临床病原体检查
临床常见病原体检测方法及诊断意义
临床常见病原体检测方法及诊断意义简介本文介绍了临床常见病原体的检测方法及其诊断意义。
病原体检测对于正确诊断并治疗疾病至关重要，因为不同的病原体可能导致不同的病情和治疗方法。
常见病原体检测方法以下是常见病原体检测的一些常用方法：1. 病原体培养：通过将患者样本接种到特定培养基中，培养条件适合病原体生长繁殖，然后观察培养结果，鉴定病原体种类。
2. PCR（聚合酶链式反应）：通过扩增病原体DNA或RNA片段，使其数量增加到可以观察到的水平。
PCR可用于检测细菌、病毒、真菌等多种病原体。
3. 血清学检测：通过检测患者血液中的抗体或抗原，判断是否存在特定病原体感染。
血清学检测方法包括ELISA、免疫荧光等。
4. 影像学检查：通过X射线、CT、MRI等影像学技术，观察病变部位或病原体引起的影响，如肺部感染的阴影。
诊断意义病原体检测的诊断意义在于确定病原体种类及其数量，对选择合适的治疗方案和预后评估具有重要意义。
1. 确定病原体种类：不同的病原体可能导致不同的疾病，因此准确确定病原体种类有助于明确疾病的诊断。
2. 指导治疗方案：针对不同的病原体，可能需要使用特定的抗生素或抗病毒药物进行治疗。
病原体检测结果可以指导医生选择合适的治疗方案，避免盲目使用药物。
3. 预后评估：某些病原体可能与严重的疾病及不良预后相关。
通过病原体检测及其数量的评估，医生可以更好地评估患者的预后情况，采取相应的治疗措施。
结论临床常见病原体的检测方法及其诊断意义对于疾病的准确诊断和治疗具有重要作用。
通过选择合适的病原体检测方法，并正确解读检测结果，可以更好地指导医疗决策和改善患者预后。
临床感染之病原体检验
(二)细菌学检验程序
1. 细菌学检验见第一节血液感染及有关章节。 2. 病原体检测只对某些疾病诊断具有意义。
由于菌群复杂，正常寄生菌和种类繁多， 一份咽拭子分离出来的细菌不一定与疾病 有关，另外由于接受药物治疗，使某些细 菌受到抑制，可影响阳性检出率。因此， 在分析结果时应紧密结合临床。
3. 鼻咽拭子标本的检测有助于猩红热、风湿热、急性肾小球肾 炎病人的临床诊断；还可检出化脓链球菌、奋森螺旋体、脑 膜炎奈瑟菌、麻风杆菌等以协助诊断；对白喉、百日咳或口 腔念珠菌感染的诊断有意义，应结合临床。
第四节 上呼吸道感染
(一)常见病原体 1.革兰阳性
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓 链球菌、肺炎链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒 状杆菌、厌氧菌、炭疽芽胞杆菌、白假丝酵母 菌、放线菌、奋森螺旋体; 2.革兰阴性 脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白杆菌、
铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌、不动 杆菌、百日咳杆菌、军团菌、肺炎支原体
4. 呼吸道还可见病毒感染，常见 普通感冒或流行性感冒，咽炎 和扁桃腺炎等，均应结合临床 进行诊断。
第五节 下呼吸道感染
1.革兰阳性
(一)常见病原体
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、
肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、结核
分枝杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆
菌、白假丝酵母菌、毛霉、曲霉;
2.革兰阴性 脑膜炎奈瑟菌、黄色球菌、大肠
3.抗体检测
为病毒检测的快速诊断方法，较常用。 (1)中和试验：主要检测中和抗体lgG，此抗
体持续时间长有诊断意义，阳性率和特异 性均高。双份血清效价4倍增高。 (2)特异性IgM抗体测定：此抗体在病后4天即 可出现，2周可达高峰，常用于早期诊断。 用 ELISA、间接免疫荧光法等检测，敏感 性和特异性较高。
临床常见病原体检查ppt课件
ppt课件.
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提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查
方法
药敏检测
第二节：病原体耐药性检测
第三节：临床感染常见病原体检测 病原体检测
第四节：病毒性肝炎检测
第五节：性传播疾病病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
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教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
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（一）直接显微镜检查——不染色 标本
• 不染色标本：适用于检
查生活状态下病原体的 动力及运动状况。
• 方法：压滴法、悬滴法。
• 意义：在不染色状态下
借助暗视野显微镜或相 差显微镜观察病原菌的 动力、活动方式。部分 病原体可借此初步诊断， 如梅毒螺旋体。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
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(二)病原体特异性抗原检查
• 利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检
测患者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫 荧光技术、酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳 凝集试验、对流免疫电泳等技术检测标本中未知 的病原体抗原，其诊断价值常以标本不同而各异。
• 酒精棉球消毒，防止污染。
静脉采血后，将血液注入培 养瓶内 。
• 采集时间：一般在抗生素使
临床本科11病原体检测汇总
第三节 感染性病原体检测 （自学）
第四节
病毒性肝炎血清学标志检测
病毒性肝炎有7型：HAV
HBV HCV
HDV HEV HGV TTV 甲、丙、丁、戊四型肝炎均会产生 特异抗体，IgM型抗体阳性示急性感 染或病毒在复制；IgG型抗体阳性示 继往感染，传染性降低。 抗HAV—IgG属保护性抗体，可终生 阳性。
两瓶阴性
单瓶阳性
两瓶均阳性
两次培养为不同细菌
污染
两次培养为相同细菌
重新双部位采血培养
细菌鉴定/药敏实验
阳性报告
2、尿液标本
杂菌多，要求晨起中段 尿或导尿管无菌操作。
3、呼吸道标本
痰液和鼻咽拭子均要求 晨起清水漱口后采集 4、粪便标本 取粘液脓血部位送检，怀 疑2号病用碱性蛋白胨保养送检。 5、脑脊液应及时送检或床边接种，同 时做血培养。 体腔积液，采量多，做血培养。
抗—HCV：输血后肝炎
抗 HDV 检 测 须 依 赖
乙肝病毒存在 戊肝抗体检查
肝炎病毒和病毒性肝炎的特征
病毒特征 肝炎特征
急性肝炎 急性肝炎 慢性肝炎 肝硬化。肝癌 同上 同上 急性肝炎 经口 非经口 30天 60--70天 0.1--0.2% 约1%
类型 直径(nm) 核酸 所致肝脏病 感染途径 潜伏期 急肝死亡率
HBsAg （ + ）示急慢性乙肝或携带者， 具有传染性 ? ? HBsAb （ + ）示继往感染，现已恢复。 HBsAb属保护性抗体 有中和作用。 HBeAg （ + ）示病毒在复制，有强传染 性。且可胎传。 HBeAb （ + ）示病毒复制减少，传染性 降低。一般认为HBeAb无保护性。 HBcAb（+）示病毒感染且复制，具有 传染性（特别是IgM阳性）。HBcAb无 保护性。
临床病原体检查的常用方法
病原体是指侵犯人体、导致人体受感染的微生物，其中对人体伤害性最大的是病毒和细菌。
当人体被病原体入侵之后，这些微生物开始在人体中繁殖生长、释放毒性，进而导致人体出现不同的病症，这个过程就称为感染。
但是人体在被病毒入侵以后，能够激发人体内的抵抗力，与病毒对抗，这也就是我们常说的免疫力。
然后身体内部的免疫和入侵后的病毒，不断对抗，如果身体免疫能力强，那身体就不形成感染，病原体便会逐渐消失，如果身体免疫力较弱，无法对抗强悍的病毒，那将会形成感染，感染一旦恶化、扩散，就会对人体造成生命安全的威胁。
对抗感染性病毒，除了机体自身的免疫功能，还可以借助外力，比如抗菌药物，在药物的帮助下，可以有效击退病毒，将疾病治愈。
一、临床病原体检查临床病原体检查的目的主要是为了明确是否已经发生感染，确定病原体属于什么类型，其次是将体外抗微生物药物敏感实验结果呈现出来。
此外，检查临床病原体也是为了配合流行病学的调查，协助密切监察病毒的发生趋势，然后及时向有关部门报告。
一般来讲，展开一次临床病原体检查，首先要通过医生和护士采集标本，然后由检验师送往检验科进行检验，检验科通过直接显微镜检查、血清学检查、细菌培养等方式进行检验，然后出具检验报告，最后再由医生明确诊断，分析后予以合理的用药。
二、临床病原体标本采集在采集标本的过程中，要遵循以下几个原则，第一，要根据患者的患病史，同时结合患者的临床表现，确定采集什么类型的标本，然后再选择患者病变发生明显的部位进行采集；第二，要明确采集标本前，患者是否使用过抗生素药物，一般在发病的早期，患者会采取抗生素药物治疗，来对抗病毒，如果患者使用过抗生素，要在标本采集上注明，以免影响标本的检验结果；第三，采集标本的环境要干净卫生，采集后的标本要置于无菌器皿中，并且密封完好，以免在采集、运送过程中被污染；第四，标本在采集之后，必须立刻贴上标签，和检验申请单一起送入检验科，以免出现差错。
总之，要遵循无菌、及时、符合要求、标清注明的原则。
检验科常见病原体检测原理与方法
检验科常见病原体检测原理与方法一、引言病原体检测是临床检验科的重要工作之一，通过对患者体液、组织或分泌物中潜在的病原微生物进行检测，可以帮助医生确定疾病的诊断、预后以及治疗方案的选择。
本文将介绍常见的病原体检测原理与方法。
二、细菌检测原理与方法1. 培养法培养法是最常用的细菌检测方法之一。
基本原理是将样本接种到富含营养物的培养基上，利用细菌的生长及代谢特性，在培养条件下培养出细菌并进行鉴定。
常用的培养法有血培养法、尿培养法等。
2. PCR法PCR法是一种基于聚合酶链式反应（PCR）原理的细菌检测方法。
通过特异性引物，可以扩增靶标基因序列，进而检测细菌的存在。
PCR法具有高度敏感性和特异性的优势，可以快速准确地检测细菌。
3. 蛋白质组学分析蛋白质组学分析是一种通过检测样本中的蛋白质组成来鉴定细菌的方法。
通过质谱仪等设备，可以分析样本中的蛋白质质量和序列，进而确定细菌的种类。
三、病毒检测原理与方法1. 核酸检测法核酸检测法是目前最常用的病毒检测方法之一。
该方法通过提取样本中的核酸，利用PCR等技术检测病毒的核酸序列，进而确定病毒的存在。
2. 免疫学检测法免疫学检测法是基于免疫学原理来检测病毒的方法。
通过检测患者体液中的抗体或抗原，可以确定病毒的感染情况。
常用的免疫学检测法包括ELISA、免疫荧光等。
3. 电镜法电镜法是一种利用电子显微镜对病毒进行直接观察和检测的方法。
通过放大病毒颗粒的形态特征，可以确定病毒的存在。
四、寄生虫检测原理与方法1. 寄生虫卵检测法寄生虫卵检测法是最常用的寄生虫检测方法之一。
该方法通过对患者样本中的粪便、尿液等进行检测，寻找寄生虫卵的存在，以确定寄生虫感染的情况。
2. 血液学检测法血液学检测法是通过检测患者血液样本中的寄生虫的存在来确定感染情况。
常用的检测方法包括滴虫检测、钩虫检测等。
3. 分子生物学检测法分子生物学检测法是一种利用核酸检测寄生虫的存在的方法。
通过PCR等技术，可以检测患者样本中的寄生虫核酸序列，确定寄生虫感染情况。
临床分析病原体的快速检测方法
临床分析病原体的快速检测方法在临床医学领域，快速准确地检测病原体对于诊断疾病、制定治疗方案以及预防疾病传播至关重要。
随着科技的不断进步，临床上出现了一系列快速检测方法，极大地提高了病原体检测的准确性和速度。
本文将介绍几种主要的病原体快速检测方法。
1. 免疫层析法免疫层析法是一种常用的病原体快速检测方法。
它基于抗原与抗体之间的特异性结合原理，能够快速检测出特定病原体的存在。
免疫层析法操作简便，结果快速可靠。
常见的免疫层析法有比色法、荧光法和化学发光法等。
2. 核酸扩增技术核酸扩增技术是一种高度敏感和特异性的病原体检测方法。
其中最为常用的是聚合酶链式反应（PCR）技术。
PCR技术可以扩增极少量的目标DNA或RNA分子，从而实现对病原体的检测。
PCR技术的快速发展，使得临床上诊断病原体感染的准确性大幅提高。
3. 质谱分析法质谱分析法是一种高灵敏度的病原体检测方法。
它基于测量样品中病原体分子的质量和相对丰度，通过分析得到病原体的特征谱图，从而快速进行检测和鉴定。
质谱分析法在快速检测病原体方面具有显著优势，但是设备复杂且昂贵，需要专业人员操作。
4. 原位杂交法原位杂交法可以直接在细胞或组织中检测病原体的存在，具有高灵敏度和高特异性。
这种方法利用标记有特异性探针的核酸杂交，形成特异性结合，从而实现对病原体的检测。
原位杂交法在细菌、病毒和真菌等病原体的检测中具备良好的应用前景。
5. 快速培养法传统的细菌培养需要较长的时间，无法满足迅速诊断的需求。
然而，近年来，一些快速培养方法的出现，使得细菌感染的快速检测成为可能。
例如，基于分子生物学技术的快速培养法能够在短时间内检测出细菌的存在，从而大大加速疾病的诊断和治疗。
结语随着临床诊断技术的不断发展，病原体的快速检测方法不断涌现。
免疫层析法、核酸扩增技术、质谱分析法、原位杂交法和快速培养法等，都在不同程度上提高了临床病原体检测的速度和准确性。
未来，随着新技术的应用，我们相信病原体检测方法将会更加快速、准确，为临床医学的发展和患者的健康提供更多的支持和保障。
临床病原体检查
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1、乙肝两对半检测
（1）HBsAg:表面抗原
为HBV的主要外壳蛋白，包括前S1、前S2和S蛋白， 具有抗原性，HBsAg阳性表示存在HBV的现症感染， 为HBV感染最早证据。 HBsAg阳性见于急性乙肝潜伏期；发病后3个月不转 阴，则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者 HBsAg也呈阳性。HBsAg本身不具有传染性，但因其 常与HBV同时存在，常作为传染性标志之一。
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（2）抗-HBs：表面抗体
抗-HBs是一种保护性Ab（中和性抗体，能中和HBsAg ）， 抗-HBs阳性提示机体有一定免疫力。一般在感染后3-6个 月才出现，可持续多年。注射过乙型肝炎疫苗或抗-HBs免 疫球蛋白者，抗-HBs可呈现阳性反应。
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（3）HBeAg： e抗原
HBeAg阳性是HBV复制的标志，表明乙型肝炎处 于活动期，提示HBV在体内复制，传染性较强； HBeAg持续阳性，表明肝细胞损害较重，且可转 为慢性乙型肝炎或肝硬化。如转为阴性，表示病 毒停止复制 。
送检日期延误的标本；
容器有破损或渗漏等；
拒
标本储存、运送方式不当；
收
明显污染标本；
量明显不足标本；
重复送检标本（血培养除外）
烈性传染病标本的采集和运送不符合相关规定
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三、检查方法
➢ 直接显微镜检查。 ➢ 病原体抗原与抗体的检测。 ➢ 病原体核酸的检测。 ➢ 病原体的分离培养与鉴定。
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（一） 直接显微镜检查
11临床病原体检测
病毒分离培养与鉴定的结果评价
必须结合流行病学资料、临床表现、标本来源 及病毒种类加以分析。 从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒可明确 诊断。 从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病毒人体 不能长期携带，有诊断价值，如麻疹病毒、流 感病毒等。反之需相应的临床表现，才有病原 学意义，如巨细胞病毒，肠道病毒等。 阴性不能排除病毒感染。
耐青霉素的肺炎链球菌
定义：1μg苯唑西林纸片的抑菌圈直径 <19mm且MIC>2μg/ml应视为耐青霉素 肺炎链球菌（penicillin resistant strepttococcus paeumoni，PRSP）。
临床意义
PRSP对氨苄西林、 氨苄西林/舒巴坦、 头孢克肟、 头孢唑啉的临床治疗疗效很 差，治疗时参考药敏结果选择药物，经 验治疗重症感染时，可用头孢曲松或头 孢噻肟联合万古霉素用药。
何时不需进行细菌的药敏试验？
若感染的性质不清楚、标本含数种混合生长的 菌或正常菌群，而且这些菌与正在治疗的感染 关系很小时，通常不必作药敏试验，因为其实 验结果可能有误导作用。 若感染是由公认的对高效药物敏感的微生物引 起，就很少需要作药敏试验。
耐药机制
Hale Waihona Puke 整合子 灭活酶和钝化 酶β内酰胺酶 氨基糖苷钝化酶 氯霉素乙酰转移酶 红霉素酯酶
检验申请单的基本内容
The patient’s name and hospital number. Age and sex. Collection date and time. Diagnosis. Exact nature and source of the specimen. Ordering physician. Immunization history and antimicrobial therapy. Objective
临床病原体检查
2.AST选择与应用
1) K-B纸片琼脂扩散法：技术简单、所用试剂量少、 不需特殊设备、易于判断，自由选择用药，是临床 实验室普遍使用的定性药敏试验。
2) 稀释法：定量药敏试验技术，易于标准化，但试验 费时，多用于研究
3) E试验：直接定量药敏技术，结果准确、重复性好、 操作简便易行，但试纸条昂贵，多用于研究
可见生长的最低浓度 II. MBC：能杀死99.9%测试菌的最低药物浓度
常用AST方法
常用并比较成熟的实验室方法是NCCLS推荐 的方法
1) K-B纸片琼脂扩散法 2) 稀释法 3) E试验 4) 联合药敏试验 5) 一些特殊细菌的药物敏感试验
3)E试验
a) 药敏试验的直接定量技术，结合稀释法和 扩散法的原理、特点
标本采集和运送各论
1. 血液标本 2. CSF与其他无菌体液标本 3. 尿液标本 4. 呼吸道标本 5. 粪便标本 6. 泌尿生殖道标本 7. 创伤、组织和脓肿标本
1.血液标本
❖ 采集时间： ➢发热初期和高峰期(≥38℃）或低温（≤36℃） ➢已用抗菌药物治疗者，在下次用药前采集
❖ 采血量： ➢成人5 ～ 10ml/次， ➢婴儿和儿童1 ～ 2ml/次
临床医学五年制
实验诊断学
许 建 成 讲师
一、标本采集和运送 二、检测方法 三、临床感染常见病原学实验诊断 四、抗菌药物敏感性试验和细菌耐药性检查 五、医院感染的实验诊断
一、标本采集和运送 1. 基本原则 2. 各论
标本采集和运送基本原则
1. 采集的标本无外源性污染 2. 标本在应用抗菌药物或伤口局部处理前收集 3. 采集后及时送检 4. 不要在标本中添加任何防腐剂 5. 在检验申请单上医生应提供患者的临床资料
诊断学——临床常见病原体检测
MH平板
生理盐水
(shēnglǐyánshuǐ )
待检菌
共一百一十一页
药敏试片
18-24小时(xiǎoshí)培养
共一百一十一页
药物(yàowù)敏感试验
稀释(xīshì)法（dilution test） 琼脂稀释法
共一百一十一页
抗酸染色(rǎnsè)
阳性：菌体呈红色 阴性：菌体呈蓝色
主要用于分枝杆菌（结核(jiéhé)）、奴卡菌鉴别
阳性
共一百一十一页
阴性
荧光 染色 (yíngguāng)
• 用形态学和免疫学相结合的方法(fāngfǎ)可特异性地检测某些病原体的 存在
阴道加德纳菌
共一百一十一页
沙眼衣原体
电镜检查(jiǎnchá)
标本(biāoběn)的实验室质量评估标准
1、标本信息(xìnxī)要全。 2、仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本，一般情况
下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。 而病毒检测的标本可于4℃存放2～3天。
3、检查送检容器是否完整，有无破损或渗漏等情况，若有则不予 接收。
4、标本储存、运送方式不当，不予接收。
共一百一十一页
（三）病原体核酸(hé 的检测 suān)
• 常用试验方法(fāngfǎ)有： 1、聚合酶链式反应PCR（polymerase chain reaction）。 2、核酸探针杂交技术 3、实时荧光定量PCR （Realtime PCR）
4、基因芯片等
共一百一十一页
（三）病原体核酸(hé 的检测 suān)
共一百一十一页
临床病原体检查
墨汁染色 新型隐球菌
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一、细菌真菌涂片检查的优缺点
优点：快速诊断或初步诊断 缺点：不能准确鉴定细菌真菌的属种；未进行
药敏试验，不能准确指导临床抗生素治疗。
细菌真菌培养鉴定和药敏试验（第二、三部分 ）
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第二部分 细菌真菌培养鉴定及临床意义
一 血液 二 中段尿 三 粪便 四痰 五 穿刺液 六 分泌物 七 器械
述多个项目；
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采集方法
要采集深部痰（sputum），而不是唾液和口水； 自然咳痰法(Expectorated sputum)： 最好为清晨第一口痰，用清水反复漱口用力咳出第
一口痰于无菌容器内; 支气管镜采集法（Bronchoscopy）；
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结果报告形式
报“正常菌群”： 培养出的均为不致病的细菌， 或培养出的细菌种类较多且无优势菌； 一般血液科或抵抗力极度低下的病人，不报正常菌群，
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细菌室接到已采集血液的培养瓶后，立即放入
自动血液培养检测仪，自动培养及实时检测
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结果报告形式
阳性初步结果报告： 仪器发出阳性报警，阳性标本平均检出时间约10小时； 取出阳性瓶，对血液涂片及革兰氏染色； 立即将涂片结果（G+、G-细菌，球菌或杆菌，或真菌）
电话通知相应科室，并将涂片结果在网上发出； 利用阳性血液进行K-B药敏试验，第二天将药敏结果电话
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3、涂片抗酸染色：检查抗酸杆菌
结核分枝杆菌（TB）菌体表面含有脂质成分，不易着 色，但一经着色后，即使在酸或乙醇的作用下也不容 易脱色；
抗酸性菌呈红色，其它细菌及细胞等背景呈蓝色； 油镜下仔细查遍整个涂片，或至少100个视野。
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3、涂片抗酸染色：检查抗酸杆菌
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复制出相应的动物模型
建立新的检测方法
• PCR法 • 间接免疫荧光法 • ELISA
直接显微镜检查的目的与评价 （ 1）
• 染色标本目的：了解细菌的形 态、染色性或观察宿主细胞内 包涵体。 • 评价：为临床初步诊断提供依 据。如CSF找到抗酸杆菌，应初 步考虑结核分枝杆菌感染。
革兰氏阳性球菌
• 直接显微镜检查：观 察寄生虫生活史的各 阶段，是寄生虫感染 的主要诊断依据。 • 寄生虫抗体检测：辅 助诊断。
支原体感染检查项目的选择与 评价
• 直接显微镜检查：无 价值。 • 分离培养：阳性可明 确诊断。 • 目前临床多检测支原 体抗原与核酸，用于 早期快速诊断。
螺旋体感染检查项目的选择与 评价
血液标本的采集
• 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血 症的病人。 • 一般在抗生素使用前，于发热初期或高 峰期采血。 • 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 • 血液与培养基的比例为1：10，一般成人 血量10~20ml，婴儿1-5ml。
血液标本的采集方法
Байду номын сангаас
呼吸道标本采集
• 类型：鼻咽拭、痰和 经气管采集的标本。 • 上呼吸道存在正常菌 群，在采集标本与结 果分析时应予考虑。
细菌感染检查项目的选择
• 普通细菌：常采用直接镜检、分离培养 与鉴定明确病原体。 • 难培养或培养要求高的细菌：综合运用 免疫学或分子生物学检测，如结核分枝 杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。 • 流行病学调查：病原体抗体检测，如 ASO试验与Widal反应等。
病毒感染检查项目的选择
• 细胞培养快速复制的病毒：细胞培养。 • 细胞培养不能快速复制的病毒：目前多 检测病毒抗原、特异性抗体或核酸，如 CMV。 • 不能细胞培养的病毒：病毒核酸检测与 病毒特异性抗体检测，如HCV、HPV等。
检验申请单的基本内容
• • • • • • • The patient,s name and hospital number. Age and sex. Collection date and time. Diagnosis. Exact nature and source of the specimen. Ordering physician. Immunization history and antimicrobial therapy. • Objective.
淋病病原体的检测方法选择与 评价（2）
• 分离培养；广泛采用，阳性即可确诊。 • PCR：可用于早期快速诊断，但假阳性 率高。 • 特异性抗原与抗体检测：方法尚不成熟。
梅毒螺旋体感染检查项目的选 择与评价
• 直接显微镜检查：有 初步诊断价值。 • 非特异性抗体的检测： 过筛试验。 • 特异性抗体的检测： 确诊试验。
临床病原体检查的基本程序
• 医生、护士、病人、检验师：正确采集 运送标本。 • 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物 检测、病原体分离培养鉴定、药敏实 验——报告结果。 • 医生：明确诊断、合理用药。
标本采集的基本原则
• 根据病史与临床表现确定标本采集的类 型与部位，尽量采集病变明显部位标本。 • 在发病的早期或急性期采集标本，最好 在抗生素使用前（如使用过抗生素应在 申请单上注明）。 • 采集标本防止污染，并置于无菌容器， 加盖密封、立即送检。 • 标本必须贴上标签，与检验申请单同时 送检。
病原体核酸的检测
• 聚合酶链式反应：扩增 病原体微生物特异的 DNA或 RNA片段。 • 探针杂交法：通过已知 序列的探针与病原体的 核苷酸杂交，用以了解 病原体的有无。
病原体核酸检测结果评价
• 是检测病原体微生物最灵敏的方法，但 具有一定的假阳性与假阴性。 • 阳性只表明存在某种病原体的核酸，是 否正被感染应结合临床具体分析。
痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且 在取痰前用清水反复 漱口。 • 方法：（1）自然咳 痰法：（2）气管镜 下采集法；（3）气 管穿刺法。
尿标本的采集
• 无菌采集中段尿 • 如考虑厌氧菌感染， 采取膀胱穿刺法采集 标本。 • 排尿困难者考虑导尿 采集标本。
粪便标本采集
• 自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清 洁容器中送检。 • 排便困难者，采用直肠拭子采集。 • 怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接 种或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送 培养液送检。 • 传染性腹泻应连续送检3次。
病毒分离培养与鉴定的结果评价
• 必须结合流行病学资料、临床表现、标 本来源及病毒种类加以分析。 • 从组织、血液以及脑脊液中分离到病毒 可明确诊断。 • 从呼吸道、肠道等分离到病毒，如该病 毒人体不能长期携带，有诊断价值，如 麻疹病毒、流感病毒等。反之需相应的 临床表现，才有病原学意义，如巨细胞 病毒，肠道病毒等。 • 阴性不能排除病毒感染。
细菌分离培养与鉴定的结果评价
• 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应 考虑细菌为感染的病原体。 • 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结 合细菌的量考虑是否为致病菌。 • 如临床表现支持感染，但培养阴性，应 考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。 • 直接镜检找到病原体，而培养阴性，应 考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
临床病原体检查
赵友芳
临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传染病的发 生，及时向行政主管部门报告。 • 配合相关机构进行流行病学调查。
感染性疾病的现状
• 感染性疾病的病原体：细菌、病毒、支 原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。 • 自从抗生素的发现和预防接种的实施， 许多曾严重危害人体健康的病原体已消 灭或基本消灭。 • 新的传染病陆续被发现，曾绝迹的老传 染病部分死灰复燃。 • 条件致病菌感染比例增加。 • 多重耐药菌株不断出现。
重要的性病及病原体
• 性病 病原体 • 淋病 淋球菌 • 梅毒 梅毒螺旋体 • 艾滋病 人类免疫缺陷病毒 • 非淋球菌尿道炎 溶脲支原体、沙眼衣原体等 • 生殖器疱疹 单纯疱疹病毒 • 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒
淋病病原体的检测方法选择与 评价（1）
• 直接显微镜检查：多 形核白细胞内见革兰 氏阴性双球菌，男性 泌尿生殖道标本可明 确诊断，而女性需结 合培养结果分析。
标本送检
• 标本要求在30min内送检，否则影响阳性 率。 • 烈性传染病标本需专人护送。
检验科可拒收部分标本
• The information on the label does not match the information on the requisition. • The specimen has been transported at the improper temperature or in improper medium. • The quantity of specimen is insufficient for testing . • The specimen is leaking .
单纯疱疹病毒
• 分离培养；阳性可确诊。 • 目前临床常检测HSV-DNA与HSV抗原， 用于早期快速诊断。
人乳头瘤病毒
• 不能分离培养 • 目前临床常检测HPV-DNA与HPV抗原， 用于早期快速诊断。
重要的性病及诊断金标准
• 性病 • 淋病 • 梅毒 • 艾滋病 • 非淋球菌尿道炎 • 生殖器疱疹 • 尖锐湿疣 诊断金标准 分离培养 特异性抗体检测 免疫印迹法与RT-PCR
胸腹水等穿刺液标本
• 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天 后进行。 • 用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于 抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检。 • 怀疑厌氧菌感染，采用床边接种为宜。
脓液及创伤感染分泌物标本
• 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤 采取脓液或病灶深部分泌物，置于斯氏 运送培养基送检。 • 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽 取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。 • 大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉纤 多点采取脓液或分泌物，置于无菌试管 中送检。
生殖道标本
• 男性：无菌采集尿道 口分泌物或前列腺液。
生殖道标本
• 女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌 物。怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹 隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板。 • 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器 硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立 即送检。
脑脊液
• 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml， 置于无菌容器中立即送检，不能暂时保 存于冰箱中。
检验科可拒收部分标本
• The specimen transport time exceeds 2 hours postcollection and the specimen is not preserved. • The specimen was received in a fixative which kill any microorganism present. • The specimen is dried. • The specimen has been received for anaerobic culture from a site known to have anaerobes as part of normal flora.
分离培养、鉴定
分离培养、鉴定 PCR
第三节 医院感染常见病原体检查
• 医院感染（nosocomial infection）：又称 医院获得性感染（hospital acquired infection），指患者在入院时不存在，也 不处于潜伏期，而在医院内发生的感染， 包括医院内获得的而在出院后发病的感 染。广义的医院感染对象不仅指住院患 者，还包括门诊病人、医院职工、探视 人员与陪护人员等。
革兰氏阴性杆菌
墨汁染色找 新型隐球菌
抗酸染色
直接显微镜检查的目的与评价 （ 2）