反相色谱切换为正相色谱操作步骤

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反相色谱切换为正相色谱操作步骤

a先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净,然后将色谱柱拆下来密封保存。用双通将进样器与检测器连接。

b将贮液瓶内装入300ml的二次蒸馏水,将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1.5小时。注意观查泵压。

c将流速渐次降到0ml/min,把二次蒸馏水更换为甲醇(HPLC),将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1小时。

d用相同的方法将甲醇依次更改为异丙醇、四氢呋喃(HPLC),冲洗系统各1小时。

e最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相:异丙醇/正己烷=15/85(V/V)混合液冲洗系统1小时(根据不同样品更换不同的流动相)。同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇换为流动相,保持每分钟50-60滴的速度清洗柱塞杆。然后将双通更换为Si60 250mm*4.6mm*5um色谱柱,待色谱柱平衡好以后分析样品。

正相色谱一定要确保系统内无水。

品管科

傅忠

2006-7-2

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