复方磺胺甲恶唑片含量测定
复方磺胺甲恶唑片含量测定
5
（2）重氮化-偶合反应
A r N H2 HClN ,a NO2 重 氮盐OH ,β 萘酚 橙黄色— 猩红色的偶氮染料
6
6
（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应
Ar NH 2 芳醛 H 有色希夫氏碱
芳醛： 对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等
如：与对二甲氨基苯7甲醛在酸性溶液中生 成黄色希夫氏碱。
➢ 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代 基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺 胺类药物的鉴别。
➢ 芳伯氨基反应：可发生重2 氮化-偶合反应，产生有 色沉淀
2
➢ N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂 反应：生成沉淀。
➢ 乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化）， 在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴 别反应。
❖ 参比波长和测定波长的确定：取对照品溶液(2)的稀 释液，以257nm 为测定波长(λ2)，在304nm 波长 附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长 (λ1)，要求△Ａ＝Ａλ2 －Ａλ1 ＝0 。
❖样液的测定：再在λ2与λ12波5 长处分别测定供试品溶 液的稀释液与对照品溶液(1) 的稀释液的吸收度，求 出各自的吸收度差值(△Ａ)计算，即得。
12
四、含量测定
1．亚硝酸钠滴定法 测定原理：利用磺胺类药物的N1取代物分子中
含有芳伯氨基，在0~5℃低温状态下、盐酸介质 中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类 药物的含量。
H2N
+
NN
SO2NHR+NaNO2+ 2HCl
13
-
SO2NHR Cl +NaCl+2H2 O
13
磺胺嘧啶含量测定
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定课件
结果与讨论
结果总结
对实验结果进行总结，概述复方磺胺甲恶唑片的含量测定结果。
结果解释
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量进行解释，分析可能的 影响因素。
讨论
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量测定方法、实验过程等 方面进行讨论，提出改进意见和建议。
05 实验结论
实验总结
实验原理
通过高效液相色谱法，利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶解 能力不同，在流动相与固定相之间，将不同的物质分离出来。
色谱条件设置
根据实验原理和仪器说明书，设置色谱柱、流动相、检 测波长等参数。
样品测定
分别进样对照品溶液和样品溶液，记录色谱图，测量各 组分的峰面积或峰高。
数据处理
根据峰面积或峰高，计算各组分的含量。
02 实验材料与设备
实验材料
对照品：磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶
实验用水：超纯水
流动相：磷酸盐缓冲液
试剂：氢氧化钠、盐酸、 甲醇等
胺甲恶唑片的含量。
误差分析
03
对计算过程中可能产生的误差进行分析，评估结果的准确性。
结果可靠性分析
重复性实验
为了验证结果的可靠性，需要进行重复性实验， 并对多次实验结果进行比较和分析。
对照实验
通过设置对照组，对比实验组和对照组的结果， 判断实验结果的可靠性。
数据检验
采用合适的统计方法对实验数据进行检验，如t检 验、F检验等，以确定结果的可靠性。
测定步骤
3. 根据吸光度和标准曲线，计算出复 方磺胺甲恶唑片中主要成分的浓度。
4. 根据浓度计算出样品中药物的含量。
04 结果分析与讨论
数据处理与结果计算
数据处理
01
将实验过程中收集的数据进行整理、筛选和清洗，确保数据的
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
单波少法测定复圆磺胺甲噁唑含量之阳早格格创做一、手段1.掌握复圆造剂的分解特性及赋形剂的搞扰与排除要领.2.掌握单波少分光光度法测定复圆磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的本理与要领.两、真验真质与本品20片，粗稀称定，研细，粗稀称与适量(约相称于磺胺甲噁唑50mg（20片仄衡片沉的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片仄衡片沉的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲心恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，与绝滤液动做供试品溶液.粗稀称与105℃搞燥至恒沉的磺胺甲噁唑对于照品50mg（按本料药95%含量计）与甲氧苄啶对于照品10mg（按本料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别动做对于照品溶液(1)与对于照品溶液(2).3.磺胺甲噁唑的测定粗稀量与供试品溶液与对于照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀.与对于照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波少(λ2)，正在304nm波少附近(每隔断0.5nm)采用等吸支面波少为介进波少(λ1)，央供△A=Aλ2－Aλ1=0.再正在λ2与λ1波少处分别测定供试品溶液的稀释液与对于照品溶液(1)的稀释液的吸支度，供出各自的吸支度好值(△A)，估计，即得.粗稀量与上述供试品溶液与对于照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[与盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾，加火至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀.与对于照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波少(λ2)，正在295nm波少附近(每隔断0.2nm)采用等吸支面波少为参比波少(λ1)，央供△A=Aλ2－Aλ1=0.再正在λ2与λ1波少处分别测定供试品溶液的稀释液与对于照品溶液(2)的稀释液的吸支度，供出各自的吸支度好值(△A)，估计，即得.本品每片中含磺胺甲噁唑(C10H11N3O2S)应为0.360～0.440g，含甲氧苄啶(C14H12N4O3)应为72.0～88.0mg.三证明1.磺胺甲噁唑与甲氧苄啶的结构分别为：SMZ与TMP的紫中吸支图谱分别为：1 TMP(2.0μg/ml)；2 SMZ(10.0μg/ml) 1 TMP(5.0μg/ml)；2 SMZ(25.0μg/m l)3 SMZ＋TMP；4 辅料3 SMZ＋TMP； 4 辅料2.复圆磺胺甲噁唑片的处圆为：磺胺甲噁唑400g甲氧苄啶80g造成1000片3.本真验采与单波少分光光度法测定SMZ战TMP的含量.由于搞扰组分正在测定波少战参比波少处吸支度相等，可正在估计△A时消去，所以应用本法不妨没有经分散，曲交测定复圆造剂中SMZ战TMP的含量.四、思索题1.试简述单波少分光光度法的本理.2.试查阅本品的其余分解要领，从中相识复圆造剂分解的特性及生少趋势.注意：1、与20片后要算一片的仄衡沉量，而后根据那一片去与八分之一沉量.2、1,2步调动做母液配造，不妨喊博门三组完毕，3步调由单数组完毕，4步调由单数组完毕.3、利用紫中测定时屡屡换一个波少便要将空黑对于照液吸支值沉新归整，预防出现背数值情况.。
8079-2复方磺胺甲恶唑片检验标准操作程序
目的：规范复方磺胺甲噁唑片检验操作，保证检验结果的准确性。
范围：复方磺胺甲噁唑片的中间产品、成品。
责任：质检员规定：1性状取供试品10片铺于洁净白纸上，观察其色泽及片型厚薄的均一性，鼻嗅口尝其气味。
2鉴别2.1取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑50mg），显芳香第一胺的鉴别反应（附录Ⅲ）。
2.2取本品的细粉适量（约相当于甲氧苄啶50mg），加稀硫酸10ml，微热溶解后，放冷，滤过，滤液加碘试液0.5ml，观察反应现象。
2.3取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑0。
2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取磺胺甲噁唑0。
2g与甲氧苄啶40mg，加甲醇10ml，作为对照溶液。
照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各5µl，薄层板上，以氯仿-甲醇-二甲基甲酰胺（20：2：1）为展分别点于同一硅胶GF254开剂，展开后，晾干，置紫外灯（254nm）下检视。
观察供试溶液品所显两种成分的主斑点与对照品溶液的主斑点位置对应情况。
3检查3.1重量差异按“重量差异检查操作程序”检验。
复方磺胺甲噁唑片标准操作程序第2页3.2崩解时限按“崩解时限检查标准操作程序”检验。
3.3溶出度取本品，照溶出度测定法(附录XC第二法)，以0。
1/L盐酸溶液900为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液10ul，照含量测定项下的方法，依法测定，计算每片中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的溶出量。
3.4微生物限度按“微生物检验操作程序”检验。
3.5水分用水分测定仪测定(颗粒)。
4含量测定照高效液相色谱法(附录VD)测定。
4.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-乙腈-三乙胺(799:200:1)(用氢氧化钠试液或冰酸调节PH值至5.9)为流动相；检测波长为240nm。
理论板数按甲氧苄啶峰计算不低于4000，磺胺甲噁唑峰与甲氧苄啶峰的分离度应符合要求。
复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
验证性试验实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定一、实验目的1.掌握双波长法的基本原理。
2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。
3.熟悉紫外分光光度仪的使用。
二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL2.试药复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ95%乙醇氢氧化钠硫酸三、实验原理1.双波长分光光度法（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。
用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。
（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。
在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。
所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。
四、实验内容1.工作曲线的制备（1）标准贮备液的配制分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。
双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分含量.doc
典型实验教学案例简介案例x 双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中两组分含量药物的含量测定是药物质量控制的重要方面。
紫外分光光度法以其准确度、灵敏度高，简便快速等特点，成为药物含量测定的重要方法。
紫外法测定含量时，常选择被测组分的最大吸收波长最为测定波长，以提高检测的灵敏度。
当用紫外法测定复方制剂多组分中一种组分的含量时，共存组分常常也会有吸收干扰，此时，消除干扰就成为准确测定的关键环节。
双波长分光光度法作为计算分光光度法的一种，就是消除干扰、实现多组分含量同时测定的一种有效手段。
本实验就以复方磺胺甲噁唑片为实验对象，通过双波长分光光度法测定其两组分的含量，从而达到学习双波长法的原理和操作的目的。
一、实验目的1．掌握双波长分光光度法的测定原理。
2．熟悉双波长分光光度法在复方制剂分析中的应用。
二、实验原理当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。
然后根据ΔA值计算b的含量。
SMZ在257nm波长处有最大吸收，TMP在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定波长（图1），在304nm波长附近选择参比波长。
TMP在239nm波长处有较大吸收，此波长又是SMZ的最小吸收峰，并在295nm波长附近有一等吸收点，故选定239nm为测定波长（图2），并规定在此波长附近选择供测定的参比波长。
由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定。
此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择。
三、仪器与试剂1.主要仪器：紫外-可见分光光度计；100mL 容量瓶2.主要试剂：磺胺甲噁唑和甲氧苄啶对照品；0.4%氢氧化钠溶液；0.1mol/L 盐酸溶液；氯化钾四、实验步骤1．磺胺甲噁唑的含量测定（1）平均片重测定：10片，精密称定。
（2）供试品溶液配制：图2 TMP 紫外吸收图谱1. TMP(5.0μg/ml);2.SMZ(25.0μg/ml);3. SMZ+TMP;4. 辅料图l SMZ 紫外吸收图谱1. TMP(0.2μg/ml);2.SMZ(10.0μg/ml);3. SMZ+TMP;4. 辅料精密称取片粉(约50mg SMZ, 10mg TMP)片剂 乙醇溶解、定容过滤 研磨100m（3）对照品溶液配制（3）取对照品溶液（2）的稀释液，以257nm 为测定波长（λ2），在304nm 波长附近（每间隔0.5nm ）选择等吸收点波长为参比波长（λ1），要求ΔA= A λ2（2）－A λ1（2）= 0，再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（ΔA ），计算，即得。
复方磺胺甲恶唑的含量测定
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。
分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。
本品为白色结晶性粉末。
熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。
无臭，味微苦。
外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。
分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。
［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于 5.0。
甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。
2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
二阶导数分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量
2. 4 样品的测定 取复方磺胺甲卟恶唑片 10 片 ,精
密称定 。研细后 ,精密称取适量 ,以无水乙醇溶解 , 配成浓度约为 100 μg·ml - 1 的溶液 ,过滤 。取续滤 液 ,以无水乙醇制成浓度约为 20 μg·ml - 1 的溶液 。
以无水乙醇为空白 ,在 220～400 nm 波长处绘制二
Determination of sulfamethoxazole in compound sulfamethoxazole tablets by secondary derivative spectrophotometry
Dai Min ( Yijishan Hospital ,Wannan Medical College ,Wuhu 241001)
The test f or bacterial endotoxins of infatmuli injection
Zhong Fuqing ,Zhu J iangxiang ( The Second Hospital of Jianghua ,Jianghua 425500)
ABSTRACT OBJECTIVE: To inspect on t he feasibility of bacterial endotoxin test for infatmuli injection. METHODS : Inhibition and enhancement test & contrast test . RESUL TS : The test was not disturbed by t hese samples ,as was t he same as rabit test . CONCL U2 SIONS : Infatmuli injectio could be tested wit h t he tachypleus amebocyte lysate t hat sentivity was 0. 5 EU·ml - 1 . KEY WORDS infatmuli injection ,tachypleas amebocyte lysate ,bacterial endotoxin
复方磺胺甲恶唑片中间产品质量标准
依据：《复方磺胺甲噁唑片质量标准》，产品质量的稳定性考察。
内容：
1颗粒
1.1性状：本品为白色颗粒。
1.2检查
水分：应为1.0%～4.0%（快速水分测定法）。
1.3含量测定：本品每克中含磺胺甲噁唑（C10H11N3O3S）应为0.712～0.827g，含甲氧
苄啶（C14H18N4O3）应为140.4～167.3㎎。
2素片
2.1性状：本品为白色片。
2.2检查
2.2.1 重量差异：±4.5%。
2.2.2 崩解时限：不得过13分钟。
3分装
3.1 装量差异：50片/瓶，不允许有误差。
3.2 封口质量：封口处应严密。
4包装：贴签端正（允许偏差≤2mm）；装量准确，每件装量应为：50片×300瓶；
封口严密、牢固；产品批号、生产日期、有效期印字清晰，内外一致；打包端正
（打包带上下偏差不得过1㎝），松紧适度。
复方磺胺甲恶唑片的含量测定
A2
A B
A2 A2 2 lcA 2 lcB
A B A B
2为测定波长, 1 为参比波长
A为待测组分, B为干扰组分 B B 因为 A1 A 2
A AA2 B AA1 B ( A2 A )lcA 所以 1
可见，在双波长分光光度法中吸光度 的差值与干扰组份B无关。
总结双波长法
1 在待测组分的最大吸收波长处测定干扰组 分的A1 2 在干扰组分中找到与A1相等的吸收点A2 （另一个波长） 3 在上述两个波长处测定待测组分的吸光度 差值
四
操作步骤
供试品溶液的制备:取本品10片，精密称定，研细，
精密称取适量（约相当于SMZ50mg），置100ml 容量瓶中，加乙醇适量，振摇15min，使药物溶解， 加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液备用．
与对照品溶液（１）、（２） 各２ml，分 置100ml的量瓶中，加０.４％氢氧化钠溶液 稀释至刻度，作为溶液的稀释液，取对照品 溶液（２）的稀释液，以257 nm为测定波长， 在304nm波长附近选择等吸收点波长为参比 波长，要求 A A 2 A1 0 再在两波长处分别测定供试品溶液稀释液与 对照品溶液（１）稀释液的Ａ，求出各自的 Ａ，计算，即得．
2013-7-11
双波长分光光度法(双波长等吸收法) 当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在 选定的波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组 分与干扰组分的吸收有足够大的差别。则两波长 处吸光度的差值与被测组份的浓度成正比。
B B AA B AA A1 AlcA 1lcB 1 1 1
光吸收定律：朗伯－比尔(Lambert－Beer)定律
1 I0 A lg lg ECL T I
复方磺胺甲实验报告
一、实验目的1. 掌握双波长法测定复方磺胺甲恶唑片含量的原理和方法。
2. 了解复方磺胺甲恶唑片的质量分析。
3. 提高实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量。
在一定的条件下，磺胺甲恶唑在特定波长下有最大吸收，而其他成分在此波长下无吸收或吸收较小。
通过比较样品和对照品的吸光度，可以计算出样品中磺胺甲恶唑的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 复方磺胺甲恶唑片- 磺胺甲恶唑对照品- 磺胺甲恶唑对照品储备液- 磺胺甲恶唑对照品溶液- 稀释剂2. 实验仪器：- 721分光光度计- 电子天平- 磁力搅拌器- 离心机- 量筒- 容量瓶- 移液管四、实验步骤1. 样品溶液的制备- 称取适量复方磺胺甲恶唑片，置于100ml容量瓶中。
- 加入适量稀释剂，超声溶解。
- 定容至刻度，摇匀。
2. 对照品溶液的制备- 称取适量磺胺甲恶唑对照品，置于100ml容量瓶中。
- 加入适量稀释剂，超声溶解。
- 定容至刻度，摇匀。
3. 吸收度测定- 在721分光光度计上，以稀释剂为空白，分别测定样品溶液和对照品溶液在特定波长下的吸光度。
- 记录数据。
4. 样品含量计算- 根据对照品溶液的吸光度，计算磺胺甲恶唑对照品溶液的浓度。
- 根据样品溶液的吸光度，计算样品中磺胺甲恶唑的含量。
五、实验结果与分析1. 样品溶液和对照品溶液的吸光度测定结果如下：| 溶液类型 | 吸光度 || -------- | -------- || 样品溶液 | 0.475 || 对照品溶液 | 0.502 |2. 样品含量计算结果如下：样品中磺胺甲恶唑的含量 = (样品溶液吸光度 / 对照品溶液吸光度) × 对照品溶液浓度× 样品质量 / 样品溶液体积样品中磺胺甲恶唑的含量= (0.475 / 0.502) × 0.1 × 0.1 / 1 = 0.0945六、实验结论本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量，结果表明，该方法操作简便、准确可靠。
双波长法测定复方磺胺中SMZ的含量
一、实验目的
1、掌握等吸收双波长法测定复方片剂组分含量的原理及方法； 2、熟悉利用单波长分光光度计进行双波长法测定。
二、实验原理
利用等吸收点双波长法消除干扰组分的影响，根据在 λ1 和 λ2 的 A 值通过下式计算：
a b A A1 A2 ( A1a A1b ) ( A2 A2 )
1 1 以 SMZ 最大吸收波长为测量波长 λ1，再在 λ1 处分别测量 ASMZ 、 ATMP 、 A样1 。
λ
λ
λ
1 2 1 2 （2）根据 ATMP 值，按照 TMP 吸收光谱在 304 nm 附近寻找等吸收点 ATMP （ ATMP = ATMP ） ，以该波
λ
λ
λ
λ
2 长作为参比波长 λ2，然后在 λ2 处分别测量 ASMZ 和 A样2 。
λ
λ
四、数据处理及要求
计算片剂中磺胺甲噁唑的标示百分含量。
五、注意事项
1、注意药物是否完全溶解； 2、参比波长对测定影响较大，此波长可因仪器不同而异，故用对照品溶液来确定； 3、SMZ103
1、3、4、5
由于 A1 A2 ，
b b
则 A A1 A2 ( E1 E2 )Cal
a a a a
所以 Ca
a A1a A2 A a a ( E1 E2 )l E al
三、实验步骤
1、对照品和样品溶液的配制 TMP 对照品溶液：精密称取 105℃干燥至 恒重的 TMP 约 10mg， 乙醇溶解定容到 100 ml， 取上述溶液 2.00 ml 加 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定 容到 100 ml，摇匀。 SMZ 对照品溶液： 精密称取 105℃干燥至恒重的 SMZ 约 50mg （mSMZ） ， 乙醇溶解定容到 100.0 ml， 取上述溶液 2.00 ml 加 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容到 100 ml，摇匀。 样品溶液：取片剂 10 片，研细，精密称取相当于 SMZ 50 mg 与 TMP 10 mg 粉末，乙醇溶解， 定容到 100.0ml，过滤，取续滤液 2.00 ml 加 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液定容到 100.0 ml。 2、SMZ、TMP 标准溶液吸收光谱绘制以及等吸收点寻找和样品的测定 （1） 以 0.4％氢氧化钠溶液为参比溶液， 分别取 SMZ、 TMP 标准溶液进行波长扫描 （220nm ~ 320nm） 。
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。
2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。
二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg （20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。
3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm 为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[取盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml 摇匀] 稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(2)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定一、实验原理磺胺甲恶唑是一种广谱抗菌药物，在临床上被广泛应用。
为了保证其药效，需要严格控制其含量。
本实验使用紫外分光光度法测定样品中复方磺胺甲恶唑的含量。
紫外分光光度法是利用化合物吸收紫外光的特性来测定化合物的浓度的方法。
在特定波长下，化合物分子吸收能量，产生吸收峰。
对于复方磺胺甲恶唑，其吸收峰波长为266nm。
因此可以通过测定吸光度值来计算复方磺胺甲恶唑的浓度。
二、实验仪器与药品仪器：紫外分光光度计三、实验步骤1、称取严密瓶装的复方磺胺甲恶唑片20片，粉碎并混匀。
2、取粉末约0.5g，置于50ml量瓶中，加入50ml甲醇溶液，摇匀，振荡30分钟，放置10分钟。
如样品不易溶解，可适当加热。
3、用甲醇溶液配制出复方磺胺甲恶唑的标准曲线。
取不同浓度的复方磺胺甲恶唑溶液，用25ml量瓶定容至刻度，得到不同浓度的溶液。
4、打开紫外分光光度计电源，进行预热。
5、向紫外分光光度计分光计分别加入甲醇，并进行零点校准。
6、取适量复方磺胺甲恶唑样品溶液，置于1cm医用玻璃比色皿中，放在紫外分光光度计的样品池中，测量吸光度值。
7、利用标准曲线计算复方磺胺甲恶唑在样品中的含量。
四、实验数据及计算1、标准曲线的制备制备3组复方磺胺甲恶唑溶液，分别为0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml。
将每组溶液分别加入紫外比色皿中，测量其吸光度值，并制作标准曲线。
复方磺胺甲恶唑浓度（mg/ml）吸光度值0.1 0.1280.2 0.2510.3 0.377标准曲线如下图所示：2、样品的测定取测定样品1.0ml，加入甲醇定容至10.0ml，混匀，测量其吸光度值。
根据标准曲线计算得到样品中复方磺胺甲恶唑的浓度。
5、结果与分析本实验使用紫外分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片的含量，结果显示样品中复方磺胺甲恶唑的含量为0.16mg/ml。
根据国家药典标准，每片复方磺胺甲恶唑片中复方磺胺甲恶唑的含量应在0.114mg~0.126mg之间。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定(精)
二、仪器与试药
试剂
复方磺胺甲噁唑片 规格：磺胺甲噁唑（SMZ）0.4g/片
甲氧苄啶（TMP） 0.08g/片 氢氧化钠 95%乙醇
三、实验原理
双波长分光光度法-消除干扰
干扰组分吸收光谱中两个波长处有吸收系数相同 在干扰组分等吸收波长处被测组分吸收系数有显著
差异 可用于消除干扰吸收 直接测定混合物溶液在等吸收波长处的吸收度之差
药物分析实验
实验六 复方磺胺甲噁唑片含量测定
一、实验目的
掌握双波长分光光度法的基本原理 掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量
的方法 熟悉紫外分光光度仪的使用
二、仪器与试药
仪器
Mettler AL204电子天平 752型紫外-可见分光光度仪 胖肚移液管 规格：25mL 研钵 定量滤纸（直径10cm） 容量瓶 规格：25、100 mL
记录
磺胺甲恶唑片测定记录
编号
A257 A304
空白
（ 在仪器上用空白溶剂调零）
供试品1
ΔA 标示量% 标示量% 相对
偏差
供试品2
思考题
1.当确定参比溶液时，干扰物如TMP溶液是 否需要精确配制？为什么？
2.在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等 辅料的影响？如何进行？
（2）SMZ的标准曲线及回归方程制作
1、工作标准曲线的制备
（2）SMZ的标准曲线及回归方程制作
取贮备液0,3, 6,9,12,15ml
100ml量瓶， 0.1mol/L NaOH稀释
测定波长: 257nm 参比波长：304nm
作标准曲线
测ΔA（λ1λ2）
管号 1
2
3
4
5
6
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量
双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。
2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。
二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg（20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。
3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。
4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液 [取盐酸液L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀。
取对照品溶液(1)的稀释液，以为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定
03 实验步骤
仪器与试剂的准备
高效液相色谱仪
用于复方磺胺甲恶唑片的含量测定， 确保仪器性能良好，能够满足实验要 求。
试剂
甲醇、乙腈、磷酸、三乙等，确保 试剂的质量和纯度符合实验要求。
样品处理与溶液制备
样品处理
取复方磺胺甲恶唑片适量，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲恶唑0.25g），置 50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理使溶解，放 冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
除高效液相色谱法外，可探索其他适用于复 方磺胺甲恶唑片含量测定的方法，如紫外可 见分光光度法等。
扩大应用范围
本实验方法可应用于其他类似药物制剂的含 量测定，为药物质量控制提供更多技术支持 。
感谢您的观看
THANKS
药理作用
复方磺胺甲恶唑片是一种广谱抗菌药， 主要用于治疗敏感菌引起的感染。
组成
复方磺胺甲恶唑片由磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶组成。
高效液相色谱法的基本原理
01
02
03
分离原理
高效液相色谱法基于不同 物质在固定相和流动相之 间的分配平衡差异进行分 离。
检测器
常用的检测器有紫外检测 器、荧光检测器、电化学 检测器等，用于检测分离 后的物质。
03
04
分别精密吸取对照品溶 液与供试品溶液各10μL， 注入液相色谱仪，记录 色谱图。
按外标法以峰面积计算 出供试品中磺胺甲恶唑 （C10H9N3O3S）的含 量。
04 结果分析
实验数据记录与处理
实验数据记录
在实验过程中，我们详细记录了每组样品的称量数据、吸收度数据以及波长数据。这些数据均经过了 严格的核对，以确保准确性。
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中，加0.01mol/l氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在254nm
的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系
数（
E 1% 1cm
）为866计算出每片的溶出量，限度为标示量的70％，
应符合规定。
计算公式如下：
19
A 1% 稀释倍数 溶液总体积
溶出量％＝
E 1% 1cm
➢ 与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有色的希夫碱。
3
3
二、磺胺类药物的鉴别
1．化学鉴别法 （1）铜盐反应
4
可初步区别结构类似的磺胺药
4
磺胺类药物与铜盐的反应
药物名称
加入硫酸铜试液后的现象
磺胺甲噁唑 磺胺异噁唑 磺胺嘧啶 磺胺多辛
生成草绿色沉淀 呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀 生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色 生成黄绿色沉5淀，放置后变淡蓝色
磺胺异噁唑 取 供 试 品 约 0.5g ， 精 密 称 定 ， 加 二 甲 基 甲 酰 胺 40ml溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇钠滴定 液(0.1mol/L)滴定，至溶16液恰显蓝色，并将滴定的 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 1ml 甲 醇 钠 滴 定 液 (0.1mol/L)相当于26.73mg的C11H13N3O3S。
图16-1 磺胺嘧啶的红外吸收光谱
9
三、磺胺嘧啶的检查
1．溶液澄清度与颜色的检查 有色的氧化产物——偶氮苯化合物
H3N2C4HNO2S
NN
SO2NHC4N2H3
方法：比色法
要求：澄清无色；如显色10 ，与黄色3号标准比色 液比较，不得更深。
10
2．有关物质的检查 目的：控制药物的纯度。 方法：薄层色谱法，主成分自身对照法 杂质的限度：0.5％。 3．干燥失重
12
四、含量测定
1．亚硝酸钠滴定法 测定原理：利用磺胺类药物的N1取代物分子中
含有芳伯氨基，在0~5℃低温状态下、盐酸介质 中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类 药物的含量。
H2N
+
NN
SO2NHR+NaNO2+ 2HCl
13
-
SO2NHR Cl +NaCl+2H2 O
13
磺胺嘧啶含量测定
取 供 试 品 约 0.5g ， 精 密 称 定 ， 置 烧 杯 中 ， 加 水 40ml与盐酸溶液(1+2)15ml，然后置于电磁搅拌器 上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后， 将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠液 滴定液迅速滴定，随滴随搅拌。至近终点时，将滴定 管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，将洗液并人溶 液中，继续缓缓滴定，直到电流计指针突然偏转，并 不再回复，即为滴定终点（永停法）。每1ml的亚硝 酸 钠 滴 定 液 (0.1mol/1L4) 相 当 于 25.03mg 的 C10H10N4O2S。
7
（4）N1取代基的反应 N1取代基为含氮杂环，有一定碱性，可以
和有机碱沉淀剂生成沉淀。
SD 碘化铋钾试液红棕色 SD 碘-碘化钾8试液红棕色
8
2．红外光谱识别法
红外法具有指纹性，在一定波长下，磺胺类 药物各具有其独特的吸收光谱图，可鉴别本类药物 的特征官能团。
9
➢ 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代 基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺 胺类药物的鉴别。
➢ 芳伯氨基反应：可发生重2 氮化-偶合反应，产生有 色沉淀
2
➢ N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂 反应：生成沉淀。
➢ 乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化）， 在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴 别反应。
16
计算公式：
磺胺异噁唑含量%
(V
V0 )
T
c甲醇钠 0.1
103
100%
W
讨 论： （1） 测定结果准确，终点明显。
（2）甲醇钠滴定溶液应临用前标定。
（3）滴定最17好在隔绝空气中二氧化 碳的情况下进行。
17
3．紫外分光光度法
➢ 仅有单一组分或虽有多种组分，但组分间互不干 扰的制剂： 直接采用紫外分光光度法，在待测组分的最 大吸收波长处测定吸收度，以对照品比较法或吸 收系数法计算 磺胺嘧啶片的溶出度测定
5
（2）重氮化-偶合反应
A r N H2 HClN ,a NO2 重 氮盐OH ,β 萘酚 橙黄色— 猩红色的偶氮染料
6
6
（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应
Ar NH 2 芳醛 H 有色希夫氏碱
芳醛： 对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等
如：与对二甲氨基苯7甲醛在酸性溶液中生 成黄色希夫氏碱。
一、常用药物的化学结构及理化性质
H2N H2N
OO S N H
NO CH3
磺胺甲噁唑
H2N
O
ON
S
NN
H
磺胺嘧啶
1
H2N
OO S N H
ON
CH3 CH3
磺胺异噁唑 H3CO
OO S N
CH3 N
N
H 磺胺多辛
常用药物化学结构
1
性质
➢ 具有酸碱两性：Ar－NH2显弱碱性；磺酰胺基N1 上的H较活泼，即具有一定的酸性。因此可溶于酸 性或碱性溶液中。
➢ 有多种组分且各组分吸收光谱互相重叠： 采用计算分光光度法18 复方磺胺甲噁唑片的含量测定(2000版）
18
磺胺嘧啶片的溶出度测定
检查方法：
取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液
(9→1000)1000ml 为 溶 剂 ， 转 速 为 100r/min ， 依 法 操 作 ， 经
60分钟，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液1ml，置50ml量瓶
14
计算公式：
25.03V cNaNO2 103
磺胺嘧啶含量%
0.1
100%
W
主要条件：（1）加入适பைடு நூலகம்KBr
（2）酸的种类及用量
芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6
（3）室温条件下15滴定 （4）滴定速度
（5）指示终点的方法 药典采用永停法
15
2．非水溶液滴定法
含磺酰亚氨基－SO2－NH－R，其N上的H具有 一定酸性（R吸电子效应越强，N上的H越易失去， 酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。
105℃干燥至恒重，减11失重量≤0.5％。
11
4．酸度 取本品2.0g，加水100ml，置水浴中振
摇加 热10分钟，立即放冷，滤过；分取滤液25ml， 加酚酞指示液2 滴与氢氧化钠滴定 (0.1mol/L)0.20ml，应显粉红色。
5．炽灼残渣：不得过0.1％。 6．重金属：不得过百万分之十。
12