pcr反应体系的组成及各组分作用
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pcr反应体系的组成及各组分作用
PCR,即链式酶聚合反应,反应管中各组分如下:
1.扩增缓冲液:
缓冲液有助于酶的稳定,是给聚合酶提供一个最适合酶催化反应条件;
2.4种dNTP混合物:
四种脱氧核苷酸,是DNA的原料;
3.引物:
DNA合成不能从零开始,必须要有引物,从引物末端开始延伸,合成整条链;
4.模板:
DNA合成需要模板链;
5.Taq DNA聚合酶:
催化PCR反应,该酶是从Thermus aquaticus细菌中提取的特殊的耐热DNA聚合酶,可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本;
6.Mg2+:
Mg与dNTP以及DNA模板结合形成复合体,只有这种复
合体才能被DNA聚合酶识别;
7.加双或三蒸水:
调节反应体系的浓度用;