乙肝表面抗原确证实验作业指导书
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
· Elecsys 清洗添加剂（SysWash）货号11930346
· Elecsys 系统清洗剂（SysClean）货号11298500
4.仪器和校准
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：定标次数和校正方法与Elecsys HBsAg试剂相同
定标：定标次数和校正方法与Elecsys HBsAg试剂相同。
6.质wenku.baidu.com控制
必须与标本同时平行测定Elecsys PreciControl HBs Ag 2。根据用户需要进行校正。对于Elecsys HBs Ag试验，质控按相应的说明书进行。
7.计算方法
对每一个标本，仪器会自动根据HBsAg定标液cal1和cal2的测定结果计算出cutoff值。报告结果，分有反应性或无反应性以及cutoff指数（COI）=标本信号值/cutoff等几种形式。证实试验中所加的标本体积需参考COI。
5.操作方法
标本的预处理：
标本加样体积的选择取决于相应标本在ElecsysHBsAg试验中所得的COI值的高低。以下是各种不同体积的标本分别加入Elecsys 标本杯中：
· 对于COI<7.0的有反应性标本
180μL标本+20μl证实试剂
180μL标本+20μl对照试剂 或
· 对于7.0≤COI≤30的有反应性标本
180μl PreciControl HBs Ag 2+20μl证实试剂
180μl PreciControl HBs Ag2+20μl对照试剂
充分混匀，将以上几种反应物15－25度温育30-60分钟或 2－8度温育过夜。
ElecsysHBsAg测定：将预处理标本置于仪器的标本区，记录标识数据。按ElecsysHBsAg试剂操作说明书进行检测。
8.参考范围
9.分析性能
10.干扰因素
由于钩状效应，HBsAg浓度高于1mg/ml或550000IU/ml时，Elecsys HBsAg试验的cutoff 指数将<30。这是因为在给定的加样体积下，证实试剂未能充分中和掉标本中的抗原，因而造成假阴性。由于稀释的缘故，这些标本
与对照试剂反应的COI值高于原来ElecsysHBsAg试验测出的COI值。从这一点可以鉴别有钩状效应的标本。这些标本必须在更高的稀释度（1：100）下重新检测。干扰因素与Elecsys HBsAg试验说明书中“干扰因素”一节相同。Elecsys HBsAg检测结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
11.结果解释
试验有效性的核对评估开始以前，必需核对试验的有效性。除了满足HBsAg试验所要求的条件外，还必须满足以下几条标准：
· PreciControl HBs Ag 2与证实试剂反应的COI同PreciControl HBsAg2与对照试剂反应的COI之比必须小50%（<50%）。如>50%，必须检查试验的条件，有必要的话，用新鲜的试剂重新测定标本。
HBsAg试验：
· 第1步：二种经预处理的标本、生物素化的抗HBsAg单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗HBsAg单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
· 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
· 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去。电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
试剂：
瓶1：证实试剂（黑盖），2瓶，1.3ml。抗HBsAg>200IU/l，人血清。含
防腐剂。
瓶2：对照试剂（白盖），2瓶，1.3ml。人血清,抗HBsAg<3IU/l。含防
腐剂。
校准品：
质控品：
Elecsys HBsAg质控品1和2 （PreciControl）货号11876309
其他所需材料：
12.临床意义
13．参考文献
编写： 审核： 批准：
批准日期： 年 月 日
1.分析原理
标本先用证实试剂和对照试剂预处理，随后再用HBsAg试验检测。HBsAg阳性质控品2同时平行测定以核对操作。
标本的预处理：
· ElecsysHBsAg试验重复呈现有反应性的标本，用证实试剂和对照试剂平行处理，混匀，温育。证实试剂中过量的抗HBsAg抗体中和标本中的HBsAg。在随后进行的ElecsysHBsAg试验中，标本的Cutoff-指数（COI）将比原值降低。
· 评价标本测定有效性的指标是：标本与对照试剂反应的COI必须>=1.0；COI<1.0提示稀释度太高，需用不稀释或降低稀释度稀释的标本重做。标本检测结果的解释和评估。为了证实标本的阳性结果，标本与证实试剂反应的COI同标本与对照试剂反应的COI之比必须小50%（<50%），其中标本与对照试剂反应的COI必须>=1.0。
Elecsys自动将标本产生的光电信号与从抗HBsAg定标液得出的Cutoff值相比较。随后进行人工核查试验的有效性和结果的解释。
2.标本要求
Elecsys HBsAg试验重复呈现有反应性的人血清或血浆标本。标本采集和准备与Elecsys HBsAg试验相同。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
100μl标本+100μl证实试剂
100μl标本+100μl对照试剂 或·
对于COI>30的有反应性标本，标本先用Elecsys通用稀释液作1：20稀释。
100μl稀释的标本+100μl证实试剂
100μl稀释的标本+100μl对照试剂
平行测定PreciControl HBs Ag 2,以便对操作进行核对：
· 11820532，100人份的Elecsys HBsAg试剂盒
· Elecsys通用稀释液 货号03183971
· Elecsys1010或2010分析仪
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
· Elecsys 系统清洗剂（SysClean）货号11298500
4.仪器和校准
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：定标次数和校正方法与Elecsys HBsAg试剂相同
定标：定标次数和校正方法与Elecsys HBsAg试剂相同。
6.质wenku.baidu.com控制
必须与标本同时平行测定Elecsys PreciControl HBs Ag 2。根据用户需要进行校正。对于Elecsys HBs Ag试验，质控按相应的说明书进行。
7.计算方法
对每一个标本，仪器会自动根据HBsAg定标液cal1和cal2的测定结果计算出cutoff值。报告结果，分有反应性或无反应性以及cutoff指数（COI）=标本信号值/cutoff等几种形式。证实试验中所加的标本体积需参考COI。
5.操作方法
标本的预处理：
标本加样体积的选择取决于相应标本在ElecsysHBsAg试验中所得的COI值的高低。以下是各种不同体积的标本分别加入Elecsys 标本杯中：
· 对于COI<7.0的有反应性标本
180μL标本+20μl证实试剂
180μL标本+20μl对照试剂 或
· 对于7.0≤COI≤30的有反应性标本
180μl PreciControl HBs Ag 2+20μl证实试剂
180μl PreciControl HBs Ag2+20μl对照试剂
充分混匀，将以上几种反应物15－25度温育30-60分钟或 2－8度温育过夜。
ElecsysHBsAg测定：将预处理标本置于仪器的标本区，记录标识数据。按ElecsysHBsAg试剂操作说明书进行检测。
8.参考范围
9.分析性能
10.干扰因素
由于钩状效应，HBsAg浓度高于1mg/ml或550000IU/ml时，Elecsys HBsAg试验的cutoff 指数将<30。这是因为在给定的加样体积下，证实试剂未能充分中和掉标本中的抗原，因而造成假阴性。由于稀释的缘故，这些标本
与对照试剂反应的COI值高于原来ElecsysHBsAg试验测出的COI值。从这一点可以鉴别有钩状效应的标本。这些标本必须在更高的稀释度（1：100）下重新检测。干扰因素与Elecsys HBsAg试验说明书中“干扰因素”一节相同。Elecsys HBsAg检测结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
11.结果解释
试验有效性的核对评估开始以前，必需核对试验的有效性。除了满足HBsAg试验所要求的条件外，还必须满足以下几条标准：
· PreciControl HBs Ag 2与证实试剂反应的COI同PreciControl HBsAg2与对照试剂反应的COI之比必须小50%（<50%）。如>50%，必须检查试验的条件，有必要的话，用新鲜的试剂重新测定标本。
HBsAg试验：
· 第1步：二种经预处理的标本、生物素化的抗HBsAg单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗HBsAg单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
· 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
· 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去。电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
试剂：
瓶1：证实试剂（黑盖），2瓶，1.3ml。抗HBsAg>200IU/l，人血清。含
防腐剂。
瓶2：对照试剂（白盖），2瓶，1.3ml。人血清,抗HBsAg<3IU/l。含防
腐剂。
校准品：
质控品：
Elecsys HBsAg质控品1和2 （PreciControl）货号11876309
其他所需材料：
12.临床意义
13．参考文献
编写： 审核： 批准：
批准日期： 年 月 日
1.分析原理
标本先用证实试剂和对照试剂预处理，随后再用HBsAg试验检测。HBsAg阳性质控品2同时平行测定以核对操作。
标本的预处理：
· ElecsysHBsAg试验重复呈现有反应性的标本，用证实试剂和对照试剂平行处理，混匀，温育。证实试剂中过量的抗HBsAg抗体中和标本中的HBsAg。在随后进行的ElecsysHBsAg试验中，标本的Cutoff-指数（COI）将比原值降低。
· 评价标本测定有效性的指标是：标本与对照试剂反应的COI必须>=1.0；COI<1.0提示稀释度太高，需用不稀释或降低稀释度稀释的标本重做。标本检测结果的解释和评估。为了证实标本的阳性结果，标本与证实试剂反应的COI同标本与对照试剂反应的COI之比必须小50%（<50%），其中标本与对照试剂反应的COI必须>=1.0。
Elecsys自动将标本产生的光电信号与从抗HBsAg定标液得出的Cutoff值相比较。随后进行人工核查试验的有效性和结果的解释。
2.标本要求
Elecsys HBsAg试验重复呈现有反应性的人血清或血浆标本。标本采集和准备与Elecsys HBsAg试验相同。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
100μl标本+100μl证实试剂
100μl标本+100μl对照试剂 或·
对于COI>30的有反应性标本，标本先用Elecsys通用稀释液作1：20稀释。
100μl稀释的标本+100μl证实试剂
100μl稀释的标本+100μl对照试剂
平行测定PreciControl HBs Ag 2,以便对操作进行核对：
· 11820532，100人份的Elecsys HBsAg试剂盒
· Elecsys通用稀释液 货号03183971
· Elecsys1010或2010分析仪
· Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988
· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970