淀粉中蛋白质含量测定
面粉中淀粉、蛋白质含量的测定
⾯粉中淀粉、蛋⽩质含量的测定实验⽬的:⼀、实验⽬的1、利⽤酸⽔解法测定出⾷品中淀粉含量;2、利⽤凯⽒定氮法测定⾷品中蛋⽩质的含量。
实验原理:⼆、实验原理1、淀粉的测定原理:利⽤酸⽔解法测定⾷品中的淀粉,⾸先将⽶粉去脂肪及可溶性糖,接着加盐酸对⽶粉进⾏酸⽔解,利⽤滴定的⽅法检测⽔解后样品中还原糖,将还原糖换算成淀粉的含量。
2、蛋⽩质测定的原理:⾷品中的蛋⽩质在催化加热条件下被分解,产⽣的氨与硫酸结合⽣成硫酸铵。
碱化蒸馏使氨游离,⽤硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋⽩质的含量。
实验仪器及试剂:三、实验仪器及试剂1、仪器:天平、定氮蒸馏装置、烧杯、500mL与100mL容量瓶、滤纸、烧瓶、⽔浴锅、锥形瓶、玻璃珠、滴定管。
2、试剂:硫酸铜、硫酸钾、硫酸(1.84 g/L)、甲基红⼄醇溶液(1 g/L)、硼酸溶液(20 g/L)、混合指⽰液(2份甲基红⼄醇溶液(1g/L)+1份亚甲基蓝⼄醇溶液(1 g/L))、氢氧化钠溶液(400 g/L)、硫酸或盐酸标准滴定溶液(0.0500mol/L)、⼄醚、85%⼄醇、6mol/LHCl、40%NaOH、20%⼄酸铅、10%的NaSO4、碱性酒⽯酸铜液(甲、⼄液)。
实验步骤:四、实验步骤1、淀粉的测定实验步骤:(1)样品的处理:称取2.0~5.0克的⾯粉样品,将样品置于带有滤纸的漏⽃加⼊30ml⼄醚以除去⾯粉中脂肪,再⽤150ml的85%⼄醇分3次洗涤残渣以除去可溶性糖,滤⼲,接着⽤100ml⽔洗涤残渣后将残渣移⾄烧瓶,加⼊30ml的6mol/L的HCl⾄烧瓶中,⽤沸⽔浴冷凝回流40min,接着⽤流⽔冷却后⽤碘液鉴定是否充分⽔解,直⾄⽔解充分,冷却后加⼊甲基红及40%的NaOH调⾄黄⾊,⽤6mol/L的HCl校正⾄刚好变红,加⼊20ml20%的⼄酸铅,摇匀放置10min,接着加⼊20ml10%的NaSO4摇匀,将滤液及残渣移⼊500ml容量瓶定容,接着过滤同时弃去最初的20ml滤液,取滤液20ml加⼊到100ml的容量瓶中定容,则样液制备完成备⽤;(2)标定碱性酒⽯酸铜液:吸取碱性酒⽯酸铜甲、⼄液各5ml,置于250ml锥形瓶中,加⽔20ml,玻璃珠2颗,滴加9ml葡萄糖标准液,控制在2min内加热⾄沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准液,直⾄溶液刚好褪⾊(平⾏三次取平均值)计算10ml(甲、⼄液各5ml)碱性酒⽯酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)A1;(3)样品液预测:取碱性酒⽯酸铜甲、⼄液各5ml,加20ml的⽔以及两粒玻璃珠⾄250ml的锥形瓶中,加热⾄沸腾,⽤样品液趁沸先快后慢滴定⾄褪⾊;(4)样品溶液的测定:取碱性酒⽯酸铜甲、⼄液各5ml,加20ml的⽔以及⽐预测体积少1ml的样品溶液,另加⼊两粒玻璃珠,加热⾄沸腾,⽤样品液趁沸继续以1d/s的速度滴⾄褪⾊(平⾏三次,取平均值V1)。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
淀粉是一种重要的植物多糖,广泛存在于植物中,如米、面粉、土豆、玉米等。
淀粉
具有丰富的能量,是人们日常饮食中的重要组成部分。
淀粉含有的蛋白质却可能会对其品
质和使用性产生一定的影响。
测定淀粉中的蛋白质含量就显得尤为重要。
在本文中,我们
将介绍一些常见的分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术,希望能为相关研究和生产提供
帮助。
一、传统方法
1、Kjeldahl法
Kjeldahl法是一种常用的蛋白质含量测定方法,其原理是将样品进行硫酸-碱水解,
再利用蒸馏装置将水解产生的氨气收集,最后通过滴定测定氨氮含量,从而计算出蛋白质
含量。
该方法具有测定简便、结果准确的优点,但需要较长的操作时间和对硫酸等试剂的
使用,操作过程中需要注意安全。
2、Lowry法
Lowry法是另一种常用的蛋白质含量测定方法,其原理是利用重铬酸盐氧化蛋白质中
的酪氨酸,生成紫蓝色产物,然后利用分光光度计测定其吸光度,通过标准曲线计算出蛋
白质含量。
该方法对常见的蛋白质都有很好的检测灵敏度,测定结果比较准确,但操作复杂,需要较长的操作时间。
二、快速测定方法
1、BCA法
2、Bradford法
三、光谱法
光谱法是一种新型的蛋白质含量测定方法,其原理是利用样品中蛋白质的吸收特性或
荧光特性,通过光谱仪测定其在特定波长下的吸光度或荧光强度,从而计算出蛋白质含量。
与传统的化学方法相比,光谱法无需使用化学试剂,操作简便,结果快速,适用于多种样
品的测定。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术淀粉是一种重要的碳水化合物,在食品加工和生产中起着重要作用。
淀粉与蛋白质一样都是食品中的重要成分,它们的含量对食品的品质和安全性都有着重要影响。
对淀粉的蛋白质含量进行准确快速的测定具有重要意义。
下面将分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术。
一、传统测定方法1. 熏蒸法:该方法是将食品样品熏蒸至干燥,然后利用氮气或二氧化碳浓度的差异,通过气相色谱法或质谱法进行分析,来得出蛋白质含量。
这种方法测定周期长,操作繁琐,且需要设备昂贵,不适合食品工业中的快速检测。
2. Kjeldahl法:该方法是通过将样品蒸馏后捕获并测定中的氨氮含量来计算蛋白质含量。
这种方法精度较高,但需要多个步骤,消耗大量的试剂和时间,且对设备和技术要求都比较高。
1. 近红外光谱法:近年来,近红外光谱法因其快速、无损、低成本等优势,逐渐成为食品成分分析的热门技术。
该方法通过测定样品在近红外光谱范围内吸收、反射或透射的光,来快速准确地得出蛋白质含量。
该方法不需要样品的预处理,减少了测定周期和人力成本。
2. 电泳法:电泳法是一种通过样品在电场中的迁移速率来分离、测定成分的方法。
通过蛋白质在电场中的电泳迁移速率的差异,来得出蛋白质含量的测定结果。
这种方法操作简单,准确度高,对样品种类的适用性广泛。
三、技术选择及建议近红外光谱法和电泳法是目前在淀粉化验中蛋白质含量测定领域较为先进的技术。
近红外光谱法因其快速、准确、便捷等优势,逐渐成为食品工业中重要的分析技术。
而电泳法通过蛋白质在电场中的迁移速率来分离、测定蛋白质含量的方法,操作简单,且对样品的适用性广泛。
在进行淀粉化验中蛋白质含量测定时,可以优先考虑这两种技术进行。
从实际应用来看,近红外光谱法因其无损、快速、低成本的特点,在食品生产和加工领域得到了广泛应用。
而电泳法因其准确、可靠的特点,在研究领域得到了广泛应用。
建议在实际测定中,根据需要选择合适的技术进行分析,以最大限度地满足实际需求。
3种马铃薯淀粉、蛋白质、花青素含量的测定及比较
山西农业科学2019,47(4):560-562,5763种马铃薯淀粉、蛋白质、花青素含量的测定及比较张婷,杨慧仙,杨秀丽,张谨华(晋中学院生物科学与技术学院,山西晋中030600)摘要:提取测定并比较了红玫瑰、黑玫瑰与荷兰7号3种马铃薯的淀粉、蛋白质和花青素含量,通过研究其品质性状,为马铃薯基础研究、加工提供数据参考。
结果表明,3个品种马铃薯产地相同,其营养物质含量有一定差异,三者淀粉含量在10%~15%,其中,红玫瑰最高,荷兰7号最低,三者均未达到淀粉加工和全粉加工等级;蛋白质含量差异不显著,均在1.5%~2.0%,其中,红玫瑰最高,荷兰7号最低;花青素含量三者间差异极显著,其中,黑玫瑰最高(0.435mg/g ),约为红玫瑰的2倍、荷兰7号的27倍。
综合比较,供试品种中彩色马铃薯黑玫瑰和红玫瑰的综合营养品质优于普通马铃薯荷兰7号,尤其是黑玫瑰,可作为花青素的优质来源,经济开发潜力较大。
关键词:马铃薯;品种;营养品质;花青素中图分类号:S532文献标识码:A文章编号:1002-2481(2019)04-0560-04Determination and Comparative of Starch ,Protein and AnthocyaninContents in Three Varieties of PotatoesZHANG Ting ,YANG Huixian ,YANG Xiuli ,ZHANG Jinhua(College of Biological Sciences and Technology ,Jinzhong University ,Jinzhong 030600,China )Abstract :In this paper,the content of starch,protein and anthocyanin in three kinds of potatoes,red rose,black rose and the Netherlands 7,were extracted,measured and compared,and their quality characters were studied,to provid data reference for basic research and the processing of potatoes.The results showed that the three varieties of potatoes had the same origin area,and their nutrient content was different to a certain extent.The starch content of all three was between 10%and 15%,red rose had the highest content,the Netherlands 7had the lowest content and all did not reach the processing grade of starch and total powder.The difference in protein content was not significant,all of which were between 1.5%and 2.0%,red rose had the highest content,while the Netherlands 7had the lowest content.The difference in anthocyanin content was extremely significant,with the highest level of black rose (0.435mg/g ),about was twice that of red rose and 27times that of the Netherlands 7.By a comprehensive comparison,the comprehensive nutritional quality of colored potatoes in the tested varieties were better than that of the ordinary potato,and in particular,the colored potato black rose could be used as a quality source of anthocyanin,with great economic developing potential.Key words :potatoes;varieties;nutritional quality;anthocyanin收稿日期:2018-11-28作者简介:张婷(1989-),女,山西运城人,实验员,硕士,主要从事马铃薯植物组培及营养生理学研究工作。
【百度百科】玉米淀粉(一)
【百度百科】⽟⽶淀粉(⼀)⽟⽶淀粉——百科名⽚⽟⽶淀粉(corn starch)⼜称⽟蜀⿉淀粉。
俗名六⾕粉。
⽩⾊微带淡黄⾊的粉末。
将⽟⽶⽤0.3%亚硫酸浸渍后,通过破碎、过筛、沉淀、⼲燥、磨细等⼯序⽽制成。
普通产品中含有少量脂肪和蛋⽩质等。
吸湿性强,最⾼能达30%以上。
⽟⽶淀粉——制作⽅法1.清理 清理⽟⽶中含有各种尘芥、有机和⽆机杂质。
为了保证安全⽣产和产品质量,对⽟⽶中存在的杂质必须⽟⽶淀粉进⾏清理。
清理⽟⽶的⽅法,主要采⽤筛选、风选等。
清理设备有振动筛、⽐重去⽯机、永磁滚筒和洗麦机等。
振动筛是⽤来清除⽟⽶中的⼤、中、⼩杂物。
筛孔配备,第⼀层筛⾯⽤直径17~20毫⽶圆孔,第⼆层筛⾯直径12~15毫⽶圆孔,除去⼤、中杂,第三层筛⾯选⽤直径2毫⽶圆孔除去⼩杂。
⽐重去⽯机是⽤来除去⽟⽶中的并肩⽯。
由于⽟⽶粒度较⼤,粒型扁平,⽐重也较⼤等特点,在操作时应将风量适当增⼤,风速适当提⾼,穿过鱼鳞孔的风速为14⽶/秒左右。
鱼鳞孔的凸起⾼度也应适当增⾄2毫⽶,操作时应注意鱼鳞筛⾯上物料的运动状态,调节风量,并定时检查排⽯⼝的排⽯情况。
永磁滚筒是⽤来清除⽟⽶中的磁性⾦属杂质,应安置在⽟⽶地⼊破碎机前⾯,防⽌⾦属杂质进⼊破碎机内。
洗麦机可以清理⽟⽶中的泥⼟、灰尘。
经过清理后⽟⽶的灰分可降低0.02~0.6%。
2.浸泡 ⽟⽶浸泡⽅法⽬前普遍采⽤⾦属罐⼏只或⼏⼗只⽤管道连接组合起来,⽤⽔泵使浸泡⽔在各罐之间循环流动,逆流浸泡。
在浸泡⽔中溶加浸泡剂经试⽤的结果表明,⽯灰⽔、氢氧化钠和亚硫酸氢钠都不及⼆氧化硫效果好,⼆氧化硫的含量不宜太⾼。
因为含⼆氧化硫的浸泡⽔对蛋⽩质⽹的分散作⽤是随着⼆氧化硫含量增加⽽增强。
当⼆氧化硫浓度为0.2%时,蛋⽩质⽹分散作⽤适当,淀粉较易分离;⽽浓度在0.1%时,不能发⽣⾜够的分散作⽤,淀粉分离困难。
⼀般最⾼不超过0.4%,因为⼆氧化硫的浓度过⾼,酸性过⼤,对⽟⽶浸泡并没有多⼤好处,相反地会抑制乳酸发酵和降低淀粉粘度。
血清淀粉样蛋白测定
1.材料:患者及健康者血清标本,全血采集在10 mL血清分离管中, 4000 r/min离心10min。
取30 μL血清分装在0.5 mL离心管中,于-80°C冰箱中保存。
PBS-1I C型SELDI-TOF-MS仪及CM10芯片由美国Ciphergen公司生产,其他试剂购自美国Sigma公司。
2.方法:(1) SELDI-TOF分析:将芯片装入蛋白工作平台,每孔加入200 μL结合/洗脱缓冲液(50 mmol/L NaAc, pH=4.0) 预处理芯片,室温下200 r/min振荡5 min,弃缓冲液,重复上述操作1次。
取10 μL血清样品加入20 μL U9 [9 mol/L尿素,2%(体积分数)S-环乙胺-1-丙磺酸,50 mmol/L Tris盐酸,pH=9.0],4°C振荡30 min,加360 μL结合缓冲液稀释待用。
在芯片上每孔加入100 μL稀释的样品,剧烈震荡,室温孵育l h弃掉样品,每孔用200 μL结合/洗涤缓冲液洗涤2次,每次震荡5 min,弃去孔中液体,每孔加入200 μL HPLC水,立刻甩出。
从蛋白工作平台中取出芯片,风干,加0.5 μL SPA,蛋白质芯片阅读机读取芯片,采用BioMarker Wizard软件分析。
(2) HPLC分析:采用岛津HPLC分离系统对SELDI-TOF筛选蛋白进行分离检测。
色谱峰流出液收集于离心管,留待随后的质谱分析。
(3) MALDI-TOF分析:采用MALDI-TOF质谱仪将色谱收集液与适量的基质溶液混合后,取约1 μL 溶液,滴加在样品靶上进行监测获得肽质谱图。
根据肽段的m/z数据在NCBI数据库、Swiss Prot蛋白库中搜索相应蛋白质。
(4) 血清淀粉样蛋白A的ELISA检测(严格按说明书操作)。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术淀粉化验是一项常见的食品分析方法,用于测定食品中的淀粉含量。
在淀粉化验中,除了淀粉含量之外,也可以通过测定蛋白质含量来对食品样品进行全面的分析。
因为蛋白质是食品中的重要营养成分,其含量对于食品的品质和营养价值都有着重要的影响。
本文将对淀粉化验中蛋白质含量的测定技术进行分析,探讨其原理、方法和应用。
一、蛋白质含量的测定原理在淀粉化验中测定蛋白质含量的方法主要是利用蛋白质与试剂发生化学反应,从而产生某种可测定的指标。
常用的测定方法包括凝固滴定法、比色法和光度法。
1. 凝固滴定法凝固滴定法是一种经典的测定蛋白质含量的方法,其原理是根据蛋白质与酸性溶液中的沉淀形成的凝胶的重量来计算蛋白质含量。
该方法具有操作简便、结果准确等优点,但对于不同种类的蛋白质有着一定的局限性。
2. 比色法比色法是一种常用的测定蛋白质含量的方法,其原理是根据蛋白质与试剂发生颜色反应后,利用比色法测定溶液的吸光度,从而计算出蛋白质的含量。
该方法具有高灵敏度、较强的适用性和快速的测定速度等优点,但也需要注意其对样品的前处理和试剂选择的影响。
二、蛋白质含量的测定方法在淀粉化验中测定蛋白质含量的方法有多种,根据实际情况选择合适的方法进行测定是非常重要的。
1. Kjeldahl法Kjeldahl法是一种传统的测定蛋白质含量的方法,其原理是利用硫酸将蛋白质水解成氨,并通过蒸馏和滴定的方式测定氨的含量,从而计算蛋白质的含量。
该方法具有准确性高、适用性广等优点,但需要较长的操作时间和繁琐的操作步骤。
三、蛋白质含量的测定应用在淀粉化验中测定蛋白质含量的方法可以应用于食品工业、农业生产、科研实验等领域,为保障食品质量、改善农作物产量、推动科研进步等方面提供了有力的技术支持。
1. 食品行业食品行业是淀粉化验中测定蛋白质含量的重要应用领域之一,通过对食品中蛋白质含量的测定可以控制食品的品质和营养价值,提高食品的竞争力和市场占有率。
可溶性蛋白、可溶性糖、淀粉、淀粉酶测定方法
可溶性蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法)一、实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。
考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。
在一定蛋白质浓度范围内蛋白质-色素结合物在595 nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。
故可用于蛋白质的定量测定。
蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2 min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速,其结合物在室温下1 h内保持稳定。
该反应非常灵敏,可测微克级蛋白质含量,所以是一种比较好的蛋白质定量法。
二、实验材料、仪器和试剂1.仪器设备分光光度计,离心机,研钵,2. 试剂(1)牛血清白蛋白配成1000 μg/mL和100 μg/mL。
(2)考马斯亮蓝G-250:称取100 mg考马斯亮蓝G-250溶于50 mL 90%乙醇中,加入85%(W/V)磷酸100 mL,最后用蒸馏水定容至1000 mL。
此溶液在常温下可放置一个月。
(3)90%乙醇(4)磷酸(85%,W/V)三、实验步骤:1.可溶性蛋白的提取称取新鲜植物样品约0.5 g置于研钵中,加入5 mL 4o C下预冷的浓度为50 mmol/L,pH 7.0磷酸缓冲液和少量石英砂研磨成匀浆后,转入10 mL离心管中,在4 o C冰箱中静置10 min,于15000 rpm/min下冷冻离心25 min,上清液即为蛋白提取液。
4 o C下保存备用。
2.标准曲线的绘制(1)0-100 μg/mL标准曲线的制作取6支试管,按下表数据配制0-100 μg/mL血清白蛋白液各1 mL。
准确吸取所配各管溶液0.1 mL,分别放入10 mL具塞试管中,加入5 mL考马斯亮蓝G-250试剂,盖塞,反转混合数次,放置2 min后,在595 nm下比色,绘制标准曲线。
配制0-100 μg/mL血清白蛋白液管号 1 2 3 4 5 6100 μg/mL牛血清蛋白量(mL)蒸馏水量(mL)蛋白质含量(mg)1.00.20.80.020.40.60.040.60.40.060.80.20.081.00.10(2)0-1000 μg/mL标准曲线的制作另取6支试管,按表10-2数据配制0-1000 μg/mL牛血清白蛋白溶液各1 mL。
可溶性糖、淀粉、蛋白质
植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定一、目的从一份植物样品中系统分离和测定可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质等多种成分,不仅对研究植物体内碳、氮代谢,了解植物的生长发育状况有重要意义,亦可以作为鉴定其品质的重要指标,而且也有助于训练基本操作技能。
二、原理(一)分离提取原理在80~85%的乙醇中,植物组织中的还原糖、蔗糖以及游离氨基酸和叶绿素等溶解,而淀粉及蛋白质沉淀,再用9.2mol/L高氯酸溶解淀粉(蛋白质沉淀),最后用0.1mol/L氢氧化钠溶解蛋白质,然后选用适当的方法测定各个提取液中相应物质的含量。
(二)测定原理1.蒽酮比色法——可溶性糖含量测定碳水化合物及其衍生物经浓硫酸处理,生成糠醛,再与蒽酮脱水缩合而生成蓝绿色化合物,在一定范围内其颜色深浅与碳水化合物含量成线性关系。
蒽酮反应的颜色深浅,随温度条件和加热时间而变化,葡萄糖显色高峰在100℃时,加热10min后出现,而核糖在相同温度下,加热3min后出现。
此法灵敏度高,糖含量达30μg即可测定。
2.茚三酮比色法——氨基酸含量测定氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后,产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物,在570nm下有最大光吸收。
在一定范围内,其颜色深浅与氨基酸的含量呈正比。
3.考马斯亮蓝G-250结合法——蛋白质含量测定考马斯亮蓝在游离状态时呈红色,当与蛋白质结合后变为蓝色,后者最大光吸收在595nm,在一定范围内(0~1000μg/mL),其颜色深浅与蛋白质的含量呈正比。
此法快速灵敏,反应在2min内即达到平衡,室温1h内颜色稳定,而且干扰物也少。
三、实验用品(一)实验材料:植物样品。
(二)器皿:1.25mL刻度试管×8,15mL试管×20;2.10mL离心管×2;3.容量瓶:50mL×1,25mL×1;4.移液管:5mL×2;2mL×4,1mL×2,0.1mL×2;5.恒温水浴锅;6.离心机;7.电子天平;8.分光光度计。
植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定
实验四植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定一、目的从一份植物样品中系统分离和测定可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质等多种成分,不仅对研究植物体内碳、氮代谢,了解植物的生长发育状况有重要意义,亦可以作为鉴定其品质的重要指标,而且也有助于训练基本操作技能。
二、原理(一)分离提取原理在80-85%的乙醇中,植物组织中的还原糖、蔗糖以及游离氨基酸和叶绿素等溶解,而淀粉及蛋白质沉淀,再用9.2 mol/L高氯酸溶解淀粉(蛋白质沉淀),最后用0.1 mol/L氢氧化钠溶解蛋白质,然后选用适当的方法测定各个提取液中相应物质的含量。
(二)测定原理1.蒽酮比色法——可溶性糖含量测定碳水化合物及其衍生物经浓硫酸处理,生成糠醛,再与蒽酮脱水缩合而生成蓝绿色化合物,在一定范围内其颜色深浅与碳水化合物含量成线性关系。
蒽酮反应的颜色深浅,随温度条件和加热时间而变化,葡萄糖显色高峰在100℃时,加热10 min后出现,而核糖在相同温度下,加热3 min后出现。
此法灵敏度高,糖含量达30 μg即可测定。
2.茚三酮比色法——氨基酸含量测定氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后,产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物,在570 nm下有最大光吸收。
在一定范围内,其颜色深浅与氨基酸的含量呈正比。
3.考马斯亮蓝G-250结合法——蛋白质含量测定考马斯亮蓝在游离状态时呈红色,当与蛋白质结合后变为蓝色,后者最大光吸收在595 nm,在一定范围内(0-1000 μg /mL),其颜色深浅与蛋白质的含量呈正比。
此法快速灵敏,反应在2 min内即达到平衡,室温1h内颜色稳定,而且干扰物也少。
三、实验用品(一)实验材料:植物样品。
(二)器皿:1. 25 mL刻度试管⨯8 ,15 mL试管⨯20;2. 10 mL离心管⨯2;3. 容量瓶:50 mL⨯1 ,25 mL⨯1;4. 移液管:5 mL⨯2,2 mL⨯4,1 mL⨯2,0.1 mL⨯2;5. 恒温水浴锅;6. 离心机;7. 电子天平;8. 分光光度计。
蛋白质含量的测定方法
蛋白质含量的测定方法
蛋白质的含量是指在样品中蛋白质的质量或浓度。
测定蛋白质含量是许多生物学和生化实验中常用的实验方法之一,以下是一些常见的测定方法:
1. 布拉德福德法(Bradford法):该方法利用布拉德福德蛋白
质染料与蛋白质形成复合物,并产生特定的颜色,通过比色法测定颜色强度从而确定含量。
2. 低里氏法(Lowry法):该方法基于在碱性条件下,蛋白质
与碱性铜离子复合生成紫色产物的原理,通过比色法定量测定。
3. BCA法(Bicinchoninic Acid法):该方法利用BCA试剂与
蛋白质中的蛋白质产生螯合,形成紫色到蓝色的产物,并通过光度计测定吸光度从而测定含量。
4. 还原硝酸银法:该方法是通过硝酸银与蛋白质中的氨基酸中的硫原子反应产生黑色沉淀,通过沉淀的重量或者比色法测定吸光度来确定蛋白质含量。
5. 紫外吸收法:蛋白质具有特定的紫外吸收峰,在特定波长下进行测定,可以通过比较样品吸光度与标准曲线来计算蛋白质含量。
以上只是一些常见的测定方法,根据具体需要和实验条件的不同,可以选择适合的方法进行蛋白质含量的测定。
凯氏定氮法测定玉米淀粉蛋白质含量最佳消化温度的摸索
消化 条 件 。此 时 所 需 消 化 时 间 最 短 , 试剂用量减 少, 可 降低 实验 成 本 , 也 降低 了对 环 境 的 污 染 , 可 用 于 玉 米 淀 粉 蛋
c o n d i t i o n i n t h e p r o c e s s o f d i g e s t i o n wa s e x p l o r e d . By Kj e l d a h l d e t e r mi n a t i o n o f c r u d e p r o t e i n c o n t e n t i n wh o l e wh e a t f l o u r ,t h e
op t i mu m d i ge s t i on c on di t i ons we r e obt a i ne d: d i ge s t i on t e mp e r a t u r e 4 20℃ ,t he c om p os i t e i ndi c a t or a mo un t o f 1 0. 0 g, s u l f u r i c
.
0 1 4 0 1 0 )
摘 要 : 以 国标 为 指 导 对 玉 米 淀 粉 中蛋 白质 进 行 测 定 , 由于国标 中未明确规 定消化 温度 , 因此 在 实 际检 测 中遇 到
许 多问题 。 本 实 验 以 全 麦 粉 为 标 准 样 品 , 对 消化 过 程 中 的 最 佳 温度 条 件 进 行 摸 索 。 用 凯 氏定 氮 法 测 定 全 麦 粉 中
蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法
首先,我们来介绍最常用的蛋白质含量测定方法之一——比色法。
比色法是通过蛋白质与某种试剂发生化学反应产生有色产物,
然后利用分光光度计测定产物的吸光度来计算蛋白质含量的方法。
常用的试剂包括布拉德福试剂、伯里氏试剂等。
比色法操作简便,
结果准确,适用于多种类型的蛋白质样品。
其次,还有一种常用的蛋白质含量测定方法是BCA法。
BCA法
是利用蛋白质与BCA试剂在碱性条件下发生还原反应,生成紫色螯
合物,然后利用分光光度计测定其吸光度来计算蛋白质含量的方法。
BCA法对于含有还原剂、胶体物质和表面活性剂的样品具有较好的
适用性,同时也具有较高的灵敏度和线性范围。
另外,还有一种常用的蛋白质含量测定方法是Lowry法。
Lowry
法是通过蛋白质与碱性铜离子和菲罗啉在碱性条件下发生络合反应,生成蓝色络合物,然后利用分光光度计测定其吸光度来计算蛋白质
含量的方法。
Lowry法对于各种类型的蛋白质样品均有较好的适用性,但操作相对复杂,需要较长的实验时间。
除了上述介绍的常用方法外,还有其他一些蛋白质含量测定方
法,如紫外吸收法、荧光法等。
这些方法各有特点,适用于不同类
型的蛋白质样品,实验人员可以根据实际情况选择合适的方法进行
测定。
总的来说,蛋白质含量的准确测定对于科学研究和实验室工作
至关重要。
在选择测定方法时,需要考虑样品的性质、实验条件、
仪器设备等因素,并且在操作过程中要严格按照方法要求进行操作,确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的方法能为您的实
验工作提供一些帮助,祝您实验顺利!。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
淀粉化验技术主要用于测定样品中淀粉的含量,而蛋白质含量的测定则是通过测定样品中的总氮含量,再根据蛋白质和氮含量的相关性计算出蛋白质含量。
下面将介绍几种常见的淀粉化验中蛋白质含量测定的技术。
1. 凱氏法:该方法将样品与硫酸在高温下反应,将样品中的有机物转化为氨气。
然后,将生成的氨气通过碱液吸收,再经过酸中和,生成盐酸。
使用酸碱指示剂比色测定,通过比较样品与标准蛋白质溶液生成的酸的浓度差异,计算蛋白质的含量。
2. 巴斯捷尔法:该方法需要先将样品加有机溶剂中,将样品中的蛋白质转移到有机溶剂中。
然后,通过酸水解蛋白质,释放出游离氨基酸。
接着,使用比色法或荧光法测定游离氨基酸的含量,并根据氨基酸的含量计算样品中蛋白质的含量。
这些技术在淀粉化验中蛋白质含量的测定中都有一定的应用。
不同的技术方法有各自的优缺点,选择合适的方法需要考虑到测定的准确性、敏感性和实验条件等因素,并根据具体的实验目的进行选择。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
淀粉化验是一种常见的食品分析方法,用于测定食品中淀粉的含量。
在淀粉化验中,
也需要测定样品中的蛋白质含量。
蛋白质含量是影响淀粉测定结果的一项重要因素。
因此,在实验中准确测定蛋白质含量是至关重要的。
蛋白质含量的测定技术有很多种,具体的使用技术根据实验需求和样品特性选择。
下
面介绍几种常见的测定技术。
1. 低里什蛋白质定量法
低里什蛋白质定量法是一种常用的蛋白质含量测定方法,其原理是利用酸和碱作用在
蛋白质分子中破坏肽键,将蛋白质分解成各种氨基酸,然后利用氨基酸与尿素和磷酸的反
应进行测定。
该方法操作简便,灵敏度较高,但存在破坏性和选择性较弱的问题。
贝雷斯蛋白质定量法是一种基于比色法的蛋白质含量测定方法,其原理是将样品与酱
油或肥料中的蛋白质分子相结合,形成紫色化合物,然后利用比色法进行测定。
该方法操
作简便,精度较高,但是需要适用于不同样品,需要根据样品特点做相应的修改。
3. 毛细管凝胶电泳法
毛细管凝胶电泳法是一种基于蛋白质电泳的蛋白质含量测定方法。
该方法将样品中的
蛋白质分子在电场作用下沿毛细管逐步凝胶分离,最终形成不同的带状物。
通过检测带状
物的数量和强度,可以计算出样品中的蛋白质含量。
该方法操作复杂,但具有较好的准确
性和选择性。
4. 紫外吸收法
综上所述,对于淀粉化验中蛋白质含量的测定技术,具体的选取方法需根据实验需求
和样品特性进行选择。
在实验过程中,需要严格控制实验条件和操作技巧,确保得到准确
的测定结果,为实验结果的准确性提供基础。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术1. 引言1.1 淀粉化验中蛋白质含量的重要性淀粉化验中蛋白质含量的重要性在于能够准确测定样品中蛋白质的含量,这对于食品、医药、环境等领域具有重要意义。
在食品工业中,蛋白质是食品的重要营养成分之一,不同的蛋白质含量可以影响食品的口感和营养价值。
准确测定淀粉化验中蛋白质含量可以帮助食品生产企业控制产品质量,确保产品符合标准。
在医学领域,蛋白质是生物体内重要的组成部分,参与了许多生理功能的调节和维持。
淀粉化验中蛋白质含量的准确测定对于疾病诊断、药物研发等具有重要的意义。
在环境检测领域,蛋白质含量的测定可以帮助分析水、土壤等环境样品中的有机物质含量,从而评估环境质量。
淀粉化验中蛋白质含量的重要性在于为各个领域提供准确的数据支持,帮助人们更好地了解和控制相关的生产和研究活动。
开展淀粉化验中蛋白质含量的测定技术研究具有重要的实际意义。
1.2 现有的蛋白质含量测定方法现有的蛋白质含量测定方法主要包括光度法、比色法、滴定法、免疫分析法和质谱分析法。
这些方法各有特点,可根据实验需求和样品性质选择合适的方法进行蛋白质含量的测定。
光度法是一种常用的蛋白质含量测定方法,通过测量样品中特定波长的光吸收量来计算样品中的蛋白质含量。
这种方法操作简便,结果稳定可靠,适用于大多数样品类型。
比色法是利用染料与蛋白质结合产生颜色反应,根据颜色深浅来确定蛋白质含量的方法。
这种方法对样品的要求较高,但对测定结果的准确性较高。
滴定法是通过向含蛋白质的样品中滴加溶液,根据终点滴定的体积计算蛋白质含量的方法。
这种方法需要耗费较多时间和试剂,但适用于部分无法用其他方法测定的特殊样品。
免疫分析法和质谱分析法是高级的蛋白质含量测定方法,具有高灵敏度和高准确性,但操作复杂,需要专业设备和技术支持。
这些方法适用于对蛋白质含量要求较高的实验及专业研究领域。
2. 正文2.1 光度法测定蛋白质含量光度法是一种常用的测定蛋白质含量的方法之一。
生化实验报告面粉
一、实验目的1. 了解面粉的生化特性。
2. 掌握面粉中主要成分的检测方法。
3. 分析面粉的营养价值。
二、实验原理面粉是小麦加工后的产品,主要成分包括淀粉、蛋白质、脂肪、矿物质和维生素等。
本实验通过检测面粉中的淀粉、蛋白质和脂肪含量,分析面粉的营养价值。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:面粉、碘液、双缩脲试剂、苏丹Ⅲ染液、蒸馏水、乙醇等。
2. 实验仪器:电子天平、烧杯、试管、滴管、移液管、酒精灯、显微镜等。
四、实验步骤1. 淀粉检测(1)取少量面粉于试管中,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)向试管中加入2-3滴碘液,观察颜色变化。
2. 蛋白质检测(1)取少量面粉于试管中,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)向试管中加入双缩脲试剂,观察颜色变化。
3. 脂肪检测(1)取少量面粉于试管中,加入适量蒸馏水,搅拌均匀。
(2)向试管中加入苏丹Ⅲ染液,观察颜色变化。
4. 面粉营养成分分析(1)根据检测结果,计算面粉中淀粉、蛋白质和脂肪的含量。
(2)分析面粉的营养价值。
五、实验结果与分析1. 淀粉检测实验结果显示,面粉加入碘液后呈现蓝色,说明面粉中含有淀粉。
2. 蛋白质检测实验结果显示,面粉加入双缩脲试剂后呈现紫色,说明面粉中含有蛋白质。
3. 脂肪检测实验结果显示,面粉加入苏丹Ⅲ染液后呈现红色,说明面粉中含有脂肪。
4. 面粉营养成分分析根据实验结果,面粉中淀粉含量约为70%,蛋白质含量约为12%,脂肪含量约为2%。
面粉是一种富含碳水化合物的食品,适合作为主食。
同时,面粉中还含有一定量的蛋白质和脂肪,具有一定的营养价值。
六、实验结论1. 面粉中含有淀粉、蛋白质和脂肪,具有丰富的营养价值。
2. 通过实验可以检测面粉中主要成分的含量,为面粉的营养评价提供依据。
七、实验讨论1. 本实验采用的方法简单易行,可操作性强。
2. 实验结果与面粉的实际营养成分基本相符,具有一定的参考价值。
3. 在实际应用中,可以根据面粉的营养成分,调整食品配方,提高食品的营养价值。
淀粉中蛋白质含量测定[整理版]
食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)【按】最近,毒奶粉事件成为各方关注的焦点。
为何不法奶农会往牛奶或奶制品中添加三聚氰胺呢?原因在于目前检验奶制品测定蛋白质方法上的缺陷——目前主要使用凯氏定氮法来检测。
检测时,通过测量奶制品中氮元素的含量,然后将含氮量经过折算转化为蛋白质的含量,而不是直接测定奶制品中蛋白质的含量。
这一方法给不法奶农制造了机会——通过往牛奶中加入含氮量高的三聚氰胺(含氮量达66%),从而提升牛奶及其制品的含氮量,从而冒充含高蛋白的奶制品。
下面介绍如何利用凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量。
实验原理蛋白质是含氮的化合物。
食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。
因为食品中除蛋白质外,还含有其它含氮物质,所以此蛋白质称为粗蛋白。
仪器与试剂:试剂——硫酸铜(CuSO4·5H20)、硫酸钾、硫酸(密度为1.8419g/L)、硼酸溶液(20g/L)、氢氧化钠溶液(400g/L)、0.01mol/L盐酸标准滴定溶液、混合指示试剂(0.1%甲基红乙溶液液1份,与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液5份临用时混合)、食品样品。
仪器——微量定氮蒸馏装置实验步骤:1、样品消化:称取食品样品粉末约0.3g(±0.001g),移入干燥的100mL 凯氏烧瓶中,加入0.2g硫酸铜和6g硫酸钾,稍摇匀后瓶口放一小漏斗,加入20mL 浓硫酸,将瓶以450角斜支于有小孔的石棉网上,使用万用电炉,在通风橱中加热消化,开始时用低温加热,待内容物全部炭化,泡沫停止后,再升高温度保持微沸,消化至液体呈蓝绿色澄清透明后,继续加热0.5h,取下放冷,小心加20mL 水,放冷后,无损地转移到100mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀备用,即为消化液。
V1——样品滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL);V2——空白滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL);c——盐酸标准滴定溶液浓度(mol/L);0.0140 ——1.0mL盐酸[c(HCl)=1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量(g);m——样品的质量(g);F——氮换算为蛋白质的系数,一般食物为6.25;乳制品为6.38;面粉为5.70;高梁为6.24;花生为5.46;米为5.95;大豆及其制品为5.71;肉与肉制品为6.25;大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83;芝麻、向日葵5.30。
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
分析淀粉化验中蛋白质含量的测定技术
淀粉化验中蛋白质含量的测定技术涉及到几种常见的实验方法,包括巴氏法、
Kjeldahl法和双波长紫外光谱法。
下面将对这些方法进行分析。
巴氏法是一种常用的测定淀粉中蛋白质含量的方法。
具体操作步骤如下:将待测的淀
粉样品加入酚酸溶液中,加热至沸腾状,然后过滤。
将滤液加入硫酸铵溶液中,用硫酸为
试剂,将含硫酸盐离析出来,沉淀中的蛋白质也会一同析出。
接下来,用乙醇洗涤沉淀,
并干燥称重,得到蛋白质的含量。
双波长紫外光谱法是一种先进的测定淀粉中蛋白质含量的方法。
这个方法的基本原理
是根据蛋白质和淀粉在紫外光谱上的特征吸收峰进行测量。
通过确定淀粉和蛋白质各自的
最大吸收波长和比例,然后将待测物质溶解在适当的缓冲溶液中进行测量。
根据各自的吸
光度值计算出蛋白质的含量。
以上三种方法在测定淀粉中蛋白质含量时各有优势和适用范围。
巴氏法相对简单易行,但存在操作复杂、时间较长和结果不太准确的问题;Kjeldahl法准确性较高,适用于深度分析,但操作繁琐且耗时较长;双波长紫外光谱法则快速、准确并且非破坏性,但设备要
求较高。
针对淀粉化验中蛋白质含量的测定技术,不同的实验方法在不同的情况下可以选择使用。
对于常规分析,巴氏法和Kjeldahl法可以作为常用的技术方法;而对于快速分析和高准确性要求,可以选择双波长紫外光谱法。
在实际应用中,需要根据实验条件和实验目的
选择合适的方法进行分析。
试题三测定淀粉的蛋白质、酸度、细度和斑点的操作 (2)
(二)残缺、污损人民币的主要 特征(图片一)
断 裂 缺 失
炭 化
不 清 晰
(二)残缺、污损人民币的主要 特征(图片二)
污 染 鼠 咬
洗 涤
霉 烂
(三)残缺、污损人民币兑换的 含义
应持有残缺、污损人民币客户的要求,通过银 行柜面,按照规定的标准给予兑换成完整券的 业务。 影响残缺、污损人民币兑换的主要因素:能否 辨别钞票的真伪、能否按原样连接、能否把握 兑换标准。 兑换的工具:兑换尺(衡量兑换标准)、高倍放 大镜(辨别真伪) 是每一个银行临柜人员应尽的社会职责,是确 保流通人民币整洁度的有力措施 ,是每一个银 行网点必须办理的业务。
判断兑换标准前,先判断钞票的真伪,主要方 法与残缺、污损人民币使用的方法类似 兑换标准与残缺、污损人民币兑换标准相同。 计算特殊残缺、污损人民币剩余面积时,既包 括图案、文字、纸张能按原样连接的实物面积, 又包括与票面原样连接的炭化、变形部分。不 能按原样连接的部分,不作为票面剩余面积计 算。
(三)特殊残缺、污损人民币的 兑换程序之一
金融机构直接办理残缺、污损人民币兑换业务 的操作程序: 认定:双人经办、复核认定兑换标准,业务主 管确认。 封装:持有人同意认定的兑换标准后,分券别 将特殊残缺和污损人民币按全额、半额使用专 用袋密封。 填单:填制《金融机构特殊残缺污损人民币兑 换单》一式三联,一联金融机构留存,一联粘贴 在专用袋上,一联交持有人。
票面因火灾、虫蛀、鼠咬、霉烂等特殊 原因,造成外观、质地、防伪特征受损, 纸张炭化、变形,图案不清晰,不宜再 继续流通使用的人民币 特殊残缺、污损人民币兑换由人民银行 指定的金融机构网点办理,目前武汉市 辖内有127多家银行网点办理,武汉市内 交行有2家(武昌支行、分行营业部)。
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食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法)
【按】最近,毒奶粉事件成为各方关注的焦点。
为何不法奶农会往牛奶或奶制品中添加三聚氰胺呢?原因在于目前检验奶制品测定蛋白质方法上的缺陷——目前主要使用凯氏定氮法来检测。
检测时,通过测量奶制品中氮元素的含量,然后将含氮量经过折算转化为蛋白质的含量,而不是直接测定奶制品中蛋白质的含量。
这一方法给不法奶农制造了机会——通过往牛奶中加入含氮量高的三聚氰胺(含氮量达66%),从而提升牛奶及其制品的含氮量,从而冒充含高蛋白的奶制品。
下面介绍如何利用凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量。
实验原理
蛋白质是含氮的化合物。
食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。
因为食品中除蛋白质外,还含有其它含氮物质,所以此蛋白质称为粗蛋白。
仪器与试剂:
试剂——硫酸铜(CuSO4·5H20)、硫酸钾、硫酸(密度为1.8419g/L)、硼酸溶液(20g/L)、氢氧化钠溶液(400g/L)、0.01mol/L盐酸标准滴定溶液、混合指示试剂(0.1%甲基红乙溶液液1份,与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液5份临用时混合)、食品样品。
仪器——微量定氮蒸馏装置
实验步骤:
1、样品消化:称取食品样品粉末约0.3g(±0.001g),移入干燥的100mL 凯氏烧瓶中,加入0.2g硫酸铜和6g硫酸钾,稍摇匀后瓶口放一小漏斗,加入20mL 浓硫酸,将瓶以450角斜支于有小孔的石棉网上,使用万用电炉,在通风橱中加热消化,开始时用低温加热,待内容物全部炭化,泡沫停止后,再升高温度保持微沸,消化至液体呈蓝绿色澄清透明后,继续加热0.5h,取下放冷,小心加20mL 水,放冷后,无损地转移到100mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀备用,即为消化液。
试剂空白实验:取与样品消化相同的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸,按以上同样方法进行消化,冷却,加水定容至100mL,得试剂空白消化液。
2、定氮装置的检查与洗涤:检查微量定氮装置是否装好。
在蒸气发生瓶内装水约三分之二,加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数
结果计算:
X=[(V1-V2)×c×0.0140]÷[(m/100)×10]×F×100
式中X——样品蛋白质含量(g/100g);
V1——样品滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL);
V2——空白滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL);
c——盐酸标准滴定溶液浓度(mol/L);
0.0140 ——1.0mL盐酸[c(HCl)=1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量(g);
m——样品的质量(g);
F——氮换算为蛋白质的系数,一般食物为6.25;乳制品为6.38;面粉为5.70;
高梁为6.24;花生为5.46;米为5.95;大豆及其制品为5.71;肉与肉制品为
6.25;大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83;芝麻、向日葵5.30。
计算结果保留三位有效数字。
注意事项及说明:
1、本法也适用于半固体试样以及液体样品检测。
半固体试样一般取样范围为2.00g~5.00g;液体样品取样10.0mL~25.0mL(约相当氮30mg~40mg)。
若检测液体样品,结果以g/100mL表示。
2、消化时,若样品含糖高或含脂及较多时,注意控制加热温度,以免大量泡沫喷出凯氏烧瓶,造成样品损失。
可加入少量辛醇或液体石蜡,或硅消泡剂减少泡沫产生。
3、消化时应注意旋转凯氏烧瓶,将附在瓶壁上的碳粒冲下,对样品彻底消化。
若样品不易消化至澄清透明,可将凯氏烧瓶中溶液冷却,加入数滴过氧化氢后,再继续加热消化至完全。
4、硼酸吸收液的温度不应超过40℃,否则氨吸收减弱,造成检测结果偏低。
可把接收瓶置于冷水浴中。
5、在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。