第十五章分枝讲义杆菌属

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(医学微生物学)15分枝杆菌-刘学恩知识讲稿

运动性和孢子形成
15分枝杆菌的运动性和孢子形成能力。
III. 15分枝杆菌的生长和培养
最适生长条件用于15分枝杆菌的培养制
2
15分枝杆菌的毒力因子和致病机制。
3
15分枝杆菌引起的疾病
15分枝杆菌引起的常见疾病。
感染的危险因素
导致15分枝杆菌感染的危险因素。
3
抗生素治疗和管理
15分枝杆菌感染的抗生素治疗和管理。
VII. 研究和未来展望
1 当前关于15分枝杆菌 2 在生物技术和医学中 3 进一步研究的挑战和
的研究
的潜在应用
机遇
目前关于15分枝杆菌的最新研究进展。
15分枝杆菌在生物技术和医学中的潜在应用。
对于进一步研究15分枝杆菌的挑战和机遇。
VIII. 结论
15分枝杆菌－刘学恩知识讲稿
在这个讲稿中，我们将介绍关于15分枝杆菌的知识。了解15分枝杆菌的定义和重要性对于医学微生物学至关重要。
I. 15分枝杆菌的概述
- 15分枝杆菌的定义 - 在医学微生物学中的重要性
II. 15分枝杆菌的一般特征
形态和结构
15分枝杆菌的外形和结构特征。
革兰染色反应
15分枝杆菌的革兰染色反应。
- 关键要点总结 - 对医疗实践和公共卫生的影响
V. 15分枝杆菌的流行病学
全球分布
15分枝杆菌的全球分布情况。
爆发和传播途径
15分枝杆菌的爆发和传播途径。
预防和控制措施
预防和控制15分枝杆菌感染的措施。
VI. 15分枝杆菌的诊断和治疗
1
临床症状和体征
诊断15分枝杆菌感染的临床症状和体征。
诊断实验室测试
2
用于诊断15分枝杆菌感染的实验室测试。

第15章分枝杆菌

第15章分枝杆菌表15-1 分枝杆菌的分类分类生长速度菌落和色素产生代表菌种致病性结核分枝杆菌复合群生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌结核病非结核分枝杆菌RunyonⅠ组生长缓慢菌落不见光时为淡黄色,光照后则变为黄色或橙色堪萨斯分枝杆菌(M.kansasii)、海分枝杆菌(M. marinum ) 肺结核样病变；皮肤丘疹、结节与溃疡RunyonⅡ组在37℃生长缓慢在暗处培养时菌落呈橘红色瘰疠分枝杆菌(M. scrofulaceum)儿童淋巴结炎RunyonⅢ组40～42℃下生长慢通常不产生色素鸟-胞内分枝杆菌(M.avium)结核样病变，多见于肺与肾RunyonⅣ组在25～45℃快速生长。

培养5～7天即可见到菌落个别种产生色素偶发分枝杆菌(M.fortuitum)极少致病麻风分枝杆菌人工培养基上不生长麻风第一节结核分枝杆菌俗称结核杆菌，是结核病的病原菌。

该菌可侵1/3感染了结核分枝杆菌。

特别是近年来世界范围内艾滋病的流行，结核病作为最多见的一种机会性感染，成为HIV阳性者死亡的主要原因，因此，结核病已成为全球重大公共卫生问题。

一、生物学性状（一）形态与染色在感染的组织中，结核分枝杆菌细长且直，大小约0.4×3 m（图15-1）；在人工培养基上，不同种呈现丝状、球状、串珠状等多形性。

由于结核分枝杆菌细胞壁中含有大量的脂质，不易着色，一旦被碱性染料着色后能够抵抗盐酸乙醇（含95%的乙醇和3%的盐酸）的脱色作用，被定性为抗酸菌（acid-fast bacteria），一般不用革兰染色法分类为革兰阳性或革兰阴性。

常用齐尼抗酸染色法（Ziehl-Neelsen acid-fast stain），以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色，结核分枝杆菌被染成红色，而其他非抗酸菌及背景则被美蓝复染呈蓝色。

此外，结核分枝杆菌在药物如异烟肼的影响下，亦可变为抗酸染色阴性。

图15-1 痰标本中的结核分枝杆菌（箭头所指）（Brooks et al, 2004）（二）培养和生长特性结核分枝杆菌的初代分离培养应使用选择和非选择培养基。

第章分枝杆菌属

分枝杆菌属分枝杆菌属（Bacillus）是一类芽孢杆菌科中的细菌属，是一种常见的细菌。

分枝杆菌属细菌的形态为革兰氏阳性，有芽孢，不运动。

分枝杆菌属细菌存在于自然界中的土壤、水、空气、动植物沙门氏菌以及人体消化道中等地方。

此外，分枝杆菌属细菌还是许多纤维素降解菌之一，有着重要的应用价值。

1. 发现历史分枝杆菌属的物种首先被德国微生物学家F. Cohn于1872年所描述。

分枝杆菌属名称来源于拉丁语Baculum（杆子）而得名。

起初，包括芽孢杆菌属（Sporolactobacillus）和马铃薯杆菌属（Solanum）在内的多个属别被归于分枝杆菌属之下。

到了20世纪30年代，随着生物学的发展以及生物化学研究的深入，分枝杆菌属内部结构不断明朗起来。

1953年，福克勒（Foukceler）首次使用荧光染色技术，证实了分枝杆菌属细胞内有芽孢的产生，并为之制定了现代概念。

目前，分枝杆菌属内部物种的划分还在持续调整之中。

2. 特征2.1 形态学特征分枝杆菌属细菌形态为革兰氏阳性菌杆，大小为0.5 ~ 1.2 µm × 2 ~ 10 µm，杆状或为不规则形状。

除了胶孢杆菌属之外，其他细菌均不产生胶质囊或鞭毛等结构，而且周围亦不具有较多的纤毛或糖胶成份。

芽孢的形成是分枝杆菌属的一个显著特征。

分枝杆菌属细胞在恶劣环境条件下，通过细胞内分裂并将核质分割成若干形状不一、结构各异的小体，然后将其包裹在亚细胞层次的膜结构内，最终形成成熟的芽孢。

2.2 生理生化特征分枝杆菌属细胞在吸取营养和能量方面非常多样化，能够利用许多有机物和少数无机物。

分枝杆菌属能产生许多酶，包括外排酶、代谢酶、溶解酶等，具有泛酸稳定性。

此外，分枝杆菌属能抵抗许多化学物质和物理条件的影响，能生长于广泛的嗜酸或嗜碱环境中，也能在较高的温度下繁殖。

2.3 分类根据细胞结构、代谢特征及生命周期等特征，目前分枝杆菌属细菌被分为16个物种。

分枝杆菌属

应用
选择卡介苗的接种对象及测定接种效果
在未接种卡介苗的人群中做流行病学调查

诊断婴幼儿结核病
测定肿瘤患者的细胞免疫功能
四、微生物学检查

标本的采集
根据感染部位选择浓缩集菌以提高检出率

直接涂片镜检
直接或集菌后涂片，抗酸染色阳性即可初步诊断金胺染色，在荧光显微镜下观察

进行结核病的辅助诊断
五、防治原则

预
防
发现并治疗痰菌阳性者新生儿接种BCG，OT试验转阳率可达96%-99%，
维持5年
但BCG的剂型及活菌数会影响免疫效果，且
成年人保护率不高
新型疫苗在研发中
新生儿即使注射了卡介苗，还有潜在威胁。
从接种卡介苗到人产生免疫力约需2个月。
其间，小儿基本上不具有抗结核病的免疫力。
耐药性变异：结核杆菌耐药检出率为20～50%,多重耐药率为 5%～20%。多重耐药结核杆菌 (MDRTB)是指至少耐异烟肼和利福平两种抗结核药的结核杆菌。结核杆菌的耐药性变异主要与其染色体基因突变有关。
致病性
1.细菌在组织细胞内大量繁殖引起炎症； 2.菌体成分和代谢物质的毒性； 3.机体对菌体成分产生的免疫损伤；（荚膜、脂质、蛋白质）
4.抵抗力
四怕
对乙醚、湿热、紫外线、抗痨药敏感四不怕耐干燥、酸碱、染料、青霉素等抗生素
变异性
1.细菌形态、菌落及免疫原性的变异；
2．毒力的变异：卡介苗
Calmette与Guerin1908年，牛型结核杆菌， 13年、230次传代减毒活菌苗株 3．耐药性变异 ※控制耐药的基因在染色体上，不同的耐药基因不相连接→故联合用药治疗有效。

(医学微生物学)15 分枝杆菌

荚膜
(capsule)
有助于粘附、入侵、抗吞噬等
致病性与免疫性
致病物质
类脂（lipid) ： 60%
分枝菌酸(mycolic acid) 索状因子(cord factor) 蜡质D(wax-D) 磷脂(phosphatide) 硫酸脑苷酯(sulfatide)
蛋白质(proteins)：
和蜡质D结合后能使机体发生超敏反应，引起组织坏死和全身中毒症状，并在结核结节的形成中起一定的作用
生物学性状
专性需氧营养要求高分离培养用罗氏培养基（Lowenstein-Jensen）代时约18h 3~4周形成“菜花样”菌落
抵抗力
抗干燥：在干燥痰中可存活6~8个月，附着在空气的尘埃中传染性可保持8~10天
抗酸碱：用酸碱处理标本，杀死杂菌和消化标本中的粘稠物质，提高检测效果
抗染料：在培养基中加入孔雀绿可抑制杂菌生长
TB X-ray photo
结核的X光片及病理
Tuberculosis – hematogenous extension
Extrapulmonary
Lymph nodes
Liver
Bones
免疫性
1、免疫性：胞内感染，细胞免疫为主，体液免疫效果差 2、感染免疫(infection immunity)：有菌免疫 3、结核菌素试验（ tuberculin skin test ）
对酒精、湿热及紫外线抵抗力较弱
Koch (1843-1910) isolated the strain in 1882
Calmette (1863-1933) and Guerin (1871-1961) studied the vaccine
The first clinical trial in 1921

分枝杆菌属

菌体的化学成分
1.脂质：磷脂；脂肪酸；
生物学特性
蜡质(waxes)：分枝菌酸 (mycolic acid)；索状因子；蜡质D； 2.蛋白质：如结核菌素(tuberculin) ； 3.多糖
抵抗力
对理化因素抵抗力较强：耐干燥；耐酸；耐硷；
生物学特性
对湿热敏感；在70%～75%乙醇中数分钟即被杀死；对紫外线敏感。
生物学特性
变异性
BCG就是牛型结核分枝杆菌毒力变异株；
结核分枝杆菌易发生菌落、毒力以及耐药性的变异：
耐药菌株，尤其是耐异烟肼菌株。
致病性与免疫性
致病物质
不产生内、外毒素以及侵袭酶。其毒力可能与下述物质有关：
1.索状因子 (cord factor) －是分枝菌酸和海藻糖结合的
一种糖脂。使细菌在液体培养基中呈婉蜒索状排列。
2、对肺结核可疑患者痰标本做直接涂片检查时未发现抗酸杆菌能否除外结核杆菌感染？还应做哪些微生物学检查 ?
3、某患者 X 光胸透检查怀疑有肺结核，如何应用微生物学检查法加以确诊。

防治原则
结核杆菌对一些药物的耐药机制已被证实：利福平耐药是由结核分枝杆菌编码RNA聚合酶b亚基（rpoB）的基因突变所致。链霉素的耐药机制主要是编码核糖体S12蛋白的rpsl基因发生突变以及编码16S rRNA的rrs基因发生突变。异烟肼的耐药与过氧化氢酶和过氧化物酶的失活有关。编码该酶的KatG基因的缺失，碱基插入或突变，使得酶分子活性严重降低或失活以及热稳定性发生改变。 Banerjee等研究发现，由inhA基因编码的酶可能是异烟肼和乙硫异烟肼共同的靶子，因此inhA基因的突变导致了对这两种药物的耐药。

第15章分支杆菌属及相似属

第十五章分支杆菌属及相似属
第一节分支杆菌(Mycobactreium)
近年来结核病在全球范围内又死灰复燃，成为传染病的首位杀手。全世界已有1／3人口约20亿人感染了结核菌，现有结核病人2000万，每年新发病人约900万，每年死亡人数高达300万。且多种耐药病例日益增高。
本属的牛分枝杆菌、结核分枝杆菌和禽分枝杆菌许多特性相似，本节一并介绍。
一、形态与染色特点：
细长、直或微弯的杆菌，单在，少数成丛。G+，抗酸性染色。不产生鞭毛、芽胞或荚膜。细胞壁含有10%左右的糖脂，抗 3%盐酸酒精脱色。
人型细长
牛型短粗
禽：多型性、球状、杆状、链球
在陈旧培养基上或干酪样变性病变组织内可见分枝现象。
二、培养特性：专性需氧，生长温度为37-37.5℃，最适pH6.4-7.0。 1、普通培养基：生长不良。 2、罗杰培养基（内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机
副结核分枝杆菌(M.paraenberculosis)
一、形态及染色特征：短杆状，无芽胞、无鞭毛、无荚膜。病料中成丛排列。革兰氏阳性、抗酸性阳性。
二、培养特性：需氧，最适温度37.5 ℃，最适PH 为6.8-7.2。生长缓慢，初代分离及困难，需在培养基中添加分支杆菌抽提物，一般需6-8周，或6个月。
盐等）：长成粗糙、隆起、不透明、边缘不整齐，颗粒、结节状、乳白色或米黄色的菌落。14-15小时分裂一次。
初代分离时，生长缓慢。（1~2周开始生长， 3~4旺盛发育）以牛型最慢，禽型快。 3、肉汤：形成菌膜。
三、抗原性：人、牛型具有相同的抗原性
禽型及其他分枝杆菌具有单独的抗原构造。
四、抵抗力：抗干燥能力强；湿热抵抗力弱， 62-63℃或煮沸可将其杀死。对紫外线敏感，直射日2h内可杀死该菌，对75%的酒精敏感。敏感药物有链霉素、异烟肼等，但易产生耐药性。

15第十五章分枝杆菌属检验

第十五章分枝杆菌属检验一、名词解释1.卡介苗（BCG）2.抗酸杆菌(acid-fast bacilli)3.结核菌素试验4.旧结核菌素(OT)5.索状因子二、选择题【A1型题】1.下列细菌中繁殖最慢的是A、大肠埃希菌B、丙型链球菌C、脑膜炎奈瑟菌D、结核分枝杆菌E、肺炎链球菌2.在液体培养基中形成菌膜生长的细菌是A、变形杆菌;B、布氏杆菌;C、肉毒梭菌;D、结核杆菌;E、产气荚膜杆菌3.结核分枝杆菌常用的培养基是A、沙保培养基B、罗氏培养基C、疱肉培养基D、巧克力色培养基E、亚碲酸钾培养基4.细胞壁含脂类最多的细菌是A、结核杆菌B、白喉棒状杆菌C、衣氏放线菌D、霍乱弧菌E、幽门螺杆菌5.与结核分枝杆菌抗酸性有关的成分是A、索状因子B、磷脂C、分枝菌酸D、蜡脂DE、硫酸脑苷脂6.关于结核分枝杆菌侵入机体的途径 ,不可能的是A、呼吸道B、消化道C、破损的皮肤D、泌尿道E、节肢动物的叮咬7.不以内毒素或外毒素为致病物质的细菌是A、白喉棒状杆菌B、炭疽芽胞杆菌C、结核分枝杆菌D、铜绿假单胞菌E、布鲁菌8.人体对结核分枝杆菌的免疫特点是A、体液免疫和细胞免疫同时存在B、以体液免疫为主C、有菌免疫D、不能通过人工主动免疫获得E、可引起I型超敏反应9.卡介苗是A、经甲醛处理后的人型结核分枝杆菌B、加热处理后的人型结核分枝杆菌C、发生了抗原变异的牛型结核分枝杆菌D、保持免疫原性 ,减毒的活的牛型结核分枝杆菌E、保持免疫原性 ,减毒的活的人型结核分枝杆菌10.卡介苗的接种对象主要是A、结核性脑膜炎患者B、结核菌素试验阳性者C、严重结核病人 , 结核菌素试验阴性患者D、新生儿和结核菌素试验阴性的儿童E、老年人11.有关结核菌素试验 ,下述错误的是A、属于皮肤迟发型超敏反应B、可检测机体对结核杆菌的免疫状况C、皮肤反应程度以局部红肿，硬结的直径为标准D、可检测机体细胞免疫功能E、12～18小时观察结果12. 结核菌素试验为阳性反应 ,下述叙述可能错误的是A、表明机体已感染过结核杆菌;B、表明机体接种卡介苗成功;C、表明机体对结核杆菌有一定的特异性免疫;D、表明机体对结核杆菌有迟发型超敏反应;E、表明机体对结核杆菌无免疫力13. 从痰中检出具有临床诊断意义的细菌是A、表皮葡萄球菌B、金黄色葡萄球菌C、甲型溶血型链球菌D、脑膜炎奈瑟菌E、结核分枝杆菌14.下列各细菌细胞壁中含脂量最多的是A、结核杆菌B、白喉杆菌C、放线菌D、霍乱弧菌E、幽门螺杆菌15.关于结合分枝杆菌生物学特性的叙述，错误的是A、专性需氧B、抗酸染色呈红色C、菌落表面粗糙呈菜花状D、耐酸碱E、耐煮沸，100℃，15分钟才死亡16.下列各成分与结核杆菌的致病性有关 ,除外的是A、结核杆菌索状因子B、磷脂C、结核杆菌内毒素D、蜡脂DE、硫酸脑苷脂17.关于结核菌素试验,下列错误的是A、可用来选择卡介苗接种对象B、检测机体细胞免疫和体液免疫状况C、作为婴幼儿结核病的辅助诊断D、红肿硬结直径大于0.5cm为阳性E、试验阳性说明已感染过结核杆菌18.下列最适合接种卡介苗的对象是A、长期低热和咳嗽，疑为肺结核的患儿B、OT试验阴性的麻疹患儿C、OT试验阳性儿童D、OT试验阴性儿童E、OT试验阴性的细胞免疫缺陷者19.一位18岁女学生就诊时主诉：近一个月来咳嗽，痰中时有血丝。

医学微生物学分支杆菌属

由于机体已形成对结核杆菌的特异性细胞免疫;对再次侵入的结核菌有较强的局限能力;故原发后感染的特点是病灶局限;主要表现为慢性肉芽肿性炎症;形成结核结节;发生纤维化或干酪样坏死;
二肺外感染
艾滋病等免疫力极度低下者;可造成全身播散性结核;
24
25
三免疫性与超敏反应
结核分枝杆菌为胞内寄生菌特异性抗体：仅对细胞外细菌发挥作用
传播途径：呼吸道消化道破损的皮肤黏膜; 侵犯多种组织器官;引起肺结核肠结核骨结核皮肤结核等;以肺结核最为常见;
一肺部感染
1 原发感染
首次感染结核分枝杆菌;多见于儿童; 外源性感染
少数免疫力低下者;经淋巴血流扩散至全身;导致全身粟粒性结核或结核性脑膜炎;
2 原发后感染
多见于成年人; 大多内源性感染;少数由外源性感染所致;
2
第一节结核分枝杆菌 M tuberculosis
结核分枝杆菌是结核病的病原体;
结核病是一种古老的疾病; 从新石器时代人类的遗骨和古代木乃伊的骨关节的病理组织中;已发现人类在史前时代已患过结核病;
Robert Koch
found & testified on march 24th; 1882 4
2抗结核免疫主要是细胞免疫致敏T淋巴细胞可杀死有结核杆菌的靶细胞; 同时释放多种淋巴因子;吸引NK T Mφ等聚集炎症部位;并增强这类细胞的杀菌活性; 激活的Mφ对结核杆菌的吞噬消化抑制繁殖阻止扩散及杀灭的能力极大增强;
2 超敏反应
机体获得对结核杆菌免疫力的同时;结核杆菌的结核菌素蛋白质与蜡质D共同刺激T淋巴细胞;形成迟发型超敏反应状态;
毒力变异：卡介苗BCG将有毒的牛分枝杆菌培养于含胆汁甘油马铃薯的培养基中;经230次传代;历时13年;使其毒力发生变异;成为对人无无致病性; 而仍保持良好免疫原性的疫苗株;称为卡介苗;

第十五章分枝讲义杆菌属

(医学微生物学)15分枝杆菌-刘学恩知识讲稿

第15章分枝杆菌

第章 分枝杆菌属

分枝杆菌属

(医学微生物学)15 分枝杆菌

分枝杆菌属

第15章 分支杆菌属及相似属

15第十五章 分枝杆菌属检验

医学微生物学分支杆菌属

第章分枝杆菌属

第15章分支杆菌属及相似属

15第十五章分枝杆菌属检验