菌种的管理和保藏

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菌种保藏室管理制度

菌种保藏室管理制度第一章总则第一条为规范菌种保藏室的管理，确保菌种资源的使用和保护，提高菌种的保存质量，特制定本管理制度。

第二条菌种保藏室是指一个专门用于菌种资源的保存、管理和利用的实验室。

第三条本管理制度适用于所有使用菌种保藏室的实验室及工作人员。

第四条菌种保藏室的管理原则是" 管理科学、操作规范、保藏严谨、使用安全”。

第五条所有菌种的管理必须符合《微生物实验室安全操作规程》和相关法律法规的规定。

第二章菌种保藏室的设立第六条菌种保藏室设有专门的实验室，实验室应符合微生物实验室的相关要求。

第七条菌种保藏室应设有专门负责菌种管理的工作人员，负责日常的菌种保藏、更新、记录等工作。

第八条菌种保藏室应设有专门的存储设施，保障菌种的安全保存。

第九条菌种保藏室的设立必须经过相关部门的认可和注册。

第三章菌种的采集、保藏及更新第十条采集新的菌种来源必须符合相关规定，取得相关部门的许可。

第十一条采集的菌种必须在规定的时间内用适当的方法保存，保证菌种的纯净性和活力。

第十二条菌种的保藏要有完善的记录，包括菌种来源、采集时间、保存方法等。

第十三条菌种的更新要进行定期检查，确保菌种的活力和纯度。

第十四条菌种的更新要在菌种信息系统中记录，保证信息的完整性。

第四章菌种的使用与管理第十五条使用菌种前必须经过专门人员的审批，确保使用目的明确，操作规范。

第十六条使用菌种时必须遵守相关的操作规程，保证操作的安全性。

第十七条使用菌种后必须按照规定的处理方法进行处理，确保操作的安全性。

第十八条菌种使用后必须及时进行记录，保持菌种的流转记录清晰。

第十九条菌种使用完毕后必须按照规定的处理方法进行处理，确保操作的安全性。

第五章菌种保藏室的安全管理第二十条菌种保藏室应设置专门的安全管理人员，协调安全管理工作。

第二十一条菌种保藏室必须建立健全的安全管理制度，确保菌种的安全保存。

第二十二条菌种保藏室必须进行定期的安全检查，发现问题及时整改。

菌种保藏方法

菌种保藏方法
菌种保藏方法，如下：
1、传代保藏，传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。

很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏，将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上，在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子，随后密封试管置于4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。

保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏，冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，这种方法适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年。

我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏，配制半固体培养基，高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3，待培养基凝固，用接种环从平面培养基上挑取单菌落，穿入培养基若干次。

在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长，之后密封试管，根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。

保存时间至少可以达到
1 年，对于有些菌种甚至能达到20 年之久。

5、液氮超低温保藏，液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。

液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内，将该安瓶瓶放人液氮（-196℃）中保藏。

菌种保藏管理制度

菌种保藏管理制度第一章总则第一条为规范和加强菌种保藏管理，提高菌种资源的利用率和保藏质量，制定本制度。

第二条本制度适用于菌种保藏单位的管理和操作。

第三条菌种保藏管理应遵循法律法规、国家标准和相关管理制度，保障菌种资源的合法、安全、有效性。

第四条菌种保藏管理应遵循科学性、规范性和合理性原则。

第二章菌种保藏管理制度要求第五条菌种保藏单位应有合格的菌种保藏人员，具有相关专业知识和操作技能。

第六条菌种保藏单位应具备完善的菌种保藏设施和设备，满足菌种的质量保护和管理需求。

第七条菌种保藏单位应制定菌种保藏管理规章制度，明确菌种资源的申请、保藏、使用和监管流程。

第八条菌种保藏单位应建立菌种信息数据库，对菌种资源进行准确、完整地记录和管理。

第九条菌种保藏单位应定期组织对菌种资源进行检测和鉴定，确保菌种的纯度和活力。

第十条菌种保藏单位应加强安全管理，确保菌种资源的安全使用和保护。

第十一条菌种保藏单位应建立菌种资源的追溯机制，对菌种资源的来源和去向进行记录和跟踪。

第三章菌种保藏管理流程第十二条菌种保藏单位应依法收集菌种资源，并进行鉴定和分类。

第十三条菌种保藏单位应按照规定对菌种资源进行保存和保藏，确保其质量和活力。

第十四条菌种保藏单位应制定菌种资源的使用管理规定，明确使用范围和条件。

第十五条菌种保藏单位应建立菌种资源的定期更新机制，确保菌种资源的新鲜和多样性。

第十六条菌种保藏单位应建立菌种资源的信息共享平台，促进菌种资源的交流和共享。

第四章菌种保藏管理监督第十七条有关行政部门应加强对菌种保藏单位的监督和检查，确保菌种资源管理的合法性和合规性。

第十八条菌种保藏单位应定期对菌种资源进行抽查和自检，发现问题及时整改。

第十九条菌种保藏单位应接受社会监督，加强与公众的沟通和交流。

第二十条对违反菌种保藏管理制度的单位和个人，依法给予相应的处罚和通报。

第五章附则第二十一条本制度自颁布之日起正式执行。

第二十二条本制度的解释权归菌种保藏管理部门所有。

菌种的管理和保藏

整理课件
液体冷冻保藏法
制备方法 1%蛋白胨、甘油 ,灭菌,接种、培养18-24小时.
保存条件 -80℃可保存数年.
整理课件
菌种的传代和使用
工作菌种传代次数不得超过5代。 1代是指将活的培养物接种到新鲜培养基中，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。
整理课件
基本操作技术
细菌的接种、分离和培养接种：将微生物的培养物接种到培养基上的一种操作技术。
信息。
整理课件
2015版-指导原则
菌种的鉴定
纯菌的分离微生物的表型表型微生物鉴定通过长时间培养对微生物细胞的恢复、增殖是有限的，如有些环境中的微生物在普通微生物增殖培养基不能恢复。此外，分离出的受损的培养物可能不能完整表达其表型属性。基因型微生物鉴定
整理课件
菌种的鉴定
微生物分类中使用的表型特征
整理课件
菌种的保藏
低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都可以抑制微生物的代谢和生长繁殖，因此低温、干燥和真空是菌种保藏的重要手段。
整理课件
菌种的保藏
标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株。冷冻菌株一旦解冻转种制备工作菌株后,不得重新冷冻或再次使用。
工作菌株不可代替标准菌株，标准菌株的商业衍生物仅可用作
培养时间( h ) 18～24
2～3天
5～7天，或直到获得丰富的孢子
整理课件
菌液制备用稀释液—2015修定内容
修订前 0.9％氯化钠溶液
修订后 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。 0.9%无菌氯化钠溶液。
整理课件
菌液贮存—2015修定内容
修订前
修订后
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2-8℃，可在24小时内使用。

生产菌种的扩大培养与保藏简介

生产菌种的扩大培养与保藏简介1. 引言生产菌种的扩大培养与保藏是微生物工程中不可或缺的重要环节。

在微生物工业中，菌种数量的扩大和保藏对于生产规模的控制和后续的实验操作至关重要。

本文将介绍生产菌种的扩大培养和保藏的基本原理、方法和注意事项。

2. 菌种的扩大培养菌种的扩大培养是将初始的菌株培养至足够数量供生产使用的过程。

以下是菌种的扩大培养的基本步骤：2.1 选择培养基根据菌株的特性和要求，选择适当的培养基进行扩大培养。

常见的培养基包括富含营养物的培养基和特殊功能的培养基。

2.2 菌种的预培养在扩大培养前，先进行菌种的预培养。

从保存的菌种中挑取适量的菌落或菌点接种到预培养培养基中，进行为期数小时的预培养。

2.3 液体扩大培养将预培养的菌种转移到液体培养基中，并进行液体扩大培养。

根据需要的菌种数量，选择适当的容器和培养条件进行扩大培养。

2.4 固体扩大培养液体培养经过一定周期后，可以将菌种转移到固体培养基中进行固体扩大培养。

固体培养可以有助于菌落的生长和分离。

2.5 菌种的检测和纯化在扩大培养结束后，需要对菌种进行检测和纯化。

常用的方法包括菌落PCR、生化测试和纯化子代的分离。

3. 菌种的保藏菌种的保藏是为了长期保存和储备菌种，保证其稳定性的一系列措施。

以下是常见的菌种保藏方法：3.1 冷冻保存法将菌种在适当的保存液中制备冻存物，并存放在低温冰箱或液氮罐中。

常用的保存液包括甘露醇、甘油等。

3.2 干燥保存法将菌种在无菌条件下培养至晚期生长期，用无菌纱布吸干培养基上的菌落，将菌落贴附在无菌纸上，然后将纸张放置在干燥剂中保存。

3.3 冷冻干燥法通过冷冻和干燥的交替操作，将菌种制备为干燥粉末，再用密封容器保存。

冷冻干燥法在菌种保存期间能保持菌种的高度稳定。

3.4 液氮冷冻保存法将菌种悬浮液或培养物直接置于液氮罐中，利用极低温度保存菌种。

这种方法能够保留菌种的生物学特性，并保证菌种长期保存。

4. 注意事项在进行生产菌种的扩大培养和保藏时，需要注意以下事项：•严格遵守无菌操作规范，防止污染和交叉感染。

5菌种的管理和保藏

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低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都可以抑制微生物的代谢和生长繁殖，因此低温、干燥和真空是菌种保藏的重要手段。标准储备菌株经纯度和特性确认后保存时，可将培养物等份悬浮于抗冷冻的培养基中，并分装于小瓶中,建议采用低温冷冻干燥，液氮储存，超低温冷冻(低于-70℃)等方法保存。
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⑵创造适宜的培养条件 ⑶用不同类型的细胞进行传代 ⑷采用有效的保藏方法
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定期检查
主要检查项目菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形
态、生化特性及血清学检查。
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菌种的复壮使衰退的菌种重新恢复原来的优良特性的过程验室主要采用分离纯化的方法。
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⑴ 挑选特征典型的纯菌菌落。 ⑵确定保藏的合适菌体。 ⑶选择最适宜的方法保藏。 ⑷定期对保藏的菌种进行检查。
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二、菌种的传代和使用
工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5代，（从菌种保藏中心获得的标准菌株为第0代）防止过度的传代造成菌种变异。
1代是指将活的培养物接种到新鲜培养基中，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。
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菌种的来源
药品微生物检验用的试验菌应来自认可的国内或国外菌种收藏机构的标准菌株，或使用与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。
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菌种保藏的中心任务
⒈广泛收集各种有用的微生物菌种。 ⒉选择最适宜的保藏方法。 ⒊研究、检验、交换和使用。
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菌种保藏与管理

菌种保藏与管理第一节概述一、菌种的定义菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料，也是与微生物有关的生产部门的重要生产资料。

本文所指的菌种，包括可以培养的有一定科学意义或实用价值的细菌、真菌、病毒、细胞等代表株。

二、菌种保藏的意义微生物具有生命活力，其世代时间（generation time）一般很短，在传代过程中易发生变异甚至死亡。

因此，菌种保藏是一项重要的基础工作，是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。

它既是保护微生物资源的一种手段，又为持久而有效的利用微生物资源提供了保证，受到世界各国的极大重视。

很多国家相继建立了专门的菌种保藏机构，组织科学技术人员从事收集国内外长期利用及新发现的各类菌(毒)种。

实行集中保藏、科学的育种传代以及分类管理，并负责同世界各地相互交流，研究保藏菌(毒)种的科技情报工作，使各类菌种长期满足社会需要，更好的为生产和人类健康服务。

三、菌种保藏的目的和任务菌种保藏是应用及研究微生物工作者的一个必须且重要的一门应用学科技术，不单纯是菌种的分离培养、种株纯化、分类鉴别及储藏保管，还涉及多种学科，如微生物生理学、生物化学、生态学、遗传学、形态学、分子生物学以及微生物种群的分类等。

只有掌握了相关学科的科学技术，才有可能全面做好菌种保藏工作。

菌种保藏的中心任务是将现有菌种或广泛收集的各种有用的微生物菌种，选择最适宜的保藏方法，避免在保藏期间和传代过程中死亡、变异及衰退，以保持菌种原有的各种生物学特性，从而达到保证研究、检验、交换和使用的目的。

如何保持菌种性状的稳定是菌种保藏研究的重要课题。

事实上没有哪一种保藏方法能使菌种的原有性状保持绝对不变，所以菌种保藏研究就是要研究各类菌种最合适的保藏方法，使菌种变异和死亡达到最低限度。

因此，菌种保藏研究不但需要研究原种的营养代谢、生理功能和遗传变异，还需研究菌种衰退后仍可恢复其原来的生物学性状和生理功能的科学方法。

菌种保藏也是食品、药品微生物检验工作中的一项常用技术。

微生物菌种常规保藏技术规程

微生物菌种常规保藏技术规程一、前言微生物菌种的保藏是微生物研究中非常重要的一环，它对于保障菌种的长期保存和研究使用具有重要的意义。

本技术规程旨在规范微生物菌种的常规保藏技术，确保其安全、稳定和可持续使用。

二、常规保藏技术1. 冻干法（Lyophilization）：将培养的微生物菌株悬液在前冷冻过程中给予低温、高真空条件，使其中的水分直接从冰态升华为气态，从而避免了常规冻存法中由于结冰时水晶体的生成对菌体的危害，从而达到保存微生物菌株的目的。

操作步骤：a. 微生物培养物经适当稀释后应当倒入试管中，滴入约1ml 20%乳糖溶液在表面形成一层薄膜，待乳糖凝固后，在加入4ml 0.5-0.7%匀浆的2%干燥乳铁粉液，将试管摇匀，再灌入16ml混合液保持无气泡，放置于冰浴上。

b. 待培养物温度达到0摄氏度，再清洗喷雾器，灌入76％露醇20ml，培养物放入冷板上，适当时间后将试管封口放入冷板上经杀菌后真空泵连接，把真空泵打开，通过真空泵提供的条件慢慢降低压强，一般12小时后真空泵关闭。

c. 提供适当温度下作干燥处理，通常使用倍耐安减压干燥器空干40-80小时，干燥后的干燥灸试管，将试管放入吸气瓶中后置入-40—-50摄氏度低温冷冻管内低温保存(一般保存温度为—40摄氏度或更低)，备用空干矿温度—20摄氏度或更低。

2. 酶解冻存法（Enzymatic freezing）：在培养基中添加蔗糖，结合酶解冻存方法，经冻干后的菌种耐冻性和储存时间明显提高。

操作步骤：a. 将微生物分别接种于琼脂平板上，预培养24小时，取2-3份储备品。

菌液于冻干菊花瓶中进行前冷冻，真空抽气消耗20分钟。

b. 平均地用EP管管接受，采用3次“起冻—冷冻”的方法完全冻干，最后0.1至0.3ml真菌液在5摄氏下冷冻6小时，然后在5摄氏下还原18小时。

c. 移除冻存，延长试验保存时间。

必须在-80摄氏下保存。

3. 液氮冻存法（Liquid nitrogen freezing）：液氮冷冻法是现在应用最广泛的冷冻保存方法，在液氮的作用下，微生物菌种在-196摄氏度下冷冻，保持良好的生物活性。

菌种保藏管理

菌种保藏管理菌种保藏管理是指对微生物菌种进行保存、管理、鉴定和利用的一系列工作。

菌种保藏管理的目的是保护微生物资源，促进微生物资源的研究和利用，防止微生物污染和传播，维护科学研究的诚信和公正。

一、菌种保存菌种保存是指将微生物菌株保存在适宜的条件下，以保证其生命活力和遗传稳定性。

常见的菌种保存方式有以下几种：1. 冷冻保存：将菌株在-70℃以下的低温条件下保存，可保存数年至数十年。

2. 干燥保存：将菌株在低湿度条件下干燥保存，可保存数年至数十年。

3. 液氮保存：将菌株在液氮中保存，可保存数十年至数百年。

4. 长期培养：将菌株在适宜的培养基上连续传代培养，可保存数年至数十年。

二、菌种管理菌种管理是指对保存的菌株进行鉴定、分类、记录和更新等工作。

常见的菌种管理工作有以下几个方面：1. 鉴定和分类：对保存的菌株进行鉴定和分类，确定其种属和亚种。

2. 记录和更新：对保存的菌株进行详细的记录和更新，包括菌株来源、保存时间、保存方式、鉴定结果等信息。

3. 质量控制：对保存的菌株进行质量控制，包括检测菌株的纯度、活力和遗传稳定性等指标。

4. 分发和交换：将保存的菌株分发给需要的研究人员或机构，或与其他机构进行菌株交换。

三、菌种利用菌种利用是指利用保存的菌株进行科学研究和应用开发。

常见的菌种利用方式有以下几种：1. 研究应用：利用保存的菌株进行科学研究和应用开发，如发酵生产、药物研发、环境修复等。

2. 教学实验：利用保存的菌株进行教学实验，培养学生的实验技能和科学素养。

3. 保护利用：利用保存的菌株进行保护利用，促进微生物资源的可持续利用和保护。

总之，菌种保藏管理是保护微生物资源、促进科学研究和应用开发的重要工作，需要科学规范的管理和操作。

生物安全实验室病原微生物菌(毒)种和生物样本的保存(保藏)

生物安全实验室病原微生物菌（毒）种和生物样本的保存（保藏）实验室进行实验活动时，经常需要保存病原微生物菌（毒）种及样本。

无论是短期还是长期保存，都应遵循安全、存活、生物学特性不变以及避免差错等原则。

一、保藏管理《条例》规定：“国务院卫生主管部门或者兽医主管部门指定的病原微生物菌（毒）种保藏中心或者专业实验室（以下称保藏机构），承担集中储存病原微生物菌（毒）种和样本的任务。

”保藏机构应当依照国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定，储存实验室送交的病原微生物菌（毒）种和样本，并向实验室提供病原微生物菌（毒）种和样本。

《传染病防治法实施办法》规定："一、二类病原微生物菌（毒）种的供应由国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应。

三类菌（毒）种由设有专业实验室的单位或者国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应。

”2009年7月16日，卫生部颁布了《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法》（原卫生部令第68号），《办法》规定保藏机构是指由原卫生部指定的，按照规定接收、检定、集中储存与管理病原微生物菌（毒）种或样本，并能向合法从事病原微生物实验活动的单位提供病原微生物菌（毒）种或样本的非营利性机构。

病原微生物菌（毒）种保藏机构应具有符合要求的生物安全实验室，包括既符合生物安全要求，又能够保证所保藏病原微生物菌（毒）种质量的设施、设备、技术操作人员和规章制度。

《浙江省病原微生物实验室生物安全管理办法（试行）》规定实验室设立单位应建立病原微生物菌（毒）种和样本保藏保管制度，落实安全责任部门和专人进行管理。

有关机构按照规定从事临床诊疗、疾病控制、检验检疫、教学和科研等工作，在确保安全的基础上，可以保管其工作中经常使用的病原微生物菌（毒）种或样本，其保管的病原微生物菌（毒）种或样本名单应当报当地卫生主管部门备案。

重点落实对高致病性病原微生物菌（毒）种和样本的安全保卫措施，加强安全管理与控制，设立专库专柜，单独储存，做好病原微生物菌（毒）种和样本进出和储存的记录，建立档案制度。

菌种保藏的方法

菌种保藏的方法菌种保藏是一种重要的微生物资源保护方式，对于研究、应用和开发微生物具有重要意义。

以下是几种常见的菌种保藏方法及其操作步骤。

一、低温冷冻保藏法低温冷冻是一种常用的微生物保藏方法，适用于大多数真菌、细菌和酵母菌。

其主要原理是将菌株保存在低温下，使其生理活动缓慢，以延长菌种的保藏时间。

操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。

2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。

3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，常用的保存液有甘油、甘露醇等。

4. 菌种保存：将菌株用保鲜膜包裹，放入保存管中，加入保存液，密封保存管。

5. 冷冻保存：将保存管放入低温冰箱或液氮罐中进行冷冻保存。

二、干燥保藏法干燥保藏法是一种简便、经济的保藏方法，适用于真菌、细菌、放线菌等微生物。

其基本原理是将菌种与干燥剂混合，使其水分含量降低，从而实现微生物的休眠状态。

操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。

2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。

3. 制备干燥剂：根据不同菌株的需要，选择合适的干燥剂，如硅胶、氧化钙等。

4. 菌种混合：将菌株与干燥剂按照一定比例混合均匀。

5. 干燥保存：将混合物均匀地散布在无菌培养基上，置于通风干燥的环境中进行保存。

三、冷冻冻干保存法冷冻冻干保存法是一种较为复杂的菌株保藏方法，适用于难保存的微生物，如厌氧菌、放线菌等。

其主要原理是将菌株在低温下冻结干燥，从而保护微生物的活力。

操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。

2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。

3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，如甘油、甘露醇等。

4. 冷冻过程：将菌株加入保存液中，放入冷冻机冷冻至低温（通常为-80℃）。

5. 冻干过程：将冷冻的菌株经过真空排气、结冰降温等步骤进行冻干处理。

保藏菌种的方法

保藏菌种的方法
在微生物研究中，保藏菌种是非常重要的一环。

保藏菌种可以保证菌种的纯度和活力，并且方便长期保存和传递。

以下是一些常见的保藏菌种的方法：
1. 冷冻保藏法
将菌株培养在适宜的培养基上，待生长到适当的生长期后，用生理盐水或甘油溶液混合菌体，制成菌悬液，然后用干燥冰或液氮冷冻保存。

2. 真空干燥法
将菌株培养在适宜的培养基上，待生长到适当的生长期后，用无菌水将菌体洗净，然后在真空条件下干燥保存。

3. 常温干燥法
将菌株培养在适宜的培养基上，待生长到适当的生长期后，用无菌纸片或无菌土壤将菌体均匀涂抹在上面，然后在阴凉通风处晾干保存。

4. 液氮保藏法
将菌株培养在适宜的培养基上，待生长到适当的生长期后，用无菌水将菌体洗净，然后用液氮冷冻保存。

在保藏菌种过程中，需要注意以下几点：
1. 保证菌株的纯度和活力，避免杂菌和死菌的混入。

2. 在保存菌种前，要对菌株进行鉴定和存档。

3. 在保存过程中，要保证温度、湿度、氧气和光照等环境条件
的稳定和适宜。

4. 定期检查保存的菌种，确保其纯度和活力。

综上所述，保藏菌种是微生物研究中不可或缺的一环。

通过选择合适的保藏方法和严格的管理，可以确保菌种的纯度和活力，方便长期保存和传递。

菌种的保藏管理制度

菌种的保藏管理制度一、前言随着微生物研究领域的不断发展，菌种的保藏和管理变得日益重要。

菌种在科学研究、工业生产、医药卫生等领域起着重要作用。

菌种的保藏管理制度不仅是对菌种进行有效保护和管理的重要手段，也是对科研机构和生产企业负责任的表现。

本文将从菌种的保藏目的、原则、保藏管理程序、管理机构和管理人员的职责等方面进行详细阐述，以便各单位建立完善的菌种保藏管理制度。

二、菌种的保藏目的1. 保证菌种的纯度、活力和保存性能；2. 保证菌种在长时间内可以被有效使用；3. 促进菌种资源的共享和交流；4. 保证菌种在科研、生产和应用中的安全性和可追溯性。

三、菌种的保藏原则1. 选择适宜的保藏方法，确保菌种的长期保存和传代；2. 严格按照操作规程操作，保证菌种的纯度和活力；3. 建立完善的菌种信息档案，保证菌种的可追溯性；4. 定期检测保藏菌株的纯度和活力，确保菌种的质量；5. 加强对菌种的安全管理，防止菌种的交叉污染和泄露。

四、菌种的保藏管理程序1. 菌种的采集、分离和鉴定（1）菌种的采集应按照规范程序进行，同时将采集信息记录在案，包括采集地点、采集时间、样品编号等；（2）菌种的分离和鉴定应由具有相关资质和经验的专业人员进行，并建立菌种信息档案。

2. 菌种的保存和传代（1）选择适宜的保存方法，如低温、冷冻、干燥等；（2）菌种的传代应按照规范程序进行，记录传代信息并定期对保存菌株进行检测。

3. 菌种的信息管理（1）建立菌种信息档案，包括菌种的采集信息、分离和鉴定信息、保存和传代信息等；（2）对菌种信息进行分类归档，方便查阅和管理。

4. 菌种的质量控制（1）定期对保存菌株进行纯度和活力检测；（2）对检测结果进行记录和分析，并定期进行质量评估。

5. 菌种的安全管理（1）加强菌种管理的安全防护措施，防止菌种的交叉污染和泄露；（2）对涉及菌株管理的人员进行相关培训和教育，提高他们的安全意识。

六、菌种的管理机构和管理人员的职责1. 菌种管理机构（1）设立专门的菌种管理机构，负责菌种的保藏和管理工作；（2）建立菌种管理制度，制定相关管理规定和操作程序。

菌种的管理和保藏

件
生物安全：加强生物安全管理防止菌种泄
漏和污染
应用拓展：扩大菌种保藏的应用领域如食品、医药、环
保等
感谢观看
汇报人：
菌种保藏设施与设备
低Байду номын сангаас冰箱：用于保存菌种温度控制在-20℃以下
超低温冰箱：用于长期保存菌种温度控制在-80℃
以下
干燥器：用于干燥菌种防止菌种受
潮
培养基：用于培养菌种提供营养物
质
灭菌锅：用于灭菌防止
菌种污染
生物安全柜：用于操作菌种防止菌种污染和传播
01
菌种保藏的应用
农业领域
生物能源：用于生产生物燃料如乙醇、生物柴油等
医学领域
疫苗生产：用于生产疫苗提高疫苗的质量和产量抗生素生产：用于生产抗生素提高抗生素的产量和质量生物制药：用于生物制药提高药物的疗效和安全性基因工程：用于基因工程提高基因工程的效率和准确性
环境领域
土壤修复：利用微生物降解污染物改善土壤质量
菌种保藏技术
低温保藏：将菌种置于低温环境中如冰箱、冷库等
真空保藏：将菌种置于真空环境中如真空包装、真空罐等
干燥保藏：将菌种干燥后置于干燥环境中如干燥器、干燥箱等
化学保藏：将菌种置于化学环境中如化学试剂、化学溶液等
液氮保藏：将菌种置于液氮环境中如液氮罐、液氮冷冻机等
辐射保藏：将菌种置于辐射环境中如紫外线、伽马射线等
命名规则：采用拉丁文或英文进行命名
命名示例：Escherichi coli K12
菌种鉴定与保藏
菌种鉴定：通过形态学、生理生化和分子生物学等方法进行鉴定菌种保藏：包括低温保藏、干燥保藏、液氮保藏等方法菌种管理：包括菌种登记、菌种库管理、菌种使用等环节菌种保藏的重要性：确保菌种的纯度和活性防止菌种退化和污染

医学微生物菌种保藏管理方法

医学微生物菌种保藏管理方法一、菌种保藏的基本原则1.保鲜原则：菌种在采集和分离过程中应尽量保持其原汁原味，避免外源菌的混入和污染。

2.单株原则：保藏时应保证每支菌株是单株，以保证其纯度和稳定性。

3.多种原则：对同一种微生物的不同菌株应采取多中多位保藏，以增加菌种的多样性。

4.全程可控原则：采取全程可追溯和可控制的管理方法，确保菌种的安全保藏和利用。

5.国际标准原则：按照相关国际标准和规范进行菌种保藏和管理，以提高交流和合作的效率。

二、菌种保藏的方法1.冷冻保存法：将纯菌株悬浮液或细胞片通过添加保护剂如甘油或DMSO等，将菌株冷冻保存在低温下，通常是-70°C或液氮中。

此方法简单易行，适用于细菌和真菌的保存。

2.干燥保存法：将菌落或菌株通过无菌技术处理后，放在无菌培养基上晾干后保存。

此法适用于真菌和酵母菌等耐干燥的菌种，保存条件较为简单。

3.血清冻干保存法：将微生物菌株通过添加保护剂的方法制备成冻干粉末，然后放置在低温干燥器中冻干保存。

此法适用于需长时间保存且具有较高生物学活性的病毒和细菌。

4.深层培养保存法：将纯菌株制备成深层培养基中的斜面培养或沉淀法保存。

此法适用于常规保存，保存条件较为简单。

5.液体亚培养保存法：将菌种接种到液体培养基中，通过调整培养基成分，采取亚培养保存的方式，保持菌种的生存状态。

此法适用于对菌株的要求较高的特殊菌株。

2.制度规范：建立菌种保藏和管理的工作制度和操作规范，明确工作流程和责任分工，保证工作的科学性和规范性。

3.定期检测：对保存的菌种进行定期检测，保证其纯度、活性和遗传稳定性，及时发现和处理菌种变异和污染等问题。

4.定期更新：对长时间保存的菌种进行定期更新，保持菌种的活力和可持续利用能力，与其他菌种资源中心进行流通和交换。

5.安全保障：建立菌种保藏和管理的安全保障制度，包括物理安全、信息安全和生物安全等方面的管理措施，保证菌种和研究人员的安全。

综上所述，医学微生物菌种保藏管理是一项综合性较强的工作，需要遵循基本原则，采用适合的保存方法，并且进行科学的管理和规范的操作，以确保菌种的质量和可持续利用能力。

菌种保存方法-

菌种保存⽅法-菌种保存⽅法：⼀.菌种保藏⽅法⼤致可分为以下⼏种：1．传代培养保藏法⼜有斜⾯培养、穿刺培养、疱⾁培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌⽤），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体⽯蜡覆盖保藏法是传代培养的变相⽅法，能够适当延长保藏时间，它是在斜⾯培养物和穿刺培养物上⾯覆盖灭菌的液体⽯蜡，⼀⽅⾯可防⽌因培养基⽔分蒸发⽽引起菌种死亡，另⼀⽅⾯可阻⽌氧⽓进⼊，以减弱代谢作⽤。

3．载体保藏法是将微⽣物吸附在适当的载体，如⼟壤、沙⼦、硅胶、滤纸上，⽽后进⾏⼲燥的保藏法，例如沙⼟保藏法和滤纸保藏法应⽤相当⼴泛。

4．寄主保藏法⽤于⽬前尚不能在⼈⼯培养基上⽣长的微⽣物，如病毒、⽴克次⽒体、螺旋体等，它们必须在⽣活的动物、昆⾍、鸡胚内感染并传代，此法相当于⼀般微⽣物的传代培养保藏法。

病毒等微⽣物亦可⽤其他⽅法如液氮保藏法与冷冻⼲燥保藏法进⾏保藏。

5．冷冻保藏法可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、⼲冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

常⽤的有⽢油菌保存：取灭过菌的1.5ml EP管，按照60%—80%⽢油的加⼊量，保存零下80度。

例：取37°培养过夜的菌液2-4ml⽢油6-8ml，充分混匀后分装于1.5ml EP管中，置于-80°冰箱即可。

6．冷冻⼲燥保藏法先使微⽣物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利⽤升华现象除去⽔分（真空⼲燥）。

有些⽅法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻⼲燥保藏法等均需使⽤保护剂来制备细胞悬液，以防⽌因冷冻或⽔分不断升华对细胞的损害。

保护性溶质可通过氢和离⼦键对⽔和细胞所产⽣的亲和⼒来稳定细胞成分的构型。

保护剂有⽜乳、⾎清、糖类、⽢油、⼆甲亚砜等。

⼆.常⽤的器材所要保存的微⽣物；⾁膏蛋⽩胨斜⾯培养基，灭菌脱脂⽜乳，灭菌⽔，化学纯的液体⽯蜡，⽢油，五氧化⼆磷，河沙，瘦黄⼟或红⼟，冰块、⾷盐，⼲冰，95％酒精，10％盐酸，⽆⽔氯化钙；灭菌吸管，灭菌滴管，灭菌培养⽫，管形安瓿管，泪滴形安瓿管（长颈球形底），40⽬与100⽬筛⼦，油纸，滤纸条（0．5×1．2cm），⼲燥器，真空泵，真空压⼒表，喷灯，L形五通管，冰箱，低温冰箱（-30℃），液氮冷冻保藏器。

菌种的保藏和培养(第一讲)

安瓿管置于38-40℃水浴中，急速溶解后，开启安瓿接种
培养注意事项：保护剂最终浓度为10％(甘油)或5％(二甲亚砜)；甘油为高压蒸汽灭菌，二甲亚砜最好为过滤灭菌
安瓿管
6、冷冻干燥保藏法
保藏方法：将混有保护剂的菌液入安瓿管后速冻至-70℃，用冷冻干燥机-40℃下抽真空，使真空度减压到2.67～4.00Pa条件下使冻结的细胞悬液中的水分升华，菌种干燥成粉后密封安瓿管，低温避光保藏
1. 斜面低温保藏法 2. 液体石蜡覆盖保藏法 3. 液氮超低温保藏法 4. 沙土管保藏法 5. 冷冻干燥保藏法 6. 普通冷冻保藏法
1、斜面低温保藏法(传代保藏)
保藏方法：将菌种定期在新鲜琼脂斜面、穿刺、
疱肉（厌氧细菌用）基本培养基上传代，4℃左
右保藏
保藏期限：一般1～3月
注意事项：此法简单经济，可用于实验室中多
再加入等量的含有30％灭菌甘油的LB培养基，
振荡使甘油完全分布均匀后，分装于无菌保存
管内，密封，再按前述方法冰冻保存。这一方
法的优点在、菌种的退化：菌种在培养或保藏过程中，由于自发突变的
存在，出现某些原有优良生产性状的劣化、
国内外菌种保藏机构：
菌种保藏机构的任务：广泛收集科研和生产菌
种、菌株，并加以妥善保管，使之达到不死、不
衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。
菌种保藏机构：
中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM)
美国的典型菌种保藏中心(ATCC)
英国国家典型菌种保藏所（NCTC）
法国里昂巴斯德研究所（IPL）
三、保藏方法
几次，盖上瓶盖拧紧，做好标记。室温下存
放于暗处。（最好一点可以将瓶盖放松，在
适当温度下培养过夜，再拧紧瓶盖并加封

菌种的保藏与管理

液体石蜡保存干燥（沙土）保存冷冻真空干燥保存液氮超低温保存
原理
1.根据微生物的生理、生化特性在人工创造的条件下尽量降低微生物细胞的代谢强度，使细胞处于基本休眠状态，生长繁殖受到抑制但又至于不死亡，以减低菌种的变异率。低温、干燥、缺乏营养等环境条件都有抑制微生物代谢的作用。 2.低温、干燥、真空是用于菌种保藏的重要手段。 3.在选择方法时，首先要考虑方法能否长期有效的保持菌种原有的特性，同时也应兼顾到方法的经济和简便。
菌种的保藏与管理
2012.12.13
菌种保藏的意义
• 菌种保存是为了减慢或停止菌种的生长繁殖﹔不被杂菌污染﹐在较长时期内保持著生活能力。以便为日常工作需求提供可靠的优质菌株。 • 微生物具有生命活力，在传代过程中容易发生变异甚至死亡，因此菌种保存是一项重要的基础工作，是微生物基础学工作的一项重要内容，也是药品微生物工作中的一项常用技术。 • 更有效的利用微生物资源。Fra bibliotek谢谢观赏
菌种保藏机构
常用的菌种保藏方法
方法主要原理低温（4℃）低温、缺氧干燥、无营养干燥、低温、缺氧超低温适用的微生物广泛广泛产孢微生物广泛广泛保藏时间 1--6个月 1年以上 1--10年 5--10年以上数十年特点简便简便简便但有效复杂但有效复杂但有效
斜面琼脂低温保存
液氮超低温保藏发
原理
当温度达到-70℃时，菌体的原生质会形成稳定的“玻璃态”，能长时间保藏菌种，故菌株在液氮（-196℃），干冰或超低温的冰箱中保藏，此时菌株的新陈代谢已经停止，但不会死亡。（国外已经普遍采用）
菌种的管理
• 使用菌种的单位，需有一定从事微生物工作的条件和设备，菌种应有专人负责保管和发放，并建立相关制度。 • 定期转种和（生化、纯度）鉴定，防止菌种衰退、变异、死亡。 • 菌种的采购、接受、鉴定、发放、使用、转种、销毁均应有详细记录。