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葉下株（Phyllanthus urinaria）之自由基清除抑制活性評估

摘要

自古醫學典藉中就發現，葉下株（Phyllanthus urinaria）具有優異的抗氧化能力，所以本研究期望藉由葉下株的抗氧化能力、DPPH自由基清除率、Trolox當量抗氧化能力（TEAC）、總多酚含量（TPC）活性評估測試，評估將葉下株研發美容保養品潛力。本實驗以丙酮浸泡葉下株來進行萃取，分出18個粗分層及水層、油層，再從這些粗分層來進行DPPH、TEAC、TPC三種方式分析其抗氧化能力，本研究顯示，在抗氧化分析方面，DPPH抑制效果、粗分層樣本越後層清除率越高，粗分層第15、16、18層與油層濃度1000 ppm清除率均超過50%，水層清除率更達95%以上；TEAC在粗分層第9層後抗氧化能力普遍較佳，在濃度1000 ppm第9、10、11、16、水、油、粗萃層均超過50％，其中粗分層第18抑制率達95％以上；總多酚定量測試，粗分層第15、18、水層含有相當於106.5986 mg、84.14966 mg、76.66667 mg之Gallic acid。綜合以上數據，葉下株是非常具有開發潛力的中藥材，希望更進一步研究，應用在中草藥化粧品方面。

前言

近年來隨著國際趨勢變化，使得中草藥越來越受重視，且逐漸蔚為風潮。而隨著中草藥的開發，全球各地掀起了一股崇尚自然的熱潮，不僅於醫藥上，保健食品、美容化妝品也漸漸受到市場的青睞，人們越來越瞭解中草藥並不像西藥或其他化學藥品單一個組成或成分，其作用也單方向與單純反應機制，所以紛紛轉向天然漢方草本為主，減少化學上的副作用。現今許多天然物抗氧化應用的研究，已從食品藥物領域延伸至化妝品上的應用，化粧品添加天然物已成不忽視趨勢，所以有效的結合化妝品與中草藥上技術，更提升雙方附加價值，使化粧品產業逐年成長，也讓相關產業得以蓬勃發展，可看出中草藥在化妝品上潛力無窮的商機。

本研究自民間常見草藥，葉下珠（Phyllanthus urinaria），屬於大戟科油柑植物，別名珍珠草，是一種小型藥草，廣泛的生長在熱帶和亞熱帶的中國、印度、南美洲，數百年前就已經是中國民間藥物，根據過去文獻研究報告指出葉下珠可以抗B 型肝炎病毒作用、抗肝細胞損傷作用、抗發炎作用、抗細菌作用、抗氧化與保護心臟作用、消除DPPH radical、超氧陰離子自由基（superoxide anion radical）、過氧化氫（hydrogen peroxide）、一氧化氮（nitricoxide）等自由基作用1-3。

根據許多文獻報導人類體內自由基主要是由氧在體內轉變成活性氧族（reactive oxygen species，ROS）及具有活性的氮氧化合物（reactive nitrogen species，RNS）如過氧化脂質（lipid hydroperoxide）、單旋氣（single oxygen）4。它們會攻擊人體細胞膜上的多聚不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）及各種胺基酸，造成養化傷害或基因異常表現等因素導致這種疾病，例如癌症、糖尿病、氣腫、動脈粥狀硬化、腦血管病變等5-6，綜合前述對自由基，可歸類下列幾種7：

（一）超氧陰離子自由基（superoxide anion radical）

O-2．通常是最常產生的自由基，在人體內的吞噬細胞及粒腺體中的電子等均會產生超氧陰離子自由基。但半衰期極短，可是會造成自由基會連鎖反應，接著產生的二級產物、三級產物等，將會造成傷害。

（二）過氧化氫（hydrogen peroxide）

H2O2過氧化氫對細胞的傷害性較大，因為它通過細胞膜和體內轉運中的鐵和銅發生fenton反應，產生羥基自由基（HO．）過氧化氫可活化heme protein、hemoglobin和myoglobin，成為含鐵化合物，而這些化合物會促使細胞的脂質過氧化。

（三）羥基自由基(hydroxyl radical)

HO．羥基自由基算是最會跑的自由基之一，除了自由基轉換之外，在很多情況下也會大量產生HO．。它會造成體內脂質過氧化進一步破壞細胞，且會和胺基酸、核醣體、磷脂質等生物體內

反應。多元不飽和脂肪酸(PUFA)和羥基自由基關係非常密切，普遍認為一個HO．會因連鎖反應產生數百個PUFA 的過氧化。

（四）單旋氣（single oxygen）

1O

為體內穩定的氧，受紫外線照射後出現不穩定現象，且極易與氫反應，直接攻擊不飽和脂肪2

酸，造成自由基物及脂質氧化。

（五）過氧化脂質（lipid hydroperoxide）

LOOH過氧化脂質是許多自由基物反應完的產物，且大部分發生在細胞膜上和脂肪酸。過氧化脂質也會產生有害的醛類、鹼類或其它產物。過氧化脂質或其它產物會和酵素、蛋白質、核酸作用，造成細胞病變或死亡。

隨著年紀增長生理機能及器官逐漸下降，在加上外在環境因素，使體內自由基更加活躍，所

以在膳食中增加蔬果或草藥攝取量，可降低相關疾病發生8。由於他們當中含有極性與非極性化

合物可作為氫離子、還原劑、活性氧清除物，因此具有抗氧化能力，減少細胞受氧化的傷害9，

使得人類壽命逐年增長，減少老化以成現今大家重視議題，因此如何清除體內過多自由基已被定

義為防禦醫學一環，也就是在人體老化以前，就先給予預防，這樣能降低許多因自由基而引起的

相關疾病及老化例如癌症、動脈硬化、心血管疾病、老年痴呆等，這些疾病都被認為與自由基相

關10-12。

隨著政府推動綠色生態產業和民眾環保意識抬起，與化學物質藥物相比，中草藥接受意願頗

高，業界爭相開發，紛紛開發天然植物活性成分產品，以爭取中藥化妝品商機。本研究採非細胞

抗氧化實驗，以DPPH自由基清除能力、TEAC總抗氧化能力、TPC含量檢測，評估葉下株在抗

氧化方面的潛力，並討論葉下株在化妝品上的應用潛力，藉本研究來評估葉下株體內的抗氧化功

能及抗氧化能力的相關性。