培养基模拟灌装管理..

无菌操作间沉降菌的测试应覆盖整个灌装过程，若灌装操作时间大于4小时，可以采用在同一监测点连续放置培养皿。
2）浮游菌测试
在采样点，培养皿按要求放置后，打开平皿盖，浮游菌测试点离地0.8m～1.0m左右（监测点位置应选择平行或低于分装机分装操作区域），使用浮游菌采样器进行采样测试。采样点布置参照GB/T 16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》，采样次数不少于3次，采样应覆盖培养基模拟灌装全过程，每个采样皿应注明取样编号。
2）溶解性试验
先用定量液体灌装机装入5ml液体培养基，再将0.5g无菌粉末分装于西林瓶内，轻轻振动，粉末应能完全溶解；如果不能溶解，则用定量液体加液器装入10ml液体培养基，再将0.5g无菌粉末分装于西林瓶内，然后轻轻振动，粉末应能完全溶解。若仍不能溶解，则应在略低于5.0％的浓度下重新试验。
3）抑菌性试验
培养间或培养箱热分布均匀性应符合相关规定。
7.培养基确认
目的
验证用培养基符合验证要求。
程序
1）培养基的配制
用容积为1L的三角烧瓶按标准操作规程配制大豆胰蛋白胨肉汤培养基（TSB），大豆胰蛋白胨肉汤培养基的体积≥X×5ml×5000瓶（X=灌装机或分装机的数量）。配制完毕后按培养基的灭菌规程在脉动真空灭菌器灭菌后备用。
9.培养基模拟灌装的工艺流程
10.液体灌装机及螺杆分装机的无菌性确认
目的
确认灌装前液体灌装机及螺杆分装机无菌。
程序
在分装前，确认液体灌装机及螺杆分装机已按相关SOP操作要求清洗，灭菌。在培养基模拟灌装验证开始前，每一台液体灌装机分别灌装10瓶经灭菌的大豆胰蛋白胨肉汤培养基，盖塞、轧盖，然后在23~28℃及30~35℃条件下各培养7天（从低温到高温）；
验证项目编号：VP-XX-XX-XX
验证进度：年月日~年月日
2.验证目的
采用与实际生产工艺相同或更有挑战性的条件与操作方法（包括生产环境），向制剂内包装容器内灌装经灭菌的培养基，然后将此模拟灌装产品在适当条件下培养，以评价流水线及无菌生产工艺的非最终灭菌的无菌产品的无菌保证水平，同时符合GMP要求。
12.2无菌操作间微生物的测试
目的
确认无菌操作间内的微生物数量在可接受的标准内。
程序
1）沉降菌测试
按车间洁净室菌落检查标准操作规程，采用沉降平皿法对灌装间各监测点的菌落数进行测定，放置位置包括灌装机下、回风口等。将培养皿按要求放置后，打开平皿盖，使培养基表面暴露4小时后，盖上平皿盖，然后在30~35℃的条件下，在恒温培养箱中培养48小时后计数。
2）检测方法：自动粒子计数法
使用自动粒子计数法测试洁净室中的粒子。按悬浮状态连续计数的方法，空气采样量为28.3L/分，每个采样点测试3次，采样过程应覆盖培养基模拟灌装全过程，最少采样点的数目参考GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子测试方法》制定。
3）检测点分布：根据实际情况参考GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子测试方法》设置
技术管理部
总监
审核批准验证文件
厂部
技术副厂长
组织协调验证工作，审核验证文件。
技术科
科长
组织协调验证工作，审核验证文件。
验证主管
制定验证方案，处理验证测试数据，完成验证报告
验证工艺员
收集、处理验证测试数据
QA
经理
组织协调验证工作，审核验证文件。
质量主管
协调现场验证工作
QC
经理
指导验证分析，审核分析报告。
可接受标准
西林瓶及胶塞应无微生物生长。
12.无菌环境控制与监测
12.1无菌操作间悬浮粒子数的监测
目的
确认房间洁净度等级。
测试是在动态的环境下进行，即室内满编工作人员，所有设备运转。
程序
1）采样方法：
在培养基模拟灌装过程中，对灌装间和局部层流的悬浮粒子进行动态监控。测试时尘埃粒子计数器应放在离地约0.7m~1m（监测点位置应选择平行或低于分装机分装操作区域）处设置检测点。
对于在执行本方案的过程中所发生的每个偏差，应填写一份包括以下一些内容的偏差报告
－偏差号
－偏差描述和发现人签字及日期
－必要纠偏措施
－纠偏措施批准人签字和日期
－偏差解决的日期
－偏差解决后的重新检查结果
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目的
所有进行本验证的先决条件已经得到满足。
程序
确认验证申请，审核验证方案。
对所有参与验证的相关人员进行相应培训。
负责监督测试现场严格按本方案实施
负责相关SOP文件的制定和审核
质量控制（QC）的职责包括以下：
负责完成所有测试内容和出具完整的检验报告
设动科的职责包括以下：
负责完成最初的生产设备安装、校验和确认
负责对所有仪器仪表进行校验
负责对验证仪器进行校验
验证参与人员与职责
姓名
部门
职务
分工
质量管理部
总监
最终批准验证文件
先用定量液体灌装机在30只经灭菌的西林瓶中装入5ml液体培养基，分成6组，每组各取一瓶加入0.5g无菌粉末。第一组中接种金黄色葡萄球菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第二组中接种生孢梭菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第三组中接种枯草芽孢杆菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第四组中接种绿铜假单胞菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第五组中接种黑曲霉，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第六组中接种白色念珠菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)。将接种有白色念珠菌和黑曲霉的试管放于23～28℃下培养7天，将接种有枯草杆菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的试管放于30～35℃下培养7天，每天观察培养样品。
3.人员与职责
技术科的职责包括以下：
负责计划、组织、协调本方案的实施
负责本方案的评估并将其提交各部门批复
负责对验证结果作出正确的评估并出具完整的验证文件
负责提供各项测试内容
生产部（车间）的职责包括以下：
负责安排验证测试时间计划
提供完成验证必须的设备、人员并监控
负责根据测试内容进行测试
质量保证（QA）的职责包括以下：
本区域验证、检查所必需的文件已经得到批准和可用，培养基模拟灌装过程中涉及的设备验证工作已完成。
可接受标准
验证申请已提交，附上验证申请表及相关文件。
验证方案已审核并适用于指导本次验证进行。
所有验证参与人员均经过培训，每位人员都能够胜任其职责，并签字确认。
本次验证所涉及文件已批准生效，所涉及的设备验证已完成。
可接受标准
1）模拟分装用无菌粉末无菌性试验：在23~28℃及30~35℃条件下培养14天，所有检品均应无菌；
2）模拟分装用无菌粉末溶解性试验：在10%的浓度下，轻轻振摇，样品完全溶解；
3）模拟分装用无菌粉末抑菌性试验：全部样品、对照品试管中均应有明显微生物生长。与未加无菌粉末的培养瓶相比，样品瓶内微生物生长无微弱、缓慢或不长，无菌粉末无抑菌作用。
QC
分析员
负责验证分析
制剂车间
主任
指导现场验证操作，确保验证进度。
工艺员
负责现场验证
制剂车间
操作工
实施验证工作
设动科
主任
指导并组织各仪器仪表的校准，确保验证期间设备正常运转
4.参考文件清单
为了编写本方案，参考了以下文件
描述
标题/号码
修订/日期
药品生产质量管理规范
NA
2010
药品生产验证指南
NA
2003
8.模拟分装用无菌粉末确认
目的
模拟灌装用无菌粉末符合验证要求。
程序
1）无菌性试验
将模拟分装用的粉末（乳糖、甘露醇、PEG6000、PEG8000）装于适当容器中，经环氧乙烷或钴-60灭菌后备用，灭菌有效性应经验证。无菌粉末的用量≥X×0.5g/瓶×5000瓶（X=灌装机或分装机的数量）。
将灭菌后的粉末用无菌操作方法取样，在23~28℃及30~35℃条件下培养14天，并按药典方法检验其无菌性。
－每次测试应签名和注明日期（需有执行人和审核人的签名）
－如果有些测试没有进行，则应在偏差记录中写明未执行的原因和预计执行的日期
日期的格式为年/月/日
在文件中不能使用修正液，修改错误必须使用以下正确的方式:
系统XX签名
系统YZ日期
对于不使用的部分，必须如下面所示的划掉。或者，填写“NA”，表示不适用
NA
2）培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查）
将灭菌后的大豆胰蛋白胨肉汤培养基灌装于14支接种管内，将接种管分成7组，每组2支。第一组中接种金黄色葡萄球菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第二组中接种绿铜假单胞菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第三组中接种白色念珠菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第四组中接种黑曲霉，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第五组中接种枯草芽孢杆菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第六组中接种生孢梭菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第七组中接种常见杆菌（依据日常监测结果选择最常见菌种），接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；以上管子接种后盖塞、封口。另取一支作为空白对照，将接种有白色念珠菌和黑曲霉的试管放于23～28℃下培养5天；将接种有常见杆菌、枯草杆菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的试管放于30～35℃下培养5天，每天观察接种管内微生物的生长情况。
培养基灌装作为培养基模拟灌装的模拟实验，可以直观、方便、准确地反映出培养基模拟灌装过程的污染情况及问题。培养基模拟灌装验证采用胰酪胨大豆肉汤培养基按无菌生产工艺模拟生产，过程中采用连续3次灌装的方式进行，再通过对培养基模拟灌装样品进行无菌检查，从而对无菌生产工艺中所有影响产品无菌结果的各个环节作出准确评价。
《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》
GB/T 16294-2010
2010
《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》
GB/T 16293-2010
2010
《医药工业洁净室(区)悬浮粒子的测试方法》
GB/T 16292-2010
2010
xxxx生产工艺规程
2010版
2010
5.
下面说明了一些进行记录测试数据工作的通用标准
可接受标准
《悬浮粒子测试方法》
空气洁净度级别
A级
B级
悬浮粒子数UCL（个·m-3）
≥0.5um
≤3520
≤
≥5um
20
≤2900
《药品生产质量管理规范》（2010修订）过渡期间，暂不能达到要求的，可执行《药品生产质量管理规范》98版标准，新建生产线除外。
如动态洁净度超标，则应进行偏差调查，若同房间的静态洁净度没有问题，则应考虑减少室内人员，或者设法减少机器的产尘，来降低室内的尘埃粒子浓度。
3）培养基无菌性试验
将已配置的液体培养基按规定灭菌规程进行灭菌。然后将灭菌后的培养基置先在23~28℃条件下培养7天，再在30~35℃条件下培养7天。
可接受标准
1）培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查）：培养后空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管应有菌且生长良好；
2）培养基无菌性试验：灭菌后的培养基应澄清、无沉淀。经23~28℃和30~35℃条件培养的培养基，应无菌生长。
验证项目名称：培养基模拟灌装验证
验证项目编号：VP-XX-XX-XX
验证参与部门：QA、生产部门、QC、技术科、设动部门
验证开始时间：
验证完成时间：
培养基模拟灌装
xx车间xx线
验证方案批准
编制
验证工艺员
签名
日期(年/月/日)
审核
制剂车间主任
签名
日期(年/月/日)
审核
设动科科长
签名
日期(年/月/日)
审核
同时，每台螺杆分装机分装10瓶灭菌后的无菌粉末（0.5g），盖塞、轧盖，送交QC，按无菌检查法进行无菌检查。
可接受标准
液体灌装机样品在23~28℃及30~35℃条件下各培养7天后，应无菌生长。
螺杆分装机样品无菌检查，结果应无菌。
11.西林瓶及胶塞的无菌检查
目的
确认西林瓶及胶塞无菌。
程序
在培养基模拟灌装验证过程中，随机抽取清洗灭菌后的瓶子与胶塞各20只，浸于硫乙醇酸盐及改良马丁培养基中，在23~28℃及30~35℃条件下培养14天。
保证每一文件是可追溯的，它应有标题，系统参考，文件中应有设备的系列号
文件中每个注解、记录等都应该清楚、易读、有日期和签名。不能使用铅笔，而应使用钢笔或水笔记录数据
每次测试必须是：
－如果记录的是某一数值时，填写“通过/不通过”是不充分的
－如果在本次测试的格式中并没有描述测试程序，注明参考的规程
－附上在测试过程中所产生的打印出来的图，签名并注明日期
QC经理
签名
日期(年/月/日)
审核
QA经理
签名
日期(年/月/日)
审核
技术科科长
签名
日期(年/月/日)
批准
质量受权人
签名
日期(年/月/日)
培养基模拟灌装验证
1.验证项目概述
培养基模拟灌装验证，是在与培养基模拟灌装生产过程有关的其他验证，如：洁净厂房、公用系统、灭菌设备（包括蒸汽灭菌柜、隧道式干燥灭菌器、热循环烘箱等）、制剂设备（包括分装机及灌装机、洗瓶机、冻干机、轧盖机等）、容器具清洁验证合格后，且操作人员熟练掌握了岗位SOP后进行的。