C18色谱柱保存、清洗、再生
C18色谱柱的冲洗方法
C18色谱柱的冲洗方法1.初次使用前的冲洗：在初次使用C18色谱柱之前，需要对其进行特定的冲洗步骤。
首先，将纯水通过柱底部注入柱中，使得柱内充满水。
然后，将纯水缓慢通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
接下来，使用有机溶剂（如甲醇或乙腈）进行冲洗。
首先，缓慢注入有机溶剂，使其通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
然后，重复此步骤两次以确保彻底冲洗。
2.样品前的冲洗：在每次分析之前，都需要对C18色谱柱进行样品前的冲洗。
首先，使用纯水进行冲洗。
将纯水通过柱底部注入柱中，使其充满整个柱。
然后，将纯水缓慢通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
接下来，使用有机溶剂进行冲洗。
缓慢注入有机溶剂，使其通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
最后，使用移液枪或注射器将样品注入柱中进行分析。
3.淋洗液的冲洗：在一些情况下，可能需要对C18色谱柱进行淋洗液的冲洗。
淋洗液是指用于去除吸附在色谱柱上的杂质或其他有机溶剂的溶液。
常用的淋洗液包括醋酸、甲醇、乙腈等。
将淋洗液通过柱底部注入柱中，使其充满整个柱，然后缓慢通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
根据需要，可以进行多次淋洗液冲洗，以确保柱的性能。
4.结束使用后的冲洗：在每次使用C18色谱柱之后，都需要进行结束使用后的冲洗。
首先，使用纯水进行冲洗。
将纯水通过柱底部注入柱中，使其充满整个柱。
然后，将纯水缓慢通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
接下来，使用有机溶剂进行冲洗。
缓慢注入有机溶剂，使其通过柱底部排出，直到出流液为无色透明。
最后，将柱封口或存放在适当的溶剂中，以保护柱的性能。
总之，C18色谱柱的冲洗方法包括初次使用前的冲洗、样品前的冲洗、淋洗液的冲洗以及结束使用后的冲洗。
通过正确的冲洗方法，可以保证C18色谱柱的性能，提高分析的准确性和可靠性。
液相色谱柱清洗活化再生
1.色谱柱的活化30个柱体积，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）冲洗10个柱体积，然后再用流动相平衡30柱体积。
=9：1冲洗30倍柱体积，再流动相平衡30个柱体积。
100%甲醇或乙腈冲洗30个柱体积，然后转换到流动相平衡。
用于反相色谱时，先用异丙醇或乙醇冲洗色谱柱50-100个柱体积，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）冲洗10个柱体积，然后再用流动相平衡30柱体积。
50倍柱体积50/50乙腈/水活化平衡，然后再用流动相平衡30柱体积。
2.色谱柱的清洗保存和再生清洗：如使用缓冲盐，先用高比例水相冲洗30个柱体积，然后再转换到80%有机相冲洗30个柱体积。
再生：用95%水，甲醇，异丙醇，甲醇，95%水分别冲洗30个柱体积，在第一次用95%水时，进样10次100 μL DMSO。
清洗：100%乙醇0.3ml/min 3h，再用正己烷：异丙醇=9：1冲洗30倍柱体积并保存。
再生：根据不同类型正相柱选择。
[常规正己烷/异丙醇的柱子，乙醇（0.1%三氟乙酸）0.3ml/min 3h，乙醇0.3ml/min 3h，乙醇（0.1%二乙胺）0.3ml/min 3h，乙醇0.3ml/min 3h，正己烷：异丙醇=9：1冲洗30倍柱体积]清洗：用100%水冲洗30个柱体积去除盐，然后用100%甲醇或乙腈冲洗30个柱体积后保存在50%甲醇或乙腈中。
再生：先用高浓度盐的缓冲液清洗（浓度可以是5-10倍，不超过1M），然后再用100%水洗，50%乙腈或甲醇保存。
清洗：反相使用时同反相C18色谱柱，如短期不用，可用95%甲醇或乙腈保存;长期不用时需用异丙醇置换，最后用正己烷保存。
再生: NH2柱用于反相条件时，NH2键会水解，先用含1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗30个柱体积，乙腈-水(50:50)冲洗30个柱体积，95%水/5%乙腈冲洗30个柱体积，异丙醇冲洗30个柱体积，95%乙腈/5%水冲洗30个柱体积并保存。
色谱柱的保存
针对经常会有客户来电咨询色谱柱试用问题，特将C18柱日常所需注意问题总结如下，如有遗漏之处或对某项内容有不同看法欢迎讨论。
1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以20倍柱体积为宜，以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到巅峰状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗3-4小时以上，最后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即第二天需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响，Diamonsi（2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效。
C18色谱柱通用使用方法
C18色谱柱通用使用方法1.柱的准备：a.检查柱的完整性和封闭性。
确保柱的端口和连接器没有损坏，没有杂质进入柱内。
b.检查柱的包装是否完好。
确保柱没有受到损坏或污染。
2.柱的预处理：a.将新的C18色谱柱进行预处理。
通常情况下，柱需要进行反相条件下的"洗涤"，以去除柱内的杂质和残留物。
b.使用适当的洗涤溶液，如乙腈/水或甲醇/水混合溶液，进行柱的洗涤。
通常需要使用高浓度有机溶剂，如100%乙腈或甲醇，进行洗涤。
c. 洗涤柱时，使用较高的流速，通常为1-2 mL/min，以加快杂质的去除。
3.样品的准备：a.样品前处理。
根据需要，对样品进行适当的前处理，如过滤、离心、稀释等。
b.样品溶剂的选择。
根据样品的性质选择合适的溶剂，通常为乙腈/水或甲醇/水混合溶剂。
c.样品的溶解。
将样品溶解于适当的溶剂中，并通过过滤器进行过滤，以去除悬浮物和固体杂质。
4.色谱条件的设置：a.流动相的选择。
根据需要选择合适的流动相组成，通常为乙腈/水或甲醇/水混合溶剂。
b.pH值的调节。
根据需要调节流动相的pH值，以适应目标化合物的分离。
c. 流速的设置。
根据样品的复杂性和分离的要求，设置合适的流速。
通常情况下，流速为0.5-2 mL/min。
d.分析温度的控制。
根据样品的性质和分析要求，设置合适的温度。
通常为室温或稍高温度。
5.色谱分离：a.样品注射。
将样品通过自动进样器或手动注射器注入到色谱柱中。
b.等待分离。
在流动相的作用下，样品组分将按照其亲水性和疏水性被分离。
根据需要，调节流动相的组成和温度，以实现最佳的分离效果。
c.收集分离的组分。
根据需要，收集分离出的目标组分，可以通过分级洗脱或梯度洗脱的方式进行。
6.柱的保养：a.柱的再生。
根据需要，可以使用适当的再生溶液（如有机溶剂）对柱进行再生，以去除残留的样品和杂质。
b.柱的保存。
在不使用柱时，将其存放在干燥、避光和低温的环境中，以保持柱的稳定性和使用寿命。
c18反相色谱柱再生
c18反相色谱柱再生C18反相色谱柱在现代分析化学中具有广泛的应用，在许多分析实验中都起着重要的作用。
然而，在某些情况下，柱的使用寿命会很短，需要及时进行再生。
这篇文章将介绍C18反相色谱柱再生的步骤以及柱再生后的评估和性能测试。
1.柱再生前的准备在进行柱再生之前需要注意以下几点：1.1 色谱柱的选购选择质优的C18反相色谱柱更容易进行有效的再生，同时也有利于柱的使用寿命的延长。
1.2 柱的使用条件为了保证柱的使用寿命，需要注意以下两点：1.2.1 避免使用高盐浓度的缓冲液。
1.2.2 避免使用高脂肪样品。
这些注意事项可以延长柱的使用寿命，有利于进行柱再生的工作。
2.柱再生的方法C18反相色谱柱的再生方法主要有以下几个步骤：2.1 理化清洗理化清洗包括溶剂清洗、反吹吸毛细管和再生试剂处理三个步骤。
其中，溶剂清洗是为了去除来自样本的污染物和应力累积，精确用于色谱分析。
2.2 饱和清洗饱和清洗是为了去除残余污染物和杂质，并且在再生前提供充分的柱平衡。
2.3 再生步骤通过使用专门的再生试剂，可以更彻底地去除残留的污染物和杂质。
在剂量和时间的控制下进行柱再生，可以获得保持原色谱柱性能的“全新”反相柱。
3.评估柱的性能重要的是再生后评估柱的性能。
这些测试通常包括：3.1 有效期有效期是将反相柱用于特定色谱分析试验的期限。
它可以通过反相柱再生前和再生后的色谱图进行比较来确定。
3.2 分离效率和解析度分离效率和解析度是反相柱性能的重要参数。
在再生之前和之后进行分离的对比试验可以确定其对分离效率和分辨率的影响。
4.总结C18反相色谱柱的再生使得柱的寿命可以延长，是一项十分重要的部分。
通过采用有效的柱再生步骤和测试方法，可以有效确保柱再生后的性能和柱再生之前类似，使其更好地应用于分析实验。
C18柱日常所需注意问题
C18柱日常所需注意问题总结如下，如有遗漏之处或对某项内容有不同看法来电讨论。
1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以20倍柱体积为宜，以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到巅峰状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗3-4小时以上，最后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即第二天需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18柱（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响，Diamonsil（2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效；
7、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。
色谱柱再生程序：
按照下列次序冲洗色谱柱，冲洗体积均为20倍柱体积：
10%甲醇水→甲醇→异丙醇（或氯仿）→甲醇→10%甲醇水
（步骤3选用异丙醇时，由于异丙醇粘度较大，需适当降低流速，建议流速设为0.2-0.3ml/min）。
C18色谱柱的冲洗方法
C18色谱柱的冲洗方法
C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱，广泛应用于分离和纯化生物大分子、有机化合物等物质。
为了保证色谱柱的稳定性和使用寿命，有必要进行适当的冲洗。
以下是C18色谱柱的冲洗方法：
1. 使用纯水预洗：首先使用高纯度的水（如去离子水）预洗色谱柱，既可清除杂质，也可减少游离硅胶的溶解。
预洗时间一般为30分钟至1小时。
2. 醇洗法：使用有机溶剂如甲醇、乙醇等进行洗脱，可清除游离硅胶表面的疏水杂质与氧化物。
洗涤方法是按照以下顺序，首先使用甲醇洗脱5-10柱体积，随后使用水甲醇（95:5）混合液洗脱5柱体积。
最后用纯水洗脱2-3柱体积，以消除杂质和有机残留。
3. 酸洗法：使用pH值为2-3的酸溶液进行洗脱，可清除碱金属离子、氧化物等硅胶上的杂质和污染。
一般使用的酸为1%三氟乙酸（TFA）或1%醋酸溶液。
洗脱顺序为先使用甲醇洗脱5柱体积，然后使用酸溶液洗脱5柱体积，最后用酸性水洗脱2-3柱体积。
请根据具体情况选择合适的冲洗方法，尽量避免出现对色谱柱产生伤害的情况。
c18色谱柱冲洗方法
c18色谱柱冲洗方法C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱，用于分离和分析各种有机物。
在使用过程中，由于样品的复杂性和柱子的不同寿命，需要进行定期的冲洗和维护，以保持色谱柱的性能和延长使用寿命。
C18色谱柱的冲洗方法主要包括前冲洗和后冲洗。
1.前冲洗：在使用新的C18色谱柱之前，首先需要进行前冲洗以清除潜在的杂质和柱子中的空隙。
前冲洗一般使用有机溶剂和水的混合物。
以下是一种常用的前冲洗方法：a.使用无机盐和有机溶剂制备一个50%的有机溶剂溶液。
常用的有机溶剂包括乙腈和甲醇等。
b.使用前述有机溶剂溶液和水制备50%的有机溶剂和50%的水的混合物。
c. 运行液相色谱系统，将50%有机溶液和50%的水的混合物以1mL/min的流速通过C18色谱柱进行前冲洗。
冲洗时间通常为15-30分钟。
2.后冲洗：后冲洗是指在使用C18色谱柱一段时间后，柱子表面可能会附着样品残留物，需要进行清洗以恢复柱子表面的性能。
以下是一种常用的后冲洗方法：a.使用90%甲醇和10%水的有机溶剂制备后冲洗溶液。
b. 运行液相色谱系统，将后冲洗溶液以1mL/min的流速通过C18色谱柱进行后冲洗。
后冲洗时间通常为30-60分钟。
3.再生：如果C18色谱柱因样品残留物和其他污染物而导致性能下降，可以考虑进行柱子的再生。
以下是一种常用的再生方法：a.使用90%甲醇和10%水的有机溶剂制备再生溶液。
b. 运行液相色谱系统，将再生溶液以1mL/min的流速通过C18色谱柱进行再生。
再生时间可以根据实际情况进行调整，通常为30-60分钟。
c.再生后，使用前述的前冲洗方法进行前冲洗，以确保柱子完全清洁。
值得注意的是，柱子的冲洗方法应该根据具体实验条件和样品的特性来确定。
在冲洗过程中，也要注意保持流速稳定，避免超过柱子的最大压力，以免对柱子造成损害。
总之，C18色谱柱的冲洗方法是保持色谱柱性能和延长使用寿命的重要步骤。
通过定期的前冲洗、后冲洗和再生，可以有效地清除样品残留物和污染物，使色谱柱保持良好的分离效果和稳定性能。
C18色谱柱
在用的最多的就是反相C18色谱柱,在平时的工作中,个人积累了一些小经验,很管用的，在此与大家分享1、新柱的处理：我们每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，我们每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。
首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC 柱子，则应以0.3ml/min进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC柱子则应以0.3ml/min进行），继续冲洗2~8小时。
2、新柱的使用：首先我们确认所分析样品流动相的PH是不是在色谱柱PH的耐受范围之内，以免损伤柱子!如果，确认在柱子的使用范围之内，就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶液，在平衡柱子之前务必要先用5%甲醇或5%乙腈去过渡30分钟以上。
再用带盐的流动相去平衡色谱柱。
)当色谱柱平衡了足够时间，基线非常平稳的时候，方可进样分析。
不管是分析什么样的产品，由于各种各样的因素，样品中总有杂质。
因此，最好在色谱柱前端加上保护柱。
以增加色谱柱的使用寿命！3、色谱柱清洗：①如果样品分析中只用到一般的乙腈、甲醇和水的流动相，在做完样品之后可直接用55%~65%乙腈/水或者用55%~65%甲醇/水冲洗色谱柱40~80分钟，然后以纯甲醇或乙腈冲洗30分钟，即可保存；②如果样品分中流动相里含用缓冲液或酸或离子对试剂的流动相，在做完样品之后的清洗必须按照如下步骤进行清洗柱子:先用5%的甲醇/水或5%的乙腈/水，以1ml/min,冲洗1.5小时以上(如果色谱柱更长，则还需要增加适当时间);然后用55%甲醇/~水65%/水冲洗色谱柱30~60分钟.最后用甲醇或乙腈以1ml/min冲洗30分钟。
C18柱使用指南(1)
C18柱使用指南
1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以20倍柱体积
为宜，以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到巅峰状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中
的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗3-4小时以上，最后保存在纯有机试剂或高
比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即第二天需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18柱（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用
高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响，Diamonsil（2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部
分柱效；
7、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲
洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。
色谱柱再生程序：
按照下列次序冲洗色谱柱，冲洗体积均为20倍柱体积：
10%甲醇水→甲醇→异丙醇（或氯仿）→甲醇→10%甲醇水
（步骤3选用异丙醇时，由于异丙醇粘度较大，需适当降低流速，建议流速设为0.2-0.3ml/min）
体积计算表：
迪马应用实验室。
色谱柱假如受到污染该怎么办 色谱柱维护和修理保养
色谱柱假如受到污染该怎么办色谱柱维护和修理保养色谱柱在日常使用过程中，尽管保护严格，样品和流动相尽管经过前处理，但经过长时间的使用，仍旧难以完全避开柱子受到污染，固定相流失、板结、柱床塌陷以及柱效下降等。
有些可以通过维护和修理，使部分柱效恢复。
1.柱污染再生技术色谱柱污染后，可以用合适的溶剂冲洗，使柱效再生。
C18柱常规的再生洗涤方法是：分别用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL 依次通过色谱柱，再用100%甲醇60 mL平衡色谱柱后封存，柱效将恢复正常。
必要时，依据柱污染性质（如有机污染、盐类污染等），接受0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA钠盐冲洗，然后再用水冲洗，后用100%甲醇平衡色谱柱后封存。
对于严重污染的C18柱，可接受水、甲醇、氯仿、乙烷依次冲洗后，按次序倒过来再冲洗1次，每次所用溶剂60 mL，不接检测器，后用100%甲醇平衡色谱柱封存。
2.柱污染的修复在柱污染再生无效或已知柱污染严重时，可以接受柱修补的方法解决，但柱污染深度不宜超过 5 mm。
方法是将特制小铲将污染部分挖去，再用与柱填料相同的固定相与流动相混合制成浆状，然后将浆状固定相认真补入被挖去的部分（尽量使后填补的固定相接近原装的紧密程度），修平端面即可。
修好的柱子假如柱头两端的筛板的孔径是一致的，可将柱子颠倒过来使用一般时间，目的是借助流动相冲洗作用，恢复柱床紧密程度。
3.柱塌陷的修复柱塌陷的原因很多。
对于塌陷不太严重时，假如柱头两端的筛板孔径是一致的，可将柱颠倒使用一般时间，即可恢复性能。
当塌陷严重（5 mm左右）时，可接受柱污染的修复方法修补即可。
缓冲盐不当使用对色谱柱有哪些影响？在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调整流动相的pH值，缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压上升、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响：1、柱压上升；原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻拦流动相质，引起柱压上升。
c18色谱柱再生方法
c18色谱柱再生方法嘿，咱今儿就来讲讲这 C18 色谱柱的再生方法。
这 C18 色谱柱啊，就好比咱家里的宝贝物件，用久了也会变脏变旧，得给它好好拾掇拾掇，让它重新焕发活力呀！你想想看，要是色谱柱不好好保养，那得出的数据能靠谱吗？那不是瞎耽误事儿嘛！所以啊，学会再生方法那可太重要啦！首先呢，咱得把柱子里的脏东西给冲出来。
就像咱打扫房间，得把灰尘垃圾都清理掉一样。
这时候就要用到合适的溶剂啦，可别随便乱用哦，不然柱子可就遭罪啦！然后呢，得给它来个深度清洁。
可以用一些专门的清洗液，就像给柱子洗个舒服的泡泡浴。
让那些残留的杂质啊、污染物啊都乖乖地被洗掉。
在这个过程中，可千万得有耐心啊！别着急忙慌地乱来，得一步一步慢慢来。
这就好比给花浇水，你不能一股脑儿地倒下去，得均匀地洒，让花儿好好吸收。
还有哦，清洗的时间和温度也得掌握好。
就像做饭一样，火候不到不行，火候过了也不行。
得恰到好处，才能让柱子恢复到最佳状态。
有时候啊，可能一次清洗还不够呢，得多来几次，就像给衣服搓了一遍没干净，还得再搓搓。
你说这柱子是不是也挺娇气的呀？嘿嘿，其实只要咱用心对待它，它也会好好回报咱，给咱提供准确可靠的数据呀！咱再想想，要是不懂得再生方法，柱子用着用着就不行了，那多浪费呀！咱花了那么多钱买的柱子，不得让它发挥最大的作用嘛！所以啊，大家一定要记住这些再生方法，别不当回事儿。
等你真的用到的时候，就知道有多重要啦！就像你有一把好刀，得经常磨一磨，才能一直锋利呀！总之呢，C18 色谱柱的再生可马虎不得，咱得认真对待，让它一直保持良好的状态，为我们的实验和工作助力！大家可都记住了吗？。
C18色谱柱维护常识要点
C18色谱柱维护常识要点1.色谱柱的存储：在不使用色谱柱时，应将其存储在恒温箱或冰箱中，避免暴露在阳光下或高温环境中。
同时，要注意避免色谱柱的震动和振荡，以防止填料团聚或变形。
2.色谱柱的洗脱条件：为了避免填料的污染和附着物的积累，使用完毕后应进行适当的洗脱。
常用的洗脱方法包括使用pH2-3的酸性溶液，有机溶剂和水的混合溶液，或者乙腈/甲醇和水的混合溶液。
洗脱条件可根据具体实验需求进行调整。
3.色谱柱的保养：在每次使用之前，可以采用反向流动的方式，用纯溶剂（如甲醇或乙腈）冲洗色谱柱，以去除悬浮物和固体颗粒。
此外，还可以使用纯溶剂进行适当的冲洗，以除去柱底的附着物。
4. 色谱柱的压力限制：为了避免色谱柱的损坏和破裂，应注意限制色谱柱的最大操作压力。
一般来说，C18色谱柱的最大操作压力为400-600 bar，具体压力限制应视柱子型号而定。
5.色谱柱的管线连接：在连接色谱柱和管线时，应注意连接的紧密性。
确保连接口无泄漏，避免溶剂泄漏造成的柱底液滴，以免影响分离效果。
6.色谱柱的pH范围：C18色谱柱主要用于中性和弱酸性化合物的分离，不适用于酸性和碱性化合物。
一般来说，C18色谱柱的pH工作范围为2-8，超过此范围会影响柱子的稳定性和寿命。
7.色谱柱的再生和保养周期：根据柱子使用情况和样品类型的不同，可以适当延长色谱柱的使用寿命。
通常情况下，C18色谱柱的寿命在100-200次左右。
超过这个次数后，可以考虑对柱子进行再生，使用适当的再生溶剂（如甲醇/乙腈和酸性溶液）进行再生处理。
8.色谱柱的操作温度：C18色谱柱的操作温度范围通常在室温到50℃之间。
在操作过程中，应注意温度的控制，避免温度过高或过低对柱子的影响。
9.色谱柱的保健：在柱子存放和使用期间，应注意避免强烈的酸碱溶液的接触。
柱底的固相填料可以通过适当的保护剂（如硅胶）进行保护，以延长柱子的使用寿命。
总之，C18色谱柱的维护对于保证色谱技术的准确性和可靠性非常重要。
acepfp c18色谱柱说明书
acepfp c18色谱柱说明书AcepFP C18 色谱柱说明书引言：本说明书介绍了AcepFP C18色谱柱的性能特点、适用范围、使用方法以及相关的注意事项。
AcepFP C18色谱柱是一种高性能色谱柱，广泛应用于分离和纯化各种化合物。
本文将详细介绍该色谱柱的技术参数、使用说明，并给出一些实际应用案例。
一、产品特点AcepFP C18色谱柱具有以下特点：1. 高度稳定性：该色谱柱采用优质的C18填料，具有出色的化学稳定性和物理耐受性，保证色谱柱的稳定性和长期使用寿命。
2. 高分离效果：AcepFP C18色谱柱具有极佳的分离效果，可有效地分离各种复杂的化合物混合物，提高实验的分析准确性和可靠性。
3. 宽pH范围：该色谱柱适用于广泛的pH范围，可在酸性、碱性和中性条件下稳定分离化合物。
4. 良好的再生性：AcepFP C18色谱柱具有良好的再生性能，可多次使用而不损失分离效果和分辨率。
二、技术参数以下是AcepFP C18色谱柱的主要技术参数：- 型号: AcepFP C18- 柱径: 根据实际需求选择- 长度: 根据实际需求选择- 填料颗粒大小: 5μm- pH范围: 2-10- 最大使用压力: 400 bar- 表面积: 300 m²/g- 碳负荷: 18%三、使用方法1. 色谱柱的准备：a. 检查色谱柱的外观，确保无损坏。
b. 连接色谱柱到色谱系统中，注意正确安装柱芯和连接管路。
2. 前处理样品：a. 样品前处理应根据实验需求进行。
b. 注意采用合适的溶剂及溶解度，以保证样品溶解彻底。
3. 样品注入：a. 使用注射器将前处理好的样品插入到色谱柱的进样口处。
b. 控制注射量和流速，避免色谱柱承受超过最大使用压力。
4. 色谱条件参数设定：a. 根据分析需求设定流速、温度和梯度等参数。
b. 合理设定检测器的波长和灵敏度，保证信号的准确性和清晰度。
5. 结果分析：a. 分析实验结果，注意样品峰的对称性、分离度和峰形。
色谱柱的清洗和再生方法
色谱柱的清洗和再生方法
除非特殊说明，在所有情况下，所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40-60倍。
应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等，比较色谱柱性能的改善，以确定清洗的效果。
确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液，清洗前所用的溶剂应与清洗时所用的溶剂相溶。
硬确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶。
1、正相填料
用四氢呋喃冲洗。
用甲醇冲洗。
用四氢呋喃冲洗。
用二氯甲烷冲洗。
用无苯正己烷冲洗。
2、反相填料
用HPLC级水冲洗，冲洗时进4等份的200μl的二甲亚砜（DMSO）。
用甲醇冲洗。
用氯仿冲洗。
用甲醇冲洗。
3、阴离子交换填料
用HPLC级水冲洗
用甲醇冲洗
用氯仿冲洗
4、阳离子交换填料
用HPLC级水冲洗，在冲洗的过程中进4等份200μl的DMSO。
用四氢呋喃冲洗
5、蛋白质凝胶过滤填料
去除蛋白质尺寸排阻介质中的污染物有两种清洗/再生的方法。
弱保留蛋白质：用30mol/L pH3.0磷酸盐缓冲液冲洗。
强保留蛋白质：用100%的水到100%的乙腈梯度洗脱60min。
6、冲洗的溶剂体积：
7、极性固定相（如Si、NH2、DIOL基色谱填料）的再生：
正庚烷——氯仿——乙酸乙酯——丙酮——乙醇——水
8、非极性固定相（如反相色谱填料RP-C18、RP-C8、CN等）的再生：
水——乙腈——氯仿（或异丙醇）——乙腈——水。
液相色谱柱维护保养及仪器冲洗
液相色谱柱维护保养及仪器冲洗注意：每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书色谱柱维护保养是很重要的，关系到色谱柱的使用寿命和检测结果的准确性，所以任何人用过色谱柱之后，一定要对色谱柱进行保养，管理人员和使用者互相监督。
总的原则是色谱柱要轻拿轻放，避免损坏填料；另外没有使用的情况下，一定要保证两端的堵头封好。
对于具体的色谱柱，下面列出常用色谱柱维护保养的具体方法和注意事项，以便使用者参考。
对于未启用的新的色谱柱，先用甲醇或乙腈以小流速（0.2ml/min缓慢升高到0.5ml/min ）不接检测器冲洗色谱柱30分钟后，将色谱柱与检测器连上，流速调为1.0 ml/min冲洗色谱柱60分钟，然后不断降低有机相的比例（如80%、50%、 10%甲醇或乙腈）各冲洗至少 30分钟。
若色谱柱暂时不用，则将色谱柱保存在高比例有机相中（如80%甲醇或乙腈，或者参考该色谱柱使用说明书中建议的溶剂中）；色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例的有机溶剂（将缓冲盐溶液换成水）冲洗色谱柱15分钟，然后再换成流动相进行样品分析。
样品分析完后，色谱柱维护与保养方法：流动相中若含酸、碱、盐类物质，则要先用10%甲醇或乙腈冲洗，1.0ml/min 的流速冲洗至少30min,再用80%甲醇或乙腈冲洗至少30min,柱子保存在80% 甲醇或乙腈里（具体问题具体分析，洗脱程序可以是梯度洗脱程序，注意如果最后色谱柱保存的是高有机相，第二天用之前一定要用高水相过渡一下，再换成流动相）。
如柱子长时间未用，则柱子保存在 100%的甲醇或乙腈里。
对于含有离子对试剂的流动相如庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠等，柱子应采用梯度洗脱，一般用乙腈-水系统（水：90-10；乙腈：10-90）冲洗时间要稍长些，然后保存于90%乙腈。
需要特别强调的是，目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间（1小时以上）冲洗，除非有专门耐水的专用柱，否则，用纯水长时间冲洗色谱柱，会导致色谱柱的固定相流失和相塌陷，损坏色谱柱。
c18色谱柱 保存 步骤
C18色谱柱的保存步骤如下：
保存前的处理
1. 清洗：使用适当的流动相（例如甲醇-水混合物）以低流速冲洗色谱柱，以去除残留在柱内的样品和杂质。
2. 脱气：如果可能，使用氮气或其他惰性气体吹扫色谱柱内部，以去除残留的溶剂蒸汽。
3. 保护液填充：用适合的保护液充满色谱柱。
对于反相C18色谱柱，通常推荐使用甲醇：水=50:50（v/v）的溶液作为保护液。
存放条件
1. 温度：将色谱柱存放在室温（大约15-25℃）下，避免极端的温度变化。
2. 湿度：防止色谱柱受潮，如果可能的话，可以将其储存在干燥箱中。
3. 避光：色谱柱应存放在避光的地方，因为紫外线可能会导致固定相的降解。
长期不使用时的注意事项
1. 定期检查：即使色谱柱未在使用，也应定期检查其是否保持良好状态，并根据需要重新平衡或更换保护液。
2. 重新启用：在重新使用长期存放的色谱柱之前，最好先进行一次温和的清洗和再生过程。
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C18色谱柱保存、清洗、再生方法
一、色谱柱的保存方法
1. 纯乙腈或甲醇保存色谱柱（当使用流动相中含有盐时，注意首先用20倍柱体积的
5 %-10%的乙腈-水或5 %-10%甲醇-水流动相过渡）。
二、色谱柱的清洗方法
1. 以乙腈:水（1 : 9,v/v）→乙腈→乙腈:水（1 : 9,v/v）依次冲洗，然后进行使用。
2.多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上，引起柱压升高伴随峰形展宽的现
象。
此时，可将色谱柱与检测器断开，将色谱柱反接后进行冲洗。
三、色谱柱的再生方法：
1. 一般污染再生：乙腈:水（1 : 9,v/v）→ 乙腈→ 氯仿（或异丙醇）→ 乙腈→乙腈:水（1 : 9,v/v）→流动相，分别冲洗10～20倍柱体积。
2. 蛋白污染再生：0. 1%的三氟乙酸水溶液:异丙醇（4 : 1,v/v）→乙腈：异丙醇（1 : 2,v/v,
内含0. 1% 三氟乙酸）→水：异丙醇( 1 : 4, V/V) ，分别冲洗10～20倍柱体积。
（注意每项过渡时，压力的控制，压力最好控制在1500 psi以下，根据柱子的具体情况请自己优化流速）。