炎、尿路感染、 附睾炎、结膜炎、心内膜炎、连续性腹膜 透析相关的腹膜炎、角膜炎以及广泛的皮 肤黏膜和软组织感染，也可引起医源性败 血症、肺炎等。引起本菌定植与感染的危 险因素有机械通气、广谱抗生素的预防性 应用、化疗、插管和中性粒细胞减少等。
耐药机制
• 1、细菌主动外拍泵的存在。 • 2、灭活抗生素的酶类的产生，如广谱β内
酰胺酶，超广谱β内酰胺酶，金属酶等。 • 3、外膜蛋白的改变或减少使抗生素进入细
菌的通道减少或缺如。 • 4、生物膜的存在使抗生素不能进入细菌细
非发酵菌
定义
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利 用葡萄糖的需氧、无芽孢革兰阴性杆 菌的统称。
主要非发酵菌种类
非发酵菌
铜绿假单胞菌 假单胞菌属
伯克霍尔德菌属
洋葱伯克霍尔德菌
鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌
窄食单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
嗜麦芽窄食单胞菌
产碱杆
不动杆菌属
菌属
鲍曼不动杆菌
黄杆菌属
脑膜败血黄杆 菌
非发酵菌共同特征
不动杆菌属
• 不动杆菌属广泛分布于自然界与医院环境 中，能在潮湿和干燥的表面生存，也可生 存于健康人的皮肤。最常见的种类有鲍曼 不动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌 和约氏不动杆菌等。
鲍曼不动杆菌
• 鲍曼不动杆菌是仅次于铜绿假单胞菌而居 临床分离阳性率第2位的非发酵菌，为条件 致病菌。由于其能获得多重耐药性且能够 在大多数环境中生存，其引起的医院内感 染有增加趋势。
多重耐药菌与泛耐药菌株
• 多重耐药菌(MDR)是基糖苷类、红霉素、β－内酰胺类）或三类 以上抗菌药物同时耐药。
• 泛耐药菌株(PDR)指除多粘菌素类外，对几 乎所有测试抗菌素耐药。比如对氨基糖苷 、青霉素、头孢菌素、碳氢酶烯系类、四 环素类、氟奎诺酮及磺胺类等耐药。
非发酵菌的耐药及治疗对策课件
加速非发酵菌疫苗的研发和临床试验： 通过疫苗接种提高人群免疫力，减少 感染的发生。
CHAPTER
非发酵菌感染的预防和控制
加强医院感染控制措施
严格执行手卫生规范
强化环境清洁和消毒
隔离感染患者
提高公众对非发酵菌感染的认识和预防意识
普及非发酵菌感染知识
倡导健康生活方式
鼓励人们保持良好卫生习惯，增强免 疫力，降低感染风险。
WATCHING
非发酵菌的耐药及治 疗对策课件
目 录
• 非发酵菌概述 • 非发酵菌的耐药性 • 非发酵菌耐药性的检测与监测 • 非发酵菌耐药性的治疗对策 • 非发酵菌感染的预防和控制
contents
CHAPTER
非发酵菌概述
非发酵菌的分类与特点
分类
特点
非发酵菌的分布与流行趋势
分布
流行趋势
CHAPTER
非发酵菌的耐药性
加强国际合作与交流，共同应对非发酵菌耐药性的挑战
分享经验和研究成果
各国应加强信息交流，共享非发酵菌耐药性的研究成果和防控经 验。
合作开展研究项目
通过国际合作，共同开展非发酵菌耐药性的基础和应用研究，提 高防控水平。
建立全球监测网络
建立全球性的非发酵菌耐药性监测网络，实时监测非发酵菌的耐 药性动态，为防控策略制定提供依据。
公共卫生管理
监测数据有助于评估和控制非发 酵菌的传播风险，为公共卫生管
理提供决策依据。
药物研发
监测结果有助于发研发。
耐药性监测的国际合作与交流
国际组织合作 信息共享 培训与能力建设
CHAPTER
非发酵菌耐药性的治疗对策
抗菌药物的合理使用
严格掌握抗菌药物的适应症
CHAPTER
非发酵菌感染的预防和控制
加强医院感染控制措施
严格执行手卫生规范
强化环境清洁和消毒
隔离感染患者
提高公众对非发酵菌感染的认识和预防意识
普及非发酵菌感染知识
倡导健康生活方式
鼓励人们保持良好卫生习惯，增强免 疫力，降低感染风险。
WATCHING
非发酵菌的耐药及治 疗对策课件
目 录
• 非发酵菌概述 • 非发酵菌的耐药性 • 非发酵菌耐药性的检测与监测 • 非发酵菌耐药性的治疗对策 • 非发酵菌感染的预防和控制
contents
CHAPTER
非发酵菌概述
非发酵菌的分类与特点
分类
特点
非发酵菌的分布与流行趋势
分布
流行趋势
CHAPTER
非发酵菌的耐药性
加强国际合作与交流，共同应对非发酵菌耐药性的挑战
分享经验和研究成果
各国应加强信息交流，共享非发酵菌耐药性的研究成果和防控经 验。
合作开展研究项目
通过国际合作，共同开展非发酵菌耐药性的基础和应用研究，提 高防控水平。
建立全球监测网络
建立全球性的非发酵菌耐药性监测网络，实时监测非发酵菌的耐 药性动态，为防控策略制定提供依据。
公共卫生管理
监测数据有助于评估和控制非发 酵菌的传播风险，为公共卫生管
理提供决策依据。
药物研发
监测结果有助于发研发。
耐药性监测的国际合作与交流
国际组织合作 信息共享 培训与能力建设
CHAPTER
非发酵菌耐药性的治疗对策
抗菌药物的合理使用
严格掌握抗菌药物的适应症
非发酵菌的耐药及治疗对策
非发酵菌的耐药及治疗对策什么是非发酵菌？非发酵菌是一类不靠发酵代谢获取能量的微生物。
它们生长缓慢，对环境的适应能力相对较弱，更容易在人体内引发感染。
一些非发酵菌种类通常生长于惰性和污秽环境，例如水、土壤或食物中，而其他非发酵菌可以从人和动物的皮肤、口腔和肠道中分离出来。
非发酵菌的耐药性非发酵菌的耐药性往往比其他微生物更高，这意味着它们难以被常见的抗生素杀死。
与其他细菌不同，非发酵菌不使用发酵作为它们的主要代谢方式，而是使用其他化学物质来产生能量。
这使得它们在天然界中生长得更为广泛和适应各种条件，然而却也使得常见的抗生素对其产生的影响较小。
非发酵菌的高度耐药性意味着，它们所引起的感染更加难以治疗，并且药物疗效的预测性很差。
抗生素过度使用的问题也加剧了这个情况。
当前，治疗非发酵菌感染的首选药物是四环素类、氨基糖苷类、多黏菌素E、大环内酯类和喹诺酮类，但是已经发现存在多种产生了抗药性的非发酵菌，这些细菌对抗生素产生的耐药性，随着药品的不断使用而变得更加普遍。
治疗耐药性非发酵菌感染的策略做好预防措施由于非发酵菌的耐药性较强，更应注重预防。
保持好个人卫生、遵循医疗机构的感染预防措施，以及注意食品的选择和烹饪等措施都有利于预防非发酵菌感染。
准确诊断非发酵菌感染准确诊断非发酵菌感染有助于针对性治疗。
但是还需要考虑抗生素选择和使用的范围。
正确的药物治疗是准确诊断非发酵菌感染的前提。
没有明确的敏感性测试可能会导致不必要的药物使用，这不仅对病人没有益处，还可能带来消耗性医疗的问题。
合理使用抗生素一般来说，应该尽可能避免不必要的抗生素使用，以防止抗生素负荷增加和高耐药的情况恶化。
如果一些老年病人或者有免疫缺陷的病人一直使用抗生素，容易导致耐药菌的滋生。
坚持病原学领域的最佳实践，不是简单的使用抗生素，还需要注意抗生素使用的时间和剂量的合理性。
拓展非抗生素治疗选择随着医学技术的不断进步，新的非抗生素药物和新的治疗方法正在不断被开发出来，例如喂养益生菌、使用细胞保护剂和抗氧化剂进行治疗等。
非发酵菌特征及鉴定思路课件
分离培养与纯化
分离培养
通过选择性培养基，将非发酵菌从样本中分离出来。
纯化
通过反复划线培养，获得纯培养物，保证后续实验的准确性。
生理生化特征分析
氧化酶试验
通过氧化酶试验，初步判断非发 酵菌是否为革兰氏阴性菌。
糖发酵试验
检测非发酵菌对糖的利用能力，有 助于分类鉴定。
吲哚试验
检测非发酵菌是否产生吲哚，用于 鉴别肠道细菌。
01
02
03
形态与染色
非发酵菌为革兰氏阴性杆 菌，无芽孢，无鞭毛，多 数有菌毛。
培养特性
非发酵菌需氧或兼性厌氧， 营养要求较高，在培养基 中加入特殊生长因子才能 生长。
抵抗力
非发酵菌对干燥、紫外线 等理化因素敏感，抵抗力 较弱。
生态分布与环境适应性
生态分布
非发酵菌广泛分布于自然环境、水体、 土壤、植物表面等，也存在于人体皮 肤、呼吸道、肠道等部位。
05
非发酵菌的耐药性与抗菌 药物选择
非发酵菌的耐药性机制
产生抗菌药物酶
非发酵菌能够产生各种抗菌药物 酶，如β-内酰胺酶，破坏抗菌药 物的化学结构，使其失去活性。
药物外排
非发酵菌通过药物外排系统将抗 菌药物排出细胞外，降低药物在 细胞内的浓度，从而产生耐药性。
靶点改变
非发酵菌的靶点改变是导致耐药 性的另一种机制，通过改变抗菌 药物作用的靶点结构，使其无法 与靶点结合，从而避免被抗菌药
分子生物学鉴定方法
16S rRNA基因测序
通过对细菌16S rRNA基因进行测序，比对数据库中的序列信息， 确定细菌的种属关系。
DNA-DNA杂交
利用同源双链DNA之间的杂交技术，比较菌株间的基因组相似性。
4非发酵菌
（二）临床意义
1. 致病因子 （1）侵袭力 粘附素、荚膜多糖 （2）毒素 外毒素、内毒素 （3）绿脓素 （4）侵袭性酶类 弹性蛋白酶、磷脂酶C 2. 所致疾病
医院感染的主要病原菌。烧伤创面感染、皮肤感染、肺部 感染、泌尿道感染、中耳炎、脑膜炎、心内膜炎、败血症 等。也可引起小儿类似沙门菌和霍乱样的严重腹泻。
二、细菌特性
1. 形态染色
革兰阴性杆菌，多为球杆 状，单个存在或成双排列，无 芽胞，无鞭毛，粘液型菌株有 荚膜。
2. 培养特性
专性需氧，营养要求不高，最 适生长温度为37℃，但有些 菌株可在42℃生长。
血琼脂平板：菌落圆形、光滑、 边缘整齐、灰白色，多数菌 株不溶血。
麦康凯琼脂平板：菌落呈粉红 色，但在SS琼脂培养基上只 有部分菌株生长。
可疑菌落
革兰阴性球杆菌 氧化酶阴性
动力 阴性
KIA
底层斜面 不变色
全面生化反应 最终鉴定
报告
寡养单胞菌属 (Stenotrophmonas）
一、分类
寡养单胞菌目前仅一个种，即嗜麦芽寡养单胞菌
（S.maltophilia） 。其分类经过了两次改名： 假单胞菌属（嗜麦芽假单胞菌）→黄单胞菌属（嗜麦芽
24h生长 （非军团菌）
48h后生长பைடு நூலகம்
革兰染色 姬美耐染色
直接荧光抗体 PCR、DNA探针
革兰阴性菌
血琼脂平板 巧克力琼脂平板
革兰阳性菌 非军团菌
BCYE琼脂
生长 （非军团菌）
不生长
生长
可能是军团菌
鉴定： 菌落特征 生化反应 直接荧光抗体染色
黄单胞菌）→窄食单胞菌属（嗜麦芽寡养单胞菌）。
二、细菌特性
1. 形态染色 革兰阴性杆菌，有一端或两端丛 鞭毛，多数在三根以上， 无芽 胞，无荚膜，可产生菌毛。
非发酵菌的重要性
非发酵菌的重要性
非发酵菌 (Non-fermentative bacteria) 是指一类在发酵过程中不能产生酒精或其他代谢产物的微生物。
与之相对的是发酵菌，它们能够产生酒精、二氧化碳或其他代谢产物。
非发酵菌在自然界中广泛存在，包括许多细菌、真菌和病毒等。
它们在许多不同的环境下都能生存，包括土壤、水、植物和动物组织中。
非发酵菌的生理功能多种多样，包括生产抗生素、分解有机物、提高免疫力等。
非发酵菌的命名主要基于它们的代谢类型，即它们是否能够产生酒精或其他代谢产物。
例如，一类叫做“醋酸菌”的微生物，能够在发酵过程中产生醋酸。
另一类叫做“嗜盐菌”的微生物，能够在高浓度的盐溶液中生存。
非发酵菌在人类生活中也扮演着重要的角色。
例如，一些非发酵菌可以用于食品发酵和酿造，如啤酒、葡萄酒和醋等。
此外，一些非发酵菌还可以用于医药生产、环境保护等方面。
非发酵菌是指一类在发酵过程中不能产生酒精或其他代谢产物的微生物。
它们的生理功能多种多样，并且在自然界和人类生活中都扮演着重要的角色。
非发酵菌
非发酵菌耐药趋势与合理用药
北京大学第一医院，北京大学临床药理研究所 高磊
12 May 2020
内容简介
• 非发酵菌的概念 • 2008年Mohnarin非发酵菌耐药趋势 • 非发酵菌的临床治疗
2
12 May 2020
非发酵菌简介
•不发酵糖(Nonfermenters)革兰阴性杆菌:
简称非发酵菌指一大群不发酵葡萄糖或仅以
G-菌, 109657,
68%
160513株病原菌分布
8
12 May 2020
2008年度Monarin病原菌分布
鲍曼不动 11%
肺炎杆菌 15%
阴沟杆菌 6%
其他 11%
其他 16%
绿脓杆菌 17%
大肠杆菌 25%
G-杆菌分布
9
12 May 2020
嗜麦芽 4%
其他不动 2%
奇变杆菌 2%
催产克雷 2%
• 除多粘菌素B外，铜绿假单胞菌对各种抗菌药物的敏感率 在45.6%-72.8%之间
• 敏感率高于70%有阿米卡星、美洛培南、头孢他定、哌 拉西林/他唑巴坦，
• 对碳青霉烯不敏感菌株对所有药物的敏感性都很低，敏 感率大多在40%以下。
14
12 May 2020
鲍曼不动杆菌(12310株)对抗菌药物的敏感性
流感杆菌 1%
弗枸杆菌 1%
产气杆菌 1%
液化沙雷 1%
洋葱泊克 1%
临床常见非发酵菌
铜绿假单胞菌
鲍曼不动杆菌
嗜麦芽窄食单胞菌
10
12 May 2020
洋葱伯克霍尔德菌
铜绿假单胞菌(13847株)对抗菌药物的敏感性
抗菌药物
哌拉西林
北京大学第一医院，北京大学临床药理研究所 高磊
12 May 2020
内容简介
• 非发酵菌的概念 • 2008年Mohnarin非发酵菌耐药趋势 • 非发酵菌的临床治疗
2
12 May 2020
非发酵菌简介
•不发酵糖(Nonfermenters)革兰阴性杆菌:
简称非发酵菌指一大群不发酵葡萄糖或仅以
G-菌, 109657,
68%
160513株病原菌分布
8
12 May 2020
2008年度Monarin病原菌分布
鲍曼不动 11%
肺炎杆菌 15%
阴沟杆菌 6%
其他 11%
其他 16%
绿脓杆菌 17%
大肠杆菌 25%
G-杆菌分布
9
12 May 2020
嗜麦芽 4%
其他不动 2%
奇变杆菌 2%
催产克雷 2%
• 除多粘菌素B外，铜绿假单胞菌对各种抗菌药物的敏感率 在45.6%-72.8%之间
• 敏感率高于70%有阿米卡星、美洛培南、头孢他定、哌 拉西林/他唑巴坦，
• 对碳青霉烯不敏感菌株对所有药物的敏感性都很低，敏 感率大多在40%以下。
14
12 May 2020
鲍曼不动杆菌(12310株)对抗菌药物的敏感性
流感杆菌 1%
弗枸杆菌 1%
产气杆菌 1%
液化沙雷 1%
洋葱泊克 1%
临床常见非发酵菌
铜绿假单胞菌
鲍曼不动杆菌
嗜麦芽窄食单胞菌
10
12 May 2020
洋葱伯克霍尔德菌
铜绿假单胞菌(13847株)对抗菌药物的敏感性
抗菌药物
哌拉西林
非发酵菌
生化反应：
抵抗力：较强，临床分离株对
多种抗生素耐药
（二）致病性：
可产生多种致病物质：内毒素、外毒 素、菌毛、荚膜、胞外酶和溶血物质 除自然界外，也存在于人体皮肤上及 与外界相通的腔道中。 多为继发感染，如烧伤后的创面感染， 也可引起肺炎、脑膜炎、尿道感染，严重 时可引起败血症，死亡率甚高。
（三）微生物学检验
麦康凯上可形成5种不同形态的菌落：
①典型型：灰绿色，大小不一，扁平湿润， 边缘不齐，表面可见金属光泽。 ②大肠菌群型：圆形凸起，灰白色半透明。
③粗糙型：菌落中央凸起，边缘扁平，表 面粗糙。
④侏儒型：细小无光泽，半透明菌落 ⑤粘液型：光滑凸起呈粘液状
氧化酶＋，O/F 上能氧化分解葡萄糖、木糖产酸、精 氨酸双水解酶＋，枸橼酸盐＋，硝酸 盐＋。
生化反应 氧化酶阴性，触酶阳性， 葡萄糖O/F为氧化型。
不动杆菌属主要菌种生化反应特征：
二、致病性
该菌广泛存在于自然界，属条件致病 菌，也是医院感染的常见病菌之一，常引 起呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染。
三、微生物学检查
标本采集：血液、脑脊液、痰液、尿液、脓 汁等。 检验程序： 检验方法： （1）直接镜检：脑脊液、尿液离心取沉淀物 涂片，脓汁和痰液直接涂片染色镜检可见革兰阴性 球杆菌成双排列，细胞内外可见，常染成革兰假阳 性。 （2）分离培养：
非发酵菌 及检验
非发酵菌及检验
非发酵菌（nonfermenters）是指一群 不能利用或仅以氧化形式利用糖类, 生化 特性十分相近的革兰阴性无芽胞杆菌。 括多个菌属，主要有：假单胞菌属 不动杆菌属
产碱杆菌属
莫拉菌属
黄杆菌属
分群依据： 1. 氧化酶试验阳性（不动杆菌及个别假 单胞菌为阴性） 2. 葡萄糖氧化/发酵（O/F）：应开管产 酸，闭管不变。
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非发酵菌
杭州艾迪康临床检验中心微生物 赵德扬
非发酵菌
非发酵菌是一群需氧或兼性氧、不发酵糖
类能在普通培养基上生长的革兰阴性杆菌 主要存在于外界环境中,其中大多数是条 件致病菌.其种类繁多,在鉴定上较为复杂, 但可以根据基本生化反应来鉴别.
非发酵菌的鉴别
(一)基本生化反应 1 氧化酶试验 在营养平板或半固体培养
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
3 气味可初步鉴别 铜绿假单胞菌有生姜味，产
碱属有水果味，腐败希瓦菌、恶臭假单胞、洋 葱伯克霍德菌有腐败样气味. 4 色素 色素的产生有利于细菌的鉴别, 但不同 的细菌可形成相似的色素,在非发酵菌中产生黄 色色素的有非发酵菌杆菌 、洋葱伯克霍、施氏 假单胞菌、少动鞘氨醇杆菌、食神鞘氨醇杆菌 等.产蓝绿色色素的有铜绿假单菌，产生荧光色 素的有恶臭假单胞菌、荧光单胞菌和铜绿单胞 菌,产红棕色或淡紫色的腐败希瓦菌产、紫色色 素的有紫色杆菌.
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
5 动力和氧化酶
㈠动力和氧化酶阴性:不动杆菌 CDC ED-5 CDC NO-1 ㈡动力阴性和氧化酶阳性的非发酵菌: 莫拉菌属威克斯属、金黄杆菌属、尿道寡 源杆菌、鞘氨醇杆菌属. ㈢动力阳性和氧化酶阴性细菌：非发 酵菌唐菖蒲霍德菌、洋葱伯克德菌、浅黄 色单胞菌嗜麦芽窄食单胞菌、少动鞘氨醇 单胞菌
基上作氧化酶试验.麦康凯、SS及其他含 有糖的培养基不能作为氧化酶试验,因糖 分解产酸会有影响. 2 葡萄糖O/F 观察待检菌对葡萄糖是否氧 化发酵或产碱，传统的糖发酵不能作为氧 化发酵,因为糖发酵管含有蛋白胨高.
ห้องสมุดไป่ตู้
非发酵菌的鉴别
3 硝酸盐还原/产气
观察待检菌是否还 原硝酸盐或硝酸盐产气. 4 动力试验 可采用半固体穿剌,玻片滴 法或鞭毛染色,观察待检有无动力,以及鞭 毛的位置和数量. 5 触酶试验 在不含血的培养基上作触酶 试验,区别待检菌阳性/阴性.
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
1 H2S非发酵菌
TSI中H2S阳性者儿乎都是 腐败希瓦菌.但值得注意的是,在TSI中这 种 色沉淀有时可掩盖高层真正颜色(红 色).因此很像沙门菌变形杆菌或弗劳地枸 橼酸杆菌,可采用氧化酶各葡萄糖O/F试验 加以鉴别. 2 吲哚 在非发酵菌中吲哚阳性的菌株有 脑膜脓毒金黄色杆菌、产吲哚金黄杆菌、 有毒威克斯菌短稳杆菌
杭州艾迪康临床检验中心微生物 赵德扬
非发酵菌
非发酵菌是一群需氧或兼性氧、不发酵糖
类能在普通培养基上生长的革兰阴性杆菌 主要存在于外界环境中,其中大多数是条 件致病菌.其种类繁多,在鉴定上较为复杂, 但可以根据基本生化反应来鉴别.
非发酵菌的鉴别
(一)基本生化反应 1 氧化酶试验 在营养平板或半固体培养
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
3 气味可初步鉴别 铜绿假单胞菌有生姜味，产
碱属有水果味，腐败希瓦菌、恶臭假单胞、洋 葱伯克霍德菌有腐败样气味. 4 色素 色素的产生有利于细菌的鉴别, 但不同 的细菌可形成相似的色素,在非发酵菌中产生黄 色色素的有非发酵菌杆菌 、洋葱伯克霍、施氏 假单胞菌、少动鞘氨醇杆菌、食神鞘氨醇杆菌 等.产蓝绿色色素的有铜绿假单菌，产生荧光色 素的有恶臭假单胞菌、荧光单胞菌和铜绿单胞 菌,产红棕色或淡紫色的腐败希瓦菌产、紫色色 素的有紫色杆菌.
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
5 动力和氧化酶
㈠动力和氧化酶阴性:不动杆菌 CDC ED-5 CDC NO-1 ㈡动力阴性和氧化酶阳性的非发酵菌: 莫拉菌属威克斯属、金黄杆菌属、尿道寡 源杆菌、鞘氨醇杆菌属. ㈢动力阳性和氧化酶阴性细菌：非发 酵菌唐菖蒲霍德菌、洋葱伯克德菌、浅黄 色单胞菌嗜麦芽窄食单胞菌、少动鞘氨醇 单胞菌
基上作氧化酶试验.麦康凯、SS及其他含 有糖的培养基不能作为氧化酶试验,因糖 分解产酸会有影响. 2 葡萄糖O/F 观察待检菌对葡萄糖是否氧 化发酵或产碱，传统的糖发酵不能作为氧 化发酵,因为糖发酵管含有蛋白胨高.
ห้องสมุดไป่ตู้
非发酵菌的鉴别
3 硝酸盐还原/产气
观察待检菌是否还 原硝酸盐或硝酸盐产气. 4 动力试验 可采用半固体穿剌,玻片滴 法或鞭毛染色,观察待检有无动力,以及鞭 毛的位置和数量. 5 触酶试验 在不含血的培养基上作触酶 试验,区别待检菌阳性/阴性.
少数可作推测性鉴别特征生化 反应非发酵菌的鉴别
1 H2S非发酵菌
TSI中H2S阳性者儿乎都是 腐败希瓦菌.但值得注意的是,在TSI中这 种 色沉淀有时可掩盖高层真正颜色(红 色).因此很像沙门菌变形杆菌或弗劳地枸 橼酸杆菌,可采用氧化酶各葡萄糖O/F试验 加以鉴别. 2 吲哚 在非发酵菌中吲哚阳性的菌株有 脑膜脓毒金黄色杆菌、产吲哚金黄杆菌、 有毒威克斯菌短稳杆菌