流感嗜血杆菌
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肠道杆菌(enteric bacilli)
※ 一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似
的Ｇ－杆菌, 广泛分布于水、土壤或腐物中。
※ 分类学上的地位:《伯杰氏系统细菌学手册 》
(第９版)的第Ⅰ大类的兼性厌氧Ｇ－杆菌。 ※ 多数是肠道的正常菌群,少数为致病菌 ※ 至少有30个菌属，120多个菌种
肠道杆菌共同特点
微生物学检查方法
微生物学检查方法
抗原检测：
检测体液或脓汁中的b型多糖抗原，用包被兔抗体
的乳胶微粒凝集反应 免疫荧光、荚膜肿胀试验亦可获得较高阳性结果
分子生物学技术：
PCR技术鉴定临床标本中的流感嗜血杆菌，并作
为确定分离株的一种试验
鉴定依据
革兰阴性小杆菌、多形性 培养采用巧克力色培养基，CO2培养
形态结构
G—中小杆菌，无芽孢，多数有周鞭毛（除志 贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC ），无芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。 及菌毛
培养特性
需氧或兼性厌氧 营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似， 形成灰白色中等大小S型菌落。
生化反应
发酵葡萄糖产酸、或产酸产气； 乳糖发酵试验：非致病菌 +，致病菌 -（除外变形 杆菌）。触酶阳性；氧化酶阴性；硝酸盐还原为 亚硝酸盐。
有色菌落
无色菌落
25
抗原构造及分类： O抗原（分类依据）：包括群和型特异性抗 原 A群:痢疾志贺氏菌 B群:福氏志贺氏菌 C群:鲍氏志贺氏菌 D群:宋内氏志贺氏菌 K抗原无分类意义 抵抗力：比其它肠道杆菌弱，粪便标本立即 送检；易形成抗药性。
26
沙门菌属
是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2000种以 上血清型 对人类有致病性 肠热症——伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌 、肖氏沙门菌、希氏沙门菌 食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌 、肠炎沙门菌 败血症——猪霍乱沙门菌最常见
甲基红试验
原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步 生成大量混合酸，使培养基pH维持在4.4 以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色 反应。此为甲基红试验阳性。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 试剂：甲基红试剂 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验， 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
（巧克力色培养基） X因子 —— 血红素 V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ 5%～10%CO2
培养特性
巧克力色平板上培养：经35℃，18～24h培养形成 微小（0.5～0.8mm）无色透明，不溶血，呈露滴 样小菌落。 48h后形成灰白色较大的菌落。
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培 养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，并弥 散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄 色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越 远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。
流感嗜血杆菌
生化反应：
◆ 对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸， 不分解乳糖或甘露醇，对麦芽糖、蔗糖或糊精的 发酵不稳定。 ◆ 还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型 菌株不溶血。产生自溶酶，可被胆汁溶解。
致病性
◆ 致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。 ◆ 通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。 ◆ 原发性感染多由b型荚膜强毒株引起，为急性化脓 感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关 节炎、心包炎及败血症等。 ◆ 继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等后 发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中 耳炎、鼻窦炎等
葡萄糖
甲基红试验
丙酮酸 大量混合酸
pH降至4.4以下
甲基红试剂
培养基变红
甲基红试验
V-P试验
原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮 酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙 酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白 胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化 合物。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主 要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
生物学性状
形态染色
符合肠杆菌特点，多为周毛菌，有菌毛
伤寒杆菌的周身鞭毛
培养特性
EMB、SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落
麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落
EMB培养基，上为E.coli，下为伤寒杆菌
生化反应
乳糖（-），葡萄糖（+），多数H2S+，动力+ ，尿素（-）
抗原结构
O抗原——特异性低、稳定、分群（组） H抗原——特异性高，不稳定，分型 Vi抗原（毒力抗原）——不稳定，可阻止 “O”凝集
葡萄糖
V－P试验
丙酮酸
脱酸
乙酰甲基甲醇
V-P试剂
二乙酰 培养基变红
葡萄糖
丙酮酸 脱酸 大量混合酸 乙酰甲基甲醇 V-P试剂 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 培养基变红 二乙酰
葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径
靛基质试验
原理：细菌产生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的 色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂 对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。 培养基：蛋白胨水 试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛） 结果：加入试剂后，培养基出现红色液面：+ 培养基液面为黄色： － 应用：用于肠道杆菌的鉴定
流感嗜血杆菌
名称由来
→于1892年由费佛博士在流行 性感冒的瘟疫中发现。 →曾误认为它是1889年流感大 流行的原因。 →直至1933年，发现流行性感 冒的病毒性病原后，才消除了 这种误解。
与流感的关系
嗜血杆菌属（Haemophilus）
根据《Bergy’s鉴定细菌学手册》第九版（1994）记载，嗜 血杆菌属列为群5中的亚群3，其中和临床有关的有9个种即： • 流感嗜血杆菌（H.influenzae） • 副流感嗜血杆菌（H .parainfluenzae） • 溶血嗜血杆菌（H .haemolyticus） • 副溶血嗜血杆菌（H .parahemolyticus） • 杜克嗜血杆菌（H .ducreyi） • 埃及嗜血杆菌（H .aegyptius） • 嗜沫嗜血杆菌（H .aphrophilus） • 副嗜沫嗜血杆菌（H .paraphrophilus） • 迟缓嗜血杆菌（H .segnis） 代表菌：流感嗜血杆菌（H .influenzae）
23
志贺菌（Shigella)
人类细菌性痢疾的病原菌，俗称痢疾杆菌 一、生物学性状 形态与染色：G–、短小杆菌、无芽胞，无 鞭毛，无荚膜，有菌毛。 培养特性：营养要求低，SS平板上呈无色半 透明菌落 生化反应：葡萄糖+，乳糖H2S - ，动力24 可与沙门菌、大肠埃希菌区别。
培养——SS平板
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
1. 初次分离为G—短小杆菌； 2.陈旧培养基或恢复其病灶中，具有多形性 （球杆、长杆或丝状）; 3.无芽胞，无鞭毛，不能运动; 4.毒力株（粘液型菌株）在营养丰富的培养 基上，6～8h有明显荚膜，在陈旧培养物中 荚膜消失。
培养特性
需养菌。培养较ຫໍສະໝຸດ Baidu。
培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子
枸橼酸盐利用试验原理
培养基 枸橼酸盐 铵盐
碳酸盐
氨
培养基pH下降 溴麝香草酚蓝 呈碱性变色
培养基变蓝
埃希菌属
埃希菌属（Escherichia）有6个种，只有大肠埃希 菌（E.coli）是临床最常见、最重要的一个菌种。 ①大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群； ②在宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织器官后即 可成为机会致病菌，引起肠道外感染； ③一些血清型的大肠埃希菌具有致病性，能导致人 类胃肠炎； ④在环境卫生和食品卫生学中常被用作粪便污染的 卫生学检测指标。
EMB（伊红——美兰培养基），乳糖、伊红、美兰
大肠埃希菌 （非致病菌） 乳糖 产酸
发酵
伊红 结合 美兰 形成紫黑色金属光 泽化合物
选择作用 （弱选） 有色的乳糖发酵菌落
伤寒沙门菌等 （致病菌）
乳糖
不发酵
伊红美兰不能结合
无色的乳糖不发酵菌落
EMB平板上的E.coli
SS培养基（沙门志贺培养基） 乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂
22
生物学性状
中等大小的G-杆菌、无芽胞、有周鞭毛、菌毛 营养要求不高。肠道鉴别培养基形成有色菌落 ，SS平板上呈红色大菌落 发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气 ，分解蔗糖因菌株而异，尿素酶试验阴性。 吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试 验）为+ + - -。 克氏双糖铁琼脂（KIA）：斜面和底层均产酸产 气，H2S（-）。 动力-吲哚-尿素（MIU）培养基为+ + -。
靛基质试验原理
色氨酸
色氨酸酶
靛基质 （吲哚） 对二甲基氨基苯甲醛 玫瑰靛基质 （玫瑰吲哚）
靛基质试验
尿素酶试验
原理：产生脲酶的细菌，能水解尿素生 成氨和CO2，氨使培养基呈碱性变色。 培养基：尿素培养基 试剂：酚红指示剂 结果：培养基变红：+ 培养基不变色： 应用：肠杆菌科属间鉴定
卫星现象（satellite phenomenon）：
X因子、V因子需要试验：
取流感嗜血杆菌分别接种于 兔血肉汤和10%兔血清肉汤， 35℃孵育18～24h，观察生长 情况。因流感嗜血杆菌生长 需要X因子和V因子，故只能 在兔血肉汤中生长。也可在 MH琼脂平板上密划细菌，再 贴上含X因子和V因子的纸片， 结果有三种可能： a.仅需X因子，如杜克嗜血杆 菌和嗜沫嗜血杆菌； b. 仅需V因子,如副流感嗜血 杆菌和副嗜沫嗜血杆菌； c.同时需要X因子和V因子， 如流感嗜血杆菌和溶血嗜血 杆菌。
血平板上有“卫星现象”
X、V因子需求试验
尿素酶试验原理
尿素 尿素酶 氨+CO2
培养基pH升高
酚红呈碱性变色
枸橼酸盐利用试验
原理：某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯 一的碳源，也能利用其中的铵盐 作为唯一碳源，细菌 生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成 的氨，使培养基变碱，是指示剂呈碱性反应。 培养基：枸盐酸盐培养基 试剂：溴麝香草酚蓝（pH6.0以下呈黄色，pH7.6以上 呈蓝色） 结果：培养基变蓝：+ 培养基不变色：－ 应用：肠杆菌科属间鉴别
大肠埃希菌 乳糖 中性红 产酸 桃红色乳糖发酵菌落 发酵 呈红色
选择抑制作 用 （强选）
伤寒沙门菌
乳糖 无色乳糖不发酵菌落 不发酵
胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率
微生物检验 1.分离培养
2.鉴定
（1）初步鉴定： ①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以 鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸 脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分 为三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。 KIA和MIU将细菌初步定属。 （2）最后鉴定： 根据生化反应的结果初步定属、种，再根据 血清凝集反应才能作出最后判断。
※ 一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似
的Ｇ－杆菌, 广泛分布于水、土壤或腐物中。
※ 分类学上的地位:《伯杰氏系统细菌学手册 》
(第９版)的第Ⅰ大类的兼性厌氧Ｇ－杆菌。 ※ 多数是肠道的正常菌群,少数为致病菌 ※ 至少有30个菌属，120多个菌种
肠道杆菌共同特点
微生物学检查方法
微生物学检查方法
抗原检测：
检测体液或脓汁中的b型多糖抗原，用包被兔抗体
的乳胶微粒凝集反应 免疫荧光、荚膜肿胀试验亦可获得较高阳性结果
分子生物学技术：
PCR技术鉴定临床标本中的流感嗜血杆菌，并作
为确定分离株的一种试验
鉴定依据
革兰阴性小杆菌、多形性 培养采用巧克力色培养基，CO2培养
形态结构
G—中小杆菌，无芽孢，多数有周鞭毛（除志 贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC ），无芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。 及菌毛
培养特性
需氧或兼性厌氧 营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似， 形成灰白色中等大小S型菌落。
生化反应
发酵葡萄糖产酸、或产酸产气； 乳糖发酵试验：非致病菌 +，致病菌 -（除外变形 杆菌）。触酶阳性；氧化酶阴性；硝酸盐还原为 亚硝酸盐。
有色菌落
无色菌落
25
抗原构造及分类： O抗原（分类依据）：包括群和型特异性抗 原 A群:痢疾志贺氏菌 B群:福氏志贺氏菌 C群:鲍氏志贺氏菌 D群:宋内氏志贺氏菌 K抗原无分类意义 抵抗力：比其它肠道杆菌弱，粪便标本立即 送检；易形成抗药性。
26
沙门菌属
是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2000种以 上血清型 对人类有致病性 肠热症——伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌 、肖氏沙门菌、希氏沙门菌 食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌 、肠炎沙门菌 败血症——猪霍乱沙门菌最常见
甲基红试验
原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步 生成大量混合酸，使培养基pH维持在4.4 以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色 反应。此为甲基红试验阳性。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 试剂：甲基红试剂 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验， 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
（巧克力色培养基） X因子 —— 血红素 V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ 5%～10%CO2
培养特性
巧克力色平板上培养：经35℃，18～24h培养形成 微小（0.5～0.8mm）无色透明，不溶血，呈露滴 样小菌落。 48h后形成灰白色较大的菌落。
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培 养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，并弥 散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄 色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越 远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。
流感嗜血杆菌
生化反应：
◆ 对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸， 不分解乳糖或甘露醇，对麦芽糖、蔗糖或糊精的 发酵不稳定。 ◆ 还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型 菌株不溶血。产生自溶酶，可被胆汁溶解。
致病性
◆ 致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。 ◆ 通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。 ◆ 原发性感染多由b型荚膜强毒株引起，为急性化脓 感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关 节炎、心包炎及败血症等。 ◆ 继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等后 发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中 耳炎、鼻窦炎等
葡萄糖
甲基红试验
丙酮酸 大量混合酸
pH降至4.4以下
甲基红试剂
培养基变红
甲基红试验
V-P试验
原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮 酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙 酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白 胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化 合物。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主 要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
生物学性状
形态染色
符合肠杆菌特点，多为周毛菌，有菌毛
伤寒杆菌的周身鞭毛
培养特性
EMB、SS上呈无色透明乳糖不发酵菌落
麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落
EMB培养基，上为E.coli，下为伤寒杆菌
生化反应
乳糖（-），葡萄糖（+），多数H2S+，动力+ ，尿素（-）
抗原结构
O抗原——特异性低、稳定、分群（组） H抗原——特异性高，不稳定，分型 Vi抗原（毒力抗原）——不稳定，可阻止 “O”凝集
葡萄糖
V－P试验
丙酮酸
脱酸
乙酰甲基甲醇
V-P试剂
二乙酰 培养基变红
葡萄糖
丙酮酸 脱酸 大量混合酸 乙酰甲基甲醇 V-P试剂 pH降至4.4以下 甲基红试剂 培养基变红 培养基变红 二乙酰
葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径
靛基质试验
原理：细菌产生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的 色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂 对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。 培养基：蛋白胨水 试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛） 结果：加入试剂后，培养基出现红色液面：+ 培养基液面为黄色： － 应用：用于肠道杆菌的鉴定
流感嗜血杆菌
名称由来
→于1892年由费佛博士在流行 性感冒的瘟疫中发现。 →曾误认为它是1889年流感大 流行的原因。 →直至1933年，发现流行性感 冒的病毒性病原后，才消除了 这种误解。
与流感的关系
嗜血杆菌属（Haemophilus）
根据《Bergy’s鉴定细菌学手册》第九版（1994）记载，嗜 血杆菌属列为群5中的亚群3，其中和临床有关的有9个种即： • 流感嗜血杆菌（H.influenzae） • 副流感嗜血杆菌（H .parainfluenzae） • 溶血嗜血杆菌（H .haemolyticus） • 副溶血嗜血杆菌（H .parahemolyticus） • 杜克嗜血杆菌（H .ducreyi） • 埃及嗜血杆菌（H .aegyptius） • 嗜沫嗜血杆菌（H .aphrophilus） • 副嗜沫嗜血杆菌（H .paraphrophilus） • 迟缓嗜血杆菌（H .segnis） 代表菌：流感嗜血杆菌（H .influenzae）
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志贺菌（Shigella)
人类细菌性痢疾的病原菌，俗称痢疾杆菌 一、生物学性状 形态与染色：G–、短小杆菌、无芽胞，无 鞭毛，无荚膜，有菌毛。 培养特性：营养要求低，SS平板上呈无色半 透明菌落 生化反应：葡萄糖+，乳糖H2S - ，动力24 可与沙门菌、大肠埃希菌区别。
培养——SS平板
流感嗜血杆菌（H.influenzae）
1. 初次分离为G—短小杆菌； 2.陈旧培养基或恢复其病灶中，具有多形性 （球杆、长杆或丝状）; 3.无芽胞，无鞭毛，不能运动; 4.毒力株（粘液型菌株）在营养丰富的培养 基上，6～8h有明显荚膜，在陈旧培养物中 荚膜消失。
培养特性
需养菌。培养较ຫໍສະໝຸດ Baidu。
培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子
枸橼酸盐利用试验原理
培养基 枸橼酸盐 铵盐
碳酸盐
氨
培养基pH下降 溴麝香草酚蓝 呈碱性变色
培养基变蓝
埃希菌属
埃希菌属（Escherichia）有6个种，只有大肠埃希 菌（E.coli）是临床最常见、最重要的一个菌种。 ①大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群； ②在宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织器官后即 可成为机会致病菌，引起肠道外感染； ③一些血清型的大肠埃希菌具有致病性，能导致人 类胃肠炎； ④在环境卫生和食品卫生学中常被用作粪便污染的 卫生学检测指标。
EMB（伊红——美兰培养基），乳糖、伊红、美兰
大肠埃希菌 （非致病菌） 乳糖 产酸
发酵
伊红 结合 美兰 形成紫黑色金属光 泽化合物
选择作用 （弱选） 有色的乳糖发酵菌落
伤寒沙门菌等 （致病菌）
乳糖
不发酵
伊红美兰不能结合
无色的乳糖不发酵菌落
EMB平板上的E.coli
SS培养基（沙门志贺培养基） 乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂
22
生物学性状
中等大小的G-杆菌、无芽胞、有周鞭毛、菌毛 营养要求不高。肠道鉴别培养基形成有色菌落 ，SS平板上呈红色大菌落 发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气 ，分解蔗糖因菌株而异，尿素酶试验阴性。 吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试 验）为+ + - -。 克氏双糖铁琼脂（KIA）：斜面和底层均产酸产 气，H2S（-）。 动力-吲哚-尿素（MIU）培养基为+ + -。
靛基质试验原理
色氨酸
色氨酸酶
靛基质 （吲哚） 对二甲基氨基苯甲醛 玫瑰靛基质 （玫瑰吲哚）
靛基质试验
尿素酶试验
原理：产生脲酶的细菌，能水解尿素生 成氨和CO2，氨使培养基呈碱性变色。 培养基：尿素培养基 试剂：酚红指示剂 结果：培养基变红：+ 培养基不变色： 应用：肠杆菌科属间鉴定
卫星现象（satellite phenomenon）：
X因子、V因子需要试验：
取流感嗜血杆菌分别接种于 兔血肉汤和10%兔血清肉汤， 35℃孵育18～24h，观察生长 情况。因流感嗜血杆菌生长 需要X因子和V因子，故只能 在兔血肉汤中生长。也可在 MH琼脂平板上密划细菌，再 贴上含X因子和V因子的纸片， 结果有三种可能： a.仅需X因子，如杜克嗜血杆 菌和嗜沫嗜血杆菌； b. 仅需V因子,如副流感嗜血 杆菌和副嗜沫嗜血杆菌； c.同时需要X因子和V因子， 如流感嗜血杆菌和溶血嗜血 杆菌。
血平板上有“卫星现象”
X、V因子需求试验
尿素酶试验原理
尿素 尿素酶 氨+CO2
培养基pH升高
酚红呈碱性变色
枸橼酸盐利用试验
原理：某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯 一的碳源，也能利用其中的铵盐 作为唯一碳源，细菌 生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成 的氨，使培养基变碱，是指示剂呈碱性反应。 培养基：枸盐酸盐培养基 试剂：溴麝香草酚蓝（pH6.0以下呈黄色，pH7.6以上 呈蓝色） 结果：培养基变蓝：+ 培养基不变色：－ 应用：肠杆菌科属间鉴别
大肠埃希菌 乳糖 中性红 产酸 桃红色乳糖发酵菌落 发酵 呈红色
选择抑制作 用 （强选）
伤寒沙门菌
乳糖 无色乳糖不发酵菌落 不发酵
胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率
微生物检验 1.分离培养
2.鉴定
（1）初步鉴定： ①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以 鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸 脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分 为三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。 KIA和MIU将细菌初步定属。 （2）最后鉴定： 根据生化反应的结果初步定属、种，再根据 血清凝集反应才能作出最后判断。