反相色谱切换为正相色谱操作步骤
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
反相色谱切换为正相色谱操作步骤
a先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净,然后将色谱柱拆下来密封保存。用双通将进样器与检测器连接。
b将贮液瓶内装入300ml的二次蒸馏水,将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1.5小时。注意观查泵压。
c将流速渐次降到0ml/min,把二次蒸馏水更换为甲醇(HPLC),将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1小时。
d用相同的方法将甲醇依次更改为异丙醇、四氢呋喃(HPLC),冲洗系统各1小时。
e最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相:异丙醇/正己烷=15/85(V/V)混合液冲洗系统1小时(根据不同样品更换不同的流动相)。同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇换为流动相,保持每分钟50-60滴的速度清洗柱塞杆。然后将双通更换为Si60 250mm*4.6mm*5um色谱柱,待色谱柱平衡好以后分析样品。
正相色谱一定要确保系统内无水。
品管科
傅忠
2006-7-2