工业药物分析03第4,5节 药物定量分析与分析方法验证PPT幻灯片
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一、方法选择
原料药 -侧重方法准确性
中药材及其成方制剂 -侧重方法专属性和灵敏度
化学药物制剂
二、常用方法及含量计算
一、容量分析法 用原料药精制品(含量>99.5％)或
对照品考察方法的精密度，相对标准 差一般应不大于0.2％；进行回收率试 验。回收率一般在99.7～100.3％之间。
(一)容量分析法的特点
六、 线性 在设计的范围内，测试结果与试样
中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 数据要求：应列出回归方程、相关
系数和线性图。
七、范围 指达到一定精密度、准确度和线性
的条件下，测试方法适用的高低限浓度 或量的区间。
八、 耐用性 指测定条件稍有变动时，结果不受
影响的承受程度，为常规检验提供依据。 是衡量实验室和工作人员之间在正常情 况下实验结果重现性的尺度。
(二)容量分析法的计算问题
1． 滴定度
2． 滴定度（T）的计算
3． 百分含量计算
（1） 直接滴定法
含量%=
V× TW´
×100% =
V×T ×WF
×100%
（2）回滴定法（剩余滴定法 ）
三、色谱分析法 (一) HPLC法：要求RSD<2％，回收 率98％～102％之间。
线性范围：用精制品配制一系列 标准溶液，浓度点n应为5～7，用浓 度c对峰高h或被测物的响应值之比进 行回归处理，建立回归方程，r应大 于0.999，截距应趋于零。
1．非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能
被可靠地检测出的最低浓度或量。
2．信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法
（仪器分析方法），是把已知低浓度 试样测出的信号与空白样品测出的信 号进行比较，算出能被可靠地检测出 的最低浓度或量。一般以信噪比 （S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或 注入仪器的量确定检测限。
专属性：要考查辅料、有关物质或降 解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有 干扰应设法排除。
第五节 药品质量标准分析方 法验证
一)目的
证明所采用的分析方法适合于相应 的检测要求，方法验证过程和结果均应 记载在药品标准起草和修订说明中。
二)用途 （一）药品质量标准起草时，分析方法 需经验证。
（二）药物合成方法变更、制剂的组分 变更、原分析方法进行修订时，分析方 法需经验证。
三)需验证的分析项目
1. 鉴别试验； 2. 杂质定量或限度检查； 3. 原料或制剂中有效成分含量测定； 4. 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测
定； 5. 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测
试方法。
四)验证内容
验证内容有：准确度、精密度 （重复性、中间精密度和重现性）、 专属性、检测限、定量限、线性、范 围和耐用性。
dxi x
标准（偏）差（SD或S）
S
xi x2
n1
相对标准（偏）差（RSD），也称 变异系数（CV）
RSDS10% 0 x
1. 重复性 在相同条件下，由同一个 分析人员测定所得结果的精密度；在规 定的范围内，至少用9次测定结果评价， 如制备三个不同浓度样品各测三次或把 被测物浓度当作100%，至少测6次进行 评价。
2. 中间精密度 同一实验室，不同时 间由不同分析人员用不同设备所得结果 的精密度。考察随机变动因素的影响。 变动因素为不同日期、不同分析人员、 不同设备。
3. 重现性 不同实验室，不同分析人 员测定结果的精密度。当分析方法将被 法定标准采用时，应进行重现性试验。 如建立药典分析方法时通过协同检验得 出重现性结果，协同检验的过程、重现 性结果均应记载在起草说明中。
如不能得到制剂的全部组分，可向 制剂中加入已知量的被测物进行测定， 或与另一个已建立准确度的方法比较 结果。
中药分析的准确度一般用加样回 收试验衡量。中药回收率一般要求在 95～105%范围内，有些方法操作步骤 繁多时，可要求在90～110%范围内。 RSD一般在3%以内。
2．杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂
三、专属性（specificity） 指有其他成分（杂质、降解物、
辅料等）可能存在情况下采用的方法 能准确测定出被测物的特性，能反映 该方法在有共存物时对供试物准确而 专属的测定能力。是指该法用于复杂 样品分析时相互干扰程度的度量。
四、 检测限（limit of detection， LOD）
检测限系指试样中被测物能被 检测出的最低量。是限度试验参数， 无需定量测定。常用%、ppm、 ppb表示。
九、应用
3．数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检
测限结果。
五、定量限（1imit of quantitation， LOQ）
指样品中被测物能被定量测定的最 低量，结果应具有一定准确度和精密度。 常用%、ppm、ppb表示。
常用信噪比法确定定量限，一般 以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓 度或注入仪器的量进行确定，也可用 仪器所测空白背景响应标准差（SD） 的10倍为估计值，再经试验确定。
质进行测定。如果不能得到杂质或降 解产物，可用本法测定结果与另一成 熟的方法进行比较。
二、精密度（precision）
精密度是指在规定条件下，同一 个均匀样品，经多次取样测定所得结 果之间的接近程度。用偏差（d）、标 准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变 异系数，CV）表示。
偏差Biblioteka Baidud）：测量值与平均值之差
一、 准确度（accuracy） 准确度是指用该方法测定的结果与
真实值或参考值接近的程度，用百分回 收率表示。
测定回收率R（recovery）的具体 方法可采用“回收试验法”和“加样回 收试验法”。
回收试验 空白+已知量A的对照品 （或标准品）测定，测定值为M
R M 100% A
加样回收试验 已准确测定药物含量P 的真实样品+已知量A的对照品（或标 准品）测定，测定值为M
RMP10% 0 A
数据要求 规定的范围内，至少 用9次测定结果评价，如制备三个不同 浓度样品各测三次。
1. 含量测定方法的准确度
原料药可用已知纯度的对照品或样 品进行测定，或用本法所得结果与已 建立准确度的另一方法测定的结果进 行比较。
制剂可用含己知量被测物的各组 分混合物进行测定，即采用在空白辅 料中加入原料药对照品的方法。
原料药 -侧重方法准确性
中药材及其成方制剂 -侧重方法专属性和灵敏度
化学药物制剂
二、常用方法及含量计算
一、容量分析法 用原料药精制品(含量>99.5％)或
对照品考察方法的精密度，相对标准 差一般应不大于0.2％；进行回收率试 验。回收率一般在99.7～100.3％之间。
(一)容量分析法的特点
六、 线性 在设计的范围内，测试结果与试样
中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 数据要求：应列出回归方程、相关
系数和线性图。
七、范围 指达到一定精密度、准确度和线性
的条件下，测试方法适用的高低限浓度 或量的区间。
八、 耐用性 指测定条件稍有变动时，结果不受
影响的承受程度，为常规检验提供依据。 是衡量实验室和工作人员之间在正常情 况下实验结果重现性的尺度。
(二)容量分析法的计算问题
1． 滴定度
2． 滴定度（T）的计算
3． 百分含量计算
（1） 直接滴定法
含量%=
V× TW´
×100% =
V×T ×WF
×100%
（2）回滴定法（剩余滴定法 ）
三、色谱分析法 (一) HPLC法：要求RSD<2％，回收 率98％～102％之间。
线性范围：用精制品配制一系列 标准溶液，浓度点n应为5～7，用浓 度c对峰高h或被测物的响应值之比进 行回归处理，建立回归方程，r应大 于0.999，截距应趋于零。
1．非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能
被可靠地检测出的最低浓度或量。
2．信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法
（仪器分析方法），是把已知低浓度 试样测出的信号与空白样品测出的信 号进行比较，算出能被可靠地检测出 的最低浓度或量。一般以信噪比 （S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或 注入仪器的量确定检测限。
专属性：要考查辅料、有关物质或降 解产物对主药的色谱峰是否有干扰，如有 干扰应设法排除。
第五节 药品质量标准分析方 法验证
一)目的
证明所采用的分析方法适合于相应 的检测要求，方法验证过程和结果均应 记载在药品标准起草和修订说明中。
二)用途 （一）药品质量标准起草时，分析方法 需经验证。
（二）药物合成方法变更、制剂的组分 变更、原分析方法进行修订时，分析方 法需经验证。
三)需验证的分析项目
1. 鉴别试验； 2. 杂质定量或限度检查； 3. 原料或制剂中有效成分含量测定； 4. 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测
定； 5. 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测
试方法。
四)验证内容
验证内容有：准确度、精密度 （重复性、中间精密度和重现性）、 专属性、检测限、定量限、线性、范 围和耐用性。
dxi x
标准（偏）差（SD或S）
S
xi x2
n1
相对标准（偏）差（RSD），也称 变异系数（CV）
RSDS10% 0 x
1. 重复性 在相同条件下，由同一个 分析人员测定所得结果的精密度；在规 定的范围内，至少用9次测定结果评价， 如制备三个不同浓度样品各测三次或把 被测物浓度当作100%，至少测6次进行 评价。
2. 中间精密度 同一实验室，不同时 间由不同分析人员用不同设备所得结果 的精密度。考察随机变动因素的影响。 变动因素为不同日期、不同分析人员、 不同设备。
3. 重现性 不同实验室，不同分析人 员测定结果的精密度。当分析方法将被 法定标准采用时，应进行重现性试验。 如建立药典分析方法时通过协同检验得 出重现性结果，协同检验的过程、重现 性结果均应记载在起草说明中。
如不能得到制剂的全部组分，可向 制剂中加入已知量的被测物进行测定， 或与另一个已建立准确度的方法比较 结果。
中药分析的准确度一般用加样回 收试验衡量。中药回收率一般要求在 95～105%范围内，有些方法操作步骤 繁多时，可要求在90～110%范围内。 RSD一般在3%以内。
2．杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂
三、专属性（specificity） 指有其他成分（杂质、降解物、
辅料等）可能存在情况下采用的方法 能准确测定出被测物的特性，能反映 该方法在有共存物时对供试物准确而 专属的测定能力。是指该法用于复杂 样品分析时相互干扰程度的度量。
四、 检测限（limit of detection， LOD）
检测限系指试样中被测物能被 检测出的最低量。是限度试验参数， 无需定量测定。常用%、ppm、 ppb表示。
九、应用
3．数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检
测限结果。
五、定量限（1imit of quantitation， LOQ）
指样品中被测物能被定量测定的最 低量，结果应具有一定准确度和精密度。 常用%、ppm、ppb表示。
常用信噪比法确定定量限，一般 以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓 度或注入仪器的量进行确定，也可用 仪器所测空白背景响应标准差（SD） 的10倍为估计值，再经试验确定。
质进行测定。如果不能得到杂质或降 解产物，可用本法测定结果与另一成 熟的方法进行比较。
二、精密度（precision）
精密度是指在规定条件下，同一 个均匀样品，经多次取样测定所得结 果之间的接近程度。用偏差（d）、标 准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变 异系数，CV）表示。
偏差Biblioteka Baidud）：测量值与平均值之差
一、 准确度（accuracy） 准确度是指用该方法测定的结果与
真实值或参考值接近的程度，用百分回 收率表示。
测定回收率R（recovery）的具体 方法可采用“回收试验法”和“加样回 收试验法”。
回收试验 空白+已知量A的对照品 （或标准品）测定，测定值为M
R M 100% A
加样回收试验 已准确测定药物含量P 的真实样品+已知量A的对照品（或标 准品）测定，测定值为M
RMP10% 0 A
数据要求 规定的范围内，至少 用9次测定结果评价，如制备三个不同 浓度样品各测三次。
1. 含量测定方法的准确度
原料药可用已知纯度的对照品或样 品进行测定，或用本法所得结果与已 建立准确度的另一方法测定的结果进 行比较。
制剂可用含己知量被测物的各组 分混合物进行测定，即采用在空白辅 料中加入原料药对照品的方法。