苹果酸含量的测定苹果酸含量
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
学生姓名：
学号：
专业：应用化学
年级班级：12级C班
课程名称：现代仪器分析实验实验时间：2015年4月24日
0.02mo l/L KH2PO4溶液
的配制：磷酸二氢钾（KH2PO4，M=136）
将磷酸二氢钾溶液用蒸馏水稀释到1000ml的容量瓶中，是其浓度变为0.02mol／L，PH=2.75(用盐酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4溶液。
计算：有公式m=cv*M=(0.02mol／L*1000ml/1000)*136
需要磷酸二氢钾的质量m=2.72g
苹果酸样品
的配制：将果实样品破碎除籽后研磨成粉状，之后准确称取1.000g样品，加入含0.008mol／L磷酸的蒸馏水25ml,在25摄氏度的水浴中震荡浸泡10min，然后在800r／min、4摄氏度的条件下离心20min，取上清液，用0.45pm的水系滤膜过滤后用与HPLC分析。
纯甲醇CH3OH(M=34)
2实验所得高效液相谱图：
高效液相图
特殊实验条件
泵B浓度95.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐）泵A浓度5.0%（纯甲醇）标准谱图
山西谱图山东谱图
甘肃谱图浓度
泵B浓度90.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），泵A浓度10.0%（纯甲醇）高效液相图
特殊实验条件
标准图谱
山西谱图
山东图谱甘肃图谱
3苹果酸含量计算
实验1：实验2：
苹果产地：山西样品
称取量：
1.0903
g
容量瓶
体积：
25
ml
苹果
产地：
山西样品
称取量：
1.0903
g
容量瓶
体积：
25
ml
实验条件：流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐
酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓
冲盐，并加以适量的纯甲醇，限制最大压
力17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件：
流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐，
并加以适量的纯甲醇，限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件：泵B浓度95.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度5.0%（纯甲醇）
特殊
实验
条件：
泵B浓度90.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度10.0%（纯甲醇）
苹果酸含量计算苹果酸含量计算
标准曲线：
由于峰往后移了，检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.604，峰面积为69562计算得出浓度为13.96ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
得X=13.96ug/ml
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=13.96*25*134/1.0903
=42892ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.357，峰面积10835时测得苹果酸浓度为2.334ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=2.334*25*134/1.0903
=7171ug/g
实验1：实验2：
苹果产地：山东样品
称取量：
1.2084
g
容量瓶
体积：
25
ml
苹果
产地：
山东样品
称取量：
1.2084
g
容量瓶
体积：
25
ml
实验条件：流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐
酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓
冲盐，并加以适量的纯甲醇，限制最大压
力17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件：
流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐，
并加以适量的纯甲醇，限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件：泵B浓度95.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度5.0%（纯甲醇）
特殊
实验
条件：
泵B浓度90.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度10.0%（纯甲醇）
苹果酸含量苹果酸含量
标准曲线：
由于峰往后移了，检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.593，峰面积为20080计算得出浓度为4.011ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=4.011*25*134/1.2084
=11120ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.410，峰面积6672时测得苹果酸浓度为1.522ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=1.522*25*134/1.2084
=4219ug/g
实验1：实验2：
苹果产地：甘肃样品
称取量：
1.0123
g
容量瓶
体积：
25
ml
苹果
产地：
甘肃样品
称取量：
1.0123
g
容量瓶
体积：
25
ml
实验条件：流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波
分析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸
调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲
盐，并加以适量的纯甲醇，限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
实
验
条
件：
流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波分
析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸调
节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐，
并加以适量的纯甲醇，限制最大压力
17.0MPa最小压力0.0MPa。
LC停止时间10min，PDA停止时间10min，
模式为二元高压梯度。
特殊实验条件：泵B浓度95.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度5.0%（纯甲醇）
特殊
实验
条件：
泵B浓度90.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），
泵A浓度10.0%（纯甲醇）
苹果酸含量苹果酸含量
标准曲线：
由于峰往后移了，检测出来的含量为零。
所以用保留时间5.599，峰面积为69577计算得出浓度为13.36ug/ml。
用外标法计算。
函数为F(x)=4975.23*X+123.23
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=13.36*25*134/1.0123
=44874ug/g 标准曲线
正常出峰
在保留时间4.410，峰面积5657时测得苹果酸浓度为1.324ug/ml
用外标法计算
函数为F(X)=5123.99*X-1125.04
苹果酸含量为W苹果酸=CVM/m
=1.324*25*134/1.0123
=4381ug/g。