实验9 胴体生成和利用

Байду номын сангаас3、工作原理
本实验以丁酸为底物，与新鲜肝匀浆(含有生成酮体的酶系)保温后可形成酮 体。酮体可与含亚硝基铁氰化钠的显色粉反应产生紫红色化合物，而经同样 处理的肌肉匀浆则不产生酮体，故不产生显色反应。
实验步骤
1）肝及肌肉组织匀浆的制备 （1）肌肉匀浆制备： 取鸡肌肉组织2g，剪碎，加入生理盐水2毫升，研磨成匀浆； （2）肝匀浆制备 取鸡肝组织2g，剪碎，加入生理盐水2毫升，研磨成匀浆； 注意：做完肌肉匀浆，然后清洗匀浆机制备肝匀浆。
实验9 酮体的测定
1、任务背景
在肝脏中，脂肪酸b-氧化不完全，经常生成乙酰乙酸、b-羟丁酸和丙酮，这 三者称为酮体。酮体是机体代谢的中间产物，在正常情况下，其产量甚微； 患糖尿病时，机体大量动员脂肪氧化，肝组织生成酮体的量会超过肝外组织 利用率，便可出现酮尿症、酮血症，导致酸中毒。 2、任务目标 通过实验了解和验证肝组织的生酮作用。
实验步骤
2）pH对酶活性的影响 取试管5支，标号，按表操作：
试 剂（滴） 磷酸缓冲液（ PH7.6 ） 丁酸 缓冲液 丙酮 肝匀浆
管
1 15 30 — — 15
号
2 15 — 30 — 15 3 15 30 — — — 4 15 — 30 — — 5 — — 30 30 —
肌匀浆
—
—
15
15
—
分别于37水浴20分钟。取出后,各管加15%三氯醋酸溶液20滴, 摇匀。离心5分钟(3000转/分)。分别取出上述各离心管0.5ml， 放于1.5ml离心管里，并加一小匙显色粉，观察颜色反应。