直接抗人球蛋白试验阳性的意义讲义

3、放散液 若红细胞在37℃收集和洗涤，细胞上没有
免疫球蛋白，放散液中不会有反应发生。
4、自身抗体的特异性 最 常 见 与 CAS 有 关 的 特 异 性 为 抗 I 。
较不常见的抗i特异性则与感染性单核 球症有关。
在及稀有的情况下，血清中冷反应性 自身凝集素具有Pr特异性或其他特异性。
阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）
2、血清免疫球蛋白类型 在PCH中IgG自身抗体，习惯上称为双相
性溶血素，因为它在低温与红细胞相结合，在 37℃ 时 使 致 敏 红 细 胞 溶 血 。 Donath— Landsteiner(DL)试验是诊断这种疾病的基础。
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3、释放液免疫球蛋白类型
由于补体成分是循环红细胞上唯一存在的 球蛋白，因此从PCH病人红细胞上得到的洗脱 液一般是没有活性的。
3、 血清里存在游离的自身抗体时，不可能获 得在血清学上完全相配合的血液。这种情 况下要考虑自身抗体可能掩盖有临床意义 的同种抗体的存在。倘若时间允许，在输 血前应测定是否存在同种抗体
解决ABO定型中的问题
1 、采集标本后，立即将标本放入37 ℃并在试 验前用温盐水（37~45 ℃ ）洗涤红细胞。
1、 温抗体型自身免疫溶血性贫血（WAIHA） 原发性的 （自发性） 继发性的 （与淋巴瘤、系统性红斑狼疮、 癌症或药物处理有关）
2、 冷凝集素综合征（CAS） 原发性的 （自发的） 继发性的 （与淋巴瘤支原体肺炎、传染性 单核细胞增多症 有关）
三、血清学特征
温抗体型自身免疫溶血性贫血 （WAIHA）
4、自身抗体的特异性
PCH的自身抗体大部分呈现抗-P特异性， 与所有的红细胞（包括病人自己的红细胞）起 反应，与罕见p或Pk表现型不反应。亦有例子 报告具有抗-I、抗-i和抗-Pr等特异性。
▪ 病人的红细胞是抗体还是补体致敏？ ▪ 血清中有抗体吗？
如果有，这些抗体是凝集 还是非凝集性抗体？ 体外溶血吗？ 最适反应温度是暖（37 ℃ ）还是冷（4 ℃ ）？ 是自身抗体还是同种抗体？
▪ 自身免疫性溶血性贫血
是由于机体免疫功能异常，产生了抗自 身红细胞的抗体，使红细胞破坏加速造 成的溶血性贫血，在后天性溶血性贫血 中多见。
二、分类
免疫性溶血性贫血可分为三类
▪ 同种免疫性溶血性贫血 ▪ 自身免疫性溶血性贫血 ▪ 药物引起的免疫性溶血性贫血
自身免疫性溶血性贫血可分为四种主要类型：
▪ 洗脱液中有抗体活性吗？
四、具有自身抗体的患者的血清学检查
（一）、输血前试验中可能存在的问题
1、 冷型反应性自身抗体能引起自身凝集 反应，致使ABO及Rh分型试验结果发 生矛盾。自身抗体亦凝集血清分型试 验所用的A型和B型试剂红细胞。
2、 被球蛋白致敏的红细胞在接触到高蛋白含 量的商品化的抗-Rh 血清试剂时，可发生 自发性的凝集反应，致使 Rh 定型试验的 结果发生矛盾。
2、用硫醇类试剂（2-Me、DTT等）处理红细 胞。
3、反定型中，可将血清和A、B红细胞在37 ℃ 预热进行试验。
4、用吸收后血清进行试验（自身吸收的或用 纯合子O型红细胞吸收的
解决Rh定型中的问题
1、由冷自身抗体造成可用解决ABO定型问题 的方法来避免。
2、由IgG致敏的红细胞，试验必须要进行适当 的对照试验。 或使用使用有盐水反应活性 的试剂。
1. 直接抗球蛋白试验 补体是红细胞上唯一能被检出的蛋白。多
特异性抗球蛋白试剂中抗C3d（C4d）成分是 造成DAT阳性的原因。
2．血清
在 4℃ 温 度 测 定 与 免 疫 性 溶 血 有 关 的 IgM冷反应性自身凝集素效价常大于1，000 以上；在体外用超过32℃温度盐水悬浮红细 胞时则很少有反应。若在反应介质中加入 30%牛白蛋白时，70 % 有临床意义的样本 将在37℃反应
常见的自身免疫性溶血性贫血， 约占 所有免疫性溶血性病例的48~70%， 与温反应性自身抗体有关
WAIHA典型的血清学特征
1、直接抗球蛋白试验 使用单特异性IgG及抗C3试剂时，可有三种
形式的反应： 单独IgG反应、单独C3致敏、IgG+C3致敏，
2、在血清中的自身抗体 是IgG型的，与所有的红细胞在间接抗
（二）在有自身抗体存在时检测同种抗体
1、有温型反应性抗体存在时检测同种抗体
▪ 自身吸收 ▪ 异体吸收法 ▪ 稀释技术
是DAT阳性的自身免疫性溶血性贫
血症最少见的类型，成人中很少见，儿
童中占32%。
较 为 常 见 PCH
是急性暂时的情况，继发于病毒感染症，
尤其在幼童当中。它也能出现在老年人
中，为一特发性的慢性病。
PCH典型的血清学特征
1、直接抗球蛋白试验 PCH中的自身抗体是IgG，它和IgM冷
自身凝集素一样，在身体较冷的部位， PCH的IgG自身抗体与红细胞起反应，使 补体成分（C3及C4）与红细胞发生不可逆 的 结 合 ， 然 后 在 较 温 暖 的 部 位 IgG 分 离 。 所以直抗阳性是补体造成的。
人球蛋白试验中都呈阳性反应。血清中的游离抗 体量非常少。
3、放散液中
体。 4、自身抗体特异性
可检到IgG抗
冷凝集素综合征（CAS）
CAS（也称冷凝集素疾病CHD)，是与 冷反应自身抗体有关的溶血性贫血中最常见 的一种类型，约占所有免疫性溶血性病例的 16-32%。可有急性和慢性两种情况。
CAS典型的血清学特征
直接抗人球
蛋白试验阳 性的意义
红细胞膜受某些药物（以头孢菌素类最多见） 疗法而改变，导致蛋白质（包括免疫球蛋白） 非特异性地被红细胞膜所吸收
对给予药物（如奎尼丁及非那西丁）的反应形 成药物-抗药物复合体，使补体成分、IgG抗体 （占少数）与红细胞相结合
为减少器官及骨髓移植患者的T细胞群体，应 用有嗜异性抗体存在的马抗人淋巴细胞球蛋白 时
非抗体介导的丙球蛋白过高患者
直接抗人球蛋白试验阳性的评价
血液标本的收集 初步的血清学研究 进一步的研究
自身免疫性溶血性贫血
一、概念
▪ 免疫性溶血 免疫性溶血是指由于免疫反应而使红细
胞破坏加速，寿命缩短的过程。
▪ 溶血性贫血 溶血性贫血是由于红细胞破坏增多、增
速， 超过造血补偿能力范围，所发生 的一种贫血。